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Estimativa da razão sexual de Lepidochelys olivacea (Testudines, Cheloniidae) no Espírito Santo, Brasil

VASCONCELOS, D. G. 07 April 2017 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T23:27:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10790_79 -Daniele Giulianna de Vasconcelos.pdf: 2043181 bytes, checksum: 7ebde14210ce97703251bb63885645af (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Mundialmente são listadas sete espécies de tartarugas marinhas, divididas em duas famílias Dermochelyidae e Cheloniidae, das quais cinco ocorrem no Brasil: Lepidochelys olivacea, Chelonia mydas, Eretmochelys imbricata, Caretta caretta e Dermochelys coriacea. As tartarugas marinhas são répteis cosmopolitas, com migrações de centenas a milhares de quilômetros entre as áreas de alimentação e desova. Lepidochelys olivacea, conhecida como tartaruga-oliva é a menor dentre as tartarugas marinhas encontradas em águas Brasileiras. O estado do Espírito Santo é considerado área secundária de nidificação para a espécie, por apresentar um número reduzido de desovas. Os quelônios marinhos apresentam determinação sexual dependente da temperatura do ambiente onde se encontram. A razão sexual desses animais está diretamente relacionada à temperatura do solo e ao tempo de incubação dos ninhos, na qual temperaturas mais altas produzem fêmeas, enquanto os machos são produzidos em temperaturas amenas. Existe um período sensível para a determinação do sexo, e este ocorre em torno do terço médio da incubação (20º ao 41º dia). Uma razão sexual de 1:1 (50% machos e 50% fêmeas) é produzida quando os embriões são expostos, no segundo terço de incubação, à chamada temperatura pivotal. O procedimento mais usual na identificação do sexo em quelônios recém-nascidos é uma análise histológica das gônadas, visto que os filhotes não possuem dimorfismo sexual. O trabalho de campo foi realizado no litoral norte do município de Linhares, Espírito Santo, entre a foz do rio Doce, a vila de Povoação e o balneário de Pontal do Ipiranga na temporada reprodutiva de 2015/16. Através de busca ativa foram encontrados os ninhos de Lepidochelys olivacea e inserido para registro das temperaturas um data logger (termômetro) que monitorou a temperatura durante todo o período de incubação e retirado no momento da eclosão dos filhotes. Monitoramos a temperatura de 15 ninhos de L. olivacea, esses ninhos registraram durante todo o período de incubação temperaturas entre 29ºC e 32,5ºC. No segundo terço, os valores de ficaram entre 31°C, dentro da temperatura pivotal para espécie em estudo. A temperatura média dos ninhos com a temperatura média do ambiente externo, foram significativamente diferentes (valor p=0,000), sendo que a temperatura média dentro dos ninhos (30,93°C) foi maior que a externa (25,59°C). O número médio de filhotes machos foi significativamente igual ao número médio de filhotes fêmeas (valor-p=0,782). Analisando a temperatura com os dias de incubação, ficou evidente que quanto maior a temperatura média do ninho, menor tenderá a ser o tempo de incubação. O número de ninhos, assim como o tempo de incubação analisados em temporadas passadas (entre 2003/04 a 2015/16), uma vez que o valor da temperatura está relacionado aos dias de incubação, observamos ao longo dos anos de 2003/04 a 2015/16 que o número médio de dias de incubação dos ninhos diminuiu ao longo do tempo e a redução média foi maior na base PV. Estimamos a razão sexual em 1:1, com 50% fêmeas e 50% machos na maioria dos ninhos estudados, e a sexagem dos filhotes também indicou não ocorrer diferença significativa entre os sexos.
