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Efeito da composição da dieta sobre o metabolismo do lactato no músculo do caranguejo Chasmagnatus granulatus submetido a hipóxia e a recuperação da hipóxia

Maciel, Jose Eduardo Salazar January 2007 (has links)
O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito de diferentes tempos de hipóxia ambiental e da recuperação da hipóxia sobre as atividades gliconeogênica e neoglicogeniogênica, assim como, a atividade e a expressão da fosfoenolpiruvato carboxiquinase no músculo do C. granulatus alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos. Também, determinar sob as mesmas condições experimentais, outras vias do metabolismo do lactato em C. granulatus. Para este estudo foram utilizados caranguejos C. granulatus, alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos, submetidos a hipóxia ambiental (4,5% de O2) durante 8 horas e períodos de recuperação após a hipóxia, em normóxia, de 3 e 24 horas. Foram utilizados 16 animais por dieta experimental, subdivididos em 4 animais por período experimental (normóxia, hipóxia, 3 horas de recuperação e 24 horas de recuperação). No presente trabalho, aumentos na incorporação de 14C-lactato em glicose e na atividade da enzima PEPCK no músculo mandibular foram constatados às 8 horas de hipóxia. Os valores de lactato e de glicose circulantes estão elevados, porém a concentração de glicogênio muscular diminuiu marcadamente. em ambos os grupos experimentais (HP e HC). Nos animais alimentados com a dieta HC a expressão da PEPCK aumentou significativamente. Nos caranguejos que receberam a dieta HP, não foi necessário o aumento da expressão de PEPCK, somente sua atividade, em resposta a hipóxia ambiental de 8 horas. em C. granulatus o lactato desapareceu lentamente da hemolinfa durante o período de recuperação pós-hipóxia. Contudo, nos animais que receberam a dieta HP a restauração dos níveis de lactato hemolinfático ocorreu mais rapidamente que naqueles mantidos com a dieta HC. O retorno à normóxia diminui marcadamente a incorporação do 14C-lactato em glicose nos caranguejos mantidos com a dieta HC, quando comparada aos valores obtidos em hipóxia. Esta diminuição foi acompanhada pela redução na expressão e na atividade da PEPCK. No grupo HP a atividade gliconeogênica, a atividade e expressão da PEPCK mantiveram-se elevadas no período de recuperação da hipóxia. A incorporação do 14C-lactato em glicogênio aumentou, em ambas dietas, após 24 horas de recuperação da hipóxia. Os resultados do presente trabalho sugerem que a gliconeogênese e a neoglicogeniogênese, no músculo mandibular, são importantes mecanismos na metabolização do lactato gerado no período de hipóxia e que e a expressão da PEPCK na isoforma mitocondrial é controlada pelo teor de oxigênio no meio e pela composição da dieta administrada aos caranguejos, sendo este um mecanismo adaptativo do C. granulatus em situações de anoxia e hipóxia ambiental.
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Efeito da composição da dieta sobre o metabolismo do lactato no músculo do caranguejo Chasmagnatus granulatus submetido a hipóxia e a recuperação da hipóxia

Maciel, Jose Eduardo Salazar January 2007 (has links)
O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito de diferentes tempos de hipóxia ambiental e da recuperação da hipóxia sobre as atividades gliconeogênica e neoglicogeniogênica, assim como, a atividade e a expressão da fosfoenolpiruvato carboxiquinase no músculo do C. granulatus alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos. Também, determinar sob as mesmas condições experimentais, outras vias do metabolismo do lactato em C. granulatus. Para este estudo foram utilizados caranguejos C. granulatus, alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos, submetidos a hipóxia ambiental (4,5% de O2) durante 8 horas e períodos de recuperação após a hipóxia, em normóxia, de 3 e 24 horas. Foram utilizados 16 animais por dieta experimental, subdivididos em 4 animais por período experimental (normóxia, hipóxia, 3 horas de recuperação e 24 horas de recuperação). No presente trabalho, aumentos na incorporação de 14C-lactato em glicose e na atividade da enzima PEPCK no músculo mandibular foram constatados