O presente estudo teve por objetivo avaliar in vitro a eficiência dos sistemas de irrigação (convencional, ultrassônica e EndoSafe), na remoção do magma dentinário de canais mesiais curvos de molares inferiores, por meio de microscopia eletrônica de varredura. Foram utilizados canais mesiais com curvatura entre 200 e 400, de 47 molares inferiores, preparados com Reciproc (instrumento R25). Destes, dois condutos foram utilizados como controle negativo, e os outros foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais conforme a sua irrigação final: IC irrigação convencional com seringa e agulha; PUI irrigação ultrassônica passiva; EndoSafe irrigação com o sistema EndoSafe. Em todos os grupos foram utilizados 5mL de EDTA e 5mL de NaOCl por 30 segundos cada. A observação da região apical, após clivagem, foi realizada através de microscopia eletrônica de varredura em aumento de 1000X. Posteriormente, as imagens obtidas foram avaliadas por 3 examinadores calibrados pelo sistema de três pontos. Da análise dos resultados, pelo teste de Kruskal-Wallis, pode-se observar que o grupo ultrassônico e o EndoSafe apresentaram melhores resultados quando comparados ao grupo convencional, com diferença estatística entre os grupos (PIU: 40%; EndoSafe: 26,7% e IC: 6,7%; sem magma dentinário). Concluiu-se que a irrigação ultrassônica apresenta melhores resultados em comparação aos outros grupos, aumentando a remoção do magma dentinário no terço apical de raízes curvas. / The present study aimed to evaluate in vitro the efficiency of irrigation systems (conventional, ultrasound and EndoSafe system), on removing the smear layer of curved mesial root canals of mandibular molars by means of scanning electron microscopy to evaluate. Fourty seven mesial canals were used with curvature degree between 200 and 400, and were shaped with rotary system Reciproc (R25 instrument). Two of these were used as negative control, and the others were randomly divided into three groups according to their final irrigation: IC - irrigation with conventional syringe and needle; PUI - passive ultrasonic irrigation; EndoSafe - EndoSafe irrigation system. In all groups, 5mL of EDTA, and 5 mL of NaOCl was used for 30 seconds each. Root canals were split longitudinally and subjected to scanning electron microscopic at a magnification of 1000X. The presence of smear layer was evaluated by three calibrated observers using a three-score scale. Analyzing the results, using Kruskal-Wallis test, it could be observed that ultrasonic group and EndoSafe system showed better results when compared to the conventional group, statistical significance between groups (PIU: 40%; EndoSafe: 26.7% and CI: 6.7%; without smear layer). It was concluded that ultrasonic irrigation performs better compared to the other groups, increasing the removal of the smear layer in the apical third of curved roots.

Objetivou-se avaliar a limpeza das paredes dos canais radiculares instrumentados e a permeabilidade dentinária, após o uso da solução de EGTA isolada ou em associação com tensoativos. Para a análise da capacidade de limpeza, foram usados 25 incisivos centrais superiores humanos, instrumentados pela técnica step-back com limas tipo K e irrigados com hipoclorito de sódio a 2%. Após a instrumentação, os canais foram irrigados por um período de 5 minutos, com 10ml das seguintes soluções a serem testadas: Grupo 1- água destilada (controle negativo); Grupo 2 - EGTA a 15%; Grupo 3 - EGTA-C a 15%; Grupo 4 - EGTA-T a 15%; Grupo 5 - EDTA a 17% (controle positivo). Em seguida, os canais foram lavados com 10ml de água destilada, secos com cones de papel e as raízes foram fraturadas longitudinalmente e preparadas para microscopia eletrônica de varredura. Uma grade quadriculada, confeccionada digitalmente, foi sobreposta às fotomicrografias, obtidas dos terços cervical, médio e apical dos canais de cada grupo experimental, o que permitiu o cálculo da porcentagem de limpeza da superfície dentinária pela contagem do número de quadrantes limpos. Para a avaliação da permeabilidade dentinária, foram usadas 25 raízes de incisivos centrais superiores humanos instrumentados com as seguintes soluções irrigadoras: Grupo 1 - água destilada (controle negativo); Grupo 2 - EGTA a 15%; Grupo 3 - EGTA-C a 15%; Grupo 4 - EGTA-T a 15%; Grupo 5 - EDTA a 17%. Foram utilizados 3ml da solução estudada a cada troca de instrumento. Os canais foram, então, irrigados com 10ml de água destilada, e secos. A superfície externa das raízes foi impermeabilizada com exceção do