Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-07-17T13:05:37Z No. of bitstreams: 1 YwllianeDaSilvaRodriguesMeurer_TESE.pdf: 1373910 bytes, checksum: d491e059868659b49cc5906532ddf376 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-07-18T14:01:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 YwllianeDaSilvaRodriguesMeurer_TESE.pdf: 1373910 bytes, checksum: d491e059868659b49cc5906532ddf376 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T14:01:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 YwllianeDaSilvaRodriguesMeurer_TESE.pdf: 1373910 bytes, checksum: d491e059868659b49cc5906532ddf376 (MD5) Previous issue date: 2017-03-13 / Inibidores seletivos de recapta??o de serotonina (ISRS) s?o amplamente utilizados no tratamento de depress?o e ansiedade em v?rios est?gios da vida do indiv?duo, inclusive durante a gravidez ou lacta??o. Nessa circunst?ncia, com o feto in utero ou em amamenta??o, o mesmo ser? exposto a influ?ncia da hiperestimula??o seroton?rgica capaz de desorganizar o desenvolvimento morfofuncional do SNC. A modula??o do circuito seroton?rgico no c?rebro em desenvolvimento pode alterar a organiza??o e forma??o de diferentes redes neurais espec?ficas e repercutir na express?o comportamental do indiv?duo. Neste sentido, utilizamos o ISRS ? fluoxetina (dose: 10mg/kg)? no per?odo de desenvolvimento PND7PND21, para investigar poss?veis altera??es persistentes na neuroqu?mica e no comportamento de ratos machos e f?meas durante as idades p?snascimento de 45 (PND45) e 90 dias (PND90). Outros tr?s grupos experimentais foram utilizados como controle da administra??o farmacol?gica, s?o eles: Naive (animais n?omanipulados), Sham (animais residentes nas gaiolas de tratamento sem manipula??o) e Veh (animais residentes nas gaiolas de tratamento que recebiam inje??o de ?gua destilada). Nosso trabalho re?ne um conjunto de dados comportamentais complementares e tamb?m in?ditos relacionados a avalia??o do comportamento mnem?nico, da ansiedade e tipodepressivo nos animais nessas diferentes idades e em ambos os sexos. Aqui observamos aumento na ansiedade (avaliada no teste de campo aberto), altera??es de mem?ria de curto prazo (atrav?s dos paradigmas de reconhecimento de objetos e alterna??o espont?nea), bem como manifesta??o do comportamento tipodepressivo (usando os testes de prefer?ncia de sacarose e nata??o for?ada) na prole em idade de 45 dias. Enquanto que na idade adulta (PND90) foi observada (atrav?s dos paradigmas comportamentais usados na avalia??o da prole juvenil) redu??o nos n?veis de ansiedade, manuten??o das altera??es de mem?ria de curto prazo, bem como atenua??o do perfil tipodepressivo. Em ambas idades foram observadas redu??o no n?mero de neur?nios parvalbuminapositivos, contudo somente animais em idade PND45 tratados com fluoxetina apresentaram redu??o significativa e ainda quando comparados com os grupos Naive e Sham, mas n?o ao grupo Veh. Por isso, mais estudos s?o necess?rios para investigar os efeitos persistentes da serotonina sobre a matura??o, prolifera??o e migra??o de interneur?nios para as regi?es corticais. Os animais expostos ao ISRS apresentam maior tra?o de altera??es nos comportamentos de ansiedade e tipodepressivo. Nosso trabalho exp?e altera??es mnem?nicas decorrentes da exposi??o previa a fluoxetina, sugerindo altera??es persistentes no circuito corticol?mbico. Estes achados sugerem que a modula??o do circuito seroton?rgico durante per?odos cr?ticos do desenvolvimento do sistema nervoso central pode alterar a organiza??o dos diferentes circuitos neuroqu?micos e induzir altera??es comportamentais, as quais podem repercutir para o surgimento de dist?rbios neuropsiqui?tricos. / Selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) are widely prescribed to treat depression, anxiety and other disorders. The developmental exposure to selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) results in persistent behavioural impairment into adulthood. In this way, serotonergic overexpression in early life may lead to structural and functional changes in brain circuits that control cognitive and emotional behaviour. Here, we addressed the question of how postnatal (PND7PND21) exposure to fluoxetine affects memory, anxietyand depressionlike behaviours, as well as neurochemical markers of