às 8 horas de hipóxia. Os valores de lactato e de glicose circulantes estão elevados, porém a concentração de glicogênio muscular diminuiu marcadamente. em ambos os grupos experimentais (HP e HC). Nos animais alimentados com a dieta HC a expressão da PEPCK aumentou significativamente. Nos caranguejos que receberam a dieta HP, não foi necessário o aumento da expressão de PEPCK, somente sua atividade, em resposta a hipóxia ambiental de 8 horas. em C. granulatus o lactato desapareceu lentamente da hemolinfa durante o período de recuperação pós-hipóxia. Contudo, nos animais que receberam a dieta HP a restauração dos níveis de lactato hemolinfático ocorreu mais rapidamente que naqueles mantidos com a dieta HC. O retorno à normóxia diminui marcadamente a incorporação do 14C-lactato em glicose nos caranguejos mantidos com a dieta HC, quando comparada aos valores obtidos em hipóxia. Esta diminuição foi acompanhada pela redução na expressão e na atividade da PEPCK. No grupo HP a atividade gliconeogênica, a atividade e expressão da PEPCK mantiveram-se elevadas no período de recuperação da hipóxia. A incorporação do 14C-lactato em glicogênio aumentou, em ambas dietas, após 24 horas de recuperação da hipóxia. Os resultados do presente trabalho sugerem que a gliconeogênese e a neoglicogeniogênese, no músculo mandibular, são importantes mecanismos na metabolização do lactato gerado no período de hipóxia e que e a expressão da PEPCK na isoforma mitocondrial é controlada pelo teor de oxigênio no meio e pela composição da dieta administrada aos caranguejos, sendo este um mecanismo adaptativo do C. granulatus em situações de anoxia e hipóxia ambiental.
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Aspectos fisiológicos da produção de força em remadores

Baptista, Rafael Reimann January 2005 (has links)
Atualmente a ciência do esporte requer abordagens que combinem o estudo de aspectos biomecânicos e fisiológicos para o correto entendimento dos fenômenos relacionados ao desempenho humano. Desta forma, o objetivo geral deste estudo foi analisar as relações e as diferenças entre os formatos de curva de força x tempo e as respostas fisiológicas e biomecânicas de remadores. Quinze remadores (24,47±5,21 anos, 83,51±7,19 kg, 185,50±6,53 cm e 13,68±1,65 % de gordura), foram submetidos a um teste cardiopulmonar de exercício em remoergômetro. Foram medidas as respostas de VO2, VCO2, VE, RER, MET, lactato, FC, força, potência e impulso, tanto no estágio de limiar de lactato quanto no estágio máximo alcançado pelos remadores. O Tratamento estatístico foi composto por Teste t-Student para amostras independentes, Correlação Linear de Pearson, Teste Qui-Quadrado de McNemar e ANOVA one-way. O nível de significância adotado foi de 5%. Os remadores foram classificados em dois grupos: stroke (pico de força na primeira metade da curva de força x tempo) e bow (pico de força na segunda metade da curva de força x tempo). No estágio de limiar de lactato foram identificados três remadores com perfil stroke e 12 com perfil bow, não havendo diferenças significativas nos parâmetros fisiológicos e biomecânicos entre os dois grupos, bem como não havendo correlações significativas entre o formato de curva de força e as respostas fisiológicas e biomecânicas. No estágio máximo alcançado pelos remadores foi possível classificar oito remadores como stroke e sete bow, sendo que estes últimos apresentaram menores valores de lactato, embora sem significância estatística (p=0,067), e maiores níveis de produções de potência (p=0,037) Foram encontradas correlações regulares negativas entre o lactato sangüíneo e: a) o tempo para o pico de força(r= -0,556 e p=0,031); b) o tempo de curva (r= -0,593 e p=0,020); c) a metade da curva de força (r= -0,562 e p=0,029). Dos 12 remadores bow no limiar de lactato, 41,7% transitaram para um padrão stroke, enquanto que 58,3% mantiveram o perfil original no estágio máximo, os quais apresentaram maiores valores de VE, potência e tempo para o pico de força máxima e maiores valores VCO2 no limiar de lactato. O panorama criado por este conjunto de resultados permite sugerir que treinadores e atletas, interessados em prolongar o tempo de exercício, devem buscar um perfil de pico de força bow.
