A fibrose e a cirrose hepática são doenças crônicas do fígado que representam uma das maiores causas de mortalidade humana. A GRX é uma linhagem representativa das células estreladas hepáticas (HSC), que estão associadas ao desenvolvimento da fibrose que, em último estágio, acarreta em cirrose. No fígado saudável, estas células apresentam um fenótipo quiescente ou lipocítico, caracterizado pela sua capacidade de armazenar gotas lipídicas. Danos contínuos ao fígado desencadeiam uma resposta que gera estímulos autócrinos e parácrinos mediados por citocinas e espécies reativas de oxigênio. Este quadro leva a uma modulação destas células ao fenótipo ativado ou miofibroblástico, relacionada com um aumento da capacidade de produzir componentes de matriz extracelular, cuja deposição exagerada configura o estado patológico da fibrose. O resveratrol (RSV - 3,4',5-tri-hidroxi-trans-estilbeno) é uma fitoalexina produzida por algumas espécies de plantas, ao qual são atribuídos inúmeros efeitos benéficos devido a sua capacidade antioxidante, antiproliferativa e pró-apoptótica.Recentemente, tem se discutido um possível efeito pró-oxidante desta molécula em alguns sistemas celulares. O presente estudo mostra que a dose de 50 μM de RSV induziu uma diminuição da viabilidade e da proliferação celular nas células GRX devido a um efeito pró-oxidante observado nas primeiras 24 horas de tratamento. Essas alterações foram atenuadas ao longo de 120 horas de exposição. Observamos um aumento da atividade da superóxido dismutase (SOD) e uma diminuição da atividade da catalase (CAT) no grupo que recebeu 50 μM de RSV em 120 horas de tratamento, que resulta em um desequilíbrio na atividade de ambas enzimas e possivelmente gera uma produção alta de H2O2. As células que receberam 50 μM de RSV apresentaram dano mediado por lipoperoxidação, tanto em 24 horas quanto em 120 horas de exposição, embora este parâmetro tenha sido menor no modelo crônico. De maneira complementar, avaliamos os efeitos do RSV sobre os parâmetros de migração das células GRX. Observamos um aumento na capacidade de migração destas células já nas primeiras 8 horas de exposição às doses de 1, 10 e 50 μM de RSV. Estes resultados mostraram que o RSV induz um aumento de migração e uma adaptação das células GRX que sobrevivem ao choque tóxico das primeiras 24 horas. / Fibrosis and hepatic cirrosis are chronic diseases of the liver, standing for one of the highest causes of human mortality. GRX cell line is representative of hepatic stellate cells (HSC) that are associated to fibrosis development which, at its last stage, turns into cirrosis. In a healthy liver, such cells present a quiescent or lipocytic phenotype, characterized by its capacity to store lipid droplets. Continuous injuries to the liver generate autocrine and paracrine stimuli mediated by cytokines and reactive oxygen species (ROS). This may cause modulation to the activated or myofibroblastic phenotype, related to an increase of cells capacity to produce matrix components which excessive deposition is responsible for the pathologic condition of fibrosis. Resveratrol (RSV - 3,4',5-tri-hidroxi-trans-stilbeno) is a phytoalexin produced by some species of plants. Several beneficial effects are attributed to this molecule due to its antioxidant, antiproliferative and pro-apoptotic capacity. Recently, a possible pro-oxidant effect of this molecule in some cell systems has been put into discussion. The present study shows that 50 μM of RSV induced a decreased cell viability and proliferation of GRX cells due a pro-oxidant effect during the first 24 hours of treatment. These alterations were attenuated during 120 hours of exposure. We observed an increased SOD activity as well as a decreased CAT activity, in the 50 μM RSV-treated group at 120 hours of treatment, leading to an imbalance in the ratio of both enzymes activities, and possibly resulting in an over-production of H2O2. The cells that received 50 μM RSV presented oxidative damage, mediated by lipoperoxidation, at 24 hours as well as at 120 hours, although some of these parameters were smaller in the chronic model. Additionally, we evaluated RSV effects on the GRX cell migration. We observed an increase in the migration capacity of these cells during the first 8 hours of exposition to the 1, 10 and 50 μM RSV. Such results demonstrate that RSV induces migration increase as well as an adaptation of GRX cells which survive the first 24-hour toxic shock.

