A partir da hipófise de Astyanax altiparanae foram clonados e caracterizados os cDNAs completos para fshb, lhb e gpha. Das gônadas, foram clonados os cDNAs para fshr e lhr. As análises filogenéticas destes genes demonstram uma proximidade com as sequências homólogas das ordens Siluriformes e Cypriniformes. Por meio de qPCR, detectamos que a expressão dos mRNAs para as gonadotropinas foi restrita à hipófise, ao passo que dos receptores foi restrita às gônadas. Foi detectado que os mRNAs/proteínas para subunidades beta são expressas por diferentes populações de células gonadotrópicas. Nas gônadas, ambos receptores foram localizados nas células de Sertoli e Leydig, bem como nas células foliculares e da teca de oócitos a partir de crescimento secundário. Então, os níveis de expressão gênica das subunidades das gonadotropinas e seus receptores, juntamente como os níveis plasmáticos de esteroides sexuais foram avaliados e relacionados com a cinética da gametogênese durante o ciclo reprodutivo anual de machos e fêmeas em cativeiro. / From Astyanax altiparanae pituitaries, we cloned the full-leght cDNAs coding for fshb, lhb e gpha. From gonads, we cloned the full-length cDNAs for fshr and lhr. Phylogenetic analysis revealed that all five sequences showed the highest identity degree with homologous sequences from Siluriformes and Cypriniformes, respectively. Using qPCR, we observed that gonadotropin subunits expression were restricted to the pituitary gland, just like their receptors were restricted to the gonads. We also observed that both gonadotropin beta subunits mRNAs/proteins are expressed by distinct populations of gonadotropes at pituitary. In the gonads, both receptors were detected on Sertoli and Leydig cell, as well as on ovaries were located on follicular and theca cells, in oocytes starting from secondary growth. Then, gene expression levels of gonadotropins subunits mRNAs and their receptors were assessed, in parallel to plasma level of sex steroids, and evaluated according to gemetogenesis during the annual reproductive cycle of males and females kept in captivity.

A partir da hipófise de Astyanax altiparanae foram clonados e caracterizados os cDNAs completos para fshb, lhb e gpha. Das gônadas, foram clonados os cDNAs para fshr e lhr. As análises filogenéticas destes genes demonstram uma proximidade com as sequências homólogas das ordens Siluriformes e Cypriniformes. Por meio de qPCR, detectamos que a expressão dos mRNAs para as gonadotropinas foi restrita à hipófise, ao passo que dos receptores foi restrita às gônadas. Foi detectado que os mRNAs/proteínas para subunidades beta são expressas por diferentes populações de células gonadotrópicas. Nas gônadas, ambos receptores foram localizados nas células de Sertoli e Leydig, bem como nas células foliculares e da teca de oócitos a partir de crescimento secundário. Então, os níveis de expressão gênica das subunidades das gonadotropinas e seus receptores, juntamente como os níveis plasmáticos de esteroides sexuais foram avaliados e relacionados com a cinética da gametogênese durante o ciclo reprodutivo anual de machos e fêmeas em cativeiro. / From Astyanax altiparanae pituitaries, we cloned the full-leght cDNAs coding for fshb, lhb e gpha. From gonads, we cloned the full-length cDNAs for fshr and lhr. Phylogenetic analysis revealed that all five sequences showed the highest identity degree with homologous sequences from Siluriformes and Cypriniformes, respectively. Using qPCR, we observed that gonadotropin subunits expression were restricted to the pituitary gland, just like their receptors were restricted to the gonads. We also observed that both gonadotropin beta subunits mRNAs/proteins are expressed by distinct populations of gonadotropes at pituitary. In the gonads, both receptors were detected on Sertoli and Leydig cell, as well as on ovaries were located on follicular and theca cells, in oocytes starting from secondary growth. Then, gene expression levels of gonadotropins subunits mRNAs and their receptors were assessed, in parallel to plasma level of sex steroids, and evaluated according to gemetogenesis during the annual reproductive cycle of males and females kept in captivity.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1671012 bytes, checksum: 403ddd0d13dc2890004dae5a13c0606b (MD5) Previous issue date: 2011-08-04 / One of the factors most relevant in environmental pollution that involves the ecosystem is the contamination by pesticides, especially when these are applied indiscriminately. Between these compounds are pesticides with several chemical compositions that are used with different aims. The aquatic environment has been considered the most relevant toxic receptor compartment, and so has attracted attention of researchers for evaluation of biological indicators. Thus, it becomes necessary to use methods of assessment of the effects of pollutants using fish to show the first signs of environmental stress caused by contaminants in different levels of biological organization. The morphological disorders in fish organs with wide surface area exposures to the environment, such as the gills, may