Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2016. / Submitted by Jane Andréia Silveira Pinheiro (janeapinheiro@gmail.com) on 2016-06-29T11:51:53Z No. of bitstreams: 1 2016_DiegoSousaMoura.pdf: 8524274 bytes, checksum: 612849ccfd0cbcb5dc5cd8be5ae063b8 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-06-29T13:58:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_DiegoSousaMoura.pdf: 8524274 bytes, checksum: 612849ccfd0cbcb5dc5cd8be5ae063b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T13:58:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_DiegoSousaMoura.pdf: 8524274 bytes, checksum: 612849ccfd0cbcb5dc5cd8be5ae063b8 (MD5) / De acordo com a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), aproximadamente 226 ingredientes ativos de fármacos psicotrópicos têm autorização para comercialização no Brasil (RDC 6/2014). Produzidos em larga escala, os fármacos psicotrópicos chegam aos ecossistemas (ex. por meio do descarte de efluentes domésticos). Assim, organismos não alvo, aquáticos e terrestres, são expostos a um coquetel de fármacos, durante o seu ciclo de vida. O objetivo do presente estudo foi: fazer uma revisão bibliográfica dos fármacos psicotrópicos comercializados no Brasil, com foco especial às suas diferentes classes, modo de ação e ecotoxicidade; Avaliar a mortalidade e efeitos subletais (comportamento, atividade de colinesterases e alterações no desenvolvimento) de algumas dessas drogas utilizando testes de embriotoxicidade com embriões de peixe-zebra (baseados na norma OCDE - nº 236) e por fim, investigar a interação entre fármacos e nanomateriais (nanoestruturados de carbono e nanopartícula de titânio), visto que existe a possibilidade de aplicação em processos de remediação ambiental. Os 226 fármacos psicotrópicos comercializados no Brasil podem ser divididos em seis diferentes classes: ansiolíticos (n = 69), antidepressivos (n = 57), antipsicóticos (n = 54), antiepilépticos (n = 20), fármacos para alívio sintomático de doenças neurodegenerativas (n = 26), reguladores do humor (n = 1). Os dados da revisão bibliográfica revelam que: apenas 24 % possuem algum estudo ecotoxicológico, além disso, esses estudos são limitados, sendo, em sua maioria relativos a testes agudos, pouca informação é encontrada sobre a toxicidade crônica. Considerando nossos resultados dos testes de embriotoxicidade com 16 formulações comerciais e 5 compostos puros (mg/L), bioquímicos (5 compostos puros - μg/L) e comportamentais (5 compostos puros - ηg/L), sugere-se que o uso somente do parâmetro de mortalidade parece ser insuficiente para avaliação de riscos, uma vez que efeitos severos no organismo nomeadamente: paralisia, são encontrados em doses em média 5-10x mais baixas que o valores de CL50 para os fármacos testados. Uma análise refinada dos parâmetros comportamentais utilizando o zebrabox revela que há alterações significativas no tempo total de nado ou distância total percorrida dos embriões em concentrações muito próximas ou, até mesmo abaixo das concentrações já detectadas no meio ambiente de fármacos psicotrópicos. Ademais, os resultados obtidos sugerem que os efeitos no comportamento podem não seguir uma dose resposta, uma vez que em baixas doses podem induzir a atividade locomotora e em doses mais altas tendem a diminuir a atividade locomotora. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / According to the National Health Surveillance Agency (ANVISA), approximately 226 active ingredients of psychiatric pharmaceuticals are allowed to be sold in Brazil (DRC 6/2014). Produced on a large scale, psychiatric pharmaceuticals arriving ecosystems (eg. By means of disposal of domestic waste). Thus, non-target organisms, aquatic and terrestrial, are exposed to a cocktail of drugs, throughout their life cycle. The aim of this study was: do a literature review of psychiatric drugs marketed in Brazil, with a special focus to their different classes, mode of action and ecotoxicity; Assess mortality and sublethal effects (behavior, cholinesterase activity and changes in development) of some of these pharmaceuticals using embryotoxicity tests with zebrafish embryos (based on the OECD standard – nº 236) and finally investigate