OBJETIVO: Examinar o efeito do meio condicionado da linhagem HepG2 nas célulastronco mesenquimais in vitro no que se refere à sua diferenciação em hepatócito. MATERIAIS E MÉTODOS: As CTM foram isoladas da medula óssea de ratas Wistar combinando a centrifugação por gradiente de densidade e a aderência à superfície de cultivo. As CTM foram cultivadas em meio de diferenciação osteogênico e adipogênico e coradas com Alizarin Red S e Oil Red-O respectivamente. Para induzir a diferenciação hepática, CTM foram cultivadas com 70% de meio condicionado de HepG2 ou com 50 ng/mL de fator de crescimento de hepatócito (HGF) durante 3 semanas. Foram realizadas RT-PCR e analises imunocitoquímica para marcadores de células-tronco (Thy-1) e marcadores hepáticos como ALB, AFP, CK-8 e CK-18. Adicionalmente foram realizadas colorações de Oil Red-O em CTM tratadas com meio condicionado de HepG2. RESULTADOS: Combinando a centrifugação por gradiente de densidade com a aderência à superfície de contacto, isolamos uma população homogênea de CTM nas quais as colorações de Alizarin Red S e Oil Red-O foram positivas quando tratadas. Logo de 3 semanas de tratamento, com meio condicionado de HepG2 ou HGF, não foram observados câmbios morfológicos nem expressão gênica (RT-PCR ou análise imunocitoquímica) para proteínas hepáticas (AFP, ALB, CK8 e CK18). A expressão de Thy-1 foi positivo antes e depois do tratamento em ambos grupos. Surpreendentemente as CTM tratadas com meio condicionado de HepG2 apresentaram acúmulos de lipídeos perinucleares corados com Oil Red-O. Estes acúmulos de gordura foram distintos às observados nas CTM tratadas com meio adipogênico, mas seu fenótipo foi similar às células HepG2 quando coradas com o mesmo método. CONCLUSÕES: Apesar de que o meio condicionado de HepG2 não foi capaz de induzir a diferenciação de CTM a hepatócitos, ele tem algum efeito sobre as CTM conduzindo a um fenótipo que se assemelha a uma esteatose microgoticular. / AIM: In the present study, we examined the effect of conditioned medium from the HepG2 cell line upon mesenchymal stem cells and their ability to differentiate into hepatocyte-like cells in vitro. METHODS: MSCs were isolated from bone marrow of Wistar rats by combining gradient density centrifugation with plastic adherence. The cells were cultured in osteogenic or adipogenic differentiation medium and analyzed by Alizarin Red S and Oil Red-O staining. To induce hepatic differentiation, MSC were cultured with 70% of HepG2-CM or with 50 ng/mL hepatocyte growth factor (HGF) for 3 weeks. RT-PCR and immunocytochemistry analysis for the stem cell marker Thy-1 and hepatic markers, ALB, AFP, CK-8 and CK-18 were performed. In addition, Oil Red-O and Alizarin Red S staining were also performed in the MSC treated with HepG2-CM. RESULTS: By combining gradient density centrifugation with plastic adherence, we isolated a homogeneous population of MSC and differentiated them into osteocytes and adipocytes. After 3 weeks of treatment no changes in morphology were observed in either group (HepG-CM or HGF). RT-PCR and antibody staining for hepatic proteins (AFP, ALB, CK8 and CK18) were also negative. Expression of Thy-1, a marker of mesenchymal stem cell was positive both before and after treatment in both groups. Surprisingly MSC treated with HepG2-CM for 3 weeks presented lipid droplets that were stained with Oil Red-O. These droplets were very distinct from the ones observed in MSC treated with adipogenic medium but resembled those seen in HepG2 cells stained by the same method. CONCLUSIONS: However, HepG2-CM was not able to induce differentiation of MSC in a hepatocyte-like, they had an effect upon MSC leading to a phenotype resembling mild steatosis.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T13:58:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 814255 bytes, checksum: 9974a4e27a801b7dc81c4bd03f1beafd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T13:58:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 814255 bytes, checksum: 9974a4e27a801b7dc81c4bd03f1beafd (MD5) Previous issue date: 2001-11-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Para avaliar os componentes da resistência a H. glycines na linhagem de feijoeiro L2300, foi considerado, além do número de fêmeas/sistema radicular, o número de ovos produzidos por elas. A linhagem L2300 apresentou os menores números de fêmeas e ovos por sistema radicular e de ovos por fêmea. Também foram menores os números de cistos e ovos por cisto. A cultivar Ouro, suscetível a H. glycines, apresentou menor número de ovos por fêmea e menor número de cistos e de ovos por cisto em relação à soja. Compararam-se a viabilidade e o tempo de sobrevivência no solo do inóculo de H. glycines produzido no feijoeiro L2300 com aquele produzido na cultivar suscetível Ouro e na soja suscetível FT-Cristalina. Não se observou efeito da planta hospedeira em que foi produzido o inóculo de H. glycines sobre a eclosão dos juvenis nas avaliações realizadas aos dois e quatro dias após a montagem do ensaio. Observou-se menor número de juvenis e de fêmeas nas raízes de soja FT-Cristalina quando se utilizou inóculo produzido na linhagem L2300. Os cistos produzidos em feijoeiro da linhagem L2300 e na cv. Ouro apresentaram menor sobrevivência após permanecerem no solo, sem plantas, por dezoito meses. Ao avaliar o efeito da linhagem L2300 de feijoeiro na redução da população