Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Lea Assed Bezerra da Silva / Banca: Pedro Felício Estrada Bernabé / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do preparo biomecânico coadjuvado por diferentes soluções irrigadoras e da sua associação a um curativo de demora à base de hidróxido de cálcio em canais radiculares de dentes de cães contendo endotoxina (LPS bacteriano). Foram utilizados 137 raízes de pré-molares com vitalidade pulpar de 7 cães, cujos canais radiculares, após pulpectomia foram preenchidos por solução de LPS de Eschechia coli na concentração de 10mg/mL, por 10 dias, quando receberam os seguintes procedimentos: Nos grupos I a V foi realizado o preparo biomecânico dos canais radiculares, coadjuvado pelas seguintes soluções irrigadoras: solução de hipoclorito de sódio a 1, 2, 5 e 5% (grupos I a III); solução de digluconato de clorexidina a 2% (Grupo IV); soro fisiológico (Grupo V). No grupo VI, a solução de LPS foi mantida no canal radicular durante todo o período experimental e no grupo VII, após o preparo biomecânico coadjuvado por soro fisiológico, os canais radiculares foram preenchidos por pasta à base de hidróxido de cálcio (Calen). Decorridos 60 dias, os animais foram mortos e as peças submetidas ao processamento histológico para avaliação do reparo apical e periapical. A avaliação histopatológica demonstrou que, os grupos I a VI, que não receberam curativo de demora apresentaram maior intensidade de infiltrado inflamatório, espessura do ligamento periodontal e reabsorção cementária e ósse (p<0,05) do que o grupo VII, o qual recebeu curativo de demora à base de hidróxido de cálcio. Concluiu-se que o preparo biomecânico coadjuvado por diferentes soluções irrigadoras não foi capaz de inativar a endotoxina. Porém, o emprego do curativo de demora à base de hidróxido de cálcio mostrou-se eficaz na inativação, in vivo, dos efeitos tóxicos da endotoxina. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of biomechanical preparation with different irrigating solutions and its association with a calcium hydroxide based root canal dressing (Calen) in root canals of dog's teeth containing endotoxin (bacterial LPS). One hundred and thirty-seven root canals of pre-molars with pulp vitality from 7 mongrel dogs were used. The root canals, after pulpectomy, were filled with LPS solution from Escherichia coli with 10mg/mL, for 10 days. Then, they were submitted to the following treatments: In the groups I to V, biomechanical preparation of root canals was done using the following irrigating solutions: 1, 2, 5 and 5% sodium hypochlorite solution in the groups I to III; 2.0% digluconate chlorhexidine (Group IV); saline solution (Group V). In the group VI, LPS solution was mantained in the root canal during all the experimental period and in the group VII, after the biomechanical preparation using saline solution as irrigating solution, the root canals were filled with a calcium hydroxide based root canal dressing (Calen). After 60 days, the animals were killed and the obtained histological sections were processed for evaluation of the apical and periapical repair. The histopathological evaluation showed that, the groups I to VI, with no root canal dressing demonstrated more intensive inflammatory infiltrate, thickness of periodontal ligament and cement and osseus reabsorption (p<0,05) than group VII, that received a root canal dressing based on calcium hydroxide. In conclusion, the biomechanical preparation with different irrigating solutioons didn't inativate the endotoxin. The intracanal dressing based on calcium hydroxide was efficient, in vivo, in the inativation of the deletery effects of endotoxin. / Mestre

O presente trabalho teve por objetivo avaliar ex vivo a atividade antimicrobiana hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5% e 5,25%, clorexidina (CHX) gel e líquida 2% e MTAD em biofilme de Enterococcus faecalis, sobre matriz dentinária humana. 118 incisivos inferiores humanos, com canal único, foram instrumentados e seccionados transversal e longitudinalmente. Os fragmentos radiculares obtidos foram imersos em caldo TSB e autoclavados e em seguida foram inoculados com suspensão de E. faecalis e incubados em estufa a 37C, por 72 horas, para permitir a formação do biofilme. As amostras foram randomicamente divididas em 5 grupos experimentais, com 40 amostras para cada grupo, e dois grupos controle, com 3 amostras cada. O biofilme formado sobre a matriz dentinária foi submetido à ação das soluções antimicrobianas pelos tempos 1, 5, 15 e 30 minutos. A atividade antimicrobiana foi avaliada por meio da contagem de UFCs. Após a ação das soluções antimicrobianas, os fragmentos foram imersos em meio seletivo para enterococos, incubados em estufa a 37 C por 72 horas e avaliados quanto à turbidez do meio. A avaliação do percentual de redução bacteriana em função do tempo e da solução demonstrou não haver diferença estatística entre CHX gel, NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p>0,05). Entretanto a CHX líquida e o MTAD foram menos efetivos que NaOCl 2,5% e NaOCl 5,25% (p<0,05) e semelhantes a CHX gel. O tempo de ação de 1 minuto foi o menos efetivo na eliminação bacteriana. Apenas a CHX líquida e o MTAD apresentaram diferenças na eficácia em função do tempo. A CHX foi menos efetiva em 1 e 5 minutos (p<0,05) e o MTAD, em 1 minuto de ação. Ao analisar a viabilidade bacteriana intra-dentinária, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram superiores a CHX gel, CHX líquida e NaOCl 2,5%; e o tempo de 30 minutos foi estatisticamente significativo em relação aos demais (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos parece-nos lícito concluir que o NaOCl 2,5% e 5,25% e a CHX gel 2% foram mais eficazes na eliminação de E. faecalis em todos os tempos testados. O MTAD apresentou efetiva ação antimicrobiana a partir de 5 minutos de ação. Porém quando foi avaliada a atividade antimicrobiana no interior da dentina, o NaOCl 5,25% e o MTAD foram mais efetivos, sendo necessário tempo mínimo de 30 minutos para ampla eliminação bacteriana no interior dos túbulos dentinários. / The present study aimed to evaluate ex vivo the antimicrobial activity of sodium hypochlorite (NaOCl) 2.5% and 5.25%, chlorhexidine (CHX) liquid and gel 2% and MTAD in Enterococcus faecalis biofilms, on human dentin matrix. 