the interaction between pharmaceuticals and nanomaterials (carbon nanotubes and titanium nanoparticles), since there is the possibility of application in environmental remediation processes. Approximalety, 226 psychiatric pharmaceuticals marketed in Brazil can be divided into six different classes: anxiolytics (n = 69), antidepressants (n = 57), antipsychotics (n = 54), antiepileptics (n = 20), fármacos para alívio sintomático de doenças neurodegenerativas (n = 26) mood regulators (n = 1). Data from the literature review shows that: only 24% have some ecotoxicological study, moreover, these studies are limited, and mostly related to acute tests, little information is found on the chronic toxicity. Whereas our results of embryotoxicity tests with 16 comercial formulations and 5 pure compounds (mg/L), biochemical (5 pure compounds - μg/L) and behavioral (5 pure compounds - ηg/L), it is suggested that the use of only mortality parameter seems to be insufficient to evaluate risks, since severe effects on the body including paralysis, are found in lower average (doses 5-10x) the CL50 values for the pharmaceuticals tested. A refined analysis of behavioral parameters using zebrabox shows that there are significant changes in the total swimming time, or total distance of embryos on much concentrations near or even below the concentrations already been detected in the environment of psychiatric pharmaceuticals. Furthermore, the results suggest that the effects on behavior can not follow a dose response since in low doses can induce locomotor activity and high doses tend to decrease locomotor activity.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3203.pdf: 828816 bytes, checksum: 87fb4eedafe660b031534b4dca53b5dd (MD5) Previous issue date: 2010-08-06 / Universidade Federal de Minas Gerais / O uso de pesticidas, incluindo os inseticidas, herbicidas e fungicidas, pode representar um grande risco aos ecossistemas e uma ameaça potencial à saúde humana, animal e vegetal. Dentre os inseticidas piretróides comercialmente relevantes destacam-se aqueles cujo princípio ativo é a deltametrina. Esta é conhecida como sendo um piretróide (tipo II) tóxico para peixes e outros animais aquáticos, e por possuir um amplo espectro de ações nesses organismos não alvos, incluindo a indução de estresse oxidativo. O estudo do estresse oxidativo em peixes induzido por deltametrina, pode fornecer informações úteis acerca das conseqüências ecotoxicológicas do uso de inseticidas piretróides formulados a base de deltametrina. Para a realização do nosso estudo, utilizamos juvenis de Brycon amazonicus como modelo de estudo acerca dos efeitos toxicológicos da deltametrina quando presente na água, e enfatizamos os mecanismos de defesa antioxidante da espécie. Nossos objetivos foram: 1) determinar a CL(I)50; 96h da deltametrina (na formulação comercial Keshet®) para B. amazonicus; 2) avaliar efeitos tóxicos da deltametrina no metabolismo antioxidante de B. amazonicus frente à exposição hídrica a 10% da CL(I)50; 96h e 3) determinar a capacidade de recuperação dos juvenis de B. amazonicus após um período de 10 e 20 dias de pós-exposição à deltametrina.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1671012 bytes, checksum: 403ddd0d13dc2890004dae5a13c0606b (MD5) Previous issue date: 2011-08-04 / One of the factors most relevant in environmental pollution that involves the ecosystem is the contamination by pesticides, especially when these are applied indiscriminately. Between these compounds are pesticides with several chemical compositions that are used with different aims. The aquatic environment has been considered the most relevant toxic receptor compartment, and so has attracted attention of researchers for evaluation of biological indicators. Thus, it becomes necessary to use methods of assessment of the effects of pollutants using fish to show the first signs of environmental stress caused by contaminants in different levels of biological organization. The morphological disorders in fish organs with wide surface area exposures to the environment, such as the gills, may be useful as biomarkers. The Thiodan® (Bayer), an insecticide and acaricide widely used to control