be useful as biomarkers. The Thiodan® (Bayer), an insecticide and acaricide widely used to control chewing and sucking insects was chosen for this study. The use of small species, such as lambari Astyanax aff. bimaculatus, facilitates the execution of laboratory tests, reason for the choice of these species. This study determined the LC50-96h with 120 animals, divided in one as control group and seven concentrations of Thiodan® (1.5, 3, 6, 12, 24, 48 and 96 &#956;g.L-1) with three replicates of five fish each. Also it has been evaluated the influence of Thiodan® on the morphology of the gills of female A. bimaculatus. The fish were distributed in four separate experiments (fish without adaptation and without food, fish without adaptation and fed, fish adapted and without food, and fish adapted and fed). For each experiment were used a control group and three concentrations of Thiodan® (1.3, 2.6 and 5.2 &#956;g.L-1) lasting 96 hours, with three replicates of 10 fish in each aquarium. For morphological and morphometric studies, fragments of gills were processed following routine techniques. The water quality was measured and was according to the Resolution 357/2005 (CONAMA). The result of LC50-96h was 13.6&#956;g.L-1 with a confidence interval from 10.1 to 18.4&#956;g.L-1 (P<0.05). During the toxicity tests (96h) the exposed groups showed aggressive behavior and escape attempt in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1), restlessness, erratic swimming and branchial hyperventilation at all concentrations in four experiments. Histologically there was hyperplasia, lamellar fusion, detachment and destruction of the lamellar epithelium. The morphometric analysis showed a reduction of number and diameter of chloride cells, the thickness of the primary lamellae, and the length of the secondary lamellae, within and between experiments (P<0.05). It was observed an increase in the number of mucus cells and coincident points with the gill tissue (P<0.05) in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1) in experiments 1 and 2. There was an increase (P<0.05) in the diameter of the aneurysm in the experiment 1 when compared to the others. There was no difference (P>0.05) in the diameter of mucus cells, vasodilation, and the amount of the hemorrhage focus between the experiments. Morphometric analysis showed that changes in experiment 1 were more evident when compared to others. Based on these results the experiment showed that the gills of A. bimaculatus can be used as biomarkers of environmental contamination by Thiodan® but the fish should not be used as bioindicator organism, because it has low sensibility to this product. / Um dos fatores de maior relevância na poluição ambiental e que compromete um ecossistema é a contaminação por agrotóxicos, principalmente quando esses são aplicados de forma indiscriminada. Entre esses compostos estão pesticidas que possuem diferentes composições químicas e são utlizados com diversas finalidades. O ambiente aquático tem sido considerado o mais relevante compartimento receptor de tóxicos, e por isso tem despertado interesse de pesquisadores para avaliação de indicadores biológicos. Assim, torna-se necessário a aplicação de métodos de avaliação dos efeitos dos poluentes utilizando peixes para demonstrar os primeiros sinais de estresse ambiental causados por contaminantes em diferentes níveis de organização biológica. As alterações morfológicas dos órgãos de peixe com grande superfície de exposição ao meio ambiente, como as brânquias, podem ser úteis como biomarcadores. O Thiodan® (Bayer), um inseticida e acaricida amplamente utilizado para o controle de insetos chupadores e mastigadores, que apresenta ação por contato e ingestão, foi escolhido para o presente estudo. O uso de espécies de pequeno porte, como o lambari Astyanax bimaculatus facilita a execução dos testes em laboratório, motivo da escolha da espécie. O presente trabalho determinou a CL50-96h e avaliou a influência do Thiodan® (Bayer) sobre a morfologia das brânquias de fêmeas da A. bimaculatus em maturação gonadal. Foram utilizadas 600 fêmeas de lambaris, divididas em cinco lotes, que permaneceram em sistema estático para determinação da CL50-96h e para o teste de toxicidade. O primeiro lote de 120 animais, utilizado para a determinação da CL50-96h, foi constituído de três repetições com cinco peixes cada para o grupo controle e para cada concentração de Thiodan® (1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 24,0; 48,0 e 96,0 &#956;g.L-1). Os demais lotes foram distribuídos em quatro experimentos distintos (peixe sem adaptação e sem alimentação, peixes sem adaptação e alimentados, peixes adaptados e sem alimentação, e peixes adaptados e alimentados). Para cada experimento, utilizou-se um grupo controle e três diferentes concentrações de Thiodan® (1,3; 2,6 e 5,2&#956;g/L), com três repetições de 10 peixes cada, durante 96h. Para estudos morfológicos emorfométricos, fragmentos de brânquias foram processados seguindo técnicas de rotina. Os parâmetros indicadores da qualidade da água utilizada para a realização dos experimentos encontraram-se