Made available in DSpace on 2018-08-01T22:33:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9833_Luiza Alves Mendes.pdf: 3673218 bytes, checksum: fe4f231bf8dcda3969e2c9d8a4ed2a00 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / A goiabeira (Psidium guajava L., Myrtaceae) apresenta, dentre seus usos relevantes, atividades biológicas relacionadas a compostos ativos na planta, com destaque ao óleo essencial presente na folha, alvo deste estudo tanto por alterações sazonais no perfil cromatográfico, quanto por efeito larvicida. Os óleos essenciais extraídos das folhas de 21 genótipos de P. guajava, obtidos sazonalmente nos anos de 2015 e 2016, foram analisados utilizando GC-FID e GC-MS. No total foram identificados 35 compostos. Variações quali e semiquantitativas nos óleos essenciais foram observadas ao comparar os diferentes genótipos, bem como os mesmos genótipos nas estações do ano. De forma geral, os genótipos apresentaram predominância de sesquiterpenos, com área relativa acima de 70%. A primavera foi a estação que mais diferiu das demais, com redução de sesquiterpenos hidrogenados e aumento de oxigenados. Quando se observa os fatores fenológicos, como a floração, a redução de compostos como o (E)-Caryophyllene e -Humulene nos óleos essenciais das folhas de todos os genótipos estudados, se apresenta como uma possível influência dessa época. Por outro lado, recentemente os óleos essenciais de P. guajava demonstraram atividade larvicida promissora em larvas de Aedes aegypti. Os óleos essenciais das cultivares SEC, C4, C6, PAL e PET foram avaliados quanto ao efeito larvicida sendo eficientes, com CL50 que variam de 39,48 a 64,25 µg.mL-1 . SEC apresentou-se como a cultivar mais promissora, pois além de ter menor valor de CL50, teve maior rendimento de extração, que variou de 0,15 a 0,37% para as cinco cultivares. Assim, a utilização dos óleos essenciais, além de ser mais uma alternativa ao controle de um inseto vetor de doenças, pode gerar novas fontes de recursos aos produtores de goiaba, uma vez que na condução da cultura grande quantidade de matéria vegetal é gerada em decorrência das sucessivas podas para a produção. Palavras-chave: Goiabeiras; metabólitos secundários; genótipos; sesquiterpenos; atividade larvicida.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-12T18:24:49Z No. of bitstreams: 2 Luana Ferreira_Completo.pdf: 1693618 bytes, checksum: c301fb5df53cc66816c58cab6f264254 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T18:24:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Luana Ferreira_Completo.pdf: 1693618 bytes, checksum: c301fb5df53cc66816c58cab6f264254 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-07-02 / FACEPE / A ocorrência e o potencial farmacológico de metabólitos secundários de micro-organismos endofíticos de plantas, têm sido amplamente investigados. Tabebuia avellanedae, (ipê-roxo) é utilizada como analgésico, antiinflamatório, antibióticos e anti-mutagênico. Diante do potencial biotecnológico desta planta, o presente trabalho teve como objetivo isolar endofíticos de folhas de T. avellanedae e avaliar a atividade antimicrobiana. Foram isolados 166 endofíticos dos quais aproximadamente 74% (123) são fungos, 22% (36) bactérias e 4% (7) actinobactérias. Todas as actinobactérias foram identificadas como Streptomyces spp. Utilizou-se como micro-organismos testes bactérias Gram positivas, Gram negativas e leveduras patógenas oportunistas. Na seleção primária, actinobactérias (3) e fungos (9) apresentaram halos de inibição antimicrobiana. Destes endófitos na fermentação, aproximadamente 66,66% das actinobactérias tiveram atividade contra Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus e Bacillus subtilis e 11,11% dos fungos contra Candida albicans. Para extração dos compostos biativos os melhores solventes, pHs, meios de cultura e tempo de cultivo foram, respectivamente, para Streptomyces sp. PCA 3: acetato de etila, pH 7, MPE, 96 horas; para Streptomyces sp. PCA 4: clorofórmio, pH 7 (extrato) e acetona, pH 2 (biomassa), MPE, 72 horas; e para o fungo PEF 6: acetato de etila, pH 7, cinco dias. Foram detectados nos extratos da planta e endofíticos bioativos ß-amirina, ß-sitosterol, ácido ursólico, flavonóides e alcalóides sendo constatado que os compostos produzidos pelo isolado Streptomyces sp. PCA 4 são mais semelhantes aos produzidos pela planta. Diante desses resultados, conclui-se que os endofíticos bioativos apresentam potencial farmacológico, porém outros estudos são necessários para comprovar a efetividade dos mesmos.