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Biologia reprodutiva de surubins do Iguaçu, Steindachneridion melanodermatum, em condições de cativeiro /

Tessaro, Lucelia. January 2015 (has links)
Orientador: Irani Quagio Grassiotto / Coorientador: Robie Allan Bombardelli / Banca: Evoy Zaniboni Filho / Banca: Hugo Pereira Godinho / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Resumo: Entender a dinâmica e os eventos reprodutivos de cada espécie é essencial para o controle e melhoria da reprodução em cativeiro. O surubim do Iguaçu faz parte um programa de repovoamento do rio Iguaçu e suas proles provêm de reprodução induzida, porém aspectos básicos de sua biologia reprodutiva, como idade em que acontece o primeiro ciclo de reprodução e os meses que representam o período reprodutivo, são desconhecidos ou pouco explorados. O trabalho foi conduzido a fim de levantar informações a respeito do desenvolvimento reprodutivo da espécie, em uma população de cativeiro. Foram utilizados peixes juvenis (n≈154), machos e fêmeas, a partir de um ano de idade que foram acompanhados, mensalmente, durante 24 e 36 meses, respectivamente. Foram avaliados parâmetros referentes ao desenvolvimento gonadal, alterações celulares e flutuação de esteroides sexuais (estradiol e testosterona) ao longo do tempo. Nas condições do experimento, os animais apresentaram crescimento corporal e ganho de peso gradual. Fêmeas apresentaram desenvolvimento sexual tardio e permaneceram imaturas até 48 meses (4 anos de idade). Observou-se o desenvolvimento celular e alteração nos níveis de esteroides, que acompanharam os picos verificados para os machos. Os machos apresentaram ciclo reprodutivo do primeiro para o segundo ano de vida e todas as fases reprodutivas foram observadas. O padrão de desenvolvimento gonadal, aliado às modificações celulares e flutuação de esteroides indica o período reprodutivo dos machos nos meses de setembro a novembro (primavera) / Abstract: Understand events and reproductive dynamics is essential for the appropriate management and control of reproductive function in captivity. The species, ―surubim do Iguaçu‖ is include in Iguaçu river reintroduction programs and offspring's were obtain by induce spawning, but reproductive biology aspects, as first maturation age and reproductive season are lower explored or no available. The research was realized to provide information about surubim's reproductive development, in captive conditions. Were evaluated juvenile individuals, with one year old, every month due 24 and 36 months, to male and female, respectively. Were evaluated gonad developments, cell modifications and steroids fluctuations (estradiol and testosterone), during all experimental time. The fish showed gradative growth and weight gain. Female present slow sexual development and stay in immature status after 48 months (4 years age). Cellular modifications and steroids elevation levels were verified, and peaked of steroids occur in same time of male peaked. Male showed reproductive cycle with two years old and all reproductive phases of were observed. The gonadal development with to cellular changes and steroids fluctuation indicates the breeding season the males in the months from September to November (spring) / Doutor
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Identificação do sexo de psitacídeos (Amazona aestiva) por meio da avaliação gonadal, utilizando a tomografia computadorizada (TC) /

Lehmkuhl, Ricardo Coelho. January 2010 (has links)
Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de tomografia computadorizada como meio da visibilização e identificação dos órgãos reprodutivos (gônadas). Utilizou-se 38 aves da espécie Amazona aestiva, com sexo indeterminado e idade superior a cinco anos, para realizar o exame tomográfico utilizou-se anestesia dissociativa a base de quetamina e xilazina. As aves foram posicionadas em decúbito dorsal, e realizou-se os cortes axiais com intervalo de um milímetro. As imagens tomográficas adquiridas foram submetidas à reconstrução multiplanar (MPR) com cortes dorsais e sagitais, possibilitando a caracterização das gônadas tanto masculina, quanto feminina, com 100% de eficiência, confirmadas por meio de análise comparativa com técnica de polimorfismo de DNA, demonstrando a eficácia da tomografia computadorizada na avaliação e sexagem de psitacídeos da espécie Amazona aestiva / Abstract: The aim of this study was to evaluate the technique of computed tomography (CT) to visualize and identify the reproductive organs (gonads). Thirty-eight Amazona aestiva parrots of unknown sex, older than 5 years of age were used. For anesthesia, ketamine and xylazine were administered. The birds were placed in dorsal recumbency for CT and images were acquired with axial slices at 1-mm collimation. Multiplanar reconstruction (MPR) was performed using dorsal and sagittal slices in order to identify male and female gonads, reaching 100% efficiency as confirmed by the DNA polymorphism technique, so demonstrating the efficacy of the tomography for sexing Psittacidae parrots of the species Amazona aestiva / Orientador: Luiz Carlos Vulcano / Coorientador: Carlos Roberto Teixeira / Banca: Vania Maria de Vasconcelos Machado / Banca: Sheila Canevesse Rahal / Banca: Masao Iwasaki / Banca: João Batista da Cruz / Doutor