em conformidade com as condições exigidas pela Resolução 357/2005 (CONAMA) para cultivo e criação de peixes tropicais. A CL50-96h obtida foi de 13,6&#956;g.L-1 com intervalo de confiança de 10,1 a 18,4&#956;g.L-1 (P<0,05). Durante os testes de toxicidade (96h), os grupos expostos apresentaram comportamento agressivo e tentativa de fuga na maior concentração (5,2&#956;g.L-1), agitação, nado errático e hiperventilação branquial em todas as concentrações nos quatro experimentos. Histologicamente observou-se hiperplasia, fusão lamelar, descolamento e destruição do epitélio lamelar. As análises morfométricas mostraram redução de número e diâmetro de células de cloreto, da espessura das lamelas primárias, e do comprimento das lamelas secundárias, entre e dentro dos experimentos (P<0,05). Também foi observado aumento do número de células de muco e dos pontos coincidentes com o tecido branquial (P<0,05) na maior concentração (5,2&#956;g.L-1) nos experimentos 1 e 2. Houve aumento (P<0,05) no diâmetro de aneurisma no experimento 1 em relação aos demais. No diâmetro de células de muco, na vasodilatação e na quantificação de foco de hemorragia entre os experimentos não houve diferença (P>0,05). A análise morfométrica mostrou que as alterações no experimento 1 (animais sem adaptação e sem alimentação) foram mais evidentes quando comparadas aos demais. Com base nesses resultados, pode se concluir que as brânquias de A. bimaculatus podem ser utilizadas como biomarcadores de contaminação ambiental pelo Thiodan®.

Grãos secos de destilaria com solúveis (DDGS) são uma fonte alternativa protéica e energética, de baixo custo se comparado com a farinha de peixe e o farelo de soja. Neste estudo avaliou-se a influência dos diferentes níveis de DDGS no desempenho produtivo e reprodutivo de lambari-de-rabo amarelo, bem como analisou-se a viabilidade econômica deste produto. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado composto de 4 tratamentos (níveis de DDGS) e 4 repetições. Foram elaboradas dietas contendo 0%, 10%, 20% e 30%, de DDGS em substituição parcial e total do farelo de soja e quirera de arroz. Um total de 2400 alevinos de lambari foram estocados em 16 tanques de 500L, contendo biofiltro e um sistema individual de recirculação de água, à densidade de 0,3 peixes/ L. Os peixes foram alimentados 4 vezes ao dia no primeiro mês e 2 vezes nos meses subsequentes durante 150 dias, à taxa diária do arraçoamento de 5% de peso vivo. Mensalmente os peixes foram pesados e no final determinou-se os parâmetros produtivos tais como: ganho de peso, índice de conversão alimentar, taxa de sobrevivência, taxa de crescimento específico, taxa de eficiência protéica, índice de crescimento instantâneo, taxa de ganho de peso, fator de condição corporal e composição química do corpo inteiro e do músculo. Após o período de alimentação foram determinados os seguintes parâmetros reprodutivos: índice gonadossomático, volume dos ovos, fertilidade inicial, fertilidade inicial relativa, taxa de fertilidade, índice de desova, fertilidade final, fertilidade final relativa, taxa de eclosão e sobrevivência, diâmetro dos ovos e do vitelo e comprimento das larvas. Foi feita a histologia das gônadas das fêmeas e dos machos e avaliação do sêmen. Também se analisou a viabilidade do uso do DDGS. Os dados foram submetidos à análise de variância (&alpha; = 0,05), à regressão e teste de tendência, e para a comparação das médias de viabilidade económica utilizou-se o teste Tukey por meio do programa SAS. A adição de DDGS não afetou os parâmetros produtivos (P &GT; 0,05), exceto para a matéria mineral do músculo (P &LT; 0,05). Ocorreram diferenças (P &LT; 0,05) para fertilidade inicial, peso, comprimento total e padrão dos machos. Histologicamente não se evidenciou diferenças entre as estruturas morfológicas dos ovários, nos testículos dos peixes alimentados com dieta de 30% de DDGS apresentaram células espermáticas abundantes, portanto o desenvolvimento gonadal não foi influenciado negativamente pelo DDGS. Economicamente as dietas contendo DDGS (10, 20 e 30%) foram respetivamente 2; 7 e 11% menos onerosas do que a dieta com farelo de soja e quirera de arroz. As médias do custo do ganho não diferiram (P &GT; 0,05) entre si, indicando que se pode substituir o farelo de soja e quirera de arroz com o DDGS sem grandes prejuízos no desempenho e a baixo custo de alimentação. / Distillers dried grains with solubles (DDGS) is a protein and energy source alternative, is used to formulate diets to feed fishes in replecement of fish meal and soya, and the cost is low. This research was carried out to investigate the influence of dietary inclusion of DDGS levels on growth and reprodution performance and evaluate its economical value of lambari. The experimental delineament were four isonitrogenous diets were formulated that contain 0%, 10%, 20%, and 30% of DDGS in substituation of soja meal and broken rice. A total of 2400 lambari were stored in 16 tanks 500L, provided with a biofilter and a single system of water recirculation, density were 0,3 fish / L. During 150 days the groups of fish were fed with experimental diets