118 mandibular human incisors, single rooted, were instrumented and sectioned transversal and longitudinally. The root sections obtained were immersed in TSB broth and autoclaved, thereafter, they were inoculated with suspensions of E. faecalis and incubated at 37C, for 72h to allow biofilm formation. Samples were randomly divided in 5 experimental groups, with 40 samples per group, and 2 control groups, with 3 samples each. The biofilm developed over the dentin matrix was placed under the action the antimicrobial solutions for 1, 5, 15 e 30 minutes. The antimicrobial activity was assessed through CFU counts. After the action of the antimicrobial solutions, the root fragments were immersed in an Enterococci selective broth, incubated at 37 C for 72 hours, and evaluated for broth turbidity. The analysis of the percentage of bacterial reduction depending on the time and on the solution demonstrated no statistic difference among the CHX gel, NaOCl 2.5% and 5.25%(p>0.05). However, the CHX liquid and MTAD were less effective than NaOCl 2,5% and NaOCl 5,25% (p<0.05) and similar to CHX gel. Only CHX liquid and MTAD had statistical differences in its efficacy depending on the time. CHX was less effective in 1 and 5 minutes (p<0.05) and MTAD in 1 minute. When analyzing the bacterial viability in the dentin, NaOCl 5.25% and MTAD were superior to CHX gel, CHX liquid and NaOCl 2,5%; and the time of 30 minutes was statistically different than the others (p<0.05). Based on the results obtained it seems licit to conclude that NaOCl 2,5% and 5,25% and CHX gel 2% were the most effective in the elimination of E. faecalis at all times tested. MTAD presented effective antimicrobial action after 5 minutes of action. However, when the bacterial survival in the dentin was assessed, NaOCl 5.25% and MTAD were the most effective, and the minimum time for wide bacterial elimination in the dentinal tubules was 30 minutes.

A qualidade final do preparo do canal destaca-se, dentre outras condições, pela ausência de magma dentinário e pelo aumento da permeabilidade dentinária, de modo a permitir pela primeira, a falta de substrato para desenvolvimento de microbiota e melhor adaptação do material obturador e, pelo segundo a possibilidade de alcançar na maior profundidade do túbulo dentinário as sujidades ali eventualmente presentes e fazer com que a medicação intracanal atue plenamente no sistema endodôntico. Metodologias experimentais de avaliação dessas qualidades aferem isoladamente cada uma delas dificultando a percepção de que a interação de ambas poderia permitir compreender o seu real papel no êxito da terapia endodôntica. O objetivo deste estudo consistiu-se em criar um procedimento capaz de, no mesmo espécime dental, avaliar a presença de magma e o quanto de permeabilidade dentinária radicular se alcança após o preparo químico-cirúrgico e a irrigação-aspiração final com diferentes irrigantes. Quarenta dentes unirradiculares humanos foram preparados com instrumentos rotatórios e Endo-PTC + NaOCl a 1% e divididos em quatro grupos (n=10) no momento da irrigação-aspiração final de acordo com o irrigante a ser empregado: G I (controle) - NaOCl a 1%; G II - EDTA a 17%; G III - EDTA-T a 17% e G IV - MTAD®. Os canais foram preenchidos com azul de metileno a 0,5% e mantidos em frascos por 48 h. Decorrido este tempo, as coroas foram removidas e as raízes foram clivadas no sentido transversal obtendose fragmentos do terço cervical, médio e apical. Os espécimes foram fotografados e analisados no programa ImageLab quanto à penetração do corante. Após esta análise, os fragmentos foram novamente clivados no sentido longitudinal e preparados para MEV. As eletromicrografias foram analisadas por três diferentes avaliadores e qualificadas por escores. As substâncias irrigadoras utilizadas, quando comparadas entre si, tiveram efeitos semelhantes sobre a permeabilidade dentinária, considerando as raízes por inteiras e pelos seus terços. Na avaliação individual das substâncias irrigadoras, as diferenças de permeabilidade entre os terços radiculares não foram estatisticamente significantes, exceto para o EDTA-T cujo terço apical teve menor penetração do corante. Quando a substância irrigadora com ação quelante/desmineralizante foi empregada para irrigação-aspiração final do canal radicular, o magma dentinário foi eficientemente removido enquanto a irrigação somente com NaOCl não foi suficiente para remover o magma. Os três terços do canal radicular apresentaram o mesmo grau de limpeza das paredes da dentina radicular, exceto para o EDTA-T, cujo terço apical apresentou maior quantidade de magma quando comparado aos terços cervical e médio. A vinculação dos resultados estatísticos da permeabilidade dentinária com a remoção do magma dentinário não mostrou a mesma relação uniforme para as substâncias irrigadoras avaliadas, quer na sua totalidade quer nos seus terços, deduzindo-se que maior ou menor permeabilidade necessariamente não corresponde a menor ou maior presença de magma dentinário. As análises da permeabilidade dentinária e da remoção do magma dentinário, com aplicação inicial do corante seguido de processamento para MEV, mostraram-se viáveis nos mesmos espécimes radiculares. / After root canal preparation and removal of smear layer, penetration of intracanal dressing deep in dentinal tubules to reduce microbial growth is enhanced. Removal of smear layer also permits a more effective cleaning of organic tissue and bacteria from within the dentinal tubules and allows a better adaptation of obturation material along root canal walls. Other studies have evaluated smear layer removal and dentinal permeability in isolation on different specimens, making it difficult to interpret the interaction between smear layer and dentin permeability and their real roles in root canal treatment. The aim of this study was to create a procedure to evaluate the presence of smear layer and what its influence is on root dentin permeability after chemomechanical root canal preparation and final irrigation-aspiration with different chemicals using the same specimen. Forty single root human teeth were instrumented with rotary instruments and Endo-PTC + 1% NaOCl and ramdomly