Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-12T20:49:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nádia Consuelo Aragão.pdf: 2319940 bytes, checksum: 16c19bc70cc74a5a157a7d19a1a3df58 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-18T17:26:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nádia Consuelo Aragão.pdf: 2319940 bytes, checksum: 16c19bc70cc74a5a157a7d19a1a3df58 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-18T17:26:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nádia Consuelo Aragão.pdf: 2319940 bytes, checksum: 16c19bc70cc74a5a157a7d19a1a3df58 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / FACEPE / Lutzomyia longipalpis, vetor da leishmaniose visceral americana, está inserido em um complexo de espécies e diversas análises tem sido desenvolvidas para melhorar o conhecimento acerca desse vetor. Nesse trabalho, avaliou-se o uso da morfometria geométrica alar, da estruturação genética e da análise filognética do gene period na separação de machos das morfoespécies (1S e 2S) do Estado do Ceará. No primeiro estudo, foram analisados, 78 exemplares coletados em Sobral, em março/2012, e, 111 coletados em setembro/2012, em Caririaçu. Uma avaliação morfométrica geométrica para 12 landmarks com análises de tamanho centróide, componentes principais, variáveis canônicas e discriminantes conferiram uma distância de Mahalanobis entre 1S e 2S de 2,0198 e reclassificação com acertos de 80% dos 1S e 73,21% dos 2S. Dados do Genbank foram usados para construção de uma árvore filogenética por inferência bayesiana de um fragmento de 525 pb do gene period que separou corretamente os grupos 1S e 2S com 53% e 48% de suporte dos ramos. No segundo estudo, foram analisados 58 espécimes de Sobral, 59 de Caririaçu e 54 de Bodocó. O DNA foi sequenciado e anáilises estruturação e, filogenética, por máxima verossimilhança, para o gene period, foram feitas. Uma estruturação com K=2 correspondente aos morfotipos analisados e suporte de 55% foram obtidos. Todas as análises aplicadas, demonstraram tendência de separação das espécies crípticas de Lu. longipalpis do Estado do Ceará, conforme o padrão de manchas abdominais proposto por Mangabeira em 1969. / Lutzomyia longipalpis, a vector of American visceral leishmaniasis, is inserted in a complex of species, and several analyses have been developed to improve the knowledge about this vector. In this work, the use of the geometric morphometry, the genetic structuring and the phylogenetic analysis of the period gene in the males of morphospecies 1S and 2S from the state of Ceará was evaluated. In the first study, 78 specimens collected in Sobral, in March / 2012, and 111 collected in September / 2012, in Caririaçu, were analyzed. A geometric morphometric evaluation for 12 landmarks with centroid size analysis, main components, canonical and discriminant variables gave a Mahalanobis distance between 1S and 2S of 2.0198 and reclassification with 80% of the 1S and 73.21% of the 2S. Genbank data were used to construct a phylogenetic tree by Bayesian inference from a 525-bp fragment of the period gene that correctly separated the 1S and 2S groups with 53% and 48% support from the branches. In the second study, 58 Sobral, 59 Caririaçu and 54 Bodocó specimens were analyzed. The DNA was sequenced, and structure analysis and phylogenetic analysis for the period gene by maximum likelihood were generated. A structuring with K = 2, corresponding to analyzed morphotypes and support of 55% was obtained. All the applied analyses showed a tendency of separation of the cryptic Lu.longipalpisspecies of the State of Ceará, according to the pattern of abdominal spots proposed by Mangabeira in 1969.

Leishmaniasis is protozoan diseases, which is transport into the host during the feeding of sand fly. During the feeding of infected sand flies not only the leishmania but also the sand fly saliva are inoculated into the hosts. Sand fly saliva can strongly affect the response of the immune system. If the host hadn't met sand fly saliva yet, the course of infection is usually worse. In cutaneous leishmaniasis, the lesions developed early, being more destructive and perstiting longer, if not healed. The hosts living in endemic areas of leishmaniasis and the vector hosts are often exposed to feeding uninfected sand flies. To hosts are repeatedly inoculated the sand fly saliva antigen and induced specific cellular and antibody responses. Cellular and antibody responses are different for different hosts, attempts were made most frequently in murine and canine models. In humans, as host sis it difficult to monitor development leishamnia infectipon after previous exposure, that's why in humans mainly it is monitors the levels of antibodies, according to which we can determine the extent of sand fly bited and the risk of transmission of leishmaniasis. The specifity of immune responses against sand fly saliva is important for the testing new type of controlling and healing programs against sand fly and...

