Orientador: Sara T. O. Saad / Deissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T23:58:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_DeniseSilviade_M.pdf: 5043387 bytes, checksum: 45f6a641dda3292cdb3759ed8468aae3 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Para que a terapia gênica seja aplicada à terapêutica clínica, é necessário o desenvolvimento de um sistema que permita a eficácia biológica e segurança no caso de efeitos tóxicos. O gene da eritropoetina (EPO) pode ser utilizado para o tratamento de anemias crônicas, porém estudos in vivo têm demonstrado que efeitos tóxicos, como trombose e policitemia fatal, são freqüentes devido ao descontrole da expressão da EPO e alta elevação do hematócrito (Hct). O objetivo deste estudo foi buscar um sistema capaz de induzir a apoptose de células transformadas com o gene da EPO, baseado na ativação artificial da caspase9, através de indutores químicos de dimerização (CIO), comparando este sistema ao do Tet-Off. Duas construções foram utilizadas: a primeira contendo o cDNA da EPO murina (pBS-mEpoD) sob o controle do sistema Tet-off (ptetTA) e o segundo contendo o cDNA da caspase9 ligado a duas moléculas de FKBP em tandem (iCasp9). As moléculas de FKBP contêm uma mutação F36V que permite a ligação específica do indutor químico de dimerização (CIO) AP20187, gentilmente cedido pela ARIAD Pharmaceutics (Cambridge, MA). Estudos in vitro mostraram que, em células murinas C2C12 transfectadas estavelmente, o vetor icasp9 apresentou expressão adequada e 90% das células entraram em apoptose após a administração do AP 20187. Os ensaios in vivo foram realizados, inicialmente, com 3 grupos de camundongos (11/grupo), que receberam '5mu¿p pBS-mEpoD , '0,5mu¿g ptet-tTA e diferentes concentrações de iCasp9: grupo 1: zero, grupo 2= '6mu¿g e grupo 3= '10mu¿ g. As injeções intramusculares foram seguidas de eletroporação (8 pulsos, 30mseg , 200V/cm, 1Hz). Após cinco semanas, os animais apresentaram aumento no Hct de 33% (Student T test p=0.0013), 36.8% (p=0.0004) e 12.8% (p=0.0374) nos grupos 1,2 e 3 respectivamente, sugerindo que a administração de '6mu¿g de icasp9 não altera a expressão do vetor pBSmEpoD, enquanto que '10mu¿g de iCasp9 reduz sua eficiência. Novo experimento foi realizado, onde 49 animais participaram do estudo, sendo que treze destes receberam as concentrações administradas ao grupo 1, acima descrito, e 36 receberam as concentrações do grupo 2. Através deste experimento, foi possível verificar a eficiência do sistema na elevação e sustentação do hematócrito, assim como comparar os sistemas iCasp9/AP20187 e Tet-Off, no controle da expressão da eritropoetina. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: In order to apply gene therapy to clinical practice, it is necessary to develop a system establishing biological efficiency and safety in case of toxic effects.The erythropoietin gene (EPO) can be used in the treatment of chronic anemia, however in vivo studies have revealed that toxic effects, such as thrombosis and fatal polycythemia, are frequent due to uncontrolled EPO expression and a high increase in the hematocrit (Hct) levels.The aim of this study was to search for a system capable of inducing apoptosis in cells transformed by the EPO gene, based on the artificial activation of caspase-9, using chemical inducers of dimerization (CIO), comparing this system to Tet-Off. Two constructions were used: the first one containing the cONA of murine EPO (pBSmEpoO) under Tet-Off system (ptet-tTA) control and the second containing the cONA of caspase-9 connected to two FKBP molecules in tandem (iCasp9). The FKBP molecules contain a F36V mutation that permits a specific connection to the chemical inducer of dimerization (CIO) AP20187, kindly provided by ARIAO Pharmaceutics (Cambridge, MA). Studies in vitro demonstrated that, in stably transfected murine cells C2C12,the icasp9 vector presented and adequate expression and 90% of the cells entered apoptosis after AP20187 administration. The in vivo assays were performed, initially, with 3 groups of mice (11/group) that received '0,5mu¿g pBS-mEpoO, '0,5mu¿g ptet-tTA and different concentrations of iCasp9: group 1: zero, group 2='6mu¿g, and group 3='10mu¿g.The intramuscular injections were followed by electroporation (8 pulses, 30mseg, 200V/cm, 1Hz). After five weeks, the animais demonstrated a 33% increase in Hct (Student T test p=0.0013), 36.8% (p=0.OO04)and 12.8% (p=0.0374) in groups 1, 2, and 3 respectively, suggesting that the administration of '6mu¿g of icasp9 does not alter the pBS-mEpoO vector expression, although '10mu¿g of iCasp9 reduces its efficiency. A new assay was performed, the study involved 49 animais, thirteen of which received the same concentrations administered in group 1, described above, and 36 received the same concentrations as group 2. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T20:59:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tassi_ErikaMariaMarcondes_M.pdf: 3208716 bytes, checksum: 62edc7df5feb41a3f7d65d80c6e2d615 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: As proteínas parcialmente hidrolisadas vêm sendo empregadas na formulação de produtos especiais, tais como alimentos para fins clínicos e esportistas. Para a nutrição clínica, esses produtos são empregados devido à sua facilitada digestão e absorção, porém em produtos para esportistas o uso é atribuído somente às suas propriedades funcionais. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficácia de dietas contendo proteolisados de ?-lactoalbumina como fonte protéico-energética, em relação à proteína intacta e em condições de alto dispêndio energético no rato, visando o desenvolvimento de dietas de desempenho superior para esportistas. Foram elaboradas dietas isoenergéticas/isoprotéicas, com 16% de proteína, sendo esta ?-lactoalbumina (L), proteolisado de ?-lactoalbumina (H) ou caseína (C). As demais características foram de acordo com as especificações do American Institute Nutrition (AIN-93G). Os ratos, de acordo com seu nível de atividade foram divididos em grupos treinados (T) e sedentários (S). O treinamento físico consistiu em sessões de lh diária (cinco dias/semana) de natação, durante quatro semanas. No final do período de treinamento, os animais foram submetidos a teste de resistência. Após atingido o ponto de exaustão, os ratos foram sacrificados e deles retiradas amostras de sangue, fígado e músculo gastrocnêmio. Determinações analíticas de glicose sérica, ácidos graxos livres sérico, lactato, albumina e proteínas totais séricas, glicogênio hepático, glicogênio e proteínas musculares foram realizadas por técnicas rotineiras. Observou-se que, por razão do treinamento, o ponto de exaustão dos animais da categoria T foi atingido após um tempo três vezes superior ao dos animais da categoria S (152±8min x 48±10min), enquanto que as diferenças entre as dietas não foram significativas. Por outro lado, análise de variância das médias dos parâmetros bioquímicos mostrou diferenças significativas (p<0.05) entre as glicemias dos ratos, tanto em função do nível de atividade quanto em função do tipo de dieta. Dentre os ratos treinados e sedentários, os grupos H finalizaram com índices glicémicos aceitáveis de 56 e 78mg/dL, respectivamente; sendo estes 74 e 61% maiores que os correspondentes aos grupos TL e SL (p<0.05). Observou-se ainda que as glicemias destes últimos não diferiram das dos grupos TC e SC. As dietas SH e TH resultaram em níveis de albumina sérica 81 e 52% superiores àqueles correspondentes às dietas TL e SL, enquanto que os níveis de lactato não mostraram qualquer dependência do tipo de fonte protéica. Tanto nos animais treinados como os sedentários, a dieta H resultou em níveis finais significativamente maiores (p<0.05) no conteúdo de glicogênio muscular, não havendo diferença significativa entre as dietas C e L. Diferença significativa (p<0.05) também foi encontrada para os níveis de glicogênio muscular, mas não para o glicogênio hepático, entre os grupos TH e TL. Os resultados sugerem que o proteolisado da ?-lactoalbumina, apesar de não melhorar os tempos de chegada dos animais à exaustão física, permitiu que os mesmos finalizassem o teste com índices significativamente superiores de glicogênio muscular, e de glicose e albumina sérica. Os resultados também sugerem que o hidrolisado de ?-lactoalbumina pode ser usado com vantagem na formulação de produtos para esportistas / Abstract: The utilization of protein hydrolyzates as ingredients for special, medical or sports foods has been considered, but mostly on the basis of better functional properties or facilitated absorbability. In this study we report the evaluation of diets in which partly hydrolyzed ?-lactoalbumin was fed to exercising rats as a source of protein and energy, in comparison with the intact protein. Three isoenergetic, isoproteic diets containing 16% protein, either as ?-lactoalbumin (L), hydrolyzed ?-lactoalbumin, (H) or whole casein (C, also as assay control) were prepared according to specifications of the American Institute of Nutrition (AIN)-93G. Thirty adult Wistar rats were segregated into two groups: one undergoing l hr daily, 5-day-a-week swimming (T or trained) and another exempted from physical activity (S or sedentary). Physical activity was extended for four weeks, after which the animals from both groups were subjected to a swimming resistance test. At exhaustion, the animals were killed and samples of blood, liver and gastrochnaemius were collected for analysis. Analytical determinations of serum glucose, lactate, free fatty acids, albumin and total proteins, in addition to liver glycogen and muscle glycogen and proteins were accomplished by standard techniques. It was observed that, as a result of training, exhaustion was reached by the animals of group T at a time three times greater than that of rats of group S (152±8 vs 48±l0min), while the diets had no appreciable influence on this parameter. On the other hand, analysis of variance of the data for the biochemical parameters showed significant differences (p<0.05) between the blood glucose levels, both as a function of training and the type of diet. Regardless of the level of activity, the H-diet subgroups finalized the test with glycemic values (56 and 78mg/dL for the T and S groups, respectively) that were 74 and 61% higher than subgroups TL and SL, whereas no significant difference was found between subgroups TC and SC. Feeding the diets TH and SH also resulted in serum albumin levels in the rat that were 81 and 52% greater than those feeding on diets TL and SL, correspondingly, but no effect on serum lactate concentration was found from the type of protein. Diet H was observed to allow for greater final reserves of muscle glycogen in both groups, while those of subgroups C and L were essentially the same. Significant differences (p<0.05) were also found for muscle, but not for liver glycogen between subgroups TH and TL. Our results demonstrate that feeding the ?