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Expressão dos transportadores de monocarboxilatos de equinos e cães / Expression of monocarboxylate transporters in equines and dogs

Feringer Júnior, Walter Heinz [UNESP] 13 November 2017 (has links)
Submitted by WALTER HEINZ FERINGER JUNIOR null (walterferinger@gmail.com) on 2018-03-22T22:47:37Z No. of bitstreams: 1 TESE_WALTER_HEINZ_FERINGER_JUNIOR.pdf: 2433033 bytes, checksum: 618fd780a0ad05e04e544c2769f96c3d (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-03-23T10:43:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 feringerjunior_wh_dr_jabo.pdf: 2433033 bytes, checksum: 618fd780a0ad05e04e544c2769f96c3d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-23T10:43:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 feringerjunior_wh_dr_jabo.pdf: 2433033 bytes, checksum: 618fd780a0ad05e04e544c2769f96c3d (MD5) Previous issue date: 2017-11-13 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O principal mecanismo de transporte dos íons lactato e H+ em equinos e cães é o complexo transportador formado pelos transportadores de monocarboxilatos, isoformas 1 (MCT1) e 4 (MCT4) juntamente com a proteína auxiliar CD147. Objetivando identificar diferenças entre equinos com desempenho distinto, 16 equinos da raça Brasileiro de Hipismo (BH) foram distribuídos em dois grupos, desempenho inferior (DI, n=8) e desempenho superior (DS, n=8) que foram submetidos a teste de salto incrementai (TSI). Realizou-se biópsia do músculo Gluteus medius para tipificação e análise das expressões das isoformas MCT1, MCT4 e CD147. Amostras sanguíneas foram colhidas para avaliar as expressões MCT1 e CD147 das hemácias. Aplicaram-se testes de normalidade de Shapiro Wilk e homogeneidade de Levene. As medidas morfométricas foram submetidas ao teste de Tukey. Teste “t” de Student não pareado para a comparação das médias dos grupos DI e DS. Aplicou-se correlação de Spearman para as expressões dos transportadores. Para todas as análises utilizou-se p≤0,05. Não houve diferença entre os grupos quanto à frequência de cada tipo de fibra e constatou-se maior quantidade das fibras tipo I em relação às fibras IIA e IIX em todos os equinos avaliados. Não houve diferença entre os pesos moleculares e a expressão das proteínas MCT1, MCT4, e CD147 musculares ou sanguíneas. Houve correlações positivas entre MCT1 vs. CD147 e MCT4 vs. CD147 musculares dos grupos DI e DS. As correlações encontradas foram esperadas uma vez que as isoformas estudadas dependem intimamente da proteína auxiliar CD147 para o transporte. Os equinos BH não apresentaram diferenças nas expressões dos MCT1,4 e CD147, musculares ou sanguíneos, mesmo com níveis de condicionamento diferentes. Com o objetivo de investigar as concentrações de lactato plasmático e das hemácias e avaliar as expressões eritrocitáras do complexo transportador MT1/CD147, 6 cães da raça American Pitbull Terrier (APBT) foram submetidos ao teste de esforço incremental (TEI) em esteira. No final de cada incremento de velocidade foi coletado sangue da veia cefálica. Foram mensuradas concentrações de lactato sanguíneo (LS), plasmático (LP), pH e hematócrito (Ht). A concentração do lactato dentro das hemácias (LH) foi estimada e estabeleceu-se a relação LH:LP. As expressões sanguíneas do complexo MCT1/CD147 foram avaliadas por Western Bloting. Aplicou-se análise de variância de uma via seguido pelo teste de Dunn’s. Para pH e Ht aplicou-se teste t de student para amostras pareadas e a correlação de Pearson foi utilizada para MCT1 e CD147, estabeleceu-se nível de significância P≤0,05. LS, LP e LH e pH não apresentaram diferenças entre si, a relação LH:LP foi próxima de 1 com tendência de aumento. MCT1 e CD147 apresentaram 48 e 59 kDa de peso molecular e 1,27 e 1,05 de unidades ópticas arbitrárias (UOA). Não foram encontradas correlações entre MCT1 e CD147. A grande velocidade de transporte do MCT1/CD147 explica a relação LP:LH próxima de 1, esta velocidade e o mecanismo de arquejo podem explicar os valores de pH constantes. A raça APBT, quando submetidos à atividade física apresentaram tendência de aumento da relação LH:LP e expressam de maneira homogênea o complexo MCT1/CD147. / The central transport mechanism of lactate and H+ ions in horses and dogs is the carrier complex formed by the monocarboxylate, isoform 1 (MCT1) and 4 (MCT4) associated with the ancillary protein CD147. This study aimed to identify possible differences between horses with different performances levels, 16 horses of the Brazilian Sport Horse breed (BH) were distributed in two groups, inferior performance (IP, n = 8) and superior performance (SP, n = 8). A Gluteus medius muscle biopsy was performed for cellular typing and analysis of MCT1, MCT4, and CD147 muscle expressions. By jugular venipuncture, blood samples were collected to evaluate MCT1 and CD147 expressions in the red blood cells (RBC). Normality Shapiro Wilk test and homogeneity of Levene were applied. The morphometric measurements were submitted to the Tukey test, and not paired Student's t-test were applied to compare the mean of the IP and SP groups for all variables and was used Spearman's correlation for isoform expressions, for all analyzes, p≤0.05. There were no differences between the groups regarding the frequency of each type of fiber and a higher number of type I fibers were observed about the IIA and IIX fibers in all groups. There was no difference between molecular weights and expressions of MCT1, MCT4, and CD147 in muscle or blood. There were positive correlations between muscles MCT1 vs CD147 and MCT4 vs CD147 in both groups. The relationships found were expected since the MCT1 and 4 depended on the CD147 ancillary protein for correct functioning. The BH horses do not present differences in the muscle or RBC expressions of MCT1, 4 and CD147, even with different conditioning levels. To investigate plasma and erythrocyte lactate concentrations and to evaluate erythrocyte expression of the MT1/CD147 transporter complex, six dogs of the American Pit Bull Terrier breed (APBT) were submitted to a treadmill incremental effort test (IET). At the end of each increment of speed, blood was collected from the cephalic vein. Concentrations of blood (BL) and plasma lactate (PL), pH and hematocrit (Ht) were measured. The concentration of lactate inside the red blood cells (LC) was estimated and the LC: PL ratio was established, the blood expressions of the MCT1/CD147 transporter complex were evaluated by western blot. Data were submitted to the Shapiro-Wilks normality test, one-way ANOVA and Dunn's test. For pH and Ht, paired Student's t-test was applied, and Pearson's correlation was used for MCT1 and CD147 analysis, for all analyzes, p≤0.05. BL, PL, LC, pH showed no differences, the LC: PL ratio was close to 1 with an increasing tendency. MCT1 and CD147 presented 48 and 59 kDa of molecular weight and 1.27 and 1.05 of arbitrary optical units (AOU). No correlations were found between MCT1 and CD147. The high transport velocity of the MCT1/CD147 could explain the LC: PL ratio close to 1, this velocity plus the grasping mechanism may explain the constant of pH values. The APBT submitted to intense physical activity showed a tendency to increase the LC: PL ratio, and homogeneously express the MCT1/CD147 complex / FAPESP: 11/11080-0
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Efeitos do uso de palmares e nadadeiras sobre a organização espaço-temporal e concentração de lactato do nado crawl

Matos, Cristiano Cardoso de January 2012 (has links)
O objetivo geral deste estudo foi comparar variáveis espaço-temporais e fisiológicas durante o nado crawl com o uso de palmares e nadadeiras. Participaram 11 voluntários do sexo masculino (25,8 ± 5,5 anos de idade, 75,2 ± 5,5 kg de massa corporal e 177 ± 6,5 cm de estatura), nadadores de nível nacional e regional que realizaram dois protocolos distintos de avaliação: nado de 50 m em máxima intensidade e 12 repetições de 50 m em intensidade submáxima (nado intervalado). Ambos os protocolos foram realizados três vezes: nado sem equipamentos (SE), com palmares (CP) e com nadadeiras (CN). Foram coletados dados de desempenho, comprimento médio de braçadas (CB), frequência média de braçadas (FB), velocidade média de nado (VN), duração das fases da braçada (A, B, C, D), índice de coordenação de nado (IdC), frequência média de pernadas (FP), profundidade média de pernada (PP), concentração de lactato [LA] e percepção subjetiva de esforço (PSE). Utilizaram-se filmadoras para obtenção de imagens (60 Hz) subaquáticas dos nados no plano sagital, posteriormente analisadas, e um pacer subaquático luminoso foi utilizado para controle da VN nas séries de nado