ápice e da superfície cervical. Em seguida as raízes foram imersas em sulfato de cobre e, posteriormente, em ácido rubeânico, ambos sob vácuo. Foram, então, obtidos fragmentos dos terços cervical, médio e apical, por meio de cortes transversais das raízes de cada grupo experimental. Estes fragmentos foram fotografados, e a área de penetração dos íons cobre na dentina, evidenciada pela reação com o ácido rubeânico (coloração negra), foi mensurada em computador (programa ImageTool 3.0), o que possibilitou quantificar a permeabilidade dentinária. Os testes estatísticos permitiram concluir que, tanto em relação à capacidade de limpeza da superfície dentinária, como em relação à capacidade de promover o aumento da permeabilidade dentinária, as soluções irrigadoras estudadas puderam ser agrupadas em ordem decrescente do seguinte modo: EDTA, EGTA-T, EGTA-C, EGTA, Água destilada. A adição de tensoativos à solução de EGTA resultou em uma melhora de sua capacidade de limpeza da superfície dentinária e no aumento da permeabilidade da dentina. Apenas a solução de EGTA-T a 15% apresentou resultados estatisticamente semelhantes à solução de EDTA a 17%, tanto em relação à limpeza, quanto à permeabilidade da dentina. Houve uma correlação diretamente proporcional entre os resultados obtidos nos dois experimentos realizados: quanto maior a capacidade de limpeza promovida pela solução quelante estudada, maior a permeabilidade da dentina das paredes do canal. / The objective was to evaluate the root canal dentin cleanness and the dentin permeability, after the use of the EGTA solution isolated or in association with tensoactives. For the analysis of the dentin cleanness capacity, 25 human upper central incisors were used, prepared by the step-back technique with K type files and irrigated with 2% sodium hypoclorite. Then, the root canals were irrigated for 5 minutes, with 10ml of the following solutions: Group 1 - distilled water (negative control); Group 2 - 15% EGTA; Group 3 - 15% EGTA-C; Group 4 - 15% EGTA-T; Group 5 - 17% EDTA (positive control). Soon afterwards, the root canals were irrigated with 10ml of distilled water and dryed with paper points. The roots were fractured longitudinally and prepared for scanning electronic microscopy. A digitally manufactured grid was superposed to the obtained digital photomicrographs of the cervical, middle and apical thirds of each specimen of the experimental groups. That allowed the calculation of the cleanness percentage of the root canals dentinal surface by counting the number of clean quadrants. For the evaluation of the dentin permeability, 25 roots of human upper central incisors were prepared with the following irrigating solutions: Group 1 - distilled water (negative control); Group 2 - 15% EGTA; Group 3 - 15% EGTA-C; Group 4 ? 15% EGTA-T; Group 5 - 17% EDTA (positive control). During instrumentation, at each instrument change, the root canals were irrigated with 3ml of the studied solution. After instrumentation, the root canals were irrigated with 10ml of distilled water and dryed. The external surface of the roots was made waterproof, except for the apex and the cervical surface. Then, the roots were immersed in copper sulfate and, later, in rubeanic acid, both under vacuous condition. Fragments of the cervical, middle and apical thirds were obtained through transverse cuts of the roots of each experimental group. These fragments were photographed, and the area of penetration of the copper ions into the dentine, evidenced by its reaction with the rubeanic acid (black coloration), was mensured in the computer (ImageTool 3.0 software). That made possible to quantify the dentin permeability. The data obtained in both experiments were submitted to the statistical analysis. The results showed that the studied solutions could be arranged in a decreasing order of dentin cleanness capacity and dentin permeability: EDTA, EGTAT, EGTA-C, EGTA, distilled Water. The tensoactive addition to the EGTA solution resulted in an improvement of its dentin cleanness capacity and an increase of the dentin permeability. Only the 15% EGTA-T experimental solution presented statistical similar results as the ones presented by the 17% EDTA solution (p>0,05) (for both the dentin cleanness, and the dentin permeability). There was a directly proportional correlation among the results obtained in the two accomplished experiments: the greater the cleanness capacity promoted by the studied solution, the greater the dentin permeability of the root canal walls.