-lactoalbumin hydrolyzate, in spite of not altering the end-point of physical exercise, guarantees significantly higher levels of serum glucose and albumin, as well as muscle glycogen to the rat. Data also suggest that ?-lactoalbumin hydrolyzates could be used, with advantage, in the formulation of sport foods / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piraciacaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T12:14:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Palma_AdrianaMariaBrunoCostaHindsde_M.pdf: 2783509 bytes, checksum: ad0d209fcb9e9bb1783c22737afda9d4 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: o flúor foi identificado como um ativador da adenilciclase, fato que levou à. formulação do presente trabalho. Este, teve como objetivo, analisar os efeitos do flúor no metabolismo glicolítico do germe dental de ratos, o qual está relacionado com a atividade da adenilciclase. Para tanto foram utilizados germes dentais de ratos de oito dias, os quais foram submetidos aos tratamentos com fluoreto de sódio (NaF), monofluorfosfato de sódio (MFP Na) e fluoraluminato (AIF4 -). Esses experimentos foram conduzidos in vitro e in vivo. Um grupo experimental complementar foi formado com o intuito de avaliar a ação do flúor na ausência do alumínio. Para tanto, foi acrescentado às soluções, o EDT A que age quelando o íon alumínio. Essa etapa do trabalho foi conduzida in vitro. O metabolismo glicolítico foi avaliado através da produção de ácido láctico. Os resultados mostraram que o flúor diminuiu a produção de ácido láctico, ou seja, inibiu o metabolismo glicolítico. O composto que melhor caracterizou esta inibição foi o AIF4 -. O MFP Na não alterou a produção de lactato. A adição de EDTA aboliu o efeito inibitório do flúor no metabolismo glicolítico / Abstract: Fluoride was identified as an activator of adenylate cyclase. The aim of the present work was to verify its effects on glicolitic metabolism of rat tooth germ, which is related to adenylate cyclase activity. Eight-days old rat germs were submmited to treatments with, sodium fluoride (NaF), sodium monofluoridephosphate (Na MFP) and fluoroaluminate (AlF 4 -). The expirements were carried on in vitro and in vivo. In order to evaluate the influence of fluoride in absence of aluminum, another group was formed using EDT A as a chelating agent of aluminum ions. This was an only in vitro experiment. Glycolitic metabolism was measured by lactate production. The results showed that fluoride decreased acid production, therefore it had inhibited glycolitic metabolismo The compound that best showed this inhibition was AlF4 -. Na MFP didn't influence acid production. Addition of EDTA abolished fluoride inhibitory effect on glycolitic metabolismo / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Ciências

Orientadores: Felix Guillermo Reyes Reyes, Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T11:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reis_MariseAuxiliadoradeBarros_D.pdf: 5281331 bytes, checksum: 6c96857352a7bfbd197d71302dadb4d7 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Vários estudos têm demonstrado que o magnésio desempenha papel importante na homeostase glicêmica. Assim, no presente trabalho foi avaliado o efeito da deficiência de magnésio, da sua duração e da interação entre estes dois fatores na secreção e ação da insulina. Ratos foram alimentados com dieta deficiente em magnésio durante 6 (DF-6) ou 11 (DF-11) semanas e comparados com ratos alimentados com dieta controle durante os mesmos períodos de tempo (CO-6 e CO-11). Os ratos dos grupos DF-6 e DF-lI apresentaram níveis de magnésio sérico mais baixos do que os CO-6 e CO-lI, porém a homeostase glicêmica entre os grupos DF-6, CO-6 e CO-II não foi diferente. Os animais do grupo DF-lI apresentaram maior velocidade de decaimento da glicose (Kg) e redução da área total sob a curva de glicose, quando comparados aos animais dos grupos CO-6, CO11 e DF-6, assim como menor área total sob a curva de insulina quando comparados com os ratos CO-II e DF-6, indicando um aumento da sensibilidade à insulina. Com a finalidade de avaliar o efeito da suplementação de magnésio, ratos alimentados com dieta controle ou com dieta deficiente durante 6 semanas receberam, ao final desse período e durante 5 semanas adicionais, uma dieta suplementada com magnésio (grupos SCO e SDF, respectivamente). No grupo SDF os níveis de magnésio sérico, a velocidade de decaimento da glicose e áreas totais sob as curvas de glicose e insulina, não foram significativamente diferentes daqueles apresentados pelo grupo CO-lI, indicando que a suplementação com magnésio evitou o aumento da sensibilidade à insulina. Não foi verificada diferença na velocidade de