Phlebotomine sand flies are proven vectors of many pathogens including parasites of genus Leishmania. Leishmania develop in sand fly midgut which is colonized also by many others microorganisms, creating rich community known as gut microbiota. The presence and composition of gut microbiota affect sand fly mortality, but also development of transmitted pathogens. In contrast to mosquitoes, sand fly gut microbiota is not well studied. This thesis focuses on bacteria of the genera Asaia and Wolbachia and their potential impact on Leishmania in sand fly midgut. Thesis reports the first finding of Asaia sp. and Wolbachia sp. in sand flies from Balkan penninsula - hotspot for visceral leishmaniasis and phleboviruses. In 273 individuals from subgenera Larroussius were Asaia sp. and Wolbachia sp. detected with infection prevalence 2,5 % and 8,4 %, respectively. In addition, laboratory-reared sand flies were tested for presence of these bacteria: from twelve studied colonies, only Phlebotomus perniciosus was infected by Wolbachia sp. Then, we focussed on elimination of Wolbachia sp. from this laboratory colony with the aim to use Wolbachia-negative sand flies in future experiments with Leishmania. The final part of the thesis was dedicated to bacteria of the genus Asaia (specifically A. krungthepensis),...

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2012-09-11T14:49:08Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Carolina Cunha Monteiro.pdf: 2690341 bytes, checksum: c13f5fff0318498b18aff1d8e3e2f76e (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-11T14:49:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Carolina Cunha Monteiro.pdf: 2690341 bytes, checksum: c13f5fff0318498b18aff1d8e3e2f76e (MD5) / FAPEMIG CNPq CAPES Fundação Oswaldo Cruz / As Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e transmitidas pela picada dos flebotomíneos. A doença apresenta diferentes manifestações clínicas, como a leishmaniose visceral (LV). No Brasil a LV é causada pela subespécie Leishmania (L.) infantum chagasi e transmitida principalmente pelo vetor Lutzomyia longipalpis e nos últimos dez anos, a média anual de novos casos foi de 3.379. O flebotomíneo, durante o repasto sanguíneo, pode ingerir o parasito que é direcionado ao intestino médio do inseto, onde entra em contato com a microbiota. In vitro a ação dessa microbiota sobre o parasito foi avaliada demonstrando a lise na parede celular de Leishmania (L.)infantum chagasi e Leishmania (V.) braziliensis causada por Serratia marcescens, porém ainda não esta claro o seu papel no vetor. Neste trabalho foi feita a identificação por sequenciamento de DNA de isolados bacterianos do intestino médio de L. longipalpis de duas localidades brasileiras. Nas fêmeas de flebotomíeneos da Gruta da Lapinha foi encontrada pela primeira vez a bactéria da família Enterobactereaceae, Providencia sp. Nas fêmeas de Jacobina a bactéria encontrada foi a espécie Acinetobacter soli. As duas localidades apresentaram maior número de bactérias do tipo bacilos Gram negativos. Os machos de Jacobina não apresentaram crescimento bacteriano, diferentemente dos machos da Gruta da Lapinha. Para análise da influência das bactérias no desenvolvimento do parasito, Fêmeas de L. longipalpis foram infectadas com Leishmania (L.) infantum chagasi e tratadas com dois antibióticos de ação principal sobre bactérias Gram negativas, carbenicilina e gentamicina. Os parasitos do grupo tratado com carbenicilina, além de serem capazes de se estabelecer no flebotomíneos após a digestão, tiveram um aumento no seu número. O grupo tratado com gentamicina apresentou uma queda já no segundo dia pós-infecção, tendo um aumento no quinto dia. Ao incubar as bactérias identificadas no intestino médio com L. (L.) infantum chagasi in vitro, foi possível ver que as bactérias interferem no crescimento do parasito. Analisamos também a expressão de peptídeos antimicrobianos. Gambicina e defensina apresentaram diferença de expressão entre os grupos Não alimentados e Pós Digestão, sendo que a expressão foi maior em Não alimentados. No processo de interação, estabelecemos no laboratório a transmissão de L.