Submitted by Danielle Karla Martins Silva (danielle.martins@ufpe.br) on 2015-03-04T14:40:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Maria Valdirene Leite Pedone Bonfim - Pós Graduação em Biologia de Fungos.pdf: 592747 bytes, checksum: 54c5c82656eeef0f28340e78eb661648 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T14:40:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Maria Valdirene Leite Pedone Bonfim - Pós Graduação em Biologia de Fungos.pdf: 592747 bytes, checksum: 54c5c82656eeef0f28340e78eb661648 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CNPq / A aplicação de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) pode aumentar o crescimento e a concentração de metabólitos primários e secundários em diversas espécies vegetais. Anadenanthera colubrina, planta com propriedades medicinais, tem o crescimento beneficiado pela micorrização, mas não se conhece a influência da simbiose sobre a produção de compostos foliares bioativos nessa planta. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da inoculação micorrízica e da adição de P na produção de compostos bioativos em mudas de angico-preto. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial de 2 x 5, sendo dois tratamentos de inoculação (com ou sem FMA) e cinco níveis de P, em 5 repetições. Sementes de angico-preto foram desinfestadas e, após a germinação, as plântulas com duas folhas definitivas foram transferidas para potes contendo solo desinfestado com 5 níveis de P [4 ( nível natural), 8, 15, 30 e 50 mg de P dm-3 de solo, suplementado com superfosfato simples] e inoculadas com solo-inóculo misto, fornecendo 300 esporos de Gigaspora albida + Acaulospora longula. Após 150 dias em casa de vegetação, a parte aérea foi colhida, seca em estufa e macerada em etanol 95 % (12 dias/20 °C) para determinação de carboidratos solúveis, proteínas, fenóis, flavonóides e de taninos totais. A produção de proteínas e de carboidratos, tanto em concentração como em conteúdo, foi favorecida pela inoculação com FMA, porém tal benefício foi mitigado nos maiores níveis de P testados. A concentração de fenóis, de flavonóides e de taninos totais foi favorecida pela micorrização, mesmo nos níveis mais altos de P. Conclui-se que a produção de metabólitos primários e secundários foliares em mudas de A. colubrina pode ser maximizada pela micorrização, com os benefícios dependentes da suplementação fosfática do solo.

REIS, Francisco Alex Aragão dos. Prospecção Química de Lippia insignis Moldenke (Verbenaceae). 2016. 86 f. Dissertação (Mestrado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2017-01-13T18:52:00Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_faareis.pdf: 4461757 bytes, checksum: 269b965e657eab3fa10c117f9bfd02de (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-19T13:11:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_faareis.pdf: 4461757 bytes, checksum: 269b965e657eab3fa10c117f9bfd02de (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-19T13:11:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_faareis.pdf: 4461757 bytes, checksum: 269b965e657eab3fa10c117f9bfd02de (MD5) Previous issue date: 2016 / This paper describes the first chemical study of the speciesLippia insignis Moldenke (Verbenaceae), collected in Feira de Santana – BA. From the ethanolic extract of the stems was isolated four compounds: the phenylpropanoid heteroside verbascoside; the lignane isolaricesinol; and the iridoids adoxoside and caryoptoside. From the extract of the leaves was isolated the flavonoid scutellarein 7-O-glucopiranoside. The Nuclear Magnetic Ressonance thecnics (NMR-¹H, ¹³C, COSY, HSQC, HMBC), infrared (IR) and mass spectrometry (MS) as well as the comparison of literature data were used to the structural determination of the isolated metabolites. It was the first relate of the isolated iridoid adoxoside in the genre Lippia. All the isolated compounds have pharmacological activity related in the literature. The chemical study of L. insignis species corroborates to a better understanding of the chemotaxonomy of genus Lippia, confirming the chemical profile of the genre and putting the species as a new source of bioactive molecules. / Este trabalho descreve o primeiro estudo químico realizado na espécie Lippia insignis Moldenke (Verbenaceae), coletada em Feira de Santana – BA. Do extrato etanólico do caule isolou-se quatro metabólitos secundários: o heterosídeo fenilpropanoídico verbascosídeo, a lignana isolaricesinol, e os iridóides adoxosídeo e carioptosídeo. Do extrato metanólico das folhas isolou-se o flavonóide escutellareína 7-O-glucopiranosídeo. Para a identificação dos metabólitos foram utilizadas as técnicas de Ressonância Magnética Nuclear unidimensionais (RMN-¹H e ¹³ C) e técnicas bidimensionais (COSY, HSQC, HMBC), infravermelho (IV) e espectrometria de massa (EM), bem como comparação com dados da literatura. O iridóide adoxosídeo está sendo relatado pela primeira vez no gênero Lippia. Todos os compostos isolados dessa espécie já possuem alguma atividade farmacológica descrita na literatura. O estudo químico de L. insignis corrobora para um maior conhecimento da quimiotaxonomia do gênero Lippia, confirmando o perfil químico do gênero e colocando a espécie como uma nova fonte de moléculas bioativas.