Quando combinados no interior do canal, hipoclorito de sódio e clorexidina formam um produto insolúvel em água. Esse trabalho teve como objetivo avaliar as conseqüências da utilização do hipoclorito de sódio 1% pH 9 (NaOCl) como substância durante o preparo e do gel de clorexidina a 2% (CLX) como medicação intracanal em diferentes condições, sob a luz do microscópio eletrônico de varredura ambiental (MEVA). Cinqüenta pré-molares humanos inferiores foram preparados com ProTaper Universal®, sendo quarenta com auxílio de NaOCl e Endo-PTC Leve®. Outros dez dentes foram preparados apenas com CLX (Grupo 2). Os espécimes foram submetidos à irrigação final com ácido cítrico (Grupos 1 e 2) e com tiosulfato de sódio 10% e ácido cítrico (Grupo 3). Todos os grupos experimentais foram medicados por 7 dias com clorexidina. Após esse período, a medicação foi removida e foram contados os túbulos visíveis e os túbulos patentes da superfície dentinária, nas imagens obtidas através do MEVA. Houve diferença estatística entre os grupos experimentais e o Grupo controle negativo, exceto no Grupo 3, em que foi utilizado o tiosulfato. Portanto, apenas quando o NaOCl foi inativado, pode-se observar quantidades desejáveis de túbulos visíveis e patentes. / When combined in the interior of the canal, sodium hypochlorite and chlorhexidine form an insoluble product. The aim of this study was to evaluate the consequences of the use of the hipoclorito of sodium 1% pH 9 (NaOCl) as substance during prepare and gel of clorexidina 2% (CHX) as intracanal medication in different conditions, using environmental scanning electron microscope (ESEM). Fifty extracted mandibular premolars had been prepared with ProTaper Universal®. In forty, was used NaOCl and EndoPTC Leve (Tween 80, Urea peroxide and Carbowax associated) during the prepare. Ten teeth had been prepared using CHX only (Group 2). These had been submitted to the final irrigation with citric acid (Groups 1 and 2) and with sodium thiosulfate 10% and citric acid (Group 3). All the experimental groups received 7 days of intracanal medication with CHX. After this period, the medication was determined the numbers of visible and patent tubules on the root dentin surface, using the images captured on ESEM. There were significant differences between the control group and the experimental groups, except in the case where the tiosulfato was used. Therefore, only when NaOCl is inactivated, desirable amount of visible and patent tubules can be observed.

Avaliou-se a citotoxicidade do hipoclorito de sódio a 1%, do digluconato de clorexidina a 2% e do Endoquil e seus efeitos na liberação de citocinas e de óxido nítrico em culturas de macrófagos peritoniais murinos. As substâncias sofreram diluições de 1.000 e 10.000 vezes: Grupo Controle, meio de cultura meio McCoy`s 5A® modificado e apirogênico; Grupo Hipoclorito de sódio a 1% (diluições A 0,001 e B 0,0001); Grupo Digluconato de Clorexidina a 2% (diluições A 0,002 e B 0,0002); Grupo Endoquil a 10% (diluições A 0,01 e B 0,001). Foram utilizados 70 camundongos da linhagem C57Bl/6j fêmeas. Após anestesia e sacrifício realizou-se a coleta do exudato celular por meio da injeção e aspiração de meio McCoy`s 5A® modificado na cavidade abdominal dos animais. O ensaio da atividade citotóxica foi realizado pelo Método do MTT nos períodos: curto prazo (4 e 12 horas); médio prazo (24, 48 e 72 horas) e longo prazo (5 e 7 dias). A absorbância dos poços foi lida em Leitora de Elisa a 550 nm. Os valores obtidos foram comparados com os valores do padrão, calculando-se assim a viabilidade e o número de células presentes de cada grupo avaliado em função do tempo. A quantificação in vitro das citocinas IL-1, IL-1, IL-6 e TNF- foi realizada por meio de imunoensaio do tipo Elisa, utilizando-se kit Quantikine® M murine. A análise da síntese de óxido nítrico foi conduzida segundo a metodologia de Griess, na qual o óxido nítrico é convertido a nitrito, sendo este último detectado colorimetricamente. Cada grupo experimental foi analisado em dois tempos de observação (24 e 48h), com estímulo de LPS ou não, em duplicatas. Os dados foram submetidos ao teste estatístico de análise de variância e, quando necessário, complementados pelo teste de Tukey. Após 12 horas, o grupo tratado com clorexidina na diluição A apresentou diminuição significativa da viabilidade celular em relação aos grupos tratados com hipoclorito de sódio e Endoquil; este declínio estendeu-se para 24, 48 e 72 horas quando provocou morte celular. Em 5 e 7 dias, ocorreu redução da viabilidade em todos os grupos, com diferença significante para o grupo da clorexidina. Em relação às citocinas e óxido nítrico: o hipoclorito de sódio e a clorexidina induziram a produção e exacerbaram o efeito do LPS sobre as IL-1 e IL-1 , respectivamente, enquanto que o Endoquil diminuiu estes efeitos; a clorexidina inibiu o efeito estimulatório do LPS, diminuindo a síntese de IL- 6; juntamente com o Endoquil, a clorexidina diminuiu a síntese de TNF- , enquanto que o hipoclorito aumentou esta produção em 24 horas; mesmo estimulados com LPS, o hipoclorito e a clorexidina comprometeram a síntese de