(L.) infantum chagasi diretamente via picada do flebotomíneo a hamsters e camundongos. Os dois modelos apresentaram uma variação de 4 a 15 mil parasitos inoculados na orelha dos vertebrados. / Leishmaniasis are diseases caused by protozoa of the genus Leishmania and they are transmitted by the bite of sandflies. The disease presents different clinical manifestations, such as visceral leishmaniasis (VL). In Brazil, VL is caused by Leishmania (L.) infantum chagasi and it is transmitted by the vector bite Lutzomyia longipalpis and during the last ten years the annual new cases average of VL was 3.379. The sandfly is able to ingest the parasite during the blood meal which is directed to the insect midgut where it gets in contacts with the microbiota. The microbiota activity over the parasite was evaluated in vitro demonstrating cell walls lysis of Leishmania (L.) infantum chagasi and L. braziliensis caused by Serratia marcescens but their role in the vector is not clear yet. This work identified bacterial isolates from the L. longipalpis midgut from two deferent places in Brazil by sequencing DNA. Lapinha Cave females showed for the first time in sandflies a bacteria from the Enterobactereaceae family, Providence sp. Jacobina females’ insects presented Acinetobacter soli as a midgut bacteria. The insects from both sites showed a majority of Gram negative rods. Males from Jacobina showed no bacterial growth, unlike the Lapinha Cave ones. In order to analyze the influence of bacteria on the development of the parasite, L. longipalpis females were infected with L. (L.) infantum chagasi and treated with two difenrets antibiotics for Gram negative bacterias, carbenicillin and gentamicin. Carbenicillin treated group parasites were able to establish infection in sand flies after digestion increasing the number of parasites. The gentamicin treated group featured a parasite drop since the second day postinfection, having an increasing on the fifth day. Incubating in vitro those bacterias identified in the midgut with L. (L.) infantum chagasi, could be seen that bacteria interfere on parasite growth. We also analyzed the antimicrobial peptides expression in the insects. Gambicina and defensin expression differ between groups; Not Fed and Post Digestion. The expression was higher in Not Fed one. In the interaction process, we established the laboratory transmission of L. (L.) infantum chagasi directly by the sandfly bite on hamsters and mice. Both models showed a range 4 to 15 million parasites inoculated into the vertebrates’ ear.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:01:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3080_1.pdf: 1729482 bytes, checksum: cc52c3d552954febce109b4ce2d8f6e4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Lutzomyia longipalpis, principal vetor da Leishmania infantum chagasi, apresenta um status taxonômico bastante controverso, sendo aventada a possibilidade que esta espécie represente, na verdade, um complexo de espécies crípticas. Diferenças genéticas entre as espécies irmãs podem implicar em diferenças nas suas respectivas capacidades vetoriais, a exemplo do que é observado no mosquito Anopheles gambie. Tornam-se então necessários, estudos que visem esclarecer o real status taxonômico desta espécie, aumentando o conhecimento acerca da capacidade vetorial deste organismo. Com a finalidade de refinar as inferências genéticas para as populações de Lutzomyia longipalpis baseados no fragmento de period, o presente estudo lançou mão de métodos probabilísticos e testes de atribuição foram utilizados (máxima verossimilhança e STRUCTURE) associados com as análises de variância molecular (AMOVA) e Fst. Este trabalho visou fornecer subsídios para ratificar a presença de espécies crípticas relacionadas às manchas dos tergitos abdominais dos machos de Lutzomyia longipalpis pertencentes à localidade de Sobral-CE, entretanto as demais populações de Lu. longipalpis não apresentou estruturação genética suficiente para que sejam atribuídas ao status de complexo de espécie

