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Estudo dos genes relacionados a mecanismos de reparo em danos de DNA em sÃndrome mielodisplÃsica / Study of genes related to DNA repair mechanisms in damage in myelodysplastic syndrome

Howard Lopes Ribeiro JÃnior 11 March 2013 (has links)
nÃo hà / A SÃndrome MielodisplÃsica (SMD) à um grupo de doenÃas clonais das cÃlulas progenitoras hematopoiÃticas, caracterizadas por citopenia(s) perifÃrica(s), displasia de uma ou mais linhagens celulares mielÃides e aumento do risco de desenvolvimento de leucemia mielÃide aguda. A SMD à considerada uma doenÃa de pessoas idosas, pois aproximadamente 80% dos pacientes possuem mais de 60 anos ao diagnÃstico. SÃo raras na infÃncia, sendo observadas em menos de 5% das neoplasias hematolÃgicas que acometem pacientes com menos de 14 anos de idade. A patogÃnese da SMD envolve danos no DNA nas cÃlulas tronco hematopoÃticas acometido provavelmente pelos danos de fita dupla (DSB) no DNA tendo o processo de junÃÃes por extremidades nÃo-homÃlogas (JENH) e recombinaÃÃo homÃloga como principais mecanismos de reparo necessÃrios para garantir a estabilidade genÃmica das cÃlulas-tronco. Este estudo de coorte propÃs avaliar a associaÃÃo dos polimorfismos BRCA1 rs4793191, BRCA2 rs9567623 e RAD51 rs1801320, atuantes no mecanismo de RecombinaÃÃo HomÃloga; o XRCC5 rs3835, XRCC6 rs2267437 e LIG4 rs1805388 relacionados ao mecanismo de JunÃÃes por Extremidades nÃo-HomÃlogas e, por fim, o ATM rs228593, um sensor molecular ao dano em DSB. Esta anÃlise de genotipagem baseou-se na metodologia de PCR-RFLP, entre amostras de medula Ãssea de 60 pacientes com SMD, oriundos do Hospital UniversitÃrio Walter Cantidio, e 82 amostras de sangue perifÃrico de idosos voluntÃrios sadios. Os pacientes com SMD foram diagnosticados de acordo com os critÃrios propostos pela OrganizaÃÃo Mundial de SaÃde. Os genÃtipos dos polimorfismos estudados encontravam-se em equilÃbrio de Hardy-Weinberg (p>0,05), exceto o polimorfismo rs1805388 para o gene LIG4. Nossos resultados apresentaram para o polimorfismo rs228593 do gene ATM uma associaÃÃo do genÃtipo heterozigoto A/G (p=0,008, OR 0,225, IC 0,075-0,680) com diminuiÃÃo de risco para SMD adicionada com associaÃÃo do genÃtipo A/G com as variÃveis clÃnicas de citopenia (p=0,032, OR 5,250, IC 1,151-23,937), na faixa de 0-1 citopenias no sangue perifÃrico, e com prognÃstico favorÃvel para o Ãndice prognÃstico do IPSS (p<0,001, OR 21,95, IC 29,791-16,185). Para o polimorfismo rs2267437 para o gene XRCC6 relacionamos o genÃtipo mutante C/G e C/G+G/G com a variÃvel celularidade na medula Ãssea na faixa de normocelular + hipercelular (p=0,023, OR 5,556, IC 1,270-24,239). Para o polimorfismo rs3835 do gene XRCC5 identificamos que o genÃtipo A/G està altamente associado com a diminuiÃÃo de risco para SMD (p<0,001, OR 0,100, IC 0,035-0,289). Para o polimorfismo rs1801320 do gene RAD51, associamos o genÃtipo heterozigoto mutante G/C com diminuiÃÃo de risco para SMD (p=0,053, OR 0,453, IC 0,203-1,009). Adicionalmente, associamos o genÃtipo selvagem G/G com a variÃvel idade (p<0,001, OR 24,521, IC 64,033-93,907), na faixa de maior que 60 anos de idade, e com a variÃvel citopenia (0-1 citopenias) (p<0,001, OR 16,099, IC 31,299-82,808). NÃo obtivemos associaÃÃo significante entre os polimorfismos rs 4793191, rs9567623 e rs1805388 para os genes BRCA1, BRCA2 e LIG4, respectivamente, e as variÃveis clÃnicas para os pacientes com SMD. Neste estudo demonstramos que os genes relacionados a DSB sÃo tambÃm relacionados à patogÃnese da SMD. Estes resultados suportam a importÃncia dos polimorfismos rs228593, rs3835, rs2267437 e rs1801320 para os genes ATM, XRCC5, XRCC6 e o RAD51, respectivamente, na manutenÃÃo da estabilidade genÃmica promovendo um melhor entendimento da gÃnese e etiologia da SÃndrome MielodisplÃsica. / Myelodysplastic Syndrome (MDS) is a group of diseases of clonal hematopoietic progenitor cells, characterized by cytopenia (s) peripheral (s), dysplasia of one or more myeloid cell lineages and increased risk for development of acute myeloid leukemia. MDS is considered a disease of older people, because approximately 80% of patients have more than 60 years at diagnosis. Are rare in children, being observed in less than 5% of hematologic malignancies that affect patients under 14 years of age. The pathogenesis of MDS involves DNA damage in hematopoietic stem cells probably affected by Double-Strand Break (DSB) in the process of Non-homologous end join (NHEJ) and homologous recombination (HR) repair mechanisms as key for ensuring genomic stability of cells trunk. This cohort study proposed evaluate the association between rs4793191, rs9567623 and rs1801320 polymorphisms of the BRCA1, BRCA2 and RAD5 genes, acting on the HR mechanism; the rs3835, rs2267437 and rs1805388 of the XRCC5, XRCC6 and LIG4, related with NHEJ mechanism and, finally, ATM rs228593 as molecular sensor damage in DSBs. This genotyping analysis was based on the methodology of PCR-RFLP, between bone marrow samples of 60 patients with MDS, from the University Hospital Walter Cantidio, and 82 peripheral blood samples of elderly healthy volunteers with approval in the CEP / HUWC under protocol No. 027.04.12. The MDS patients were diagnosed by examination of bone marrow and bone marrow cytogenetic analysis technique by G band. The genotypes studied polymorphisms were in Hardy-Weinberg equilibrium (p> 0.05), except for the rs1805388 polymorphism in LIG4 gene. Our results showed for the rs228593 polymorphism of the ATM gene association with low-risk MDS for genotype A /G (p = 0.008, OR 0.225, CI 0.075 to 0.680) with added association of genotype A/G with the clinical variables of cytopenia (p = 0.032, OR 5.250, CI 1.151 to 23.937), in the range of 0-1 in peripheral blood cytopenias, and with favorable prognosis in IPSS (p <0.001, OR 21.95, CI 29.791 to 16.185). For the rs2267437 polymorphism in the gene XRCC6 relate the mutant genotype C / C and G / G + G / G with variable marrow cellularity in the range of normocellular + hypercellular (p = 0.023, OR 5.556 CI 1.270 to 24.239). For the genotypes of rs3835 polymorphism of the XRCC5 gene identify the genotype A / G is highly associated with low-risk MDS (p <0.001, OR 0.100, CI 0.035 to 0.289). Additionally, for the rs1801320 polymorphism of the gene RAD51, we associate the mutant heterozygous genotype G/C with low-risk MDS (p = 0.053, OR 0.453, CI 0.203 to 1.009). For the same polymorphism, we associate the wild genotype G / G with variable age (p <0.001, OR 24.521, CI 64.033 to 93.907), in the range of greater than 60 years old, and with the variable cytopenia (0-1 cytopenias) (p <0.001, OR 16.099, CI 31.299 to 82.808). We did not obtain significant association between polymorphisms rs 4793191, rs9567623 and rs1805388 for the genes BRCA1, BRCA2 and LIG4, respectively, and clinical variables for patients with MDS. In this study we demonstrate that genes related to DSB are also related to the pathogenesis of MDS. These results support the importance of polymorphisms rs228592, rs3835, rs2267437 and rs1801320 in the ATM, XRCC5, XRCC6 and RAD51 genes, respectively, in the maintenance of genomic stability by promoting a better understanding of the genesis and etiology of myelodisplastic syndrome.