óxido nítrico, em 24horas e, após 48 horas, apenas a clorexidina manteve a inibição. / The cytotoxicity of 1% sodium hypochlorite, of 2% chlorhexidine digluconate and of Endoquil and its effects on cytokine release and nitric oxide were evaluated in culture of murine peritoneal macrophages. Substances were diluted 1,000 and 10,000 times: Control Group with culture medium using McCoy 5A`s® modified and apirogenic, Group Sodium Hypochlorite 1% (dilutions A - 0.001 and B - 0.0001); Group Chlorhexidine Digluconate 2% (dilutions A - 0.002 and B - 0.0002); Group Endoquil 10% (dilutions A - 0.01 and B - 0.001).70 female mice of strain C57BL/6J were used. After anesthesia and sacrifice, middle McCoy`s® 5A modified was injected in the abdominal cavity of animals and then the cellular exudate was aspirated. The cytotoxicity assay was performed by MTT method in the periods: short term (4 and 12 hours), medium term (24, 48 and 72 hours) and long term (5 to 7 days). The absorbance of the wells was read on ELISA reader at 550 nm. The values were compared with standard values, observing the viability and cell number in each group as a function of time. The in vitro quantification of cytokines IL-1, IL-1, IL-6 and TNF- was performed using an ELISA-type immunoassay, using the kit Quantikine® M Murine. Analysis of nitric oxide synthesis was conducted according to the Griess assay, in which nitric oxide is converted to nitrite, the latter being detected colorimetrically. Each experimental group was analyzed at two time points (24 and 48h) with stimulation of LPS or not, in duplicates. The data were submitted to statistical analysis of variance and, where necessary, complemented by Tukey test. After 12 hours, the group treated with chlorhexidine with dilution A significantly decreased cell viability when compared to the groups treated with sodium hypochlorite and Endoquil. This decline has extended to 24, 48 and 72 hours, when cell death occurred. After 5 and 7 days occured the reduction of viability in all groups, with significant differences for the chlorhexidine group. In relation to cytokines and nitric oxide: sodium hypochlorite and chlorhexidine induced the production and exacerbated the effect of LPS on IL-1 and IL-1 , respectively, while Endoquil decreased these effects;chlorhexidine inhibited the stimulatory effect of LPS, reducing the synthesis of IL- 6; just as Endoquil chlorhexidine decreased the synthesis of TNF-, but hypochlorite increased production in 24 hours; even stimulated with LPS, sodium hypochlorite and chlorhexidine undertook the synthesis of nitric oxide in 24 hours and, after 48 hours only chlorhexidine kept inhibition.

Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana das soluções Tetraclean®, MTAD® e modificações desta formulação sobre uma cepa de Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto e frente ao biofilme. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta às soluções irrigadoras, por períodos de 30 s, 1, 3 e 10 min, e um agente neutralizante foi utilizado. As colônias viáveis foram quantificadas após diluições seriadas e cultura em placas de ágar. Para determinação do número inicial de UFC, água esterilizada foi usada como controle. Para o crescimento do biofilme, amostras de biofilme dentário foram suspensas em BHI (Brain Heart Infusion), e incubadas por 14 dias em anaerobiose, tendo como substrato, discos de hidroxiapatita. Após o período de incubação, os biofilmes foram expostos às soluções irrigadoras por períodos de 30 s, 1 e 3 min. Os biofilmes corados com o Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV), que diferencia células viáveis (verde) e células não-viáveis (vermelho) foram observados na microscopia confocal. As imagens do biofilme obtidas pelo software EZ-C1 for Nikon foram transferidas para análise quantitativa da proporção de células viáveis sobre o total de células do biofilme para o software Imaris 5.0. No teste de contato direto, o Tetraclean® eliminou completamente o E. faecalis em 30 s, enquanto o MTAD® e o MTAD® + CTR 0,01% eliminaram após 10 min, e o MTAD® + CTR 0,1% resultou em culturas negativas após 3 min de contato com a suspensão bacteriana. Quando removido o Tween 80 do MTAD®, e acrescida a CTR 0,01%, obteve-se culturas negativas após 1 minuto. Os resultados obtidos pelo método de exposição ao biofilme confirmaram os achados do teste de contato direto. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of MTAD® and Tetraclean®. The tests were performed on Enterococcus faecalis using the direct exposure test and an in vitro biofilm model. Alternative formulations to MTAD® were also included in the experiments: MTAD® + 0.01% cetrimide (CTR); MTAD® + 0.1% CTR; MTAC (the detergent Tween 80 was substituted for cetrimide) with 0.01% CTR and MTAC (0.1% CTR). In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the irrigation solutions. After 30 seconds, 1 minute, 3 minutes and 10 minutes, an inactivator agent was used. The number or viable colonies were calculated after serial 10-fold dilutions and culture in agar plates. To calculate the initial number of colonies, sterilized water was used as a control. Dental biofilm samples were suspended in BHI broth and incubated in anaerobic conditions in hidroxiapatite discs. After incubation for 14 days, the biofilms were exposed to the irrigation solutions for 30 seconds, 1 minute and 3 minutes. Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV) was used to diferentiate viable cells (Green) and non viable cells (Red). The samples were observed in the Confocal Laser Microscope. The biofilm images in 3D obtained in the EZ-C1 for Nikon software were transfered to quantitative analysis in the Imaris 5.0 software. The software calculated the ratio of green cells. In the direct exposure test, Tetraclean® and MTAC (0.1% CTR) erradicated E. faecalis in 30 s. MTAD® and MTAD® + 0.01% CTR eliminated E. faecalis after 10 min. MTAD® + 0.1% CTR resulted in negative culture after 3 min. Negative cultures were obtained after 1 min when MTAC (0.01% CTR) was used. The findings from the biofilm exposure method confirmed the results from direct exposure test. The Kruskal-Wallis statistical analysis showed a significant difference in time exposure to irrigant (P<0.001). / Orientador: Mario Roberto Leonardo / Coorientador: Markus Haapasalo / Banca: Mario Tanomaru Filho / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Izabel Yoko Ito / Banca: Antonio Carlos Pizzolitto / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:41:57Z : No. of bitstreams: 1 yamashita_jc_dr_arafo.pdf: 1654679 bytes, checksum: ea4cab55ba1e8890848c0a5afe9fc1d2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar a microbiota presente no sistema canais radiculares antes e após o preparo biomecânico; e as condições histopatológicas da reparação apical e periapical após preparo biomecânico dos canais radiculares de dentes com reação periapical crônica. Foram utilizados 78 canais radiculares de dentes de cães, os quais, após indução de lesão periapical, foram submetidos ao preparo biomecânico utilizando as seguintes soluções irrigadoras: solução de digluconato de clorexidina a 2%, de hipoclorito de sódio a 2,5% ou soro fisiológico. Um grupo controle não recebeu preparo biomecânico. Foram realizadas culturas microbiológicas antes e após 30 dias do preparo biomecânico. Após este período os animais foram mortos para processamento e análise histopatológica. O estudo microbiológico demonstrou que houve redução dos microrganismos nos grupos que utilizaram soluções antimicrobianas (p<0,05), com melhor resultado para a solução de clorexidina. Os grupos que utilizaram solução fisiológica controle apresentaram aumento de microrganismos. No estudo histopatológico, foi observado, de um modo geral, infiltrado inflamatório periapical severo e em grande extensão, severo espessamento do ligamento periodontal e grandes áreas de reabsorção óssea e apical em todos os grupos (p>0,05). Concluiu-se que o emprego de soluções irrigadoras antimicrobianas durante o preparo biomecânico promove redução da microbiota endodôntica, sem a sua eliminação do sistema de canais radiculares em dentes de cães com lesão periapical. A solução de clorexidina a 2% proporcionou maior redução da microbiota que a solução de hipoclorito de sódio a 2,5% (p<0,05). Porém, os resultados histopatológicos demonstram que somente o preparo biomecânico não foi capaz de criar condições para reparação dos tecidos apicais e periapicais. / The aim of this study was to evaluate the microorganisms in the root canal system before and after biomechanical preparation and the apical and periapical repair after this biomechanical preparation. The study was performed in 78 root canals of dog's teeth with induced chronic periradicular lesion. There were used the following endodontic irrigating solutions: 2% chlorhexidine digluconate solution; 2.5% sodium hypochlorite solution, saline solution and a control group without biomechanical preparation. The microbiological sampling were performed before and 30 days after the biomechanical preparation. After this period the animals were killed to histological analysis. In the microbiologic study, the results showed that the antimicrobial solutions used reduced the number of microorganisms (p<0.05). The chlorhexidine solution showed better performance. The group that used saline solution and the control group presented an increased number of microorganisms. The histological results showed a severe periapical inflammation, severe thickness of periodontal ligament, apical and osseous resorption in all groups (p>0.05). It was concluded that the antimicrobial endodontic solution reduced but not eliminated the microorganisms present in root canals of dogþs teeth with necrosis and periapical lesion. The chlorhexidine solution was more effective in reducing the number of microorganisms than sodium hypochlorite solution (p<0.05). Although, the histopathological results showed that the biomechanical preparation alone was not capable to promote an adequate condition for the apical and periapical tissues repair.