decaimento da glicose (Kitt) durante o teste venoso de tolerância à insulina, assim como na sinalização da insulina no músculo e figado dos grupos DF-6 e CO-6. Entre os grupos alimentados durante 11 semanas, o DF-lI apresentou maior velocidade de decaimento da glicose, enquanto que este mesmo parâmetro nos grupos SDF e SCO não se diferenciou dos ratos CO-II. Nenhuma diferença foi observada na sinalização da insulina no músculo dos animais dos grupos CO-11, DF-lI e SDF. No figado de ratos DF-11, o nível protéico e o grau de fosforilação do receptor de insulina e do substrato-I desse receptor apresentaram-se aumentados, assim como verificou-se maior associação entre o substrato-I do receptor e a subunidade p85 do fosfatidilinositol 3-quinase, quando comparados com ratos CO-II. Nenhuma diferença foi encontrada nas etapas iniciais da ação da insulina nos grupos SDF e CO-ll. Estes resultados sugerem que as mudanças nas etapas iniciais da transmissão do sinal insulínico no figado, induzidas por diferentes níveis séricos de magnésio, podem ter um papel fundamental na homeostase glicêmica / Abstract: Numerous studies have demonstrated a major role for magnesium in insulin action and secretion. Therefore, we investigated the effect ofMg deficiency, duration of feeding, and the interaction between these factors on the secretion and action of insulin. Rats fed a Mgdeficient diet for 6 (DF-6) or 11 (DF-lI) weeks, and rats fed a control diet for the same periods (CO-6 and CO-ll groups) were compared. DF-6 and DF-lI rats had serum Mg levels lower than the control groups, but no change in glucose homeostasis was observed among DF-6, CO-6 and CO-II rats. DF-lI rats showed a greater glucose desappearance rate (Kg) and a reduced total area under the glucose curve compared to CO-6, CO-II and DF-6 rats, as well as a reduced total area under the insulin curve compared to the CO-ll and DF-6 rats, indicating increased sensitivity to insulin. In order to evaluate the effect of supplementation, rats fed a control or Mg-deficient diet for 6 weeks were then fed a Mgsupplemented diet for 5 weeks (SCO and SDF groups, respectively). In the SDF rats, the serum Mg levels, glucose disappearance rate and total area under the glucose and insulin curves were restored to control values, indicating that the Mg supplementation prevented the increase in sensitivity to insulin. No differences were found in the glucose desappearance rate during an i. v. insulin tolerance test (Kitt), as well as in the insulin signaling in muscle and liver ITom DF-6 and CO-6. Among the groups of rats fed for 11 weeks, the DF-ll group had a significantly greater glucose desappearance rate while the rate of the SDF and SCO groups did not differ ITom CO-II rats. No differences were observed in muscle insulin signaling of rats ITom the CO-ll, DF-lI and SDF. In DF-ll rats, insulin receptor and insulin receptor substrate-I protein and phosphorylation levels were elevated in liver and there was a greater association between the insulin receptor substrate-I and p85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase compared with CO-II rats. No diferences were found in the early steps of insulin action in SDF and CO-II rats. These results suggest that the changes in the early steps of insulin signal transduction in the liver, induced for different serum Mg levels, may play an important role in the glucose homeostasis / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:59:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_GiseliaAparecidaFreireMaiade_M.pdf: 17345722 bytes, checksum: 065ea40c010cb23a3b118ef433576273 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A fonna solúvel do receptor da transferrina (sTtR) tem sido indicada como um parâmetro útil na avaliação do estado do ferro e da atividade eritropoiética. Reticulócitos imaturos apresentam altas concentrações de receptor da transferrina na sua membrana. Nós testamos a correlação entre sTtR e parâmetros reticulocitários em pacientes com anemia ferropriva (AF) e 13talassemia heterozigota (13 tal hetero). Parâmetros laboratoriais relacionados ao estado do ferro e reticulócitos foram estudados a fim de estabelecer a utilidade clínica dos mesmos na distinção entre os dois tipos de anemia. As medidas dos reticulócitos foram obtidas utilizando contador hematológico semi-automatizado e as concentrações de sTtR foram detenninadas por técnica imunoenzimática. Cinquenta pacientes com AF e quarenta e um com 13tal hetero foram estudados. A contagem de reticulócitos foi significativamente mais elevada na 13tal hetero quando comparada à AF e ao grupo controle. Por outro lado, os valores de sTtR apresentaram-se significativamente maiores na AF do que na 13tal hetero. O melhor parâmetro para distinguir os dois tipos de anemia foi o sTtRI, obtido pela relação entre os níveis de sTtR e ferritina sérica. O compartimento de transporte foi melhor avaliado pela transferrina do que pela capacidade de ligação do ferro à transferrina (TIBC). A associação das medidas de ferro sérico e transferrina (índice de transferrina) melhorou a acurácia do teste de transferrina. A correlação entre reticulócitos altamente imaturos e nível de sTtR foi observado somente no grupo AF, sugerindo que a deprivação