interneurons and serotonergic cells in brain areas related to these behaviours in juvenile (PND45) and adult (PND90) female and male rats. In a first stage, we analysed both female and male rat?s performances in several behavioural tasks and investigated the expression of serotonin (5HT) in the dorsal and median nucleus of raphe, and parvalbumin (PV) in PFCm and hippocampus at PND45. We found that earlylife exposure to fluoxetine increased anxietyand depressionlike behaviours (more in female compared to male animals), and induced a working memory impairment only in the juvenile male. Afterwards, we performed behavioural and neurochemical analysis of male and female adult rats (PND90), where we found that fluoxetine affects only anxietyrelated male behaviour. Also, the memory impairment (more in male than female) and depressivelike profile (both sexes) remained in adult age. Moreover, the exposure to fluoxetine affect PV immunoreactivity in the hippocampus in any sex at PND45 and PND90; however, adult animals appear to recover neurochemical deficits observed at the juvenile age. The results revealed developmental fluoxetine effects on juvenile behaviour that can have implications for affective disorders and mnemonic processes. These results revealed persistent changes a sex and agemanner related to developmental exposure to fluoxetine, where serotonergic modulation induce differential profile of anxietyand depressionlike behaviour and mnemonic impairment on female and male rats at juvenile and adult age. Also, suggest a sexdependent compensatory mechanism, which it is possibly related to serotonergic sinalisation. Circuits may involve subcortical and cortical information processing, including subcortical limbic and possible (pre)frontal areas. Thus, our findings suggest that serotonergic modulation during critical periods of SNC development may alter the organisation of excitatoryinhibitory circuit and induce behavioural changes, which may have repercussions for the onset of neuropsychiatric disorders.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:36:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoanilsonGS_TESE.pdf: 3996700 bytes, checksum: 8b3084030c1c254db2c08a440881ea9a (MD5) Previous issue date: 2011-05-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Cortical interneurons are characterized by their distinct morphological, physiological and biochemical properties, acting as modulators of the excitatory activity by pyramidal neurons, for example. Various studies have revealed differences in both distribution and density of this cell group throughout distinct cortical areas in several species. A particular class of interneuron closely related to cortical modulation is revealed by the immunohistochemistry for calcium binding proteins calbindin (CB), calretinina (CR) and parvalbumin (PV). Despite the growing amount of studies focusing on calcium binding proteins, the prefrontal cortex of primates remains relatively little explored, particularly in what concerns a better understanding of the organization of the inhibitory circuitry across its subdivisions. In the present study we characterized the morphology and distribution of neurons rich in calcium-binding proteins in the medial, orbital and dorsolateral areas of the prefrontal cortex of the marmoset (Callithrix jacchus). Using both morphometric and stereological techniques, we found that CR-reactive neurons (mainly double bouquet and bipolar cells) have a more complex dendritic arborization than CB-reactive (bitufted and basket cells) and PV-reactive neurons (chandelier cells). The neuronal densities of CR- and CB-reactive cells are higher in the supragranular layers (II/III) whilst PV-reactive neurons, conversely, are more concentrated in the infragranular layers (V/VI). CR-reactive neurons were the predominant group in the three regions evaluated, being most prevalent in dorsomedial region. Our findings point out to fundamental differences in the inhibitory circuitry of the different areas of the prefrontal cortex in marmoset / Os interneur?nios do c?rtex cerebral s?o caracterizados por suas diferentes propriedades morfol?gicas, fisiol?gicas e bioqu?micas, atuando como moduladores da atividade excitat?ria cortical dos neur?nios piramidais, por exemplo. V?rios