until visual satiety four times per day for the first month and twice in the remaining months, the daily rate of feeding were 5% of body weight. Each month the fish were weighed for determination of production parameters such as: weight gain, feed conversion rate, survival rate, specific growth rate, protein efficiency ratio, instantaneous growth rate, weight gain rate, condition factor physical and chemical composition of the whole body and muscle. After the feeding period terminated reproductive parameters such as: gonadossomatic index, egg volume, initial fertility, relative initial fertility, fertility rate, spawning rate, final fertility, final relative fertility, hatching and survival rate, diameter of eggs and length of the larvae. It was made the histology of the gonads (females and males) and semen evaluation. Also analyzed the economic viability of using DDGS in the diets. The data were subjected to ANOVA, regression and trend test, economical value analised by Turkey test (&alpha; = 0,05). Addition of DDGS did not affect the productive parameters (P &GT; 0,05) except for the mineral of muscle (P &LT; 0,05). There were differences (P &LT; 0,05) in initial fertility (FI), weight, total and pattern length of males. Histologically no detectable morphological differences between the structures of the ovaries, but testes of fish fed with diet of 30% DDGS showed abundant sperm cells, therefore gonadal development was not negatively influenced by the DDGS. Economically diets containing DDGS (10, 20 and 30%) were respectively 2; 7:11% cheaper than the diet with soy meal and broken rice. The cost gain was no significant (P &GT; 0.05). The result from this resarch shows that DDGS can replace soybean meal and broken rice without major losses in performance and low cost supply.

Sendo o GnRH a molécula capaz de iniciar a cascata hormonal reprodutiva, realizamos a clonagem, analisamos os efeitos da indução à reprodução e as funções dos GnRHs de A. altiparanae. Como resultados, obtivemos as sequências dos cDNAs do GnRH2 e GnRH3. Quando induzidos à reprodução, a desova foi às 20 h pós-estímulo (hpe) em fêmeas e às 16 hpe em machos, o aumento da expressão do mRNA de GnRH3 ocorreu às 8 hpe em fêmeas, e o aumento da expressão do mRNA de GnRH2 foi às 0 hpe em machos. Com relação ao efeito dos GnRHs, todos estimularam a expressão do mRNA de &beta;LH, mas não de &beta;FSH, e só o GnRH2 foi capaz de elevar o MIS e causar a desova. Como conclusão, temos que as sequências dos cDNAs dos GnRHs se mostraram conservadas; a indução à reprodução por redução do nível da água foi eficaz; em cativeiro, a espécie teve desenvolvimento assincrônico; o GnRH2 provavelmente está ligado ao comportamento reprodutivo, e o GnRH3 é a possível forma hipofisiotrópica. Por fim, só o GnRH2 desencadeou toda a cascata hormonal. / The study on reproduction in fish has been acquired great importance in last years, mainly for the benefit of threatened species. During the reproductive process, the hypothalamic neurons synthesize and release GnRH that stimulates the pituitary cells to release FSH and LH, which, in turn, promote the gonadal maturation. In fact, the morphological changes in gonads are the result of the endocrine action of the reproductive axis, in which the GnRH is the key molecule to starting the reproductive axis control. Thus, the knowledge about the GnRH, as well as about the gonadal morphological changes in the spawning might contribute to effectiveness of reproduction. Therefore, in this work, with Astyanax altiparanae as a model, we made the molecular characterization of the GnRHs, and we analyzed the gonadal morphological changes during the reproductive stimulus. In addition, we evaluated the role of injected GnRHs in vivo. As results, we obtain the cDNA complete sequence of preproGnRH2 (612bp) and preproGnRH3 (407bp) of A. altiparanae. Regarding the induction of reproduction by water level drawdown, the released of gametes occurred at 20 hours after stimulus in female and at 16 hours after stimulus in males, the mRNA expression of GnRH3 increased at 8 hours after stimulus in female and the mRNA expression of GnRH2 increased at 0 hours in males. Regarding the effects of injected GnRH, all of them stimulated the &beta;LH but not &beta;FSH mRNA expression, and only the GnRH2 was able to rise the MIS and stimulate the released of gametes. We conclude that the cDNAs sequences of preproGnRH2 and preproGnRH3 were conserved, although there is a change in the amino acid at the position 8 of the GnRH3 decapeptide of A. altiparanae. Furthermore, the induced reproduction by water level drawdown was effective, and in captivity, the A. altiparanae has an asynchronous development with splitted spawning during the breeding season. The analysis of the animals submitted to the reproductive stimulus allowed us to suggest that in A. altiparanae, the GnRH2 probably has a role in sexual behavior and the GnRH3 possibly is the hypophysiotropic form. Finally, analyzing the GnRH effects, we observed that only the GnRH2 was able to start the entire reproductive hormonal cascade, leading the animal to spawning.

