Orientador : Radovan Borojevic / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T08:59:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arcanjo_KatiaDenisedeSouza_D.pdf: 8227428 bytes, checksum: ce60d7dcab3f2fe523a6be9c914002b6 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O microambiente da medula óssea desempenha importância fundamental na proliferação e diferenciação das células progenitoras hematopoéticas bem como no controle do egresso dessas células para o sangue periférico. Embora moléculas da matriz extracelular, juntamente com citocinas, sejam cruciais na compartimentalização dos microambientes da medula óssea, ainda não se conhecem os pré-requesitos para que um determinado estroma possa sustentar a hematopoese. Usando uma linhagem celular (FDC-Pl) dependente de fator de crescimento, comparamos modelos experimentais de estromas periféricos e de medula óssea, que sustentam ou não a proliferação mielóide "in vitro". Observamos que todos os estromas produzem um grupo similar de hemopoetinas, incluindo o fator estimulador de colônias de macrófagos e granulócitos (GM-CSF), o qual pode ser liberado das monocamadas estromais, através de altas concentrações de sais, numa forma biologicamente ativa. Por outro lado, glicosaminoglicanos (GAGs) obtidos a partir desses estromas, exibiram uma capacidade de modulação da atividade biológica do GM-CSF variável, dependendo da concentração utilizada. Fibroblastos de pele, que não são capazes de sustentar a mielopoese "in vitro", sintetizam GAGs que podem inibir a atividade mielopoética de GM-CSF. Concluímos que, a qualidade dos glicoconjugados pericelulares dos estromas, presentes no microambiente local, é determinante para que um dado estroma seja capaz de sustentar a mielopoese, mesmo quando hemopoetinas biologicamente ativas são localmente produzidas. Os aspectos espaciais desse microambiente e as interações moleculares entre as células do estroma e progenitores mielóides foram investigados. Demonstramos que esse contato fisico pode disparar um "capping" de moléculas de superfície celular incluindo glicoconjugados de ácido siálico e proteoglicanos. Juntas, essas moléculas, potencialmente interativas com o GMCSF, geram um ambiente intercelular esfecífico, promovendo condições fisico-químicas requeri das para essa interação. A identificação da expressão dos HSPGs associados as superfícies celulares foi monitorada através de RT -PCR. Os estromas analisados mostraram expressão de mRNA para glipicam, betaglicam e sindecam-4. O tratamento das monocamadas estromais com PI-PLC (fosfolipase C) e tripsina branda, confinnou a presença de HSPGs de superfície celular (glipicam) e sindecam, respectivamente. Aproximadamente, 20% dos HSPGs obtidos, estão associados à membrana através de âncoras de GPI enquanto o restante, 80%, permanece integrado à membrana plasmática. Demonstramos que as moléculas marcadas com sulfato radioativo, deslocadas da superfície celular das células estromais após tratamento com tripsina branda, são capazes de aumentar a atividade biológica do GM-CSF, quando comparadas com aquelas deslocadas por PIPLC as quais não apresentaram diferenças significativas se comparadas com o controle. Esses resultados sugerem a existência de HSPGs transmembranares e associados via âncora de GPI nas superfícies das células estromais, e que, a atividade biológica de GM-CSF na proliferação de FDC-Pl "in vitro", é aumentada através de uma possível interação física entre o fator de crescimento e um HSPG transmembranar / Abstract: The bone marrow microenvironrnent plays an important role in promoting hematopoietic progenitor cell proliferation and differentiation, as well as their controlled release into the circulation. It has been shown that the extracellular matrix elements in combination with cytokines are crucial for compartmentalization of the bone marrow environrnent, but it is not clear which are the molecular and structural requirements for a given stroma to sustain hematopoiesis. Using the growth factor-dependent cell line FDC-Pl, we have compared in vitro experimental models of bone marrow and peripheral stromas, two of which sustain myeloid proliferation and one which does not. We have found that all the stromas produced a similar set of hemopoietins, including the GM-CSF, which could be released from the stromal cell layer in an active form by high-salt buffers. On the other hand, glycosaminoglycans (GAGs) obtained from stromas had variable concentration-dependent capacity to modulate the GM-CSF activity. The skin fibroblasts, which can not sustain myelopoieis in vitro, synthesized GAGs that could inhibit the myelopoiesis-promoting activity of GM-CSF produced by the same cells. We conclude that the quality of the stroma pericellular glycoconjugates, present in microenvironrnent, is determinant for the ability of a given stroma to sustain myelopoiesis, even when biologically active hemopoietins are locally produced. The spatial organization of this microenvironrnent and molecular interactions