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As implicações da elevação da temperatura na duração da espermatogênese em Astyanax altiparanae (Characiformes, Characidae)

Quirino, Patricia Postingel. January 2017 (has links)
Orientador: Rosicleire Veríssimo Silveira / Resumo: Frente ao cenário de mudanças climáticas estabelecidas e consequentemente às alterações da temperatura global, torna-se essencial estudar os seus efeitos na espermatogênese dos animais. Sendo assim, objetivou-se caracterizar morfológica e estereológicamente os tipos celulares encontrados na espermatogênese do lambari Astyanax altiparanae, além de determinar as fases testiculares e a verificar a duração da espermatogênese em diferentes temperaturas. Para tal, noventa e seis espécimes machos e adultos de A. altiparanae foram mantidos em sistema de circulação fechada sob temperatura da água estabilizada à 27ºC (temperatura de conforto) e 32ºC. Posteriormente, os espécimes receberam pulsos de BrdU (bromodeoxiuridina) na concentração de 100 mg/Kg/dia por 2 dias consecutivos, sendo as coletas realizadas diariamente por um período de 15 dias. Os testículos foram removidos, fixados, processados, incluídos em historesina e seccionados a 3µm, submetidos a colorações de Hematoxilina/Eosina e a técnicas de imunodetecção de BrdU. Os resultados obtidos a partir da temperatura de conforto da espécie permitiram classificar as espermatogônias de A. altiparanae em A-indiferenciadas*, A-indiferenciadas, A-diferenciadas e espermatogônias B. Assim como, caracterizar o ciclo reprodutivo da espécie em Regredido, Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e em Regressão. A duração da espermatogênese foi determinada em aproximadamente seis dias para animais em 27°C e um dia para ani... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In view of the scenario of the established climate changes and the consequent changes in the global temperature, it is essential to study its effects on animal spermatogenesis. Therefore, the objective of this work was to characterize, morphologically and stereologically, the cell types found in spermatogenesis of the yellow-tetra Astyanax altiparanae, to determin the testicular phases and to verify the spermatogenesis duration at different temperatures. For this purpose, ninety-six male and adult specimens of A. altiparanae were kept in a closed circulation system under water temperature stabilized at 27ºC (comfort temperature) and 32ºC. Subsequently, the specimens received pulses of BrdU (bromodeoxyuridine) at a concentration of 100 mg/kg/day for 2 consecutive days, and samples were collected daily during a period of 15 days. Their testes were removed, fixed, processed in historesin and sectioned in 3 µm, submitted to Hematoxylin/Eosin and to BrdU immunodetcion. Partial results of the comfort temperature allowed to classify the A. altiparanae spermatogonia in Aind*, Aind, Adif and B. Moreover, the reproductive cycle of the species was classified in Regressed, Initial Maturation, Mid Maturation, Final Maturation and Regression. It was possible to conclude that the spermatogenesis duration was determined in approximately six days for animals at 27°C and one day for animals at 32°C. In addition, the elevated temperature was also responsible for increased cell proliferation in ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Influência antrópica no ambiente aquático sobre os processos fisiológicos associados à maturação oocitária em peixes teleósteos / Anthropic influence of aquatic environment in the physiological processes associated with oocyte maturation in teleost fish

Carlos Eduardo Tolussi 04 November 2016 (has links)
A ecotoxicologia emergiu como uma necessidade de avaliar e mitigar os impactos antrópicos no ambiente natural e nas comunidades viventes no local, utilizando uma gama de experimentos em campo e em laboratório. Dentre as diversas áreas estudadas a reprodução é um dos processos que podem ter seu desempenho diminuído devido à ação antrópica, sendo assim importante seu estudo na ecotoxicologia. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do ambiente impactado nos processos fisiológicos associados à maturação oocitária em fêmeas de Astyanax fasciatus. Fêmeas de A. fasciatus foram coletadas entre 2012 e 2014 e machos (como indicadores da presença de compostos estrogênicos) entre 2013 a 2014, com duas coletas a cada estação do ano em dois reservatórios, Ponte Nova (referência) e Billings (impactado). Amostras de água e sedimento foram também coletadas nos mesmos pontos para análise dos parâmetros físicos e químicos. Estes resultados foram comparados com a resolução CONAMA/357 e calculado o coeficiente de risco. Para ambos os sexos foram analisadas a expressão gênica da vitelogenina e do receptor de estradiol, a concentração plasmática de vitelogenina e estradiol. Foram também realizadas as análises de fecundidade relativa e absoluta, histologia das gônadas, assim como o cálculo dos índices gonadossomático e hepatossomático, apenas nas fêmeas. O coeficiente de risco mostrou que o reservatório Billings apresenta um alto risco para os metais e dos compostos orgânicos. Foram observados valores elevados na concentração plasmática de estradiol e expressão de vitelogenina em machos deste reservatório, na primavera de 2013, assim como foram observados valores mais elevados de fecundidade relativa e absoluta nas fêmeas, no inverno e primavera deste mesmo ano, em comparação com os animais do reservatório referência (Ponte Nova). Esses resultados sugerem que no inverno e primavera de 2013, os poluentes como os aqui analisados e outros aqui não detectados, podem ter interferido na reprodução em A. fasciatus do reservatório