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:05:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6276_1.pdf: 1215242 bytes, checksum: 3ea46dcb59e401036947e744ffa20c15 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / A enzima acetilcolinesterase (AChE) desempenha um papel fundamental na transmissão do impulso nervoso colinérgico e é alvo dos inseticidas organofosforados e carbamatos. Dois genes, Ace1 e Ace2, foram caracterizados em diferentes classes de insetos e, em mosquitos, duas mutações pontuais em Ace1 foram associadas com resistência. Apesar da resistência a estes inseticidas não ter sido ainda detectada em flebotomíneos, a seleção deste fenótipo é esperada. Neste trabalho, foi analisada a inibição de AChE de Lutzomyia longipalpis por compostos organofosforados e caracterizada parcialmente a seqüência do cDNA que codifica esta enzima neste inseto. Os resultados revelam a presença de um único gene Ace em L. longipalpis e que a atividade de AChE é inibida por organofosforados na concentração de 5 x 10-5 M. Na análise da seqüência parcial de AChE de L. longipalpis (LLAChE) observou-se que esta é homóloga àquelas de AChE1 de dípteros e que a mutação F331W é menos provável de ocorrer do que a substituição G119S, devido à restrição codante. A comparação da estrutura em 3D de LLAChE e aquelas de A. gambiae e C. tritaeniorhynchus sugerem que modificações estruturais similares, devido a mudanças não sinônimas de aminoácidos no núcleo do sítio ativo, podem ser detectadas nas três espécies

INTRODUÇÃO: Leishmaniose visceral (LV) é uma doença negligenciada que afeta milhões de pessoas no mundo e que constitui um grave problema de saúde pública. OBJETIVOS: Descrever no tempo e no espaço, a dispersão de Lutzomyia longipalpis e a expansão da LV no estado de São Paulo (SP); identificar fatores associados a estes processos. MÉTODOS: Foram realizados estudos descritivos, ecológicos e de análise de sobrevida. Informações sobre o vetor e os casos foram obtidas na Superintendência de Controle de Endemias e no Sistema de Informações de Agravos de Notificação para o período de 1997 a 2014. A área de estudo foi composta pelos 645 municípios de SP. Foram produzidos mapas temáticos e de fluxo e calcularam-se incidência, mortalidade e letalidade por LV em humanos (LVH). Utilizou-se a técnica de análise de sobrevida (Curvas de Kaplan-Meier e Regressão de Cox) para a identificação de fatores associados à dispersão do vetor e expansão da LV. RESULTADOS: A partir da detecção de Lu. longipalpis em Araçatuba em 1997, deram-se a ocorrência do primeiro caso canino (LVC) (1998) e o primeiro caso humano (LVH) autóctones (1999) em SP. Até 2014, foi detectada a presença do vetor em 173 (26,8 por cento ) municípios, LVC em 108 (16,7 por cento ) e LVH em 84 (13 por cento ). A expansão dos três fenômenos ocorreu no sentido noroeste para sudeste e se deram a velocidades constantes. Na região de São José do Rio Preto, a dispersão do vetor deu-se por vizinhança com municípios anteriormente infestados, a expansão da LV relacionou-se com os municípios sede das microrregiões e a doença ocorreu com maior intensidade nas áreas periféricas dos municípios. A presença da Rodovia Marechal Rondon e a divisa com o Mato Grosso do Sul foram fatores associados à ocorrência dos três eventos, assim como a presença da Rodovia Euclides da Cunha para presença do vetor e casos caninos, e, presença de presídios para casos humanos. CONCLUSÕES: A dispersão do vetor e da LV em SP iniciou-se, a partir de 1997, próximo à divisa com o estado do Mato Grosso do Sul, avançou no sentido noroeste para sudeste, na trajetória da rodovia Marechal Rondon, e ocorreu em progressão aritmética, com as sedes das microrregiões de SP tendo papel preponderante neste processo. A ocorrência autóctone de LVC e LVH iniciou-se na sequência da detecção de Lu. longipalpis em Araçatuba e de seu espalhamento por SP e não a partir dos locais onde anteriormente ele já estava presente. O uso da análise de sobrevida permitiu identificar fatores associados à dispersão do vetor e a expansão da LV. Os resultados deste estudo podem ser úteis para aprimorar as atividades de vigilância e controle da LV, no sentido de retardar sua expansão e/ou de mitigar seus efeitos, quando de sua ocorrência. / INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis (VL) is a neglected disease that affects millions of people worldwide and is a serious public health problem. To describe in time and space, Lutzomyia longipalpis dispersion and expansion of LV in São Paulo (SP); identify factors associated with these procedures. METHODS: We conducted descriptive studies, ecological and survival analysis. Vector information and the cases were obtained from the Superintendency of Endemic Disease Control and System for Noticeable Diseases Information for the period from 1997 to 2014. The study area was composed of 645 municipalities of SP. They were produced thematic and flow maps and were calculated incidence, mortality and lethality by LV in humans (LVH). We used the survival analysis