intervalado nas condições CP e CN e lactímetro portátil foi utilizado para obter as medidas de [LA]. De modo geral, em máxima intensidade palmares alteram [LA] e nadadeiras afetam FB, VN, e [LA]. Em série de nado intervalado, palmares alteram PSE e nadadeiras afetam CB, duração das fases A e C, FP, [LA] e PSE. As áreas de palmares e nadadeiras, relativas às mãos e pés, parecem ser decisivas para os resultados encontrados. / The Main objective of this study was to compare spatio-temporal and physiological variables in the front crawl stroke with paddles and fins. Eleven male volunteers (25.8 ± 5.5 years old, 75.2 ± 5.5 kg of body mass and 177 ± 6.5 cm of height), regional and national level swimmers, performed two different protocols: 50 m all-out and 12 trials of 50 m in sub-maximal intensity (interval training). Both protocols were performed three times: non equipment swimming (NS), paddles swimming (PS) and fins swimming (FS). Performance, means stroke length (SL), stroke frequency (SF), swimming velocity (SV), duration of the phases of the strokes (A, B, C, D), index of coordination (IdC), kick rate (KR) and deep (KD), lactate concentration [LA] and perceived exertion (PE) were obtained. Underwater images (60 Hz) in the sagital plane of the swimming were obtained with camcorders, after these images were analyzed, and an underwater pacer was used to control SV in the interval training for the PS and FS conditions and a portable lactimeter was used to obtain [LA]. In general way, in maximal intensity, paddles change [LA] and fins change SR, SV and [LA]. In interval training, paddles affect PE and fins change SL, duration of phases A and C, KR, [LA] and PE. Paddles and fins areas, relatives to hands and foots, seem to be very decisive in the found results.
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Aspectos fisiológicos da produção de força em remadores

Baptista, Rafael Reimann January 2005 (has links)
Atualmente a ciência do esporte requer abordagens que combinem o estudo de aspectos biomecânicos e fisiológicos para o correto entendimento dos fenômenos relacionados ao desempenho humano. Desta forma, o objetivo geral deste estudo foi analisar as relações e as diferenças entre os formatos de curva de força x tempo e as respostas fisiológicas e biomecânicas de remadores. Quinze remadores (24,47±5,21 anos, 83,51±7,19 kg, 185,50±6,53 cm e 13,68±1,65 % de gordura), foram submetidos a um teste cardiopulmonar de exercício em remoergômetro. Foram medidas as respostas de VO2, VCO2, VE, RER, MET, lactato, FC, força, potência e impulso, tanto no estágio de limiar de lactato quanto no estágio máximo alcançado pelos remadores. O Tratamento estatístico foi composto por Teste t-Student para amostras independentes, Correlação Linear de Pearson, Teste Qui-Quadrado de McNemar e ANOVA one-way. O nível de significância adotado foi de 5%. Os remadores foram classificados em dois grupos: stroke (pico de força na primeira metade da curva de força x tempo) e bow (pico de força na segunda metade da curva de força x tempo). No estágio de limiar de lactato foram identificados três remadores com perfil stroke e 12 com perfil bow, não havendo diferenças significativas nos parâmetros fisiológicos e biomecânicos entre os dois grupos, bem como não havendo correlações significativas entre o formato de curva de força e as respostas fisiológicas e biomecânicas. No estágio máximo alcançado pelos remadores foi possível classificar oito remadores como stroke e sete bow, sendo que estes últimos apresentaram menores valores de lactato, embora sem significância estatística (p=0,067), e maiores níveis de produções de potência (p=0,037) Foram encontradas correlações regulares negativas entre o lactato sangüíneo e: a) o tempo para o pico de força(r= -0,556 e p=0,031); b) o tempo de curva (r= -0,593 e p=0,020); c) a metade da curva de força (r= -0,562 e p=0,029). Dos 12 remadores bow no limiar de lactato, 41,7% transitaram para um padrão stroke, enquanto que 58,3% mantiveram o perfil original no estágio máximo, os quais apresentaram maiores valores de VE, potência e tempo para o pico de força máxima e maiores valores VCO2 no limiar de lactato. O panorama criado por este conjunto de resultados permite sugerir que treinadores e atletas, interessados em prolongar o tempo de exercício, devem buscar um perfil de pico de força bow.