de ferro celular é o principal fator responsável pela estimulação da síntese de sTtR em células vennelhas imaturas. Valores elevados de.sTtR em pacientes 13 tal hetero refletem a presença de eritropoiese inefetiva nesta hemoglobinopatia. Nós concluímos que as determinações de sTfR, ferritina e transferrina são parâmetros úteis e precisos na discriminação entre pacientes com AF e 'beta' tal hetero / Abstract: The soluble fonn of transferrin receptor (sTfR) has been pointed as an useful parameter to assess the iron status and erythropoiesis activity. Immature reticulocytes present high sTfR concentration. We tested the correlation between sTfR and reticulocyte parameters in iron deficiency anemia (IDA) and P thalassemia heterozygous (P thal hetero) patients. Laboratorial parameters related to iron status and reticulocytes were studied in order to establish the clinical use of them to distinguish both anemias. Reticulocyte measurements were obtained using a semi-automated analyzer and serum concentration of sTfR was determined by an immonoenzymatic technique. Fifty IDA and 41 Pthal hetero patients were studied. Reticulocyte count was significantly higher in p thal hetero group than in IDA and control groups. On the other hand, sTfR analysis showed increased values in IDA patients, when compared to pthal hetero group. The better parameter to distinguish both anemias was sTfR index, obtained by the ratio sTtR/ferritin leveI. Transport compartment was better evaluated by serum transferrin measurement than transferrin iron binding capacity (TIBC) detenninations. The association of serum iron with transferrin measurements (transferrin index) improved the accuracy of the transferrin test. The correlation between high immature reticulocytes and sTfR leveI was observed only in IDA group, suggesting that cellular iron deprivation is the main responsible factor for the sTfR synthesis stimulation in immature red blood cells. High sTfR values in p thal hetero patients reflect a degree of ineffective erythropoiesis in this hemoglobinopathy. We concluded that sTfR, ferritin and transferrin measurements are useful and precise parameters to discriminate IDA from 'beta' thal hetero patients / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Debora de Queiroz Tavares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T12:52:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_MariaCristinaJesus_D.pdf: 20850800 bytes, checksum: 04dfad436dcae593fa8ce6e0c6a48f55 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Todo amido ingerido não é sempre digerido e absorvido pelo intestino delgado. Uma parte do amido de certos alimentos resiste a digestão enzimática no intestino delgado e ao atingir o intestino grosso é hidrolisado parcialmente pela microflora. Nesta circunstância será denominado amido resistente (AR). O AR é encontrado em alimentos cozidos, resmados e processados, mas ocorre também in natura em batata crua e banana verde e outras fontes naturais. O fruto verde é rico em AR nativo. No presente estudo foram extraídos os amidos de duas espécies de banana (Musa AAA -Nanicão e Musa AAB - Terra) com rendimento total de 5 e 8%, respectivamente. Os grânulos de amido de ambas as bananas demonstraram-se química e morfologicamente semelhantes apresentando elevada resistência à a-amilase pancreática in vtro 84,61 e 84,81%para Musa AAA - Nanicão e Musa AAB - Terra, respectivamente. Os grânulos são ovalados e polimorfos de comprimento entre 30-40 J.lmpara Musa AAA - Nanicão e 20-40 J.lmpara Musa AAB - Terra, predominando formas ovais, alongadas e superfície lisa. Sob ação da a-amilase pancreática apresentaram corrosão apical e estrias equatoriais. O amido de Musa AAA - Nanicão foi caracterizado pela difração de raio-X em tipo B. O amido de Musa AAB - Terra teve difração de tipo C e apresentou melhor estabilidade de pasta no perfil amilográfico. O trabalho foi dividido em duas etapas: a primeira avaliou o efeito no trato intestinal de ratos alimentados com dietas contendo, na fração de amido que compõe a dieta, concentrações crescentes (O,7, 14 e 28%) de AR de bananas verdes (Musa AAA - Nanicão e Musa AAB - Terra) durante 10dias; a segunda etapa consistiu de dietas com 32% de AR de bananas verdespara avaliaro efeito no metabolismo lipídico e glicídico e na microbiota do cécum de ratos durante15 dias ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: Not alI ingested starch is digested and absorbed by the smalI intestine. Part of the starch from some kinds of food resists enzymatic digestion, and reaches the large intestine where it is partialIy hydrolysed by the microflora. This kind of starch is known as resistant starch (RS). Resistant starch is found in cooked, colded and processed foods, although it is naturalIy found in raw potatoes and green bananas and other natural sources. In this study starch was extracted from two species ofbananas (Musa AAA -Nanicão and Musa AAB - Terra) with total yields of 5 and 8%, respectively. The starch granules from both kinds of banana were chemicalIy and morphologicalIy alike and showed great resistance to pancreatic a-amylase in vitro, 84.61 and 84.81% for Musa AAA - Nanicão and Musa AAB - Terra, respectively. The granules are polymorphic with a length