technique (Kaplan-Meier curves and Cox regression models) for the identification of factors associated with vector dispersion and expansion of the LV. RESULTS: From Lu. longipalpis detection in Araçatuba in 1997, given the occurrence of the first canine case (LVC) (1998) and the first autochthonous human (LVH) case (1999) in SP. By 2014, the vector presence in 173 was detected (26.8 per cent ) municipalities, LVC in 108 (16.7 per cent ) and LVH in 84 (13 per cent ). The expansion of the three phenomena occurred in the northwest towards the southeast and gave constant speeds. In the region of São José do Rio Preto, the dispersion of the vector occurred by neighborhood with municipalities previously infested, LV expansion was related to the municipal headquarters of the micro and the disease was more intense in the peripheral areas of the municipalities. The presence of Marechal Rondon highway and the border with Mato Grosso do Sul were factors associated with the occurrence of the three events, as well as the presence of Euclides da Cunha highway for vector presence and canine cases, and presence of prisons to human cases. CONCLUSIONS: Dispersal vector and LV SP began, from 1997, near the border with the state of Mato Grosso do Sul, has advanced in the northwest direction to the southeast, in the path of the Marechal Rondon highway, and occurred in arithmetic progression, with the headquarters of SP micro taking leading role in this process. The autochthonous occurrence of LVC and LVH were initiated following the detection Lu. longipalpis in Aracatuba and its scattering by SP and not from the places where previously it was already present. The use of survival analysis identified factors associated with the spread of vector and the expansion of LV. The results of this study may be useful to improve the surveillance and control activities of LV, to slow its expansion and / or mitigate their effects when they occur.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-11-06T17:53:22Z No. of bitstreams: 1 Theo de Araújo Santos Corpusculos lipídios e eicosanoides nos momentos iniciais...pdf: 8310647 bytes, checksum: 79f3b7453e377fceaa874dda0b7901fe (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-06T17:53:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Theo de Araújo Santos Corpusculos lipídios e eicosanoides nos momentos iniciais...pdf: 8310647 bytes, checksum: 79f3b7453e377fceaa874dda0b7901fe (MD5) Previous issue date: 2013 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Corpúsculos lipídicos são organelas citoplasmáticas envolvidas na produção de eicosanoides em leucócitos. Eicosanoides como as prostaglandinas têm sido envolvidos no controle da resposta inflamatória e imunológica. A saliva de Lutzomyia longipalpis participa do estabelecimento e desenvolvimento da doença pela modulação das respostas hemostática, imunológica e inflamatória do hospedeiro favorecendo a infecção. Entretanto, o papel dos eicosanoides nos momentos iniciais da infecção por Leishmania ainda não foi esclarecido, assim como a participação da saliva neste contexto. Aqui, nós investigamos o papel dos eicosanoides induzidos pela saliva de L. longipalpis e produzidos pela Leishmania infantum chagasi na infecção. O sonicado de glândula salivar (SGS) de L. longipalis induziu um aumento no número de CLs em macrófagos de maneira dose e tempo dependente, o qual esteve correlacionado com o aumento de PGE2 nos sobrenadante de cultura. As enzimas COX- 2 e PGE-sintase foram co-localizadas nos CLs induzidos pela saliva e a produção de PGE2 foi reduzida pelo tratamento com NS-398, um inibidor de COX-2. Nós verificamos que o SGS rapidamente estimulou a fosforilação de ERK-1/2 e PKC-α e a inibição farmacológica dessas vias inibiu a produção de PGE2 pelos macrófagos estimulados com SGS. Em seguida, nós avaliamos o efeito da saliva de L. longipalpis sobre a produção de eicosanoides durante a infecção por L. i. chagasi no modelo peritoneal murino. Nós observamos que a saliva aumentou a viabilidade intracelular de L. i. chagasi tanto em neutrófilos como em neutrófilos recrutados para a cavidade peritoneal. As células recrutadas para cavidade peritoneal apresentaram maiores níveis da relação PGE2/LTB4 e o pré-tratamento com NS-398 reverteu o efeito da saliva sobre a viabilidade intracelular dos parasitas. Parasitas como Leishmania são capazes de produzir PGs utilizando uma maquinaria enzimática