divided into four groups (n=10) at the final rinse step, according to the irrigant used: G I (control) - 1% NaOCl; G II - 17% EDTA; G III - 17% EDTA-T and G IV - MTAD®. The root canals were filled with 0.5% methylene blue and maintained in bottles for 48 h. After this time, the crowns were cut off and the roots were transversally split resulting in three fragments: coronal, middle and apical. The specimens were analyzed using ImageLab software to evaluate dye penetration. After this analysis, the fragments were then axially split and prepared for SEM. The photomicrographs were analyzed by three different evaluators and qualified by scores. When the whole roots were analyzed and the irrigants used were compared among themselves, the same effect on dentin permeability was observed. Individual evaluation of the irrigants showed, the differences in the permeability levels for all 3 root canal thirds were not statistically significant, except for the apical third of the EDTA-T irrigation group which exhibited less dye penetration. When a decalcifying irrigant was used for final rinse, the smear layer was efficiently removed. In contrast a final rinse with NaOCl was not enough to remove this layer. In all irrigation experimental groups the three different thirds of the root canals showed the same amount of smear layer removal, except for the EDTA-T group, which exhibited higher amounts of smear layer removal in the apical third compared to coronal and middle thirds. The results of both studies (dentin permeability and smear layer removal) did not show an even relationship for the irrigants evaluated, neither on their smear layer in the entire canal nor was it observed in each root canal thirds evaluated. This inferres that higher or lower dentinal permeability does not necessarily correspond to a higher or lower amount of smear layer presence. The Pearson correlation test supports these statements. The analysis of dentin permeability with initial introduction of a dye followed by the smear layer removal analysis under SEM, was shown to be a feasible procedure using the same root specimen.

Este estudo clínico analisou os efeitos dos procedimentos endodônticos e da irrigação ultrassônica passiva (PUI) em bactérias e endotoxinas de canais radiculares. Cinquenta pacientes com dentes com periodontite apical primária foram divididos de forma randomizada em dois grupos: PUI (n=25) e irrigação convencional (IC) (n=25). O preparo químico-cirúrgico (PQC) foi realizado com instrumentos reciprocantes, utilizando-se NaOCl 2,5% durante o preparo; e EDTA 17%, para remoção do magma dentinário. Os canais radiculares foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio por 14 dias e obturados. Foram realizadas coletas microbiológicas dos canais antes (S1) e após o PQC (S2), após os protocolos de irrigação (S3), após a medicação intracanal (S4) e após a reinstrumentação dos canais (S5). Durante o processamento das amostras, as coletas de 5 casos foram perdidas por fatores diversos. As amostras foram analisadas por PCR quantitativo para detecção e quantificação de bactérias e pelo teste turbidimétrico de LAL para detecção e determinação do nível de endotoxinas. Bactérias e endotoxinas foram observadas em 100% das amostras iniciais coletadas. Em ambos os grupos, houve diminuição significativa na concentração de endotoxinas entre uma etapa do tratamento e a etapa posterior (p<0,05). O mesmo foi observado quanto ao número de bactérias, exceto entre a remoção da medicação intracanal e a reinstrumentação antes da obturação (S5). A análise intergrupos demonstrou que, com relação às endotoxinas, não foram observadas diferenças significativas entre os grupos (p>0,05). Com relação à redução bacteriana, a PUI foi capaz de reduzir significativamente mais o número de bactérias do que a IC (p<0,05). A análise qualitativa dos resultados demonstrou que nenhuma das técnicas sobressaiu-se sobre a outra em relação à frequência de casos com leituras positivas, tanto para bactérias quanto para endotoxinas. Concluiu-se que a PUI foi mais eficaz do que a IC em reduzir o número de bactérias, mas não a quantidade de endotoxinas do canal radicular. Além disso, cada etapa do tratamento endodôntico foi capaz de reduzir tanto o número de bactérias quanto a quantidade de endotoxinas. / The aim of this clinical study was to compare the effects of passive ultrasonic irrigation (PUI) and intracanal medication with calcium hydroxide in bacteria and endotoxins from root canal. Fifty teeth with apical periodontitis were randomly divided into two groups according to the irrigation protocol: PUI (n = 25) and conventional irrigation (CI) (n = 25). The root canal preparation of all the teeth was carried out with reciprocating files and 2.5% NaOCl during preparation; and 17% EDTA for smear layer removal. The root canals were medicated with calcium hydroxide for 14 days. Microbiological sampling were performed before (S1) and after the preparation (S2) after irrigation protocols (S3), and after intracanal medication (S4 and S5). During the processing of the samples, five cases were lost for several factors. The samples were analyzed by real time PCR, for the detection and quantification of bacteria, and the turbidimetric LAL assay, for the detection and analysis of the endotoxin levels. Bacteria and endotoxins were observed in 100% of the initial samples. In both groups, there was a significant decrease in the concentration of endotoxins between one step and the subsequent step of treatment (p < 0.05). The same was observed for the number of bacteria, with the exception of the reinstrumentation after the removal of the medication (S5). The intergroup analysis showed no significant differences between groups in endotoxin reduction ( p > 0.05 ). PUI was able to reduce the number of bacteria significantly better than CI (p < 0.05). No significant statistical difference was observed between groups regarding the occurrence of cases wielding positive results for bacteria or endotoxin. It was concluded that PUI was more effective than CI in reducing the number of bacteria but not the amount of endotoxin in the root canal. Furthermore, each step of the endodontic therapy was effective in reducing both the number of bacteria as the amount of endotoxin.