among stroma cells and myeloid progenitors was investigated, and we have shown that the physical intercellular contact triggers the capping of cell surface molecules, including sialylated glycoconjugates and proteoglycans. Together, they generated the specific intercellular environrnent, rich in molecules potentially interactive with GM-CSF, and providing the physicochemical conditions required for this interaction. We have partially assessed the identification of the core proteins of cell-associated HSPGs of the stromal cell lines monitoring their expression by RT-PCR. The assayed stromas expressed mRNA for glypican, syndecan-4 and betaglycan. The stromal layers treatment with PI-PLC and mild trypsin confirmed the presence of hydrophobic cell surface HSPG glypican and syndecan, respectively. About 20% of the HSPG are linked to membrane by glycosilphosphatidylinositol (GPI) anchor while the remainder, 80%, are integrated in the plasma membrane. We have shown that the 35 -s labeled molecules dislodged from stroma cell membranes by mild treatment with trypsin increased the biological activity of the GM-CSF, whilst those dislodged by phospholipase-C did noto These results suggested the existence of both transmembrane HSPG and GPI-HSPG and that the biological activity of GM-CSF in FDC-Pl proliferation, in vitro, is increased by a physical interaction between growth factor and transmembranar HSPG / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:36:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eberlin_Samara_M.pdf: 897038 bytes, checksum: ae2e9caf86af642e06e326ab2e2ac1a1 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O modelo experimental de infecção por Listeria monocytogenes tem provado ser útil na investigação dos efeitos de novos compostos na resposta imunológica primária contra bactérias intracelulares. Em particular, o número de células hematopoéticas na medula óssea e baço é de fundamental importância na resistência a esta infecção. Neste trabalho, investigamos o efeito do extrato de Uncaria tomentosa (EUT) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos para granulócitos e macrófagos (CFU-GM) da medula óssea e do baço e a atividade estimuladora de colônias (CSA) do soro de animais normais e infectados com Listeria monocytogenes. A eficácia de EUT frente a uma dose letal da bactéria também foi avaliada. Demonstramos que o EUT protegeu os animais contra uma dose letal de L. monocytogenes, quando administrado profilaticamente nas doses de 50 e 100 mg/kg durante 7 dias, com taxas de sobrevida de 15 e 35%, respectivamente. Este tratamento também preveniu a mielossupressão e hematopoese extramedular causadas por uma dose sub-letal de L. monocytogenes, devido a um aumento no número de CFU-GM na medula óssea. Além disso, observamos uma resposta dose-dependente na estimulação da mielopoese. Animais somente tratados (não infectados) com uma a dose de 100mg/Kg também apresentaram números elevados de CFU-GM na medula óssea em relação ao grupo controle. Adicionalmente, a investigação da produção de fatores estimuladores de colônias no soro dos animais revelou um aumento da CSA nos grupos normais e infectados quando estes foram pré-tratados com EUT, sugerindo que a estimulação da mielopoese pelo extrato seja mediada pela produção de fatores de crescimento. Estes resultados favorecem a nossa hipótese de que a habilidade da Uncaria tomentosa em induzir uma alta reserva de progenitores na medula óssea seja o maior determinante da resistência à infecção / Abstract: Infection with Listeria monocytogenes has proven to be a useful model to investigate early effects of new compounds on the immune response to intracellular bacteria. In particular, the number of hematopoietic cells in the bone marrow and spleen is critically important to resistance to this infection. In this study, we demonstrated that Uncaria tomentosa extract (UTE) protects mice from a lethal dose of Listeria monocytogenes when administered prophylacticly at 50 and 100 mg/kg for 7 days, with survival rates of 15 and 35%, respectively. These doses also prevented the myelosuppression and the splenomegaly due to increased numbers of granulocyte-macrophage progenitors (CFU-GM) caused by a sublethal infection with L. monocytogenes. Moreover, stimulation of myelopoiesis ocurred in a dose-dependent manner. Non-infected mice treated with 100 mg/kg UTE also presented higher numbers of CFU-GM in the bone marrow than the controls. Furthermore, investigation of the production of colony-stimulating factors revealed increased colony-stimulating activity in the serum of normal and infected mice pre-treated with UTE, suggesting that stimulation of myelopoiesis by UTE is mediated by its effects on the production of growth factors.These results favour our hypothesis that the ability of Uncaria tomentosa to induce a higher reserve of myeloid progenitors is of major significance in determining early resistance to infection / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:26:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Granja_Silvia_M.pdf: 