própria. Neste estudo nós descrevemos a dinâmica de formação e a distribuição celular dos CLs em L. i. chagasi bem como a participação desta organela na produção de PGs. A quantidade de CLs aumentou durante a metaciclogênese assim como a expressão de PGF2α sintase (PGFS), sendo esta enzima co-localizada nos CLs. A adição de ácido araquidônico AA à cultura de L. i. chagasi aumentou a quantidade de CLs por parasita, bem como a secreção de PGF2α. A infecção com as diferentes formas de L. i. chagasi não foi capaz de estimular a formação de CLs na célula hospedeira. Por outro lado, os parasitas intracelulares apresentaram maiores quantidades de CLs. A infecção estimulou uma rápida expressão de COX-2, mas não foi detectado aumento na produção de PGF2α nos sobrenadantes. Por fim, nós verificamos a presença do receptor de PGF2α (FP) nos vacúolos parasitóforos de macrófagos infectados com L. i. chagasi. O prétratamento das células com um antagonista do receptor FP inibiu os índices de infecção de forma dose-dependente. Em conjunto, nossos dados apontam que os eicosanoides desempenham um papel crucial para evasão da resposta imune durante os momentos iniciais da infecção por L. i. chagasi com diferentes contribuições do parasita, do vetor e da célula hospedeira neste contexto. / Lipid bodies (LB) are cytoplasmic organelles involved in eicosanoid production in leukocytes. Eicosanoids as prostaglandins (PG) have been implicated in the inflammatory and immune response control. Sand fly saliva participates of the establishment and development of the disease by modulation of haemostatic, inflammatory and immunological response of the host favoring the infection. However, the role of eicosanoids in the early steps of the infection remains to be investigated as well as the role of the sand fly in this context. Herein, we investigated the role of eicosanoids trigged by L. longipalpis saliva and produced by Leishmania infantum chagasi during infection. L. longipalpis salivary gland sonicate (SGS) induced an increase of LB number in the macrophages of a dose and time dependent manner, which was correlated with an increase of PGE2 release in the culture supernatants. Furthermore, COX-2 and PGE-synthase co-localized within the LBs induced by L. longipalpis saliva and PGE2 production was abrogated by treatment with NS-398, a COX-2 inhibitor. We verified SGS rapidly triggered ERK-1/2 and PKC-α phosphorylation, and blockage of the ERK-1/2 and PKC-α pathways inhibited the SGS effect on PGE2 production by macrophages. Next, we evaluated the effect of the L. longipalpis saliva in the eicosanoid production during L. i. chagasi in the murine peritoneal model. We observed SGS increased parasite viability inside recruited monocytes and neutrophils. In this regarding, SGS-recruited cells to peritoneal cavity displayed an increase in the levels of PGE2/LTB4 and the pre-treatment with NS-398 abrogated the sand fly saliva effect on parasite viability. Parasites as Leishmania are capable to produce PGs using enzymatic machinery itself. Parasite LBs amounts increased during metacyclogensis as well as the PGF2α synthase (PGFS) expression and this enzyme was colocalized on LBs. Exogenous addition of aracdonic acid in the Leishmania cultures increased LB number per parasite and PGF2α release. Macrophage infection with different forms of L. i. chagasi was not able to stimulate LB formation in the host cell. Notwithstanding, Leishmania infection upregulated COX-2 expression but this was not followed by PGF2α release by macrophages. We detected PGF2α receptor (FP) on the Leishmania PV surface. In addition, the pre-treatment of the host cells with a selective antagonist of FP, dramatically hampered Leishmania infection in a dose dependent manner. In set, our data point out a crucial role for eicosanoids to immune response evasion during early steps of L. i. chagasi infection with different contributions of parasite, vector and host cells in this context.