Billings. No entanto, é necessário destacar que essas alterações podem, em dado momento, prejudicar o processo de maturação oocitária, sendo então importante monitorar e realizar mais estudos de análise de risco ambiental no reservatório / The ecotoxicology has arisen as a need to evaluate and mitigate the anthropic impacts in wild environmental and in the local communities, using several bioassays and wild experiments. Among the several studied areas, the reproduction is a process that can have its performance reduced due to the anthropic impacts, showing the importance of studying these processes in ecotoxicologydy. The aim of this study was to evaluate the influence of the impaired environmental in the physiological processes associated with oocyte maturation of Astyanax fasciatus females. Astyanax fasciatus females were sampled between 2012 and 2014 and males (as indicators of the presence of estrogenic compounds) from 2013 to 2014, with two samplings at each season, in two reservoirs, Ponte Nova (reference) and Billings (impacted). Sediments and water were sampled in the same sites to evaluate the chemical and physical parameters. The results of the analysis were compared with the CONAMA/357 guidelines and the hazard risk was calculated. The gene expression of vitellogenin and estradiol receptor, vitellogenin and estradiol plasma level were performed in males and females. The relative and absolute fecundity, gonad histology, gonadosomatic and hepatosomatic index were evaluated only in females. The hazard risk at Billings reservoir was high for organic compounds and metals. Estradiol levels and vitellogenin gene expression were higher in males sampled in Billings in the spring/2013, as well as the relative and absolute fecundity, that were higher in the winter and spring of the same year, when compared with the animals from the reference site (Ponte Nova). These outcomes suggest that during winter and spring of 2013 the pollutants, as analyzed in this study, as well as others that were not detected, may have interfered in the reproductive process of A. fasciatus at Billings reservoir. However, it is necessary to observe that these alterations might, at a given time, impair the oocyte maturation process, being important to monitor and accomplish additional studies of the environmental risk assessment at Billings reservoir
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Influência antrópica no ambiente aquático sobre os processos fisiológicos associados à maturação oocitária em peixes teleósteos / Anthropic influence of aquatic environment in the physiological processes associated with oocyte maturation in teleost fish

Tolussi, Carlos Eduardo 04 November 2016 (has links)
A ecotoxicologia emergiu como uma necessidade de avaliar e mitigar os impactos antrópicos no ambiente natural e nas comunidades viventes no local, utilizando uma gama de experimentos em campo e em laboratório. Dentre as diversas áreas estudadas a reprodução é um dos processos que podem ter seu desempenho diminuído devido à ação antrópica, sendo assim importante seu estudo na ecotoxicologia. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do ambiente impactado nos processos fisiológicos associados à maturação oocitária em fêmeas de Astyanax fasciatus. Fêmeas de A. fasciatus foram coletadas entre 2012 e 2014 e machos (como indicadores da presença de compostos estrogênicos) entre 2013 a 2014, com duas coletas a cada estação do ano em dois reservatórios, Ponte Nova (referência) e Billings (impactado). Amostras de água e sedimento foram também coletadas nos mesmos pontos para análise dos parâmetros físicos e químicos. Estes resultados foram comparados com a resolução CONAMA/357 e calculado o coeficiente de risco. Para ambos os sexos foram analisadas a expressão gênica da vitelogenina e do receptor de estradiol, a concentração plasmática de vitelogenina e estradiol. Foram também realizadas as análises de fecundidade relativa e absoluta, histologia das gônadas, assim como o cálculo dos índices gonadossomático e hepatossomático, apenas nas fêmeas. O coeficiente de risco mostrou que o reservatório Billings apresenta um alto risco para os metais e dos compostos orgânicos. Foram observados valores elevados na concentração plasmática de estradiol e expressão de vitelogenina em machos deste reservatório, na primavera de 2013, assim como foram observados valores mais elevados de fecundidade relativa e absoluta nas fêmeas, no inverno e primavera deste mesmo ano, em comparação com os animais do reservatório referência (Ponte Nova). Esses resultados sugerem que no inverno e primavera de 2013, os poluentes como os aqui analisados e outros aqui não detectados, podem ter interferido na reprodução em A. fasciatus do reservatório Billings. No entanto, é necessário destacar que essas alterações podem, em dado momento, prejudicar o processo de maturação oocitária, sendo então importante monitorar e realizar mais estudos de análise de risco ambiental no reservatório / The ecotoxicology has arisen as a need to evaluate and mitigate the anthropic impacts in wild environmental and in the local communities, using several bioassays and wild experiments. Among the several studied areas, the reproduction is a process that can have its performance reduced due to the anthropic impacts, showing the importance of studying these processes in ecotoxicologydy. The aim of this study was to evaluate the influence of the impaired environmental in the physiological processes associated with oocyte maturation of Astyanax fasciatus females. Astyanax fasciatus females were sampled between 2012 and 2014 and males (as indicators of the presence of estrogenic compounds) from 2013 to 2014, with