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Processo de diferenciação gonodal em Pseudoplatystoma fasciatum e tentativa de feminilização com 17β-estradiol

Valentin, Fernanda Nogueira [UNESP] 07 June 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-07Bitstream added on 2014-08-13T18:00:56Z : No. of bitstreams: 1 000750528.pdf: 388655 bytes, checksum: 5e25e9cb8343db7711c8612a05c569a2 (MD5) / O Pseudoplatystoma fasciatum é uma espécie nobre que apresenta carne sem espinhos, sabor delicado e textura firme. Nesta espécie, as fêmeas atingem maior tamanho e apresentam melhores taxas de crescimento que os machos. Assim, o objetivo desde trabalho foi descrever o processo de desenvolvimento e diferenciação gonadal do P. fasciatum e avaliar a possibilidade da feminilização com uso do hormônio 17β-estradiol. Para a descrição da diferenciação e desenvolvimento gonadal, os juvenis de P. fasciatum foram obtidos por meio de reprodução induzida de reprodutores mantidos em diversas estações de reprodução e pisciculturas de reprodução induzida (Centro de Aquicultura da UNESP “CAUNESP”, piscicultura Andrade e piscicultura Mar & Terra); já para o tratamento hormonal, os juvenis foram obtidos e mantidos na piscicultura Mar & Terra. As coletas para a diferenciação e desenvolvimento gonadal foram realizadas em tempos pré-estabelecidos, iniciando a partir de 39 dias pós-fertilização (dpf) e até completarem 240 dpf. Para o tratamento hormonal os juvenis com 39dpf receberam ração incorporada com 17β-estradiol e alimentados diariamente até a saciedade. Foi utilizado um grupo controle e três grupos tratados (50, 100, 150mg/Kg de ração comercial extrusada com 40% de proteína bruta). As coletas iniciaram com 39 dpf e depois periodicamente nos seguintes tempos 45, 57, 70, 100 dpf. Aos 39 dpf observaram-se pares de gônadas indiferenciadas como estruturas simples, localizadas dorsalmente ao intestino e ventralmente ao rim. Entre 39 e 45 dpf observamos pela primeira vez evidências histológicas no início de diferenciação em gônada feminina e gônada masculina. Com 60 a 70 dpf as diferenças externas e internas das gônadas femininas e masculinas permitiam a identificação morfológica de precursores de ovários e testículos, porém, tanto a gônada feminina quanto a masculina ... / Pseudoplatystoma fasciatum is an important species, with unspined meat, delicate flavor and firm texture. Females of this species reach larger sizes and have better growth rates than males. The objective of this study was to describe the gonad development and differentiation of P. fasciatum and evaluate the potential feminization effect of the 17β - estradiol hormone. For development and gonadal differentiation description, P. fasciatum juveniles were obtained through the hormonal induction of various breeders maintained in different reproductive stations and fish farms of inducted reproduction (Centro de Aquicultura Unesp “CAUNESP”, Andrade and Mar&Terra piscicultures); for the hormonal treatment juveniles were obtained and maintained in Mar&Terra pisciculture. Samples for development and gonadal differentiation were performed on pre-set points starting from 39 days post-fertilization (dpf) until complete 240 dpf. For the hormonal treatment juveniles (39 dpf) were fed daily to satiation with artificial food incorporated with 17β-estradiol. We used a control group and three treated groups (50, 100, 150mg/kg of commercial extruded feed containing 40% crude protein). Sampling started at 39 (dpf) and periodically at the following times 45, 57, 70 and 100 dpf. At 39 dpf gonads were undifferentiated observed as simple structures, located ventrally to intestine and dorsally to kidney. From 39 to 45 dpf we observed the first histological clues of female and male gonad differentiation. At 60-70 dpf the external and internal differences of male and female gonads enabled the morphological identification of ovaries and testes precursors, however, both the male and the female gonad consisted mainly of somatic cells and rare germ cells of the undifferentiated type, referred as oogonia for female gonads and spermatogonia for male gonads. From 100 to 113 dpf, gonads from both sexes increased in size ...
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Diferenciação gonadal em Piaractus mesopotamicus /

Barbosa, Roosevelt Passos. January 2015 (has links)
Orientador: Sergio Ricardo Batlouni / Coorientador: Rafael Yutaka Kuradomi / Banca: George Shigueki Yasui / Banca: Laura Satiko Okada / Resumo: Neste estudo, foram avaliados aspectos relacionados ao desempenho zootécnico e caracterização das células germinativas de machos e fêmeas diploides (2n) e triploides (3n) de Astyanax altiparanae. O principal objetivo foi verificar a performance e a possível esterilidade em peixes 3n. No Capítulo I, o crescimento e as características da carcaça foram examinadas. Fêmeas 3n apresentam maiores valores de ácidos graxos saturados e menores de insaturados e poli-insaturados. Adicionalmente, foi verificada uma diminuição no IGS e maior crescimento. Machos triploides apresentaram IGS e crescimento similares em comparação com os machos diploides normais. No Capítulo II o objetivo foi analisar histologicamente as gônadas dos diploides e triploides, e adicionalmente, caracterizar a estrutura das espículas presentes nas nadadeiras pélvicas e anal (característica