estudos revelaram diferen?as na distribui??o e densidade deste grupo celular ao longo de diferentes ?reas corticais em diversas esp?cies. Uma classe particular de interneur?nios intimamente relacionada ? modula??o cortical ? revelada pela imunohistoqu?mica para as prote?nas ligantes de c?lcio calbindina (CB), calretinina (CR) e parvalbumina (PV). Em que pese a quantidade crescente de estudos focando nas prote?nas ligantes de c?lcio, o c?rtex pr?frontal de primatas ainda permanece relativamente pouco explorado, especialmente no que se refere a um melhor entendimento da organiza??o do circuito inibit?rio ao longo de suas subdivis?es. No presente estudo caracterizamos a morfologia e a distribui??o desse grupo neuronal nas regi?es medial, orbital e dorso-lateral do c?rtex pr?-frontal do sagui (Callithrix jacchus). Utilizando par?metros morfom?tricos e t?cnicas estereol?gicas, evidenciamos que os neur?nios reativos a CR (especialmente c?lulas em duplo-buqu? e bipolares) possuem arboriza??o dendr?tica mais complexa quando comparados aos neur?nios reativos a CB (neur?nios de tufos duplos e c?lulas em cesto) e PV (c?lulas em candelabro). A densidade dos neur?nios reativos a CB e CR ? mais elevada nas camadas supragranulares (II/III), enquanto os neur?nios reativos a PV se concentram predominantemente nas camadas infragranulares (V/VI). Os neur?nios reativos a CR foram o grupo predominante nas tr?s regi?es avaliadas, sendo mais prevalente na regi?o dorsolateral. Nossos achados apontam para diferen?as cruciais no circuito inibit?rio ao longo das diferentes ?reas do c?rtex pr?-frontal do sagui

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-10-18T21:17:40Z No. of bitstreams: 1 DanielaMariaDeSousaMoura_TESE.pdf: 5064072 bytes, checksum: ff797a9a6f4cca34baad638e77a8a3f2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-10-30T19:11:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DanielaMariaDeSousaMoura_TESE.pdf: 5064072 bytes, checksum: ff797a9a6f4cca34baad638e77a8a3f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-30T19:11:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielaMariaDeSousaMoura_TESE.pdf: 5064072 bytes, checksum: ff797a9a6f4cca34baad638e77a8a3f2 (MD5) Previous issue date: 2017-08-30 / As c?lulas granulares do hipocampo s?o um dos poucos tipos de neur?nios gerados no sistema nervoso central de mam?feros adultos. O modelo atual de neurog?nese no hipocampo adulto assume que c?lulas tronco neurais (CTN) geram progenitores com potencial restrito ? gera??o de neur?nios ou astr?citos. Est?mulos ambientais e condi??es patol?gicas podem alterar a progress?o da linhagem, modulando a prolifera??o, diferencia??o, sobreviv?ncia e integra??o sin?ptica dos neur?nios gerados. Por exemplo, a Epilepsia do Lobo Temporal mesial (ELT), a forma mais comum de epilepsia em adultos, est? associada a altera??es na taxa de neurog?nese hipocampal adulta. Neste trabalho, n?s utilizamos dois modelos experimentais de ELT para avaliar os efeitos de um insulto epileptog?nico (i.e., status epilepticus, SE) sobre a linhagem e amadurecimento celular no giro denteado adulto. Atrav?s da t?cnica de fate-mapping utilizando animais Dcx-CreERT2/CAG-CAT-GFP, n?s acompanhamos o destino de c?lulas que apresentavam o promotor do gene doublecortin (DCX) ativado antes ou depois da inje??o intrahipocampal dos agentes convulsivantes ?cido ca?nico ou pilocarpina. Desta forma, pudemos avaliar o efeito destas drogas sobre progenitores e neur?nios imaturos DCX+ gerados antes ou ap?s o tratamento. Em ambos os modelos, foram observados um aumento de neurog?nese e altera??es no posicionamento e morfologia de c?lulas granulares, conforme descri??es pr?vias na literatura. Altera??es neuronais, tais como localiza??o ect?pica e presen?a de dendritos basais, foram observadas tanto em c?lulas geradas antes quanto ap?s a indu??o do SE, embora com frequ?ncias distintas. No entanto, apenas no hipocampo ipsilateral ? inje??o de ?cido ca?nico n?s observamos dispers?o da camada granular e morte neuronal em CA1 e CA3, apesar da atividade parox?stica epil?ptica ocorrer em ambos os hipocampos. Surpreendentemente, o aumento da neurog?nese em animais que receberam ?cido ca?nico foi restrito ao hipocampo contralateral, enquanto no lado ipsilateral foi observado um significativo aumento