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ManifestaÃÃes clÃnicas e fatores de risco para comprometimento da funÃÃo renal em pacientes vÃtimas de acidentes com serpentes peÃonhentas / Clinical manifestations and risk factors for renal impairment in patients accident victims with poisonous snakes

Polianna Lemos Moura Moreira Albuquerque 26 September 2013 (has links)
nÃo hà / IntroduÃÃo. O envenenamento por serpentes peÃonhentas à uma das doenÃas negligenciadas dos paÃses tropicais. A lesÃo renal aguda à uma das principais causas de morbidade e mortalidade nestes casos. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrÃncia de LRA por acidentes ofÃdicos, avaliar as manifestaÃÃes clÃnicas e classificar a LRA e os fatores de risco envolvidos. Metodologia. Foi realizado estudo retrospectivo com pacientes vÃtimas de picadas de cobras atendidos em um centro de referÃncia. Foram comparados os pacientes com e sem LRA, definida de acordo com RIFLE e AKIN. A anÃlise estatÃstica foi realizada pelo programa SPSS e foi considerado significativo p<0,05. Resultados. Foram incluÃdos 276 pacientes, 83,7% (n= 230) do sexo masculino e 85,5% (n= 126) procedente de zona rural. LRA foi observada em 15,2% dos casos. O principal gÃnero envolvido foi Bothrops (82,2%). A mÃdia de idade dos pacientes com LRA foi maior do que naqueles sem LRA (43Â20 vs. 34Â21 anos, p=0,015, respectivamente). O tempo entre o acidente e o atendimento mÃdico foi maior no grupo com LRA (25Â28 vs. 14Â16h, p=0,034), o tempo entre o acidente e a administraÃÃo de soro antiofÃdico (30,7Â27 vs. 15Â16h, p=0,01) e o tempo de internaÃÃo (9,1Â7,7 vs. 3,2Â2,2 dias, p<0,01, respectivamente). Os pacientes com LRA foram classificados como âRiskâ (28,5%), âInjuryâ (11,9%) e âFailureâ (57,1%), e como AKIN1(35,7%), AKIN2 (7,1%) e AKIN3 (57,1%). As mÃdias dos valores de creatinina e ureia à admissÃo e durante a internaÃÃo foram maiores para os piores estÃdios do RIFLE e do AKIN. PotÃssio na admissÃo foi maior no RIFLE-F e AKIN3 (p= 0,045). A hemoglobina foi menor nos pacientes classificados dentro dos piores estÃdios do RIFLE e AKIN (p=0,041; p=0,042). HemodiÃlise foi necessÃria em 30% dos casos, e recuperaÃÃo completa da funÃÃo renal foi observada em 54,8% dos casos. Houve quatro Ãbitos, nenhum com LRA. Os fatores de risco associados à LRA foram alteraÃÃes hemorrÃgicas (p=0,036, OR = 6,718, IC95% 1,067 â 25,661) e um maior tempo de internamento (p=0,004, OR = 1,69, IC95% 1,165 â 2,088). ConclusÃo. A LRA à uma importante complicaÃÃo desses acidentes, indicando baixa mortalidade, porÃm, alta morbidade, podendo levar a melhora parcial da funÃÃo renal. / Introduction: Envenomation by venomous snakes is a neglected disease in tropical countries. Acute kidney injury (AKI) is one of the main causes of morbidity and mortality in these cases. The aim of this study was to investigate the occurrence of AKI by snake bites, to evaluate the clinical manifestations and classify the AKI and the involved risk factors. Methods: A retrospective study was conducted with patients victims of snakebites admitted to a reference center. Patients with and without AKI were compared, and AKI was defined according to the RIFLE and AKIN criteria. Statistical analysis was performed by the program SPSS and it was considered significant p<0.05. Results: A total of 276 patients were included, with 83.7% (n= 230) male and 85.5% (n= 146) from rural Ãrea. AKI was observed in 15.2% of cases. The mean genus involved in the accidents was Bothrops (82.2%). Mean age of patients with AKI was higher than in patients without AKI (43Â20 vs. 34Â21 years, p=0.015), respectively. Time between the accident and the medical care was higher in the AKI group (25Â28 vs. 14Â16h, p=0.034), as well as the time between the accident and the administration of antiofidic sera (30.7Â27 vs. 15Â16h, p=0.01) and the length of hospital stay (9.1Â7.7 vs. 3.2Â2.2 days, p<0.01), respectively. Patients with AKI were classified as âRiskâ (28.5%), âInjuryâ (11.9%) and âFailureâ (57.1%), and as AKIN1 (35.7%), AKIN2 (7.1%) and AKIN 3 (57.1%). The mean values of creatinine and urea at admission and during hospital stay were higher in the worst stages of RIFLE and AKIN. Potassium at admission was higher in RIFLE-F and AKIN 3 (p=0.045). Hemoglobin was lower in patients classified within the worst staged of RIFLE and AKIN (p=0.041; p=0.042). Hemodialysis was required for 30% of cases, and complete renal function recovery was observed in 54.8% of cases. There were 4 deaths, of whom no one had AKI. Risk factors for AKI were hemorrhagic abnormalities (p=0.036, OR=6.718, 95% CI 1.067â25.661) and a higher lenght of hospital stay (p=0.004, OR=1.69, 95% CI 1.165â2.088). Conclusion: AKI is an importante complication of these acidentes, with low mortality, but with high morbidity, that can lead to partial renal function recovery.