Orientador: Regina Maria Puppin-Rontani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T23:23:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pascon_FernandaMiori_M.pdf: 4566507 bytes, checksum: 3f6c891c0673562868d8c5f467dd9f71 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Um dos principais objetivos do tratamento endodôntico é o debridamento do sistema de canais radiculares através da remoção dos restos pulpares, da smear layer e smear plugs, para eliminar a contaminação bacteriana e subprodutos da mesma, os quais podem se tornar reservatórios de irritantes no canal tratado. Além disso, as substâncias irrigadoras e os métodos de irrigação utilizados durante o preparo químico-mecânico, podem também contribuir para a remoção da smear layer e consequentemente alterar a permeabilidade dentinária. Dessa forma, os objetivos desta Dissertação foram: (1) discutir através da revisão da literatura, a eficácia de substâncias irrigadoras, bem como a influência de dois métodos de irrigação (irrigação manual ou ativação ultrasônica) utilizados durante o preparo químico-mecânico de dentes decíduos e permanentes, considerando a permeabilidade da dentina radicular; (2) correlacionar o índice de permeabilidade da dentina radicular de dentes decíduos sob a influência de substâncias irrigadoras associadas ou não a auxiliares de instrumentação (líquido de Dakin, líquido de Dakin associado ao peróxido de hidrogênio, solução salina associada à clorexidina gel e solução salina) e diferentes métodos de irrigação (irrigação manual ou ativação ultrasônica) aos seus aspectos morfológicos (presença ou ausência de smear layer). Baseando-se na revisão de literatura pôde-se concluir que as substâncias irrigadoras e associações utilizadas durante o tratamento endodôntico promoveram aumento da permeabilidade dentinária radicular de dentes permanentes e que não houve diferenças quanto à permeabilidade dentinária, quando comparada a irrigação realizada manualmente ou através de vibração ultrasônica. Não há estudos relacionados à permeabilidade radicular de dentes decíduos, quando estes são submetidos a substâncias irrigadoras e diferentes métodos de irrigação. A técnica de irrigação manual foi considerada mais efetiva do que a técnica de irrigação através de sistema de vibração ultrasônica, quanto à permeabilidade dentinária radicular de dentes decíduos. A presença da smear layer nas paredes radiculares foi um fator limitante à penetração do corante (índice de permeabilidade) para o terço médio quando dentes decíduos foram irrigados manualmente. O líquido de Dakin apresentou os maiores valores de índice de permeabilidade, nos três terços radiculares, sugerindo que essa solução irrigadora seja indicada para o tratamento endodôntico de dentes decíduos. / Abstract: One of the main goals of root canal treatment is the cleaning of the entire root canal system, through removal of pulpal debris, smear layer and smear plugs in order to avoid harbor bacteria or bacterial by-products, providing a reservoir of potential irritants in treated root canal. In addition, the cleansers and irrigation methods used in the endodontic treatment, can also contribute with the smear layer removal and with permeability alterations. Thus, the aims of this Thesis was: (1) to discuss the efficacy of some cleansers, as well as the influence of two irrigation systems used during endodontic preparation of primary and permanent teeth (manual or ultrasonic vibration) with regard to root dentin permeability, based on a literature reviewing; (2) to correlate the dye permeability to morphological aspect (presence or absence of smear layer) of the primary root dentin wall, using scanning electron microscopy (SEM), regarding the endodontic preparation and irrigation methods. Based on literature review (1) it can be concluded that among the solutions used for permanent teeth, all solutions and associations studied increased the dentin permeability. There was no difference in the dentin permeability when comparing manual and ultrasonic irrigation. There are not enough papers focusing primary teeth on this subject to definitely establish the patterns of increased dentin permeability in tooth root canal treatment regarding the irrigating solutions and irrigation systems. The results of the second study showed that manual irrigation technique was better than ultrasonic one and that Dakin's liquid, Dakin's liquid associated with hydrogen peroxide, and saline solution showed the highest permeability index averages values. Regarding the correlation study, it could be concluded that the smear layer presence on the root dentin walls was a limiting factor to dye penetration (Permeability Index), in middle third for manual irrigation. / Mestrado / Odontopediatria / Mestre em Odontologia

