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Ocorrência e análise da infecção natural de espécies da subfamília Phlebotominae na Fercal, Distrito Federal, Brasil/DF / Occurrence and analysis of natural infection of species of phlebotominae subfamily in Fercal, Federal District, Brazil/DF

Coelho, Thais Oliveira 30 November 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-graduação em Medicina Tropical, 2017. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-03T18:25:59Z No. of bitstreams: 1 2017_ThaisOliveiraCoelho.pdf: 1524361 bytes, checksum: e3c8a123df6dcb4461fcfb6acd0597a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-09T19:00:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_ThaisOliveiraCoelho.pdf: 1524361 bytes, checksum: e3c8a123df6dcb4461fcfb6acd0597a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-09T19:00:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_ThaisOliveiraCoelho.pdf: 1524361 bytes, checksum: e3c8a123df6dcb4461fcfb6acd0597a5 (MD5) Previous issue date: 2018-07-03 / Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAP/DF). / Introdução: Os insetos da subfamília Phebotominae são vetores de vários protozoários do gênero Leishmania que produzem doenças como a leishmaniose visceral (LV) e a leishmaniose tegumentar americana (LTA). A fauna de flebotomíneos do Distrito Federal ainda é pouco conhecida com apenas 35 espécies registradas e as pesquisas sobre infecção natural destes vetores ainda é escassa. A Região Administrativa (RA) da Fercal é uma área situada entre a Bacia do Rio Maranhão e às margens da Área de Proteção Ambiental – APA Cafuringa, com grande potencial eco-turístico que apresenta uma expansão urbana desordenada, sendo considerada área de transmissão intensa para leishmaniose visceral humana e com elevada positividade canina para Leishmania spp. Objetivo e Metodologia: O presente estudo teve como objetivo identificar as espécies de flebotomíneos, assim como sua relação com as variáveis climáticas e estimar a infecção natural do gênero Leishmania nas espécies capturadas. As capturas foram realizadas na RA da Fercal/DF em 15 Unidades Domiciliares (UD) por meio de armadilhas CDC instaladas no intradomicílio e peridomicílio e armadilha de Shannon na área de mata. A análises de infecção natural foram realizada nas espécies Lutzomyia longipalpis e Nyssomyia whitmani por meio de PCR. Resultados: Foram identificadas um total de 27 espécies com 8 registros novos para o DF, dentre 1883 espécimes capturadas e Ny. whitmani foi a espécie predominante. Verificou-se diferença significativa entre a ocorrência de flebotomíneos capturados em área de mata e área urbana, com maior ocorrência nos domicílios (p<0,0001). Com relação a pluviosidade, temperatura e umidade não foram observadas associação com a maior ou menor abundância de flebotomíneos e a avaliação da infecção natural de 194 pools de flebotomíneos não apresentou resultados positivos. Conclusões: Atualiza-se para 43 as espécies de flebotomíneos registradas no Distrito Federal. O período de maior coleta para flebotomíneos ocorreu em agosto a setembro de 2014 e as espécies Ny. whitmani e Lu. longipalpis foram mais abundantes no peridomicílio. A avaliação da infecção natural apresentou resultados negativos para Leishmania sp. Essas informações são de fundamental importância para as ações de vigilância e controle da LV e LTA, no DF. / Introduction: Insects of the subfamily Phebotominae are vectors of several protozoa of the genus Leishmania that produce diseases such as visceral leishmaniasis (LV) and American cutaneous leishmaniasis (ACL). The phlebotomine fauna of the Federal District is still little known with only 35 species registered and the research on natural infection of these vectors is still scarce. The Fercal Administrative Region (RA) is an area located between the Maranhão River Basin and the APA Cafuringa Environmental Protection Area, with great potential for eco-tourism that presents a disorderly urban expansion, being considered an intense transmission area for human visceral leishmaniasis and with high canine positivity for Leishmania spp. Objective and Methodology: The objective of this study was to identify sandfly species, as well as their relationship with climatic variables and to estimate the natural infection of the genus Leishmania in the captured species. The catches were taken at RA of Fercal / DF in 15 Domiciliary Units (UD) by means of CDC traps installed in the intradomicile and peridomicile and trap of Shannon in the forest area. The analyzes of natural infection were carried out in the species Lutzomyia longipalpis and Nyssomyia whitmani by means of PCR. Results: A total of 27 species with 8 new records were identified for DF, among 1883 specimens captured and Ny. whitmani was the predominant species. There was a significant difference between the occurrence of sand flies captured in forest and urban areas, with a higher occurrence in the households (p <0.0001). Regarding rainfall, temperature and humidity, no association was observed with greater or less abundance of sand flies, and the evaluation of the natural infection of 194 sand flies did not present positive results. Conclusions: Up to 43 species of sand flies are recorded in the Federal District. The period of greatest collection for sandflies occurred in August to September 2014 and the species Ny. whitmani and Lu. longipalpis were more abundant in the peridomicile. The evaluation of the natural infection presented negative results for Leishmania sp. This information is of fundamental importance for the actions of surveillance and control of LV and LTA in the DF.
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FAUNA FLEBOTOMÍNEA DE FRAGMENTOS DE MATA E PERIDOMICÍLIOS NA ÁREA URBANA DE NOVA ANDRADINA-MS E INFECÇÃO NATURAL POR Leishmania / FAULTY FLEBOTOMÍNEA OF WEED FRAGMENTS AND PERIDOMICÍLIOS IN THE URBAN AREA OF NEW ANDRADINA-MS AND NATURAL INFECTION BY Leishmania

Leite, Jhoy Alves 13 March 2015 (has links)
Submitted by Cibele Nogueira (cibelenogueira@ufgd.edu.br) on 2017-01-26T13:59:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) JHOYLEITE.pdf: 1672229 bytes, checksum: a842a3c0cc7cf9a97045d5acc3717c43 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T13:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) JHOYLEITE.pdf: 1672229 bytes, checksum: a842a3c0cc7cf9a97045d5acc3717c43 (MD5) Previous issue date: 2015-03-13 / The sand flies are widely distributed throughout the world. This insect group is of great interest in public health because their females are involved in the transmission of Leishmania, agents of cutaneous and visceral leishmaniasis. Forest fragments favor the maintenance of the life cycle of both, vector and agent, in nature. In Nova Andradina municipality, Mato Grosso do Sul state, Brazil, some cases of cutaneous leishmaniasis (CL) have been notified. So the goal of this study was to identify the sand fly fauna and investigate the presence of species naturally infected by Leishmania of urban forest fragments and peridomiciles close to them in Nova Andradina. The insects were captured from November 2013 to January 2015, using CDC light traps distributed in three urban forest fragments. Parasitological examination was performed to investigate flagellates in sand fly guts and Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) for identification of Leishmania spp. A total of 302 sand flies were captured (101 males and 201 females) of six genus and 11 species: Brumptomyia brumpti, Evandromyia cortelezzii, Evandromyia lenti, Evandromyia teratodes, Evandromyia termitophila, Nyssomyia neivai, Psathyromyia aragaoi, Psathyromyia bigeniculata, Psathyromyia campograndensis, Pintomyia christenseni and Sciopemyia sordellii. Only Ny. neivai is recognized as vector of cutaneous leishmanaisis agents in Southeast and South Brazilian regions, Paraguay and Argentina. Thus it may be linked to cases in Nova Andradina-MS. Br. brumpti was the most abundant and present in peridomiciles along with Ev. lenti, Ev. termitophila, Ny. neivai and Pi. christenseni. Although specimens were collected in nearly every month, their highest frequencies occurred during rainy periods, mainly for Br. brumpti, Sc. sordellii, Pi. christenseni and Ev. lenti. Of the 106 females dissected and placed in 55 pools, the presence Leishmania (Leishmania) amazonensis DNA was detected by PCR-RFLP in three species: Ev. lenti, Ev. teratodes and Sc. sordellii, as well as of Leishmania spp. in two females of Pi. christenseni and one of Sc. sordellii, resulting in a minimum infection rate of 5.66% for each taxon of Leishmania. / Os flebotomíneos, com ampla distribuição mundial, constituem um grupo de insetos de grande importância na saúde pública, cujas fêmeas estão envolvidas na transmissão de Leishmania, agentes das leishmanioses tegumentar e visceral. Esses insetos são encontrados com frequência em fragmentos de matas, onde habitats naturais favorecem a manutenção do ciclo de vida desses vetores na natureza. No município de Nova Andradina, Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil tem sido notificados vários casos de leishmaniose tegumentar. O objetivo deste estudo foi conhecer a fauna flebotomínea de fragmentos de mata e peridomicílios em área urbana e investigar a presença de espécies infectadas naturalmente por Leishmania. Os insetos foram coletados de novembro de 2013 a janeiro de 2015; utilizando-se armadilhas luminosas, tipo CDC distribuídas em três fragmentos de matas e peridomicílios adjacentes a estes, em área urbana de Nova Andradina. Foi realizado exame parasitológico para pesquisa de flagelados e análise molecular para identificação da espécie de Leishmania. Foram coletados 302 espécimes de flebotomíneos; 101 machos e 201 fêmeas. A fauna flebotomínea constituiu-se de seis gêneros e 11 espécies: Brumptomyia brumpti, Evandromyia cortelezzii, Evandromyia lenti, Evandromyia teratodes, Evandromyia termitophila, Nyssomyia neivai, Psathyromyia aragaoi, Psathyromyia bigeniculata, Psathyromyia campograndensis, Pintomyia christenseni e Sciopemyia sordellii. Dentre as espécies assinaladas, Ny. neivai é a única com importância na transmissão de agentes da leishmaniose tegumentar no Sudeste e Sul no Brasil, Paraguai e Argentina, e pode estar associada aos casos ocorridos em Nova Andradina-MS. Br. brumpti foi a espécie mais abundante e presente nos peridomicílios juntamente com Ev. lenti, Ev. termitophila, Ny. neivai e Pi. christenseni. Os espécimes foram coletados em quase todos os meses e verificou-se o aumento na abundância de indivíduos em períodos chuvosos e maior riqueza das espécies Br. brumpti, Sc. sordellii, Pi. christenseni e Ev. lenti em períodos com alta precipitação pluviométrica. Das 106 fêmeas dissecadas e acondicionadas em 55 pools, detectou-se a presença de DNA de Leishmania (Leishmania) amazonensis pela PCR seguida da análise de polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição, em um pool de cada uma das espécies: Ev. lenti, Ev. teratodes e Sc. sordellii, assim como de DNA de Leishmania spp., em dois pools de Pi. christenseni e um de Sc. sordellii; resultando, portanto, em uma taxa de infecção mínima de 5,66% para cada uma das leishmânias.