de H. glycines, comparado a outras culturas, maior número de cistos foi obtido em vasos onde foram plantados a soja FT-Cristalina e o feijoeiro cv. Ouro, ambos suscetíveis ao nematóide. O número de fêmeas por sistema radicular da soja FT-Cristalina foi maior quando inicialmente foi plantado o feijoeiro suscetível, cv. Ouro. Na sucessão soja suscetível-soja suscetível, o sistema radicular foi praticamente destruído devido à alta população do nematóide, resultando em baixo número de fêmeas por sistema radicular. Avaliando-se a reação da linhagem L2300 do feijoeiro a outras raças de H. glycines, essa planta foi moderadamente suscetível às raças 4 e 14 e suscetível à raça 2. O efeito da temperatura na resistência da linhagem de feijoeiro L2300 foi avaliado e foi estável nas temperaturas de 22, 24 e 26 o C. Maior número de fêmeas por sistema radicular da linhagem L2300 foi observado na temperatura de 30 o C. No estudo da análise genética da linhagem L2300, testou-se a hipótese de herança monogênica sob diferentes graus médios de dominância (GMD). Com base nessa análise, a hipótese de herança monogênica com dominância parcial (GMD=-0,5), no sentido do menor número de fêmeas, é a mais adequada para explicar os resultados observados (P=0,69 pelo teste de qui-quadrado). / The eggs and females numbers per root system were the criteria in a study of resistance factors in Phaseolus vulgaris L2300 line to Heterodera glycines, the soybeans cyst nematode. These numbers and those of cyst and eggs per cyst in L2300 were the lowest among tested dry bean cultivars. Although suscetible to the SCN, the Ouro dry beans cultivar allowed less eggs per female nematode, less cysts per root and less eggs per cyst than soybeans. In addition, survival time and extended viability of H. glycines inocula in soil were compared for the resistant L2300 dry beans line with susceptible 'Ouro' beans and susceptible 'FT-Cristalina' soybean. As indicated by juveniles counts done two and four days after the experiment began, these host plants, used as sources of inoculum, showed no effect on eggs hatching. But less juveniles and females were found in susceptible 'FT-Cristalina' when inoculum came from 'L2300' and also cysts from this line and the Ouro cv. survived less in soil kept with no plants for 18 months. Likewise, H. glycines population was smaller in pots in whose soil L2300 was grown instead of the susceptible 'FT-Cristalina' and 'Ouro'. Data indicated that number of females on 'FT-Cristalina' root system increased where 'Ouro' instead of L2300 line had been the previous crop. Root system of soybeans were destroyed to such an extent in susceptible- susceptible soybeans crop successions that only a few females per soybean root system could be found eventually. When evaluated against several H. glycines races L2300 showed moderate susceptibility to races 4 and 14 while susceptible to race 2. L2300 resistance to the SCN showed no change at 22, 24, or 26 ο C, and the highest number of females per root was found at 30 ο C. Based on the least female numbers and at P=0.69 (chi square test), the hypothesis of monogenic resistance with partial dominance (MGD=-0.5) suits best to explain the available data.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-27T15:46:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2280584 bytes, checksum: 9c9398a231a528e3fcdab696e4338b90 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-27T15:46:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2280584 bytes, checksum: 9c9398a231a528e3fcdab696e4338b90 (MD5) Previous issue date: 2002-04-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O presente trabalho teve como objetivo avaliar tecnologicamente uma farinha mista de trigo e de soja melhorada. Foram utilizadas uma linhagem de soja isenta de lipoxigenase (Doko RC TN) e uma variedade comercial contendo lipoxigenase (Doko RC). O produto consistiu de macarrão tipo espaguete preparado a partir da farinha mista de trigo e soja integral e desengordurada com três níveis de substituição de farinha de trigo por farinha de soja, 15%, 25% e 35% . A comparação da composição química das farinhas de soja com a farinha de trigo mostrou que as farinhas de soja contêm mais proteínas, lipídios e cinzas do que a farinha de trigo. A suplementação da farinha de trigo com farinhas de soja integral e desengordurada de Doko RC e de Doko RC TN causaram um aumento na absorção de água por parte das farinhas mistas, cujos valores foram acima de 60%. De acordo com os farinogramas das farinhas mistas observou-se que, quando adicionou farinha de soja integral ou desengordurada o tempo de mistura da massa, de um modo geral, foi maior quanto maior a porcentagem de farinha de soja. Quando adicionou farinha de soja integral ou desengordurada à farinha de trigo, a estabilidade da mistura apresentou-se menor do que sem adição, e foi tanto menor quanto maior a adição. A qualidade tecnológica