sexual secundária em machos) e alguns parâmetros seminais (motilidade, concentração e viabilidade, ultraestrutura e ploidia). Machos 3n apresentam espículas nas nadadeiras pélvicas e anal, assim como observado nos diploides. Análise histológica mostrou que fêmeas 2n apresentaram gônadas desenvolvidas com ovócitos vitelogênicos. Por outro lado, fêmeas 3n exibiram gônadas imaturas. As gônadas dos machos 2n e 3n apresentaram morfologia similar, no entanto, machos 2n exibiram maior quantidade espermatozoides. Machos 3n apresentaram menor concentração espermática, motilidade e duração da motilidade. No que se refere à viabilidade espermática, não foi observada diferença significativa (P > 0,05). Em ambas ploidias, os espermatozoides apresentaram ultraestrutura similar e mesmo número de mitocôndrias, com estruturas morfológicas características: cabeça (redonda), peça e flagelo, este com formação tubular típica (9+2). Adicionalmente, a análise de citometria de fluxo mostrou que machos triploides produzem espermatozoides aneuploides (n=1,71). Em conclusão. / Abstract: In this study, aspects related with growth performance and characterization of the germ cells from diploids (2n) and triploids (3n) males and females of yellow tail tetra Astyanax altiparanae were analyzed. The principal aim was to verify the performance and sterility of 3n fish. In the Chapter I, growth and carcass traits were examined. Female 3n presented high values of saturated fatty acids in comparison with unsaturated and polyunsaturated. Additionally, decreased GSI and better growth performance was verified within triploids. Triploid males presented similar GSI and similar performance parameters in comparison with normal diploid males. In the Chapter II, the aim was to study histologically the gonads of diploids and triploids, and additionally to characterize the spines in the pelvic and anal fins (sexual secondary trait in male), and some sperm parameters (motility, concentration and viability, ultrastructure and ploidy) of 2n and 3n fishes. Triploid males presented spines in the anal fin, similarly as observed in diploids. Histological analysis showed that 2n female present developed gonads with vitelogenic oocytes. On the other hand, 3n female exhibit immature gonads. The gonads of 2n and 3n males presented similar morphology, however, 2n male presented increased amount of spermatozoa. Triploid males also presented decreased sperm concentration, motility and duration of motility. Regarding the sperm viability, no significant differences were observed (P > 0.05). In both statuses, the spermatozoa presented similar ultrastructures and same number of mitochondria, with characteristic morphological structures: head (round), midpiece and flagela, which have a typical tubular formation (9+2). Additionally, the flow cytometrycal analysis showed that 3n male produce aneuploid spermatozoa (n=1.71). In conclusion, the triploidization does not ensure sterility in males, however, 3n female (sterile) may be used for aquaculture ... / Mestre
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Desempenho reprodutivo e diferenciação gonadal em piau-três-pintas, Leporinus friderici, Bloch 1794 /

Souza, Thiago Gonçalves de. January 2015 (has links)
Orientador: Sérgio Ricardo Batlouni / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: George Shigueki Yasui / Banca: Maria Inês Borella / Banca: Diogo Teruo Hashimoto / Resumo: Os objetivos deste trabalho foram avaliar o desempenho reprodutivo e o processo de diferenciação gonadal do Leporinus friderici. Primeiramente avaliamos a evolução do processo meiótico e o desempenho reprodutivo de matrizes de L. friderici induzidas com doses convencionais e reduzidas de extrato bruto de hipófise de carpa (EC) e de hormônio liberador de gonadotropinas análogo ao de mamífero associado à metoclopramida (mGnRHa + MET). Posteriormente, investigamos o início e as características do processo de diferenciação gonadal desta espécie expostos a 25 e 29°C. Para a avaliação do desempenho reprodutivo, utilizamos o EC em doses de 0,5 e 5,5mg/Kg (doses convencionais) e em doses de 0,5 e 1,0mg/Kg (doses reduzidas). Paralelamente utilizamos dose única de 40pg de mGnRHa + 20mg de MET/Kg (dose convencional) e duas doses de 4pg + 2mg; e 8pg + 4mg, de mGnRHa + MET/Kg (doses reduzidas). Para avaliação do processo de diferenciação gonadal foram amostrados aleatoriamente cinco peixes com 50, 70, 90, 110, 130, 150, 170, 190, 210 e 240 dias após eclosão (DAE), expostos a 25 e 29°C, em sistema de recirculação de água. Concluimos que embriões viáveis de L. friderici podem ser obtidos com doses reduzidas de EC, mas não com doses convencionais. Não foi possível obter embriões viáveis de L. friderici com uso de mGnRHa + MET, pelo menos com as doses e procedimentos aqui empregados, pois estes causaram baixa fertilidade, baixa eclosão e redução da qualidade dos ovos. Com relação ao processo de diferenciação gonadal, demonstramos que a temperatura mais elevada (29°C) provocou aumento no comprimento padrão (CP) e peso médio (P), intensificou a diferenciação gonadal e propiciou um maior número de fêmeas de L. friderici. Concluindo, é possível que a espécie apresente alguma toxicidade provocada pelo excesso de GnRH, hormônio luteinizante ou aos esteroides gonadais, os quais seriam transmitidos da