Orientador: Marcelo de Carvalho Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T04:19:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fortaleza_CarlosMagnoCasteloBranco_D.pdf: 17491955 bytes, checksum: ecc96e4f4d60a3aa874930801b5ca9fe (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Taxas de resistência ao Imipenem e à Ceftazidima em Pseudomonas aeruginosa têm apresentado crescimento em todo o mundo. Em nosso estudo, procuramos investigar os fatores de risco para a recuperação de cepas de P. aeruginosa resistentes ao Imipenem ou à Ceftazidima em pacientes internados no Hospital de Clínicas da Universidade Estadual de Campinas (HC-UNICAMP). Esse hospital possui 400 leitos, três unidades de terapia intensiva (UTI) e diversas enfermarias clínicas, cirúrgicas e pediátricas. Os fatores de risco para resistência ao Imipenem e à Ceftazidima foram avaliados separadamente em dois estudos tipo "caso-controle". Casos e controles foram selecionados retrospectivamente entre indivíduos internados no período de 1999-2002. Para cada caso, dois controles foram selecionados entre os pacientes internados na mesma enfermaria ao mesmo tempo. As variáveis estudadas incluíram: dados demográficos (sexo, idade), diagnóstico e outras doenças presentes (co-morbidades), procedimentos realizados e anti microbianos utilizados. Análise bivariada e multivariada foram realizadas para identificação dos fatores de risco. Os resultados foram ajustados para gravidade dos pacientes e tempo de exposição ao risco. Isolados de P. aeruginosa resistentes ao Imipenem e à Cefatazidima foram recuperados de 108 pacientes e 55 pacientes, respectivamente. Os fatores de risco significativos para P. aeruginosa resistente ao Imipenem foram: transferência de outro hospital (OdasRaíio=4,\; Intervalo de Confiança 95%: 1,40-12,66; p=0,01), hemodiálise (OR=7,79; IC95%: 1,59-38,16; p=0,01), e o uso de Imipenem (OR= 18,51; IC95%: 6,30-54,43; p<0,0001), Amicacina (OR=3,22, IC95%: 1,40-7,41; p=0,005) e Vancomicina (OR=2,48; IC95%: 1,08-5,64, p=0,03). Para P. aeruginosa resistente à Ceftazidima, transferência de outro hospital (OR=18,69; IC95%: 2,00-174,28; p=O,01) e uso de Amicacina (OR=3,69; IC95%: 1,32-10,35; p=0,01) foram fatores de risco significativos. Nosso estudo sugere um papel importante para várias classes de antimicrobianos como fatores de risco para aquisição de P. aeruginosa resistente ao Imipenem, mas não para isolados resistentes à Ceftazidima. Estratégias baseadas apenas na restrição do uso de Imipenem e Ceftazdima podem não ser adequadas para controlar a disseminação de cepas resistentes de P. aeruginosa / Abstract: Imipenem and ceftazidime-resistance in Pseudomonas aeruginosa is increasing worldwide. Our study aimed to investigate risk factors for nosocomial recovery of imipenem-resistant (IRPA) and ceftazidime-resistant P. aeruginosa (CRPA) in patients admitted the Hospital de Clínicas da Universidade Estadual de Campinas (HC-UNICAMP). This is a 400-bed general teaching Hospital in Campinas , Brazil, harboring three intensive-care units and several medical, surgical and pediatrical wards. Risk factors for IRPA and CRPA were assessed in two separate case-control studies. Cases and controls were selected retrospectivelly over the 1999-2002 period. Controls were matched to cases (ratio=2:l) on the basis of admission to the same ward at the same time as the case. Variables assessed included: demographic data, comorbid conditions, procedures and classes of antimicrobials used. Bivariate and multivariable analysis (logistic regression) were performed. Results were adjusted for patients severity and time of exposure to risk. IRPA and CRPA isolates were recovered from 108 and 55 patients, respectively. Statisticaly significant risk factors for IRPA were: previous admission to another hospital {Odds Ratio=A.21, 95% Confidence Interval: 1.40-12.66, P=0.0\), hemodialysis (OR=7.79, 95%CI: 1.59-38.16, P=0.01), imipenem (OR=18.51, 95%CI: 6.30-54.43, PO.0001), amikacin (OR=3.22, 95%CI: 1.40- 7.41, P=0.005) and vancomycin use (OR=2.48, 95% CI: 1.08-5.64, P=0.03). For CRPA, previous addmission to other hospital (OR=18.69, 95%CI:2.00-174.28, P=0.01) and amikacin use (OR=3.69, 95%CI:1.32-10.35, P=0.01) were significant risk factors. Our study suggests a definite role for several classes of antimicrobials as risk factors for IRPA but not for CRPA Limiting the use of only imipenem and ceftazidime may not be a wise strategy to contain the spread of resistant P. aeruginosa strains / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: João Lucio de Azevedo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:48:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vialta_Airton_D.pdf: 7068425 bytes, checksum: 35be95d571d938d79e669c7ef9161e46 (MD5) Previous issue date: 1994 / Doutorado / Doutor em Genetica