Objetivos: avaliar a eficácia do uso da irrigação ultrassônica passiva (IUP), do instrumento adicional e da associação de ambos na remoção da medicação intracanal de hidróxido de cálcio através da microtomografia computadorizada (micro-CT). Material e métodos: foram selecionados 32 dentes humanos unirradiculares, preparados pela técnica de instrumentação rotatória com o sistema Protaper® universal até a lima final Finishing File 4 (F4). As amostras foram preenchidas com medicação intracanal de Ca(OH)2 associada ao propilenoglicol 400. Após 30 dias, os dentes foram divididos em quatro grupos, de acordo com a técnica de remoção da medicação. Nos grupos em que foi utilizada a IUP, esta foi realizada através da irrigação-aspiração com 5 mL de NaOCl 1%, 3 mL de EDTA 17% com agitação ultrassônica por um minuto a 2 mm do CRT e 5 mL de NaOCl 1%. O instrumento adicional utilizado foi a lima F5. No grupo controle, a remoção da medicação foi feita apenas com o instrumento final (F4) e com o uso do EDTA 17%, mantido por um minuto no interior do canal, sem ativação ultrassônica. As amostras foram avaliadas por meio da micro-CT, em três momentos distintos do procedimento endodôntico: 1) após preparo químico-cirúrgico do canal, 2) 30 dias após aplicação da medicação intracanal de Ca(OH)2 e 3) após remoção da medicação intracanal. As imagens microtomográficas foram avaliadas utilizando o software CTan (SkyScan). O canal foi dividido em terços apical, médio e cervical. Os conjuntos de dados foram analisados usando a escala de cinza do software CTan para quantificar o volume (em mm3) do canal após o preparo, o volume da medicação após 30 dias, o volume de resíduos de medicação e o volume do canal após remoção da medicação. A porcentagem de resíduos também foi calculada em relação ao volume do canal e ao volume de medicação após 30 dias. Finalmente, o aumento de volume do canal após a remoção também foi avaliada. Os dados foram analisados através de ANOVA de três fatores/teste de Tukey ou Kruskal-Wallis/Student-Newman-Keuls, com nível global de significância de 5%. Resultados: Independentemente da região do canal, o uso do ultrassom resultou em um menor volume de resíduos de MIC, em termos absolutos e em relação ao volume do canal. Em relação ao volume de medicação após 30 dias, o uso do ultrassom foi marginalmente significante. O uso do instrumento adicional não apresentou influência significante sobre a eficácia da remoção da MIC. A porcentagem de resíduos foi maior na região apical, quando o ultrassom não foi utilizado. Em números absolutos, a região cervical apresentou maior volume de resíduos. Em relação ao grupo controle, o uso do ultrassom resultou em um volume final maior do canal cirúrgico no terço cervical. Em termos percentuais, todas as técnicas resultaram em aumentos estatisticamente semelhantes do volume do canal cirúrgico para os terços cervical e médio. No terço apical, o grupo controle apresentou aumento percentual estatisticamente inferior aos demais. Conclusões: houve diferenças estatisticamente significantes na eficácia de remoção da MIC entre as técnicas testadas, sendo que o uso do ultrassom resultou em um menor volume de resíduos de MIC, em todos os grupos para um dado terço. / Objectives: To evaluate the efficacy of passive ultrasonic activation (PUI), an additional instrument and the combination of both for removal of intracanal calcium hydroxide using computerized microtomography (micro-CT). Methods: 32 singlerooted human teeth were prepared using the universal Protaper® rotary instrumentation system, with Finishing File 4 (F4) as the final file. The samples were filled with intracanal Ca(OH)2 plus propyleneglycol 400. After 30 days, the samples were divided into four groups according to the medication removal technique. In the groups where PUI was used, it was done by suction-irrigation with 5 mL of 1% NaOCl, 3 ml 17% EDTA with ultrasonic agitation for one minute at 2 mm from the working length and 5 ml of 1% NaOCl. The additional instrument used was the F5 file. In the control group, removal of the medication was performed only with the final instrument (F4) and using 17% EDTA, kept for one minute in the canal without ultrasonic activation. The samples were evaluated by micro-CT, at three different stages of the endodontic procedure: 1) after chemical-surgical preparation of canal 2) 30 days after application of the Ca(OH)2 medication 3) after removal of the medication. Microtomography images were evaluated using the CTan (SkyScan) Software. The root was divided in apical, middle and cervical. Each data set was analyzed using the CTan software gray scale to determine the volume (mm3) of the canal after the preparation, the volume occupied by the medication after 30 days, the medication residue volume and the volume of the canal after medication removal. The residue percentage was also calculated in relation to the volume of the canal and the volume of medication found after 30 days. Finally, the volume increase of the canal after medication removal was also assessed. Data were analyzed using threefactor ANOVA/Tukey test or Kruskal-Wallis/Student-Newman-Keuls with overall significance level of 5% Results: Regardless of the region, the use of ultrasound resulted in a smaller volume of residue in absolute terms and in relation to the volume of the canal. In relation to the volume of medication after 30 days, the use of ultrasound was only marginally significant. The use of an additional instrument showed no statistically significant influence on the effectiveness of MIC removal. The percentage of residue was higher in the apical region, when the ultrasound was not used. In absolute numbers, the cervical region showed the highest volume of residue. In relation to the control group, the use of ultrasound resulted in a higher final volume in the cervical third. All techniques resulted in statistically similar increases in the volume of the surgical canal for the cervical and middle thirds. In the apical third, the control group showed a statistically lower increase in volume than the others thirds. Conclusions: Statistically significant differences were found among the tested techniques, the use of ultrasound resulted in a smaller volume of residue in all groups for a particular third.

Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T19:11:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prado_Mairado_D.pdf: 14853217 bytes, checksum: f86be389a870042c299930884a318e11 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução: O objetivo do presente trabalho foi avaliar a interação entre as diferentes substâncias químicas auxiliares, utilizadas em endodontia, e seus efeitos nas etapas do tratamento endodôntico. Métodos: Soluções de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 0,16%, 1%, 2,5% e 5,25%, clorexidina 2% solução e gel, EDTA 17%, ácido cítrico 10% e ácido fosfórico 37% foram utilizadas isoladamente ou associadas entre si na proporção 1:1. As mesmas foram analisadas quimicamente por espectrometria de massa; e microbiologicamente pelo método de difusão em ágar, contra diferentes patógenos. Adicionalmente, foram avaliados onze protocolos de irrigação em relação à formação de smear layer química por microscopia eletrônica de varredura. Por fim, foram avaliados 9 protocolos de irrigação associados a dois diferentes sistemas de obturação, guta-percha/ AH Plus e Resilon/ Real Seal SE, em relação à microinfiltração coronária e à resistência de união da dentina aos materiais obturadores. Resultados: O NaOCl, em todas as concentrações, associado à clorexidina em ambas as formulações, levou à formação de precipitado, assim como a associação entre a clorexidina e o EDTA e entre clorexidina e solução salina. Todas as associações avaliadas apresentaram algum grau de inibição contra os patógenos testados. Irrigação intermediária, com 10 mL de água destilada, entre as soluções de NaOCl e clorexidina, não foram capazes de inibir a formação de smear layer química, assim como irrigações com EDTA e ácido cítrico. Dos diferentes protocolos de irrigação avaliados, aqueles que apresentaram uma irrigação final com solução de clorexidina 2% tiveram níveis reduzidos de microinfiltração coronária. Em relação à resistência de união à dentina, no sistema obturador guta-percha/AH Plus, os grupos em que se utilizou as associações NaOCl/ácido fosfórico e clorexidina/EDTA apresentaram maiores valores de resistência de união, ao passo que no sistema Resilon/Real Seal SE, os maiores valores foram encontrados nos grupos clorexidina/ácido fosfórico. A utilização da clorexidina como irrigante final não afetou negativamente os sistemas obturadores avaliados. Conclusões: A interação entre as substâncias químicas auxiliares pode levar à formação de precipitados. As diferentes substâncias químicas auxiliares, quando associadas, possuem atividade antimicrobiana. Irrigações intermediárias entre as diferentes substâncias químicas auxiliares são necessárias para reduzir ou até mesmo impedir a formação de precipitados, visualizados na superfície dentinária como uma smear layer química. Durante o preparo químicomecânico, as diferentes substâncias químicas auxiliares geram modificações na superfície dentinária que influenciam na microinfiltração coronária e na resistência de união dos sistemas obturadores guta-percha/AH Plus e Resilon/Real Seal SE / Abstract: Introduction: The aim of the present study was to evaluate the interaction among different chemical auxiliary substances used in endodontics and their effects on different steps of endodontic treatment. Methods: 0.16%, 1%, 2.5% and 5.25% sodium hypochlorite solutions (NaOCl), 2% chlorhexidine solution and gel, 17% EDTA, 10% citric acid, 37% phosphoric acid, distilled water, and saline solution were used both associated with each other (1:1 ratio) and not associated. The solutions were chemically examined with mass spectrometry. They were microbiologically examined using the Agar Diffusion Method, against different pathogens. In addition, eleven protocols were analyzed in regards to chemical smear layer with scanning electron microscopy. Finally, nine irrigation protocols (associated with two filling systems, i.e. gutta-percha/AH Plus and Resilon / Real Seal SE) were examinated regarding coronal microleakage and were examined as well regarding their bond strength with dentin. Results: NaOCl, at all concentrations, associated with both chlorhexidine formulations, led to precipitate formation, similar to the association between chlorhexidine/EDTA, and the chlorhexidine/saline solution association. All associations had some degree of inhibition against the evaluated pathogens. Intermediate flush, with 10 mL of distilled water, between NaOCl and chlorhexidine did not inhibit chemical smear layer formation, similar to intermediate flushes with EDTA and citric acid. Among the different irrigation protocols that were evaluated, when final flush with 2% chlorhexidine was present, the lowest levels of coronal microleakage were found. Regarding the bond strength to dentin, in the gutta-percha/AH Plus system, the groups with NaOCl/phosphoric acid and chlorhexidine/EDTA associations showed higher bond strength values. In the Resilon/Real Seal SE system, the highest values were found in the chlorhexidine/phosphoric acid groups. The use of chlorhexidine as a final flush did not negatively affect the filling systems evaluated. Conclusions: The interaction among the auxiliary chemical substances may lead to precipitate formation. The association between the different substances has antimicrobial activity. Intermediate flushes are necessary to reduce or even avoid the formation of chemical smear layer on the dentin surface. During the chemo-mechanical preparation, the various auxiliary chemical substances used do modify the dentine surface. These modifications have influence in the coronal microleakage and in the bond strength of the filling systems gutta-percha/AH Plus and Resilon / Real Seal SE / Doutorado / Endodontia / Doutora em Clínica Odontológica