4156460 bytes, checksum: b1b84570b489260a8a070b8b91241e1c (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Claudia Bincoletto Trindade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T17:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Blanco_MarcosLuengo_M.pdf: 11771640 bytes, checksum: 07eeb35ecb8cbf763d5f368dcb0e178f (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Diante da importância da resposta hematopoética na sobrevivência de animais portadores do Tumor Ascítico de Ehrlich (TAE), neste trabalho avaliou-se os efeitos in vivo da Geléia Real (GR) sobre a hematopoese medular e esplênica de animais portadores do TAE. Camundongos machos BALB-c foram tratados por vinte dias com 500, 1000 ou 1500 mg/kg de GR, a qual foi administrada por via oral, no vigésimo dia de tratamento estes animais foram inoculados com 6 x 10'POT. 6' células do TAE e após inoculação tumoral, o tratamento com GR foi mantido por mais 3, 8 ou 13 dias. Vinte e quatro horas após a última dose de GR, a medula óssea e o baço destes animais foram retirados para a realização da análise quantitativa das células formadoras de colônias (CFU-C), a qual foi realizada através da técnica de cultura clonal em meio semi-sólido. Os resultados demonstraram que o TAE induz uma diminuição no número de CFU-C da medula óssea e um aumento deste número no baço. Entretanto, quando estes animais receberam o tratamento profilático/terapêutico com as três doses de GR, esta mielossupressão foi totalmente prevenida a partir do oitavo dia de inoculação tumoral, sendo que o número de CFU-C na medula óssea de animais portadores do TAE e tratados com 500 mglkg apresentou-se aumentado em relação ao controle normal (sem tratamento). Com relação a hematopoese esplênica, manifestada nos animais portadores do TAE, observou-se uma redução no número de CFU-C frente ao tratamento com GR, sendo que nas doses de 500 e 1000 mg/kg, foram obtidos valores próximos ao dos animais normais nos três períodos avaliados após a inoculação tumoraL O tratamento de animais normais com a GR não alterou o número de CFU-C na medula óssea e no baço. Quanto à presença de fatores estimuladores de colônias no soro dos animais portadores do TAE e tratados com 500 mg/kg de GR, verificou-se neste grupo, uma inibição parcial na produção destes fatores em relação aos animais apenas portadores do TAE. Os efeitos estimulatórios da GR sobre a hematopoese medular foram mais uma vez observados ao se avaliar os efeitos in vitro deste composto sobre o estroma medular de animais normais. Estes experimentos demonstraram que a GR, nas doses de 100 e 500 mg/L, é capaz de estimular o tecido estromal, aumentando tanto a celularidade, como o número de CFU-C no sobrenadante das culturas líquidas. Diante do exposto, pode-se concluir que a GR possui a capacidade de aumentar a sobrevida dos animais portadores do TAE, possivelmente através de um restabelecimento parcial da hematopoese medular e esplênica / Abstract: Alterations in the hematopoietic response are common in both human and animal tumor system. Thus, in this work we have investigated the hematopoietic response of tumor-bearing mice treated with Royal JelIy, employing the well established Ehrlich ascites tumour (EAT) experimental model. Royal Jelly (RJ) was given orally (500, 1000 and 1500 mg/kg) in a prophylactic-therapeutic manner (20 days before Ehrlich's cells inoculation and during 3, 8 or 13 days after it). Twenty-four hours after the last dose of RJ, the colony forming-unit (CFU-C) on the bone marrow and spleen was measured. Our results demonstrated that the treatment with the three doses of RJ recovery totally the myelossupression induced by the EAT, starting on the eight day after tumor inoculation. Moreover, the dose of 500 mg/kg increased the number of CFU-C in relation to normal mice. RJ treatment prevented partially, the presence of extamedullary hematopoiesis with the doses of 500 and 1000 mg/kg. Regarding to the colony stimulating activity (CSA), which was enhanced in the serum of EAT-bearing mice, it was partialIy inhibited when these mice were previously treated with 500 mg/kg of RJ for twenty-eight days. In relation to the effects of RJ in vitro, we have demonstrated that this substance increased the numbers of CFU-C, as welI as, the cellularityin the supematant of cultures treated with 100 or 500 mg/L. The study of survival showed a protection of EAT-bearing mice treated with the three doses of RJ studied, although EAT-bearing mice treated with 500 mg/kg of RJ presented higher rate of survival in relation to 1000 or 1500 mg/kg. The results obtained in this study indicate that RJ produces a modulation on the hematopoese medullar and extramedullar in EAT-bearing mice, which is probably related with the increased rate of survival in RJ treated mice / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Irene Lorand-Metze / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-13T21:44:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grotto_HelenaZerlottiWolf_D.pdf: 3607019 bytes, checksum: d25bdefb66b8f1355fd1c10892769c5c (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: A Técnica de Ag-NOR foi empregada em 10 aspirados de M.O. controles, 26 com LMA e 21 C 011 LLA. Convencionou-se contar separadamente as Ag-NORs como "clusters" e como pontos. (...continua) / Abstract: The silver staining method was carried out on bone marrow smears of 10 controls, 26 Acute Myelogenous Lukemia (LMA) and 21 Acute Lymphocyt Leukemia (LLA). The procedure was standardized to include separate count of clusters and dots of Ag-NORs. (...continue) / Doutorado / Doutor em Ciências Médicas