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Estudo da infecção natural de Lutzomyia longipalpis por Leishmania infantum e a flutuação mensal de flebotomíneos coletados no município de Camaçari, Estado da Bahia

Sousa, Orlando Marcos Farias de January 2014 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-07-18T16:05:02Z No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-18T16:05:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / No município de Camaçari, considerado área endêmica para leishmaniose visceral (LV), foi realizado estudo objetivando determinar a influência das variáveis climáticas sobre a flutuação mensal da população flebotomínica e a taxa de infecção natural desses flebotomíneos por Leishmania infantum. Para o levantamento entomológico foram realizadas capturas sistemáticas de flebotomíneos utilizando armadilhas tipo HP, tanto no peri como no intradomicílio. As residências foram selecionadas em bairros pertencentes a zona urbana orla e zona urbana sede, onde casos humanos de LV no foram registrados município. As capturas foram realizadas entre dezembro de 2011 e novembro de 2012. A relação entre pluviosidade, umidade relativa do ar e temperatura e a proporção de flebotomíneos foi calculada utilizando o coeficiente de Spearman. Para o estudo da infecção natural dos flebotomíneos foi utilizada a técnica de qPCR. Os pools avaliados foram compostos por flebotomíneos da mesma espécie, distribuídos pelas residências, ás quais foram investigadas no intra e peridomicilio. Além disso, os pools foram distribuídos de acordo com os 12 meses de coleta. Os resultados mostraram que a fauna flebotomínica é diversificada, sendo composta por quatro gêneros com ocorrência de cinco espécies. Espécimes de interesse epidemiológico foram encontrados com predominância para a espécie Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98,4%). Foi observada correlação positiva entre a densidade de flebotomíneos e a variável pluviosidade na zona urbana sede durante o período de coleta (r = 0,66, p <0,02). A correlação entre as variáveis bioclimáticas e a densidade dos flebotomíneos também foi avaliada em bairros que se destacaram individualmente pela densidade de flebotomíneos, sendo encontrado correlação positiva para a variável umidade relativa do ar (r = 0,58 p <0,04) e associação similar para a variável precipitação durante o período de coleta (r = 0,67 p <0,01). As análises moleculares mostraram infecção natural por Leishmania infantum em 10 pools de 78 de pools de Lutzomyia longipalpis analisados. Estes achados aliados à presença do vetor competente da LV, Lutzomyia longipalpis em elevada proporção, e os estudos das variáveis climáticas alertam para a necessidade de vigilância epidemiológica e constituem em ferramenta útil para o planejamento de medidas de controle contra LV no município de Camaçari. / In Camaçari city, considered an endemic area for visceral leishmaniasis (VL), the study was conducted aiming to determine the climatic variables influence on the sandflies monthly fluctuation and the natural infection rates by Leishmania infantum in the sandflies. The entomological inventory was performed with sandflies systematic captures using HP traps, both in peridomiciliar well as in intradomiciliar. The residences were selected in districts belonging to the coastline urban zone and headquarters urban zone, where human cases of VL were recorded in the city. Captures were performed between December 2011 and November 2012. The correlation between the number of sandflies and the different climatic variables was calculated using Spearman's coefficient. The sandfly natural infection was evaluated by qPCR technique. Pools reviews were composed by sand flies of the same species, distributed among households, which were investigated in peridomiciliare and intradomiciliare. Additionally, pools were distributed according to the 12-month sampling. The results showed that the phlebotomine fauna is diverse, consisting of four genera and five species. Specimens of epidemiological interest were found predominantly for Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98.4%). In addition, a positive correlation between sandfly density and pluviosity at headquarters urban zone was observed during the collection period. (r = 0.66, p <0.02). The correlation between bioclimatic variables and density of sandflies was also evaluated in neighborhoods that stood out individually by the sandfly density. A positive correlation was observed for the variable relative humidity during the collection period (r = 0.58 p <0.04) and similar association for precipitation variable in the same period (r = 0.67 p <0.01). Molecular analysis showed natural infection by Leishmania infantum in 10 pools of 78 pools of Lutzomyia Longipalpis analyzed. In summary, these findings combined with the presence of VL competent vector, Lutzomyia Longipalpis in high density, and studies of climate variables warn of the need for epidemiological surveillance and constitute a useful tool for planning control measures against VL in Camaçari. Keis
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Participação de gambás e cães domiciliados como reservatórios de Leishmania infantum e Trypanosoma cruzi georreferenciados nos municípios da Regional de Saúde de Três Lagoas - MS

Zuque, Maria Angelina da Silva January 2016 (has links)
Orientador: Simone Baldini Lucheis / Resumo: A Leishmaniose Visceral e a Doença de Chagas são importantes zoonoses negligenciadas do ponto de vista de saúde pública. Animais domésticos, como o cão, e animais silvestres, como os gambás, fazem parte do ciclo destas zoonoses como fontes de infecção para os vetores. O estudo foi realizado em cinco municípios da Regional de Saúde de Três Lagoas, Mato Grosso do Sul, em 2013 e 2014, com objetivo de identificar a ocorrência da infecção natural por Leishmania spp e Trypanosoma cruzi em gambás (Didelphis albiventris) e cães domiciliados, descrever aspectos epidemiológicos dessas doenças na população canina e humana, seus vetores, e a distribuição espacial da Leishmaniose Visceral Canina usando técnicas do georrefenciamento. Amostras de sangue dos cães foram submetidas a análises sorológicas e moleculares, e a dos gambás somente as análises moleculares. Em relação à pesquisa de anticorpos contra a Leishmania spp., as provas sorológicas de 683 amostras dos cães, revelaram reagentes 320 amostras ao Dual Path Platform, 300 amostras ao Enzyme Linked Immunosorbent Assay e 116 a Reação de Imunofluorescência Indireta. Para Trypanosoma cruzi, pela Reação de Imunofluorescência Indireta, quatro amostras do município de Três Lagoas foram reagentes. Das 683 amostras de sangue total, dos cães submetidas à Reação em Cadeia pela Polimerase, todas foram negativas para Trypanosoma cruzi e obteve-se êxito na amplificação de Leishmania spp em 17 amostras. As 39 amostras de sangue total dos gambás fo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL ) and Chagas disease (CD ) are important neglected zoonoses in accordance with public health. Domestic animals such as dogs and wildlife such as possums , are part of these zoonoses cycles as reservoirs and sources of infection for vectors. The study was conducted in five Regional Health of the municipalities of Três Lagoas , Mato Grosso do Sul in 2013 and 2014 , in order to verify the occurrence of natural infection with Leishmania infantum and Trypanosoma cruzi in opossums (Didelphis albiventris) and the pet dogs, and describe the characteristics of diseases in human and canine population , vectors , and the spatial distribution of canine Visceral Leishmaniasis using techniques georrefenciamento. In dog´s blood there were performed serological analysis and molecular tests ande the samples of the opossums were performed molecular tests. Regarding the research for Leishmania antibodies the techniques serological to 683 dog samples, showed reagent 320 samples to Dual Path Platform, 300 samples to Enzyme Linked Immunosorbent Assay and 116 to Immunofluorescence Antibody Test. For Trypanosoma cruzi, the test Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) four samples of Três Lagoas municipality were reactive. Of the samples from dogs 683 submitted to the Polymerase Chain Reaction were all negative by Trypanosoma cruzi gave successful amplification Leishmania spp in 17 of them. The 39 samples of the opossums were all negative by PCR to Leishmania spp. and Trypa... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Aspectos clínicos, epidemiológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental em ovinos por Toxoplasma gondii