two samplings at each season, in two reservoirs, Ponte Nova (reference) and Billings (impacted). Sediments and water were sampled in the same sites to evaluate the chemical and physical parameters. The results of the analysis were compared with the CONAMA/357 guidelines and the hazard risk was calculated. The gene expression of vitellogenin and estradiol receptor, vitellogenin and estradiol plasma level were performed in males and females. The relative and absolute fecundity, gonad histology, gonadosomatic and hepatosomatic index were evaluated only in females. The hazard risk at Billings reservoir was high for organic compounds and metals. Estradiol levels and vitellogenin gene expression were higher in males sampled in Billings in the spring/2013, as well as the relative and absolute fecundity, that were higher in the winter and spring of the same year, when compared with the animals from the reference site (Ponte Nova). These outcomes suggest that during winter and spring of 2013 the pollutants, as analyzed in this study, as well as others that were not detected, may have interfered in the reproductive process of A. fasciatus at Billings reservoir. However, it is necessary to observe that these alterations might, at a given time, impair the oocyte maturation process, being important to monitor and accomplish additional studies of the environmental risk assessment at Billings reservoir
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Efeito do grau hierárquico de dominância na memória de lambaris (Astyanax altiparanae)

Nunes, Faeli Lugo January 2014 (has links)
Orientadora : Profª. Drª. Marisa Fernandes de Castilho / Dissetação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Fisiologia. Defesa: Curitiba, 26/09/2014 / Inclui referências / Área de concentração : Bioquímica / Resumo: O objetivo desse estudo foi testar o papel do grau hierárquico de dominância na aprendizagem e memória em lambaris (Astyanax altiparanae). Peixes foram pareados por quatro dias, ao longo dos quais foram identificados o dominante e submisso na dupla. Posteriormente, foram individualmente submetidos ao teste de esquiva inibitória, cujo aparato se constituiu num aquário retangular onde um estímulo aversivo (barra de ferro controlada por um sistema de roldanas) ocupava cerca de 50% da sua extensão; o estímulo era abaixado toda vez que o peixe se dirigia para esse lado (fase 1). Imediatamente após o teste, o grau hierárquico de dominância dos animais foi invertido, peixes dominantes se tornaram submissos e peixes submissos se tornaram dominantes. Os indivíduos permaneceram pareados por mais quatro dias e novamente realizaram o teste de memória aversiva (fase 2). O tempo que o animal demorou a se dirigir a área do estímulo, número de vezes que ele se dirigiu a essa área e tempo decorrido até o peixe não se dirigir mais a essa área foram registrados. Peixes dominantes que mantiveram essa posição hierárquica e aqueles que sofreram inversão do status social obtiveram o melhor desempenho, reduzindo o total de idas em direção ao estímulo aversivo e o tempo para evitá-lo quando realizaram o teste pela segunda vez. Concluímos que o status social de dominância favorece o processo de aprendizagem - animais dominantes apresentaram melhor desempenho na evocação da memória comparativamente aos submissos e esse desempenho independe da posição hierárquica assumida posteriormente, sugerindo que a submissão hierárquica não compromete a consolidação das informações aprendidas. Animais submissos, por outro lado, apresentam comprometimento da memória, com baixo desempenho no processo de aprendizagem independente do grau hierárquico assumido posteriormente a essa fase de aquisição da informação. Palavras – chave: interação social; estresse; memória; Astyanax altiparanae. / abstract: The aim of this study was testing the role of dominance hierarchy in learning and memory of Astyanax altiparanae. Adults fishes were paired for four days, during which were identified as dominant and subordinate. Subsequently, the animals were individually submitted to the inhibitory avoidance test, which apparatus is constituted of a rectangular tank in which an aversive stimulus (iron rod controlled by a pulley system) occupied about 50% of its length; the stimulus was triggered when the fish swam towards it (phase 1). After completing the test, the dominance hierarchy was reversed, so dominant fishes became subordinate and subordinate became dominant. Subjects were paired for four days more and then performed the aversive memory tested again (phase 2). Data concerning the time for the fish to address the area of the stimulus, number of times they went to that area and time needed until they avoid this area were recorded. Dominant individuals who maintained this status as well as the dominant fish who suffered reversal of this hierarchy achieved the best performance, reducing total of visits towards the aversive stimulus and the time to avoid it when they repeated the avoidance task. We conclude that dominant animals have better performance in information acquisition (learning) compared to subordinate, dominant animals showed better performance for memory recall when compared to subordinate and that this performance is independent of the hierarchical position subsequently assumed, suggesting that the hierarchical submission doesn’t compromise the consolidation of information learned. Subordinate animals, on the other hand, demonstrated impairments in associative memory, with the worst performance in the learning process and therefore in evoking this memory, independently of the hierarchical level assumed later on. Keywords: social interaction; stress; memory; Astyanax altiparanae.