CASTRO, Alana Jocelina Montenegro de. Leishmaniose Visceral : avaliação citomorfológica da medula óssea e correlação com a gravidade da doença. 2011. 70 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-20T12:38:54Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:20:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_ajmcastro.pdf: 1202723 bytes, checksum: 72e1f4351ac05b090da58e32fb280db8 (MD5) Previous issue date: 2011 / The visceral leishmaniasis (VL) is a serious problem of public health in the Latin America and has shown an increase mortality in the Brazil. This is a systemic infectious disease involving the bone marrow, causing many hematologic manifestations. Objetives: to describe LV bone marrow features and correlate cytomorphological findings with peripheral blood parameters and the disease severity: Methodology: It is a retrospective study with gathering clinical and laboratory data of patients attended at three references hospital of Ceará State between june 2001 and August 2010. Were included 126 patients with a LV diagnosis confirmed by detection of the parasite in bone marrow and/or by positive sorology, by rK39. The slides of bone marrow aspiration of all patients were evaluated and the parasite load and the hematologic parameters were determined.The gravity was determined by the risk of death using the scoring system. Results: The age ranged from 5 months to 79 years and 74% were male. The patients from urban area accounted 68,2%. Comorbidities were associated in 31,7% patients. The more frequently finding of bone marrow were moderate/high parasite load (57,2%), dysplasia with predominance of dyserythropoiesis (80,9%), hemophagocytosis (30,1%) and granuloma (22,2%).There was one positive association between parasite load and serious neutropenia, neutrophil <500/mm3 (p=0,04), and hemophagocytosis (p=0,05). In this present study, using the model predictions based on scores was observed that 23,8% were classified as high risk of death. Most patients with a score considered with high risk of death had normocelular bone marrow, parasite load moderate/high, dyserythropoiese and dysgranulopoiese. In relation to the presence of granuloma there was a negative association statistically significant in the patients with high risk of death (p=0,02). The study points to possible diagnostic and prognostic indicators identified in the bone marrow of patients with VL. / A leishmaniose visceral (LV) é um sério problema de saúde pública na América Latina e vem apresentando uma letalidade crescente no Brasil. É uma doença infecciosa sistêmica que envolve a medula óssea, causando várias manifestações hematológicas. Objetivos: Descrever as características da medula óssea na LV e correlacionar os achados citomorfológicos com parâmetros do sangue periférico e com os sinais de gravidade da doença. Metodologia: Trata-se de um estudo retrospectivo, com levantamento dos dados clínicos e laboratoriais de pacientes atendidos em três hospitais de referência no Estado do Ceará, entre junho de 2001 a agosto 2010. Foram incluídos 126 pacientes com diagnóstico de LV, confirmado pela detecção do parasito na medula óssea e/ou pela sorologia positiva, através do rK39. As lâminas dos mielogramas de todos os pacientes foram avaliadas e a carga parasitária e os parâmetros hematológicos foram determinados. A gravidade foi determinada pelo risco de óbito, utilizando sistema de escores. Resultados: A idade variou de 5 meses a 79 anos e 74% eram do gênero masculino. Os pacientes residentes em região urbana representaram 68,2% da casuística. Comorbidades estavam associadas em 31,7% dos pacientes. Os achados mais frequentes da medula óssea foram carga parasitária moderada/alta (57,2%), displasia com predomínio de diseritropoese (80,9%), hemofagocitose (30,1%) e granuloma (22,2%). Houve uma associação positiva entre a carga parasitária com neutropenia grave, neutrófilos <500/mm3 (p=0,04) e hemofagocitose (p=0,05). No presente trabalho, utilizando o modelo de prognóstico baseado em escores, foi observado que 23,8% foram classificados como pacientes com alto risco de óbito (≥ 3). A maioria dos pacientes com escore considerado de alto risco de óbito apresentou medula óssea normocelular, carga parasitária moderada/alta, diseritropoese e disgranulopoese. Em relação à presença de granuloma, houve uma associação negativa, estatisticamente significante, nos pacientes com alto risco de óbito (p=0,02). O estudo aponta para possíveis indicadores diagnósticos e de prognósticos identificáveis na medula óssea de pacientes com LV.