da massa é caracterizada pela sua extensibilidade e elasticidade e são verificados através do extensograma. Com a adição de quantidades crescentes de farinha de soja integral ou desengordurada obteve-se valores menores de extensibilidade. Com relação às características tecnológicas das massas alimentícias, observou-se que o tempo de cozimento reduziu quando comparado ao macarrão controle, permanecendo em torno de 7 a 8 minutos, tanto para os macarrões produzidos com farinha integral e desengordurada de soja Doko RC quanto para as massas produzidas com farinha integral e desengordurada de soja Doko RC TN. Quanto à influência do tempo de armazenamento no tempo de cozimento das massas, observou-se uma tendência na redução no tempo de cozimento com o aumento do tempo de estocagem. A absorção de água pelos macarrões foi menor do que para o macarrão controle, os valores variaram em torno de 2,65 a 3,00. Para o parâmetro aumento de volume foi observado que os macarrões apresentaram valores que variaram em torno de 2,70 a 4,00 independente dos níveis de substituição e do tipo de farinha mista de trigo e soja. A perda de sólidos solúveis apresentou-se acentuada para todos os macarrões provenientes das farinhas mistas em todos os níveis de adição. O tempo de armazenamento influenciou significativamente a perda de sólidos solúveis pelos macarrões produzidos com farinhas mistas integrais ou desengorduradas de soja Doko RC e Doko RC TN. Quanto à composição centesimal, obteve-se macarrões com 23 g e 21,7 g de proteína provenientes da adição de 35% de farinha integral de soja Doko RC e de soja Doko RC TN, respectivamente. Os teores totais de isoflavonas nos macarrões (35%) foram de 1,28 mg /g de macarrão proveniente da farinha integral de soja Doko RC e de 3,92 mg/g de macarrão produzido com farinha integral de soja melhorada. Quanto ao teor de rafinose para macarrões produzidos com farinha integral de soja Doko RC os valores foram de 2,50, 2,81 e 4,36 mg/g de macarrão para os níveis de 15%, 25% e 35%, respectivamente. Para macarrões com farinha integral de soja melhorada os valores foram de 1,57, 2,32 e 3,14 mg/g de macarrão para os níveis de 15%, 25% e 35%, respectivamente. Os valores de estaquiose para macarrões com soja comercial foram 6,09, 10,06 e 16,19 mg/g de macarrão para os níveis de 15%, 25% e 35%, respectivamente. Para macarrões com soja melhorada estes valores foram 6,04, 10,49 e 14,46 mg/g de macarrão para os níveis de 15%, 25% e 35%, respectivamente. A acidez dos macarrões aumentou durante o armazenamento, especialmente para macarrões adicionados de farinha de soja Doko RC TN. Os macarrões produzidos com farinha de soja Doko RC e farinha de soja Doko RC TN obtiveram boa aceitação, situando-se na escala hedônica nas faixas “gostei ligeiramente” e “gostei moderadamente”. / Spaghetti was prepared from wheat flour blended with 15%, 25% and 35% of nonfatted or whole DOKO RC and DOKO RC TN soybean flours. Supplementing wheat flour caused an increase in farinograph water absorption in all blends. Dough development time and stability were lower for all blends containing DOKO RC or DOKO TN flours, and it was even lower as the percentage of blend increased. A decrease in the elasticity and extensibility of the doughs were obtained for all blends containing different levels of DOKO RC or DOKO RC TN flours. Cooked weight of fortified spaghetti showed a slightly decrease in all levels of supplementation with DOKO RC and DOKO RC TN flours as compared with a standard. Cooking time was significantly lower in all levels of blend with DOKO RC and DOKO RC TN. Cooking loss of all fortified spaghetti was higher as the level of substitution increased. It was observed that cooking loss was the highest for spaghetti made of all blends immediately after processing and after 30 days of storage. Sensory evaluation data of the fortified spaghetti were statistically analysed and the results showed that the 15% level of DOKO RC TN flour in spaghetti had better score, 7,23. Protein contents of spaghetti made with 15%, 25% and 35% of DOKO RC flour were 17,02%, 20,39% e 23,08%, respectively. Spaghetti fortified with 15%, 25% and 35% of DOKO RC TN flour showed protein levels of 16,56%, 18,85% and 21,50%, respectively. Daidzein and genistein levels were higher for spaghetti and of all blends of DOKO RC TN flours, except for glycitein. Raffinose and stachyose levels were higher for spaghetti fortified with all blends of DOKO RC TN flour.