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Efeito da inibiÃÃo da calcineurina pela ciclosporina a em cÃlulas planctÃnicas e biofilme de complexo Candida parapsilosis / Effect of inhibition of calcineurin by cyclosporin into planktonic cells and complex biofilm Candida parapsilosis

Ramila de Brito MacÃdo 18 December 2013 (has links)
nÃo hà / O Complexo Candida parapsilosis compreende trÃs espÃcies, C. parapsilosis stricto sensu, C. metapsilosis e C. orthopsilosis, que possuem caracterÃsticas fenotÃpicas iguais, podendo ser diferenciadas apenas pelo genÃtipo utilizando a tÃcnica de PCR com enzima de restriÃÃo. O Complexo C. parapsilosis vem ganhando destaque na epidemiologia mundial da candidÃase por ser a 2a ou 3a espÃcies mais isolada, alÃm disso, relatos de resistÃncia a alguns antifÃngicos sÃo preocupantes. A calcineurina molÃcula responsÃvel, tambÃm, pela resistÃncia aos antifÃngicos e pensando em novos alvos moleculares para as drogas que o objetivo desse trabalho foi, avaliar o potencial sinÃrgico de antifÃngicos e do inibidor de calcineurina, ciclosporina A, contra formas planctÃnicas e biofilmes de cepas do Complexo C. parapsilosis de origens clÃnicas. Os ensaios de sensibilidade com anfotericina B, fluconazol, voriconazol, caspofungina e ciclosporina A foram realizadas pela tÃcnica de microdiluiÃÃo, em conformidade com as orientaÃÃes do Clinical Laboratory Standards Institute. Os testes de sinergismo contra cÃlulas planctÃnicas de cepas do Complexo C. parapsilosis foram realizados pelo mÃtodo de Checkerboard, em ensaio de microdiluiÃÃo. CombinaÃÃes formadas por antifÃngicos com ciclosporina A foram avaliados contra biofilmes em formaÃÃo e maduros, em placas de poliestireno, onde diferenÃas no padrÃo de sensibilidade aos antifÃngicos entre as espÃcies nÃo foram observadas, porÃm cepas de C. parapsilosis stricto sensu foram mais sensÃveis à ciclosporina A que C. orthopsilosis e C. metapsilosis. O sinergismo entre os antifÃngicos e ciclosporina A foi observado em cepas do Complexo C. parapsilosis. As combinaÃÃes formadas por antifÃngicos e ciclosporina A foram capazes de impedir o crescimento das espÃcies do Complexo na fase planctÃnica, bem como, na formaÃÃo de biofilme nas CIM10X e CIM50X e mostrou efeito inibitÃrio contra biofilmes maduros de C. parapsilosis stricto sensu, C. metapsilosis e C. orthopsilosis nas CIM50X. Os resultados obtidos reforÃam o potencial de inibiÃÃo da calcineurina fÃngica como uma abordagem promissora para aumentar a eficiÃncia de drogas antifÃngicas. / Candida parapsilosis Complex comprises three species, C. parapsilosis sensu stricto, C. metapsilosis and C. orthopsilosis, which have the same phenotypic characteristics, can be differentiated only by the genotype using PCR with restriction enzyme. The C. parapsilosis Complex is gaining prominence in the global epidemiology of candidiasis to be the second or third most isolated species, moreover, reports of resistance to some antifungal agents are worrying. Calcineurin molecule also responsible for resistance to antifungal drugs and thinking of new molecular targets with the objective of this study was to evaluate the potential synergistic antifungal and calcineurin inhibitor, cyclosporin A, against planktonic and biofilm forms of strains C. parapsilosis Complex from clinical sources. The susceptility assays with amphotericin B, fluconazole, voriconazole, caspofungin and cyclosporin A were performed by microdilution in accordance with the guidelines of the Clinical Laboratory Standards Institute. The method board in microdilution assay performed tests for synergism against planktonic cells of strains of C. parapsilosis Complex. Antifungal combinations formed by cyclosporin A were evaluated against biofilms forming and mature in polystyrene plates, where differences in the pattern of antifungal susceptibility among species were observed, but strains of C. parapsilosis sensu stricto were more sensitive to cyclosporin A to C. orthopsilosis and C. metapsilosis. Synergism between the antifungal and cyclosporin A was observed in strains of C. parapsilosis Complex. The combinations formed by antifungal and cyclosporin A were able to prevent the growth of the species in the planktonic phase of the complex, as well as in biofilm formation in CIM10X and CIM50X and showed inhibitory effect against mature biofilms of C. parapsilosis sensu stricto, C. metapsilosis and C. orthopsilosis in CIM50X. These results support the potential of inhibiting fungal calcineurin as a promising approach for increasing the efficiency of antifungal drugs.
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AvaliaÃÃo qualitativa e quantitativa de glicosaminoglicanos em pacientes com osteoartrite / Qualitative and quantitative evaluation of glycosaminoglycans in patients with osteoarthritis

Rodolfo de Melo Nunes 16 December 2013 (has links)
nÃo hà / A cartilagem articular à um tecido avascular constituÃdo por condrÃcitos dispersos em uma matriz extracelular abundante (MEC) que reveste as superfÃcies articulares e protege as extremidades Ãsseas. AlÃm do fluido intersticial, a MEC à composta por proteoglicanos, glicosaminoglicanos (GAGs) e glicoproteÃnas. DoenÃas articulares, como a osteoartrite (OA), promovem a degradaÃÃo da cartilagem articular e esclerose do osso subcondral, levando à dor crÃnica e comprometimento funcional das articulaÃÃes. Neste contexto, a quantificaÃÃo de GAGs à utilizada para estudar o papel das alteraÃÃes fisiolÃgicas ou patolÃgicas da cartilagem articular. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar as alteraÃÃes bioquÃmicas da cartilagem articular humana e de rato com ou sem a OA. As cartilagens humanas foram obtidas de pacientes submetidos à artroplastia por OA ou por fratura. Ratos Wistar machos (150-180g) foram submetidos à osteoartrite experimental que consiste na transecÃÃo do ligamento cruzado anterior (TLCA). Grupo sham foi submetido apenas ao procedimento cirÃrgico, sem transecÃÃo. Inicialmente, as amostras de cartilagem foram submetidas à aÃÃo do complex enzimÃtico PROLAV 750R, obtendo-se ao final do processo, os GAGs. Esses foram identificados e quantificados em gel de agarose (0,6%) e a massa molar foi avaliada em gel de poliacrilamida (6% w/v). Os resultados foram expressos como mÃdia  erro padrÃo da mÃdia (e.p.m.), submetidos à ANOVA e teste de Tukey (P<0,05) ou teste âtâ de Student (P<0,05). Em ratos, o rendimento da degradaÃÃo da cartilagem pela PROLAV 750R foi significativamente diminuÃda apÃs 70 dias de TLCA (P<0,05). Quanto à quantificaÃÃo de GAGs, houve um aumento significativo do conteÃdo de GAGs apÃs 70 dias de TLCA. Em humanos, o percentual de massa degradada pela PROLAV foi reduzida na presenÃa de OA. Os pacientes com OA com idade inferior a 80 anos apresentaram aumento significativo da quantidade de GAGs, quando comparado ao grupo controle. Quanto à mobilidade eletroforÃtica, GAGs de pacientes com OA apresentaram alteraÃÃo da massa molar. Esses achados mostram que tanto a cartilagem proveniente de pacientes acometidos por OA quanto animais submetidos à OA experimental apresentam menor rendimento à degradaÃÃo enzimÃtica, aumento da quantidade de CS e alteraÃÃo da massa molar. / Articular cartilage is na avascular tissue composed of chondrocytes scattered in an abundant extracellular matrix (ECM) that lines the joint surfaces and protects the bone ends. In addition to the intersticial fluid, the ECM is composed of proteoglycans, glycosaminoglycans (GAGs) and glycoproteins. Joint diseases such as osteoarthritis (OA), promote the degradation of articular cartilage and subchondral bone sclerosis, leading to chronic pain and functional impairment of the joints. In this context, the quantification of GAGs is used as a means to study the physiological or pathological changes of articular cartilage. The objective this study was to evaluate the biochemical changes of the articular cartilage of human and rat normal or affected by OA. The human cartilage were obtained from patients submitted to arthroplasty for OA or fracture. Male Wistar rats (150-180g) were submitted to the anterior cruciate ligament transection (ACLT). Sham group was submitted to only to surgery without transection. Initialy, the cartilage samples were submitted to the action of the enzymatic complex PROLAV 750R, getting to the end of the process, the GAGs. These were identified and quantified in agarose gel (0.6%) and molar mass was assessed in polyacrylamide gel (6% w/v). The results were expressed as mean  standard error of mean (S.E.M.) were submitted to ANOVA and Tukeyâs test (P<0.05) or âtâ test of Student (P<0.05).In rats, the effective proteolysis was significantly decreased after 70 days of ACLT (P<0.05). In the quantification of GAGs, there was a significant increase in GAG content after 70 days of ACLT. In humans, the percentage of mass degraded by PROLAV was altered by presence of OA. The OA patients under 80 years of age showed a significant increase in the amount of GAGs compared to the control group. In the electrophoretic mobility, GAGs of patients with OA showed abnormalities of the molar mass. These findings show that both cartilage from patients affected by OA as experimental animals subjected to OA have lower effective proteolysis, increasing the amount of CS and alteration of the molar mass.