SOUSA, Debora Bezerra de. Estudo do potencial químico de Fusarium udum. 2017. 139 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Celia Sena (celiasena@dqoi.ufc.br) on 2017-11-07T20:09:55Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_dbsousa.pdf: 5343823 bytes, checksum: a8ff9a4e6104fc12d420f0ad30f9866c (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-11-07T22:59:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_dbsousa.pdf: 5343823 bytes, checksum: a8ff9a4e6104fc12d420f0ad30f9866c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-07T22:59:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_dbsousa.pdf: 5343823 bytes, checksum: a8ff9a4e6104fc12d420f0ad30f9866c (MD5) Previous issue date: 2017 / The present study aims to investigate the chemical potential of Fusarium udum, an endophytic fungus isolated from Chrotalaria paulinea, which is responsible for causing damage to bean planting and species of Chrotalaria. The fungus was cultivated in four distinct culture media: PD (potato-dextrose), PDY (potato-dextrose-yeast), MPD (malt-peptone-dextrose), and Czapek. The culture time was determined by the glucose rate of the culture medium. The ethyl acetate extract from the microorganism cultivated in MPD (25 days) was selected for the pre-liminary chromatographic treatment, and led to the isolation of tyrosol, fusaric acid, and monaspilosin. In another experiment that used the culture media mentioned above, F. udum produced secondary metabolites through different days of incubation (7, 14, 21, 28 days). The chromatographic fractionation of the ethyl acetate extract from the microorganism cultured in PDY (28 days) provided cycle (L-Pro-L-Leu) and triptophol. The micellar extract obtained in this culture was also studied and it supplied the substance adenosine. Usual chromatographic techniques, including liquid-liquid partition, C-18 cartridge chromatography, and high perfor-mance liquid chromatography (HPLC), were used to isolate the secondary metabolites. The structural characterization was conducted by using the spectrometric techniques mass spec-trometry (MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) with one and two-dimensional experi-ments and comparison with literature data. / O presente trabalho objetiva a investigação do potencial químico de Fusarium udum, um fungo endofítico isolado de Chrotalaria paulinea, e responsável por causar danos a plantações de feijão e em espécies de Chrotalaria. O fungo foi cultivado em quatro meios de cultura distintos: BD (batata-dextrose), BDL (batata-dextrose-levedura), MPD (malte-peptona-dextrose) e Czapek, sendo o tempo de cultivo determinado pela taxa de glicose do meio. O extrato AcOEt do micro-organismo cultivado em meio MPD (25 dias) foi selecionado para o tratamento cromatográfico preliminar, levando ao isolamento do tirosol, ácido fusárico e monaspilosina. Em um outro experimento, e utilizando os meios de cultivo mencionados, F. udum teve a produção dos metabólitos secundários acompanhada através de diferentes dias de incubação (7, 14, 21, 28 dias). O fracionamento cromatográfico do extrato AcOEt do micro-organismo cultivado em meio BDL (28 dias) forneceu a dicetopiperazina ciclo (L-Pro-L-Leu) e o triptofol. O extrato micelar obtido neste cultivo também foi estudado e forneceu a adenosina. Técnicas cromatográficas usuais, incluindo partição líquido-líquido, cromatografia em cartucho C-18 e cromatografia de alta eficiência (CLAE) foram utilizadas para o isolamento dos metabólitos secundários, enquanto que a caracterização estrutural foi possível através do uso de técnicas espectrométricas utilizando espectrometria de massa (EM) e ressonância magnética nuclear (RMN) com experimentos uni e bidimensionais, além de comparação com dados da literatura.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Ciências Animais, 2014. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2014-10-08T13:36:15Z No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-16T19:18:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T19:18:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_CamilaEufrasioSouza.pdf: 1372623 bytes, checksum: d4c002a8ea333e2b97bdc5bda4cc4985 (MD5) / Objetivou-se com esse trabalho avaliar o efeito in vitro de metabólitos secundários de plantas no volume de metano (VCH4), degradabilidade in vitro da matéria seca (DIVMS), volume de metano por grama de matéria seca degradada (VCH4/DIVMS), concentração de nitrogênio amoniacal (N-NH3) e ácidos graxos voláteis (AGV). Foram realizados três experimentos, conduzidos no Laboratório Química Analítica de Plantas (LQAP) da Embrapa Cerrados. O meio de cultura foi preparado seguindo-se as recomendações de Theodorou et al. (1994). A mensuração dos gases produzidos foi realizada às 6 e às 24 horas após o início dos experimentos, pelo deslocamento de água medido pelo aparato de vasos comunicantes. DIVMS foi determinada às 24 h. Amostras de Brachiaria brizantha cv. Marandu e concentrado foram pesadas na relação 80:20 em sacos F57 da Ankom ® e foram usadas como tratamento controle (TC) para os experimentos 1 e 2. Para o experimento 3, somente amostras de B. brizantha cv. Marandu foram usadas como controle (TC). O delineamento foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e três repetições e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. No experimento 1 foi avaliado duas doses (0,3 e 0,6 mL/L de solução) de óleo essencial de alho (A3, A6), canela (C3, C6) e orégano (O3, O6) e duas doses (300 e 600 mg/L de solução) de timol (T3, T6) e resveratrol (R3, R6) em pó. Para VCH4 todos os tratamentos diferiram (P<0,05) de TC, reduzindo o volume produzido. R6 não diferiu (P>0,05) de TC para DIVMS, sendo que todos os outros tratamentos aumentaram (P<0,05) DIVMS. A relação VCH4/DIVMS foi reduzida (P<0,05) com a adição dos metabólitos. A concentração de N-NH3 não foi alterada por nenhum dos metabólitos avaliados. As concentrações dos ácidos acético, propiônico e soma AGV não foram alteradas pelo tratamento R3, tendo todos os outros reduzido (P<0,05) a concentração de ambos os ácidos, o que evidencia o efeito antimicrobiano dos óleos essenciais sobre os micro-organismos ruminais. No experimento 2 foram avaliadas as combinações entre 300 e 600 mg/L de resveratrol com 0,6 mL/L dos óleos essenciais de alho (R3A6, R6A6), canela (R3C6, R6C6) e orégano (R3O6, R6O6), e 600 mg/L de timol (R3T6, R6T6). Também foi avaliada a dose de 0,6 mL/L de todos os metabólitos sem associação com resveratrol (A6, C6, O6, T6, R6) e a menor dose de resveratrol (R3). O VCH4 e a DIVMS reduziram (P<0,05) em relação à TC para todos os tratamentos combinados ou não com o resveratrol, mas não houve efeito (P>0,05) para os tratamentos R3 e R6. O VCH4/DIVMS também foi reduzido (P<0,05) em relação à TC para todos os tratamentos. A concentração de N-NH3 foi reduzida (P<0,05) para os tratamentos R6, R6A6 e R6T6. Os tratamentos A6, C6, O6 e R3C6 aumentaram (P<0,05) a concentração de N-NH3. Não houve efeito, em relação à TC, na concentração de acetato, butirato e soma de AGV para os tratamentos combinados com o resveratrol, à exceção de R3C6, indicando que tais aditivos podem ser usados para melhorar a eficiência do uso da dieta de ruminantes com efeito tóxico sobre os micro-organismos metanogênicos. O experimento 3 avaliou o efeito de extratos de plantas do cerrado, barbatimão e sucupira, nos mesmo parâmetros citados acima. Amostras de Brachiaria brizantha foram usadas como controle (Br). As doses avaliadas foram 100, 200, 300, 400 e 600 mg/L de solução para barbatimão (B100, B200, B300, B400 e B600) e para sucupira (S100, S200, S300, S400 e S600). Para VCH4, B300, B600, S300 e S400 mg/L, diferiram (P<0,05) de Br. Nenhum tratamento teve influência na DIVMS. A relação VCH4/DIVMS aumentou (P<0,05) em 33,8% para S300. A concentração de N-NH3 aumentou (P<0,05) para S400 e S600 Em relação a concentração do AGV, B100 e S300 mg/L reduziram (P<0,05) a concentração de ácido acético, porém S400 aumentou (P<0,05) em 21% a concentração desse ácido. Os tratamentos não diferiram estatisticamente de Br para o ácido propiônico. Os tratamentos reduziram (P<0,05) a concentração de ácido butírico entre 37,6 e 76,4%. A soma de AGV também reduziu significativamente (P<0,05) para todos os tratamentos com extrato de barbatimão e sucupira, a exceção do tratamento S400. Os tratamentos com extrato de barbatimão provocaram queda na produção de CH4, porém reduziram a SAGV, o que mostra que tal extrato, nas doses avaliadas, não é recomendado para melhorar a eficiência de uso da dieta por bovinos. Os tratamentos com extrato de sucupira apresentaram variação nos resultados dos parâmetros avaliados nesse experimento. Mais estudos devem ser realizados para elucidar os efeitos desse extrato sobre os parâmetros de fermentação ruminal. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to evaluate in vitro effect of plant secondary metabolites on the volume of methane (VCH4), in vitro dry matter degradability (IVDMD), volume of methane per gram of degraded dry matter (VCH4/IVDMD), ammonia concentration (N-NH3) and volatile fatty acids (VFA). The incubation medium was prepared following the recommendations of Theodorou et al. (1994). In vitro gas production was performed by the use of a simple apparatus for measuring gas production through communicating vessels and methane concentration was determined by gas chromatography. IVDMD were determined at 24 h. Samples of Brachiaria brizantha and concentrate were weighed in the ratio 80:20 into Ankom® filter bags (F57) and were used as the control treatment (TC) for experiments 1 and 2. For experiment 3 only B. brizantha was used as control (Br). In Experiment 1 it was evaluated two doses (0.3 and 0.6 mL/L solution) of cinnamon (C3, C6), garlic (A3, A6) and oregano (O3, O6) essential oils and two doses (300 and 600 mg/L solution) of, thymol (T3, T6) and resveratrol (R3, R6) powder. All treatments differed (P<0.05) from TC for VCH4, reducing the volume produced. R6 did not differ (P>0.05) for IVDMD compared to TC, but all the others treatments increased (P<0.05) IVDMD. The VCH4/IVDMD ratio was reduced (P<0.05) with the addition of the secondary metabolites. N-NH3 concentration was not altered by any of the metabolites evaluated. The concentrations of acetic, propionic and total VFA acids were not altered by treatment R3, while all others reduced (P<0.05) the concentration of both acids, which shows the antimicrobial effect of essential oils on rumen microorganisms. In experiment 2, the combinations between 300 and 600 mg/L of resveratrol with 0.6 mL/L of cinnamon (R3C6, R6C6), garlic (R3A6, R6A6) and oregano (R3O6, R6O6) essential oils and with 600 mg/L thymol (R3T6, R6T6) were evaluated. 0.6 mL/L of all metabolites without association with resveratrol (A6, C6, O6, T6, R6) and the lowest dose of resveratrol (R3) were also evaluated. The VCH4 and IVDMD decreased (P<0.05) compared to TC for all treatments combined or not with resveratrol, but there was no effect (P>0.05) for R3 and R6 treatments The VCH4/IVDMD was also reduced (P<0.05) compared to TC for all treatments. The N-NH3 concentration was reduced (P<0.05) for R6, R6A6 and R6T6 treatments. The C6, A6, O6 and R3C6 treatments increased (P<0.05) the concentration of N-NH3. Compared to TC, there was no effect in acetate, butyrate and the sum of VFA concentrations combined with resveratrol, with the exception of R3C6 treatments, indicating that such additives can be used to improve efficiency of feed utilization by ruminants, with toxic effect on the methanogenic microorganisms. Experiment 3 tested doses were 100, 200, 300, 400 and 600 mg/L of solution for barbatimão (B100, B200, B300, B400 and B600) and sucupira (S100, S200, S300, S400 and S600). Treatments B300, B600, S300 and S400 mg/L differed (P<0.05) from Br to VCH4. IVDMD was not affected. The VCH4/DIVMS ratio increased (P<0.05) in 33.8% for S300. The N-NH3 concentration increased (P<0.05) to S400 and S600. S300 and B100 reduced (P<0.05) acetic concentration, however S400 increased (P<0.05) in 21% the concentration of this acid. The treatments did not differ statistically from Br to propionic acid. The treatments reduced (P<0.05) butyric acid concentration from 37.6 to 76.4%. The sum of VFA also reduced (P<0.05) for both barbatimão and sucupira treatments, except to S400 treatment. Treatments with barbatimão extract caused decreased in CH4 production, but reduced SVFA, which shows that this extract in the doses evaluated, it is not recommended to improve the efficiency of use of the diet for cattle. Treatment with extract sucupira showed variation in the results of the parameters evaluated in this experiment. More studies should be conducted to elucidate the effects of this extract on ruminal fermentation.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2015. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-04-27T18:35:44Z No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-05-04T12:11:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-04T12:11:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_CarlaFerreiraCaixeta.pdf: 1703488 bytes, checksum: 06b95239b227b538dedfd0b672d5f26e (MD5) / Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) é uma espécie extremamente polífaga, se alimenta das mais diferentes culturas de interesse econômico e tem grande adaptabilidade às várias condições climáticas consideradas uma praga de importância. Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria cosmopolita que expressa diversas proteínas durante seus estágios de crescimento que possuem atividade entomopatogênica, podendo atuar como importante agente de controle biológico, além de ser capaz de colonizar o interior das plantas promovendo o seu crescimento. Com a necessidade de se conhecer cada vez mais e explorar as potencialidades deste microrganismo o estudo objetivou selecionar 100 estirpes de Bacillus thuringiensis com toxicidade para Helicoverpa armigera e potencial para promoção de crescimento vegetal. Das estirpes avaliadas 23 apresentaram 100% de mortalidade para H. armigera, sendo quinze pertencentes às subsp. kurstaki, aizawai, tolworthi, fokuokaensis, sotto, morrisoni, thuringiensis e oito não sorotipadas. As estirpes apresentam perfil proteíco de 130 e 65 kDa, sendo que algumas apresentaram apenas uma das proteínas e fragmentos de DNA de tamanho esperado para a detecção dos genes cry1 e cry2. Na detecção da capacidade de promoção de crescimento in vitro, nenhuma estirpe apresentou a capacidade de produção de sideróforos, solubilização de fosfatos e fixação biológica de nitrogênio. Na produção de AIA todas as estirpes foram positivas e a quantidade variou de 1,17 μg mL-1 (estirpe S93) a 7,44 μg mL-1 (estirpe S1983). Das 100 estirpes analisadas 45 apresentaram amplicons esperados para todos os genes avaliados, sendo que 71 estirpes apresentaram amplicons de tamanhos esperados para o gene fosfatase ácida, 57 foram positivos para os genes sideróforos. Os genes envolvidos nas rotas de biossíntese do hormônio AIA se mostraram mais frequentes em estirpes de Bt, sendo que das estirpes analisadas 91 foram positivos para a presença do gene ipdC, 97 para o genes iam1 e 93 para o gene iam2. B. thuringiensis pode ser utilizado no controle de H. armigera e possui potencial como inoculante para a promoção de crescimento vegetal, abrindo novas perspectivas para o uso agronômico. / Helicoverpa armigera (Hübner, 1808) (Lepidoptera: Noctuidae) is an extremely polyphagous species, feeding from different types of crops with economic importance and has great adaptability to various climatic conditions, considered an important pest. Bacillus thuringiensis is a cosmopolitan bacteria that express different proteins during their growth stages with entomopathogenic activity, and may act as an important biological control agent, besides being capable to colonize the interior of plants, promoting its growth. To know more and explore the potentials of this microorganism, the aimed of this work to select 100 strain of Bacillus thuringiensis wich toxicity to Helicoverpa armigera and potential for plant growth promotion. 23 strains showed 100% the mortality against H. armigera, of which fifteen belonged to subsp. kurstaki, aizawai, tolworthi, fokuokaensis, sotto, morrisoni, thuringiensis and eight without serotype. Some strains exhibited the profile of 130 and 65kDa, other showed just one of the proteins and the amplicons with the expected size of cry1 and cry2 gene. In vitro detection of growth promotion capability, showed that no strain had the siderophore production capability, phosphate solubiliation and biological fixation of nitrogen. All strains tested were capable of produce IAA, and the amount varied from 1,17 μg mL-1 (S93 strain) to 7,44 μg mL-1 (1983 strain). 45 of the 100 analyzed strains showed the expected amplicons for all the studied genes, 71 strains showed the expected amplicon size for the acid phosphatase gene, 57 were positive for siderophore gene. The genes involved in the biosynthesis of IAA hormone were more frequents in Bt strains, 91 strains were positive for the presence of ipdC gene, 97 were positive for iam1 gene, and 93 for iam2 gene. B thuringiensis can be used in biological control against H. armigera and has a great potencial to promote plant growth, creating new perspectives for agronomic use.