fêmea para... / Abstract: The objectives of this study were to evaluate the reproductive performance and gonadal differentiation process Leporinus friderici. First we assess the evolution of the meiotic process and the reproductive performance of L. friderici broodstock induced with conventional and lower dose of crude carp pituitary extract (EC) and mammalian gonadotropin releasing hormone analogue associated with metoclopramide (mGnRHa + MET ). Subsequently, we investigated the beginning and the characteristics of gonadal differentiation process of this species exposed at 25 and 29°C. For the evaluation of reproductive performance, we used the EC at doses of 0.5 and 5.5 mg / kg (conventional dose) and at doses of 0.5 and 1.0mg / kg (lower doses). Parallel use of a single dose of 40pg + 20mg mGnRHa MET / kg (conventional dose) and two doses of 4pg + 2mg; and 4pg + 8mg of mGnRHa + MET / kg (lower doses). For evaluation of gonadal differentiation process were randomly sampled five fish 50, 70, 90, 110, 130, 150, 170, 190, 210 and 240 days after hatching (DAE), exposed to 25 and 29°C in recirculation system water. We conclude that viable L. friderici embryos can be obtained with low doses of EC, but not with standard doses. Could not get viable embryos L. friderici with use of mGnRHa + MET, at least with the doses and procedures used here, as these caused low fertility, low hatching and reduced egg quality. With respect to gonadal differentiation process, we have demonstrated that the higher temperature (29°C) caused an increase in average weight (P) and standard length (CP), intensified gonadal differentiation and provided a greater number of females L. friderici. In conclusion, it is possible that the species has any toxicity caused by excess GnRH, luteinizing hormone or the gonadal steroids, which would be transmitted to the female embryos before the ovulation process, killing them. With the production of females, which is the genre of greater economic ... / Doutor
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Ontogenia do trato digestório e desenvolvimento gonadal de Betta splendens : aspectos morfológicos /

Silva, Regiane Cristina da. January 2013 (has links)
Orientador: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Lilian Cristina Makino / Banca: Sérgio Fonseca Zaiden / Resumo: O Betta splendens destaca-se como uma das espécies ornamentais mais cultivadas no mundo. Dentre os fatores que determinam o sucesso de criação, estão aqueles relacionados às alterações morfológicas do trato digestório e o desenvolvimento normal das gônadas. Este estudo objetivou acompanhar e registrar o desenvolvimento do trato digestório e gonadal do B. splendens por meio de técnicas de histologia e de microscopia eletrônica de varredura (MEV). As larvas foram obtidas a partir de reprodução natural, mantidas sob cuidado parental do macho e coletadas em tempos préestabelecidos durante o desenvolvimento. Em cada tempo de coleta, os peixes foram anestesiados em solução de bezoncaína, pesados e fixados em formol 4% tamponado e também em Karnovsky modificado. A temperatura da água durante a ontogênese foi de 28,0±2,0ºC e o pH 6,9±0,3. A eclosão ocorreu 28 horas pós-fertilização. Neste momento, as larvas apresentavam-se com trato digestório incompleto, sendo visualizado um tubo reto e simples com um epitélio constituído por uma camada de células colunares na região ventral e posterior da larva, representando o intestino primitivo. Com 18 horas pós-eclosão (hpe) foi observada a abertura bucal e dentes maxilares. O tubo digestório estava totalmente aberto com 32 hpe e a língua apresentava botões gustativos e melanóforos na região dorsal com 40 hpe. A absorção total do saco vitelínico ocorreu com 74 hpe, quando foi observado conteúdo no estômago e intestino. Neste período, o trato digestório e glândulas anexas estavam totalmente diferenciados e funcionais. Levando em consideração o hábito alimentar e suas particularidades, o conhecimento morfofuncional do trato digestório se faz necessário para estabelecer dietas que atendam às exigências desta espécie, visando melhorias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Betta splendens highlights like one of the most cultivated ornamental fish in the world. Among the factors that determine the success of rearing, are factors related to morphological changes of the digestive tract and normal development of the gonads. This study aimed to monitor and record changes in the digestive tract morphology and gonadal development of B. splendens by techniques of histology and scanning electron microscopy (SEM). The larvae were obtained from natural reproduction and were kept under male parental care and collected in pre-established time of development. At each sampling time, fish were anesthetized in a solution of bezoncaine, weighed and fixed in 4% buffered formaldehyde y and either in modified Karnovsk solution. The water temperature during ontogeny was 28.0 ± 2.0 °C and pH 6.9 ± 0.3. The hatching occurred at 28 hours after fertilization. At this time the larvae presented an incomplete digestive system, being viewed as a straight tube lined by a simple epithelium that consisted by a layer of columnar cells located in the ventral and posterior regions of the larva, representing the primitive gut. At 18 hours post-hatching (hph) was