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Fatores de risco para lesÃo renal aguda e mortalidade nos pacientes submetidos a transplante hepÃtico / Risk factors for acute renal failure and mortality in patients undergoing liver transplantation

Adller GonÃalves Costa Barreto 29 September 2014 (has links)
nÃo hà / Acute kidney injury is a significant cause of morbidity and mortality in patients undergoing liver transplantation. Objectives: To evaluate the incidence and risk factors for acute kidney injury (AKI), as well as assess the impact of acute kidney injury during hospitalization, the glomerular filtration rate 3 months after liver transplantation and impact on mortality in 30 days . Evaluation of the subgroup of patients who required hemodialysis and its risk factors and the impact on hospitalization. Methods: Retrospective cohort of patients undergoing liver transplantation at the University Hospital Walter CantÃdio (HUWC), from January 2013 to January 2014.Resultados: Among 134 patients evaluated 67 (50%) were male. The median age and interquartile range were 56 (48-62). Of these patients, 64 (47%) had acute kidney injury after liver transplantation. Through logistic regression analysis it was observed that viral liver diseases, warm ischemia time and dosage of serum lactate were independent markers for development of AKI (OR 2.9 95% CI = 1.2 to 7 and, and OR 1.1 95% CI = 1.01 to 1.2, OR 1.3 95% CI = 1.02 to 1.89 and, respectively). The ICU and hospital stay was higher in patients with AKI, 4 (3-7) days vs 3 (2-4) days with p = 0.001 and 16 (9 -26) vs 10 (8-14) with p = 0.001 respectively . The glomerular filtration rate 3 months after surgery in the group with AKI did not possess statistical difference when compared to those without AKI. After logistic regression analysis, it was observed that the presence of AKI was an independent risk factor for mortality among patients undergoing liver transplantation (OR 4.3 CI 95% = 1.3 to 14.6). Of the 64 patients who had AKI 33 (51%) required hemodialysis. After logistic regression analysis, the MELD Na &#8805; 22 (reference group <22) was a predictor for starting hemodialysis with 8.4 more likely the patient starting hemodialysis compared with the reference group (OR 8.4 CI 95% = 1, 5 to 46.5) .The patients undergoing hemodialysis had a long ICU stay and longer duration of mechanical ventilation when compared to the group that did not receive hemodialysis [6 (3.5 to 14)] vs [3 (2-4)] with p = 0.007; [3 (1.5 to 11)] vs [1 (1-2)] with p = 0.001 respectively. Conclusions: viral liver disease, prolonged warm ischemia and dosage of elevated serum lactate were independent predictors for development of AKI among patients undergoing liver transplantation at HUWC. Patients with AKI had a longer hospital and ICU stay. The presence of AKI was an independent marker for mortality among patients undergoing liver transplantation. The value of MELD In> = 22 was a predictor for starting dialysis in patients with AKI, these patients had a longer ICU stay and mechanical ventilation. / A lesÃo renal aguda à uma causa significativa de morbimortalidade nos pacientes submetidos à Transplante hepÃtico. Objetivos: Avaliar a incidÃncia e fatores de risco para lesÃo renal aguda (LRA), assim como avaliar o impacto da lesÃo renal aguda na internaÃÃo hospitalar, na taxa de filtraÃÃo glomerular 3 meses apÃs o transplante de fÃgado e no impacto na mortalidade com 30 dias. AvaliaÃÃo do subgrupo de doentes que necessitou de hemodiÃlise e seus fatores de risco e o impacto na internaÃÃo. MÃtodos: Estudo coorte retrospectivo com pacientes submetidos a transplante hepÃtico no Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio (HUWC), no perÃodo de janeiro de 2013 a janeiro de 2014. Resultados: Entre os 134 pacientes avaliados 67(50%) eram do sexo masculino. A mediana de idade e intervalo interquartÃlico foram 56(48-62). Destes pacientes, 64(47%) apresentaram lesÃo renal aguda no pÃs-operatÃrio de transplante hepÃtico. AtravÃs da anÃlise de regressÃo logÃstica foi observado que Hepatopatia viral, tempo de isquemia quente e dosagem do lactato sÃrico foram marcadores independentes para desenvolvimento de LRA (OR 2,9 e IC95%= 1,2-7; OR 1,1 e IC95%=1,01-1,2; OR 1,3 e IC95%=1,02-1,89 respectivamente). A internaÃÃo em UTI e permanÃncia hospitalar foi maior no grupo com LRA, 4 (3-7) dias vs 3 (2-4) dias com p=0,001 e 16(9 -26) vs 10(8 â 14) com p=0,001 respectivamente. A taxa de filtraÃÃo glomerular 3 meses apÃs a cirurgia no grupo com LRA nÃo possuiu diferenÃa estatÃstica quando comparado ao sem LRA. ApÃs a anÃlise de regressÃo logÃstica, foi observado que a presenÃa de LRA foi fator de risco independente para mortalidade entre os pacientes submetidos ao transplante de fÃgado (OR 4,3 IC95%=1,3- 14,6). Dos 64 pacientes que apresentaram LRA 33(51%) necessitaram de hemodiÃlise. ApÃs anÃlise de regressÃo logÃstica, o MELD Na &#8805; 22 (grupo referencia < 22) foi fator preditor para iniciar hemodiÃlise com 8,4 mais chance do doente iniciar hemodiÃlise quando comparado com o grupo referÃncia (OR 8,4 IC95%=1,5-46,5). Os pacientes que se submeteram a hemodiÃlise tiveram um tempo de permanÃncia na UTI e tempo de ventilaÃÃo mecÃnica mais prolongado quando comparado ao grupo que nÃo realizou hemodiÃlise [6(3,5-14)] vs [3(2-4)] com p=0,007; [3(1,5-11)] vs [1(1-2)] com p=0,001 respectivamente. ConclusÃes: hepatopatia viral, tempo de isquemia quente prolongado e dosagem do lactato sÃrico elevado foram preditores independentes para desenvolvimento de LRA entre os pacientes submetidos a transplante de fÃgado no HUWC. Os pacientes com LRA apresentaram maior tempo de internaÃÃo hospitalar e em UTI. A presenÃa de LRA foi marcador independente para mortalidade entre os pacientes submetidos ao transplante de fÃgado. O valor do MELD Na >= 22 foi fator preditor para iniciar hemodiÃlise entre os pacientes com LRA, estes pacientes tiveram maior permanÃncia na UTI e em ventilaÃÃo mecÃnica.