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Adriano Antunes de Souza Araújo / Banca: Anil Kumar Sing / Resumo: A cefalotina (CET) é um antimicrobiano β-lactâmico semi-sintético, bactericida e representa o protótipo das cefalosporinas, pertencente à classe da primeira geração. As cefalosporinas apresentam um espectro de atividade mais amplo do que as penicilinas e são amplamente prescritas. Poucos métodos analíticos são descritos na literatura para a análise de CET, e ao nosso conhecimento, nenhum método rápido e indicativo de estabilidade por cromatografia líquida para este composto foi publicado anteriormente. Foi desenvolvido um método indicativo de estabilidade por cromatografia líquida em fase reversa para determinação quantitativa de CET, na presença de impurezas e produtos de degradação gerados a partir dos estudos de degradação forçada em amostras de pó liofilizado para injeção. O método desenvolvido é também aplicável para a determinação de substâncias relacionadas em matéria-prima e em formas farmacêuticas. A separação cromatográfica foi obtida com a coluna Agilent Eclipse XDB-Phenyl, de 250 mm x 4,6 mm, 5 μm, em fase móvel composta por uma mistura das soluções A (tampão fosfato de amônio, pH 4,5) e B (acetonitrila), no modo de eluição gradiente. A vazão utilizada foi de 1,0 mL/min e o comprimento de onda 238 nm. O fármaco foi submetido a condições de estresse por hidrólise, oxidação, fotólise, umidade e degradação térmica. Obteve-se degradação considerável nas condições de hidrólise alcalina, ácida e estresse oxidativo. No método desenvolvido por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), a resolução entre CET e os seus potenciais produtos de degradação foi maior que 2,4; além disso, a pureza de pico de CET em todas as condições foi maior que 99%, demonstrando o poder indicativo de estabilidade do método. A impureza B (desacetilcefalotina) que é um metabólito menos ativo da CET foi identificada e apresentou formação significativa, especialmente na condição... / Abstract: Cephalothin (CET) is a semi-synthetic β-lactam antimicrobial compound, bactericidal, and it represents the prototype of cephalosporins, which belongs to the first-generation class. Cephalosporins present a larger spectrum of activity than penicillins and they are widely prescribed. Few analytical methods are described in the literature for the analysis of CET and to our knowledge rapid stability-indicating liquid chromatography (LC) methods for this compound have not been published elsewhere. A stability-indicating gradient reversed phase liquid chromatography (RP-LC) method has been developed for the quantitative determination of CET, in the presence of its impurities and degradation products generated from forced degradation studies, in samples of lyophilized powder for injection. The developed method is also applicable for the related substances determination in bulk drugs and pharmaceutical forms. The chromatographic separation was achieved on an Agilent Eclipse XDB-Phenyl, 250 mm x 4.6 mm, 5 μm column with mobile phase containing a gradient mixture of solutions A (aqueous ammonium phosphate buffer, pH 4.5) and B (acetonitrile) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was 238 nm. The drug substance was subjected to stress conditions of hydrolysis, oxidation, photolysis, humidity and thermal degradation. Considerable degradation was found to occur in base, acid and oxidative stress conditions. In the developed high performance liquid chromatography (HPLC) method, the resolution between CET and its potential degradation products was found to be greater than 2.4, further, the peak purity of CET in all conditions were more than 99% proving the stability-indicating power of method. The less active metabolite of CET, desacetylcephalothin (impurity B), was identified and is showed significant formation especially in alkaline condition. This method is able to detect the degradation products of CET at a ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-04Bitstream added on 2014-06-13T20:33:02Z : No. of bitstreams: 1 pedroso_tm_me_arafcf_parcial.pdf: 91662 bytes, checksum: f5c6c2b00880819f56fc5a7a78654f9d (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-13T18:26:27Z: pedroso_tm_me_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-04-13T18:27:06Z : No. of bitstreams: 1 000712772.pdf: 1022206 bytes, checksum: 44846063b688caab618840158e9fc515 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os antimicrobianos têm um papel fundamental no controle de doenças infecciosas. As cefalosporinas se mantêm como uma classe de antimicrobianos que se sobressaem pela sua importância terapêutica, elevada frequência de utilização, segurança e efetividade contra um amplo espectro microbiano. A cefazolina sódica (CFZ) é um agente antimicrobiano β-lactâmico, classificada como cefalosporina de primeira geração, muito utilizado como agente terapêutico e na profilaxia perioperatória. Neste trabalho foram desenvolvidos novos métodos analíticos para análise qualitativa e para a quantificação de cefazolina sódica, visando a obtenção de métodos mais rápidos, mais seguros para os operadores, mais econômicos e de fácil execução, que são essenciais para a análise desta cefalosporina na indústria farmacêutica. Na análise qualitativa, a cefazolina foi estudada quanto a sua solubilidade, ponto de fusão, pH, espectrofotometria na região do ultravioleta (UV) e na região de infravermelho (IV), cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), possibilitando a identificação da amostra. Para quantificação do fármaco três métodos foram validados. O método espectrofotométrico na região do ultravioleta foi validado utilizando o comprimento de onda de 270 nm, com faixa linear de concentração de 8 a 28 μg/mL utilizando água purificada como solvente, o teor foi de 99,10% e a exatidão foi de 100,56%. Ensaio microbiológico por método turbidimétrico utilizou o micro-organismo Staphylococcus aureus ATCC 26923, com faixa linear de 6 a 11,46 μg/mL e apresentou potência de 100,07% e exatidão foi 99,92%. A validação do método por CLAE foi realizada empregando fase móvel composta por água purificada e acetonitrila (60:40 v/v), com pH 8 ajustado com trietilamina (TEA), no comprimento de onda... / The antimicrobials have a crucial role in the control of infectious diseases. Cephalosporins remain one class of antimicrobials that stand out for their therapeutic importance, high frequency of use, safety and effectiveness against a broad microbial spectrum. Cefazolin sodium (CFZ) is a β-lactam antimicrobial agent, classified as first-generation cephalosporin, often used as a therapeutic agent and for perioperative prophylaxis. In this work, new analytical methods were developed for qualitative and quantitative analysis of cefazolin sodium in lyophilized powder, seeking obtain method faster, safer for operators, more economical and easiness of implementation, which are essential for the analysis of this cephalosporin in pharmaceutical industry. For qualitative analysis, several methods were performed, including analyzes of solubility, melting point and pH; ultraviolet (UV) and infrared (IR) spectrophotometry; thin layer chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC) allowing the identification of samples. For quantification of the drug, three analytical methods were validated. The spectrophotometric method in the ultraviolet region was validated at 270 nm, with a linear range of concentration from 8 to 28 mg/mL, using purified water as solvent, the content of 99.10% accuracy of 100.56%. In the microbiological assay by turbidimetric method, Staphylococcus aureus ATCC 26923 was used as microrganism test, with linear range from 6 to 11.46 mg/mL, the method presented potency of 100.07% and accuracy of 99,92%. Validation of the HPLC method consisted of mobile phase composed of purified water and acetonitrile (60:40 v/v), adjusted to pH 8 with triethylamine (TEA), and detection wavelength of 270 nm, yielding a retention time of 3.6 minutes in the linear range evaluated from 30 to 80 μg/mL, content... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:49Z : No. of bitstreams: 1 000840326_20160424.pdf: 113924 bytes, checksum: 3a1cad039c8f76f08b11170e5da617e3 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-04-25T15:55:53Z: 000840326_20160424.