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Efeitos do uso de palmares e nadadeiras sobre a organização espaço-temporal e concentração de lactato do nado crawl

Matos, Cristiano Cardoso de January 2012 (has links)
O objetivo geral deste estudo foi comparar variáveis espaço-temporais e fisiológicas durante o nado crawl com o uso de palmares e nadadeiras. Participaram 11 voluntários do sexo masculino (25,8 ± 5,5 anos de idade, 75,2 ± 5,5 kg de massa corporal e 177 ± 6,5 cm de estatura), nadadores de nível nacional e regional que realizaram dois protocolos distintos de avaliação: nado de 50 m em máxima intensidade e 12 repetições de 50 m em intensidade submáxima (nado intervalado). Ambos os protocolos foram realizados três vezes: nado sem equipamentos (SE), com palmares (CP) e com nadadeiras (CN). Foram coletados dados de desempenho, comprimento médio de braçadas (CB), frequência média de braçadas (FB), velocidade média de nado (VN), duração das fases da braçada (A, B, C, D), índice de coordenação de nado (IdC), frequência média de pernadas (FP), profundidade média de pernada (PP), concentração de lactato [LA] e percepção subjetiva de esforço (PSE). Utilizaram-se filmadoras para obtenção de imagens (60 Hz) subaquáticas dos nados no plano sagital, posteriormente analisadas, e um pacer subaquático luminoso foi utilizado para controle da VN nas séries de nado intervalado nas condições CP e CN e lactímetro portátil foi utilizado para obter as medidas de [LA]. De modo geral, em máxima intensidade palmares alteram [LA] e nadadeiras afetam FB, VN, e [LA]. Em série de nado intervalado, palmares alteram PSE e nadadeiras afetam CB, duração das fases A e C, FP, [LA] e PSE. As áreas de palmares e nadadeiras, relativas às mãos e pés, parecem ser decisivas para os resultados encontrados. / The Main objective of this study was to compare spatio-temporal and physiological variables in the front crawl stroke with paddles and fins. Eleven male volunteers (25.8 ± 5.5 years old, 75.2 ± 5.5 kg of body mass and 177 ± 6.5 cm of height), regional and national level swimmers, performed two different protocols: 50 m all-out and 12 trials of 50 m in sub-maximal intensity (interval training). Both protocols were performed three times: non equipment swimming (NS), paddles swimming (PS) and fins swimming (FS). Performance, means stroke length (SL), stroke frequency (SF), swimming velocity (SV), duration of the phases of the strokes (A, B, C, D), index of coordination (IdC), kick rate (KR) and deep (KD), lactate concentration [LA] and perceived exertion (PE) were obtained. Underwater images (60 Hz) in the sagital plane of the swimming were obtained with camcorders, after these images were analyzed, and an underwater pacer was used to control SV in the interval training for the PS and FS conditions and a portable lactimeter was used to obtain [LA]. In general way, in maximal intensity, paddles change [LA] and fins change SR, SV and [LA]. In interval training, paddles affect PE and fins change SL, duration of phases A and C, KR, [LA] and PE. Paddles and fins areas, relatives to hands and foots, seem to be very decisive in the found results.
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Efeito da composição da dieta sobre o metabolismo do lactato no músculo do caranguejo Chasmagnatus granulatus submetido a hipóxia e a recuperação da hipóxia

Maciel, Jose Eduardo Salazar January 2007 (has links)
O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito de diferentes tempos de hipóxia ambiental e da recuperação da hipóxia sobre as atividades gliconeogênica e neoglicogeniogênica, assim como, a atividade e a expressão da fosfoenolpiruvato carboxiquinase no músculo do C. granulatus alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos. Também, determinar sob as mesmas condições experimentais, outras vias do metabolismo do lactato em C. granulatus. Para este estudo foram utilizados caranguejos C. granulatus, alimentados com dietas ricas em proteínas ou carboidratos, submetidos a hipóxia ambiental (4,5% de O2) durante 8 horas e períodos de recuperação após a hipóxia, em normóxia, de 3 e 24 horas. Foram utilizados 16 animais por dieta experimental, subdivididos em 4 animais por período experimental (normóxia, hipóxia, 3 horas de recuperação e 24 horas de recuperação). No presente trabalho, aumentos na incorporação de 14C-lactato em glicose e na atividade da enzima PEPCK no músculo mandibular foram constatados às 8 horas de hipóxia. Os valores de lactato e de glicose circulantes estão elevados, porém a concentração de glicogênio muscular diminuiu marcadamente. em ambos os grupos experimentais (HP e HC). Nos animais alimentados com a dieta HC a expressão da PEPCK aumentou significativamente. Nos caranguejos que receberam a dieta HP, não foi necessário o aumento da expressão de PEPCK, somente sua atividade, em resposta a hipóxia