Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eberlin_Samara_M.pdf: 897038 bytes, checksum: ae2e9caf86af642e06e326ab2e2ac1a1 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O modelo experimental de infecção por Listeria monocytogenes tem provado ser útil na investigação dos efeitos de novos compostos na resposta imunológica primária contra bactérias intracelulares. Em particular, o número de células hematopoéticas na medula óssea e baço é de fundamental importância na resistência a esta infecção. Neste trabalho, investigamos o efeito do extrato de Uncaria tomentosa (EUT) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos para granulócitos e macrófagos (CFU-GM) da medula óssea e do baço e a atividade estimuladora de colônias (CSA) do soro de animais normais e infectados com Listeria monocytogenes. A eficácia de EUT frente a uma dose letal da bactéria também foi avaliada. Demonstramos que o EUT protegeu os animais contra uma dose letal de L. monocytogenes, quando administrado profilaticamente nas doses de 50 e 100 mg/kg durante 7 dias, com taxas de sobrevida de 15 e 35%, respectivamente. Este tratamento também preveniu a mielossupressão e hematopoese extramedular causadas por uma dose sub-letal de L. monocytogenes, devido a um aumento no número de CFU-GM na medula óssea. Além disso, observamos uma resposta dose-dependente na estimulação da mielopoese. Animais somente tratados (não infectados) com uma a dose de 100mg/Kg também apresentaram números elevados de CFU-GM na medula óssea em relação ao grupo controle. Adicionalmente, a investigação da produção de fatores estimuladores de colônias no soro dos animais revelou um aumento da CSA nos grupos normais e infectados quando estes foram pré-tratados com EUT, sugerindo que a estimulação da mielopoese pelo extrato seja mediada pela produção de fatores de crescimento. Estes resultados favorecem a nossa hipótese de que a habilidade da Uncaria tomentosa em induzir uma alta reserva de progenitores na medula óssea seja o maior determinante da resistência à infecção / Abstract: Infection with Listeria monocytogenes has proven to be a useful model to investigate early effects of new compounds on the immune response to intracellular bacteria. In particular, the number of hematopoietic cells in the bone marrow and spleen is critically important to resistance to this infection. In this study, we demonstrated that Uncaria tomentosa extract (UTE) protects mice from a lethal dose of Listeria monocytogenes when administered prophylacticly at 50 and 100 mg/kg for 7 days, with survival rates of 15 and 35%, respectively. These doses also prevented the myelosuppression and the splenomegaly due to increased numbers of granulocyte-macrophage progenitors (CFU-GM) caused by a sublethal infection with L. monocytogenes. Moreover, stimulation of myelopoiesis ocurred in a dose-dependent manner. Non-infected mice treated with 100 mg/kg UTE also presented higher numbers of CFU-GM in the bone marrow than the controls. Furthermore, investigation of the production of colony-stimulating factors revealed increased colony-stimulating activity in the serum of normal and infected mice pre-treated with UTE, suggesting that stimulation of myelopoiesis by UTE is mediated by its effects on the production of growth factors.These results favour our hypothesis that the ability of Uncaria tomentosa to induce a higher reserve of myeloid progenitors is of major significance in determining early resistance to infection / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Resta_AndreiadosSantos_M.pdf: 837966 bytes, checksum: ca84712f5cd6dd4ba54f60e463697d96 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Neste trabalho foi investigado o efeito imunomodulador do extrato seco de Spirulina sp sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos de granulócitos-macrófagos (CFU-GM) na medula óssea e no baço de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes. Alterações no peso do baço e na resistência dos animais à infecção também foram estudadas. Foram testadas quatro doses do extrato de Spirulina sp: 50, 150, 200 e 300 mg/kg/dia, administradas por via oral aos animais. Três protocolos de tratamento foram utilizados para avaliar os efeitos da alga sobre a resistência de camundongos infectados intraperitonealmente com uma dose letal Listeria monocytogenes (6x104 bactérias/animal). No primeiro protocolo, animais infectados foram pré-tratados por 7 dias com as diferentes doses do extrato. No segundo, doses de 150 e 200 mg/kg/dia foram administradas aos animais por 14 dias consecutivos, sendo que a suspensão de bactérias foi inoculada no 7° dia de tratamento. No terceiro protocolo, os animais