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Syndecan-1 na insuficiÃncia cardÃaca descompensada: associaÃÃo com a funÃÃo renal e mortalidade / Syndecan-1 in decompensated heart failure: association with renal function and mortality

Fernanda Macedo de Oliveira Neves 04 April 2014 (has links)
nÃo hà / IntroduÃÃo: Nas Ãltimas dÃcadas, a insuficiÃncia cardÃaca (IC) emergiu como um problema de saÃde pÃblica mundial. Dados do MinistÃrio da SaÃde de 2006 sugerem prevalÃncia de dois milhÃes de portadores de IC, sendo esta uma das principais causas de hospitalizaÃÃo entre as doenÃas cardiovasculares no Sistema Ãnico de SaÃde. LesÃo renal aguda (LRA) à uma complicaÃÃo comum em pacientes admitidos por IC. Portanto, sabe-se que a diminuiÃÃo da funÃÃo renal està associada com o aumento do risco de Ãbito, hospitalizaÃÃes e eventos cardiovasculares com importantes implicaÃÃes socioeconÃmicas. Apesar da terapia avanÃada para IC, o prognÃstico de pacientes com IC continua reservado. Objetivo: Avaliar o biomarcador syndecan-1 na admissÃo hospitalar em pacientes internados por IC descompensada e a sua associaÃÃo com lesÃo renal aguda/crÃnica. Metodologia: Trata-se de um estudo prospectivo observacional com 201 pacientes apresentando IC descompensada no departamento de emergÃncia. O estudo foi realizado em um hospital pÃblico, na cidade de Fortaleza/CE entre abril e setembro de 2013. Foi aprovado pelo Comità de Ãtica em Pesquisa do Hospital de Messejana Doutor Carlos Alberto Studart Gomes. Os pacientes foram comparados com um grupo controle composto por 15 indivÃduos sadios. A anÃlise foi realizada em amostras de soro por meio da tÃcnica de imunoensaio ligado à enzima (ELISA) e pelos ensaios bioquÃmicos. A anÃlise estatÃstica foi realizada atravÃs do programa SPSS 19.0 para Windows. Resultados: A idade mÃdia foi 64,2  13,5 anos e a fraÃÃo de ejeÃÃo (FE) calculada foi de 41.5  14.4 no momento da admissÃo. Considerando todos os pacientes, 80 (39,8 %) tinham doenÃa renal crÃnica (DRC) e 62 pacientes (37,8 %) desenvolveram ou pioraram da LRA durante a internaÃÃo. Dos pacientes com DRC, 43 pacientes mantiveram funÃÃo renal estÃvel durante a internaÃÃo hospitalar. A mÃdia de internaÃÃo hospitalar foi de 8,7  4,9 dias e mortalidade intra-hospitalar foi de 5,5%. Os pacientes IC descompensada tinham syndecan-1 sÃrico aumentado na admissÃo hospitalar (133,7  95,0 vs. 18,3  9,2, p<0,001) em comparaÃÃo ao grupo controle. O aumento do nÃvel de syndecan-1 foi observada em pacientes com LRA (mÃdia de 248,7  165.6ng/mL). Pacientes com estÃgio 2/3 de LRA (n =13) apresentaram maior nÃvel syndecan-1 em comparaÃÃo aos pacientes com estÃgio 1 de LRA (n = 63) - 443,2  281,1 vs. 178,9  100,8 ng/mL, p <0,001). A curva ROC para a previsÃo LRA foi 0,741 (IC 95% 0,669-0,812, p <0,001). Os resultados foram ainda melhores quando considerados apenas os graus mais elevados de severidade da LRA (estÃgio2/3) â curva ROC 0,840 (IC 95% 0,733-0,948, p <0,001) Na anÃlise uni variada, a concentraÃÃo de syndecan-1 como variÃvel contÃnua se correlacionou de forma significativa com a mortalidade hospitalar (OR = 1,046 com 95% CI 1,025-1,067, p<0,001 para cada 10ng/mL). AlÃm disso, nÃvel de syndecan-1 na admissÃo da emergÃncia teve boa capacidade discriminativa para prever a mortalidade hospitalar (AUC 0,788 IC 95% 0,673-0,903, p<0,001). ConclusÃo: Em pacientes com IC descompensada, syndecan-1 mensurada na prÃ-admissÃo hospitalar pode ser considerado como um biomarcador efetivo para predizer a LRA e mortalidade. / Introduction: In recent decades, heart failure (HF) has emerged as a global public health problem. Data from the Ministry of Health, 2006, suggest prevalence of two million patients with HF, thus representing one of the major causes of hospitalization among cardiovascular diseases in the Unified Health System (SUS). Acute kidney injury (AKI) is a common complication in patients admitted for HF. Therefore, it is known that the decrease of renal function is associated with increased risk of death, hospitalization, and cardiovascular events with significant socioeconomic implications. Despite the advanced therapy for HF, the prognosis of patients with HF remains guarded. Objective: To evaluate the biomarker syndecan-1 at admission in patients hospitalized for decompensated HF and its association with acute/chronic renal injury. Methods: This is a prospective observational study conducted with 201 patients with decompensated HF at the emergency department. The study took place in a public hospital in the city of Fortaleza-CE, Brazil, between April and September 2013. The Research Ethics Committee of the Hospital de Messejana Doutor Carlos Alberto Studart Gomes approved the study. We compared the patients with a control group of 15 healthy individuals. The analysis happened through serum samples applying the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) technique and through biochemical assays. For statistical analysis, we used the SPSS 19.0 for Windows. Results: The mean age was 64.2  13.5 years and the ejection fraction (EF) calculated was 41.5  14.4 at the time of admission. Considering all the patients, 80 (39.8%) had chronic kidney disease (CKD) and 62 (37.8%) developed or worsening AKI during hospitalization. Of the patients with CKD, 43 maintained stable renal function during hospitalization. The average length of hospital stay was 8.7  4.9 days and the in-hospital mortality was 5.5%. The patients with decompensated HF had increased serum syndecan-1 at admission (133.7  95.0 vs. 18.3  9.2, p<0.001) compared with the control group. We observed an increased level of syndecan-1 in patients with AKI (mean of 248.7  165.6ng/mL). Patients with AKI stage 2/3 (n=13) had higher level of syndecan-1 compared with patients with AKI stage 1 (n=63) (443.2  281.1 vs. 178.9  100.8 ng/mL, p <0.001). The ROC curve for AKI prediction was 0.741 (95% CI 0.669-0.812, p<0.001). The results were even better when considering only the highest levels of AKI severity (stage 2/3) â ROC curve 0.840 (95% CI 0.733-0.948, p<0.001). In the univariate analysis, the concentration of syndecan-1 as a continuous variable was significantly correlated with hospital mortality (OR=1.046 95% CI 1.025-1.067, p<0.001 for each 10ng/mL). Additionally, the level of syndecan-1 at admission on emergency had good discriminative ability to predict hospital mortality (AUC 0.788 95% CI 0.673-0.903, p<0.001). Conclusion: In patients with decompensated HF, syndecan-1 measured in the pre-hospital admission can be considered as an effective biomarker to predict AKI and mortality.