MORAES, Érica Paes Barreto Xavier de 24 February 2010 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-25T14:02:10Z No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T14:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ERica Paes Barreto.pdf: 2810391 bytes, checksum: c2a8c78628d4782cffb353f0779d8f36 (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The aim of the present study was to evaluate the clinical, epidemiological, parasitological and reproductive aspects of the T. gondii natural and experimental infection in sheep. Firstly, Toxoplasma gondii venereal transmission via experimental infection was studied 41 seronegative sheep divided in three groups: G1, where 15 females were inseminated with semen containing 6.5 X 104 tachyzoites; G2, where 15 females were inseminated with semen containing 4 X 107 tachyzoites; and G3: 11 females inseminated with tachyzoite-free semen. In order to confirm the T. gondii infection via semen, serological tests were performed as well as the DNA of the parasite was detected in the blood using nested PCR at 0, 7, 14, 21, 28, 49,63 and 123 days post-infection (p.i.). In the G1 only 5/15 (33.3%) of the females seroconverted, while in G2 15/15 (100%)seroconverted. Regarding nested PCR analysis, it was observed that 14/15 (93.3%) of the females in the G1 and 14/15 (93.3%) from G2 were positives for T. gondii. On the other hand, in G3 all samples were negative. In addition, the reproductive disturbances were diagnosed using ultrasound and it was observed that in G1,9/15 (60%) presented embryonic reabsorption and 40% kept gestation, showing normal or dystocic delivery, stillborns and uterine atony. In the G2, embryonic reabsorption was present in 15/15 (100%) of the sheep associated with other pathologies such as 2/24 (8.3%) hydrometra, 2/24 (8.3%) mucometra and 2/24(8.3%) follicular cysts. In the G3, 8/11 of females kept gestation and delivered healthy fetuses. Besides, histopathology showed toxoplasmosis-like lesions in placentas as well as nested PCR was positive for all organs from stillborn and placenta examined. In the next step of the study, 24 non-pregnant sheep (G1 and G2) were submitted to controlled mating season and 15/24 (62.5%) got pregnant while 9/24(37.5%) did not. Those who did not get pregnant presented reproductive pathologies such as anestrous (66.6%), follicular cysts (11.1%), hydrometra and mucometra (22.2%). Next, it was investigated the elimination of Toxoplasma gondii in semen from naturally infected males. In this regard, 65 males were submitted to anti-T. gondii antibody screening using Indirect Immunofluorescence (IFI). Animals serologically positive were submitted to semen collection for parasite DNA detection. In the serological test 6/65 (9.2%) of the animals were positive. In the nested PCR using semen 4/6 (66.6%) of the animals were also positive. In the third series of experiments, 245 organs from stillborns and 28 placentas from sheep with reproductive disturbances were evaluated. Following necropsy, brain, cerebellum, spinal cord, lungs, heart, spleen, liver and placenta were harvest for nested PCR and histopathology. Nested PCR confirmed three fetuses and 2 stillborns (14.3%) positive for T. gondii in fetal organs and placenta, where heart and placenta were the most affected ones. Histopathology evidenced macroscopic damage suggesting T. gondii infection in 2/35 (5.7%) of the placentas, and toxoplasmosis-like damage in placentas with non-supurative infiltration, several necrosis focuses associated to tissue cysts. In conclusion, insemination using fresh semen experimentally contaminated with different doses of tachyzoites from T. gondii is capable of infecting sheep and produce reproductive pathologies, compromising the reproductive life of females. The detection of the proliferative form of the parasite in semen from males naturally infected by nested PCR reinforces the need for intensifying studies about the possibility ofhorizontal transmission of the parasite via semen in sheep. In addition, we reported the involvement of T. gondii in aborted fetuses and placentas of sheep naturally infected in Brazil; these data have not been described earlier in the literature. / Objetivou-se com este trabalho, estudar os aspectos clínicos, epidemiológicos, patológicos e reprodutivos da infecção natural e experimental por Toxoplasma gondii em ovinos. No primeiro, estudou-se a transmissão venérea do T. gondii através da infecção experimental via sêmen em 41 ovelhas soronegativas e divididas em três grupos: G1: 15 fêmeas inseminadas com sêmen contaminado com 6,5 X 104 taquizoítos; G2: 15 com 4 X 107 taquizoítos e G3: 11 fêmeas inseminadas com sêmen sem taquizoítos. Para a confirmação da infecção pelo T. gondii foram realizados exames sorológicos e detecção do DNA parasitário no sangue, através do PCR nested aos 0, 7, 14, 21, 28, 49, 63, 123 dias pós infecção (p.i.). No G1 apenas 5/15 (33,3%) fêmeas soroconverteram, enquanto que no G2 15/15 (100%) soroconverteram. Na PCR nested observou-se que 14/15 (93,3%) das fêmeas do G1 e 14/15 (93,3%) do G2 foram positivas para T. gondii e no G3 todas as amostras foram negativas. Os transtornos reprodutivos foram diagnosticados através de exames ultra-sonográficos e observou-se que no G1, 9/15 (60%) apresentaram reabsorção embrionária e 40% delas mantiveram a gestação, observando-se partos normais e distócicos, natimortos e atonia uterina. No G2 observaram-se reabsorções embrionárias em 15/15 (100%) das ovelhas e outras patologias como 2/24 (8,3%) hidrometra, 2/24 (8,3%) mucometra e 2/24(8,3%) cistos foliculares. No G3, 8/11 fêmeas gestaram e pariram fetos viáveis. No exame histopatológico observaram-se lesões características da toxoplasmose em placentas e PCR nested positiva em todos os órgãos dos natimortos e placentas examinados. Em uma próxima etapa do estudo, as 24 ovelhas não gestantes (G1 e G2) foram submetidas à estação de monta controlada e destas 15/24 (62,5%) emprenharam. Aquelas que não emprenharam apresentaram patologias reprodutivas como:anestro (66,6%), cistos foliculares (11,1%), hidrometra e mucometra (22,2%). No segundo experimento pesquisou-se a eliminação de T. gondii no sêmen de reprodutores ovinos naturalmente infectados. Foram utilizados 65 reprodutores submetidos inicialmente à pesquisa de anticorpos anti-T. gondii por meio da técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI). Os animais sorologicamente positivos foram submetidos à colheita de sêmen para detecção do DNA parasitário. Na sorologia observaram-se 6/65 (9,2%) animais positivos. No PCR nested de sêmen 4/6 (66,6%) animais foram positivos. No terceiro experimento foram examinados 245 órgãos de fetos abortados e natimortos, além de 28 placentas procedentes de ovelhas com distúrbios reprodutivos. À necropsia foram coletados fragmentos de cérebro, cerebelo, medula, pulmão, coração, baço, fígado e placenta para realização do PCR nested e exame histopatológico. Na PCR nested foram confirmados três fetos e dois natimortos (14,3%) positivos para T. gondii em órgãos fetais e placentas, destacando-se o coração e a placenta como órgão de predileção. No exame histopatológico foram observadas lesões macroscópicas sugestivas da infecção por T. gondii em 2/35 (5,7%) das placentas, além de lesões características da toxoplasmose nas placentas como infiltração não supurativa, múltiplos focos de necrose e mineralização, além da presença de cistos teciduais. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que a inseminação utilizando sêmen fresco experimentalmente contaminado com diferentes doses de taquizoítos de T. gondii é capaz de infectar ovelhas e provocar patologias reprodutivas, comprometendo a vida reprodutiva das fêmeas. A detecçãoda forma proliferativa do parasito no sêmen de reprodutores naturalmente infectados por meio da técnica da PCR nested, reforça a necessidade de intensificar os estudos sobre a possibilidade da transmissão horizontal do parasito via sêmen na espécie ovina. Além disso, constatou-se envolvimento de T. gondii em fetos abortados e em placentas de ovinos naturalmente infectados no Brasil; esses dados não haviam sido descritos anteriormente na literatura.