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 55.pdf: 1161666 bytes, checksum: 3ce55ce3ee2bf0d0668d0a96bd60e27c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A família dos interferons (IFNs) compreende um grupo de citocinas secretadas por todas as células nucleadas presentes em mamíferos, conhecidas pelas suas atividades antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras. Com o advento da tecnologia de DNA recombinante, tornou-se possível a produção e o isolamento de grandes quantidades de IFNs, os quais vêm sendo utilizados clinicamente no tratamento de diversas enfermidades, como a hepatite C. Ao mesmo tempo, tem ocorrido uma crescente demanda no controle da qualidade destes biofármacos. Neste trabalho, estudamos a atividade biológica do IFN alfa-2b em linhagem de células Hep-2C para aplicação em ensaios de potência. Foi padronizado um ensaio antiviral para determinação de potência do IFN alfa-2b utilizando a combinação Hep-2C/vírus Mengo, no entanto vimos que a atividade antiproliferativa causada pelo IFN alfa-2b em células Hep-2C impacta negativamente na análise final dos dados. Ao considerar a via de transdução intracelular estimulada pelos IFNs, vimos mediante citometria de fluxo, que em células Hep-2C existe dose-dependência entre a ocorrência de intermediários fosforilados (pSTAT1) e a dose de IFN alfa-2b (entre 35,25 e 1000 UI/ml) empregada na estimulação destas células. Em seu conjunto, mostramos nesta tese que o ensaio de redução do efeito citopático viral para determinação da potência do IFN alfa-2b utilizando a combinação Hep-2C/vírus Mengo é informativo, porém vários aspectos devem ser considerados para minimizar prejuízos na análise final de dados. Ainda, sugerimos que a aplicação da citometria de fluxo na determinação de intermediários fosforilados em células Hep-2C seja bastante promissor no desenvolvimento de novos ensaios biológicos para a determinação de potência relativa do IFN alfa-2b. / A família dos interferons (IFNs) compreende um grupo de citocinas secretadas por todas as células nucleadas presentes em mamíferos, conhecidas pelas suas atividades antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras. Com o advento da tecnologia de DNA recombinante, tornou-se possível a produção e o isolamento de grandes quantidades de IFNs, os quais vêm sendo utilizados clinicamente no tratamento de diversas enfermidades, como a hepatite C. Ao mesmo tempo, tem ocorrido uma crescente demanda no controle da qualidade destes biofármacos. Neste trabalho, estudamos a atividade biológica do IFN alfa-2b em linhagem de células Hep-2C para aplicação em ensaios de potência. Foi padronizado um ensaio antiviral para determinação de potência do IFN alfa-2b utilizando a combinação Hep-2C/vírus Mengo, no entanto vimos que a atividade antiproliferativa causada pelo IFN alfa-2b em células Hep-2C impacta negativamente na análise final dos dados. Ao considerar a via de transdução intracelular estimulada pelos IFNs, vimos mediante citometria de fluxo, que em células Hep-2C existe dose-dependência entre a ocorrência de intermediários fosforilados (pSTAT1) e a dose de IFN alfa-2b (entre 35,25 e 1000 UI/ml) empregada na estimulação destas células. Em seu conjunto, mostramos nesta tese que o ensaio de redução do efeito citopático viral para determinação da potência do IFN alfa-2b utilizando a combinação Hep-2C/vírus Mengo é informativo, porém vários aspectos devem ser considerados para minimizar prejuízos na análise final de dados. Ainda, sugerimos que a aplicação da citometria de fluxo na determinação de intermediários fosforilados em células Hep-2C seja bastante promissor no desenvolvimento de novos ensaios biológicos para a determinação de potência relativa do IFN alfa-2b.

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-12. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:28:35Z : No. of bitstreams: 1 000850034.pdf: 1958965 bytes, checksum: 19fdba345238432739b0e6a6d3b2303a (MD5) / O melasma é uma hipermelanose focal e adquirida de curso crônico que afeta áreas fotoexpostas, especialmente, de mulheres em idade fértil. Diversos fatores contribuem para seu desenvolvimento: exposição solar, esteroides sexuais, medicamentos e história familiar. Recentemente, ancestralidade referida foi apontada como outro fator de risco. E este fato incentivou a investigação da ancestralidade relacionada ao melasma. O principal objetivo desse projeto foi avaliar a associação entre a ancestralidade genética e o melasma facial. Foi realizado um estudo transversal envolvendo mulheres portadoras de melasma facial e seu grupo controle, pareado por idade, entre pacientes do Hospital das Clínicas, FMB-Unesp, Botucatu (Brasil). Foram excluídos descendentes de asiáticos, portadores de outras dermatoses faciais e fototipos extremos (I e VI). Após inquérito de dados clínicos e demográficos, foi coletado swab da mucosa oral para posterior extração de DNA, e a partir deste material, realizada avaliação da ancestralidade genética por estudo de marcadores informativos de ancestralidade do tipo INDEL. Foram avaliadas 119 mulheres com melasma facial e seus 119 controles. A idade média do início do melasma ocorreu aos 27±8 anos. Gestação (40%), exposição solar (37%) e contraceptivo oral hormonal (22%) foram os fatores mais frequentemente relatados como desencadeantes. Todos os sujeitos apresentaram algum grau de miscigenação quanto à ancestralidade genética. Os componentes Ancestralidade e melasma facial Maria Paula Barbieri D'Elia 14 genéticos africano e europeu diferiram significativamente entre casos e controles (10% vs 6%; 77% vs 82%; p<0,05). O percentual de ancestralidade africana (OR=1,04), história familiar de primeiro grau (OR=3,04), baixa escolaridade (OR=4,04) e uso de antidepressivos entre indivíduos com familiares acometidos pelo melasma (OR=6,15) associaram-se à doença, independentemente dos demais fatores...