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-30Bitstream added on 2014-06-13T21:02:44Z : No. of bitstreams: 1 pappen_fg_dr_arafo.pdf: 4993789 bytes, checksum: ca121f0b3da3d2618c6caa7970c772de (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana das soluções Tetraclean®, MTAD® e modificações desta formulação sobre uma cepa de Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto e frente ao biofilme. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta às soluções irrigadoras, por períodos de 30 s, 1, 3 e 10 min, e um agente neutralizante foi utilizado. As colônias viáveis foram quantificadas após diluições seriadas e cultura em placas de ágar. Para determinação do número inicial de UFC, água esterilizada foi usada como controle. Para o crescimento do biofilme, amostras de biofilme dentário foram suspensas em BHI (Brain Heart Infusion), e incubadas por 14 dias em anaerobiose, tendo como substrato, discos de hidroxiapatita. Após o período de incubação, os biofilmes foram expostos às soluções irrigadoras por períodos de 30 s, 1 e 3 min. Os biofilmes corados com o Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV), que diferencia células viáveis (verde) e células não-viáveis (vermelho) foram observados na microscopia confocal. As imagens do biofilme obtidas pelo software EZ-C1 for Nikon foram transferidas para análise quantitativa da proporção de células viáveis sobre o total de células do biofilme para o software Imaris 5.0. No teste de contato direto, o Tetraclean® eliminou completamente o E. faecalis em 30 s, enquanto o MTAD® e o MTAD® + CTR 0,01% eliminaram após 10 min, e o MTAD® + CTR 0,1% resultou em culturas negativas após 3 min de contato com a suspensão bacteriana. Quando removido o Tween 80 do MTAD®, e acrescida a CTR 0,01%, obteve-se culturas negativas após 1 minuto. Os resultados obtidos pelo método de exposição ao biofilme confirmaram os achados do teste de contato direto. / The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of MTAD® and Tetraclean®. The tests were performed on Enterococcus faecalis using the direct exposure test and an in vitro biofilm model. Alternative formulations to MTAD® were also included in the experiments: MTAD® + 0.01% cetrimide (CTR); MTAD® + 0.1% CTR; MTAC (the detergent Tween 80 was substituted for cetrimide) with 0.01% CTR and MTAC (0.1% CTR). In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the irrigation solutions. After 30 seconds, 1 minute, 3 minutes and 10 minutes, an inactivator agent was used. The number or viable colonies were calculated after serial 10-fold dilutions and culture in agar plates. To calculate the initial number of colonies, sterilized water was used as a control. Dental biofilm samples were suspended in BHI broth and incubated in anaerobic conditions in hidroxiapatite discs. After incubation for 14 days, the biofilms were exposed to the irrigation solutions for 30 seconds, 1 minute and 3 minutes. Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV) was used to diferentiate viable cells (Green) and non viable cells (Red). The samples were observed in the Confocal Laser Microscope. The biofilm images in 3D obtained in the EZ-C1 for Nikon software were transfered to quantitative analysis in the Imaris 5.0 software. The software calculated the ratio of green cells. In the direct exposure test, Tetraclean® and MTAC (0.1% CTR) erradicated E. faecalis in 30 s. MTAD® and MTAD® + 0.01% CTR eliminated E. faecalis after 10 min. MTAD® + 0.1% CTR resulted in negative culture after 3 min. Negative cultures were obtained after 1 min when MTAC (0.01% CTR) was used. The findings from the biofilm exposure method confirmed the results from direct exposure test. The Kruskal-Wallis statistical analysis showed a significant difference in time exposure to irrigant (P<0.001).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:20:40Z : No. of bitstreams: 1 arandagarcia_aj_dr_arafo.pdf: 276892 bytes, checksum: ce8d5151d3d18872dcf1b45140fe73e1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade antibacteriana de soluções irrigadoras e do sistema Endox Plus no preparo de canais radiculares. Capítulo 1 - Para comparar a efetividade antibacteriana da solução de hipoclorito de sódio (NaOCl), MTAD BioPure e do Sistema Endox Plus durante o preparo biomecânico, foram utilizadas 70 raízes de dentes humanos unirradiculados contaminadas com cepa de E. faecalis (ATCC 29212) e incubadas por 21 dias. Os espécimes foram divididos em cinco grupos: GI- Sistema Endox Plus, GII- NaOCl 2.5 % /MTAD, GIII- NaOCl 2,5% /EDTA, GIV- solução salina (controle positivo), GV- Controle negativo (sem instrumentação/irrigação). Foi realizada a análise microbiológica das amostras por meio de diluições seriadas e a contagem das UFCs. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por ANOVA e Tukey post-hoc (p < 0,05). Todos os espécimes mostraram crescimento bacteriano após o período de contaminação com similar contagem de UFC/mL log, sem diferença estatística entre os grupos. Após os procedimentos houve uma redução da quantidade de bactérias em todos os grupos, exceto no controle negativo. Não houve diferenças estatísticas significantes entre os GI e GIV. Os grupos II e III não mostraram crescimento bacteriano, mostrando diferença estatística com os outros grupos. Na coleta final, houve um aumento na contagem bacteriana nos grupos I, II, III e IV, sem diferença significativa entre eles. Porém, houve diferença na proliferação bacteriana quando comparados com a coleta pós-preparo. O sistema Endox Plus demonstrou a menor efetividade antibacteriana quando comparado às soluções de NaOCl 2,5% /MTAD e NaOCl 2,5% /EDTA e, todos os procedimentos avaliados permitiram a proliferação bacteriana após 7 dias, mostrando a permanência... / The aim of this study is to evaluate the antimicrobial effectiveness of irrigating solutions and the Endox Plus system in the treatment of the root canals. Chapter I- In order to compare the antimicrobial effectiveness of sodium hypochlorite solution (NaOCl), MTAD Biopure and Endox Plus system during chemomechanical preparation, were used 70 single-rooted human teeth, which were contaminated with the strain of E. faecalis (ATCC 29212) and incubated for 21 days. The specimens were divided into five groups: GI- Endox Plus system, GII- NaOCl 2.5% /MTAD, GIII- NaOCl 2.5% /EDTA, GIV- saline solution (positive control), GV- negative control (without instrumentation/irrigation). Microbiological analysis of the samples consisted in evaluation of the CFUs. The data obtained were statistically analyzed by ANOVA tests and Tukey post-hoc (p<0.05). The specimens showed bacterial growth after the initial incubation period with similar counting of CFU/mL log, with no statistical difference among the groups. After the procedures there was a decrease of the amount of bacteria in all groups, except in the negative control. There were no statistically differences between the GI and GIV. The GII and GIII didn’t show bacterial growth, showing statistical differences with the other groups. In the final sample, bacterial counts increased in groups I, II, III, IV, with no statistically significant differences among the groups, but there was a difference when compared to the post-instrumentation sample. The Endox Plus system presented the lowest antibacterial effectiveness when compared to the solutions of NaOCl 2.5% /MTAD y NaOCl 2.5% /EDTA and all the evaluated procedures allowed the recovery of bacteria 7 days after treatment, demonstrating persistence of infection in the root canal system. Chapter II- The antibacterial... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-03Bitstream added on 2014-06-13T20:16:42Z : No. of bitstreams: 1 brito_eg_me_sjc.pdf: 1907796 bytes, checksum: bf58da81036e3153fe91516a2dffc53e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A proposta deste trabalho foi avaliar a efetividade de extratos naturais, como soluções irrigadoras, sobre E. faecalis, S. aureus, E. coli, e endotoxinas (LPS) em canais radiculares. Foi avaliado também o efeito citotóxico do conteúdo do canal, após os tratamentos, pela produção de TNF-α e IL-1β em cultura de macrófagos. Foram utilizados 84 dentes unirradiculados, contaminados com associação dos três microrganismos por 28 dias. Após, foram divididos em 7 grupos (n=12), de acordo com o irrigante utilizado: G1) solução fisiológica (controle); G2) solução de clorexidina 2%; G3) extrato glicólico de própolis 12%; G4) extrato glicólico de alcaçuz 20%; G5) extrato glicólico de barbatimão 20%; G6) extrato glicólico de romã 20%; G7) extrato glicólico de cavalinha 20%. Foram realizadas 2 coletas do conteúdo do canal radicular: imediatamente após a instrumentação e após 7 dias da instrumentação. Para todas as coletas, foi realizada avaliação da atividade antimicrobiana pela contagem de UFC/mL em meios de cultura seletivos, verificação da neutralização de endotoxinas pelo teste cinético cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus (LAL) e avaliação dos efeitos citotóxicos do conteúdo do canal pela produção de IL-1 e TNF-α por macrófagos. Os resultados foram analisados estatisticamente (ANOVA e teste de Tukey, 5%). Todos os extratos promoveram significativa redução microbiana em relação ao controle na 1ª coleta após instrumentação (p<0,05). Com relação E. faecalis, os extratos de própolis (G3), barbatimão (G5), romã (G6) e cavalinha (G7) promoveram ausência de crescimento microbiano em muitos espécimes, sendo semelhantes a clorexidina e diferentes dos demais grupos (p<0,05). Com relação S. aureus, os extratos de própolis (G3) e barbatimão (G5) promoveram ausência de crescimento microbiano em todos os espécimes, sendo semelhantes... / The purpose of this study was to evaluate the effects of natural extracts as irrigating solutions on E. faecalis, S. aureus, E. coli, and endotoxins (LPS) in root canals. The post treatment citotoxic effect of root canal content was also evaluated by TNF-α and IL-1β production by macrophages cell culture. A total of 84 single root canal teeth were contaminated with E. faecalis, S. aureus and E. coli for 28 days. The groups were assigned into 7 groups (n=12) according to the irrigant solution used: G1) physiologic solution (control); G2) chlorhexidine 2%; G3) propolis glycolic extract 12%; G4) liquorice glycolic extract 20%; G5) barbatiman glycolic extract 20%; G6) pomegranate glycolic extract 20%; G7) horsetail glycolic extract 20%. Samples were twice collected from root canals: immediately