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Ecologia de flebotomíneos (Diptera, psychodidae) e sua interação com leishmania (Kinetoplastida, trypanosomatidade) e hospedeiros vertebrados em áreas de transmissão de leishimanioses / Ecology of sandflies (Diptera, psychodidae) and their interaction with leishimania (Kinetoplastida, trypanosomatidade) and vertebrate hosts in areas of transmission of leishmaniasis

Silva, Antonia Suely Guimarães e 30 June 2016 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-21T18:25:20Z No. of bitstreams: 1 AntoniaSilva.pdf: 3060571 bytes, checksum: a7f2fb96a4ad01ab72950bd6a3cbffca (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T18:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntoniaSilva.pdf: 3060571 bytes, checksum: a7f2fb96a4ad01ab72950bd6a3cbffca (MD5) Previous issue date: 2016-06-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / Fundação de Amparo à Pesquisa de Minas Gerais (FAPEMIG) / The Sandflies are insects diptera nematocera belonging to the Psychodidae family, very important for public health, because some species are vectors of etiological agents of leishmaniasis, endemic parasitic disease in the state of Maranhão and in Brazil. These vectors are frequently found in natural ecotopes, domestic animal shelters and human habitations. This research aimed to study the occurrence of sandflies in the urban and rural peridomiciliary environment of municipality of Caxias, Maranhão, in notification area of cases of cutaneous and visceral leishmaniasis, as well as the rate of natural infection by Leishmania and analysis of blood food source. This is a cross-sectional, exploratory, descriptive and field study, with a quantitative approach, performed from March 2013 to February 2015. The specimens were collected with CDC (Center for Disease Control) light traps type in 20 homes, 10 in urban area and 10 in rural area. Were collected 15,895 specimens belonging to 17 species, one of genus Brumptomyia and 16 of Lutzomyia. The most abundant species were Lu. longipalpis (90.26%) and Lu. whitmani (7.65%). In the urban area the abundance of sandflies was higher in rainy season, and in the rural area in the dry season. Lu. longipalpis and Lu. whitmani occurred in two seasons, most frequently in rainy and dry season, respectively. From a total of 3, 520 female, 982 samples were used for DNA and PCR-RFLP extraction for detecting the presence of Leishmania. The vector Lu. longipalpis was found infected by Le. infantum (3.0%); Le. shawi (0.3%); Le. mexicana (0.2%); Le. braziliensis (0.6%) and Le. guyanensis (0.6%) and with mixed infection Le. infantum/Le. braziliensis (0.6%). The specie Lu. whitmani was infected by Le. infantum/Le. braziliensis (4.0%) and Le. braziliensis (4.3%). Other species found infected include: Lu. trinidadensis with Le. infantum/Le. braziliensis and Lu. evandroi and Lu. termitophila with Le. braziliensis and Le. guyanensis respectively. Based on these results it is suggested adopting control measures by the public health authorities to contain a future epidemic of AVL in this area, which is also endemic to ACL. For detection of food source were captured 778 engorged females, 573 were positive for eight different types of domestic and wild animals: dog, man, chicken, ox, pig, horse, rodent and opossum; obtaining mixed reactions in eight different associations: dog/rodent, man/chicken, chicken/rodent, dog/chicken, horse/rodent, rodent/pig and man/opossum. The presence of sandflies species infected with different species of leishmanias and fed with blood of domestic animals and human justifies the occurrence of endemic form of visceral and cutaneous leishmaniasis in the municipality of Caxias. Based on these results it is suggested adoption of control measures by the public health authorities to contain a future epidemic of these diseases. / Os flebotomíneos são dípteros nematóceros, pertencentes à família Psychodidae, muito importantes para a saúde pública, pois algumas espécies são vetores dos agentes etiológicos das leishmanioses, doenças parasitárias endêmicas em todo o território brasileiro. Esses vetores são encontrados com frequência em ecótopos naturais, abrigos de animais domésticos e habitações humanas. A presente pesquisa teve como objetivo estudar a ocorrência de flebotomíneos no ambiente peridomiciliar urbano e rural do município de Caxias, Maranhão, em área de notificação de casos de leishmaniose tegumentar e visceral, bem como, a taxa de infecção natural por Leishmania e análise da fonte alimentar sanguínea. Trata-se de um estudo transversal, exploratório, descritivo e de campo, tendo uma abordagem quantitativa, realizado no período de março de 2013 a fevereiro de 2015. Os espécimes foram coletados com armadilhas luminosas do tipo CDC (Center for Disease Control) em 20 residências, 10 na zona urbana e 10 na zona rural. Foram coletados 15.892 espécimes pertencente a 17 espécies, sendo uma do gênero Brumptomyia e 16 do gênero Lutzomyia. As espécies mais abundantes foram Lu. longipalpis (90,26%) e Lu. whitmani (7,65%). Na zona urbana a abundância de flebotomíneos foi maior no período chuvoso, e na zona rural na estação seca. Lu. longipalpis e Lu. Whitmani ocorreram nas duas estações, com mais frequência na estação chuvosa e seca, respectivamente. Do total de 3.520 fêmeas, 982 exemplares foram utilizados para a extração de DNA e PCR-RFLP para detecção de presença de Leishmania. O vetor Lu. longipalpis foi encontrado infectado por Le. infantum (3,0%), Le. shawi (0,3%), Le. mexicana (0,2%), Le. braziliensis (0,6%) e Le. guyanensis (0,6%) e com infecção mista Le. infantum/Le. braziliensis (0,6%). A espécie Lu. whitmani estava infectada com Le. infantum/Le. braziliensis (4,0%) e Le. braziliensis (4,3%). Outras espécies encontradas infectadas incluem-se: Lu. trinidadensis com Le. infantum/Le. braziliensis; Lu. evandroi e Lu. termitophila com Le. braziliensis e, Le. guyanensis, respectivamente. Para detecção da fonte alimentar foram utilizadas 778 fêmeas ingurgitadas, 573 positivaram para oito tipos diferentes de animais domésticos e silvestres, sendo detectadas reações simples representadas por sange de: cão, homem, galinha, boi, porco, cavalo, roedor e gambá e as reações mistas foram representadas por sangue de: cão/roedor, roedor/homem, galinha/homem, galinha/roedor, cão/galinha, cavalo/roedor, roedor/porco e homem/gambá. A presença de espécies de flebotomíneos infectadas com diferentes espécies de leshmânias e alimentados com sangue de animais domésticos e humanos justifica a ocorrência de forma endêmicas das leishmanioses visceral e tegumentar no município de Caxias. Diante dos resultados obtidos sugere-se adoção de medidas de controle por parte das autoridades de saúde pública, de forma a conter uma futura epidemia dessas doenças.