The irrigating solutions used in primary teeth pulpectomies are essential supporters in chemical mechanic preparation, for they come in contact with the dental and periapical tissues, evaluating their biocompatibility is necessary. The aim of this study was to evaluate the in vitro cytotoxicity and genotoxicity of irrigating solutions and pharmacological associations used for sanitizing the root canals of these teeth, by conducting four tests that evaluated the toxicity according to different parameters. Tests of Cell Viability (MTT), Lipid Peroxidation (TBARS), GEMO and Alkaline Comet Assay were performed in the evaluation of major solutions - 1% and 2.5% Sodium Hypochlorite, 2% Chlorhexidine -, auxiliary solutions - 6% Citric Acid and 17% EDTA - and of the associations between major and auxiliary solutions, exposing both human peripheral blood mononuclear cells (MTT, TBARS and Alkaline Comet Assay) in 24h and 72h, and exposing dsDNA, purified calf thymus DNA (GEMO). Data were assessed for normality by Kolmogorov-Smirnov and analyzed by ANOVA followed by post hoc Dunnett's, and Kruskal-Wallis test followed by post hoc Dunn. Values showing p<0.05 were considered statistically significant. Reduction in cell viability was observed in all groups at 24 hours. At 72 hours the reduction has continued, except for EDTA, combinations of (1% and 2.5%) sodium hypochlorite with EDTA (p<0.05) and Chlorhexidine with EDTA (p>0.05). EDTA and 2.5% sodium hypochlorite with EDTA caused lipid peroxidation in 24h, and 1% and 2.5% sodium hypochlorite and three associations with citric acid (p<0.05) had the same effect in 72h. All groups have caused breaks in DNA by Alkaline Comet Assay, 24h and 72h (p<0.05). In the GEMO Test, dsDNA damage was observed in all groups (p<0.05), except for Chlorhexidine with EDTA. Some degree of toxicity was observed in all tested groups. However, Chlorhexidine, among the major solutions, and EDTA, among the auxiliary solutions, were less cytotoxic. Also, the association of these two solutions had less potential toxicity. The results demonstrated the best in vitro biocompatibility in the combination of Chlorhexidine and EDTA. / As soluções irrigantes empregadas na pulpectomia de dentes decíduos são coadjuvantes essenciais no preparo químico mecânico, por entrarem em contato com os tecidos dentários e periapicais, é fundamental a avaliação da biocompatibilidade das mesmas. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade, in vitro, de soluções irrigantes e associações farmacológicas empregadas na sanificação dos canais radiculares desses dentes, realizando quatro testes que avaliaram a toxicidade analisando diferentes parâmetros. Foram realizados os Testes de Viabilidade Celular (MTT), Peroxidação Lipídica (TBARS), GEMO e Ensaio Cometa Alcalino, na avaliação das soluções principais: Hipoclorito de Sódio 1% e 2,5%, e Clorexidina 2%; e soluções auxiliares: Ácido Cítrico 6% e EDTA 17% e das associações entre as soluções principais e auxiliares, frente às células mononucleadas do sangue periférico humano (MTT, TBARS e Ensaio Cometa Alcalino), em 24h e 72h, e frente ao dsDNA, DNA de timo de bezerro purificado (GEMO). Os dados obtidos foram avaliados quanto à normalidade pelo Kolmogorov-Smirnov e analisados por Anova seguido do post hoc de Dunnett, e Kruskal-Wallis seguido do post hoc de Dunn. Os valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Foi Observado em 24h, redução na viabilidade celular em todos os grupos. Em 72h a redução se manteve, exceto no EDTA, associações do Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) com EDTA (p<0,05) e Clorexidina com EDTA (p>0,05). Causaram lipoperoxidação em 24h, EDTA e Hipoclorito de Sódio 2,5% com EDTA e, em 72h, Hipoclorito de Sódio (1% e 2,5%) e as três associações com Ácido Cítrico (p<0,05). Todos os grupos causaram quebra no DNA pelo Ensaio Cometa Alcalino, 24h e 72h (p<0,05). No Teste GEMO foi observado dano ao dsDNA em todos os grupos (p<0,05), exceto Clorexidina com EDTA. Foi observado algum nível de toxicidade em todos os grupos testados. Entretanto, a Clorexidina entre as soluções principais, e o EDTA entre as auxiliares, foram menos citotóxicas. Também, a associação dessas duas soluções apresentou menor potencial de toxicidade. A partir dos resultados ficou demonstrado a melhor biocompatibilidade in vitro da associação de Clorexidina e EDTA.

Estudou-se, in vitro, a dissolução do tecido pulpar bovino, promovida pela solução de hipoclorito de sódio nas concentrações de 0,5; 1,0; 2,5 e 5,0 por cento com e sem lauril dietilenoglicol éter sulfato de sódio analisando-se, também, o potencial hidrogeniônico (pH), a tensão superficial, a condutividade iônica e o teor de cloro, antes e depois da utilização dessas soluções. Secionava-se um fragmento da porção central da polpa de incisivos centrais inferiores de bovinos e sua massa era anotada. Para a realização do teste de dissolução, confeccionou-se um dispositivo conectado a uma bomba peristáltica que promovia a agitação da solução. Colocava-se um fragmento pulpar no interior desse dispositivo e ligava-se a bomba peristáltica. O tempo de dissolução total foi medido com um cronômetro. Usando o tempo de dissolução do fragmento de polpa e a massa deste, calculava-se a velocidade de dissolução do tecido pulpar. Concluiu-se que: a) a velocidade de dissolução dos fragmentos de polpa bovina é diretamente proporcional à concentração da solução de hipoclorito de sódio e maior sem tensoativo; b) a redução do pH, entre o início e o final do processo de dissolução pulpar, é inversamente proporcional à concentração da solução de hipoclorito de sódio, com ou sem tensoativo; c) a redução da condutividade iônica, entre o início e o final do processo de dissolução pulpar, ocorreu da mesma forma nas diferentes concentrações da solução de hipoclorito de sódio, com ou sem tensoativo; d) a variação da tensão superficial, entre o início e o final do processo de dissolução pulpar, é diretamente proporcional à concentração da solução de hipoclorito de sódio e maior nas soluções sem tensoativo. As soluções sem tensoativo apresentaram redução da tensão superficial e as com tensoativo, elevação; e) os menores teores de cloro remanescente ocorreram com a solução de hipoclorito de sódio a 0,5 por cento e, os maiores, com o grupo formado pelas soluções a 1,0 - 2,5 e 5,0 por cento; e f) as soluções de hipoclorito de sódio com tensoativo apresentaram os menores teores de cloro remanescente após o processo de dissolução. / The dissolution of bovine pulp tissue by 0.5, 1.0, 2.5 and 5% sodium hypochlorite with and without lauryl-diethylene-glycol-ether sodium sulfate was studied, in vitro. The pH, surface tension, ionic conductivity and chlorine level were also analyzed before and after use of these solutions. A fragment from the central portion of bovine mandibular central incisors was sectioned and its mass was recorded. The pulp fragment was placed in a hydraulic apparatus with a peristaltic pump for agitation of the