of between 30-40 IJ.mfor Musa AAA - Nanicão and between 20-40 IJ.mfor Musa AAB - Terra, with oval and elongated shapes with a smooth surface predominating. The action of pancreatic a-amylase resulted in apical corrosion and equatorial grooves. The starch from Musa AAA - Nanicão was characterized as type B by X-ray diffraction and that from Musa AAB - Terra as type C, the latter presenting a better paste stability in the amilographic profile. The research was divided into two stages: in the first, the effect on the intestinal tract of rats fed on diets with increasing concentrations (O, 7, 14 and 28% of the total starch content) of RS from green bananas (Musa AAA - Nanicão and Musa AAB - Terra) for 10 days was analyzed; in the second, the effects of feeding rats on diets with 32% of RS from green bananas on the lipidic and glycidic metabolism of the rats and also on the microbiotic content of the cecum was analyzed during 15 days ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador: Ricardo Antunes Azevedo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T15:50:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gaziola_SaleteAparecida_D.pdf: 4051671 bytes, checksum: 69f5c5ae7cb94c0486211b621052970f (MD5) Previous issue date: 1999 / Doutorado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador : Ladaslav Sodek / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:52:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amarante_Lucianodo_D.pdf: 6847848 bytes, checksum: 6fae28c31334396bbd398e6813a4350e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Plantas de soja noduladas fixando plenamente o N2, cultivadas na ausência de N-combinado, contêm níveis relativamente altos de GLN como forma de transporte de N no xilema (cerca de 20-25 em mol % do total de aminoácidos) comparadas a plantas não noduladas nutridas com NO3- (cerca de 1-2 em mol % do total de aminoácidos). Experimentos que levaram à redução da fixação de N2, avaliados pela redução do teor de URE na seiva do xilema, como a aplicação de NO3 -, transferência das plantas para sistema hidropônico com aeração, inundação do sistema radicular, substituição do ar da rizosfera com N2 ou mistura argônio:oxigênio (80:20), conduziram a uma redução severa e específica dos níveis de GLN. A remoção manual dos nódulos do sistema radicular produziu o mesmo efeito. Além disso, durante o crescimento das plantas foi observado um aumento substancial dos níveis de GLN correspondentes à fase de formação dos nódulos e o início da fixação plena de N2 em soja, em paralelo ao aumento de ureídeos e atividade da GS. Aumentos concomitantes dos níveis de GLN e de URE também foram observados quando plantas noduladas de soja, cultivadas em vermiculita sem N e transferidas para hidroponia, na presença ou ausência de N, ou inundadas, foram replantadas em vermiculita ou tiveram a inundação suprimida através da drenagem. A NADH-GOGAT nos nódulos parece ter uma relação direta com níveis de GLN transportados no xilema, partindo da observação da queda e posterior elevação da atividade da enzima em paralelo aos níveis de GLN nos tratamentos de hidroponia na presença e ausência de NO3 ¿ e posterior replantio em vermiculita sem N, respectivamente. As mudanças de atividade da GS em nódulos foram muito menos pronunciadas, sugerindo elevada estabilidade da enzima sob os tratamentos com hidroponia. A composição nitrogenada da seiva do xilema das plantas inundadas de soja mostrou uma queda considerável dos níveis de GLN, 10 minutos após início do tratamento, alcançando valores muito baixos dentro de 30 min. Uma inibição concomitante do teor de URE foi obtida nesses tratamentos. Apesar da evidência de que a atividade dos nódulos esteja relacionada às flutuações dos níveis de GLN, foram encontrados teores mínimos desse aminoácido nos nódulos, não sofrendo variações detectáveis com a aplicação dos tratamentos. As reduções de GLN no xilema também não mostraram uma correspondência com os níveis de GLN do floema, raízes e folhas. Os tratamentos inibitórios à fixação de N2 como a aplicação de NO3 - e inundação também causaram uma redução dos níveis de GLN em espécies de leguminosas exportadoras de amidas e em ambos os teores de GLN e de URE em outras espécies de leguminosas que exportam preferencialmente URE, sugerindo ser este um efeito comum em leguminosas que transportam GLN. Coletivamente, as mudanças da composição aminoacídica do xilema frente aos diferentes tratamentos utilizados indicam que o nível de GLN transportado no xilema está fortemente associado com a atividade dos nódulos / Abstract: Nodulated soybean plants, fully dependent on N2 fixation, cultivated with N deficient nutrient solution, contain relatively high levels of GLN in N transport of the xylem (around 20-25 mol % of total amino acids) compared to non-nodulated plants grown on nitrate (around 1-2 mol % of total amino acids). Experiments that lead to reduced N2 fixation, judged by xylem sap ureide levels, such as NO3 - application, transfer of plants to aerated hydroponic culture, waterlogging of the root system, substitution of air in the rhizosphere with nitrogen or a mixture of argon:oxygen (80:20), lead to severe and specific reduced GLN levels. Manual removal of the nodules