observed the mouth opening, and maxillary teeth. The digestive tract was totally opened at 32 hph and tongue showed taste buds and melanophores in the dorsal region at 40 hpe. The total absorption of the yolk sac occurred at 74 hph, when feed particles were observed into the stomach and intestine. In this period, the digestory tract and annexes glands were fully differentiated and functional. Taking in consideration the feeding habit and your peculiarities, the morphofunctional knowledge of the digestory tract becomes necessary for estabilish diets that meet the requirements of this species, looking for improvement in the productive performance and health of the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Processo de diferenciação gonodal em Pseudoplatystoma fasciatum e tentativa de feminilização com 17β-estradiol /

Valentin, Fernanda Nogueira. January 2013 (has links)
Orientadora: Laura Satiko Okada Nakaghi / Coorientador: Sergio Ricardo Batlouni / Banca: Gustavo Manoel Somoza / Banca: Heid Sueli Leme dos Santos / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: Sergio Fonseca Zaiden / Resumo: O Pseudoplatystoma fasciatum é uma espécie nobre que apresenta carne sem espinhos, sabor delicado e textura firme. Nesta espécie, as fêmeas atingem maior tamanho e apresentam melhores taxas de crescimento que os machos. Assim, o objetivo desde trabalho foi descrever o processo de desenvolvimento e diferenciação gonadal do P. fasciatum e avaliar a possibilidade da feminilização com uso do hormônio 17β-estradiol. Para a descrição da diferenciação e desenvolvimento gonadal, os juvenis de P. fasciatum foram obtidos por meio de reprodução induzida de reprodutores mantidos em diversas estações de reprodução e pisciculturas de reprodução induzida (Centro de Aquicultura da UNESP "CAUNESP", piscicultura Andrade e piscicultura Mar & Terra); já para o tratamento hormonal, os juvenis foram obtidos e mantidos na piscicultura Mar & Terra. As coletas para a diferenciação e desenvolvimento gonadal foram realizadas em tempos pré-estabelecidos, iniciando a partir de 39 dias pós-fertilização (dpf) e até completarem 240 dpf. Para o tratamento hormonal os juvenis com 39dpf receberam ração incorporada com 17β-estradiol e alimentados diariamente até a saciedade. Foi utilizado um grupo controle e três grupos tratados (50, 100, 150mg/Kg de ração comercial extrusada com 40% de proteína bruta). As coletas iniciaram com 39 dpf e depois periodicamente nos seguintes tempos 45, 57, 70, 100 dpf. Aos 39 dpf observaram-se pares de gônadas indiferenciadas como estruturas simples, localizadas dorsalmente ao intestino e ventralmente ao rim. Entre 39 e 45 dpf observamos pela primeira vez evidências histológicas no início de diferenciação em gônada feminina e gônada masculina. Com 60 a 70 dpf as diferenças externas e internas das gônadas femininas e masculinas permitiam a identificação morfológica de precursores de ovários e testículos, porém, tanto a gônada feminina quanto a masculina ... / Abstract: Pseudoplatystoma fasciatum is an important species, with unspined meat, delicate flavor and firm texture. Females of this species reach larger sizes and have better growth rates than males. The objective of this study was to describe the gonad development and differentiation of P. fasciatum and evaluate the potential feminization effect of the 17β - estradiol hormone. For development and gonadal differentiation description, P. fasciatum juveniles were obtained through the hormonal induction of various breeders maintained in different reproductive stations and fish farms of inducted reproduction (Centro de Aquicultura Unesp "CAUNESP", Andrade and Mar&Terra piscicultures); for the hormonal treatment juveniles were obtained and maintained in Mar&Terra pisciculture. Samples for development and gonadal differentiation were performed on pre-set points starting from 39 days post-fertilization (dpf) until complete 240 dpf. For the hormonal treatment juveniles (39 dpf) were fed daily to satiation with artificial food incorporated with 17β-estradiol. We used a control group and three treated groups (50, 100, 150mg/kg of commercial extruded feed containing 40% crude protein). Sampling started at 39 (dpf) and periodically at the following times 45, 57, 70 and 100 dpf. At 39 dpf gonads were undifferentiated observed as simple structures, located ventrally to intestine and dorsally to kidney. From 39 to 45 dpf we observed the first histological clues of female and male gonad differentiation. At 60-70 dpf the external and internal differences of male and female gonads enabled the morphological identification of ovaries and testes precursors, however, both the male and the female gonad consisted mainly of somatic cells and rare germ cells of the undifferentiated type, referred as oogonia for female gonads and spermatogonia for male gonads. From 100 to 113 dpf, gonads from both sexes increased in size ... / Doutor
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Ontogenia do trato digestório e desenvolvimento gonadal de Betta splendens: aspectos morfológicos