chewing and sucking insects was chosen for this study. The use of small species, such as lambari Astyanax aff. bimaculatus, facilitates the execution of laboratory tests, reason for the choice of these species. This study determined the LC50-96h with 120 animals, divided in one as control group and seven concentrations of Thiodan® (1.5, 3, 6, 12, 24, 48 and 96 &#956;g.L-1) with three replicates of five fish each. Also it has been evaluated the influence of Thiodan® on the morphology of the gills of female A. bimaculatus. The fish were distributed in four separate experiments (fish without adaptation and without food, fish without adaptation and fed, fish adapted and without food, and fish adapted and fed). For each experiment were used a control group and three concentrations of Thiodan® (1.3, 2.6 and 5.2 &#956;g.L-1) lasting 96 hours, with three replicates of 10 fish in each aquarium. For morphological and morphometric studies, fragments of gills were processed following routine techniques. The water quality was measured and was according to the Resolution 357/2005 (CONAMA). The result of LC50-96h was 13.6&#956;g.L-1 with a confidence interval from 10.1 to 18.4&#956;g.L-1 (P<0.05). During the toxicity tests (96h) the exposed groups showed aggressive behavior and escape attempt in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1), restlessness, erratic swimming and branchial hyperventilation at all concentrations in four experiments. Histologically there was hyperplasia, lamellar fusion, detachment and destruction of the lamellar epithelium. The morphometric analysis showed a reduction of number and diameter of chloride cells, the thickness of the primary lamellae, and the length of the secondary lamellae, within and between experiments (P<0.05). It was observed an increase in the number of mucus cells and coincident points with the gill tissue (P<0.05) in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1) in experiments 1 and 2. There was an increase (P<0.05) in the diameter of the aneurysm in the experiment 1 when compared to the others. There was no difference (P>0.05) in the diameter of mucus cells, vasodilation, and the amount of the hemorrhage focus between the experiments. Morphometric analysis showed that changes in experiment 1 were more evident when compared to others. Based on these results the experiment showed that the gills of A. bimaculatus can be used as biomarkers of environmental contamination by Thiodan® but the fish should not be used as bioindicator organism, because it has low sensibility to this product. / Um dos fatores de maior relevância na poluição ambiental e que compromete um ecossistema é a contaminação por agrotóxicos, principalmente quando esses são aplicados de forma indiscriminada. Entre esses compostos estão pesticidas que possuem diferentes composições químicas e são utlizados com diversas finalidades. O ambiente aquático tem sido considerado o mais relevante compartimento receptor de tóxicos, e por isso tem despertado interesse de pesquisadores para avaliação de indicadores biológicos. Assim, torna-se necessário a aplicação de métodos de avaliação dos efeitos dos poluentes utilizando peixes para demonstrar os primeiros sinais de estresse ambiental causados por contaminantes em diferentes níveis de organização biológica. As alterações morfológicas dos órgãos de peixe com grande superfície de exposição ao meio ambiente, como as brânquias, podem ser úteis como biomarcadores. O Thiodan® (Bayer), um inseticida e acaricida amplamente utilizado para o controle de insetos chupadores e mastigadores, que apresenta ação por contato e ingestão, foi escolhido para o presente estudo. O uso de espécies de pequeno porte, como o lambari Astyanax bimaculatus facilita a execução dos testes em laboratório, motivo da escolha da espécie. O presente trabalho determinou a CL50-96h e avaliou a influência do Thiodan® (Bayer) sobre a morfologia das brânquias de fêmeas da A. bimaculatus em maturação gonadal. Foram utilizadas 600 fêmeas de lambaris, divididas em cinco lotes, que permaneceram em sistema estático para determinação da CL50-96h e para o teste de toxicidade. O primeiro lote de 120 animais, utilizado para a determinação