from the root system produced the same effect. Furthermore, during the growth cycle of the plants, a substantial increase in GLN levels was observed corresponding to the phase of nodule formation and beggining of N2 fixation, in parallel with increases in ureide levels and GS activity. Concomitant increases in GLN and ureide levels were observed, when nodulated soybean plants cultivated in vermiculite without N and transfered to hydroponic culture with or without N or waterlogging, were returned to vermiculite or the waterlogging treatment was suppressed by drainage. In nodules, NADH-GOGAT activity seems to be directly correlated with GLN levels transported in the xylem, judging by the decline and posterior elevation of enzyme activity in parallel with GLN levels in the hydroponic treatments with or without N and when plants were returned to vermiculite without N, respectively. Changes in GS activity in nodules were much less pronounced suggesting high enzyme stability under hydroponic treatment. The xylem sap nitrogen composition of waterlogged plants showed a considerable fall in glutamine levels, ten minutes after the treatment had initiated, reaching very low levels within 30 minutes. A concomitant inhibition in ureide contents was observed. Despite the evidence that nodule activity underlies the flutuations of GLN levels in the xylem, very low levels in the nodule were found, which suffered no detectable variation after the treatments applied. Decreases in xylem GLN were not associated with GLN levels in phloem, roots or leaves. Inhibitory effects on nitrogen fixation such as NO3 - application and waterlogging caused a reduction in GLN in amide exporting legumes and in both GLN and ureide levels in other URE exporting legume species, suggesting a common effect in GLN exporting legumes. Collectively, changes in amino acid xylem composition under the several treatments tested indicated that GLN levels transported in xylem are largely associated with nodule activity / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Elza Olga Ana Muscelli Berardi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_JulianoAlves_D.pdf: 1010719 bytes, checksum: bb151ccbc53c64f8ced5c4ffad35c299 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A obesidade é uma doença com alta prevalência nos países ocidentalizados e, do ponto de vista metabólico, é caracterizada por resistência a várias ações da insulina e hiperinsulinemia. A hiperinsulinemia em obesos parece relacionada à hipersecreção hormonal compensatória à reduzida ação insulínica.A significativa redução de peso observada em pacientes submetidos à cirurgia bariátrica permite avaliar o impacto do emagrecimento, em várias alterações patológicas encontradas em pacientes obesos. Os mecanismos, o grau de emagrecimento necessário e quais das alterações se modificam não estão totalmente esclarecidos. Treze pacientes obesos classe III, 4 homens e 9 mulheres, IMC = 56,3 ± 2,7 kg.m-2 foram estudados antes, durante e após a estabilização do peso e os resultados foram comparados a um grupo de indivíduos controle com peso normal (5M/8F; IMC = 22,4 ± 0,5 kg.m-2). IMC final dos obesos - 34.7 ± 2.1 kg/m2 . Após um primeiro estudo metabólico, os obesos foram submetidos à gastroplastia vertical com bandagem e derivação gastrojejunal (técnica de Capella). Foram reavaliados depois do emagrecimento em torno de 20% do peso inicial e depois de estabilização do peso corporal (~-40%). A composição corporal avaliada por impedância bioelétrica melhorou, verificando-se uma redução maior de massa magra que de massa adiposa. Os pacientes obesos apresentaram níveis plasmáticos altos de insulina em jejum (6 vezes maior que a do grupo controle) e durante o teste de tolerância oral à glicose. Após o emagrecimento, a concentração de insulina em jejum foi semelhante à encontrada no grupo de indivíduos magros. A hiperinsulinemia era decorrente de hipersecreção, uma vez que, os níveis de peptídeo C circulantes também eram altos e o clearance de insulina, avaliado durante clamp euglicêmico hiperinsulinêmico, discretamente aumentado, comparado ao dos magros. A sensibilidade à insulina foi avaliada através do clamp euglicêmico hiperinsulinêmico (infusão de insulina ¿ 40 mU/m2.min). Antes da cirurgia, era reduzida em obesos (M ¿ obesos = 19.7 ± 1.5 vs. magros = 51.5 ± 2.4 umol/min.kg MM; p<0.001) e aumentou significativamente após o final da fase de emagrecimento (35,5 ± 3,7 umol/min.kg MM; p<0.05 vs. pré-cirurgia), mas ainda foi menor que aquela medida no grupo de indivíduos magros (p<0.0001). O uso associado da calorimetria indireta permitiu verificar que tanto a via oxidativa quanto a não oxidativa foram pouco estimuladas pela infusão de insulina nos obesos. Depois do emagrecimento, apenas a resposta da via não oxidativa melhorou de maneira significativa, atingindo valores semelhantes aos observados no grupo controle. A oxidação protéica era menor que a dos magros e aumentou de forma similar durante o clamp. A oxidação lipídica em jejum, ao contrário, era maior nos obesos comparados aos magros e não foi inibida pela insulina no clamp realizado antes da cirurgia. Depois do emagrecimento, permaneceu alta em jejum e foi inibida discretamente durante o clamp. Estas