Orientadores: Mary Luci de Souza Queiroz, Nancy Airoldi Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T23:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Malacrida_SolangeAparecida_M.pdf: 2096449 bytes, checksum: 4e659e79b9be635dc5dd44f5df2af885 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Neste trabalho investigamos o crescimento e diferenciação das células precursoras da medula óssea após estresse induzido pelo modelo do desamparo aprendido. Ratos Wistar fêmeas pesando 180 + 20 g foram divididos em 4 grupos: Grupo Controle; Grupo Confinado (CF); Grupo Estressado (CHE) - recebeu 60 choques escapáveis de 1 mA com intervalos randômicos variando de 5 a 25 segundos e com duração determinada pela fuga do animal; Grupo Deprimido (CHI) - recebeu choques inescapáveis de mesma intensidade, freqüência e duração dos administrados aos animais do grupo CHE. A medula óssea foi retirada 24 h após o tratamento e as células formadoras de colônias (CFU-C) estudadas através da técnica de cultura donal em meio semi-sólido. Os resultados demonstraram que ocorre redução reversível significativa no número de. CFU-C nos animais dos grupos CHI e CF. Estudamos também o envolvimento do eixo hipotálamo-hipófiseadrenal na resposta observada através do tratamento dos animais CHI, CF e Controle com o inibidor da síntese de corticóides metirapone (O ou 47 mg/Kg/dia) ou com dexametasona (O ou 1 mg/Kg). O envolvimento dos receptores opióides foi estudado através do uso da naltrexona (O ou 8 mg/Kg) ou indução de tolerância cruzada à morfina (O ou 12 mg/Kg/dia). A administração de metirapone reduziu o número de CFU-C no grupo Controle mas não alterou o quadro de mielossupressão observado anteriormente nos grupos CHI e CF. Por outro lado, a administração de dexametasona promoveu uma proteção contra os efeitos mielossupressores do estresse. Observamos também uma reversão da mielossupressão após bloqueio dos receptores opióides com o antagonista naltrexona e após a suspensão da administração de morfina em animais tratados cronicamente com a droga. Concluímos portanto, que a proteção contra a mielossupressão causada pelo estresse depende da integridade do eixo hipotálamo-hipófiseadrenal. As endorfinas promovem mielossupressão que pode ser revertida pelo uso de antagonistas ou pela redução na liberação de fatores hipotalâmico-hipofisários, induzida por altos níveis de corticóides / Abstract: In this work we have investigated the growth and differentiation of bone marrow stem cells after stress induced by the learned helplessness model. Female Wistar rats weighing 180 + 20g were divided into four groups: Control Group; Confined Group (CF); Stressed Group (CHE) - received 60 escapable shocks of 1 mA with random interval between 5 to 25 seconds determinated by the escape of the animal; and Helpless Group (CHI) received inescapable shocks in the same intensity and frequency given to the CHE group. Twenty-four hours later, the bone marrow was collected and the colony forming cells (CFU-C) studied by the technique for the clonal culture of hematopoietic cells in semi-solid medium. In the animais of the groups CHI and CF, CFU-C numbers were reversibly reduced. We have also studied the role of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the above response using in the groups CHI, CF and Control, the drugs metyrapone which inhibits the synthesis of corticosteroids (O or 47 mg/Kg/day) or dexamethasone (O or 1 mg/Kg). The involvement of opioid receptors was investigated using naltrexone (O or 8 mg/Kg) or induced cross-tolerance to morphine (O or 12 mg/Kg/day). The administration of metyrapone reduced the number of CFU-C in the control group, whereas in the CHI and CF group we observed the same pattern of mielossupression observed previously. On the other hand, the administration of dexamethasone protected against the mielossupression induced by the stress. Similarly, the same protection was observed after blockade of opíoid receptors with the antagonist naltrexone and after the interruption of the chronic morphine administration. We therefore conclude that the protection against mielossuppression induced by stress depends on the integrity of the hypothalamic pituitary axis. On the other hand, the endorphins lead to mielossuppression which is reverted by the use of antagonists or by the reduced liberation of pituitary hypothalamic factors, induced by high levels of corticosteroids / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador : Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T16:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valadares_MarizeCampos_D.pdf: 1218609 bytes, checksum: 217724b78283c81f36fd717fc91a9735 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Neste trabalho, dando prosseguimento a estudos prévios realizados em nosso laboratório