foram submetidos a um pós-tratamento de 7 dias com essas mesmas doses de extrato. Para avaliação dos parâmetros hematopoéticos foi utilizado apenas o protocolo de pré-tratamento e os animais foram sacrificados 24, 48 e 72 h após inoculação intraperitoneal de uma dose subletal de Listeria monocytogenes (1x105 bactérias/animal). Animais infectados com uma dose subletal de Listeria monocytogenes apresentaram um decréscimo significativo no número de CFU-GM da medula óssea 48 e 72 h após a infecção. Esse efeito foi acompanhado por um aumento no número dessas células no baço assim como no peso deste órgão. Todas as doses de Spirulina utilizadas protegeram contra a mielossupressão provocada pela bactéria, porém um aumento estatisticamente significativo neste parâmetro foi obtido para as doses de 150 e 200 mg/kg/dia em relação ao controle e às outras doses. Estimulação da mielopoese também foi observada nos grupos de animais normais (não infectados) tratados por 7 dias com 150 e 200 mg/kg/dia de Spirulina em relação aos outros grupos. Além disso, o pré-tratamento dos animais infectados com todas as doses avaliadas inibiu o desenvolvimento da esplenomegalia e da hematopoese esplênica. Nenhuma alteração foi observada no baço dos animais apenas tratados. Empregando-se esse mesmo protocolo de pré-tratamento, as doses de 150 e 200 mg/kg/dia também aumentaram a resistência de camundongos letalmente infectados com Listeria monocytogenes, concordando com os resultados obtidos na avaliação dos parâmetros hematopoéticos. Quando o tratamento foi prolongado para 14 dias com essas mesmas doses de extrato e os animais infectados no 7o dia de tratamento, observou-se um aumento estatisticamente significativo de 35% e 30% na probabilidade de sobrevida dos animais infectados que receberam 150 e 200 mg/kg/dia da alga, respectivamente. No entanto, nenhuma alteração no tempo de sobrevida de animais infectados foi observada com o protocolo de pós-tratamento por 7 dias com 150 e 200 mg/kg/dia de extrato de Spirulina sp. Estes resultados apontam para um efeito imunoestimulante da alga quando utilizada profilaticamente e sugerem que o aumento na resistência do hospedeiro à infecção depende, em parte, do protocolo utilizado. Neste sentido, a administração do extrato seco de Spirulina sp previamente à infecção parece ser fundamental para aumentar a resistência imunológica do hospedeiro, provavelmente devido à estimulação da geração de precursores hematopoéticos de granulócitos e macrófagos, críticos para a defesa inicial do organismo contra a infecção bacteriana / Abstract: In this work, we investigated the effects of Spirulina sp extract on the growth and differentiation of bone marrow and spleen hematopoietic progenitors (CFU-GM) in normal and in Listeria monocytogenes-infected mice. Changes in spleen weight and resistance to a lethal dose of bacteria were also studied. To evaluate the hematopoietic activity, BALB/c mice were treated orally with 50, 150, 200 and 300 mg/kg doses of the extract for 7 consecutive days and, at the end of this period, they were infected intraperitoneally with a sublethal dose of the bacteria (1x103 bacteria/animal). As expected, a significant decrease in bone marrow CFU-GM numbers was observed in mice infected with L. monocytogenes at 48 and 72 h after infection. This effect was accompanied by the development of splenic hematopoiesis with splenomegaly. Pre-treatment of these animals with Spirulina sp significantly stimulated myelopoiesis, reaching normal values of bone marrow CFU-GM when 50 and 300 mg/kg of the algae were used. On the other hand, increased numbers of bone marrow CFU-GM over control values were observed when the extract was given to mice at 150 and 200 mg/kg previously to infection. Moreover, these doses also stimulated myelopoiesis in normal mice given the extract for 7 days. All of these doses of Spirulina sp completely inhibited the extramedullar hematopoiesis and the increase in spleen weight induced by the infection. This extract did not affect splenic hematopoiesis and spleen weight when administered to normal mice. Resistance to infection was studied in mice infected with a lethal dose of L. monocytogenes (6x104 bacteria/animal) and submitted to 3 protocols of treatment with Spirulina sp. These experiments show that only the doses of 150 and 200 mg/kg given for 7 days to mice previously to infection were effective to prolong survival of these animals until 12 days, compared with non-treated infected mice which died until 6 days. When 150 and 200 mg/kg of the extract were administered to mice for 14 consecutive days and the animals were infected at the 7th day of treatment, 30 and 35% of survival