after instrumentation and 7 days after instrumentation. All samples were submitted to antimicrobial evaluation by CFU/mL counting on selective culture media. The endotoxin detoxification was evaluated by Limulus amebocyte lysate assay (LAL), and the citotoxic effects was evaluated by TNF-α and IL-1β production by macrophages cell culture. The results were statistically analysed (ANOVA and Tukey, 5%). All the extracts promoted significant microbial reduction compared to the control group on samples collected immediately after instrumentation (p<0,05). E. faecalis results showed that propolis (G3), barbatiman (G5), pomegranate (G6) and horsetail (G7) extracts promoted no microbial growth in all samples, similar to chlorhexidine solution and different from other groups (p<0,05). S. aureus results showed that propolis (G3) and barbatiman (G5) promoted absence of microbial growth in all samples, similar to chlorhexidine solution and different from other groups (p<0,05). E. coli results showed that propolis (G3), pomegranate (G6) and horsetail (G7) promoted... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-01Bitstream added on 2014-06-13T20:12:41Z : No. of bitstreams: 1 figueiredo_md_me_sjc.pdf: 1643333 bytes, checksum: 28c65af70a60c705d107f1d4b9fc61c6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente, os pinos de fibra de vidro têm surgido como uma alternativa para restaurar dentes tratados endodonticamente. Entretanto, a perda da retenção do pino é uma das principais causas de falhas. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a resistência de união e o tipo de falha adesiva, em diferentes regiões da raiz, de pinos de fibra de vidro transparente cimentados no canal radicular com cimento de cura dual, variando-se a solução irrigadora utilizada durante o preparo dos canais, através do teste de push-out. Para o estudo, foram utilizados 30 dentes humanos, todos igualmente preparados. No momento da cimentação dos pinos, as soluções irrigadoras foram: solução de soro fisiológico, hipoclorito de sódio 2,5% e solução de clorexidina 2%; e o cimento resinoso utilizado foi de cura dual. Após a cimentação, os espécimes foram seccionados, obtendo-se 2 fatias de aproximadamente 2 mm cada, suas faces cervicais foram marcadas, e então, submetidas ao teste de push-out. Foram realizados os testes ANOVA e Tukey, com nível de significância de 5 %, para a análise do ensaio mecânico e realizada análise qualitativa do tipo de falha ocorrida. Pôde-se observar que o grupo irrigado com hipoclorito de sódio 2,5% apresentou menor valor da média de resistência adesiva (3,870 ± 3,799 MPa), comparado com o grupo da clorexidina 2% (4,215 ± 2,098 MPa) e com o grupo do soro (4,510 ± 1,186 MPa). Já em relação aos terços, a região média foi a que apresentou maior valor da média de resistência adesiva (4,803 ± 3,14 MPa) quando comparado com a região cervical (3,593 ± 1,717 MPa), porém não houve diferença estatística significante, nem entre as regiões e nem entre as soluções irrigadoras. A maioria das falhas ocorridas foram do tipo adesiva 70%, enquanto que 23,33% foram fraturas coesivas, e 6,66% foram do tipo mistas. Assim, é possível concluir que os... / Currently, the fiberglass posts have emerged as an alternative to restore endodontically treated teeth. However, the loss of retention of the pin is a major cause of failure. Therefore, the aim of this study was to evaluate and compare the bond strength of transparent fiberglass posts, using a dual cure cement, varying the irrigating solution used during the preparation of the root canals through the push-out test and then a qualitative analysis of types of adhesion failures was made by reading into a stereomicroscope. For the study, 30 human teeth were used, all equally prepared. At the time of cementation of the posts, the irrigating solutions were: normal saline solution, sodium hypochlorite 2.5%, and 2% chlorhexidine solution, and the resin cement used was dual-curing. After cementation, specimens were sectioned, yielding two slices of about 2 mm each, their cervical faces were marked, and then subjected to push-out test, the data obtained were analyzed by descriptive and inferential statistics. The tests performed were ANOVA and Tukey, with a significance level of 5% for the analysis of mechanical test, and the type of failure occurred was qualitatively evaluated. It could be observed that the group irrigated with sodium hypochlorite 2.5% showed the lowest mean bond strength (3.870 ± 3.799 MPa), compared with 2% chlorhexidine group (4.215 ± 2.098 MPa) and the normal saline solution group (4.510 ± 1.186 MPa). In relation to the thirds, the middle region showed the highest value of bond strength average (4.803 ± 3.14 MPa) compared with the cervical (3.593 ± 1.717 MPa), but differences were not statistically significant, nor between regions nor between irrigating solutions. Most failures were adhesive type 70%, while 23.33% were cohesive fractures, and 6.66% were mixed type. Thus, we conclude that the irrigation protocols evaluated in this study did not exert effects on the bond ... (Complete abstract click electronic access below)