da CL50-96h, foi constituído de três repetições com cinco peixes cada para o grupo controle e para cada concentração de Thiodan® (1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 24,0; 48,0 e 96,0 &#956;g.L-1). Os demais lotes foram distribuídos em quatro experimentos distintos (peixe sem adaptação e sem alimentação, peixes sem adaptação e alimentados, peixes adaptados e sem alimentação, e peixes adaptados e alimentados). Para cada experimento, utilizou-se um grupo controle e três diferentes concentrações de Thiodan® (1,3; 2,6 e 5,2&#956;g/L), com três repetições de 10 peixes cada, durante 96h. Para estudos morfológicos emorfométricos, fragmentos de brânquias foram processados seguindo técnicas de rotina. Os parâmetros indicadores da qualidade da água utilizada para a realização dos experimentos encontraram-se em conformidade com as condições exigidas pela Resolução 357/2005 (CONAMA) para cultivo e criação de peixes tropicais. A CL50-96h obtida foi de 13,6&#956;g.L-1 com intervalo de confiança de 10,1 a 18,4&#956;g.L-1 (P<0,05). Durante os testes de toxicidade (96h), os grupos expostos apresentaram comportamento agressivo e tentativa de fuga na maior concentração (5,2&#956;g.L-1), agitação, nado errático e hiperventilação branquial em todas as concentrações nos quatro experimentos. Histologicamente observou-se hiperplasia, fusão lamelar, descolamento e destruição do epitélio lamelar. As análises morfométricas mostraram redução de número e diâmetro de células de cloreto, da espessura das lamelas primárias, e do comprimento das lamelas secundárias, entre e dentro dos experimentos (P<0,05). Também foi observado aumento do número de células de muco e dos pontos coincidentes com o tecido branquial (P<0,05) na maior concentração (5,2&#956;g.L-1) nos experimentos 1 e 2. Houve aumento (P<0,05) no diâmetro de aneurisma no experimento 1 em relação aos demais. No diâmetro de células de muco, na vasodilatação e na quantificação de foco de hemorragia entre os experimentos não houve diferença (P>0,05). A análise morfométrica mostrou que as alterações no experimento 1 (animais sem adaptação e sem alimentação) foram mais evidentes quando comparadas aos demais. Com base nesses resultados, pode se concluir que as brânquias de A. bimaculatus podem ser utilizadas como biomarcadores de contaminação ambiental pelo Thiodan®.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-28T13:56:34Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thayana C. Souza.pdf: 1459085 bytes, checksum: 85b651151434fbacf08384ea817e0dc6 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-28T13:56:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thayana C. Souza.pdf: 1459085 bytes, checksum: 85b651151434fbacf08384ea817e0dc6 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-11-28T13:57:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thayana C. Souza.pdf: 1459085 bytes, checksum: 85b651151434fbacf08384ea817e0dc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T13:57:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Thayana C. Souza.pdf: 1459085 bytes, checksum: 85b651151434fbacf08384ea817e0dc6 (MD5) Previous issue date: 2014-07-07 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Amazon has been the target of environmental contamination by the indiscriminate use of pesticides, putting at risk not only the biodiversity and abundance of aquatic organisms, but also the functioning and sustainability of the ecosystem. Little is known about the effects of these substances on Amazonian species, most ecotoxicological studies are developed with species of temperate environment which, in turn, are extrapolated to tropical regions. Furthermore, the maximum permissible values for various substances in use in Brazil are not established by law. The present study was proposed to determine the acute toxicity of four pesticides in five species of Amazonian fish (Carnegiella strigata, Colossoma macropomum, Corydoras schwartzi, Hemigrammus rhodostomus e Paracheirodon axelrodi), allowing properly devise strategies for their protection based on the use of the method of distribution of sensitivity of species and suggest maximum values allowed for each pesticide. First, the