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-16Bitstream added on 2014-06-13T19:13:02Z : No. of bitstreams: 1 koshima_fat_me_jabo.pdf: 437027 bytes, checksum: d563e6f656f0c1544f2d9bf446eac284 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente trabalho foi realizado em duas Fazendas Experimentais da Monsanto do Brasil Ltda, localizadas nos municípios de Barretos – SP e Rolândia – PR, na safra verão 2007/08. O objetivo deste trabalho foi avaliar os parâmetros de estabilidade e adaptabilidade de oito linhagens elites de milho (seis utilizadas como fêmea e duas como macho em cruzamentos de híbridos simples comerciais e experimentais) em oito ambientes pelo modelo de EBERHART & RUSSELL. Os ambientes foram caracterizados por duas localidades, duas épocas de semeadura (setembro e outubro) e dois sistemas de manejo de solo (convencional e plantio direto). Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados com quatro repetições. Avaliaramse os caracteres de produção de grãos (kg ha-1), rendimento de sacos de sessenta mil sementes por hectare, altura de plantas, altura de espiga e comprimento de espiga. Constataram-se efeitos significativos para as linhagens, ambientes e interação linhagens x ambiente para todas as características avaliadas. Observou-se que todas as linhagens tiveram comportamento imprevisível para produção de grãos. De uma forma geral, observou-se uma maior produção de grãos no ambiente de Rolândia, semeado em setembro no sistema de plantio direto. O ambiente que propiciou a maior produção de grãos, necessariamente não é o ambiente com maior rendimento de sacos de 60 mil sementes por hectare. Os ambientes de Barretos se mostraram propícios para aumentar os parâmetros de altura de planta e altura de espiga. Três das oito linhagens mostraram uma adaptabilidade a ambientes desfavoráveis, enquanto que as demais linhagens... / This work was conducted in two Monsanto’s farms, located in the cities of Barretos – SP and Rolândia – PR during the 2007/08 summer season. The objective of this work was to evaluate the parameters of stability and adaptability of eight Elite inbred lines of maize (six used as female and two used as male in single crosses of commercial and experimental hybrids) in eight environments by EBERHART & RUSSELL’s method. The environments were characterized by two locations, two planting dates (September and October) and two systems of soil tillage (no till and tillage). The experimental design used was a complete randomized block with four replications. It was observed the characters of grain yield (kg ha-1), weight of thousands kernels, yield of sixty thousand kernels bag ha-1, plant height, ear height and ear length. It was evidenced significant effects for inbred lines, environments and inbred lines x environment interaction for all traits evaluated. It was observed that all inbred lines showed unstable behaviour. In general, there was a higher grain yield in environment of Rolândia, planted in September in no till system. The environment with the highest grain yield, not necessarily is the environment with highest yield of 60 thousand kernels bags ha-1. Environments of Barretos showed conditions to increasing the parameters of plant height and ear height. Three of eight inbred lines showed an adaptability to unfavorable environments, while other inbred lines showed an adaptability to favorable environments. Only two inbred lines showed the coefficient of determination above 80%. In general, the inbred line 8-F had the fourth highest grain yield (2675.3 kg ha-1) and ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-01-23Bitstream added on 2014-06-13T19:54:55Z : No. of bitstreams: 1 000752787.pdf: 949203 bytes, checksum: 3f4fc6994a1e80343b347a26e1cadb07 (MD5) / O presente trabalho tem por objetivo avaliar a capacidade de combinação de linhagens tropicais e testadores com introgressão de germoplasma temperado para a produção de híbridos de milho doce adaptados as condições brasileiras. Foram obtidos vinte e dois híbridos topcrosses originários dos cruzamentos de onze linhagens tropicais de milho super doce em cruzamento com dois testadores super doce que apresentavam introgressão de germoplasma temperado. As linhagens tropicais foram obtidas por meio de seis gerações de endogamia e seleção, após a incorporação do gene shrunken-2 em seis diferentes populações de milhos brasileiros amiláceos, utilizando o método de retrocruzamento parcial. Os dois testadores utilizados denominados de 106 e 107 foram constituídos pela mistura equitativa de sementes de vinte e duas linhagens S3 obtidas a partir de dois híbridos simples comerciais diferentes, de origem asiática tropical, com introgressão de germoplasma temperado. Os vinte e dois híbridos topcrosses, juntamente com as testemunhas comerciais ‘Tropical Plus®’ (Syngenta) e ‘AF-428®’ (Sakata Seed Sudamerica), os testadores temperados 106 e 107, bem como o híbrido entre as populações originais de 106 e 107 em equilíbrio (S0), totalizando 27 tratamentos, foram avaliados em duas épocas de cultivo, primavera e verão com semeadura em outubro de 2012 e janeiro de 2013, respectivamente. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com três repetições. Foram avaliadas as seguintes características agronômicas: número de dias para florescimento feminino, altura de planta, altura de espiga e porcentagem de acamamento. Após a colheita foi avaliada a produção total com... / This study aims to evaluate the combining ability of tropical lines and testers with introgression of temperate germplasm for the production of sweet corn hybrids adapted to Brazilian conditions. Twenty-two topcrosses hybrids originated from crosses of eleven super sweet tropical corn lines crossed with two super sweet testers who had temperate germplasm introgression were obtained. The tropical strains were obtained through six generations of inbreeding and selection after the incorporation of the shrunken-2 gene in six different populations of Brazilian amylaceous corn, using the method of partial backcross. The two testers used, called 106 and 107, were made by equal mixture of seeds of lines S3 obtained from two different commercial single cross hybrids, of tropical Asian origin, with temperate germplasm introgression. The twenty-two topcrosses hybrids, along with the commercial controls ‘Tropical Plus®’ (Syngenta) and ‘AF-428®’ (Sakata Seed Sudamerica), temperate testers 106 and 107, as well as the hybrid between the original populations of 106 and 107 in equilibrium (S0), totaling 27 treatments were evaluated in two cropping seasons, spring and summer, with sowing in October 2012 and January 2013, respectively. The experimental design was the randomized block design with three repetitions. The following agronomic traits were evaluated: number days to female flowering, plant height, ear height, and plant lodging percentage. After harvesting, total production with straw, straw percentage, total production without straw, commercial production without straw and straw cover were assessed. In the commercial ones, ear length without straw, ear diameter without straw, number of rows of kernels per ear, filling ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-07Bitstream added on 2014-06-13T20:23:21Z : No. of bitstreams: 1 espindola_smcg_dr_jabo.pdf: 360908 bytes, checksum: 4d6651892be89ff6a6c3957a8387c0d9 (MD5) / Atualmente, a soja destaca-se como a mais importante oleaginosa cultivada no mundo. Os investimentos em pesquisa levaram à tropicalização da soja, permitindo, pela primeira vez na história, que o grão fosse plantado com sucesso, em regiões de baixas latitudes, entre o Trópico de Capricórnio e a linha do Equador. Em função disso tem-se buscado o desenvolvimento de genótipos com ampla adaptabilidade, o que implica em uma baixa interação genótipo x ambiente. O entendimento do tipo de interação permite um melhor posicionamento e indicação de regiões de plantio da cultivar em questão facilitando o trabalho do melhorista. A presença desse fenômeno pode acarretar uma redução da produtividade global de uma área para a qual se faça uma indicação geral de uma dada cultivar. Por outro lado, pode-se tirar proveito de sua existência usando-se procedimentos estatísticos que identifiquem o padrão dessa interação, e gerem informações que possibilitem o agrupamento de locais em zonas dentro das quais a magnitude da interação não seja significativa, permitindo indicações específicas de cultivares para tais zonas. O uso de ferramentas moleculares tem se apresentado como uma opção para seleção de características com base no genótipo e eliminando assim o efeito do ambiente na expressão da característica em questão. O melhoramento assistido por marcadores moleculares tem sido tema de inúmeros trabalhos de seleção assistida, cujos resultados variam de concretos e positivos a controversos e pouco significativos em termos de ganhos genéticos, econômicos e eficiência, quando comparados com a seleção fenotípica. Os capítulos seguintes permitem apresentar resultados de metodologias moleculares e convencionais aplicadas em um programa de melhoramento para seleção de genótipos superiores de soja. / Nowadays, soybean highlights as the most important oilseed cultivated in the world. The investments in research led to soybean “tropicalization”, allowing, for the first time in history, that the grain was