Recentemente foram isolados da esponja marinha Axinella cf. corrugata dois compostos derivados da esculetina: o éster metílico do ácido 4-esculetínico e o éster etílico do ácido 4-esculetínico. Este último apresentou importante atividade contra o vírus da SARS. Este projeto teve como meta isolar e cultivar as linhagens de fungos associadas à esponja Axinella cf. corrugata, bem como analisar seus extratos por HPLC-PDA-MS, objetivando a possível detecção desses compostos (ou derivados) nesses extratos. Avaliações preliminares levaram à obtenção de 11 amostras potencialmente relacionadas a esses compostos. Dentre elas, uma apresentou espectros no UV e de massas muito similares aos obtidos para o aduto de sódio do éster metílico do ácido 4-esculetínico. No entanto análises espectroscópicas mais detalhadas por RMN - 1H, RMN - 13C, HSQC, HMBC e COSY da amostra purificada permitiram identificar o composto isolado, a 1,3,6-trihidroxi-8-metil-9H-xanten-9-ona. Simultaneamente às análises químicas, os extratos obtidos a partir das linhagens fúngicas isoladas da esponja Axinella cf. corrugata tiveram suas atividades biológicas avaliadas frente a microrganismos e células tumorais humanas, resultando em mais de 20% dos extratos com alguma atividade biológica. / Recently two compounds derived from esculetin have been isolated from the marine sponge Axinella cf. corrugata: the methyl ester of esculetin-4-carboxylic acid and the ethyl ester of esculetin-4-carboxylic acid. The latter displayed antiviral activity against the SARS virus. This project aimed the isolation and the growth of fungal strains associated to the sponge Axinella cf. corrugata, and the subsequent analysis of the fungal extracts by HPLC-PDA-MS, aiming the possible detection of the esculetin compounds (or derivatives) in those extracts. Preliminary analysis yielded 11 samples potentially related to these compounds. Among these extracts, one presented UV and MS spectra very similar to the spectra obtained for the sodium adduct of the methyl ester of esculetin-4-carboxylic acid. However, a detailed spectroscopic analysis of a pure compound isolated by RMN - 1H, RMN - 13C, HSQC, HMBC e COSY allowed the identification of the compound, which is 1,3,6-trihydroxy-8-methyl-9H-xanthen-9-one. Simultaneously to the chemical analysis of the fungal crude extracts, the biological activities of the obtained extracts were evaluated against microrganisms and human tumoral cell lines. More than 20% of the extracts displayed some biological activity.

O gênero Croton abriga aproximadamente 1300 espécies, muitas delas reconhecidas pela sua utilização terapêutica, que se deve a presença de grande diversidade de metabólitos secundários. Tais propriedades foram ponto de partida para investigações sobre as propriedades fitoquímicas do gênero. C. vulnerarius e C. echinocarpus são espécies endêmicas do Brasil pertencentes à seção Cyclostigma e até então pouco estudadas. Neste projeto foram extraídos, identificados e isolados componentes químicos destas espécies e analisadas as suas propriedades bioativas (antioxidante, antimicrobiana e anti-HIV). Foi verificado que, diferentemente de outras espécies da mesma seção, C. echinocarpus e C. vulnerarius não apresentam diterpenos em sua composição. No entanto, C. echinocarpus possui entre seus principais componentes um alcaloide, identificado por espectrometria de massas como coridina. Em relação às substâncias fenólicas, observamos que as espécies possuem perfis semelhantes, com alguns flavonoides em comum, sendo que o principal componente de C. echinocarpus é a apigenina vitexina e de C. vulnerarius , o derivado de campferol tilirosídeo. Em relação às atividades biológicas, foi verificado que ambas as espécies possuem potencial antioxidante e antimicrobiano contra espécies de bactérias Gram negativas, especialmente nos extratos mais ricos em compostos fenólicos. Quanto à ação anti-HIV, foi observado que a fração contendo o alcaloide coridina isolado apresentou um grande potencial de atividade anti transcriptase reversa, atingindo valores acima de 90% de atividade, mesmo para a menor concentração testada / Croton comprises approximately 1,300 species, many of them known for their therapeutic uses, which is due to the presence of a large diversity of secondary metabolites. Those properties were the starting point for research on the phytochemical characteristics of the genus. C. vulnerarius e C. echinocarpus are Brazilian endemic species belonging to section Cyclostigma. This project aimed the extraction, identification and isolation of chemical constituents from both species and the analyze of the bioactive properties of