Lethal Concentration (LC50) of pesticides was determined, tested individually for the five species. Then, it was determined the concentrations of risk affecting 5% of species (HC5) using the concept of species sensitivity distribution (SED) comparing the data obtained in this study with data from both species of temperate environment obtained from the literature. The maximum allowable values for each pesticide in aquatic environments in the Amazon have been proposed. Based on the results of LC50, deltamethrin showed greater toxicity to fish, followed by glyphosate, imidacloprid and diuron. C. strigata was one of the most sensitive species to exposure to pesticides, whereas C. schwartzi was more resistant, with higher value of LC50. There was no significant difference in the distribution of sensitivity between the Amazonian and temperate species. HC5 values generated with the construction of SDRs have been proposed as starting point for the formulation of standards of water quality in the Amazon region, with regard to the fish group, with the maximum suggested values for deltamethrin, imidacloprid, glyphosate and diuron: 0,242 μg/L, 14.56 μg/L, 177,00 μg/L, 1.27 μg/L, respectively. Therefore, this work is one of the pioneers in conducting toxicity testing in Amazonian fish with pesticides, thus testing contributes to increase the number of ecotoxicological data and can be used as a starting point for discussions involving the determination of maximum allowable values for toxic substances to the aquatic environments of the Amazon. / A Amazônia vem sendo alvo de contaminação ambiental pelo uso indiscriminado de agrotóxicos, colocando não só em risco a biodiversidade e abundância de organismos aquáticos, mas também o funcionamento e sustentabilidade desse ecossistema. Pouco se sabe a respeito dos efeitos dessas substâncias em espécies amazônicas, a maioria dos estudos ecotoxicológicos são desenvolvidos com espécies de ambiente temperado que, por sua vez, são extrapolados para as regiões tropicais. Além disso, os valores máximos permitidos para diversas substâncias em uso no Brasil não estão estabelecidos em lei. O presente trabalho teve como proposta determinar a toxicidade aguda de quatro agrotóxicos em cinco espécies de peixes amazônicos (Carnegiella strigata, Colossoma macropomum, Corydoras schwartzi, Hemigrammus rhodostomus e Paracheirodon axelrodi), permitindo delinear corretamente estratégias para sua proteção com base na utilização do método de distribuição de sensibilidade de espécies e sugerir valores máximos permitidos para cada agrotóxico. Primeiramente, foi determinada a Concentração Letal Mediana (CL50) dos agrotóxicos, testados individualmente para as cinco espécies. Em seguida, foram determinadas as concentrações de risco que afetam 5% das espécies (HC5) utilizando o conceito de Distribuição de Sensibilidade de Espécies (DSE) comparando os dados obtidos neste estudo com dados de espécies de peixes de ambiente temperado obtidos da literatura. Os valores máximos permitidos para cada agrotóxico em ambientes aquáticos na Amazônia foram propostos. Com base nos resultados da CL50, a deltametrina apresentou maior toxicidade aos peixes, seguido pelo glifosato, diuron e imidacloprido. C. strigata foi uma das espécies mais sensíveis à exposição dos agrotóxicos, enquanto que C. schwartzi apresentou mais resistência, com valores de CL50 mais elevados. Não houve diferença significativa na distribuição de sensibilidade entre as espécies amazônicas e temperadas. Os valores de HC5 gerados com a construção das DSEs foram propostos como ponto partida para a formulação dos padrões de qualidade de água na região amazônica, no que diz respeito ao grupo dos peixes, sendo os valores máximos sugeridos para deltametrina, imidacloprido, glifosato e diuron: 0,242 μg/L, 14.56 μg/L, 177,00 μg/L, 1.27 μg/L, respectivamente. Portanto, esse trabalho é um dos pioneiros na realização de testes de toxicidade com agrotóxicos em peixes amazônicos, dessa forma, contribui para ampliar o conjunto de dados ecotoxicológicos e pode ser utilizado como ponto de partida para as discussões envolvendo a determinação de valores máximos permitidos de substâncias tóxicas para os ambientes aquáticos da Amazônia.

