Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24Bitstream added on 2014-06-13T18:48:40Z : No. of bitstreams: 1 cassettari_ll_me_botfm.pdf: 958356 bytes, checksum: 4b8434476e8322b42c2108913b576141 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O diabetes mellitus é considerado um dos mais importantes fatores ligados aos defeitos da cicatrização tecidual, pois é capaz de alterar as propriedades biomecânicas e o metabolismo do colágeno das feridas cirúrgicas, predispondo às hérnias, deiscências e infecções no pós-operatório. Com objetivo de minimizar este problema, atualmente tem sido dada ênfase a aplicação de recursos terapêuticos capazes de aumentar a circulação sanguínea no território lesado, especificamente na pele. Dentre estes recursos destaca-se a iontoforese transdermal, que consiste na introdução de íons de sais solúveis para dentro dos tecidos do corpo, por meio da corrente elétrica contínua. Dentre esses sais, o zinco tem particular interesse, haja vista que é uma ortomolécula que é parte integrante da insulina, atua no metabolismo glicídio e do colágeno e, portanto, está intrinsecamente relacionado ao processo de reparação tecidual. Assim, este estudo visou a avaliar os efeitos da técnica eletroterápica isolada ou em adjuvância ao zinco, sobre a cicatrização da ferida cirúrgica realizada na pele de ratos diabéticos, tendo como parâmetro de comparação ratos normais de mesma idade e período de seguimento. O presente projeto de pesquisa teve o seguinte objetivo: Avaliar os efeitos da corrente elétrica contínua, isolada ou em associação ao zinco, administrado por meio da iontoforese transdermal, sobre a resistência mecânica e o conteúdo de hidroxiprolina de cicatrizes realizadas da pele de ratos diabéticos aloxânicos, tendo como referência ratos normais não-diabéticos submetidos aos mesmos procedimentos cirúrgicos e terapêuticos. Foram analisados 6 grupos de ratos, com 40 animais cada, submetidos à incisão cirúrgica na região anterior do abdome, assim distribuídos: G1- Grupo normal sem tto; G2 – Grupo diabético sem tto; G3 – Grupo não-diabético... / Diabetes Mellitus is considered to be one of the main factors related to tissue healing defects as it can change the biomechanical properties and metabolism of collagen in surgical wounds, thus predisposing to hernias, dehiscence and infections in the postoperative period. With the purpose to minimize such problem, emphasis has been presently given to the use of therapeutic resources that can increase blood circulation in the wounded area, specifically in the skin. Among such resources, transdermal iontophoresis stands out. It consists in the introduction of soluble salt ions into body tissues by means of continuous electric current. Of these salts, zinc is of particular interest, since it is an orthomolecule that forms insulin, participates in the metabolism of sugars and collagen, and is, therefore, intrinsically related to the tissue healing process. Hence, this study aimed at evaluating the effects of electrotherapeutic therapy, used isolatedly and adjuvantly with zinc, on the healing of surgical wounds in the skin of diabetic rats, using same-age normal rats and a similar follow-up period as comparison parameters. This research project had the following objective: To evaluate the effects of continuous electric current, isolated or in association with zinc, administered by means of transdermal iontophoresis, on the mechanical resistance and hydroxyproline content in healing wounds made in the skin of aloxanic diabetic rats by using non-diabetic rats submitted to similar surgical and therapeutic procedures as reference. Six groups of rats were analyzed. Each group consisted of 40 animals submitted to surgical incision in the anterior region of the abdomen. The animals were distributed as follows: G1- Normal group without tto; G2 – Diabetic group without tto; G3 – Treated non-diabetic group-CEC; G4 – Treated diabetic group-CEC; G5 – Treated nondiabetic group-Zn; G6- Treated... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24Bitstream added on 2014-06-13T20:40:39Z : No. of bitstreams: 1 arruda_mf_dr_arafcf.pdf: 1544944 bytes, checksum: 75a1678618fc45bbed80bdb04d417b13 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A osteoartrose se caracteriza pela degeneração articular, perda de cartilagem e alterações no osso subcondral. Pouco se sabe sobre a patogênese e mudanças que ocorrem na osteoartrose como também em seu reparo. As técnicas terapêuticas disponíveis podem resultar em alívio dos sintomas, mas não na regeneração do tecido lesado. Um dos métodos usuais para pesquisa em osteoartrose com o preceito de mimetizar esta situação e também realizada neste trabalho, é o modelo experimental utilizando a inoculação intra-articular de zymosan (Saccharamyces cerevisiae), gerando artrite em grau progressivo. A eletroterapia potencializa a reparação de tecidos conjuntivos representando uma alternativa na reparação de lesões da cartilagem hialina. O acido ascórbico é um dos precurssores do colágeno que junto com outras estruturas complexas como a trama de glicosaminoglicanas e proteoglicanas constitui a cartilagem. A utilização dessa técnica para administração do acido ascórbico em tecido biológico é fator substancial do presente trabalho. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi verificar a resposta imuno-bioquímica e avaliar microscopicamente a cartilagem articular de ratos artrose induzidos, frente ao tratamento com iontoforese na presença e ausência de acido L - ascórbico. Materiais e Métodos: Ratos wistar machos divididos em 6 grupos de 6 animais cada um, diferenciados em grupos: controle positivo C+, controle negativo C-,gavagem com solução fisiológica GSF, gavagem com ácido ascórbico GAA, iontoforese solução fisiológica IFSF iontoforese com ácido ascórbico IFAA.Resultados: Histológicos demonstraram em coloração Hematoxilina e Eosina que com o grupo IFAA obteve normalidade da variável celularidade (40.1 mm2), e manutenção da cartilagem não calcificada (75.5mm) (p<0.05), sugerindo espessuras normais. Quanto ao grupo não tratado C+ apresentou-se menor... / Osteoarthritis is characterized by joint degeneration, loss of cartilage and subchondral bone changes. Little is known about the pathogenesis and changes that occur in osteoarthritis as well as in its repair. Available therapeutic techniques can result in relief of symptoms but not in the regeneration of injured tissue. One of the usual methods for research used in this study is the experimental model which uses intra-articular inoculation of zymosan (Saccharamyces cerevisiae), causing arthritis in progressive degree. Electrotherapy enhances the healing of tissues representing an alternative in the repair of hyaline cartilage injuries. Ascorbic acid is one of the forerunners of collagen which along with other complex structures like the chains of glycosaminoglycans and proteoglycans form the cartilage. The use of this technique for administration of ascorbic acid in biological tissue is a substantial factor in this study. Objective: The objective of this study was to investigate the immune-biochemical reply and evaluate microscopically the histology of articular cartilage in rats arthritis induced, compared to treatment with iontophoresis in the presence and absence of L - ascorbic acid. Methods: Male wistar rats were divided into 6 groups of 6 animals each, in different groups: positive control C+, negative control C-, gavage with saline solution GSS, gavage with ascorbic acid GAA, saline iontophoresis IPSS, iontophoresis with ascorbic acid IPAA. Results: Histological it was demonstrated that in hematoxylin and eosin staining the group that received IPAA obtained normality of variable (40.1 mm2), and maintenance of non calcified cartilage (75.5mm) (p<0.05), suggesting normal thickness. Regarding the untreated group C+, it presented lower average in the number of chondrocytes (13.0mm2), and with regard to the thickness of cartilage it had a higher average of calcified cartilage with... (Complete abstract click electronic access below)

O objetivo deste trabalho foi estudar a permeação iontoforética da Doxorrubicina (DOX) em formulações semi-sólidas e testar a citotoxicidade destas formulações em cultura de células de melanoma com e sem a aplicação de corrente elétrica de baixa intensidade. O estudo de liberação da DOX das formulações (gel de Hidroxietilcelulose ? HEC, gel de quitosana e solução aquosa) mostrou que o gel de quitosana possuiu uma velocidade de liberação quase três vezes maior do que nas demais formulações. Os estudos de permeação passiva mostraram que o fármaco não atravessa a pele em quantidades detectáveis. No entanto, a iontoforese contribui significativamente não só na permeação da DOX, mas também na sua retenção cutânea. O gel de HEC foi o que levou a uma maior retenção cutânea do fármaco em comparação com as demais formulações. Nos estudos de citotoxicidade realizados em células de melanoma de camundongos, verificou-se que as formulações contendo DOX possuíram citotoxicidade maior comparadas ao controle (solução de DOX). Isso significa que os componentes de cada formulação contribuem no poder de citotoxicidade contra as células de melanoma. A solução de monoleína 5% em