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-25T15:56:50Z : No. of bitstreams: 1 000840326.pdf: 1991836 bytes, checksum: 2bc4d69a08c0e41971f42ad21c0a2dcc (MD5) / A cefalotina (CET) é um antimicrobiano β-lactâmico semi-sintético, bactericida e representa o protótipo das cefalosporinas, pertencente à classe da primeira geração. As cefalosporinas apresentam um espectro de atividade mais amplo do que as penicilinas e são amplamente prescritas. Poucos métodos analíticos são descritos na literatura para a análise de CET, e ao nosso conhecimento, nenhum método rápido e indicativo de estabilidade por cromatografia líquida para este composto foi publicado anteriormente. Foi desenvolvido um método indicativo de estabilidade por cromatografia líquida em fase reversa para determinação quantitativa de CET, na presença de impurezas e produtos de degradação gerados a partir dos estudos de degradação forçada em amostras de pó liofilizado para injeção. O método desenvolvido é também aplicável para a determinação de substâncias relacionadas em matéria-prima e em formas farmacêuticas. A separação cromatográfica foi obtida com a coluna Agilent Eclipse XDB-Phenyl, de 250 mm x 4,6 mm, 5 μm, em fase móvel composta por uma mistura das soluções A (tampão fosfato de amônio, pH 4,5) e B (acetonitrila), no modo de eluição gradiente. A vazão utilizada foi de 1,0 mL/min e o comprimento de onda 238 nm. O fármaco foi submetido a condições de estresse por hidrólise, oxidação, fotólise, umidade e degradação térmica. Obteve-se degradação considerável nas condições de hidrólise alcalina, ácida e estresse oxidativo. No método desenvolvido por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), a resolução entre CET e os seus potenciais produtos de degradação foi maior que 2,4; além disso, a pureza de pico de CET em todas as condições foi maior que 99%, demonstrando o poder indicativo de estabilidade do método. A impureza B (desacetilcefalotina) que é um metabólito menos ativo da CET foi identificada e apresentou formação significativa, especialmente na condição... / Cephalothin (CET) is a semi-synthetic β-lactam antimicrobial compound, bactericidal, and it represents the prototype of cephalosporins, which belongs to the first-generation class. Cephalosporins present a larger spectrum of activity than penicillins and they are widely prescribed. Few analytical methods are described in the literature for the analysis of CET and to our knowledge rapid stability-indicating liquid chromatography (LC) methods for this compound have not been published elsewhere. A stability-indicating gradient reversed phase liquid chromatography (RP-LC) method has been developed for the quantitative determination of CET, in the presence of its impurities and degradation products generated from forced degradation studies, in samples of lyophilized powder for injection. The developed method is also applicable for the related substances determination in bulk drugs and pharmaceutical forms. The chromatographic separation was achieved on an Agilent Eclipse XDB-Phenyl, 250 mm x 4.6 mm, 5 μm column with mobile phase containing a gradient mixture of solutions A (aqueous ammonium phosphate buffer, pH 4.5) and B (acetonitrile) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was 238 nm. The drug substance was subjected to stress conditions of hydrolysis, oxidation, photolysis, humidity and thermal degradation. Considerable degradation was found to occur in base, acid and oxidative stress conditions. In the developed high performance liquid chromatography (HPLC) method, the resolution between CET and its potential degradation products was found to be greater than 2.4, further, the peak purity of CET in all conditions were more than 99% proving the stability-indicating power of method. The less active metabolite of CET, desacetylcephalothin (impurity B), was identified and is showed significant formation especially in alkaline condition. This method is able to detect the degradation products of CET at a ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-04Bitstream added on 2014-11-10T11:58:48Z : No. of bitstreams: 1 000777302_20150930.pdf: 1498999 bytes, checksum: 8443b57c3d8c6bc673c540fd2e6cad01 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-30T10:42:09Z: 000777302_20150930.