investigamos os efeitos do composto diciclopentadienildiclorotitânio IV, DDCT, (15 mg/kg/dia/ dois dias) sobre a capacidade funcional das células ¿natural killer¿ (NK) e a produção das citocinas do perfil Th1 [interleucina (IL)-2 e interferon-g (IFN-g)] e do perfil Th2 (IL-4 e IL-10) de animais normais e portadores do tumor ascítico de Ehrlich (TAE). Além disso, para efeito comparativo, acrescentamos ao nosso estudo o diciclopentadienilditiocianatotitânio IV, BCDT, o qual é um derivado do DDCT com substituições dos radicais halogênios do DDCT por pseudo-halogênios. Com o composto BCDT, além dos parâmetros imunológicos acima mencionados, avaliamos, os efeitos do tratamento com uma, duas e três doses de BCDT (10, 15 ou 30 mg/kg/dia) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoiéticos [Células formadoras de colônias de granulócitos/macrófagos (CFU-GM)], de animais normais e portadores do TAE, os quais foram previamente realizados com o DDCT. Nestes animais, avaliamos ainda a celularidade da medula óssea, a presença de fatores estimuladores de colônias hematopoéticas (CSFs ) e a sobrevida. Nossos resultados demonstraram uma maior eficácia do composto DDCT em relação ao BCDT. No entanto, apesar das diferenças encontradas, verificamos que estes titanocenos compartilham a habilidade de regular positivamente os desequilíbrios hematopoiéticos e imunológicos envolvidos na evolução temporal do TAE. Como já esperado, o TAE produziu, concomitante à mielossupressão, um aumento no número de CFU-GM esplênico e uma diminuição da celularidade da medula óssea. O tratamento dos animais portadores do TAE com o BCDT produziu, de forma dose-dependente, paralelamente a um aumento na sobrevida, um aumento da mielopoiese, uma redução no número de colônias esplênicas e uma restauração no número total e diferencial da medula óssea. A maior eficácia foi encontrada com a dose de 10 mg/kg/dia/ três dias, a qual, em animais normais, produziu melhor recuperação no número de CFU-GM na medula óssea e estimulou a produção de CSFs. Efeitos tóxicos foram observados nas maiores doses do composto associado à presença de hematopoiese esplênica e uma menor sobrevida dos animais. Quanto à produção das citocinas, o tratamento com os compostos impediu a polarização Th1-Th2 encontrada nos animais portadores do TAE. Neste sentido, o tratamento destes animais com o DDCT (15 mg/kg/dia/por dois dias) ou com o BCDT (10 mg/kg/dia/por 3dias), aumentou os níveis de secreção de IL-2, regulou positivamente a secreção atípica de IFN-g e reduziu os níveis de IL-10 aumentados durante a evolução temporal do TAE. O estudo da atividade funcional das células NK em animais portadores do TAE e tratados com os titanocenos demonstrou, especialmente com o DDCT, um aumento na capacidade citotóxica das células NK, a qual se encontrava reduzida. Estes resultados são encorajadores, uma vez que favorecem a utilização dos titanocenos em combinações terapêuticas com outros quimioterápicos visando reduzir a mielotoxicidade e suplementar a eficácia tumoricida destes agentes / Abstract: In this work, as a continuation of previous studies in our laboratory, we investigated the effects of the titanocene dicyclopentadienyldichlorotitanium IV compound, DDCT, (15 mg/kg/day/ per two days) on the natural killer cell activity (NK) and on Th1 [interleukin (IL)-2 and interferon-g (IFN-g)] and Th2 (IL-4 and IL-10) responses in normal and Ehrlich ascites tumor (EAT)-bearing mice. Moreover, for comparative effect, we also studied the dicyclopentadienylditiocianatetitanium IV, BCDT. The structural difference between these compounds is the substitution of the halides halogens present in DDCT by pseudo halogens in BCDT. With the BCDT compound, besides the immunological parameters mentioned above, we evaluated the effect of the treatment using one, two or three doses of BCDT (10, 15 or 30 mg/kg/day) on the growth and differentiation of granulocyte-macrophage progenitor cells [colony-forming units of granulocyte-macrophage (CFU-GM)], of normal and EAT-bearing mice. As studied previously with the DDCT compound, we also evaluated the bone marrow cellularity, the presence of colony stimulating factors (CSFs) and survival of these animals. Our results demonstrated that the DDCT compound is more effective than the BCDT one. In despite of the differences found, we observed that these compounds share the ability of regulating positively the hematopoietic and immunologic unbalance during the EAT evolution. As expected for the EAT-model, concomitant myelosuppression, increased number of spleen CFU-GM and changes in bone marrow cellularity were observed. The treatment of EAT-bearing mice with BCDT produced a dose-dependent increase in myelopoiesis, a reduction in splenic colonies and a restoration of the total and differential marrow cell counts. In addition, BCDT treatments also increased the survival of these animals. The most effective dose schedule was 10 mg/kg/day/per three days, which, in normal animals, also produced increased bone marrow CFU-GM