solution. The time for total dissolution of the pulp segment was recorded with a chronometer. Using the pulp mass and the dissolution time, the velocity of pulp dissolution was calculated. It is concluded that: a) the velocity of dissolution of the bovine pulp fragments is directly proportional to the concentration of the sodium hypochlorite solution and is greater without the surfactant; b) the decrease in pH, from the beginning to the end of pulp dissolution, is inversely proportional to the concentration of the sodium hypochlorite solution and is greater with or without the surfactant; c) the decrease in ionic conductivity, from the beginning to the end of pulp dissolution, is similar with the different concentrations of the sodium hypochlorite solution, with and without the surfactant; d) the variation of surface tension, from the beginning to the end of pulp dissolution, is directly proportional to the concentration of the sodium hypochlorite solution and is greater in the solutions without surfactant. Solutions without surfactant presented a decrease in surface tension and those with surfactant an increase; e) the smallest levels of residual chlorine occurred with the 0.5% sodium hypochlorite solution, and the greatest with the group formed by 1.0, 2.5 and 5.0% sodium hypochlorite solutions; f) the sodium hypochlorite solutions with surfactant presented the lowest levels of residual chlorine after the dissolution process.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade da solução de nanopartículas de prata, utilizada como irrigante e medicação intracanal, em controlar os microrganismos e neutralizar endotoxinas no canal radicular. Para isso, foram utilizadas 48 raízes de dentes humanos padronizadas em 16 mm e com diâmetro apical correspondente a uma lima tipo Kerr no. 30. Os canais foram contaminados por 28 dias com E. coli e por 21 dias com E. faecalis e C. albicans. Os espécimes foram divididos em quatro grupos (n=12), de acordo com a substância utilizada (solução irrigadora e medicação intracanal): G1) solução salina e solução salina (grupo controle); G2) hipoclorito de sódio 1% associado ao creme Endo-PTC e hidróxido de cálcio - protocolo tradicional da FOUSP; G3) solução de nanopartículas de prata 50 ppm e hidróxido de cálcio associado à solução de nanopartículas de prata; e G4) solução de nanopartículas de prata 50 ppm e solução de nanopartículas de prata 50 ppm. Foram realizadas cinco coletas do conteúdo do canal radicular para avaliar a atividade antimicrobiana: coleta de confirmação, imediatamente após a instrumentação (1ª. coleta) e outra após sete dias (2ª. coleta); imediatamente após a remoção da medicação (3ª. coleta) e outra após sete dias (4ª. coleta). A neutralização da endotoxina foi avaliada apenas nas quatro últimas coletas. Os resultados obtidos foram submetidos a análise estatística (Kruskall-Wallis e Dunn). Todas as soluções irrigadoras promoveram redução significativa dos microrganismos após a instrumentação (1ª. coleta) (p<0,05). Após 7 dias houve aumento do número de microrganismos em todos os grupos, voltando ao número inicial nos grupos instrumentados com solução salina e hipoclorito de sódio. Entretanto, apesar de ter ocorrido recolonização dos microrganismos no canal radicular dos espécimes instrumentados com solução de nanopartículas de prata, manteve-se redução estatisticamente significantemente do número de UFC/mL quando comparada à coleta de confirmação (p<0,05), demonstrando efeito residual. A medicação de hidróxido de cálcio eliminou 100% dos microrganismos e manteve os resultados após 7 dias (4ª. coleta) no grupo 2. No grupo quatro houve recolonização de E. faecalis e C. albicans após 7 dias de incubação. O hidróxido de cálcio foi a única substância avaliada que promoveu redução significativa (p<0,05) das endotoxinas. Assim, pôde-se concluir que o hipoclorito de sódio e a solução de NP-Ag reduziram significativamente a microbiota do canal, no entanto somente com a associação ao hidróxido de cálcio houve eliminação dos microrganismos em profundidade nos túbulos dentinários e redução das endotoxinas presentes no canal radicular. / The objective of this study was to evaluate the antimicrobial effect and endotoxin detoxified of solution of silver nanoparticles used as irrigating and dressing in root canals. Forty-eigth single-root human teeth were used. All root canals sized 16 mm and were enlarged to a Kerr file number .30. Root canals were infected for 28 days with E. coli and for 21 days with E. faecalis and C. albicans. The specimens were divided into four groups (n=12), according to the substance used (irrigating solution and dressing): G1) saline and saline (control), G2) sodium hypochlorite 1% with Endo-PTC cream and calcium hydroxide; G3) solution of Ag-NP 50 ppm and calcium hydroxide with Ag-NP; and G4) solution of Ag-NP 50 ppm and solution of Ag-NP 50 ppm. Five samplings of root canal were accomplished to evaluate the antimicrobial activity: confirmation sample, immediately after instrumentation (1st. Sample), and other after 7 days (2 nd. Sample), immediately after dressing removed (3 rd. Sample) and other after 7 days (4 th. Sample). The endotoxina detoxified was evaluated only in the last four samples by Limulus assay. Results were analysed by Kruskal-Wallis and Dunn. All irrigation solutions caused significant reduction of microorganisms after instrumentation (1 st. Collection) (p <0.05). After 7 days there was increase of the number of bacteria in all groups, returning to the initial number of microorganisms in the groups prepared with saline and sodium hypochlorite, however, the recolonization of microorganisms in root canals of groups of solution silver nanoparticles was smaller than the number of confirmation sample (p <0.05), showing residual effect. The calcium hydroxide eliminated 100% of the microorganisms and the results remained after 7 days (4 th. Collection) for group 2. In group 4 there was recolonization of E. faecalis and C. albicans after 7 days. Calcium hydroxide was the only substance that measured a significant reduction of endotoxin (p <0.05). Thus, we concluded that the sodium hypochlorite and the NP-Ag significantly reduced the microorganisms of the root canal, but it is necessary the combination of calcium hydroxide to eliminated all microorganisms into dentinal tubules and detoxified endotoxins in the root canal.