propilenoglicol apresentou maior atividade citotóxica dentre todas as formulações estudadas. Seus componentes, monoleína e propilenoglicol contribuem sinergicamente para sua atividade citotóxica, a qual é de aproximadamente 90% quando a concentração de DOX é de 20 ng/mL. Enquanto que em solução de DOX sua citotoxicidade é de aproximadamente 34% na mesma concentração. Foi feita a padronização dos estudos de aplicação de corrente elétrica em cultura de células, quanto a placa de cultura, número de células, volume do meio de cultura e ponte salina (utilizada para a passagem da corrente para o meio de cultura). A aplicação de 0,1 a 0,5 mA/cm2 de corrente elétrica não causou morte significativa para as células de melanoma quando aplicada por um período de 10 a 60 minutos. A citotoxicidade das formulações com e sem aplicação de corrente elétrica por 10 minutos não apresentaram diferença significativa. Porém, a aplicação de 20 minutos de corrente elétrica aumentou significativamente a citotoxicidade da DOX em solução aquosa. Conclui-se, resumidamente, que a aplicação de corrente elétrica de baixa intensidade aumentou a penetração da DOX através da pele e auxiliou a entrada do fármaco nas células tumorais, quando esta é dissolvida em solução aquosa. / The aim of this work was to study the iontophoretic delivery of Doxorubicin (DOX) dispersed in semi-solid formulations and test its citotoxicity activity on melanoma cell lines, with or without the application of a low intensity electrical current. The release study of DOX from the formulations (hydroxyethylcellulose ? HEC, chitosan gel and aqueous solution) showed that chitosan gel increased almost 3 times the diffusion coefficient of the drug when compared to a water solution. Passive permeation studies showed that the drug does not cross the skin in detected amounts. However, iontophoresis of DOX increased significantly not only the permeation but also the skin retention of the drug. HEC gel improved DOX skin retention when compared to other formulations. Cytotoxicity studies, performed in rat melanoma cell culture indicated that formulations containing DOX have high citotoxicity compared to the control (DOX solution). These results means that the components of the formulations probably contribute to melanoma cells death. Monoolein 5% solution in propileneglicol showed high citotoxicity compared to the other formulations. Its components act sinergically and produce a great citotoxicity: approximately 90% when the concentration of DOX is 20 ng/mL, whereas in DOX solution its citotoxicity is approximately 34% on this concentration. Standardization of the electrical current studies has been made as matter as the culture plate, number of cells, volume of culture medium and agar bridge (used to pass electrical current for the culture medium). The application of 0,1 to 0,5 mA/cm2 of electrical current during 10 to 60 minutes did not kill melanoma cell lines significantly. The cytotoxicity of DOX incorporated in water and semi-solid formulations are not statistical different in the presence or not of an electrical current for 10 minutes. However, 20 minutes of an electrical current raised significantly the citotoxicity effects of DOX in aqueous solution. In summary, the application of low intensity electrical current increases the penetration of DOX through the skin and helps the drug to enter into the tumor cells, when dispersed in water solution

La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie qui peut engager le pronostic vital des malades de façon très rapide. La pathogénie de la maladie reste encore obscure mais est liée aux atteintes vasculaires probablement en lien avec la fibrose cutanée. La thérapeutique de cette maladie est difficile. Aucun traitement étiologique n'existe et la prise en charge est plutôt axée sur les traitements des différentes atteintes. La iontophorèse cutanée est un dispositif qui permet la diffusion de molécules en solution à travers la peau grâce à une stimulation électrique de manière non invasive. Cette technique a été utilisée initialement comme test physiologique. Notre objectif est d'évaluer et de développer la iontophorèse thérapeutique, notamment avec des molécules vasodilatatrices, pour pouvoir l'utiliser dans des applications thérapeutiques telles que la pris en charge des ulcérations digitales (ou troubles trophiques cutanés) de la ScS. Trois parties ont été développées. La première partie consiste en l'association de deux molécules vasodilatatrices (une per os, le sildenafil, et en iontophorèse, le nitroprussiate de sodium (SNP), en étudiant la tolérance de l'association et son