Orientador: Laura Satiko Okada Nakaghi / Coorientador: George Shigueki Yasui / Banca: Diogo Teruo Hashimoto / Banca: José Augusto Senhorini / Resumo: Neste estudo, foram avaliados aspectos relacionados ao desempenho zootécnico e caracterização das células germinativas de machos e fêmeas diploides (2n) e triploides (3n) de Astyanax altiparanae. O principal objetivo foi verificar a performance e a possível esterilidade em peixes 3n. No Capítulo I, o crescimento e as características da carcaça foram examinadas. Fêmeas 3n apresentam maiores valores de ácidos graxos saturados e menores de insaturados e poli-insaturados. Adicionalmente, foi verificada uma diminuição no IGS e maior crescimento. Machos triploides apresentaram IGS e crescimento similares em comparação com os machos diploides normais. No Capítulo II o objetivo foi analisar histologicamente as gônadas dos diploides e triploides, e adicionalmente, caracterizar a estrutura das espículas presentes nas nadadeiras pélvicas e anal (característica sexual secundária em machos) e alguns parâmetros seminais (motilidade, concentração e viabilidade, ultraestrutura e ploidia). Machos 3n apresentam espículas nas nadadeiras pélvicas e anal, assim como observado nos diploides. Análise histológica mostrou que fêmeas 2n apresentaram gônadas desenvolvidas com ovócitos vitelogênicos. Por outro lado, fêmeas 3n exibiram gônadas imaturas. As gônadas dos machos 2n e 3n apresentaram morfologia similar, no entanto, machos 2n exibiram maior quantidade espermatozoides. Machos 3n apresentaram menor concentração espermática, motilidade e duração da motilidade. No que se refere à viabilidade espermática, não foi observada diferença significativa (P > 0,05). Em ambas ploidias, os espermatozoides apresentaram ultraestrutura similar e mesmo número de mitocôndrias, com estruturas morfológicas características: cabeça (redonda), peça e flagelo, este com formação tubular típica (9+2). Adicionalmente, a análise de citometria de fluxo mostrou que machos triploides produzem espermatozoides aneuploides (n=1,71). Em conclusão... / Abstract: In this study, aspects related with growth performance and characterization of the germ cells from diploids (2n) and triploids (3n) males and females of yellow tail tetra Astyanax altiparanae were analyzed. The principal aim was to verify the performance and sterility of 3n fish. In the Chapter I, growth and carcass traits were examined. Female 3n presented high values of saturated fatty acids in comparison with unsaturated and polyunsaturated. Additionally, decreased GSI and better growth performance was verified within triploids. Triploid males presented similar GSI and similar performance parameters in comparison with normal diploid males. In the Chapter II, the aim was to study histologically the gonads of diploids and triploids, and additionally to characterize the spines in the pelvic and anal fins (sexual secondary trait in male), and some sperm parameters (motility, concentration and viability, ultrastructure and ploidy) of 2n and 3n fishes. Triploid males presented spines in the anal fin, similarly as observed in diploids. Histological analysis showed that 2n female present developed gonads with vitelogenic oocytes. On the other hand, 3n female exhibit immature gonads. The gonads of 2n and 3n males presented similar morphology, however, 2n male presented increased amount of spermatozoa. Triploid males also presented decreased sperm concentration, motility and duration of motility. Regarding the sperm viability, no significant differences were observed (P > 0.05). In both statuses, the spermatozoa presented similar ultrastructures and same number of mitochondria, with characteristic morphological structures: head (round), midpiece and flagela, which have a typical tubular formation (9+2). Additionally, the flow cytometrycal analysis showed that 3n male produce aneuploid spermatozoa (n=1.71). In conclusion, the triploidization does not ensure sterility in males, however, 3n female (sterile) may be used for aquaculture ... / Mestre