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-30T10:42:57Z : No. of bitstreams: 1 000777302.pdf: 2953419 bytes, checksum: 80ddcb8c8d04fd2cac9f2d44be7c50b1 (MD5) / Streptomyces clavuligerus produces various beta-lactam compounds, especially the cephamycin C. Some authors suggest that the nature and concentration of carbon and nitrogen added to the culture medium may favor the production of larger quantities of the antibiotic. Lysine plays an important role in Streptomyces clavuligerus, acting on its catabolism, via cadaverine, and secondary metabolism, in which it is converted via 1-piperideine-6-carboxylate to alpha-aminoadipic acid, a beta-lactam antibiotic precursor. The role of lysine as a cephamycin C inducer, when added to production medium at concentrations above 50 mM, has been widely explored in the literature. Moreover there are some reports on the positive influence of multifunctional diamines and antibiotic precursor compounds such as alpha-ketoglutarate. However, there is not studies on the combined influence of these inducers on beta-lactam antibiotic production. Thus, this Thesis explores such influences to devise a culture medium economically viable and which promotes the production of cafamicina C. For this, we evaluated the effect of culture medium (synthetic, semi-synthetic or complex), carbon source (starch or maltose) and different modes of operation (batch or continuous culture). Was adopted the Response Surface Methodology to investigate the interaction of lysine with putrescine or 1,3-diaminopropane and its influence on cephamycin C biosynthesis of Streptomyces clavuligerus. The addition of lysine (100 mM) in basal medium (without additives) led to an cephamycin C production of 120 mg/L, an increase of 445% in the production of this antibiotic. However, there was a residual of 30 mM at the end of cultivation, becoming the process uneconomical. The addition of putrescine (0.2 g/L) and lysine (40 mM) in the culture medium with maltose as a carbon source, showed a production around 150 mg/L in the intermittent cultivation mode. However, in this mode of operation, the increased ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:17:46Z : No. of bitstreams: 1 totoli_eg_me_arafcf_parcial.pdf: 62511 bytes, checksum: 9c5f12b88c0935c6e7424d1e5b783856 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-08-22T14:57:11Z: totoli_eg_me_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-08-22T15:02:11Z : No. of bitstreams: 1 000710567.pdf: 786299 bytes, checksum: 5dd43c9e450f8b71d2b96dcee90b7821 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A ampicilina sódica é um antimicrobiano β-lactâmico, semi-sintético, de uso parenteral, pertencente ao grupo das penicilinas. Trata-se da primeira penicilina semi-sintética a apresentar atividade contra bacilos Gram-negativos, abrindo o campo de penicilinas de amplo espectro. Existem vários trabalhos na literatura que descrevem métodos analíticos para análise da ampicilina em formas farmacêuticas. A maior parte deles envolve a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com fases móveis constituídas por soluções-tampão, as quais podem danificar as colunas cromatográficas, ou métodos que envolvem o gasto de grandes quantidades de solventes orgânicos. No entanto, a tendência é que as indústrias busquem minimizar e/ou eliminar o uso de solventes orgânicos de seus processos com o objetivo de reduzir os impactos de suas atividades sobre o meio ambiente. Desta forma, este trabalho teve como objetivo principal o desenvolvimento de novos métodos analíticos para análise de ampicilina sódica na forma farmacêutica de pó liofilizado para solução injetável, que apresentem menor impacto sobre o meio ambiente e que sejam mais práticos, mais seguros para os operadores e mais econômicos que as metodologias analíticas já descritas para a ampicilina. A ampicilina sódica foi analisada qualitativamente quanto à umidade e solubilidade. Também foi realizada análise por espectrofotometria no infravermelho e desenvolvido método por cromatografia em camada delgada (CCD) indicativo de estabilidade. Quanto à análise quantitativa, foi validado método por CLAE com detecção ultravioleta (UV) a 210 nm, fase móvel composta por etanol e água (40:60, v/v) e faixa de concentração de 70,0 a 120,0 μg/mL, exatidão de 99,54%, teor de 96,83% e tempo de retenção médio de 3,1 minutos; ensaio microbiológico pelo método... / Ampicillin sodium is a semi-synthetic β-lactam antibiotic for parenteral use, belonging to the penicillin group. It was the first semi-synthetic penicillin to show any action against Gram-negative bacilli, opening a field of broad spectrum penicillins. There are several published studies in literature that describe analytical methods for ampicillin