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ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS, CLÍNICOS E ANATOMOPATOLÓGICOS DE SURTOS DE LÍNGUA AZUL EM OVINOS NA REGIÃO CENTRAL DO RIO GRANDE DO SUL / CLINICAL, PATHOLOGICAL AND EPIDEMIOLOGICAL ASPECTS OF OUTBREAKS OF BLUETONGUE DISEASE IN SHEEP IN THE CENTRAL REGION OF RIO GRANDE DO SUL

Bianchi, Ronaldo Michel 19 February 2016 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Bluetongue (BT) is an infectious disease caused by bluetongue virus (BTV), which is transmitted by biting midges of the genus Culicoides, and affects domestic and wild ruminants, but its clinical manifestation is seen basically in sheep. Currently, 26 BTV serotypes are recognized worldwide. However, information about the disease in Brazil are limited, as only two BTV serotypes have been reported. Serological surveys reveal that Rio Grande do Sul (RS) has the lowest prevalence rates of infection among Brazilian states. This article describes the clinical, pathological and epidemiological aspects of 17 outbreaks of BT disease in sheep in the Central Region of RS state, Southern Brazil. Affected farms were visited for clinical examination, necropsy, sample collection and epidemiological investigation. The outbreaks were seasonal and occurred during the summer and fall. Of the 884 sheep in 17 small herds, 180 (20.4%) were affected. All ages of Texel and mixed breed sheep were affected. However, lambs (younger than one year) had higher morbidity than adult sheep. The most frequent clinical signs were anorexia, lethargy, loss of body condition, facial swelling mainly involving the lips, and greenish seromucous nasal discharge. Pulmonary edema, cardiac, skeletal muscle and esophageal striated muscle necrosis were the most prevalent findings. Erosive and ulcerative lesions in the upper gastrointestinal tract, and hemorrhage in the pulmonary artery also were common. The bluetongue virus (BTV) genome was detected by RT-PCR in blood, spleen, and lungs samples of 21 animals from 17 outbreaks. The virus involved in the outbreak 3 was isolated and shown to belong to serotype 17, for the first time reported in Brazil. Serology performed by agar gel immunodiffusion test (AGID) in 20 contact cattle showed seroconversion to BTV in 17 animals. In summary, our data support the BTV as the etiological agent of the outbreaks and indicate that the central region of RS is an area at risk for BT in sheep, a disease previously not recognized in the region. / Língua azul ou bluetongue (BT) é uma doença infecciosa causada pelo vírus da língua azul (BTV), que é transmitido por vetores hematófagos do gênero Culicoides e acomete ruminantes domésticos e selvagens, porém sua manifestação clínica é vista basicamente em ovinos. Atualmente, 26 sorotipos do BTV são conhecidos mundialmente. Entretanto, informações sobre a doença no Brasil são limitadas, com apenas dois sorotipos descritos. Pesquisas sorológicas revelam que o Rio Grande do Sul (RS) possui as menores taxas de prevalência de infecção entre os Estados brasileiros. O objetivo deste trabalho é descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos de 17 surtos de BT em ovinos na Região Central do RS. Para isso foram realizadas visitas às propriedades em que ocorreram os surtos para investigação epidemiológica e clínica, realização de necropsias e coleta de amostras. Os surtos foram sazonais e ocorreram durante o verão e outono. Em 17 pequenos rebanhos, de um total de 884 ovinos, 180 adoeceram (20,4%). Ovinos de todas as faixas etárias, da raça Texel e sem raça definida, foram acometidos. Entretanto, ovinos com menos de um ano de idade tiveram taxa de morbidade maior do que ovinos com um ano ou mais. Os sinais clínicos mais frequentes caracterizaram-se por anorexia, apatia, acentuada perda de peso, edema facial, envolvendo principalmente os lábios, e secreção nasal seromucosa e esverdeada. Edema pulmonar, necrose da musculatura cardíaca e esquelética e do músculo estriado do esôfago foram as lesões mais prevalentes. Erosões e úlceras no trato gastrointestinal superior e hemorragia na artéria pulmonar também foram comuns. O genoma do BTV foi detectado por meio da RT-PCR em amostras de sangue, baço e pulmão de 21 animais dos 17 surtos. O vírus envolvido no surto 3 foi isolado e pertence ao sorotipo 17, que pela primeira vez é descrito no Brasil. A sorologia foi realizada pelo método de imunodifusão em gel de ágar e demonstrou que 17 dos 20 bovinos que estavam em contato com os ovinos infectados soroconverteram ao BTV. Em síntese, nossos dados permitem concluir que o BTV é o agente causador dos surtos e indicam que a Região Central do RS é uma área de risco para a ocorrência de BT em ovinos, uma doença, até então, não reconhecida nessa região.
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Epidemiologia da leishmaniose tegumentar americana (LTA) no município de Xapuri, Estado do Acre, Brasil: estudo em população humana, cães domésticos e vetores / Epidemiology of American cutaneous leishmaniasis (ACL) in Xapuri municipality, Acre state, Brazil: study in human population, domestic dogs and vectors

Brilhante, Andréia Fernandes 21 February 2017 (has links)
Introdução. A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma endemia de importância em saúde pública na Amazônia Brasileira, onde possui diferentes perfis de transmissão com a participação de diversas espécies de vetores e de protozoários do gênero Leishmania. O Estado do Acre apresenta altos índices de LTA e, no ano de 2015, apresentou o mais alto coeficiente de detecção de casos (137,7/100.000 hab.) da doença no Brasil. Objetivo. Analisar aspectos epidemiológicos da LTA no município de Xapuri, Estado do Acre, Brasil, envolvendo população humana, cães domésticos, vetores e identificação de Leishmania. Materiais e Métodos. Para a avaliação epidemiológica, foram analisadas fichas de notificação dos casos humanos no período de 2008 a 2014 obtidas do sistema de vigilância epidemiológica do município. Foram analisadas as variáveis: sexo, grupo etário, escolaridade, forma clínica, diagnóstico, tratamento e evolução clínica. Os dados foram submetidos à análise descritiva e teste estatístico do qui-quadrado de Pearson utilizando o pacote estatístico STATA. Também foram obtidas amostras de material de pacientes (escarificação das lesões fixadas em lâminas) atendidos no centro médico do município, durante o período de novembro de 2014 a janeiro de 2016. As amostras foram submetidas à análise molecular para diagnóstico de Leishmania spp. O inquérito canino foi realizado em áreas urbanas e rurais; nestas, predominantemente, em seringais, onde a doença foi reportada em humanos. Após avaliação clínica dos animais para busca de lesões e sinais característicos de leishmanioses, foram coletadas amostras de sangue venoso por punção jugular ou cefálica, e quando havia lesões sugestivas da doença, foram anestesiados e submetidos à biopsia para colheita do fragmento de lesão. Amostras destes fragmentos foram submetidas a técnicas parasitológicas, inoculação em meio de cultura Neal, Novy e Nicolle, exame direto e técnicas moleculares para detecção do parasita. A identificação de Leishmania spp. foi realizada por técnicas moleculares. Os flebotomíneos foram coletados em ambiente domiciliar e florestal de dois seringais (Floresta e Cachoeira) e na área urbana, com armadilhas luminosas tipo CDC, instaladas mensalmente, no período de agosto de 2013 a julho de 2015. Neste período, apenas no seringal Cachoeira, também foram feitas coletas utilizando armadilhas de Shannon nas cores branca e preta, e de janeiro a maio de 2016, coletas em trocos de árvores com aspiradores manuais. Uma amostra de fêmeas coletadas pelas diferentes técnicas foi dissecada viii para investigação da presença de flagelados. Para a análise do comportamento da fauna flebotomínea foram utilizados índices ecológicos como de Shannon, Pielou e Abundância das Espécies Padronizado, média geométrica de Williams e análise dos componentes principais. Para estimar a atratividade dos flebotomíneos pelas cores branca e preta foi utilizado o teste de Mann-Whitney (p<0,05). Análises morfométricas utilizando o teste de Gabriel (teste F, p <0,05) foram feitas para distinguir alguns táxons. Para as análises moleculares dos parasitas foi empregada a técnica de Nested-PCR SSU rRNA utilizando os iniciadores S4/S12 e S17/S18 e