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AvaliaÃÃo da funÃÃo renal em pacientes com esquistossomose hepatoesplÃnica compensada / Assessment of renal function in patients with compensated hepatosplenic schistosomiasis

Daniella Bezerra Duarte 17 January 2014 (has links)
nÃo hà / IntroduÃÃo - O envolvimento glomerular na esquistossomose mansÃnica està bem documentado, sobretudo naqueles pacientes com a forma hepatoesplÃnica da doenÃa. O objetivo deste estudo à investigar a ocorrÃncia de alteraÃÃes renais em pacientes com EHE, em especial, as alteraÃÃes tubulares. MÃtodos - Foi realizado estudo transversal com 20 pacientes com EHE, acompanhados em um ambulatÃrio de MaceiÃ, Alagoas, Brasil. Testes de acidificaÃÃo e concentraÃÃo urinÃrias foram realizados usando cloreto de cÃlcio (CaCl2) e DDAVP, respectivamente, e apÃs perÃodo de 12h de jejum e privaÃÃo hÃdrica. Foi quantificado na urina o biomarcador MCP-1. Foram calculados fraÃÃo de excreÃÃo de sÃdio (FENa), fraÃÃo de excreÃÃo de potÃssio (FEK), fraÃÃo de excreÃÃo de magnÃsio (FEMg), gradiente de transporte transtubular de potÃssio (TTKG) e transporte de Ãgua livre de solutos (TcH2O). O grupo de pacientes com EHE foi comparado com um grupo de 17 voluntÃrios sadios (grupo-controle). Resultados - A mÃdia de idade e a distribuiÃÃo de gÃnero foram similares entre os dois grupos. DÃfice de acidificaÃÃo urinÃria foi encontrado em nove pacientes com EHE (45%), que apresentaram pH urinÃrio > 5,5 apÃs o teste com CaCl2. A osmolaridade urinÃria foi significativamente menor entre os pacientes com EHE (588  112 vs. 764  165 mOsm/kg, P = 0,001), apÃs perÃodo de 12h de jejum e privaÃÃo hÃdrica. DÃfice de concentraÃÃo urinÃria foi encontrado em 85% dos casos de EHE. Os valores de MCP-1 foram mais elevados no grupo com EHE do que no grupo-controle (122  134 vs. 40  28 pg/mg-Cr, P = 0,01) e correlacionaram-se positivamente com os valores de microalbuminÃria e proteinÃria no grupo com EHE. Os valores de TcH2O foram menores nos pacientes com EHE (0,72  0,5 vs. 1,1  0,3, P =0,04). ConclusÃo - A EHE à associada a importantes alteraÃÃes renais. As principais alteraÃÃes encontradas foram dÃfice de concentraÃÃo e acidificaÃÃo urinÃria, evidenciando a ocorrÃncia da disfunÃÃo tubular. Houve tambÃm um aumento do MCP-1 urinÃrio, que parece ser um marcador de lesÃo renal mais sensÃvel do que a microalbuminÃria. / Background - The glomerular involvementin schistosomiasis is well documented, especially in patients with hepatosplenic disease. The aim of this study is to investigate the occurrence of renal abnormalities among patients with HSS, especially tubular disorders. Methods - This is a cross-sectional study with 20 consecutive patients with HSSfollowed in a medical center in MaceiÃ, Alagoas, Brazil. Urinary acidification and concentration tests were performed using calcium chloride (CaCl2) and DDAVP, respectively, and after a 12h period of water and food deprivation. The biomarker MCP-1 was quantified in urine. Fractional excretion of sodium (FENa+), fractional excretion of magnesium (FEMg++) and fractional excretion of potassium (FEK+), transtubular potassium gradient (TTKG) and solute free water reabsorption (TcH2O) were calculated by standard formulae. The HSS group was compared to a group of 17 healthy volunteers (control group). Results - Patient`s average age and gender were similar to controls. Urinary acidification deficit was found in 9 HSS patients (45%), who presented urinary pH > 5.5 after CaCl2 test. Urinary osmolality was significantly lower in HSS patients (588  112 vs. 764  165 mOsm/kg, P =0,001) after 12h period water deprivation. Urinary concentration deficit was found in 85% of HSS patients. The values of MCP-1 were higher in HSS group than control group (122  134 vs. 40  28 pg/mg-Cr, P = 0.01) and positively correlated with the values of microalbuminuria and proteinuria in the HSS group. TcH2O was lower in HSS patients (0.72  0.5 vs. 1.1  0.3, P = 0.04). Conclusions - HSS is associated with important kidney disorders. The main abnormalities found were urinary acidification and concentration defect, indicating the occurrence of tubular dysfunction. There was also an increase in urinary MCP-1, which appears to be a more sensitive marker of renal injury that microalbuminuria.
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AvaliaÃÃo do dano endotelial, de glicocÃlice e tubular na lesÃo renal aguda da leptospirose / Assessment of endothelial damages of glycocalyx and tubular in AKI of leptospirosis

Marcelo Boecker Munoz Braz 19 September 2014 (has links)
nÃo hà / IntroduÃÃo: A Leptospirose à uma doenÃa frequente em paÃses tropicais, e o rim à um de seus principais ÃrgÃos alvo. ProteÃnas de membrana de Leptospira sÃo capazes de causar dano endotelial in vitro, mas nÃo existem estudos em humanos que tenham avaliado a lesÃo do glicocÃlice endotelial e sua correlaÃÃo com a lesÃo renal aguda (LRA). MÃtodos: Foi realizado um estudo de coorte em um surto de leptospirose entre militares. LRA foi definida de acordo com o padrÃo KDIGO. Foram dosados biomarcadores plasmÃticos de lesÃo tubular renal (NGAL), lesÃo de glicocÃlice endotelial (Sindecano-1) e lesÃo de endotÃlio (ICAM-1), bem como outros parÃmetros bioquÃmicos em todos os pacientes. AnÃlise Linear Multivariada foi conduzida para verificar a existÃncia de correlaÃÃo entre a variaÃÃo da creatinina sÃrica (&#916;SCr) ou da NGAL com fatores independentes. Resultados: LRA foi diagnosticada em 14 (30,4%) pacientes e 13 apresentaram sua forma mais branda (KDIGO estÃgio 1). Leptospirose estava associada à nÃveis mais elevados de ICAM-1 (ICAM-1; 483,1  31,7 versus 234,9  24,4 mg/L, P < 0,001) e de sindecano-1 (73,7  15,9 versus 21,2  7,9 ng/mL, P < 0,001), quando comparados a controles expostos. Pacientes com LRA associada à Leptospirose tinha nÃveis elevados de sindecano-1 (112,1  45,4 vs. 41,5  11,7 ng/mL, p=0,021 e ICAM-1 (576,9  70,4 vs. 434,9  35,3, p=0,034) do que nos casos de leptospirose sem LRA. Foi observada a associaÃÃo entre sindecano-1 e ICAM-1 com elevaÃÃes dos nÃveis de creatinina sÃrica e NGAL. Esta associaÃÃo persistiu mesmo apÃs anÃlise multivariada incluindo outras caracterÃsticas associadas à LRA. ConclusÃo: Marcadores de lesÃo endotelial estÃo associados à lesÃo renal secundÃria à leptospirose. / Introduction: Leptospirosis is a common disease in tropical countries, and the kidney is one of the main target organs. Membrane proteins of Leptospira are capable of causing endothelial damage in vitro, but there have been no studies in humans evaluating endothelial glycocalyx damage in humans and its correlation with acute kidney injury (AKI). Methods: We performed a cohort study in an outbreak of leptospirosis among military personnel. AKI was defined in accordance to KDIGO standard. Biomarkers for tubular injury (NGAL), glycocalyx injury (Syndecan-1) and endothelial injury (ICAM-1) were measured in plasma, as well as other biochemical parameters in all patients. Multivaried linear analisys was conducted in the correlation of the difference between maximal and minimum serum creatinine (&#916;SCr) or NGAL with independent factors. Results: AKI was diagnosed in 14 of 46 (30.4%) patients and 13 presented its mildest form (KDIGO stage 1). Leptospirosis was associated with higher levels of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1; 483.1  31.7 versus 234.9  24.4 mg/L, P < 0.001) and syndecan-1 (73.7  15.9 versus 21.2  7.9 ng/mL, P < 0.001) compared with exposed controls. Patients with leptospirosis- associated AKI had increased level of syndecan-1 (112.1  45.4 versus 41.5  11.7 ng/mL, P = 0.021) and ICAM-1 (576.9  70.4 versus 434.9  35.3, P = 0.034) compared with leptospirosis patients with no AKI. Association was verified between syndecan-1 and ICAM-1 with serum creatinine elevation and neutrophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) levels. This association remained even after multivariate analysis including other AKI associated characteristics. Conclusion: Endothelial injury biomarkers are associated with leptospirosis-associated renal damage.