effet sur le flux vasculaire cutané chez le volontaire sain (étude INFLUX-VS). La deuxième partie correspond à un screening de molécules ayant une action vasodilatatrice et étant délivrées en iontophorèse chez le rat : l'étude INFLUX-RAT conclue à l'obtention d'une vasodilatation cutanée chez le rat avec les analogues de la prostacycline. La troisième partie correspond à l'évaluation chez le volontaire sain de la iontophorèse des analogues de la prostacycline : l'étude INFLUX-IT-VS conclue à une dilatation du flux sanguin cutané avec le tréprostinil et avec une bonne tolérance cutanée et systémique. La dernière partie correspond aux avancées parallèles des travaux tant dans le domaine de la reproductibilité des techniques d'acquisition des signaux du flux sanguin cutané que les études réalisées avec les patients sclérodermiques à qui on pourrait espérer un jour voir proposer une iontophorèse thérapeutique. / Systemic scleroderma (ScS) is a rare disease that may be associated with a poor prognosis. The pathogenesis of the disease remains still unclear but comprises vascular abnormalities related to skin fibrosis. ScS disease treatment is difficult. No etiologic therapy is available and patient's management is rather centred on the treatments of the different organs failure symptoms. Skin iontophoresis is a non invasive technique, which allows a transcutaneous diffusion of molecules in solution thanks to an electrical stimulation. This technique was initially used as physiological test. Our objective is to test and to develop therapeutic iontophoresis, in particular with molecules possessing vasodilator properties. The final objective is to use it in therapeutic applications such as the treatment of ScS digital ulcerations. Three parts will be developed in the present work. The first part describes the association of two vasodilatator drugs (sildenafil used per os, associated with sodium nitroprusside used through cathodal iontophoresis. We studied the safety of the association and its effect on the skin vascular flow in healthy volunteers (INFLUX-VS study). The second part describes the screening of vasodilatator drugs delivered through cutaneous iontophoresis in rats (INFLUX-RAT study). The aim of the study was to select the more potent drugs in term of maximal rat skin vasodilatation. The more potent drugs were prostacyclins analogues. The third part describes the iontophoresis of prostacyclins analogues in healthy volunteers: the INFLUX-IT-VS study. The more potent cutaneous vasodilatation was observed with treprostinil, with a good skin and systemic tolerance. The last part decribes the reproducibility of the techniques used to quantify skin blood flow along with studies using these techniques in scleroderma patients. These are required to enable a reproducible evaluation of the effect of skin iontophoresis in patients with scleroderma

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2003. / Härtill 6 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Linköping : Linköpings universitet, 2007. / Härtill 5 uppsatser.

Orientador: César Tadeu Spadella / Banca: Erika Veruska Paiva Ortolan / Banca: Carlos Eduardo Brossi Pelissari / Resumo: O diabetes mellitus é considerado um dos mais importantes fatores ligados aos defeitos da cicatrização tecidual, pois é capaz de alterar as propriedades biomecânicas e o metabolismo do colágeno das feridas cirúrgicas, predispondo às hérnias, deiscências e infecções no pós-operatório. Com objetivo de minimizar este problema, atualmente tem sido dada ênfase a aplicação de recursos terapêuticos capazes de aumentar a circulação sanguínea no território lesado, especificamente na pele. Dentre estes recursos destaca-se a iontoforese transdermal, que consiste na introdução de íons de sais solúveis para dentro dos tecidos do corpo, por meio da corrente elétrica contínua. Dentre esses sais, o zinco tem particular interesse, haja vista que é uma ortomolécula que é parte integrante da insulina, atua no metabolismo glicídio e do colágeno e, portanto, está intrinsecamente relacionado ao processo de reparação tecidual. Assim, este estudo visou a avaliar os efeitos da técnica eletroterápica isolada ou em adjuvância ao zinco, sobre a cicatrização da ferida cirúrgica realizada na pele de ratos diabéticos, tendo como parâmetro de comparação ratos normais de mesma idade e período de seguimento. O presente projeto de pesquisa teve o seguinte objetivo: Avaliar os efeitos da corrente elétrica contínua, isolada ou em associação ao zinco, administrado por meio da iontoforese transdermal, sobre a resistência mecânica e o conteúdo de hidroxiprolina de cicatrizes realizadas da pele de ratos diabéticos aloxânicos, tendo como referência ratos normais não-diabéticos submetidos aos mesmos procedimentos cirúrgicos e terapêuticos. Foram analisados 6 grupos de ratos, com 40 animais cada, submetidos à incisão cirúrgica na região anterior do abdome, assim distribuídos: G1- Grupo normal sem tto; G2 - Grupo diabético sem tto; G3 - Grupo não-diabético... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diabetes Mellitus is considered to be one of the main factors related to tissue healing defects as it can change the biomechanical properties and metabolism of collagen in surgical wounds, thus predisposing to hernias, dehiscence and infections in the postoperative period. With the purpose to minimize such problem, emphasis has been presently given to the use of therapeutic resources that can increase blood circulation in the wounded area, specifically in the skin. Among such resources, transdermal iontophoresis stands out. It consists in the introduction of soluble salt ions into body tissues by means of continuous electric current. Of these salts, zinc is of particular interest, since it is an orthomolecule that forms insulin, participates in the metabolism of sugars and collagen, and is, therefore, intrinsically related to the tissue healing process. Hence, this study aimed at evaluating the effects of electrotherapeutic therapy, used isolatedly and adjuvantly with zinc, on the healing of surgical wounds in the skin of diabetic rats, using same-age normal rats and a similar follow-up period as comparison parameters. This research project had the following objective: To evaluate the effects of continuous electric current, isolated or in association with zinc, administered by means of transdermal iontophoresis, on the mechanical resistance and hydroxyproline content in healing wounds made in the skin of aloxanic diabetic rats by using non-diabetic rats submitted to similar surgical and therapeutic procedures as reference. Six groups of rats were analyzed. Each group consisted of 40 animals submitted to surgical incision in the anterior region of the abdomen. The animals were distributed as follows: G1- Normal group without tto; G2 - Diabetic group without tto; G3 - Treated non-diabetic group-CEC; G4 - Treated diabetic group-CEC; G5 - Treated nondiabetic group-Zn; G6- Treated... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadores: Margareth Castro Ozelo, Joyce Maria Annichino Bizzacchi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:42:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_JanainaBossoJoseda_M.pdf: 4876420 bytes, checksum: 5b610c8a9244d994e2a21f8261d30ef2 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A iontoforese é uma técnica de transferência de drogas mediadas por um fluxo elétrico. Os benefícios terapêuticos da introdução de medicamentos pela iontoforese incluem a diminuição de efeitos colaterais sistêmicos aos quais o paciente apresenta intolerância e a ação localizada do medicamento podendo este estar em maior concentração na área alvo, onde sua ação é mais efetiva e prolongada. No caso da hemofilia, efeito adicional é observado, pois o paciente é poupado de um procedimento invasivo, como punção venosa ou aplicação intra-articular, que depende da reposição dos concentrados de fator. O emprego da iontoforese corrobora a idéia de intervenção direta nos quadros agudos de hemartrose e na sinovite crônica, de maneira não invasiva. Primeiramente, elaboramos um protocolo em conjunto com o Departamento de Medicina Nuclear do Hospital das Clínicas da Unicamp com o objetivo de comprovarmos, através de experimentos cintilográficos em humanos o transporte transdérmico dinâmico pela iontoforese. Uma vez comprovado o mecanismo iontoforético, avaliamos através de modelo experimental suíno o comportamento dos fármacos com potencial uso na hemofilia, seja nos episódios agudos de hemartrose (ácido e-aminocapróico - EACA) ou tratamento da sinovite crônica (ácido hialurônico e cloridrato de oxitetraciclina). O uso de fármacos com poder hemostático durante os episódios agudos de hemartrose, além do tratamento da sinovite crônica, permitem a longo e curto prazo uma recuperação mais rápida da articulação, além de otimizar o consumo final de hemoderivados ou qualquer outra forma de reposição de fator. Neste protocolo suíno foi possível confirmar que o ácido e-aminocapróico e o cloridrato de oxitetraciclina são drogas que efetivamente poderiam ser utllizadas em protocolos iontoforéticos. A determinação da concentração do ácido hialurônico neste experimento foi prejudicada por se tratar de um complexo