numbers along with a CSF production boost. High doses of BCDT cause toxic effects and induced extramedular hematopoiese. Regarding the production of cytokines, the treatment with the titanocene compounds blocked the Th1-Th2 polarization found during the EAT progression. In this respect, the treatment of these animals with DDCT (15 mg/kg/day/per two days) or BCDT (10 mg/kg/day/per three days) increased the IL-2 levels, regulated the atypical IFN-g secretion positively and reduced the levels of IL-10, increased during the temporal evolution of EAT. In relation to the functional activity of NK cells, the treatment with both compounds enhanced the NK cell function, reduced during the EAT growth. Only the DDCT compound rescued to normal values the activity of NK cells. These up-modulatory effects demonstrated in this study, specially using the DDCT compound, indicated a new aspect of the antitumoral action mechanism of the titanocenes. Thus, it is encouraging, in this context, to consider these compounds for combination chemotherapy, protecting the host from hematotoxicity as well as supplementing tumoricidal efficacy / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientadores: Mary Luci de Souza Queiroz, Giselle Zenker Justo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cavalheri_FernandaHonorato_M.pdf: 15232255 bytes, checksum: 67b072a6243e1de49ef3c87948246310 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Neste trabalho investigamos o efeito imunomodulador do extrato seco da raiz de Echinacea purpurea (EEP) sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos da medula óssea e do baço para a série granulócito/macrófago (CFU-GM) de animais infectados com Listeria monocytogenes. A atividade dos fatores estimuladores de colônias do soro, alterações no peso do baço e a resistência dos animais à infecção também foram estudados. Camundongos BALB/c receberam um tratamento prévio por 7 dias, via oral, de EEP nas doses de 100 mg/kg, 300 mg/kg, 750 mg/kg e 1000 mg/kg. Ao final deste período os animais foram infectados intraperitonealmente com uma dose letal de Listeria monocytogenes (lxl06 bactérias/animal) para determinação da curva de sobrevida e com uma dose subletal (lxl03 bactérias/animal) para avaliação dos parâmetros hematopoéticos. Os resultados demonstraram que o EEP administrado previamente aos animais infectados, nas doses de 300, 750, e 1000 mg/kg protegeu contra mielossupressão característica deste modelo experimental. Valores similares aos do grupo controle foram obtidos para o número de células progenitoras de granulócitos/macrófagos (CFU-GM) na medula óssea desses animais 48 horas e 72 horas após a infecção com Listeria monocytogenes, enquanto nenhuma alteração estatisticamente significativa neste parâmetro foi encontrada nos animais apenas tratados com o extrato nos quatro níveis de doses experimentais testados. Da mesma forma que para medula óssea, apenas as doses de 300, 750, e 1000 mg/kg inibiram completamente o desenvolvimento da hematopoese extramedular nos animais infectados, apresentando níveis normais de CFU-GM no baço 48 horas e 72 horas após a inoculação da bactéria. Embora o CFU-GM no baço dos animais pré-tratados com 100 mg/kg de extrato e infectados fosse estatisticamente superior ao do grupo controle, esta dose de EEP proporcionou uma redução estatisticamente significativa no número de precursores neste órgão em relação aos grupos somente infectados, nas 48 horas e 72 horas de avaliação. O aumento no peso do baço que acompanha a hematopoese esplénica no modelo murino de listeriose foi apenas parcialmente regulado pelo EEP, quando aàninistrado nas doses de 300, 750 e 1000 mg/kg. Nenhum efeito sobre este parâmetro foi observado nos animais apenas tratados. Na avaliação da atividade do EEP sobre a produção de fatores estimuladores de colônias de células hematopoéticas foi observado um aumento no número de CFU-GM para o grupo de animais pré-tratados e infectados similar ao estímulo produzido apenas pela infecção. Nos grupos de animais somente tratados, a atividade do soro também foi estatisticamente superior à do grupo controle. Este mesmo protocolo de tratamento também aumentou a resistência de animais letalmente infectados com histeria monocytogenes, alcançando 33, 50 e 16% de sobrevida para as doses de 300, 750 e 1000 mg/kg respectivamente. Concluímos, portanto, que o EEP apresenta atividade estimuladora sobre a mielopoese de camundongos BALB/c infectados com Listeria monocytogenes crítica para a resistência à infecção letal observada / Abstract: In this work, we investigated the effects of Echinacea purpurea extract (EPE) on the growth and differentiation of bone marrow and spleen hematopoietic progenitors (CFU-GM) in normal and in Listeria monocytogenes-infected mice. Serum colony-stimulating activity, changes in spleen weight and resistance to a lethal dose of bacteria were also evaluated. BALB/c mice were treated orally with 100, 300, 750 and 1000 mg/kg doses of EPE for 7 consecutive days and, at the end