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Status sanitário da produção de lambari-do-rabo-amarelo Astyanax lacustris /

Margarido, Yvana Melyssa Mandú January 2020 (has links)
Orientador: Fabiana Pilarski / Resumo: Dentre os peixes nativos com potencial para a piscicultura, destaca-se o Astyanax lacustris, espécie de pequeno porte, pelágica, com hábito alimentar onívoro e amplamente distribuída nas bacias hidrográficas neotropicais. Esta espécie é comum na região sudeste do Brasil e têm se destacado pelo potencial para a produção comercial. Todavia, a intensificação da produção tem acarretado problemas de saúde, principalmente causados por parasitos, em que relatos sobre o status sanitário da espécie são escassos. Assim, este estudo teve como objetivo identificar os principais parasitos que afetam o A. lacustris e determinar os índices ecológicos do parasitismo. O estudo foi desenvolvido no Laboratório de Microbiologia e Parasitologia de Organismos Aquáticos, do Centro de Aquicultura da UNESP (LAPOA) em parceria com pisciculturas comerciais de lambari, localizadas no município de Buritizal/SP e Jaboticabal/SP. Para tanto, 270 peixes foram submetidos ao exame parasitológico através de raspado da pele e brânquias, análise de órgãos internos, como fígado, rim, cérebro e trato gastrointestinal, sendo este material observado em microscópio. Foi verificada a ocorrência de protozoário ciliado (tricodinídeos), protozoário mastigóforo (Piscinoodinium pillulare), nematódeos cistos de mixosporídeos e monogenéticos. A maior prevalência foi de tricodinídeos, sendo a espécie Tricodina heterodentata primeiramente relatada no lambari como ectoparasito e os mixosporídeos (Henneguya sp.) como endoparasit... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Among the native fish with potential for aquaculture, Astyanax lacustris stands out, a small, pelagic species with an omnivorous dietary and widely distributed in neotropical watersheds. This species is common in the southeastern region of Brazil and has stood out for its potencial for commercial production has caused health problems, mainly caused by parasites in which reports about the health status os the species are scarce. Thus, this study aims to identify the main parasites affecting A. lacustris and to determine the ecological indices of parasitism. The study was developed at the Laboratory of Microbiology and Parasitology of Aquatic Organisms of the UNESP Aquaculture Center (LAPOA) in partnership with commercial lambari fish farms, located in Buritizal/SP and Jaboticabal/SP. For this purpose, 270 fish were submitted to parasitological examination through skin scraping and gills, analysis of internal organs, such as liver, kidney, brain and gastrointestinal tract, this material being observed under a microscope. The ocurrence of ciliated protozoan (trichodina), mastigophore protozoan (Piscinoodinium pillulare), nematodes, myxozoa cysts and monogenetic were found. The highest prevalence was observed by parasitism of trichodinids as ectoparasites, being Trichodina heterodentata as the first species related to A. lacustris and myxozoa (Henneguya sp.) as endoparasites. The results of water analyzes, especially the high phosphorus level, may indicate the need for intervetio... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Níveis de proteína bruta em dietas de lambari tambiú dos 0,7 aos 4,8 gramas de peso / Crude protein levels in diets for lambari tambiú with 0,7 to 4,8 grama of live wight

Serafini, Moacyr Antonio 06 August 2003 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-11T17:31:55Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 210314 bytes, checksum: afeb1e39d403809e37ee0f3578adfc1a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T17:31:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 210314 bytes, checksum: afeb1e39d403809e37ee0f3578adfc1a (MD5) Previous issue date: 2003-08-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Com objetivo de determinar os níveis de proteína bruta (PB) da dieta para alevinos de lambari tambiú (Astyanax bimaculatus), nome vulgar tambiú. Foram utilizados 1.000 alevinos com peso inicial de 0,70 ± 0,0046 g e 100 dias de idade, mantidos em 20 aquários de 600 litros, dotados de abastecimento de água individual e em ambiente de estufa plástica transparente. O experimento foi realizado segundo delineamento inteiramente ao acaso com cinco tratamentos (25; 29; 33; 37 e 41 % de PB), quatro repetições e cinqüenta peixes por unidade