sequenciamento. Resultados. No estudo de casos humanos, constatou-se que a doença ocorre predominantemente em populações rurais e isoladas do município, em indivíduos de ambos os sexos, com as incidências mais elevadas em crianças e adolescentes. Em 33 dos 45 pacientes com clínica positiva para LTA foram detectadas a presença de DNA de Leishmania spp. Nos cães domésticos, verificou-se alta taxa de infecção (20,0 por cento ) por Leishmania (Viannia) sp. Nos estudos de flebotomíneos, foram coletados 21.197 espécimes (14.210 fêmeas e 7.107 machos) com armadilhas CDC, e 6.309 (864 machos e 5.445 fêmeas) com armadilhas de Shannon. As frequências, abundâncias e densidades mais elevadas foram dos gêneros Nyssomyia, Psychodopygus e Trichophoromyia, coletados em ambientes silvestres, peri e intradomiciliares. Em ambiente rural foram coletados 99,9 por cento dos espécimes e no urbano apenas 0,1 por cento . Nyssomyia shawi predominou no Seringal Cachoeira, e Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) no Seringal Floresta. Espécies do gênero Psychodopygus predominaram no período chuvoso, enquanto as de Nyssomyia, no período seco. Infecções por Leishmania spp. foram detectadas em Brumptomyia sp., Nyssomyia antunesi, Ny. shawi, Lutzomyia sherlocki, Psathyromyia aragaoi, Psychodopygus carrerai carrerai, Ps. davisi, Ps. hirsutus hisutus, Ps. llanosmartinsi, Ps. lainsoni, Thrichophoromyia ubiquitalis e Trichophoromyia spp. Por meio de análises morfológicas e morfométricas das fêmeas de Trichophoromyia sugeriu-se a distinção de Th. octavioi de Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) e descreveu-se, Psathyromyia elizabethdorvalae sp. n. Conclusões. A LTA em Xapuri apresenta um perfil de transmissão silvestre e outro domiciliar. As populações humanas e caninas que frequentam ambientes florestais estão expostas a uma alta diversidade de vetores e de agentes etiológicos, o que aumenta o risco de infecção de LTA. As informações aqui apresentadas podem nortear as medidas de controle, planejamento das ações e definição de prioridades dos órgãos de vigilância epidemiológica do Estado do Acre, visando o diagnóstico precoce e tratamento adequado dos casos de leishmanioses da população humana de Xapuri / Introduction. American cutaneous leishmaniasis (ACL) is an endemic disease that deserves the attention of public health in the Brazilian Amazon, where it has various transmission profiles with the participation of several species of vectors and protozoa of the genus Leishmania. The state of Acre registers high rates of ACL, having in 2015 the highest coefficient of detection of cases (137.7 / 100,000 inhab.) in Brazil. Objective. To analyze the epidemiological aspects of LTA in the municipality of Xapuri, State of Acre, Brazil, involving the human population, domestic dogs, vectors and the identification of Leishmania ssp. Materials and Methods. For the epidemiological evaluation, records of the human cases notified between 2008 and 2014 obtained from the epidemiological surveillance system of the municipality, were analyzed. The following variables were selected for analysis: sex, age group, schooling, clinical form, diagnosis, treatment and clinical evolution. The data were submitted to descriptive analysis and the Pearson chi-squared statistical test using the statistical package STATA. Samples of patient material (scarification of lesions fixed on slides) were also obtained from the medical center of the city during the period from November 2014 to January 2016. These samples were submitted to molecular analysis for the diagnosis of Leishmania spp. The canine survey was carried out in both urban and rural areas, in the latter rubber plantations where the disease had been reported in humans predominated. After a clinical evaluation to search for lesions and characteristic signs of leishmaniasis, samples of venous blood were collected by jugular or cephalic puncture, and when the animals presented lesions suggestive of cutaneous leishmaniasis, they were anesthetized and submitted to biopsy to harvest the lesion fragment. Samples of these fragments were submitted to parasitological techniques, inoculation in Neal, Novy and Nicolle culture medium, direct examination and molecular techniques to detect Leishmania spp. The samples were submitted to molecular analysis for the diagnosis of Leishmania spp. The phlebotomine survey was carried out in forest and the domiciliary environment of the city and in two rubber plantation areas (Seringal Cachoeira and Seringal Floresta), monthly using CDC light traps, from August 2013 to July 2015. In this period, only in the Seringal Cachoeira were collections also made using black and white Shannon traps. Collections in tree trunks and among tree roots with manual aspirators were also undertaken from January to May 2016. xi Samples of females collected by different techniques were dissected to investigate the presence of flagellates. For the analysis of the behavior of the phlebotomine fauna, ecological indexes such as Shannon, Pielou, and Standardized Species Abundance, Williams geometric mean and main component analysis were used. The Mann-Whitney test (p <0.05) was used to estimate the attractiveness of the black and white colors to sandflies. Morphometric analyses using the Gabriel test (test F, p <0.05) were made to distinguish between some taxa. For the molecular analyses of the parasites the Nested-PCR SSU rRNA technique was used using primers S4 / S12 and S17 / S18 and sequencing. Results. In the study of human cases, it was found that the disease occurs in rural and isolated populations and in individuals of both sexes, especially in children and adolescents. In 33 of the 45 patients with positive ACL, the presence of Leishmania spp DNA was detected. The domestic dogs have shown a high infection rate (20.0 per cent ) attributed to Leishmania (Viannia) sp. In the sandfly studies, 21,197 specimens (14,210 females and 7,107 males) were collected in CDC traps, and 6,309 (864 males and 5,445 females) were collected in Shannon traps. The highest frequencies, abundances and densities were of the genera Nyssomyia, Psychodopygus and Trichophoromyia collected in wild, peri and intradomiciliary environments. Nyssomyia shawi predominated in the Seringal Cachoeira, and the Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) in the Seringal Floresta. Species of the genus Psychodopygus predominated in the rainy season while those of Nyssomyia in the dry period. Natural infections by Leishmania spp were detected in Brumptomyia sp., Nyssomyia antunesi, Ny. shawi, Lutzomyia sherlocki, Psathyromyia aragaoi, Psychodopygus carrerai carrerai, Ps. davisi, Ps. hirsutus hirsutus, Ps. llanosmartinsi, Ps. lainsoni, Trichophoromyia ubiquitalis and Trichophoromyia sp. Morphological and morphometric analyses of Trichophoromyia females were suggested to distinguish Th. octavioi from Trichophoromyia spp (Th. auraensis/Th. ruifreitasi), Pa. elizabethdorvalae being described for the first time. Conclusions. ACL in Xapuri presents one profile of wild transmission and another of domiciliar transmission. Both populations, human and canine, because they live in forest environments are exposed to a high diversity of vectors and etiological agents, which increases the risk of ACL infection. The information presented here may guide the measures of control, planning of actions and definition of priorities taken by the organs of surveillance and epidemiology of the State of Acre, aiming at the early diagnosis and appropriate treatment of the human cases in Xapuri
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Epidemiologia da leishmaniose americana da região do Parque Nacional dos Lençóis Maranhenses: enfoque na identificação das espécies de leishmânias e na capacidade vetorial dos flebotomíneos / Epidemiology of American leishmaniasis in Lençóis Maranhenses National Park region: a focus on the identification of leishmaniasis species and the vector capacity of sand flies