na gera??o de astr?citos a partir dos progenitores DCX+. Al?m disso, tamb?m observamos neste modelo a presen?a de c?lulas com morfologia e marcadores de CTNs, sugerindo que progenitores DCX+ poderiam regredir para estados mais primitivos na linhagem celular do hipocampo adulto. O aumento da astrogliog?nese no lado ipsilateral ? inje??o de ?cido ca?nico foi associado a uma degenera??o de interneur?nios parvalbumina (PV)+ no hipocampo, sugerindo que a atividade gaba?rgica poderia estar contribuindo para o redirecionamento da linhagem celular. Em conjunto, nossos dados indicam que a linhagem celular no giro denteado n?o ? unidirecional e irrevers?vel, e que o aumento da atividade el?trica neuronal induzida por ?cido ca?nico e pilocarpina t?m efeitos diferentes sobre a diferencia??o celular e destino fenot?pico dos progenitores e neur?nios nessa regi?o. Esses resultados imp?em a necessidade de revermos o modelo atual de neurog?nese hipocampal adulta e tamb?m indicam que diferentes modelos animais de epilepsia produzem altera??es celulares distintas no hipocampo adulto e, portanto, poderiam representar diferentes graus/est?gios da patologia. / The granular cells of the hippocampus are one of the few types of neurons generated in the central nervous system of adult mammals. The current model of neurogenesis in the adult hippocampus assumes that neural stem cells (NSCs) give rise to progenitors restricted to the generation of neurons or astrocytes. Environmental stimuli and pathological conditions can alter the lineage progression, modulating cell proliferation, differentiation, survival and synaptic integration of newly generated neurons. For example, mesial Temporal Lobe Epilepsy (TLE), the most common form of epilepsy in adults, is associated with changes in the rate of adult hippocampal neurogenesis. In this work, we used two experimental TLE models to evaluate the effects of an epileptogenic insult (i.e., status epilepticus, SE) on the cell lineage and neuronal maturation in the adult dentate gyrus. Using Dcx-CreERT2 / CAG-CAT-GFP animals, we fate mapped the fate of cells expressing the doublecortin gene (DCX) either before or after intrahippocampal injection of the convulsive agents kainic acid or pilocarpine. In this way, we could evaluate the effect of these drugs on DCX+ progenitors and immature neurons generated before or after treatment. In both models, we observed an increase in neurogenesis and changes in the positioning and morphology of granular cells, according to previous descriptions in the literature. Neuronal aberrations, such as ectopic localization and presence of basal dendrites, were observed both in cells generated before and after induction of SE, albeit at different frequencies. However, only in the hippocampus ipsilateral to the injection of kainic acid we observed granule cell dispersion and neuronal death in CA1 and CA3, although the paroxysmal epileptic activity occurred in both hippocampi. Surprisingly, the increase in neurogenesis in animals that received kainic acid was restricted to the contralateral hippocampus, whereas on the ipsilateral side a significant increase in astrocyte generation was observed within the DCX+ progenitor lineage. In addition, we also observed the presence of cells with NSC hallmarks, suggesting that DCX+ progenitors could regress to more primitive states in the adult hippocampal cell lineage. The increased astrogliogenesis on the ipsilateral side to the injection of kainic acid was associated with a degeneration of parvalbumin (PV)+ interneurons in the hippocampus, suggesting that GABAergic activity could be contributing to the rerouting of the DCX+ progenitor cell lineage. Taken together, our data indicates that the cell lineage in the dentate gyrus is neither unidirectional nor irreversible, and that the increased neuronal electrical activity induced by kainic acid and pilocarpine have different effects on cell differentiation, as well as on the fate of progenitors and neurons in that region. These results highlight the need to review the current model of adult hippocampal neurogenesis and also indicate that different animal models of epilepsy produce distinct cellular alterations in the adult hippocampus and could therefore represent different degrees / stages of the pathology.