were observed, respectively. In contrast, post-treatment of infected mice with these doses did not affect survival, suggesting an important role for the pre-treatment with Spirulina sp in the prophylaxis of bacterial infections. Taken together, these results suggest that the stimulatory effect of Spirulina sp on myelopoiesis is critically important to improve resistance of L. monocytogenes-infected mice. Moreover, the present results support previous work in the literature suggesting the innate immune system as a major target of Spirulina-mediated immune activation / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Mary Luci de Souza Queiroz, Giselle Zenker Justo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavalheri_FernandaHonorato_M.pdf: 15232255 bytes, checksum: 67b072a6243e1de49ef3c87948246310 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Neste trabalho investigamos o efeito imunomodulador do extrato seco da raiz de Echinacea purpurea (EEP) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos da medula óssea e do baço para a série granulócito/macrófago (CFU-GM) de animais infectados com Listeria monocytogenes. A atividade dos fatores estimuladores de colônias do soro, alterações no peso do baço e a resistência dos animais à infecção também foram estudados. Camundongos BALB/c receberam um tratamento prévio por 7 dias, via oral, de EEP nas doses de 100 mg/kg, 300 mg/kg, 750 mg/kg e 1000 mg/kg. Ao final deste período os animais foram infectados intraperitonealmente com uma dose letal de Listeria monocytogenes (lxl06 bactérias/animal) para determinação da curva de sobrevida e com uma dose subletal (lxl03 bactérias/animal) para avaliação dos parâmetros hematopoéticos. Os resultados demonstraram que o EEP administrado previamente aos animais infectados, nas doses de 300, 750, e 1000 mg/kg protegeu contra mielossupressão característica deste modelo experimental. Valores similares aos do grupo controle foram obtidos para o número de células progenitoras de granulócitos/macrófagos (CFU-GM) na medula óssea desses animais 48 horas e 72 horas após a infecção com Listeria monocytogenes, enquanto nenhuma alteração estatisticamente significativa neste parâmetro foi encontrada nos animais apenas tratados com o extrato nos quatro níveis de doses experimentais testados. Da mesma forma que para medula óssea, apenas as doses de 300, 750, e 1000 mg/kg inibiram completamente o desenvolvimento da hematopoese extramedular nos animais infectados, apresentando níveis normais de CFU-GM no baço 48 horas e 72 horas após a inoculação da bactéria. Embora o CFU-GM no baço dos animais pré-tratados com 100 mg/kg de extrato e infectados fosse estatisticamente superior ao do grupo controle, esta dose de EEP proporcionou uma redução estatisticamente significativa no número de precursores neste órgão em relação aos grupos somente infectados, nas 48 horas e 72 horas de avaliação. O aumento no peso do baço que acompanha a hematopoese esplénica no modelo murino de listeriose foi apenas parcialmente regulado pelo EEP, quando aàninistrado nas doses de 300, 750 e 1000 mg/kg. Nenhum efeito sobre este parâmetro foi observado nos animais apenas tratados. Na avaliação da atividade do EEP sobre a produção de fatores estimuladores de colônias de células hematopoéticas foi observado um aumento no número de CFU-GM para o grupo de animais pré-tratados e infectados similar ao estímulo produzido apenas pela infecção. Nos grupos de animais somente tratados, a atividade do soro também foi estatisticamente superior à do grupo controle. Este mesmo protocolo de tratamento também aumentou a resistência de animais letalmente infectados com histeria monocytogenes, alcançando 33, 50 e 16% de sobrevida para as doses de 300, 750 e 1000 mg/kg respectivamente. Concluímos, portanto, que o EEP apresenta atividade estimuladora sobre a mielopoese de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes crítica para a resistência à infecção letal observada / Abstract: In this work, we investigated the effects of Echinacea purpurea extract (EPE) on the growth and differentiation of bone marrow and spleen hematopoietic progenitors (CFU-GM) in normal and in Listeria monocytogenes-infected mice. Serum colony-stimulating activity, changes in spleen weight and resistance to a lethal dose of bacteria were also evaluated. BALB/c mice were treated orally with 100, 300, 750 and 1000 mg/kg doses of EPE for 7 consecutive days and, at the end of this period, they were infected intraperitoneally with a sublethal dose of the bacteria (lxlO3 bacteria/animal). As expected, a significant decrease in the number of bone marrow CFU-GM in mice infected with L. monocytogenes was observed