Fonteles, Raquel Silva 24 June 2016 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-21T19:30:11Z No. of bitstreams: 1 RaquelFonteles.pdf: 2324366 bytes, checksum: 7839768f7ff6e0756295b82f795ae2bf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RaquelFonteles.pdf: 2324366 bytes, checksum: 7839768f7ff6e0756295b82f795ae2bf (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Leishmaniasis are a group of neglected infectious and parasitic diseases, with major repercussions at global and national level. In the State of Maranhao, both the American Cutaneous Leishmaniasis (LTA) and the American Visceral Leishmaniasis (LVA) are endemic and have great prominence at the national scene. Within the state territory, one of the leading regions is the Lençóis Maranhenses National Park - PNLM, whose surroundings have undergone environmental and ecological damage caused by man, resulting from direct and indirect tourism activities. As a result of this process every year are recorded cases, mostly LTA ones. Goals. Facing such reality, this study aimed: to define the epidemiological profile of the LTA between the years 2007 and 2013, taking into account demographic (age and gender), occupational and chronological features of the affected populations (reported cases); to demonstrate through a cartographic tool, a survey of the timeline distribution of cases of LTA; and an interactive map to determine the risk rate for acquisition of LT. It has been also proposed to study the transmission cycle of the disease, based on the identification of species of sandflies, their sources of blood and their Leishmania genus parasites, and additionally determining vector capacity of Lu. Whitmani toward Le. Braziliensis and Le. Amazonians. Methodology. The county of Barreirinhas was selected for this study because it is the main gateway to PNLM. In short, investigation of LTA cases was carried out in SINAN files, comprising all neighborhoods of the county (158), through the cycle 2007-2013, and sandflies collections were held in 62 of these communities. The species were identified taxonomically and females analyzed at the molecular level to research for natural infection by Leishmania, along with the animals that served as a food source. Results. 458 positive cases of LTA were reported between the years 2007 and 2013, predominantly in men from rural areas and farmers. The cases were concentrated in the south central area of the county, all year round. There was some geographic expansion with the emergence of new outbreaks, however, it was observed the persistence of the former areas of occurrence of the disease. As for the risk rates, villages Sítio Barra, Engenho and Manoelzinho were those who were positive for all variables. On the other side, the communities Quebra, Santa Rosa and Fumaça, presented less risk, since almost all the variables studied were negative for these locations. As for the sandflies, 9,853 specimens of 18 species have been collected, all present in extra-domicile (forest) and only 12 occurring in peri-domicile areas. The incidence was higher in areas surrounding dwellings (56.2%) than in extra-domicile environment (43.8%) and females predominated (51.4%) over males (48.6%). The dominant species were Lu. whitmani (53.83%), Lu. longipalpis (25.60%), Lu. Lenti (11.69%), Lu. evandroi (5.50%) and Lu. flaviscutellata (0.87%). Natural infections due to Le. infantum, were found in females captured in peri-domicile in five villages and extra-domicile in other two. The species Lu. longipalpis, vector of Le. Infantum, indicated a positivity rate of 3.7% for this species. While species not considered insect vector of this leishmania, such as Lu. Lenti and Lu. Whitmani, even so presented infection rates of 0.6% and 0.9%, respectively. Rates of natural infection due to Le. braziliensis, were detected in peri-domicile in two locations; while in Lu. Whitmani, considered the vector of this Leishmania species, rate of 0.3% was found. The rate of infection due to Le. amazonensis was 8% for Lu. Flaviscutelata, captured in peri-domicile in two villages and extra-domicile in just one. Lu. whitmani was able to get infected with Le. Braziliensis and Le. Amazonians. Concerning food source hosts, the following were identified: equines (9.0%), human (1.4%), canine (27.4%), rodent (3.3%), fowl (20.9%) and hogs (37.9%). Conclusion. All elements of the epidemiological chain of Leishmaniasis were present within the area of study, both in peri-domicile and extra-domicile areas, which explains the endemic state of the disease in the region. / Introdução. As leishmanioses constituem um grupo de doenças infectoparasitárias negligenciadas, com grande repercussão a nível mundial e nacional. No Estado do Maranhão tanto a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) como a Leishmaniose Visceral Americana (LVA) são endêmicas e apresentam grande destaque no cenário nacional. Dentro do território maranhense, uma das regiões de destaque é a do Parque Nacional dos Lençóis Maranhenses – PNLM, cujo entorno, tem sofrido danos ambientais e ecológicos gerados pelo homem, em função das atividades diretas e indiretas do turismo. Como resultado desse processo todos os anos são registrados casos, principalmente de LTA. Objetivos. Diante desta realidade, este trabalho objetivou definir o perfil epidemiológico da LTA entre os anos de 2007 e 2013, levando em consideração os fatores demográficos (faixa etária e sexo), ocupacionais e temporais das populações acometidas (casos notificados); demonstrar através de uma ferramenta cartográfica, um mapa da distribuição espaço temporal dos casos de LTA e um mapa interativo para determinação da taxa de risco para aquisição da LT. Também se propôs estudar o ciclo de transmissão da doença, a partir da identificação das espécies de flebotomíneos, de suas fontes de sangue e de seus parasitas do gênero Leishmania, e determinar capacidade vetorial de Lu. whitmani para Le. Braziliensis e Le. Amazonenses. Metodologia. O município de Barreirinhas foi selecionado para esse estudo porque constitui a principal porta de entrada ao PNLM. Em suma, fez-se o inquérito dos casos da LTA nos arquivos do SINAN de todas as localides do município (158), no período de 2007-2013, e realizou-se coletas de flebotómineos em 62 destes povoados. As espécies foram identificadas taxonomicamente e as fêmeas analisadas a nível molecular para pesquisa de infecção natural por Leishmania e dos animais que serviram como fonte alimentar. Resultados. Foram notificados 458 casos positivos de LTA entre os anos de 2007 e 2013 predominando nos homens provenientes da zona rural e lavradores. Os casos estavam concentrados na região centrosul do município, ao longo dos anos. Houve certa expansão geográfica com o surgimento de novos focos, entretanto, foi observada a persistência das antigas áreas de ocorrência da doença. Quanto às taxas de risco, os povoados Barra do Sitio, Engenho e Manoelzinho foram os que apresentaram positividade para todas as variáveis estudadas. Já os povoados Quebra, Santa Rosa e Fumaça, ofereceram menor risco, uma vez que, quase todas as variáveis estudadas deram negativas para essas localidades. Quanto aos flebotomíneos, foram coletados 9.853 exemplares de 18 espécies, todas presentes no extradomicílio (mata) e apenas 12 ocorreram nos peridomicílios. A abundância foi maior no peridomicílio (56,2%) do que no extradomicílio (43,8%) e as fêmeas predominaram (51,4%) sobre os machos (48,6%). As espécies dominantes foram Lu. whitmani (53,83%), Lu. longipalpis (25,60%), Lu. lenti (11,69%), Lu. evandroi (5,50%) e Lu. flaviscutellata (0,87%). As infecções naturais por Le. infantum, foram encontradas em fêmeas capturadas nos peridomicílios de cinco povoados e no extradomicilio de outros dois. A espécie Lu. longipalpis, vetora de Le. infantum, mostrou uma taxa de positividade de 3,7% para esta espécie. Enquanto espécies não consideradas vetoras desta leishmânia, como Lu. lenti e Lu. whitmani mostraram taxas de infecção de 0,6% e 0,9%, respectivamente. A taxa de infecção natural por Le. braziliensis, foi detectada nos peridomicílios de duas localidades; para Lu. whitmani, considerada vetora desta espécie de Leishmania foi encontrada taxa de 0,3%. A taxa de infecção por Le. amazonensis foi de 8% para Lu. flaviscutelata obtidos nos peridomicilios de dois povoados e no extradomicilio de um apenas. Lu. whitmani foi capaz de se infectar com Le. Braziliensis e Le. Amazonenses. Para fonte alimentar foram identificados os seguintes hospedeiros: equino (9,0%), humano (1,4%), cão (27,4%), roedor (3,3%), galinha (20,9%) e porco (37,9%). Conclusão. Todos os elementos da cadeia epidemiológica das leishmanioses estavam presentes na área do presente estudo, tanto no peridomicílio como no extradomicílio, o que explica a situação endêmica da doença na região.