of this period, they were infected intraperitoneally with a sublethal dose of the bacteria (lxlO3 bacteria/animal). As expected, a significant decrease in the number of bone marrow CFU-GM in mice infected with L. monocytogenes was observed during the early phase of infection. This effect was accompanied by the development of splenic hematopoiesis with splenomegaly. Treatment of these animals with 300, 750 and 1000 mg/kg of EPE previously to infection significantly stimulated myelopoiesis, reaching normal values of bone marrow CFU-GM at 48 and 72 h after infection. In addition, these doses of EPE markedly inhibited the extramedullar hematopoiesis and significantly reduced the spleen weight in infected mice. On the other hand, no effects on these parameters were observed with the 100 mg/kg dose. In addition, this extract did not affect myelopoiesis and spleen weight when administered to normal mice. Regarding the production of colony-stimulating factors (CSFs), we observed that serum from infected animals presented a higher stimulatory activity on the CFU-GM generation, and similar degrees of serum colony-stimulating activity were found in EPE-treated infected mice at all doses tested. Treatment of normal mice with all doses of EPE for 7 days also produced higher concentrations of CSFs relative to controls. Resistance to infection was studied in mice submitted to a lethal dose of L. monocytogenes (lxlO6 bacteria/animal). Administration of EPE at 300, 750 and 1000 mg/kg significantly improved the survival of mice lethally infected with L. monocytogenes, given 33%, 50% and 16% of survival, respectively. We suggest that the modulatory effect of EPE on the myelopoietic response is related to its prophylactic activity in infected mice as a mechanism to improve immunity / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:14:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_SilviaTorres_M.pdf: 4055916 bytes, checksum: baff4036eb508a4117b2506e0204d392 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A Withania somnifera (WS) é uma planta popularmente conhecida na medicina hindu pela sua potente capacidade de reforçar a saúde e prevenir doenças. Diversas investigações científicas têm atribuído essa qualidade ao potencial adaptógeno das suas raízes, que provaram estimular a celularidade da medula óssea e a atividade de linfócitos e macrófagos peritoneais em camundongos normais e imunocomprometidos, além de elevar os níveis de citocinas e anticorpos circulantes. Estes achados têm qualificado a WS como droga imunopotencializadora e mieloprotetora, e abrem discussão para o seu uso como agente adjuvante em terapias imunossupressoras, tais como a quimioterapia e radioterapia do câncer e a antibioticoterapia em infecções severas. O nosso trabalho consistiu em avaliar os efeitos imunomoduladores da WS em um modelo experimental de infecção, uma vez que a maioria dos estudos in vivo envolvendo a planta foram realizados em animais induzidos artificialmente ao estresse ou ao câncer. No nosso estudo, os camundongos inoculados peritonealmente com uma dose subletal de uma bactéria intracitoplasmática (Listeria monocytogenes) apresentaram uma queda na atividade hematopoética (CFU-GM) da medula óssea e na produção de células linfocitárias do baço que, por sua vez, foram aumentadas nos camundongos profilaticamente tratados com a WS...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Withania somnifera (WS) is a popular plant in the hindu medicine known for its strong capacity to reinforce health and prevent diseases. Many investigations have related this quality to the roots' adaptogenic potential, which proved to stimulate marrow cellularity and to activate lymphocytes and peritoneal macrophages in normal and immunocompromised mice, as well as to elevate cytokine and circulating antibody levels. These fmdings regard WS as an immunopotentializing and myeloprotecting drug, and open discussion for its use as an adjuvant agent in immunosuppressing therapies, such as chemotherapy and radiotherapy in câncer and antibiotictherapy in severe infections. Our work consisted of evaluating WS's immunomodulatory effects in an experimental infection model, once most of the studies involving this plant were carried out in animaIs artificially induced to stress or cancer. In our study, the peritoneal injection of a sublethal dose of an intracitoplasmatic bacteria (Listeria monocytogenes) reduced bone marrow hematopoietic activity (CFU-GM) and spleen lymphocyte production in mice, which were increased when the animaIs were prophylaticlly treated with WS. The oral administration ofthe extract to normal mice significant1y stimulated granulocyte, macrophage and lymphocyte production as well when the results were compared to the non-treated animaIs. We could also note that listeriosis promoted phagocytic cellular migration ITom marrow towards spleen, but the pretreatment with WS...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Medicina Experimental / Mestre em Fisiopatologia Médica