experimental. Os peixes foram alimentados ad libitum em quatro refeições diárias, durante 60 dias. Avaliaram-se o ganho de peso, o consumo de ração aparente, a conversão alimentar aparente, a taxa de eficiência protéica, a eficiência de retenção de nitrogênio, a umidade, proteína e gordura corporais e porcentagens de nitrogênio e de gordura no ganho de peso. Para a conversão alimentar aparente e para a porcentagem de nitrogênio no ganho de peso não houve efeito dos níveis de PB. Os demais parâmetros avaliados foram influenciados de forma linear ou quadrática em função dos níveis protéicos utilizados na dieta. Concluiu-se que a exigência de PB para o lambari tambiú é 37,8 % de PB, por proporcionar as melhores respostas em ganho de peso e gordura no ganho de peso. / One thousand fingerlings of lambari tambiú (Astyanax bimaculatus) with average initial weight of 0.70 ± 0.0046 g, placed in 20 aquaria (600 L) with water renewal and controlled temperature into plastic greenhouse, were used to determine crude protein (CP) requirements. The experiment was carried out according to a completely randomized design, with five treatments (25, 29, 33, 37 and 41 % CP), four replicates and fifty fishes per experimental unit. The fishes were fed ad libitum four times a day, during 60 days. Total weight gain, apparent diet consumption, apparent feed : gain ratio, protein efficiency rate, nitrogen retention rate, carcass humidity, protein and fat contents, nitrogen and fat percentage on weight gain were evaluated. For apparent feed conversion and for nitrogen percentage on weight gain, no effects of CP were observed. The all other evaluated parameters were influenced in a linear or quadratic way by protein levels. It was concluded that crude protein requirement for lambari tambiú xicorresponds to 37.8 %, since this level provides the best responses in weight gain, specific growth rate, and carcass fat composition.
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Protocolos de indução hormonal com extrato bruto de hipófises de carpa e o perfil da prostaglandina F2α durante a maturação final e ovulação em Astyanax altiparanae /

Figueiredo-Ariki, Daniel Guimarães January 2019 (has links)
Orientador: Sérgio Ricardo Batlouni / Resumo: Considerando as inconsistentes informações acerca dos protocolos de indução hormonal do Astyanax altiparanae em cativeiro, o principal objetivo deste estudo foi comparar o desempenho reprodutivo utilizando ou não extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC). Avaliamos também o efeito de diferentes doses de EBHC sobre o desempenho reprodutivo em dois distintos lotes de peixes. Em todos os experimentos, avaliamos se um eventual ganho no desempenho reprodutivo estaria associado com alterações na morfologia dos ovários e/ou com concentrações séricas de prostaglandina F2α (PGF2α). Nos experimentos 1 (lote capturado na natureza) e 2 (lote nascido em cativeiro), aplicamos 3, 6 e 9 mg.kg-1 de EBHC (T1, T2 e T3 respectivamente), e um grupo controle (C). No experimento 3 (mesmo lote do experimento 2), comparamos o desempenho reprodutivo com dose única e fracionada (10% e 90% da dose total, com intervalo de 12 horas entre as doses) de EBHC, sendo 6 mg.kg-1 em dose única (H1) ou fracionada (H2) e seus respectivos controles (C1 e C2). Nos experimentos 1 e 2 o desempenho reprodutivo foi similar entre os grupos, porém os grupos T2 e T3 apresentaram elevações de PGF2α no momento da ovulação, além de variações significativas nas frequências de estruturas ovarianas, que indicam aumento da ovulação e /ou a maturação final. No experimento 3, a dose fracionada de 6 mg.kg-1 de EBHC causou um aumento na proporção de réplicas com desova e consequentemente, no volume total de desova e no número total de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the inconsistent information about the hormonal induction protocols of Astyanax altiparanae in captivity, the main objective of this study was to compare the reproductive performance with or without crude carp pituitary extract (EBHC). We also evaluated the effect of different doses of EBHC on the reproductive performance of two distinct broodstocks. In all experiments, we evaluated whether a possible gain in reproductive performance would be associated with changes in ovarian morphology and / or with serum prostaglandin F2α (PGF2α) concentrations. In the experiments 1 (wild caught) and 2 (born in captivity), we applied 3, 6 and 9 mg.kg-1 EBHC (T1, T2 and T3 respectively), and one