ambiental de 8 horas. em C. granulatus o lactato desapareceu lentamente da hemolinfa durante o período de recuperação pós-hipóxia. Contudo, nos animais que receberam a dieta HP a restauração dos níveis de lactato hemolinfático ocorreu mais rapidamente que naqueles mantidos com a dieta HC. O retorno à normóxia diminui marcadamente a incorporação do 14C-lactato em glicose nos caranguejos mantidos com a dieta HC, quando comparada aos valores obtidos em hipóxia. Esta diminuição foi acompanhada pela redução na expressão e na atividade da PEPCK. No grupo HP a atividade gliconeogênica, a atividade e expressão da PEPCK mantiveram-se elevadas no período de recuperação da hipóxia. A incorporação do 14C-lactato em glicogênio aumentou, em ambas dietas, após 24 horas de recuperação da hipóxia. Os resultados do presente trabalho sugerem que a gliconeogênese e a neoglicogeniogênese, no músculo mandibular, são importantes mecanismos na metabolização do lactato gerado no período de hipóxia e que e a expressão da PEPCK na isoforma mitocondrial é controlada pelo teor de oxigênio no meio e pela composição da dieta administrada aos caranguejos, sendo este um mecanismo adaptativo do C. granulatus em situações de anoxia e hipóxia ambiental.
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Desenvolvimento de um sensor para análise de lactato em amostras alimentares e biológicas / Fabrication of a biosensor for determination of lactate in food and blood samples

Lowinsohn, Denise 20 April 2007 (has links)
Neste trabalho são apresentados resultados relacionados a estudos sobre o comportamento eletroquímico do lactato e do peróxido de hidrogênio em diversos eletrodos em meio de diferentes pHs utilizando voltametria cíclica. Também foi investigado o comportamento eletroquímico do peróxido de hidrogênio em eletrodos modificados com filmes de hexacianoferratos utilizando eletrodos de platina e carbono vítreo. A vantagem do uso do CTAB na modificação da superfície de carbono vítreo com Azul da Prússia foi confirmada no que se refere à melhora da sensibilidade e da estabilidade das medidas. Numa etapa posterior desenvolveu-se um biossensor para a determinação de lactato pelo monitoramento de peróxido de hidrogênio produzido na reação catalisada de lactato com oxigênio na presença da enzima lactato oxidase. Nessa etapa, o trabalho consistiu em imobilizar a enzima lactato oxidase na superfície do eletrodo, previamente, modificado com Azul da Prússia, com o auxílio de Nafion®. Após a construção do biossensor e a otimização das condições de análise (pH, quantidade de enzima, volume da amostra e vazão) para obtenção de maior sinal analítico no desenvolvimento do método para a determinação de lactato por análise em fluxo, averiguou-se a repetibilidade das medidas (Clactato = 0,28 mmol L-1) obtendo-se um desvio padrão de 2,2% para 18 repetições. A freqüência analítica foi estimada em 160 injeções por hora com limite de detecção de 0,84 µmol L-1 e linearidade até 0,28 mmol L-1 de lactato. O biossensor foi aplicado na quantificação de lactato em amostras alimentares (cervejas alcoólicas e não alcoólicas) e biológicas (sangue liofilizado e recém coletado). Por fim, realizaram-se estudos envolvendo a variação da concentração de lactato sanguíneo em função da intensidade de atividade esportiva. Os resultados obtidos pelo método proposto foram comparados com aqueles oriundos do uso de método de referência. / Results on the investigation of the electrochemical behavior of lactate and hydrogen peroxide at various electrodic surfaces at different pHs using cyclic voltammetry are presented. Experiments were also carried out with platinum and glassy carbon electrodes modified with hexacyanoferrate films. The advantage of using CTAB in the electrodeposition step of Prussian Blue films onto glassy carbon surfaces was confirmed taking into account both the stability and sensitivity of measurements. The immobilization of lactate oxidase onto glassy carbon electrodes modified with a Prussian Blue layer using Nafion® was performed to fabricate a biosensor for lactate. The biosensor was used in the development of a FIA amperometric method for the determination of lactate. Under optimal operating conditions (pH = 6.9, E = -0.1 V), the linear response of the method was extended up to 0.28 mmol L-1 lactate with a limit of detection of 0.84 µmol L-1. The repeatability of the method for injections of a 0.28 mmol L-1 lactate solution was 2.2 % (n = 18). The analytical frequency was calculated as 160 injections h-1. The usefulness of the method was demonstrated by determining lactate in beer (alcoholic and nonalcoholic beers) and blood samples (lyophilized and freshly collected). Finally, the influence of physical exercise on the blood lactate level was studied. Results obtained by using the proposed amperometric detector compared well with the reference method.