seeded with success, in low latitudes, between the tropic of Capricorn and the Equator. Due to this, researchers have tried to develop wide adaptability genotypes, which implies in a low genotype x environment interaction. The comprehension of the type of interaction allows a better placement and indications of cultivar planting regions, facilitating the breeder’s work. The presence of this phenomenon may result in a global productivity decrease of an area that make up an overall indication of a given cultivar. On the other hand, it is possible to take advantage of their existence using statistical procedures to identify the pattern of this interaction, and generate information that allow the grouping of local areas within which the magnitude of the interaction is not significant. Specific cultivar indication for these zones. The use o molecular tools have shown as an option for characteristics selection base on genotype and then eliminating the environment effect in the expression of the characteristic in question. The molecular marker-assisted breeding has been the subject of numerous works assisted selection, whose results varies from concrete and positive to controversial and little significant in terms of genetic gains, and economic efficiency compared to phenotypic selection. The following chapters present results provide molecular and conventional methodologies applied in a breeding program for superior genotypes selection.

Os gliomas malignos, tumores que normalmente originam-se de células da linhagem astrocítica, são os mais comuns e devastadores tumores primários do sistema nervoso central. O Glioblastoma multiforme (GBM) é a classe mais freqüente e uma das formas mais agressivas de câncer. Como conseqüência, a sobrevivência após o diagnóstico é geralmente de menos de um ano. Desta maneira, novas estratégias terapêuticas se fazem necessárias. Durante as últimas décadas, estudos sobre compostos naturais têm tido sucesso no que diz respeito à pesquisa de agentes anti-câncer, sendo que os alcalóides aporfinóides representam uma categoria com grande potencial. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da boldina, um alcalóide aporfinóide do Peumus boldus, em linhagens de glioma, e investigar os possíveis mecanismos de ação envolvidos com este efeito. A boldina foi capaz de diminuir o percentual de células das linhagens U138-MG, U87-MG e C6. Neste estudo, observamos células necróticas após tratamento na linhagem C6. O mesmo efeito não foi observado para baixas concentrações do tratamento nas linhagens U138-MG e U87-MG. A exposição à boldina por 24 h não causou ativação das caspases 3 e 9, executoras-chave da apoptose, ou clivagem do substrato PARP. De acordo com a análise do ciclo celular, boldina induziu parada na fase G2/M. O índice mitótico também demonstrou redução no número de mitoses. O tratamento com boldina não causou dano no DNA das células U138-MG e não afetou células normais (fatias organotípicas de hipocampo de ratos) com a mesma extensão que afetou as células tumorais. De acordo com estes resultados, sugerimos que a boldina pode ser um novo composto para o desenvolvimento de estratégias anticâncer. / Malignant gliomas, tumors that usually arise from cells of astrocytic lineage, are the most common and devastating primary tumors of the central nervous system. Glioblastoma multiforme (GBM) is the most frequent class and one of the most aggressive forms of cancer. As a consequence, survival after diagnosis is normally just less than 1 year. In this manner, new therapeutic strategies are urgently needed. During the last decades, works on natural compounds have been particularly successful in the field of anticancer drug research, and the aporphines alkaloids represent an interesting, potencially useful category of this agents. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of boldine, an aporphine alkaloid of Peumus boldus, in glioma cell lines, and investigate the possible mechanisms involved in this effect. Boldine was capable to decrease the percentage of cells in U138-MG, U87-MG and C6 glioma lineages. In this study we observed necrotic cells in C6 lineage after treatment. The same effect was not seen in low concentrations of treatment in U138-MG and U87-MG lineages. The exposure to boldine for 24 h did not result in increase of the activation of caspase-3 and caspase-9, key executioners in apoptosis. No increase in cleavage of the downstream substrate PARP was observed. According to cell cycle analysis, boldine appeared to induce G2/M arrest in U138-MG cells. Mitotic index also showed a reduction in the percentage of cells in mitosis. The treatment with boldine did not caused DNA damage in U138-MG cells and did not affect normal cells (rat organotypic hippocampal slices) to the extent that it affects tumor cells. According to these results, we suggest that boldine could be a new compound to the development of anticancer therapies.