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Denise N de Bastos.pdf: 584150 bytes, checksum: 5ec6369c1a7266f038b37ea1a2b8ccdd (MD5) Previous issue date: 2013-06-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of this study was to avaluate the toxicity to Daphnia magna cultivated on a large scale and post-larvae of jundia (Rhamdia quelen) to Glyphosate herbicide and the reference substances. Were used daphnia with age between 2 and 26 hours of life, from large scale cultured arrays. There were performed six sensitivity assays that were composed of seven treatments and three replica, at concentrations of 0; 0.1; 0.3; 0.5; 0.7; 0.9 and 1.2 mg.L-1 of potassium dichromate, with 24 hours duration. The acute toxicity assays, with copper sulfate at concentrations of 0; 0.01; 0.025; 0.05; 0.075 and 0.10 mg.L-1, and to the glyphosate concentrations of 0; 11; 21; 31; 41 and 51 µg.L-1, with three and two replica respectively, and 48 hours duration. However the post-larvae of jundia were exposed to concentrations of 0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 and 2.5 mg.L-1 of glyphosate, per 96 hours. Each replica was composed of a bottle with 10 individuals. The chronic toxicity test, the daphnia were exposed to concentrations of 0, 2, 4, 6, 8 and 10 µg.L-1 of glyphosate, with 10 replica, being a daphnia per replica, evaluating the survival and fecundity in 21 days. For acute toxicity assays, was calculated mortality using the Median Effective Concentration (EC50) in each test. The mean EC50 for D. magna with potassium dichromate was 0.57 mg.L-1. The value of acute toxicity for copper sulphate was reached at a concentration of 0.034 mg.L-1. And for the glyphosate the EC50 of 32 µg.L-1 is toxic for the species. The chronic assay showed high rate of mortality, possibly the result of unfavourable conditions for the large scale cultivation of arrays, hurt his endurance. For the R. quelen the EC50 was achieved at 0.9 mg. L-1. The results showed that organisms of the species D. magna cultivated on a large scale can be used in acute toxicity tests, but not in chronic toxicity testing, for the assessment of water quality. / O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade de Daphnia magna cultivada em larga escala e pós-larvas do jundiá (Rhamdia quelen) ao herbicida Glifosato e a substâncias de referência. Foram utilizadas dáfnias com idade de 2 a 26 horas de vida, provenientes de matrizes cultivadas em larga escala. Foram realizados seis ensaios de sensibilidade que foram compostos por sete tratamentos e três réplicas, nas concentrações de 0; 0,1; 0,3; 0,5; 0,7; 0,9 e 1,2 mg.L-1 de dicromato de potássio, com duração de 24 horas. E os testes de toxicidade aguda, com sulfato de cobre nas concentrações de 0; 0,01; 0,025; 0,05; 0,075 e 0,10 mg.L-1, e para o glifosato as concentrações de 0; 11; 21; 31; 41 e 51 µg.L-1, com três e duas réplicas respectivamente, e duração de 48 horas. Já as pós-larvas de jundiá foram expostas às concentrações de 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 mg.L-1 de glifosato, por 96 horas. Cada réplica era composta de um frasco com 10 indivíduos. No teste de toxicidade crônica, as dáfnias foram expostas as concentrações de 0, 2, 4, 6, 8 e 10 µg.L-1 de glifosato, com 10 réplicas, sendo uma dáfnia por réplica, avaliando a sobrevivência e fecundidade em 21 dias. Para os experimentos de toxicidade aguda foi calculada mortalidade através da Concentração Efetiva Mediana (CE50) em cada teste. A média da CE50 para a D. magna com dicromato de potássio foi de 0,57 mg.L-1. O valor de toxicidade aguda para o sulfato de cobre foi alcançado na concentração de 0,034 mg.L-1. Já para o glifosato a CE50 de 32 µg.L-1 é toxica para a espécie. No teste crônico, a alta taxa de mortalidade possivelmente é resultado das condições desfavoráveis no cultivo das matrizes em larga escala, o que prejudicou sua resistência. Para o R. quelen a CE50 alcançada foi em 0,9 mg.L-1. Os resultados demostraram que organismos da espécie D. magna cultivadas em larga escala podem ser utilizados em testes de toxicidade aguda, mas não em testes de toxicidade crônica, para a avaliação da qualidade da água.