in pharmaceutical dosage forms. Most of them are related to high performance liquid chromatography (HPLC) using mobile phases constituted by buffer solutions, which may damage the chromatographic columns over time, or methods that involve, mostly, the use of large amounts of organic solvents. However, the tendency is that industries seek to minimize or eliminate the use of organic solvents in their processes in order to reduce the impacts of their activities on the environment. In this way, this study aimed to develop new analytical methods for the analysis of ampicillin sodium in lyophilized powder for injectable solution, which have the lowest impact on the environment as possible and that be more convenient, safer for operators and more economical than the analytical methodologies already described for ampicillin. Ampicillin sodium was analyzed qualitatively as the moisture content and solubility characteristics. Furthermore, it was performed an analysis by infrared spectroscopy and was developed a stability indicative method by thin layer chromatography (TLC). Regarding the quantitative analysis, it was validated HPLC methodology with UV detection at 210 nm, mobile phase composed by ethanol and water (40:60 v /v), the concentration range from 70.0 to 120.0 μg/mL, accuracy of 99.54%, content of 96.83% and average retention time of 3.1 minutes; microbiological assay by turbidimetric method, in the concentration range from 2.0 to 8.0 μg/mL, using Staphylococcus aureus ATCC 26923, with accuracy... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Helder Ferreira Teixeira / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: A ampicilina sódica é um antimicrobiano β-lactâmico, semi-sintético, de uso parenteral, pertencente ao grupo das penicilinas. Trata-se da primeira penicilina semi-sintética a apresentar atividade contra bacilos Gram-negativos, abrindo o campo de penicilinas de amplo espectro. Existem vários trabalhos na literatura que descrevem métodos analíticos para análise da ampicilina em formas farmacêuticas. A maior parte deles envolve a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com fases móveis constituídas por soluções-tampão, as quais podem danificar as colunas cromatográficas, ou métodos que envolvem o gasto de grandes quantidades de solventes orgânicos. No entanto, a tendência é que as indústrias busquem minimizar e/ou eliminar o uso de solventes orgânicos de seus processos com o objetivo de reduzir os impactos de suas atividades sobre o meio ambiente. Desta forma, este trabalho teve como objetivo principal o desenvolvimento de novos métodos analíticos para análise de ampicilina sódica na forma farmacêutica de pó liofilizado para solução injetável, que apresentem menor impacto sobre o meio ambiente e que sejam mais práticos, mais seguros para os operadores e mais econômicos que as metodologias analíticas já descritas para a ampicilina. A ampicilina sódica foi analisada qualitativamente quanto à umidade e solubilidade. Também foi realizada análise por espectrofotometria no infravermelho e desenvolvido método por cromatografia em camada delgada (CCD) indicativo de estabilidade. Quanto à análise quantitativa, foi validado método por CLAE com detecção ultravioleta (UV) a 210 nm, fase móvel composta por etanol e água (40:60, v/v) e faixa de concentração de 70,0 a 120,0 μg/mL, exatidão de 99,54%, teor de 96,83% e tempo de retenção médio de 3,1 minutos; ensaio microbiológico pelo método... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Ampicillin sodium is a semi-synthetic β-lactam antibiotic for parenteral use, belonging to the penicillin group. It was the first semi-synthetic penicillin to show any action against Gram-negative bacilli, opening a field of broad spectrum penicillins. There are several published studies in literature that describe analytical methods for ampicillin in pharmaceutical dosage forms. Most of them are related to high performance liquid chromatography (HPLC) using mobile phases constituted by buffer solutions, which may damage the chromatographic columns over time, or methods that involve, mostly, the use of large amounts of organic solvents. However, the tendency is that industries seek to minimize or eliminate the use of organic solvents in their processes in order to reduce the impacts of their activities on the environment. In this way, this study aimed to develop new analytical methods for the analysis of ampicillin sodium