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-07-18T16:05:02Z No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-18T16:05:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / No município de Camaçari, considerado área endêmica para leishmaniose visceral (LV), foi realizado estudo objetivando determinar a influência das variáveis climáticas sobre a flutuação mensal da população flebotomínica e a taxa de infecção natural desses flebotomíneos por Leishmania infantum. Para o levantamento entomológico foram realizadas capturas sistemáticas de flebotomíneos utilizando armadilhas tipo HP, tanto no peri como no intradomicílio. As residências foram selecionadas em bairros pertencentes a zona urbana orla e zona urbana sede, onde casos humanos de LV no foram registrados município. As capturas foram realizadas entre dezembro de 2011 e novembro de 2012. A relação entre pluviosidade, umidade relativa do ar e temperatura e a proporção de flebotomíneos foi calculada utilizando o coeficiente de Spearman. Para o estudo da infecção natural dos flebotomíneos foi utilizada a técnica de qPCR. Os pools avaliados foram compostos por flebotomíneos da mesma espécie, distribuídos pelas residências, ás quais foram investigadas no intra e peridomicilio. Além disso, os pools foram distribuídos de acordo com os 12 meses de coleta. Os resultados mostraram que a fauna flebotomínica é diversificada, sendo composta por quatro gêneros com ocorrência de cinco espécies. Espécimes de interesse epidemiológico foram encontrados com predominância para a espécie Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98,4%). Foi observada correlação positiva entre a densidade de flebotomíneos e a variável pluviosidade na zona urbana sede durante o período de coleta (r = 0,66, p <0,02). A correlação entre as variáveis bioclimáticas e a densidade dos flebotomíneos também foi avaliada em bairros que se destacaram individualmente pela densidade de flebotomíneos, sendo encontrado correlação positiva para a variável umidade relativa do ar (r = 0,58 p <0,04) e associação similar para a variável precipitação durante o período de coleta (r = 0,67 p <0,01). As análises moleculares mostraram infecção natural por Leishmania infantum em 10 pools de 78 de pools de Lutzomyia longipalpis analisados. Estes achados aliados à presença do vetor competente da LV, Lutzomyia longipalpis em elevada proporção, e os estudos das variáveis climáticas alertam para a necessidade de vigilância epidemiológica e constituem em ferramenta útil para o planejamento de medidas de controle contra LV no município de Camaçari. / In Camaçari city, considered an endemic area for visceral leishmaniasis (VL), the study was conducted aiming to determine the climatic variables influence on the sandflies monthly fluctuation and the natural infection rates by Leishmania infantum in the sandflies. The entomological inventory was performed with sandflies systematic captures using HP traps, both in peridomiciliar well as in intradomiciliar. The residences were selected in districts belonging to the coastline urban zone and headquarters urban zone, where human cases of VL were recorded in the city. Captures were performed between December 2011 and November 2012. The correlation between the number of sandflies and the different climatic variables was calculated using Spearman's coefficient. The sandfly natural infection was evaluated by qPCR technique. Pools reviews were composed by sand flies of the same species, distributed among households, which were investigated in peridomiciliare and intradomiciliare. Additionally, pools were distributed according to the 12-month sampling. The results showed that the phlebotomine fauna is diverse, consisting of four genera and five species. Specimens of epidemiological interest were found predominantly for Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98.4%). In addition, a positive correlation between sandfly density and pluviosity at headquarters urban zone was observed during the collection period. (r = 0.66, p <0.02). The correlation between bioclimatic variables and density of sandflies was also evaluated in neighborhoods that stood out individually by the sandfly density. A positive correlation was observed for the variable relative humidity during the collection period (r = 0.58 p <0.04) and similar association for precipitation variable in the same period (r = 0.67 p <0.01). Molecular analysis showed natural infection by Leishmania infantum in 10 pools of 78 pools of Lutzomyia Longipalpis analyzed. In summary, these findings combined with the presence of VL competent vector, Lutzomyia Longipalpis in high density, and studies of climate variables warn of the need for epidemiological surveillance and constitute a useful tool for planning control measures against VL in Camaçari. Keis