Silva, Regiane Cristina da [UNESP] 27 February 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:32:47Z : No. of bitstreams: 1 silva_rc_me_jabo.pdf: 14525132 bytes, checksum: 1591a87a342d1b6b0e63b988daf82474 (MD5) / O Betta splendens destaca-se como uma das espécies ornamentais mais cultivadas no mundo. Dentre os fatores que determinam o sucesso de criação, estão aqueles relacionados às alterações morfológicas do trato digestório e o desenvolvimento normal das gônadas. Este estudo objetivou acompanhar e registrar o desenvolvimento do trato digestório e gonadal do B. splendens por meio de técnicas de histologia e de microscopia eletrônica de varredura (MEV). As larvas foram obtidas a partir de reprodução natural, mantidas sob cuidado parental do macho e coletadas em tempos préestabelecidos durante o desenvolvimento. Em cada tempo de coleta, os peixes foram anestesiados em solução de bezoncaína, pesados e fixados em formol 4% tamponado e também em Karnovsky modificado. A temperatura da água durante a ontogênese foi de 28,0±2,0ºC e o pH 6,9±0,3. A eclosão ocorreu 28 horas pós-fertilização. Neste momento, as larvas apresentavam-se com trato digestório incompleto, sendo visualizado um tubo reto e simples com um epitélio constituído por uma camada de células colunares na região ventral e posterior da larva, representando o intestino primitivo. Com 18 horas pós-eclosão (hpe) foi observada a abertura bucal e dentes maxilares. O tubo digestório estava totalmente aberto com 32 hpe e a língua apresentava botões gustativos e melanóforos na região dorsal com 40 hpe. A absorção total do saco vitelínico ocorreu com 74 hpe, quando foi observado conteúdo no estômago e intestino. Neste período, o trato digestório e glândulas anexas estavam totalmente diferenciados e funcionais. Levando em consideração o hábito alimentar e suas particularidades, o conhecimento morfofuncional do trato digestório se faz necessário para estabelecer dietas que atendam às exigências desta espécie, visando melhorias... / The Betta splendens highlights like one of the most cultivated ornamental fish in the world. Among the factors that determine the success of rearing, are factors related to morphological changes of the digestive tract and normal development of the gonads. This study aimed to monitor and record changes in the digestive tract morphology and gonadal development of B. splendens by techniques of histology and scanning electron microscopy (SEM). The larvae were obtained from natural reproduction and were kept under male parental care and collected in pre-established time of development. At each sampling time, fish were anesthetized in a solution of bezoncaine, weighed and fixed in 4% buffered formaldehyde y and either in modified Karnovsk solution. The water temperature during ontogeny was 28.0 ± 2.0 °C and pH 6.9 ± 0.3. The hatching occurred at 28 hours after fertilization. At this time the larvae presented an incomplete digestive system, being viewed as a straight tube lined by a simple epithelium that consisted by a layer of columnar cells located in the ventral and posterior regions of the larva, representing the primitive gut. At 18 hours post-hatching (hph) was observed the mouth opening, and maxillary teeth. The digestive tract was totally opened at 32 hph and tongue showed taste buds and melanophores in the dorsal region at 40 hpe. The total absorption of the yolk sac occurred at 74 hph, when feed particles were observed into the stomach and intestine. In this period, the digestory tract and annexes glands were fully differentiated and functional. Taking in consideration the feeding habit and your peculiarities, the morphofunctional knowledge of the digestory tract becomes necessary for estabilish diets that meet the requirements of this species, looking for improvement in the productive performance and health of the... (Complete abstract click electronic access below)
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Caracterização bioquímica de peptidases e análise proteômica de intestino e gônadas de Anopheles aquasalis

Lopes, Geovane Dias January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-11-04T13:39:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 geovane_lopes_ioc_mest_2014.pdf: 4146940 bytes, checksum: 332c9cbd56d1a1690235d637c48eaeef (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O objetivo geral do presente trabalho foi caracterizar e identificar peptidases ativas presentes nos intestinos de machos e fêmeas de Anopheles aquasalis bem como identificar as proteínas expressas no intestino e gônadas de fêmeas dessa espécie. Para a caracterização proteolítica foram usadas distintas abordagens bioquímicas que permitiram reunir um grupo importante de informações sobre a expressão de enzimas proteolíticas nesta espécie de mosquito. Usando o substrato fluorogênico Z-Phe-Arg-AMC em solução e a técnica de enzimografia por SDS-PAGE co-polimerizado com gelatina foi possível observar um perfil proteolítico composto por serina peptidases do tipo tripsina no intestino de machos e fêmeas de An. aquasalis. Estas enzimas apresentam maior atividade proteolítica na faixa de pH alcalino e ampla estabilidade térmica, sendo ativas entre 25 °C \2013 80 °C, com maior atividade entre 37 °C \2013 50 °C. Diferenças qualitativas e quantitativas na expressão das peptidases também foram detectadas. Foi observado que o perfil proteolítico difere entre macho e fêmea, sugerindo com isso que a expressão de algumas dessas enzimas é sexo-específica Para análise proteômica do intestino e gônadas de fêmeas alimentadas com açúcar