during the early phase of infection. This effect was accompanied by the development of splenic hematopoiesis with splenomegaly. Treatment of these animals with 300, 750 and 1000 mg/kg of EPE previously to infection significantly stimulated myelopoiesis, reaching normal values of bone marrow CFU-GM at 48 and 72 h after infection. In addition, these doses of EPE markedly inhibited the extramedullar hematopoiesis and significantly reduced the spleen weight in infected mice. On the other hand, no effects on these parameters were observed with the 100 mg/kg dose. In addition, this extract did not affect myelopoiesis and spleen weight when administered to normal mice. Regarding the production of colony-stimulating factors (CSFs), we observed that serum from infected animals presented a higher stimulatory activity on the CFU-GM generation, and similar degrees of serum colony-stimulating activity were found in EPE-treated infected mice at all doses tested. Treatment of normal mice with all doses of EPE for 7 days also produced higher concentrations of CSFs relative to controls. Resistance to infection was studied in mice submitted to a lethal dose of L. monocytogenes (lxlO6 bacteria/animal). Administration of EPE at 300, 750 and 1000 mg/kg significantly improved the survival of mice lethally infected with L. monocytogenes, given 33%, 50% and 16% of survival, respectively. We suggest that the modulatory effect of EPE on the myelopoietic response is related to its prophylactic activity in infected mice as a mechanism to improve immunity / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Techn. Univ., Diss., 2010--München.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-17T13:31:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A ocorrência e detecção de Listeria spp foi avaliada através de uma metodologia convencional recomendada pelo FDA, com modificações, pela introdução de (1) segunda etapa de enriquecimento em condições aerobiose e (2) do uso de microaerofilia . Um total de 48 unidades de frango inteiro resfriado de diferentes marcas comercializadas na região de Florianópolis foram analisadas durante o período de maio à julho. Encontrou-se, através do método convencional em condições de microaerofilia, 18 (37,5%) amostras positivas para Listeria spp. Através do método convencional em condições de aerobiose, 14 (29,2%) amostras foram positivas para Listeria spp. Testes posteriores de identificação empregando-se API Listeria mostraram que, das 18 amostras positivas para Listeria spp em microaerofilia, foram identificadas 13 (27,1%) como Listeria monocytogenes, 1 (2,1%) como Listeria innocua, 3 (6,2%) como Listeria seeligeri, 1 (2,1%) como Listeria welshimeri. Das 14 amostras positivas para Listeria spp isoladas em condições de aerobiose, 7 (14,6%) foram identificadas como L. monocytogenes, 6 (12,5%) como L. innocua e 1 (2,1%) como L. seeligeri. Com relação à detecção, os métodos convencional em condições de microaerofilia e aerobiose apresentaram ausência de resultados falso-positivos, demonstrando especificidade de 100% e, sensibilidade de análise, de 84% e 67%, respectivamente. Concluindo-se, assim, que existem diferenças significativas entre as médias dos métodos avaliados para o nível descritivo de 1 e 5%.

Orientador : Prof. Dr. Roberto Pantarolo / Coorientadora : Profª. Drª. Wanda Moscalewski Abrahão / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 10/02/2017 / Inclui referências : f. 36-40;55-56;70-71;76-86;90-109 / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: Inúmeros surtos e casos de listeriose associados ao consumo de alimentos contaminados por Listeria monocytogenes tem sido relatados atualmente. Os métodos de identificação adotados pelas organizações oficiais para a pesquisa do patógeno em alimentos são dispendiosos de tempo e trabalho. Deste modo, uma gama de métodos alternativos está sendo desenvolvida com diferentes princípios e matrizes alimentares. Diante da falta de informações epidemiológicas mais atuais e do aparecimento de mais opções metodológicas para detecção de L. monocytogenes, a reunião e sistematização de evidências pode contribuir com futuras pesquisas no campo da microbiologia de alimentos. Os objetivos do presente estudo são verificar qual a prevalência de contaminação de L. monocytogenes em matrizes alimentares no mundo, levantar quais os métodos utilizados e tipos de alimentos mais estudados e avaliar os métodos alternativos desenvolvidos e validados através da sensibilidade e especificidade. Uma revisão sistemática quantitativa da literatura, englobando os descritores "Listeria monocytogenes", "foodborne diseases" e "food analysis" e variantes foi realizada