Orientador: Rafael Henrique Nóbrega / Resumo: A decisão sobre se uma gônada bipotencial se desenvolverá em um testículo ou em um ovário é considerado um estágio crítico na diferenciação sexual dos vertebrados. A administração de esteróides exógenos durante este período pode afetar essa plasticidade, promovendo a diferenciação sexual na direção feminina ou masculina. Dessa forma, o objetivo desta tese foi avaliar os efeitos do tratamento de 17β-estradiol no desenvolvimento de Astyanax altiparanae (lambari), através de análises histológicas e de análises de expressão genica de possíveis genes envolvidos em vias masculinas e femininas. Para isso, larvas com gônadas indiferenciadas foram alimentadas com Artemia contendo diferentes concentrações de estradiol durante 28 dias, desde o 1 dia pós-eclosão (dpe) até o período que precede a diferenciação gonadal. Nossos resultados mostraram que o E2 modificou o fenotípo e a relação sexual histológica e, surpreendentemente, induziu intersexo com com a presença de óvulos nos testículos nas concentrações de 2 e 6 mg de E2/kg de alimento. Esses dados são uma evidência clara de que o tratamento utilizado não foi suficiente para induzir a reversão completa do sexo em A. altiparanae. Em termos de expressão gênica, o tratamento com E2 (6 mg/kg de alimento) produziu uma notável plasticidade gonadal entre machos e fêmeas aos 90 dias após a eclosão (dph). Os machos, denominados “machos resistentes ao estradiol”, superexpressaram os genes masculinos, como dmrt1, sox9 e amh. Dessa forma, nó... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The decision whether a bipotential gonad will become a testis or ovary is considered a critical stage in vertebrate sex determination. Administration of exogenous steroids can affect this plasticity by skewing the sex gonadal differentiation towards a male or female. The aim of this study is to evaluate the effects of 17β-estradiol (E2) diet on Astyanax altiparanae (lambari) development, focusing on the gonadal development and gene expression analysis of possible candidate genes involved in either male or female pathways. Larvae with undifferentiated gonads were fed with steroid diet containing different concentrations of E2 during 28 days, from the mouth opening until a period that precedes the gonadal differentiation. Animals were sampled at 90 days post-hatching (dhp) for histology and gene expression analysis. Our results showed that E2 disrupted both phenotypic and histological sex ratios, and surprisingly, induced intersex with testis-ova in the concentrations of 2 and 6 mg E2/Kg food. This data is a clear evidence that the treatment used was not enough to induce complete sex reversal in A. altiparanae. However, in terms of gene expression, E2 (6mg/Kg food) induced a remarkable gonadal plasticity between males and females at 90 dph. The males, named as E2 resistant males, overexpressed the male-biased genes, such as dmrt1, sox9 and amh. We suggested that these males were able to resist the E2-induced feminization by the expression of genes related to testis differentiat... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Wagner Cotroni Valenti / Resumo: O desafio global para a gestão de áreas protegidas é conciliar desenvolvimento social e conservação. Nós apresentamos um estudo de caso sobre o desenvolvimento da aquicultura do lambari em uma comunidade rural localizada na área de entorno do Parque Estadual da Serra do Mar, sudeste do Brasil, com ênfase na informação disponível sobre o status e potenciais impactos sócio-ecológicos da cadeia produtiva. Práticas de manejo inadequadas e falta de ciência aplicada tem levado à baixa produtividade e um alto consumo de recursos naturais. A aquicultura do lambari praticada no parque consome três vezes mais água e nutrientes por tonelada de peixe do que outros sistemas semi-intensivos de aquicultura realizados no Brasil e no exterior. Estratégias simples e alternativas são necessárias para melhorar a eficiência dos sistemas. Com mais pesquisa aplicada, a aquicultura de peixes nativos, de baixo nível trófico, como o lambari, pode ser uma ferramenta importante para a produção de alimentos e desenvolvimento sustentável das populações rurais no Brasil. Além disso, pode representar uma alternativa para geraração de renda para populações que vivem no entorno de áreas de conservação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The current global challenge for protected areas management is to reconcile social development and conservation. We report on a case study of the development of lambari aquaculture in a rural community located in a protected coastal rainforest in SE Brazil, with an emphasis on available information on the status and potential socio-ecological impacts of this innovative enterprise. Poor management practices and a lack of applied science has led to low productivity and a high consumption of natural resources. Lambari aquaculture performed in this protected area consumes three times more water and nutrients per ton of fish than other comparable semi-intensive aquaculture systems globally. Simple, alternative strategies are needed to improve systems' efficiencies. With participatory applied science, the aquaculture of indigenous, low trophic level fish such as the lambari can be an important tool for sustainable food production and development of rural populations, and an alternative income source for poor communities remaining in nature reserves in Brazil... (Complete abstract electronic access below) / Mestre