polissacarídeo. Assim, acreditamos que estudos complementares utilizando outras técnicas mais sensíveis de quantificação de fármacos devem ser realizadas com este intuito no futuro. A avaliação do efeito da aplicação iontoforética do EACA, ácido hialurônico e cloridrato de oxitetraciclina em modelo experimental murino (camundongos portadores de hemofília A), foi realizada através de avaliação histológica que avaliou a área de lesão proliferativa correspondente à articulação tratada e não tratada. Embora em nenhum dos grupos estudados os resultados entre os animais tratados e não tratados tenha evidenciado uma diferença estatisticamente significativa, foi possível notar uma tendência de melhora sempre que as medicações foram administradas através da iontoforese. Desta forma, o princípio da aplicação assim como as questões práticas da terapêutica iontoforética foram reconhecidas como uma possível via de administração em condições clínicas apresentadas pelos pacientes hemofílicos. Novos estudos precisam ser realizados a fim de que sejam observados o comportamento farmacológico e as doses terapêuticas ideais das drogas utilizadas para o uso através de iontoforese / Abstract: Iontophoresis is technique of transferring drugs by an electric flow. The therapeutic benefits of introducing drugs by iontophoresis include lowering of systematic side effects and the local action of medication with a larger concentration into the damage area, where its action is more effective and prolonged. Besides that, the hemophilic patients are avoided to get venous puncture or an injection into their joint. The use of iontophoresis takes the idea of direct intervention in acute hemarthroses and chronic synovitis in one non aggressive way. First of all we created a protocol in association with Nuclear Medicine Department of the Clinical Hospital of UNICAMP and we standardize cintilographic experiments in humans to evaluate the transdermal dynamics delivered by iontophoresis, confirming iontophoretics mechanism. Once it proved the iontophoretic mechanism, we evaluate in a swine experimental model the behavior of drugs with potential use in hemophilia (e-aminocaproic acid during the acute episodes of hemarthroses; hyaluronic acid and oxitetracycline clorhydrate to treat chronic cases) by electrospray ionization mass spectrometry. The use of haemostatic drugs during the acute treatment of hemarthroses, besides the treatment of chronic synovitis, allows in long and short period of time, once recover faster of the joints also reduce the final consumption of replacement products. In swine protocol, we observed that e-aminocaproic acid and oxitetracycline clorhydrate are drugs which may actually cause and be used in iontophoretics¿s protocols. However new complementary studies are necessary to make possible the use of hyaluronic acid, once it¿s a large polissacaride. We believe that others studies using different methods more sensitive of drug quantifications should be used with this purpose of accomplishment in the future. The evaluation of the iontoforetic application¿s effect of these drugs in murino¿s experimental models (knockout mice with hemophilia A) was performed by the histologic analysis, showing that in both groups (EACA and OTC) iontophoretic treatment resulted in a lower average of damage when comparing the treated limb and the one not treated. / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica inovadora para o tratamento de tumores cutâneos. As ftalocianinas têm sido utilizadas como fotossensibilizantes sistêmicos devido à sua alta afinidade ao tecido tumoral e seu efeito acentuado quando irradiadas com luz. No entanto, a lipossolubilidade e o baixo coeficiente de partilha óleo/água dessas substâncias dificultam sua aplicação tópica, levando ao desenvolvimento de derivados carregados, como a zinco ftalocianina tetrassulfonada (ZnPcS4) na tentativa de aumentar sua solubilidade em água, bem como melhorar sua captação pelas células tumorais. Entretanto, moléculas carregadas têm dificuldades em atravessar o estrato córneo (EC), a principal barreira da pele. Como a iontoforese é uma técnica não-invasiva capaz de aumentar e controlar a penetração de moléculas carregadas na pele, ela parece ser uma alternativa para aumentar a penetração cutânea da ZnPcS4 nas camadas da pele onde os tumores estão presentes. Dessa forma, foram realizados experimentos in vitro de iontoforese de um gel hidrofílico da ZnPcS4 aplicado topicamente na presença e ausência de NaCl. Estudos de iontoforese in vivo também foram realizados, empregando ratos Wistar como modelo animal, bem como experimentos em cultura