em diferentes bases de dados. Foram encontrados 3916 registros publicados de 1986 a 2016, dos quais 557 artigos foram selecionados para a leitura na íntegra. Os estudos incluídos (343) apresentaram métodos microbiológicos, bioquímicos, imunológicos, cromatográficos, espectroscópicos e moleculares, analisando os grupos de alimentos cárneos, lácteos, aquáticos, prontos para o consumo e hortifrutigranjeiros. Além disso, a estimativa da positividade de L. monocytogenes nas amostras dos estudos (apresentadas como taxa de evento e intervalo de confiança - IC de 95%) foi calculada pelo modelo de efeito randômico Bayesiano usando o programa Comprehensive Meta Analysis version 2. A estimativa geral foi de 5,6% (IC de 95%: 4,6-6,7%). Calculando por subgrupo de continentes e alimentos, a prevalência foi maior na America do Sul de 7,6% (IC 95%: 5,0 - 11,2%) e alimentos cárneos de 8.8% (IC 95%: 6,8 - 11,4%). Estes achados demonstram uma significante prevalência deste patógeno alimentar, apontando a importância de vigilância constante a fim de assegurar a qualidade e a segurança microbiológica. Apenas 40 estudos (21%) que abordaram desenvolvimento/validação de métodos possibilitaram a avaliação da sensibilidade e especificidade por contrastarem seus resultados com métodos oficiais de referencia. Os estudos revelaram taxas próximas a 100% em ambos os parâmetros, demonstrando que outras características como tempo e custo das análises devem ser levadas em consideração para a avaliação dos métodos alternativos em estudos posteriores. Conclui-se que os resultados a respeito dos métodos de identificação de L. monocytogenes e matrizes, contribuem para geração de evidências na área e subsidiam a condução de novos estudos e aperfeiçoamento dos métodos atuais para o controle da listeriose. Palavras-chave: análise de alimentos; especificidade, L. monocytogenes; sensibilidade. / Abstract: Several outbreaks and cases of listeriosis associated with the consumption of contaminated food products by Listeria monocytogenes have been reported nowadays. The conventional methods adopted by the official organizations for the search of Listeria monocytogenes in foods are time-consuming and laborious. Thus, a large number of new methodologies with different principles and matrix are been developed. Due the lack of current epidemiologic data and the development of alternative option to identify L. monocytogenes, the systematic reunion of evidence may contribute towards future researches in the field of food microbiology. The aims of this study are to evaluate the prevalence rates of L. monocytogenes contamination worldwide, to explore the most used assays and the types of food matrix analyzed, and to evaluate the developed and validated alternative methods by its sensitivity and specificity. A quantitative systematic review of the literature, using the keywords "Listeria monocytogenes", "foodborne diseases" and "food analysis" and its variants was performed in different databasis. It was retrieved 3916 records published between 1986 to 2016, 557 of which were selected for full text reading. The studies included (343) referred to microbiological, biochemical, immunological, chromatographic, spectroscopic and molecular assays, analyzing meat, diary, aquatic, ready-to-eat, vegetable, fruits and eggs products. The estimation of pathogen positivity (presented as event rate and 95% credible intervals - CI) was calculated by Bayesian-based random effect model using Comprehensive Meta Analysis version 2 with the food samples analyzed by the studies. The overall estimation was 5.6% (CI 95%: 4.6 - 6.7%). The subgroup analysis by continent and food matrix, revealed higher estimation in South America of 7.6% (CI 95%: 5.0 - 11.2%) and in meat samples of 8.8% (CI 95%: 6.8 - 11.4%). These findings demonstrate a significant prevalence L. monocytogenes, suggesting the importance of constant surveillance measures in order to guarantee food quality and microbiological safety. Only 40 studies (21%) from development/validation methods enable the sensitivity and specificity evaluation since they bring enough to contrast results against official reference methods. The results revelead rates near 100% for both parameters, showing that others characteristics like time and cost of analysis should be considered to evaluate alternative methods in further researches. To conclude, the results about the L. monocytogenes identification methods and matrix, contribute towards evidence generating in this field and subset new studies conduction and the development and improvement of the methods for listeriosis control. Key-words: L. monocytogenes; specificity; sensitivity; food analysis.