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Burkholderia pseudomallei no Estado do CearÃ: caracterizaÃÃo de reservÃrias / Burkholderia pseudomallei in the State of CearÃ: characterization of research

Dionne Bezerra Rolim 16 January 2009 (has links)
nÃo hà / A melioidose, uma enfermidade causada pelo bacilo Gram-negativo, Burkholderia pseudomallei, à endÃmica no sudeste da Ãsia e na AustrÃlia e tem distribuiÃÃo esporÃdica em outras partes do mundo. A doenÃa à descrita nas AmÃricas, sendo emergente no Brasil desde que casos em humanos sÃo bem documentados no Estado do CearÃ. Esta pesquisa pretendeu compreender melhor a ecologia da bactÃria por meios da caracterizaÃÃo de suas reservÃrias. O estudo foi realizado em uma pesquisa ambiental de B. pseudomallei no solo dos MunicÃpios de TejuÃuoca e Banabuià e na realizaÃÃo de inquÃrito soro-epidemiolÃgico para a populaÃÃo rural residente nesses locais. Para o estudo ambiental, foram coletadas amostras mensais de solo da superfÃcie atà 40 cm de profundidade durante o perÃodo de janeiro a dezembro do ano de 2007. Cinco sÃtios de coleta em cada municÃpio, delimitados na residÃncia de pessoas que tiveram melioidose. Para a realizaÃÃo do estudo sorolÃgico, foram coletadas amostras de soro de 321 residentes nessas Ãreas e efetivado inquÃrito, que incluiu informaÃÃes sobre dados demogrÃficos, histÃria de doenÃas prÃvias e atividades com exposiÃÃo relativas a solo e Ãgua. A determinaÃÃo dos tÃtulos sorolÃgicos de anticorpos foi realizada mediante teste imunoenzimÃtico, utilizando microplacas adsorvidas com antÃgeno filtrado de B. pseudomallei. A bactÃria foi encontrada no solo dos MunicÃpios de TejuÃuoca e Banabuià em 4,3 % (26/600) das amostras investigadas. As duas regiÃes apresentaram aspectos geoclimÃticos e componentes ambientais, como tipo de solo e vegetaÃÃo, Ãndice pluviomÃtrico, temperatura similares entre si. A detecÃÃo de B. pseudomallei ocorreu em clima tropical semi-Ãrido, com Ãndice pluviomÃtrico anual baixo e vegetaÃÃo de caatinga arbustiva, demonstrando influÃncia de fatores locais que facilitam a sobrevivÃncia e multiplicaÃÃo do microorganismo. O inquÃrito sorolÃgico evidenciou 51, 27% (161/327) para oisotipo IgM e 58,49 % (186/317) para o isotipo IgG. A freqÃÃncia dos tÃtulos de IgM foi maior em crianÃas do que em adultos, enquanto a freqÃÃncia de IgG aumentou com a idade. Houve associaÃÃo significativa entre a ocupaÃÃo em atividades de agricultura e os tÃtulos de IgM (44.15%, p<0.005) e de IgG (44.15%, p<0.005) e entre trabalhadores de construÃÃo civil e os tÃtulos de IgG (84.6%, , p=0.005). A maioria das amostras com tÃtulos elevados mostrou reatividade com as banda na posiÃÃo 33 a 45 kD que correspondem ao polissacarÃdeo O da cadeia do lipossacarÃdeo da bactÃria. / Melioidosis, a disease caused by the Gram-negative bacteria Burkholderia pseudomallei, is endemic in southeast Asia and in Australia and shows a sporadic distribution in other parts of the world. The disease has been described in the Americas, it is an emergent illness in Brazil, as human cases are well documented in Cearà state. This research aims to better understand the ecology of the bacteria. The study was carried out by means of an environmental search for B. Pseudomallei in the ground of the cities TejuÃuoca and Banabuià and by a epidemiological surveillance on the local rural population. For the environmental study, soil samples were collected monthly from the surface down to 40 cm depth from January to December 2007. Five sampling sites in each municipality were chosen near to the homes of people who had melioidosis. For the serological study, serum samples of 321 inhabitants of those areas were collected, and an inquiry was taken that included data about demography, previous illnesses and activities related to exposition to water and soil. Serological titers were determined by means of an immunoenzymatic test, using microplates adsorbed with filtered antigen of B. Pseudomallei. The bacteria was found in the soil of TejuÃuoca and Banabuià municipalities in 4.3% (26/600) of the samples. Both regions show similar geoclimatic and environmental aspects, such as soil and vegetation, rainfall index, and temperatures. Detection of B. Pseudomallei occurred in tropical semi-arid climate, with low annual pluviometric index and a shrubby âcaatingaâ vegetation, showing an influence of local factors enabling the survival and multiplication of the microorganism. Epidemiological surveillance showed 51.27% (161/327) for the IgM isotype and 58.49% (186/317) for IgG isotype. Frequency of IgM titers was higher among children than adults, while IgG frequency raised with age. There was a significant association between agricultural occupations and IgM (44.15%, p<0.005) and IgG titers (44.15%, p<0.005) and between construction workers and IgG titers (84.6%, p=0.005). Most samples with high titers showed reactivity to the 33 and 45 kD bands, which correspond to the polysaccharide O of the liposaccharide chain of the bacteria.