control group (C). In the experiment 3 (same broodstock as in experiment 2), we compared reproductive performance with single and fractional doses (10% e 90% of the total, with 12 hours of interval between doses) of EBHC, being: 6 mg.kg-1 in single dose (H1) or fractional (H2) and their respective controls (C1 and C2). In the experiments 1 and 2 the reproductive performance was similar between groups, but groups T2 and T3 presented elevations of PGF2α at the time of ovulation, besides significant variations in the frequencies of ovarian structures, which indicates increase in ovulation and / or final maturation. In the experiment 3, the fractional dose of 6 mg.kg-1 EBHC caused an increase in the proportion of replicates with spawn events and consequently, in the total volume of eggs and ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Efeitos do Thiodan® (endosulfan) nas brânquias de Astyanax aff. bimaculatus / Effects of Thiodan® (endosulfan) in the gills of Astyanax aff. bimaculatus

Moraes, Joelma Crespo 04 August 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1671012 bytes, checksum: 403ddd0d13dc2890004dae5a13c0606b (MD5) Previous issue date: 2011-08-04 / One of the factors most relevant in environmental pollution that involves the ecosystem is the contamination by pesticides, especially when these are applied indiscriminately. Between these compounds are pesticides with several chemical compositions that are used with different aims. The aquatic environment has been considered the most relevant toxic receptor compartment, and so has attracted attention of researchers for evaluation of biological indicators. Thus, it becomes necessary to use methods of assessment of the effects of pollutants using fish to show the first signs of environmental stress caused by contaminants in different levels of biological organization. The morphological disorders in fish organs with wide surface area exposures to the environment, such as the gills, may be useful as biomarkers. The Thiodan® (Bayer), an insecticide and acaricide widely used to control chewing and sucking insects was chosen for this study. The use of small species, such as lambari Astyanax aff. bimaculatus, facilitates the execution of laboratory tests, reason for the choice of these species. This study determined the LC50-96h with 120 animals, divided in one as control group and seven concentrations of Thiodan® (1.5, 3, 6, 12, 24, 48 and 96 &#956;g.L-1) with three replicates of five fish each. Also it has been evaluated the influence of Thiodan® on the morphology of the gills of female A. bimaculatus. The fish were distributed in four separate experiments (fish without adaptation and without food, fish without adaptation and fed, fish adapted and without food, and fish adapted and fed). For each experiment were used a control group and three concentrations of Thiodan® (1.3, 2.6 and 5.2 &#956;g.L-1) lasting 96 hours, with three replicates of 10 fish in each aquarium. For morphological and morphometric studies, fragments of gills were processed following routine techniques. The water quality was measured and was according to the Resolution 357/2005 (CONAMA). The result of LC50-96h was 13.6&#956;g.L-1 with a confidence interval from 10.1 to 18.4&#956;g.L-1 (P<0.05). During the toxicity tests (96h) the exposed groups showed aggressive behavior and escape attempt in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1), restlessness, erratic swimming and branchial hyperventilation at all concentrations in four experiments. Histologically there was hyperplasia, lamellar fusion, detachment and destruction of the lamellar epithelium. The morphometric analysis showed a reduction of number and diameter of chloride cells, the thickness of the primary lamellae, and the length of the secondary lamellae, within and between experiments (P<0.05). It was observed an increase in the number of mucus cells and coincident points with the gill tissue (P<0.05) in the highest concentration (5.2&#956;g.L-1) in experiments 1 and 2. There was an increase (P<0.05) in the diameter of the aneurysm in the experiment 1 when compared to the others. There was no difference (P>0.05) in the diameter of mucus cells, vasodilation, and the amount of the hemorrhage focus between the experiments. Morphometric analysis showed that changes in experiment 1 were more evident when compared to others. Based on these results the experiment showed that the gills of A. bimaculatus can be used as biomarkers of environmental