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Epidemiologia da leishmaniose tegumentar americana (LTA) no município de Xapuri, Estado do Acre, Brasil: estudo em população humana, cães domésticos e vetores / Epidemiology of American cutaneous leishmaniasis (ACL) in Xapuri municipality, Acre state, Brazil: study in human population, domestic dogs and vectors

Andréia Fernandes Brilhante 21 February 2017 (has links)
Introdução. A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma endemia de importância em saúde pública na Amazônia Brasileira, onde possui diferentes perfis de transmissão com a participação de diversas espécies de vetores e de protozoários do gênero Leishmania. O Estado do Acre apresenta altos índices de LTA e, no ano de 2015, apresentou o mais alto coeficiente de detecção de casos (137,7/100.000 hab.) da doença no Brasil. Objetivo. Analisar aspectos epidemiológicos da LTA no município de Xapuri, Estado do Acre, Brasil, envolvendo população humana, cães domésticos, vetores e identificação de Leishmania. Materiais e Métodos. Para a avaliação epidemiológica, foram analisadas fichas de notificação dos casos humanos no período de 2008 a 2014 obtidas do sistema de vigilância epidemiológica do município. Foram analisadas as variáveis: sexo, grupo etário, escolaridade, forma clínica, diagnóstico, tratamento e evolução clínica. Os dados foram submetidos à análise descritiva e teste estatístico do qui-quadrado de Pearson utilizando o pacote estatístico STATA. Também foram obtidas amostras de material de pacientes (escarificação das lesões fixadas em lâminas) atendidos no centro médico do município, durante o período de novembro de 2014 a janeiro de 2016. As amostras foram submetidas à análise molecular para diagnóstico de Leishmania spp. O inquérito canino foi realizado em áreas urbanas e rurais; nestas, predominantemente, em seringais, onde a doença foi reportada em humanos. Após avaliação clínica dos animais para busca de lesões e sinais característicos de leishmanioses, foram coletadas amostras de sangue venoso por punção jugular ou cefálica, e quando havia lesões sugestivas da doença, foram anestesiados e submetidos à biopsia para colheita do fragmento de lesão. Amostras destes fragmentos foram submetidas a técnicas parasitológicas, inoculação em meio de cultura Neal, Novy e Nicolle, exame direto e técnicas moleculares para detecção do parasita. A identificação de Leishmania spp. foi realizada por técnicas moleculares. Os flebotomíneos foram coletados em ambiente domiciliar e florestal de dois seringais (Floresta e Cachoeira) e na área urbana, com armadilhas luminosas tipo CDC, instaladas mensalmente, no período de agosto de 2013 a julho de 2015. Neste período, apenas no seringal Cachoeira, também foram feitas coletas utilizando armadilhas de Shannon nas cores branca e preta, e de janeiro a maio de 2016, coletas em trocos de árvores com aspiradores manuais. Uma amostra de fêmeas coletadas pelas diferentes técnicas foi dissecada viii para investigação da presença de flagelados. Para a análise do comportamento da fauna flebotomínea foram utilizados índices ecológicos como de Shannon, Pielou e Abundância das Espécies Padronizado, média geométrica de Williams e análise dos componentes principais. Para estimar a atratividade dos flebotomíneos pelas cores branca e preta foi utilizado o teste de Mann-Whitney (p<0,05). Análises morfométricas utilizando o teste de Gabriel (teste F, p <0,05) foram feitas para distinguir alguns táxons. Para as análises moleculares dos parasitas foi empregada a técnica de Nested-PCR SSU rRNA utilizando os iniciadores S4/S12 e S17/S18 e sequenciamento. Resultados. No estudo de casos humanos, constatou-se que a doença ocorre predominantemente em populações rurais e isoladas do município, em indivíduos de ambos os sexos, com as incidências mais elevadas em crianças e adolescentes. Em 33 dos 45 pacientes com clínica positiva para LTA foram detectadas a presença de DNA de Leishmania spp. Nos cães domésticos, verificou-se alta taxa de infecção (20,0 por cento ) por Leishmania (Viannia) sp. Nos estudos de flebotomíneos, foram coletados 21.197 espécimes (14.210 fêmeas e 7.107 machos) com armadilhas CDC, e 6.309 (864 machos e 5.445 fêmeas) com armadilhas de Shannon. As frequências, abundâncias e densidades mais elevadas foram dos gêneros Nyssomyia, Psychodopygus e Trichophoromyia, coletados em ambientes silvestres, peri e intradomiciliares. Em ambiente rural foram coletados 99,9 por cento dos espécimes e no urbano apenas 0,1 por cento . Nyssomyia shawi predominou no Seringal Cachoeira, e Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) no Seringal Floresta. Espécies do gênero Psychodopygus predominaram no período chuvoso, enquanto as de Nyssomyia, no período seco. Infecções por Leishmania spp. foram detectadas em Brumptomyia sp., Nyssomyia antunesi, Ny. shawi, Lutzomyia sherlocki, Psathyromyia aragaoi, Psychodopygus carrerai carrerai, Ps. davisi, Ps. hirsutus hisutus, Ps. llanosmartinsi, Ps. lainsoni, Thrichophoromyia ubiquitalis e Trichophoromyia spp. Por meio de análises morfológicas e morfométricas das fêmeas de Trichophoromyia sugeriu-se a distinção de Th. octavioi de Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) e descreveu-se, Psathyromyia elizabethdorvalae sp. n. Conclusões. A LTA em Xapuri apresenta um perfil de transmissão silvestre e outro domiciliar. As populações humanas e caninas que frequentam ambientes florestais estão expostas a uma alta diversidade de vetores e de agentes etiológicos, o que aumenta o risco de infecção de LTA. As informações aqui apresentadas podem nortear as medidas de controle, planejamento das ações e definição de prioridades dos órgãos de vigilância epidemiológica do Estado do Acre, visando o diagnóstico precoce e tratamento adequado dos casos de leishmanioses da população humana de Xapuri / Introduction. American cutaneous leishmaniasis (ACL) is an endemic disease that deserves the attention of public health in the Brazilian Amazon, where it has various transmission profiles with the participation of several species of vectors and protozoa of the genus Leishmania. The state of Acre registers high rates of ACL, having in 2015 the highest coefficient of detection of cases (137.7 / 100,000 inhab.) in Brazil. Objective. To analyze the epidemiological aspects of LTA in the municipality of Xapuri, State of Acre, Brazil, involving the human population, domestic dogs, vectors and the identification of Leishmania ssp. Materials and Methods. For the epidemiological evaluation, records of the human cases notified between 2008 and 2014 obtained from the epidemiological surveillance system of the municipality, were analyzed. The following variables were selected for analysis: sex, age group, schooling, clinical form, diagnosis, treatment and clinical evolution. The data were submitted to descriptive analysis and the Pearson chi-squared statistical test using the statistical package STATA. Samples of patient material (scarification of lesions fixed on slides) were also obtained from the medical center of the city during the period from November 2014 to January 2016. These samples were submitted to molecular analysis for the diagnosis of Leishmania spp. The canine survey was carried out in both urban and rural areas, in the latter rubber plantations where the disease had been reported in humans predominated. After a clinical evaluation to search for lesions and characteristic signs of leishmaniasis, samples of venous blood were collected by jugular or cephalic puncture, and when the animals presented lesions suggestive of cutaneous leishmaniasis, they were anesthetized and submitted to biopsy to harvest the lesion fragment. Samples of these fragments were submitted to parasitological techniques, inoculation in Neal, Novy and Nicolle culture medium, direct examination and molecular techniques to detect Leishmania spp. The samples were submitted to molecular analysis for the diagnosis of Leishmania spp. The phlebotomine survey was carried out in forest and the domiciliary environment of the city and in two rubber plantation areas (Seringal Cachoeira and Seringal Floresta), monthly using CDC light traps, from August 2013 to July 2015. In this period, only in the Seringal Cachoeira were collections also made using black and white Shannon traps. Collections in tree trunks and among tree roots with manual aspirators were also undertaken from January to May 2016. xi Samples of females collected by different techniques were dissected to investigate the presence of flagellates. For the analysis of the behavior of the phlebotomine fauna, ecological indexes such as Shannon, Pielou, and Standardized Species Abundance, Williams geometric mean and main component analysis were used. The Mann-Whitney test (p <0.05) was used to estimate the attractiveness of the black and white colors to sandflies. Morphometric analyses using the Gabriel test (test F, p <0.05) were made to distinguish between some taxa. For the molecular analyses of the parasites the Nested-PCR SSU rRNA technique was used using primers S4 / S12 and S17 / S18 and sequencing. Results. In the study of human cases, it was found that the disease occurs in rural and isolated populations and in individuals of both sexes, especially in children and adolescents. In 33 of the 45 patients with positive ACL, the presence of Leishmania spp DNA was detected. The domestic dogs have shown a high infection rate (20.0 per cent ) attributed to Leishmania (Viannia) sp. In the sandfly studies, 21,197 specimens (14,210 females and 7,107 males) were collected in CDC traps, and 6,309 (864 males and 5,445 females) were collected in Shannon traps. The highest frequencies, abundances and densities were of the genera Nyssomyia, Psychodopygus and Trichophoromyia collected in wild, peri and intradomiciliary environments. Nyssomyia shawi predominated in the Seringal Cachoeira, and the Trichophoromyia spp. (Th. auraensis/Th. ruifreitasi) in the Seringal Floresta. Species of the genus Psychodopygus predominated in the rainy season while those of Nyssomyia in the dry period. Natural infections by Leishmania spp were detected in Brumptomyia sp., Nyssomyia antunesi, Ny. shawi, Lutzomyia sherlocki, Psathyromyia aragaoi, Psychodopygus carrerai carrerai, Ps. davisi, Ps. hirsutus hirsutus, Ps. llanosmartinsi, Ps. lainsoni, Trichophoromyia ubiquitalis and Trichophoromyia sp. Morphological and morphometric analyses of Trichophoromyia females were suggested to distinguish Th. octavioi from Trichophoromyia spp (Th. auraensis/Th. ruifreitasi), Pa. elizabethdorvalae being described for the first time. Conclusions. ACL in Xapuri presents one profile of wild transmission and another of domiciliar transmission. Both populations, human and canine, because they live in forest environments are exposed to a high diversity of vectors and etiological agents, which increases the risk of ACL infection. The information presented here may guide the measures of control, planning of actions and definition of priorities taken by the organs of surveillance and epidemiology of the State of Acre, aiming at the early diagnosis and appropriate treatment of the human cases in Xapuri

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