in lyophilized powder for injectable solution, which have the lowest impact on the environment as possible and that be more convenient, safer for operators and more economical than the analytical methodologies already described for ampicillin. Ampicillin sodium was analyzed qualitatively as the moisture content and solubility characteristics. Furthermore, it was performed an analysis by infrared spectroscopy and was developed a stability indicative method by thin layer chromatography (TLC). Regarding the quantitative analysis, it was validated HPLC methodology with UV detection at 210 nm, mobile phase composed by ethanol and water (40:60 v /v), the concentration range from 70.0 to 120.0 μg/mL, accuracy of 99.54%, content of 96.83% and average retention time of 3.1 minutes; microbiological assay by turbidimetric method, in the concentration range from 2.0 to 8.0 μg/mL, using Staphylococcus aureus ATCC 26923, with accuracy... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Armando da Silva Cunha Junior / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: Os antimicrobianos têm um papel fundamental no controle de doenças infecciosas. As cefalosporinas se mantêm como uma classe de antimicrobianos que se sobressaem pela sua importância terapêutica, elevada frequência de utilização, segurança e efetividade contra um amplo espectro microbiano. A cefazolina sódica (CFZ) é um agente antimicrobiano β-lactâmico, classificada como cefalosporina de primeira geração, muito utilizado como agente terapêutico e na profilaxia perioperatória. Neste trabalho foram desenvolvidos novos métodos analíticos para análise qualitativa e para a quantificação de cefazolina sódica, visando a obtenção de métodos mais rápidos, mais seguros para os operadores, mais econômicos e de fácil execução, que são essenciais para a análise desta cefalosporina na indústria farmacêutica. Na análise qualitativa, a cefazolina foi estudada quanto a sua solubilidade, ponto de fusão, pH, espectrofotometria na região do ultravioleta (UV) e na região de infravermelho (IV), cromatografia em camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), possibilitando a identificação da amostra. Para quantificação do fármaco três métodos foram validados. O método espectrofotométrico na região do ultravioleta foi validado utilizando o comprimento de onda de 270 nm, com faixa linear de concentração de 8 a 28 μg/mL utilizando água purificada como solvente, o teor foi de 99,10% e a exatidão foi de 100,56%. Ensaio microbiológico por método turbidimétrico utilizou o micro-organismo Staphylococcus aureus ATCC 26923, com faixa linear de 6 a 11,46 μg/mL e apresentou potência de 100,07% e exatidão foi 99,92%. A validação do método por CLAE foi realizada empregando fase móvel composta por água purificada e acetonitrila (60:40 v/v), com pH 8 ajustado com trietilamina (TEA), no comprimento de onda... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The antimicrobials have a crucial role in the control of infectious diseases. Cephalosporins remain one class of antimicrobials that stand out for their therapeutic importance, high frequency of use, safety and effectiveness against a broad microbial spectrum. Cefazolin sodium (CFZ) is a β-lactam antimicrobial agent, classified as first-generation cephalosporin, often used as a therapeutic agent and for perioperative prophylaxis. In this work, new analytical methods were developed for qualitative and quantitative analysis of cefazolin sodium in lyophilized powder, seeking obtain method faster, safer for operators, more economical and easiness of implementation, which are essential for the analysis of this cephalosporin in pharmaceutical industry. For qualitative analysis, several methods were performed, including analyzes of solubility, melting point and pH; ultraviolet (UV) and infrared (IR) spectrophotometry; thin layer chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC) allowing the identification of samples. For quantification of the drug, three analytical methods were validated. The spectrophotometric method in the ultraviolet region was validated at 270 nm, with a linear range of concentration from 8 to 28 mg/mL, using purified water as solvent, the content of 99.10% accuracy of 100.56%. In the microbiological assay by turbidimetric method, Staphylococcus aureus ATCC 26923 was used as microrganism test, with linear range from 6 to 11.46 mg/mL, the method presented potency of 100.07% and accuracy of 99,92%. Validation of the HPLC method consisted of mobile phase composed of purified water and acetonitrile (60:40 v/v), adjusted to pH 8 with triethylamine (TEA), and detection wavelength of 270 nm, yielding a retention time of 3.6 minutes in the linear range evaluated from 30 to 80 μg/mL, content... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Maria Lucia Gonsales da Costa Araujo / Banca: Saulo Santesso Garrido / Banca: Wilson Rogério Lustri / Banca: Ana Paula Ulian de Araújo / Banca: Cristina Paiva de Sousa / Resumo:Streptomyces clavuligerus produz vários compostos -lactâmicos, com destaque para a cefamicina C. Vários autores sugerem que a natureza e a concentração das fontes de carbono e nitrogênio, adicionadas ao meio de cultura, podem favorecer a produção de maiores quantidades deste antibiótico. A lisina exerce um papel importante, atuando no catabolismo, via cadaverina, e no metabolismo secundário, através do qual é convertida, via 1-piperideina-6-carboxilato, em ácido alfa-aminoadípico, precursor de todos os antibióticos β-lactâmicos. O aumento da produção de cefamicina C em meios contendo concentrações de lisina acima de 50 mM tem sido bem explorado na literatura. Há também alguns relatos sobre a influência positiva da adição das multifuncionais diaminas e de compostos precursores do antibiótico como o alfa-cetoglutarato. Não há, porém, estudos acerca da influência conjunta destes compostos na produção de antibióticos. Dessa forma, esta Tese buscou explorar tal influência visando elaborar um meio de cultivo economicamente viável e favorável à produção de cefamicina C. Para isto, avaliaram-se os efeitos do meio de cultura (sintético, semi-sintético ou complexo) e da natureza da fonte de carbono (amido ou maltose), bem como do modo de operação do cultivo (batelada ou cultivo contínuo). A influência da interação de lisina com putrescina ou 1,3 diaminopropano no metabolismo secundário de Streptomyces clavuligerus foi investigada por meio da Metodologia de Superfície de Resposta. A adição de 100 mM de lisina ao meio base (sem aditivos) propiciou uma produção de 120 mg/L do antibiótico, cerca de 445% maior que a obtida em meio base. Entretanto, houve um residual de cerca de 30 mM ao final do cultivo, inviabilizando economicamente o processo. A adição de putrescina (0,2 g/L) e lisina (40 mM) ao meio base, tendo a maltose como fonte de carbono, mostrou uma produção de cerca de 150 mg/L em cultivos... / Abstract:Streptomyces clavuligerus produces various beta-lactam compounds, especially the cephamycin C. Some authors suggest that the nature and concentration of carbon and nitrogen added to the culture medium may favor the production of larger quantities of the antibiotic. Lysine plays an important role in Streptomyces clavuligerus, acting on its catabolism, via cadaverine, and secondary metabolism, in which it is converted via 1-piperideine-6-carboxylate to alpha-aminoadipic acid, a beta-lactam antibiotic precursor. The role of lysine as a cephamycin C inducer, when added to production medium at concentrations above 50 mM, has been widely explored in the literature. Moreover there are some reports on the positive influence of multifunctional diamines and antibiotic precursor compounds such as alpha-ketoglutarate. However, there is not studies on the combined influence of these inducers on beta-lactam antibiotic production. Thus, this Thesis explores such influences to devise a culture medium economically viable and which promotes the production of cafamicina C. For this, we evaluated the effect of culture medium (synthetic, semi-synthetic or complex), carbon source (starch or maltose) and different modes of operation (batch or continuous culture). Was adopted the Response Surface Methodology to investigate the interaction of lysine with putrescine or 1,3-diaminopropane and its influence on cephamycin C biosynthesis of Streptomyces clavuligerus. The addition of lysine (100 mM) in basal medium (without additives) led to an cephamycin C production of 120 mg/L, an increase of 445% in the production of this antibiotic. However, there was a residual of 30 mM at the end of cultivation, becoming the process uneconomical. The addition of putrescine (0.2 g/L) and lysine (40 mM) in the culture medium with maltose as a carbon source, showed a production around 150 mg/L in the intermittent cultivation mode. However, in this mode of operation, the increased ... / Doutor