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3491581 bytes, checksum: 0b4c4a72f2099e984a7157655c0dba92 (MD5) Previous issue date: 2011-09-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work was characterized as a descriptive study of autochthonous human cases of cutaneous leishmaniasis reported between 2002 and 2010 in the city of Timóteo-Minas Gerais, associated with entomological research in the urban area and detection of Leishmania spp. among samples of sandflies captured. The human cases were characterized by a notification form and a socioeconomic and environmental questionnaire; the entomological survey was conducted with the use of Falcão traps distributed in 35 houses where cases were reported and in 15 with the absence of cases in the urban area of the municipality. The sandflies captured were identified and it was verified the natural infection of the female using PCR/RFLR technique. It was analyzed the seasonal behavior of sandflies considering the variables rainfall, air relative humidity and temperature. To enrich the study, autochthonous human cases of American cutaneous leishmaniasis were analyzed from a quantitative study, to detect clusters of cases according to census sectors, using spatial analysis as a tool. Through the characterization of cases it is suggested the presence of two installed cycles of American cutaneous leishmaniasis in the municipality, one rural and one rural. The transmission cycle of leishmaniasis in the urban area was more evident after the high number of sandflies collected in the urban area and the presence of infected samples with Leishmania braziliensis. Among the captured sandflies Nyssomyia whitmani was the specie most commonly found and also with higher number of samples infected with Leishmania braziliensis, followed by Nyssomyia intermedia and Micropygomyia quinquefer, and both species were also found to be infected with Leishmania braziliensis. In the spatial analysis it was evidenced that the census sectors near to Parque Estadual do Rio Doce are the most affected with the disease, requiring more attention. This profile of the occurrence of the disease suggests the need for reorientation of the strategies adopted for the control and prevention of the disease by the health agencies of the municipality. / O presente trabalho se caracterizou como um estudo descritivo dos casos humanos autóctones de leishmaniose tegumentar americana notificados no município de Timóteo-MG, no período de 2002 a 2010, associado à pesquisa entomológica na área urbana e detecção de Leishmania spp. em amostras de flebotomíneos capturadas. Os casos humanos foram caracterizados através da ficha de notificação e aplicação de questionário socioeconômico e ambiental; o estudo entomológico foi realizado com a utilização de armadilhas Falcão, distribuídas em 35 residências onde houveram casos e 15 com ausência de casos na área urbana do município. Os flebotomíneos capturados foram identificados e verificou-se a infecção natural das fêmeas utilizando a técnica de PCR/RFLR. Foi realizada análise do comportamento sazonal dos flebotomíneos, onde se trabalhou com as variáveis pluviosidade, umidade relativa do ar e temperatura. Em busca de enriquecer o estudo, os casos humanos autóctones de leishmaniose tegumentar americana foram analisados a partir de um estudo quantitativo, para a detecção de conglomerados de casos segundo setores censitários, utilizando como ferramenta a analise espacial. Através da caracterização dos casos é sugerida a presença de dois ciclos de leishmaniose tegumentar americana instalados no município, um rural e outro urbano. O ciclo de transmissão de leishmaniose na área urbana do município ficou mais evidente após o grande número de flebotomíneos coletados na área urbana do município e a presença de amostras infectadas com Leishmania braziliensis. Entre os flebotomíneos capturados Nyssomyia whitmani foi a espécie mais encontrada, e também com maior número de amostras infectadas por Leishmania braziliensis, seguidas por Nyssomyia intermedia e Micropygomyia quinquefer ambas espécies também encontradas com infecção por Leishmania braziliensis. Nas análises espaciais ficou evidenciado que os setores censitários próximos ao Parque Estadual do Rio Doce são os mais afetados com a doença, necessitando de maior atenção. Esse perfil de ocorrência da doença sugere a necessidade de reorientação das estratégias de controle e prevenção adotadas pelos órgãos de saúde do município.