such constituents (antioxidant, antimicrobial and anti-HIV). It was found that, unlike other species of the same section, C. echinocarpus and C. vulnerarius does not present diterpenes in their composition. However, C. echinocarpus showed alkaloids among its main constituents, one of them identified by mass spectrometry as coridine. Regarding the phenolic substances, we observed that the two species have similar profiles, with some flavonoids in common. C. echinocarpus presents the flavone C-glycosylated vitexin as its main flavonoid constituent, while C. vulnerarius has the acylated derivative of kaempferol, tiliroside. Regarding the biological activities, both species showed antioxidant potential; antimicrobial effects against Gram-negative bacteria, especially the extracts richer in vitexin; and anti-HIV activity, where the fraction containing the alkaloid coridine showed great potential, reaching values above 90% of the anti-HIV activity, even when the lowest concentration was tested (100 mg.mL-1)

A investigação de produtos naturais tem sido cada vez mais direcionada para o estudo de microrganismos, com destaque para aqueles do ambiente marinho. Neste trabalho foram estudadas linhagens bacterianas isoladas de tecidos da esponja Arenosclera brasiliensis, como parte de um estudo que tinha o objetivo de encontrar novas moléculas bioativas. O cultivo da linhagem bacteriana Pseudovibrio denitrificans Ab134 permitiu o isolamento e identificação de três compostos derivados de dibromotirosina, a fistularina-3 (26), o ácido verongidoico (27) e a 11-hidroxiaerotionina (28). Outros cinco compostos derivados de dibromotirosina foram detectados, em frações ainda impuras, através de análises por CLUE-qTOF e tiveram suas estruturas propostas de acordo com os íons de fragmentação observados no espectro de EMAR: aerotionina (29), um éster do ácido purpurocerático B (30), purealidina L (31) e aplisinamisina II (32). Este é o primeiro relato da produção dos derivados de dibromotirosina a partir de uma linhagem bacteriana e representa um forte indício de que tais compostos, comumente isolados de esponjas, são na verdade produzidos pela microbiota associada destes animais. O cultivo da linhagem fúngica Biatriospora sp. permitiu o isolamento e identificação de nove compostos diterpênicos da classe das fomactinas, sendo seis deles inéditos. As fomactinas são conhecidas por apresentarem potente atividade como inibidoras de receptores do PAF. As fomactinas S, P, U e I apresentaram bons resultados na inibição da ligação do PAF aos seus receptores. As fomactinas S e P foram também avaliadas em ensaio de re-população tumoral pós irradiação e foram capazes de inibir o fenômeno de re-população em concentração molar equivalente a antagonistas comerciais. Tal resultado sugere que a associação da radioterapia com antagonistas do PAF-R pode ser uma nova e eficiente alternativa terapêutica para inibição do crescimento de tumores. / Research on natural products is increasingly focusing on the study of microorganisms, especially those from the marine environment. In the present investigation, bacterial strains isolated from tissues of the sponge Arenosclera brasiliensis were studied in order to find new bioactive molecules. Cultivation of the bacterial strain P. denitrificans allowed the isolation and identification of three dibromotyrosine-derived compounds: fistularin-3 (26), verongidoic acid (27) and 11-hydroxyaerothionin (28). Another five dibromotyrosine-derived compounds were detected in still impure fractions by UPLC-qTOF analysis and had their structures proposed according to the fragmentation ions observed in the HRMS spectrum: aerothionin (29), the methyl ester of purpuroceric acid B (30), purealidin L (31) and aplisinamysin II (32). This is the first report of the production of dibromotyrosine derivatives by a bacterial strain and represents a strong indication that such compounds, commonly isolated from sponges, are actually produced by the associated microbiota of these animals. Cultivation of the fungal strain Biatriospora sp. allowed the isolation and identification of nine fomactin diterpenes, six of wich are new. Fomactins are known as inhibitors of PAF receptors. Fomactins S, P, U and I have shown good results in inhibiting the binding of PAF to their receptors. The fomatins S and P were also evaluated in the post-irradiation tumor re-population assay and were able to inhibit the re-population phenomenon at micromolar concentration equivalent to commercial antagonists. Such a result suggests that the association of radiotherapy with PAF-R antagonists may be a new and efficient therapeutic alternative in tumors.