usou-se uma abordagem \201Cbottom-up\201D acoplada à análise bioinformática de dados para identificação das proteínas expressas. A análise do intestino foi feita através de um procedimento de digestão em solução sem pré-fracionamento das proteínas, ao passo que a análise das gônadas foi feita usando um protocolo de digestão em gel após fracionamento das proteínas por SDS-PAGE. Usando estas estratégias, um total de 137 e 995 proteínas foram identificadas no intestino e gônadas, respectivamente. As proteínas foram identificadas usando os programas ProLuCID e/ou PEAKS, e uma base de dados \201Ccustomizada\201D incluindo todas as sequencias de Culicídeos depositadas na base de dados UniProt (81,000 sequencias, em outubro de 2013). As identificações foram posteriormente analisadas com relação ao enriquecimento de termos de ontologia gênica e foram classificadas de acordo com seu processo biológico e função molecular, usando o módulo GeneOntology da plataforma PatternLab. A caracterização proteômica revelou para o intestino (i) a presença de várias serina peptidases do tipo tripsina, corroborando a expressão e atividade das enzimas observadas na enzimografia; (ii) a expressão de vários genes codificantes para quimiotripsina, embora a sua atividade não tenha sido detectada pela enzimografia; e para as gônadas (iii) proteínas associadas à vitelogênese; e (iv) a expressão massiva de proteínas implicadas na preparação do tecido para reprodução Finalmente, até o presente, esta é a primeira caracterização abrangente da atividade proteolítica de machos e fêmeas de An. aquasalis bem como a primeira caracterização proteômica do intestino e gônadas de fêmeas desta espécie alimentadas com açúcar. Os resultados obtidos neste trabalho além de fornecerem informações sobre a localização tecidual de proteínas no mosquito e abrirem diversas vias de estudo da biologia e fisiologia deste vetor, contribuem também para a anotação funcional do genoma desta espécie, visto tratar-se de uma espécie com genoma ainda não concluído / The aim of this study was to characterize and identify active peptidases from the midgut of males and females of Anopheles aquasalis and to identify protein expressed in the midgut and gonads of females of this species. The different bioche mical approaches used for the proteolytic characterization allowed gather ing a group of important information about the expression of proteolytic enzymes in this mosquito species. Using the fluorogenic substrate Z - Phe - Arg - AMC for in - solution enzymatic assays and by zymographic analyses (SDS - PAGE co - polymerized with gelatin) it was possible to observe a proteolytic profile composed of trypsin - like serine peptidases in the midgut of male and female A n . aquasalis . These pepti dases exhibit high proteolytic activity at a w ide range of alkaline pH and thermal stability, being active between 25° C - 80 ° C, with more activity between 37° C - 50° C. Qualitative and quantitative differences in the expression of peptidases were also detected. It was observed that proteolytic profile differs between males and females, thereby suggesting that the expression of some of these enzymes is sex - specific. For proteomic analysis of the midgut and gonads of females fed on sugar it was used a "bo ttom - up" proteomic approach coupled with bioinformatic s data analysis to identify tissue - specific expressed protein s . The midgut analysis was taken through an in - solution digestion procedure without pre - fractionation of the proteins, while the analysis of gonads was made using an in - gel digestion protocol after fractionation of proteins by SDS - PAGE. Using these strategies, a total of 137 and 995 proteins were identified in the midgut and gonads, respectively. Proteins were identified using the ProLuCID and/ or PEAKS software , and a customized database including all Culicidae protein sequences deposited at the UniProt database (81,000 sequences, in October 2013). Protein identifications were further analyzed for the enrichment of gene ontology terms and were c lassified according to their biological process and molecular function using the GeneOntology module of the PatternLab platform. The proteomic characterization of midgut revealed (i) the presence of various t rypsin - like serine peptidases , confirming the ex pression and activity of these enzymes observed by zymography, (ii) the expression of several chymotrypsin coding genes, although its activity was not detected by zymography . Proteomics of gonads from female fed with sugar revealed (iii) the expression of proteins associated with vitellogenesis and (iv) the massive expression of proteins involved in tissue preparation for reproduction process. F inally, to the present , t his is the first characterization of the proteolytic activity of males and females midgut s of An. aquasalis well as the first proteomic characterization of the midgut and gonads of A n . aquasalis females fed with sugar. The results obtained in this work in addition to providing information about the cellular localization of proteins in the mosq uito , open several avenues of study of the biology and physiology of this vector, and also contribute to the functional annotation of the genome of this species with genome not yet completed

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