Orientadora: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Erico Luis Hoshiba Takahashi / Banca: George Shigueki Yasui / Resumo: O presente estudo teve como objetivo analisar os índices reprodutivos e definir os aspectos reprodutivos da espécie Astyanax fasciatus no Córrego Rico, São Paulo, Brasil e confirmar duas hipóteses - Esta espécie possui desova do tipo parcelada neste ambiente especificamente e uma amostra da população colocada em cativeiro pode desenvolver a maturação gonadal. Foram capturados 40 exemplares da espécie, por meio de coletas mensais padronizadas realizadas no período de outubro de 2012 a janeiro de 2013 por meio de rede espera. Além disso, mais 120 exemplares de A. fasciatus foram coletados e transferidos para um tanque no Centro de Aquicultura da UNESP, Jaboticabal, SP e mantidos em cativeiro. Coletas mensais também foram realizadas no mesmo período das coletas in situ para biometria e análise histológica das gônadas. A hipótese de desova parcelada foi corroborada pela análise concomitante da variação dos índices gonadossomático, hepatossomático, fator de condição e volume gonadal além da análise histológica observando fêmeas parcialmente desovadas em mais de uma coleta. A hipótese de maturação gonadal em ambiente de cativeiro também foi corroborada por meio de análise histológica associada à análise dos índices reprodutivos. Nesse contexto, os resultados obtidos geram subsídios para estudos no tocante à biologia reprodutiva e sua aplicação na reprodução em ambiente de aquicultura / Abstract: This study aim to study the reproductive biology of redtail tetra Astyanax fasciatus from a stream in Jaboticabal,SP and confirm two hypothesis - this specie have a fractional spawning in this place specifically and A. fasciatus can maturate gonads in capitivity environment. Adult males and females (n=40) were sampled monthly during the rainy season from October 2012 to January 2013 by gillnets. Besides, more 120 adult males and females were sampled and transferred to a pond in UNESP Aquaculture Center, Jaboticabal,SP. Monthly samples were realized in the same period that in situ samples for biometrics and histological analysis. The hypothesis of fractional spawning was corroborated by concurrent analysis of gonadosomatic index, hepatosomatic index, condition factor and gonadal volume in addition to histological analysis watching females partially spawned in more than one sample. The hypothesis of gonadal maturation in captivity environment also be corroborated by histological analysis in addition to reproductive indexes analyslis. In this context, the results generate data for studies regarding the reproductive biology and its application in breeding aquacultural environment / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-01-28T10:46:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 593338 bytes, checksum: 14b43a387a2bf0ca5e7b252beff0fa2e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-28T10:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 593338 bytes, checksum: 14b43a387a2bf0ca5e7b252beff0fa2e (MD5) Previous issue date: 2015-06-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Com este estudo, objetivou-se avaliar a resposta de estresse e a mortalidade em lambaris-do- rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) nas fases de crescimento e terminação submetidos a redução da temperatura da água. Foram realizados dois experimentos, sendo o primeiro com lambaris-do-rabo-amarelo em fase de crescimento (4,25±0,75g e 5,45±0,08cm) e o segundo com lambaris em fase de terminação (7,25±0,75g e 6,56±0,08cm). Inicialmente os peixes foram aclimatados a temperatura de 27oC por 21 dias. Em ambos os experimentos, utilizou-se delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos 27, 23, 19, 15, 11 e 7 °C (temperaturas da água) e seis repetições. Os peixes foram distribuídos em seis aquários com 10L de água cada, os quais foram alocados em Câmara Incubadora B.O.D para controle da temperatura da água, utilizando-se as densidades de estocagem de 8,5 e 8,7 g/L, respectivamente, para o primeiro e segundo experimento. Os peixes passaram por um período de 72 horas na temperatura de 27°C para adaptação às condições experimentais e em seguida foram submetidos às temperaturas testes por mais 96 horas. Os lambaris-do-rabo-amarelo foram alimentados e avaliados quanto à taxa de mortalidade, os comportamentos alimentar e natatório, posição no aquário e coloração do corpo e das nadadeiras a cada 24 horas. Ao final das 96 horas de cada tratamento foram analisados os parâmetros de qualidade da água e coletadas amostras de sangue para as análises de glicemia e lactato sanguíneos e cortisol plasmático. Os dados obtidos foram avaliados por análise de variância (ANOVA) e em caso de significância (P<0,05), submetidos à análise de regressão. Foi adotada como temperatura letal aquela que antecedeu a mortalidade de 50% dos peixes. Houve aumento significativo do pH e do oxigênio dissolvido na água com a diminuição da temperatura da água para ambos os experimentos. Nas temperaturas abaixo de 27oC, os peixes de ambas as fases de desenvolvimento não alimentaram no momento do fornecimento da ração. Apenas os peixes em fase de crescimento, submetidos à temperatura da água de 7oC, não apresentaram nenhum tipo de comportamento natatório na primeira observação. Com relação à posição dos peixes nos aquários, os mesmos geralmente permaneciam próximos às estruturas de refúgio e após alguns segundos, nadavam por todo o aquário, exceto os peixes em fase de crescimento submetidos à temperatura de 7oC. Houve alteração na coloração do corpo de cinza prateado para cinza escuro e da nadadeira caudal de amarelo vivo para pálido dos peixes das duas fases de desenvolvimento submetidos às temperaturas de 7 e 11oC. Houve aumento significativo da mortalidade dos peixes com diminuição da temperatura da água, com 100% de mortalidade dos peixes das duas fases de desenvolvimento submetidos as temperaturas de 7 e 11oC. Houve diminuição na concentração de lactato sanguíneo dos peixes com a diminuição da temperatura da água em ambos os experimentos. Houve aumento significativo na concentração plasmática de cortisol apenas nos peixes em fase de crescimento em função da diminuição da temperatura da água. Portanto, conclui-se que a temperatura letal para Astyanax altiparanae nas fases de crescimento e terminação encontra-se entre 11 e 15 oC, e que, a diminuição da temperatura da água causa estresse nos peixes. / On this study, aimed to evaluate the stress response and mortality of lambaris-of-yellow-tail (Astyanax altiparanae) in growing and finishing phases, subjected to water temperature reducion. Two experiments were conducted, the first with Astyanax altiparanae in the growth phase (4.25±0.75g and 5.45±0.08cm) and the second with Astyanax altiparanae in the finishing phase (7.25±0.75g and 6.56±0.08cm). Initially the fish were acclimated to a temperature of 27oC for 21 days. In both experiments, we used a completely randomized design with six treatments 27, 23, 19, 15, 11 and 7°C (water temperatures) and six repetitions. The fish were distributed in six tanks with 10L of water each, which were placed in incubator chamber B.O.D. to control the water temperature, using the storage densities of 8.5 and 8.7g/L, respectively, for the first and second experiment. The fish passed for a period of 72 hours at 27°C for adaptation to the experimental conditions and were then subjected to testing temperature for a further 96 hours. The Astyanax altiparanae were evaluated fed and mortality rate, the food and swimming behavior, position in the aquarium and coloration of the body and fins every 24 hours. At the end of 96 hours of each treatment were analyzed water quality parameters and collected blood samples for blood glucose and lactate tests and plasma cortisol tests. Data were evaluated by analysis of variance (ANOVA) and in case of significance (P <0.05) were submitted to regression analysis. It was adopted as lethal temperature that run up to 50% of fish mortality. There was increase of pH and dissolved oxygen in water with decreasing temperature for both experiments. In temperatures below 27oC, the fish of both development phases did not fed at the feeding time. Only fish in the growth phase, subjected to water temperature of 7°C did not show any kind of swimming behavior in the first observation. Regarding the fish position in aquariums, they generally remained close to the refuge structures and after a few seconds, swam across the aquarium, except the fish in the growth phase submitted at a temperature of 7°C. There was a change on body color from silver gray to dark gray and caudal fin from bright yellow to pale yellow for fish of the two phases of development subjected to temperatures of 7 and 11oC. There was significant increase in fish mortality with decreasing water temperature, with 100% of mortality for fish in two stages undergoing development for temperatures of 7 and 11oC. There was decrease in blood lactate concentration of fish with decrease of the water temperature in both experiments. There was significant increase in plasma cortisol only on fish in the growth phase due to the decrease in water temperature. Therefore, it is concluded that the lethal temperature for Astyanax altiparanae on growing and finishing phases is between 11 and 15°C, and the temperature decrease of the water causes stress in the fish.