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DiagnÃstico laboratorial para o vÃrus dengue em lÃquido cefalorraquidiano: a detecÃÃo do antÃgeno NS1 como uma nova ferramenta / Laboratory diagnosis for dengue virus in cerebrospinal fluid: the detection of the NS1 antigen as a new tool

Fernanda Montenegro de Carvalho AraÃjo 13 October 2011 (has links)
nÃo hà / Os primeiros casos de dengue no Estado do Cearà ocorreram em agosto de 1986. A doenÃa tornou-se endÃmica, com aumento gradativo de casos graves, alguns apresentando manifestaÃÃes nÃo usuais, como o envolvimento do sistema nervoso central (SNC). Com o objetivo de estudar o diagnÃstico laboratorial especÃfico de dengue em amostras de lÃquido cefalorraquidiano (LCR), visando à correlaÃÃo entre a dengue e o envolvimento do SNC em casos ocorridos nos anos de 2005 a 2008, foram analisadas 346 amostras de LCR coletadas de 346 pacientes: 163 provenientes de pacientes com evoluÃÃo fatal que foram necropsiados no ServiÃo de VerificaÃÃo de Ãbitos Dr. Rocha Furtado (SVO); e, 183 amostras de pacientes que foram atendidos no Hospital SÃo Josà de DoenÃas Infecciosas (HSJ) com suspeita de meningite. Os mÃtodos diagnÃsticos utilizados para a anÃlise desses materiais foram: o isolamento viral, a transcriÃÃo reversa seguida da reaÃÃo em cadeia pela polimerase (RT- PCR), a pesquisa de anticorpo (Ac) IgG, Ac IgM e pesquisa de antÃgeno nÃo estrutural 1 (Ag NS1). Um ensaio imunoenzimÃtico (ELISA) comercial para detecÃÃo de Ag NS1 em soro foi avaliado para uso, pela primeira vez, em LCR apresentando uma sensibilidade de 50% (IC- 29.9-70.1) e especificidade de 100% (IC-94-100). No grupo dos pacientes que evoluÃram para Ãbito, 90 pacientes apresentaram infecÃÃo pelo vÃrus dengue (DENV), e destes 46 (51,1%) com positividade para dengue no LCR: um isolamento de DENV-3; sete detecÃÃes de vÃrus por RTâPCR (4 DENV-3; 3 DENV-2); 26 Ag NS1 e 27 Ac IgM por ELISA; 38 IgG foram positivos por imunocromatografia. O LCR acrescentou 27,8% (25/90) ao diagnÃstico de dengue em pacientes negativos em outras amostras biolÃgicas. As manifestaÃÃes clÃnicas mais observadas nos 46 casos de Ãbitos em que o LCR foi positivo para DENV foram: febre, 65%; cefalÃia 50%; vÃmito 30.4%; desorientaÃÃo, 30,4%; dispnÃia, 28%; polimialgia, 28%; adinamia, 28%; agitaÃÃo, 26%; dor abdominal, 17%; diarrÃia, 16%; queda de sensÃrio, 10,8%; tosse, 10,8%. Considerando os dados clÃnicos e laboratoriais que caracterizam um envolvimento do SNC nos pacientes com amostras de LCR positivas para DENV foram encontradas as seguintes patologias neurolÃgicas: 19 (41,3%) encefalites, 14 (30,4%) meningoencefalites e 13 (28,3%) meningites. No grupo encaminhado do HSJ, as 183 amostras de LCR foram negativas para pesquisa de bactÃrias e fungos. Cinco casos foram positivos para DENV (2,7%): dois para Ag NS1 e trÃs para Ac IgM. Dos positivos, quatro foram de pacientes internados e um de paciente atendido no ambulatÃrio. Quatro pacientes evoluÃram para cura e um foi a Ãbito. O quadro clÃnico associado aos casos suspeitos de meningite foi de febre, cefalÃia, vÃmito e rigidez de nuca. A positividade para o DENV no LCR foi maior nos casos provenientes do SVO (28,2%) quando comparado com os casos encaminhados do HSJ (2,7%), com p< 0,000 (IC- 4,21-25,37) e Risco Relativo de 10,33 vezes. Os resultados desde estudo mostraram que houve envolvimento do SNC em casos de dengue nas duas populaÃÃes trabalhadas, com um maior envolvimento nos casos encaminhados do SVO. Os resultados deste estudo sugerem que em Ãrea endÃmica de dengue, pacientes com sintomatologia neurolÃgica compatÃvel com encefalite e meningite, apresentando ou nÃo sinais clÃssicos de dengue, devem ser investigados para essa virose. Entretanto, estudos prospectivos de casos de dengue com manifestaÃÃes neurolÃgicas sÃo necessÃrios para conhecer e compreender melhor o envolvimento do SNC nas infecÃÃes pelos DENV. / The first cases of dengue fever in Cearà State occurred in August 1986. The disease has become endemic with a gradual increase in severe cases, some showing atypical manifestations, with involvement of the central nervous system (CNS). In order to study specific laboratory diagnosis of dengue in cerebral spinal fluid (CSF) samples aiming to implement the findings related to cases of neurological manifestations in the years of 2005, 2006, 2007 and 2008, 346 CSF samples collected from 346 patients were studied: the first group comprised 163 patients with fatal outcomes who were autopsied in Death Verification Service (DVS); the second group comprised 183 patients who attended at SÃo Josà Hospital (SJH). Diagnostic methods used for CSF analysis were virus isolation in cell culture, RT- PCR, ELISA for IgM Ab and NS1 Ag detection and immunochromatography for IgG detection. A commercial kit for detection of NS1 Ag in serum was evaluated for use in CSF for the first time, and presented a sensitivity of 50% (CI 9.29-70.1) and a specificity of 100% (CI 94-100). In the first group with 163 individuals, 90 patients had infection with DENV, and from these, 46 (51.1%) were positive for dengue in CSF: one isolation of DENV-3, seven detections by RT-PCR ( four of DENV-3 and three of DENV-2), 26 NS1 Ag and 27 IgM Ab by ELISA; 38 were positive for IgG by immunochromatography. CSF added 27.8% (25/90) positive cases in the diagnosis of dengue negative in other biological samples. The clinical manifestations observed in 46 cases of deaths positive for DENV in CSF were: hyperthermia 65%, headache 50%, vomiting 30.4%, disorientation 30.4%, dyspnea 28%, polymialgia 28%, asthenia 28%, agitation 26%, abdominal pain 17%, diarrhea 16%, fall sensory 10.8% and cough 10.8%. Considering the clinical and laboratory data characterizing a CNS involvement in patients with positive CSF samples for DENV were found the following neurological disorders: 19 (41.3%) encephalitis, 14 (30.4%) meningoencephalitis and 13 (28.3%) meningitis. In the second group, all 183 CSF samples were negative for bacteria and fungi. Five cases were positive (2.7%), two for NS1 Ag and three for IgM Ab. Of the positives, four patients were hospitalized and one patient was treated at the clinic. Four patients were healed and one died. The clinical associated with suspected cases of meningitis was fever, headache, vomiting and neck stiffness. The positivity for DENV in CSF was higher in cases coming from the DVS (28.2), than the cases from SJH (2.7%), p< 0.000 (CI 4. 21-25.37) and Relative Risk of 10.33 times. The results from the study showed that there was CNS involvement in dengue cases in both groups, with a greater involvement in the cases referred from DVS. Given what has been found, it would be convenient to suggest that, in an endemic area of dengue, patients with neurological symptoms consistent with encephalitis and meningitis, showing or not classic sings of dengue fever, should be investigated for these viruses. However, prospective studies of cases with neurological manifestations of dengue are still needed to know and better understand the involvement of the CNS infection by DENV.

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