Orientador: Mary L. S. Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miglinski_Debora_M.pdf: 5300105 bytes, checksum: 1b7205ddbf0c8568448b9cbfb1cce059 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Neste trabalho avaliamos o efeito imunomoduIador do extrato seco do Agaricus blazei Murill (ABM) sobre o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoéticos de granulócrtos-macrófagos (CFU-GM) na medula óssea e no baço de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes. Além disso a atividade estimuladora de colônias do soro, as alterações no peso do baço e a resistência dos animais frente à infecção também foram avaliados. Para a realização deste estudo, camundongos BALB/c foram tratados previamente à infecção com três diferentes doses de ABM nas concentrações de 500, 1000 e 1500mg/Kg, administradas por gavagem, por sete dias consecutivos. Posteriormente, os animais foram infectados intraperitoneaImente com uma dose subletal (1x 10 3 bactérias/animal) de Listeria monocytogenes para avaliação dos parâmetros hematopoéticos e com uma dose letal (6x 10 4 bactérias/animal) para avaliação da resistência dos animais frente à infecção, através da realização de uma curva de sobrevida. Nossos resultados demonstraram um decréscimo significativo no número de precursores hematopoéticos da medula óssea um aumento significativo na hematopoese extramedular e conseqüente esplenomegalia e um aumento na produção de fatores estimuIadores de colônias, em animais apenas infectados com Listeria monocytogenes. No entanto, quando os animais foram tratados profilaticamente com o ABM, nas doses de 1000 e 1500mg/kg, observamos uma reversão significativa da mielossupressão induzida pela infecção, resultando em níveis normais de CFU-GM. A inibição do desenvolvimento da esplenomegalia e da hematopoese extramedular, nos grupos de animais infectados e pré-tratados nas três doses estudadas também foram observados. Além disso, um aumento significativo na atividade estimuladora do soro, nos animais infectados e prétratados nas três doses estudadas, foram demonstrados em nossos experimentos, sendo que, com as doses de 1000 e 1500mg/K. um aumento adicional no período de 48h após a infecção foi observado. O tratamento com ABM aumentou a resistência dos animais frente à listeriose, sendo que, a probabilidade de sobrevida para as doses de 1000 e 1500mg/Kg foram de 50% e 80%, respectivamente. Nossos resultados sugerem que o ABM possui uma potente atividade imunomoduladora, capaz de aumentar a sobrevida dos animais infectados com uma dose letal de Lisleria monocylogenes, possivelmente devida a capacidade desse extrato de restabelecer a hematopoese medular e esplênica / Abstract: This work anaIyzed tbe immunomodulating effect of Agaricus blazei Murrill (ABM) dried extract on growth and differentiation of hematopoietic precursors of granulocyte-macrophage (CFU-GM) in the bone marrow and spIeen of BALB/c mice infected witb Lisleria monocylogenes. We aIso evaluated the colony stimulating activity of the serum, changes in spleen weigh, and the animals resistance to infection. To conduct the research, BALB/c mice were treated prior to the infection with three difeerent doses of ABM (500, 1000 and 1500mg/Kg), via gavage during seven consecutive days. After that the animals were infected intraperitoneally with a subletha1 dose (1x10 3 bacterial animaI) of Listeria monocytogenes to evaIuate tbe hematopoietic parameters. The animaIs were likely infected with a lethal dose (6x ] 04bacteria/animaI) 10 evaIuate their resistance 10 infection in a survivaI curve. The results showed a significant decrease in the hematopoietc precursors of the bone marrow, a significant increase in extramedular hematopoiesis and consequent spleenmegaly, and an increase in the production of colony stimulating factors in the non-treates infected animaIs. When the animaIs were previously treated with 1000 and 1500mg1Kg of ABM we observed a significant reversion of infection-induced mielosupression, to normal levels, spleenmegaly inhibition and extramedular hematopoiesis in the infected and pretreated groups with all the doses. A significant increase in the serum stimulating activity was also observed in the pretreated infected animais with na adicional increase in a period of 48hs after the infection with 1000 and 1500mg/Kg of the extract. The treatment with ABM increased animal resistance to listeriosis, and the probability of survival for the 1000 and 1500mg/Kg doses was 50% and 80% respectively. These results suggested that ABM is a powerful immunomodulator capable of increasing the survival of animals mfected with a lethal dose of Listeria monocytogenes, possibly due to this extract capacity of restoring marrow and splenic hematopoesis / Mestrado / Mestre em Farmacologia