contamination by Thiodan® but the fish should not be used as bioindicator organism, because it has low sensibility to this product. / Um dos fatores de maior relevância na poluição ambiental e que compromete um ecossistema é a contaminação por agrotóxicos, principalmente quando esses são aplicados de forma indiscriminada. Entre esses compostos estão pesticidas que possuem diferentes composições químicas e são utlizados com diversas finalidades. O ambiente aquático tem sido considerado o mais relevante compartimento receptor de tóxicos, e por isso tem despertado interesse de pesquisadores para avaliação de indicadores biológicos. Assim, torna-se necessário a aplicação de métodos de avaliação dos efeitos dos poluentes utilizando peixes para demonstrar os primeiros sinais de estresse ambiental causados por contaminantes em diferentes níveis de organização biológica. As alterações morfológicas dos órgãos de peixe com grande superfície de exposição ao meio ambiente, como as brânquias, podem ser úteis como biomarcadores. O Thiodan® (Bayer), um inseticida e acaricida amplamente utilizado para o controle de insetos chupadores e mastigadores, que apresenta ação por contato e ingestão, foi escolhido para o presente estudo. O uso de espécies de pequeno porte, como o lambari Astyanax bimaculatus facilita a execução dos testes em laboratório, motivo da escolha da espécie. O presente trabalho determinou a CL50-96h e avaliou a influência do Thiodan® (Bayer) sobre a morfologia das brânquias de fêmeas da A. bimaculatus em maturação gonadal. Foram utilizadas 600 fêmeas de lambaris, divididas em cinco lotes, que permaneceram em sistema estático para determinação da CL50-96h e para o teste de toxicidade. O primeiro lote de 120 animais, utilizado para a determinação da CL50-96h, foi constituído de três repetições com cinco peixes cada para o grupo controle e para cada concentração de Thiodan® (1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 24,0; 48,0 e 96,0 &#956;g.L-1). Os demais lotes foram distribuídos em quatro experimentos distintos (peixe sem adaptação e sem alimentação, peixes sem adaptação e alimentados, peixes adaptados e sem alimentação, e peixes adaptados e alimentados). Para cada experimento, utilizou-se um grupo controle e três diferentes concentrações de Thiodan® (1,3; 2,6 e 5,2&#956;g/L), com três repetições de 10 peixes cada, durante 96h. Para estudos morfológicos emorfométricos, fragmentos de brânquias foram processados seguindo técnicas de rotina. Os parâmetros indicadores da qualidade da água utilizada para a realização dos experimentos encontraram-se em conformidade com as condições exigidas pela Resolução 357/2005 (CONAMA) para cultivo e criação de peixes tropicais. A CL50-96h obtida foi de 13,6&#956;g.L-1 com intervalo de confiança de 10,1 a 18,4&#956;g.L-1 (P<0,05). Durante os testes de toxicidade (96h), os grupos expostos apresentaram comportamento agressivo e tentativa de fuga na maior concentração (5,2&#956;g.L-1), agitação, nado errático e hiperventilação branquial em todas as concentrações nos quatro experimentos. Histologicamente observou-se hiperplasia, fusão lamelar, descolamento e destruição do epitélio lamelar. As análises morfométricas mostraram redução de número e diâmetro de células de cloreto, da espessura das lamelas primárias, e do comprimento das lamelas secundárias, entre e dentro dos experimentos (P<0,05). Também foi observado aumento do número de células de muco e dos pontos coincidentes com o tecido branquial (P<0,05) na maior concentração (5,2&#956;g.L-1) nos experimentos 1 e 2. Houve aumento (P<0,05) no diâmetro de aneurisma no experimento 1 em relação aos demais. No diâmetro de células de muco, na vasodilatação e na quantificação de foco de hemorragia entre os experimentos não houve diferença (P>0,05). A análise morfométrica mostrou que as alterações no experimento 1 (animais sem adaptação e sem alimentação) foram mais evidentes quando comparadas aos demais. Com base nesses resultados, pode se concluir que as brânquias de A. bimaculatus podem ser utilizadas como biomarcadores de contaminação ambiental pelo Thiodan®.
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Caracterização molecular dos GnRHs de Astyanax altiparanae (Garutti e Britski, 2000), seu efeito in vivo, e sua expressão temporal ao longo do estímulo reprodutivo. / Molecular characterization of GnRH of the Astyanax altiparanae (Garutti and Britski, 2000), its effect in vivo, and its temporal expression during the reproductive stimulus.