de células tumorais para avaliar a citotoxicidade do fármaco em estudo. O método analítico para quantificação do fármaco na pele foi validado quanto à linearidade, precisão, exatidão, sensibilidade e seletividade. A iontoforese catódica promoveu um aumento significativo da retenção da ZnPcS4 tanto no EC como na epiderme viável nos experimentos realizados na presença e ausência de NaCl em relação à aplicação passiva da formulação e de iontoforese anódica, sendo que ocorreu um aumento da quantidade do fármaco retido nas diferentes camadas da pele quando o sal foi retirado da formulação. Os estudos in vivo com a formulação também mostraram que a corrente elétrica aumentou a penetração do fármaco para as camadas mais profundas da pele em relação aos experimentos passivos de permeação, o que foi evidenciado pela intensidade de fluorescência do fármaco visualizada por microscopia confocal e pela quantidade de fármaco retido nas diferentes camadas da pele. Resultados em cultura de células tumorais A431 sugerem que a concentração de fármaco que chega à epiderme viável após experimentos de iontoforese catódica é capaz de matar mais de 90% dessas células tumorais quando a dose de irradiação de 5 J/cm2 é aplicada. Além disso, quando a corrente elétrica é aplicada em cultura celular, não foi observado nenhum aumento significativo da citotoxicidade da ZnPcS4, demonstrando que a aplicação de corrente elétrica não fez com que a entrada do fármaco para o interior das células tumorais aumentasse. Não restam dúvidas, no entanto, que a corrente elétrica aumentou a penetração do fármaco nas camadas profundas da pele, além de levar a uma distribuição homogênea da ZnPcS4 nessas camadas após 15 minutos de aplicação. / Photodynamic therapy (PDT) is an innovative therapeutic modality for the treatment of cutaneous tumors. The phthalocyanines have been used as systemic photosensitizing agents due to its high affinity to tumor tissues and its accentuated effect when irradiated with light. However, the lipophilicity and the low partition coefficient oil/water of these substances difficult its topical application, leading to the development of charged derivatives, such as the zinc phthalocyanine tetrasulfonated (ZnPcS4) in an attempt to increase the water solubility, as well as improve the drug uptake by tumor cells. However, charged molecules have difficulties to cross the stratum corneum (SC), the main barrier of the skin. As iontophoresis is a noninvasive technique able to improve and control the penetration of charged molecules through the skin, it seems to be an alternative for enhancing ZnPcS4 penetration into the deep layers of the skin, where cutaneous tumors reside. This way, in vitro iontophoresis experiments of a hydrophilic gel containing ZnPcS4 applied topically in the presence and absence of NaCl were performed. In vivo iontophoresis studies were also carried out employing Wistar rats as animal model, as well as experiments in culture of tumour cells to evaluate the cytotoxicity of the drug. The analytical method for the quantification of the drug in the skin was validated considering the parameters of linearity, precision, accuracy, sensitivity and selectivity. The cathodal iontophoresis promoted a significant increase in retention of ZnPcS4 in both SC and viable epidermis in the experiments conducted in the presence and absence of NaCl in relation to the formulation applied passively or by anodal iontophoresis. Therefore, there was an increase in the amount of the drug retained in different layers of the skin when salt was removed from the formulation in the cathodal iontophoresis. In vivo studies also demonstrated that the electrical current increased penetration of the drug to the deeper layers of the skin in relation to passive experiments, evidenced by the fluorescence intensity of the drug showed by confocal microscopy and by the amount of drug retained in the different layers of the skin. Results with A431 tumor cells suggest that the concentration of the drug that reaches the viable epidermis after cathodal iontophoresis is able to kill more than 90% of these tumor cells when the radiation dose of 5 J/cm² was applied. In addition, when the electric current was applied to the cells, it was not observed any significant increase of cytotoxicity, demonstrating that the electric current application did not increased the uptake of the ZnPcS4 by the tumor cells. There are no doubts, however, that the electric current increased the ZnPcS4 penetration to the deep layers of the skin and lead to a homogeneous distribution of ZnPcS4 in these layers after 15 minutes of application.