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Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T17:45:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_AnaPaulaOttati_D.pdf: 575108 bytes, checksum: c15fa4b5bd43feff857f23fee42d426e (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Neste trabalho investigamos os efeitos do extrato de Chlorella vulgaris (ECV) em animais expostos ao chumbo e infectados com Listeria monocytogenes. Para a realização dos experimentos, camundongos receberam simultaneamente doses do ECV e acetato de chumbo durante 10 dias. Ao final deste período os animais foram infectados. A capacidade do ECV de reverter a mielossupressão induzida pelo chumbo foi demonstrada pelo aumento no número de CFU-GM e restabelecimento do potencial clonogênico das células pluripotentes da medula óssea em culturas de longa duração (LTBMC). A administração da alga aumentou a atividade das células NK e a capacidade proliferativa de linfócitos nos animais expostos ao chumbo e infectados. A eficácia da Chlorella nestes modelos foi demonstrada pela ação quelante do ECV, onde observamos uma redução de 34% nos níveis de metal no sangue quando a alga foi administrada simultaneamente ao chumbo. Além disso, experimentos com camundongos C57BL/6 com deficiência funcional do gene para IFN-g, demonstraram a importância dessa citocina na proteção conferida pelo ECV. O tratamento com o ECV estimulou a secreção de citocinas do tipo Th1 (IL-1, IFN-g e TNF-a) no grupo infectado e normalizou os níveis dessas citocinas nos grupos expostos ao chumbo e infectados/expostos ao chumbo. Da mesma forma, a produção de citocinas do tipo Th2 (IL-6 e IL10) foi significativamente modulada pelo extrato da alga nos grupos expostos ao chumbo, infectados e infectados/expostos ao chumbo / Abstract: In this work, we investigated the effects of Chlorella vulgaris extract (CVE) in lead-exposed and Listeria monocytogenes infected mice. Experiments were carried out in mice treated simultaneously with CVE and lead acetate for 10 days. At the end of this period, the animals were infected. The capacity of CVE to prevent the myelosuppression induced by lead was demonstrated by the increased numbers of CFU-GM in clonal assays and the restored clonogenic potential of pluripotent stem cells in long-term bone marrow cultures (LTBMC). The extract also stimulated NK cell activity and lymphocyte proliferation in lead-exposed and infected animals. A 34% reduction of blood lead levels was observed when CVE was given to mice simultaneously to lead acetate, suggesting a chelating activity of Chlorella. Experiments in mice lacking a functional IFN-g gene demonstrated that this cytokine is of paramount importance in the protection afforded by CVE. The CVE treatment stimulated the secretion of Th1 cytokines (IL-1, IFN-g e TNF-a) in the infected group, and normal levels of these cytokines were determined in the lead-exposed groups. Likewise, the production of Th2 type cytokines (IL-6 and IL-10) was modulated by the algae extract in all groups studied. / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Helio Langoni / Resumo: A refrigeração é um importante método de conservação do leite, porém quando ocorre por longo período, a qualidade desse produto pode ser alterada devido, principalmente, a multiplicação de bactérias psicrotróficas. Dentro desse grupo de micro-organismos, entre os gêneros patogênicos, destaca-se Listeria monocytogenes. A identificação deste patógeno em alimentos é de interesse não somente pelos efeitos nocivos aos animais, mas também pelos efeitos na saúde humana. O objetivo do presente estudo foi investigar a presença de L. monocytogenes em 95 amostras de leite bovino de conjunto de pequenas propriedades leiteiras de agricultura familiar. As amostras de leite foram cultivadas nos meios seletivos de PALCAM e ALOA e as colônias características foram avaliadas por métodos fenotípicos e moleculares, pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), para detecção de L. monocytogenes. Apesar dos resultados negativos no cultivo e na PCR, a patogenicidade de L. monocytogenes para os animais e os riscos em saúde pública, justificam estudos continuados para vigilância epidemiológica do agente em produtos de origem animal como o leite. / Abstract: Refrigeration is an important milk preservation method. However, milk quality may deteriorate if the product is refrigerated for long periods, mainly due to the growth of psychrotrophic bacteria. This group of microorganisms includes pathogenic genera, most notably Listeria monocytogenes. The detection of this bacterium in food is important, given its pathogenic effects on human and animal health and also its economic relevance. This study focused on detecting the presence of L. monocytogenes in milk samples collected at small family-owned dairy farms. Samples were cultivated on PALCAM and ALOA agars for microbiological analysis and a molecular analysis by polymerase chain reaction (PCR) was performed for the detection of L. monocytogenes. Despite the negative results obtained in both these analyses, further studies are recommended to confirm or refute the negligible effect of L. monocytogenes on small dairy farms. / Mestre