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Padronização de teste incremental de esforço máximo a campo para cavalos que pratiquem \"Hipismo Clássico\" / Standard test for incremental maximum effort at the field for horses practice \"Classic Equestrian\"

Mirian, Mauricio 12 December 2008 (has links)
Tendo em vista o grande numero de cavalos praticantes de atividades físicas altamente competitivas, a necessidade de se acompanhar o treinamento e a observação dos efeitos do treinamento no rendimento atlético dos animais, foi proposta a padronização de um teste incremental de esforço máximo a campo para cavalos adaptado do UM-TrackTest proposto para humanos. Para tanto foram utilizados 10 animais da raça Brasileiro de Hipismo, alojados em uma única vila hípica e submetidos ao mesmo manejo nutricional e de treinamento. Foram avaliados parâmetros bioquímicos (CK, LDH, lactato circulante e glicemia circulante) e sanguíneos (numero total de hemácias, concentração de hemoglobina circulante e hematócrito) ao final de cada estágio de aceleração onde as velocidades foram mantidas através de um sinal sonoro e marcações na pista de teste eqüidistantes a 50 metros. A análise estatística dos resultados obtidos das amostras colhidas demonstrou correlação de todas as variáveis analisadas em relação à intensidade do exercício quando comparadas ao repouso exceto a analise de CK e LDH que não mostrou alterações significantes durante todo o teste ( p = 0,5205 e p = 0,7913 respectivamente). O lactato apresentou uma correlação positiva (p = 0,000) em relação a FC e esta uma correlação positiva (p = 0,000) com relação a intensidade. Numero de hemácias circulantes (p = 0,000), concentração de hemoglobina circulante (p = 0,002) e hematócrito (p = 0,000) também tiveram correlação positiva com à intensidade. Com relação à glicemia observou-se uma correlação negativa significante com a FC (p = 0,003 e r = -0,312). O teste proposto demonstrou ser uma ferramenta de fácil aplicação e de reprodução a campo, permitiu a observação e constatação do limiar de lactato e permitiu a observação e avaliação das interações e inter-relações dos sistemas orgânicos mais relevantes durante o exercício. / In a view of the larger number of horses that practice highly competitive physical activities, the need to monitor the training and observation of the effects of training in athletic performance of the animals, it was proposed to develop a standard test for incremental maximum effort at the field for horses adapted to UM-TrackTest proposed for humans. To achieve this purpose, 10 animals of the breed of Brazilian Equestrian, housed in a single town riding and submitted at the same nutritional management and the same training. Biochemical (CK, LDH, lactate and glucose circulating stock) and hematologic parameters (total number of red blood cells, concentration of hemoglobin and hematocrit) were evaluated at the end of each stage of acceleration where the speeds were maintained through a sound and markings in equidistant test track at 50 meters. Statistical analysis of the results of samples taken showed correlation of all variables in relation to the intensity of physical exercise when compared to resting status at the end of exercise, except for review of CK and LDH that showed no significant changes throughout the test (p = 0.5205 and p = 0.7913 respectively). The lactate showed a positive correlation (p = 0000) compared to HR and HR showed a positive correlation (p = 0000) with regard to intensity. Number of circulating red blood cells (p = 0000), circulating concentration of hemoglobin (p = 0002) and hematocrit (p = 0000) also had positive correlation with the intensity. With regard to glycemic there was a significant negative correlation with HR (p = 0003 and r = -0312). The proposed test proved to be a tool for easy application that can be applied on the field, allows the observation and finding the lactate threshold and allowed the observation and evaluation of the interactions and inter-relationships of organic systems more relevant during exercise.

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