Chayrra Chehade Gomes 10 April 2015 (has links)
Sendo o GnRH a molécula capaz de iniciar a cascata hormonal reprodutiva, realizamos a clonagem, analisamos os efeitos da indução à reprodução e as funções dos GnRHs de A. altiparanae. Como resultados, obtivemos as sequências dos cDNAs do GnRH2 e GnRH3. Quando induzidos à reprodução, a desova foi às 20 h pós-estímulo (hpe) em fêmeas e às 16 hpe em machos, o aumento da expressão do mRNA de GnRH3 ocorreu às 8 hpe em fêmeas, e o aumento da expressão do mRNA de GnRH2 foi às 0 hpe em machos. Com relação ao efeito dos GnRHs, todos estimularam a expressão do mRNA de &beta;LH, mas não de &beta;FSH, e só o GnRH2 foi capaz de elevar o MIS e causar a desova. Como conclusão, temos que as sequências dos cDNAs dos GnRHs se mostraram conservadas; a indução à reprodução por redução do nível da água foi eficaz; em cativeiro, a espécie teve desenvolvimento assincrônico; o GnRH2 provavelmente está ligado ao comportamento reprodutivo, e o GnRH3 é a possível forma hipofisiotrópica. Por fim, só o GnRH2 desencadeou toda a cascata hormonal. / The study on reproduction in fish has been acquired great importance in last years, mainly for the benefit of threatened species. During the reproductive process, the hypothalamic neurons synthesize and release GnRH that stimulates the pituitary cells to release FSH and LH, which, in turn, promote the gonadal maturation. In fact, the morphological changes in gonads are the result of the endocrine action of the reproductive axis, in which the GnRH is the key molecule to starting the reproductive axis control. Thus, the knowledge about the GnRH, as well as about the gonadal morphological changes in the spawning might contribute to effectiveness of reproduction. Therefore, in this work, with Astyanax altiparanae as a model, we made the molecular characterization of the GnRHs, and we analyzed the gonadal morphological changes during the reproductive stimulus. In addition, we evaluated the role of injected GnRHs in vivo. As results, we obtain the cDNA complete sequence of preproGnRH2 (612bp) and preproGnRH3 (407bp) of A. altiparanae. Regarding the induction of reproduction by water level drawdown, the released of gametes occurred at 20 hours after stimulus in female and at 16 hours after stimulus in males, the mRNA expression of GnRH3 increased at 8 hours after stimulus in female and the mRNA expression of GnRH2 increased at 0 hours in males. Regarding the effects of injected GnRH, all of them stimulated the &beta;LH but not &beta;FSH mRNA expression, and only the GnRH2 was able to rise the MIS and stimulate the released of gametes. We conclude that the cDNAs sequences of preproGnRH2 and preproGnRH3 were conserved, although there is a change in the amino acid at the position 8 of the GnRH3 decapeptide of A. altiparanae. Furthermore, the induced reproduction by water level drawdown was effective, and in captivity, the A. altiparanae has an asynchronous development with splitted spawning during the breeding season. The analysis of the animals submitted to the reproductive stimulus allowed us to suggest that in A. altiparanae, the GnRH2 probably has a role in sexual behavior and the GnRH3 possibly is the hypophysiotropic form. Finally, analyzing the GnRH effects, we observed that only the GnRH2 was able to start the entire reproductive hormonal cascade, leading the animal to spawning.
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Gonadotropinas e seus receptores em Astyanax altiparanae (Teleostei, Characiformes): caracterização molecular e expressão espaço-temporal durante o ciclo reprodutivo em cativeiro. / Gonadotropins and their receptors in Astyanax altiparanae (Teleostei, Characiformes): molecular characterization and spatio-temporal expression during the reproductive cycle in captivity

Lázaro Wender Oliveira de Jesus 01 July 2016 (has links)
A partir da hipófise de Astyanax altiparanae foram clonados e caracterizados os cDNAs completos para fshb, lhb e gpha. Das gônadas, foram clonados os cDNAs para fshr e lhr. As análises filogenéticas destes genes demonstram uma proximidade com as sequências homólogas das ordens Siluriformes e Cypriniformes. Por meio de qPCR, detectamos que a expressão dos mRNAs para as gonadotropinas foi restrita à hipófise, ao passo que dos receptores foi restrita às gônadas. Foi detectado que os mRNAs/proteínas para subunidades beta são expressas por diferentes populações de células gonadotrópicas. Nas gônadas, ambos receptores foram localizados nas células de Sertoli e Leydig, bem como nas células foliculares e da teca de oócitos a partir de crescimento secundário. Então, os níveis de expressão gênica das subunidades das gonadotropinas e seus receptores, juntamente como os níveis plasmáticos de esteroides sexuais foram avaliados e relacionados com a cinética da gametogênese durante o ciclo reprodutivo anual de machos e fêmeas em cativeiro. / From Astyanax altiparanae pituitaries, we cloned the full-leght cDNAs coding for fshb, lhb e gpha. From gonads, we cloned the full-length cDNAs for fshr and lhr. Phylogenetic analysis revealed that all five sequences showed the highest identity degree with homologous sequences from Siluriformes and Cypriniformes, respectively. Using qPCR, we observed that gonadotropin subunits expression were restricted to the pituitary gland, just like their receptors were restricted to the gonads. We also observed that both gonadotropin beta subunits mRNAs/proteins are expressed by distinct populations of gonadotropes at pituitary. In the gonads, both receptors were detected on Sertoli and Leydig cell, as well as on ovaries were located on follicular and theca cells, in oocytes starting from secondary growth. Then, gene expression levels of gonadotropins subunits mRNAs and their receptors were assessed, in parallel to plasma level of sex steroids, and evaluated according to gemetogenesis during the annual reproductive cycle of males and females kept in captivity.

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