O objetivo deste trabalho foi estudar a permeação iontoforética da Doxorrubicina (DOX) em formulações semi-sólidas e testar a citotoxicidade destas formulações em cultura de células de melanoma com e sem a aplicação de corrente elétrica de baixa intensidade. O estudo de liberação da DOX das formulações (gel de Hidroxietilcelulose ? HEC, gel de quitosana e solução aquosa) mostrou que o gel de quitosana possuiu uma velocidade de liberação quase três vezes maior do que nas demais formulações. Os estudos de permeação passiva mostraram que o fármaco não atravessa a pele em quantidades detectáveis. No entanto, a iontoforese contribui significativamente não só na permeação da DOX, mas também na sua retenção cutânea. O gel de HEC foi o que levou a uma maior retenção cutânea do fármaco em comparação com as demais formulações. Nos estudos de citotoxicidade realizados em células de melanoma de camundongos, verificou-se que as formulações contendo DOX possuíram citotoxicidade maior comparadas ao controle (solução de DOX). Isso significa que os componentes de cada formulação contribuem no poder de citotoxicidade contra as células de melanoma. A solução de monoleína 5% em propilenoglicol apresentou maior atividade citotóxica dentre todas as formulações estudadas. Seus componentes, monoleína e propilenoglicol contribuem sinergicamente para sua atividade citotóxica, a qual é de aproximadamente 90% quando a concentração de DOX é de 20 ng/mL. Enquanto que em solução de DOX sua citotoxicidade é de aproximadamente 34% na mesma concentração. Foi feita a padronização dos estudos de aplicação de corrente elétrica em cultura de células, quanto a placa de cultura, número de células, volume do meio de cultura e ponte salina (utilizada para a passagem da corrente para o meio de cultura). A aplicação de 0,1 a 0,5 mA/cm2 de corrente elétrica não causou morte significativa para as células de melanoma quando aplicada por um período de 10 a 60 minutos. A citotoxicidade das formulações com e sem aplicação de corrente elétrica por 10 minutos não apresentaram diferença significativa. Porém, a aplicação de 20 minutos de corrente elétrica aumentou significativamente a citotoxicidade da DOX em solução aquosa. Conclui-se, resumidamente, que a aplicação de corrente elétrica de baixa intensidade aumentou a penetração da DOX através da pele e auxiliou a entrada do fármaco nas células tumorais, quando esta é dissolvida em solução aquosa. / The aim of this work was to study the iontophoretic delivery of Doxorubicin (DOX) dispersed in semi-solid formulations and test its citotoxicity activity on melanoma cell lines, with or without the application of a low intensity electrical current. The release study of DOX from the formulations (hydroxyethylcellulose ? HEC, chitosan gel and aqueous solution) showed that chitosan gel increased almost 3 times the diffusion coefficient of the drug when compared to a water solution. Passive permeation studies showed that the drug does not cross the skin in detected amounts. However, iontophoresis of DOX increased significantly not only the permeation but also the skin retention of the drug. HEC gel improved DOX skin retention when compared to other formulations. Cytotoxicity studies, performed in rat melanoma cell culture indicated that formulations containing DOX have high citotoxicity compared to the control (DOX solution). These results means that the components of the formulations probably contribute to melanoma cells death. Monoolein 5% solution in propileneglicol showed high citotoxicity compared to the other formulations. Its components act sinergically and produce a great citotoxicity: approximately 90% when the concentration of DOX is 20 ng/mL, whereas in DOX solution its citotoxicity is approximately 34% on this concentration. Standardization of the electrical current studies has been made as matter as the culture plate, number of cells, volume of culture medium and agar bridge (used to pass electrical current for the culture medium). The application of 0,1 to 0,5 mA/cm2 of electrical current during 10 to 60 minutes did not kill melanoma cell lines significantly. The cytotoxicity of DOX incorporated in water and semi-solid formulations are not statistical different in the presence or not of an electrical current for 10 minutes. However, 20 minutes of an electrical current raised significantly the citotoxicity effects of DOX in aqueous solution. In summary, the application of low intensity electrical current increases the penetration of DOX through the skin and helps the drug to enter into the tumor cells, when dispersed in water solution