repostas foram significativamente diferentes das observadas nos magros. No grupo controle, ocorreu uma inibição da secreção endógena de insulina, atribuída à própria insulina e avaliada pelos níveis plasmáticos de peptídeo-C. Esta auto-inibição da insulina estava diminuída nos obesos e foi totalmente recuperada após o emagrecimento. Em conclusão, este estudo permitiu confirmar várias alterações metabólicas relacionadas à secreção ou à ação da insulina em obesos. Além disto, demonstrou a falta da auto-inibição da secreção de insulina e sua recuperação pelo emagrecimento rápido e importante após cirurgia bariátrica. Demonstrou ainda, que a via metabólica que melhor respondeu ao emagrecimento foi a não oxidativa da glicose. Os efeitos do emagrecimento na sensibilidade à insulina e na secreção de insulina foram desproporcionais e ocorreram em tempos distintos da evolução pós-cirúrgica / Abstract: Obesity has a high prevalence and an increasing incidence, being considered epidemic. It is characterized by hyperinsulinemia and insulin resistance, important early metabolic changes in the obese patient. The first has been reported as an independent cardiovascular risk factor. The mechanisms underlying hyperinsulinemia are not clear and it has been associated to a compensatory beta cell mechanism for insulin resistance. The pos-hepatic insulin delivery rate is a result of the rate of insulin secretion and of its metabolic clearance rate. The main sites of insulin resistance in the obese patient are the liver and the muscle. Both insulin action pathways, oxidative and non oxidative glucose utilization - NOGD, seem to be affected. These metabolic changes are more frequent in class III obese patients, responsible, in part, for the high mortality. Weight reduction improves metabolic and cardiovascular parameters, although it is not clear which amount of weight loss is necessary, neither which insulin effects are modified by this procedure. Bariatric surgery has been report as an efficient tool for the weight, reduction and maintain. A group of 13 class III obese patients (4M/9F; BMI=56.3±2.7 kg.m-2) and 13 lean subjects (5M/8F; BMI=22.4±0.5 kg.m-2) were submitted to a metabolic evaluation including euglycemic hyperinsulinemic clamp, oral glucose tolerance test (OGTT) and indirect calorimetry. The obese patients were submitted to a bariatric surgery (Capella¿s technique) and the metabolic studies repeated after ~ 20 % of weight loss relative to their initial body weight (study II) and after weight stabilization (study III ¿ BMI=34.7±02.1 kg.m-2). Insulin secretion during fasting state and under insulin infusion during the euglycemic clamp was assessed using the C-peptide plasma measurements. It was higher in the obese in the first study (6 folders than control) and the decrease, after weight loss, was statistically significant even in the second study, with further reduction in the third study. The hyperinsulinemia was a result of insulin hyper-secretion since pos-hepatic metabolic clearance rate during the clamp was similar to that of the control group and did not change after weight loss. The insulin sensitivity was significantly impaired in the obese (study I: 19.7 ? 1.5 vs. 51.5 ? 2.4 umol/min.kgFFM; p< 0.0001) and it increased significantly after weight loss (35.5 ? 3.7 umol/min.kgFFM; p< 0.05 vs. CT and study I), but it was still lower than that of lean group (p<0.0001). The insulin stimulated glucose oxidation was lower in the obese group compared to lean and improved slightly after weight loss but it was still lower than that of the former group. The non oxidative glucose disposal was reduced in the obese group and after weight loss it improved significantly reaching levels similar to those of the lean group. Fasting protein oxidation and suppression of protein oxidation by insulin infusion were similar between lean and obese and they were not influenced significantly after weight reduction. The higher fasting lipid oxidation in obese did not change by weight reduction. The insulin infusion did not suppress the lipid oxidation in the first study, but after weight reduction a slight suppression, similar to that of the control group was observed. Insulin infusion under euglycemic conditions at steady state inhibited its own secretion in lean subjects but this insulin action was blunted in the obese group. After weight loss, inhibition of its own secretion was completely reversed to values very similar to those observed in lean controls (about 40% relative to fasting values). In summary, the rapid weight loss in obese class III, after surgery, induced a normalization of the insulin secretion and only an improvement of the insulin sensitivity, almost entirely dependent of glucose storage. The high lipid oxidation did not change with weight loss. The changes in insulin secretion and sensitivity induced by weight loss displayed different degrees and time courses / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador : Nelson E. Duran Caballero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:39:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_JulianoSouza_M.pdf: 3174279 bytes, checksum: 2cc9319f05aa72b5f4ab3d2f02b5efa6 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado