Orientadores: Jose Francisco Hofling, Marta Cristina Teixeira Duarte / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T08:53:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Furletti_VivianFernandes_M.pdf: 1126113 bytes, checksum: d4a24df57fea2a22c72726fc7f3e1ea6 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A suscetibilidade a antifúngicos foi avaliada para espécies de Candida spp isoladas de três diferentes sítios da cavidade oral de 19 pacientes com doença periodontal, a saber: bolsa periodontal, mucosa bucal e sulco gengival. Um total de 140 amostras de leveduras foram isoladas e identificadas por métodos comumente utilizados em Micologia. Destas, 105 foram identificadas como C. albicans, 16 como C. tropicalis, 5 como C. parapsilosis, 4 como C. krusei, 3 como C. famata, 3 como C. norvegensis, 3 como C. dubliniensis e 1 como C. lusitaniae. As leveduras foram testadas frente aos antifúngicos fluconazol, itraconazol, cetoconazol e anfotericina B de acordo com a padronização do NCCLS. Dentre as amostras de C. albicans, 88% apresentaram susceptibilidade dependente da concentração (SDC) e 3,6% resistência à pelo menos um antifúngico azólico. Entre as outras espécies, 57% apresentaram SDC e 42,8% resistência a pelo menos um dos azólicos testados. Quanto a anfotericina B, 90% das C. albicans e 74,3% das não-albicans foram resistentes a este antifúngico. Não houve ocorrência de resistência para o fluconazol e apenas 3,6% das C. albicans e 40% das ¿não-albicans¿ foram SDC para este antifúngico. Os valores da Concentração Inibitória Mínima CIM50 e CIM90 dos antifúngicos azólicos para as amostras de C. albicans foram inferiores aos encontrados para as demais espécies. Para a anfotericina B, os valores de CIM50 e CIM90 não foram diferentes entre C. albicans e demais espécies. Apesar do baixo índice de resistência, foi observada elevada ocorrência de SDC para itraconazol e cetoconazol. Foi possível concluir que pacientes com doença periodontal apresentaram níveis de colonização por Candida spp relevantes, principalmente na mucosa bucal e bolsa periodontal, com uma importante ocorrência de SDC e resistência aos antifúngicos testados, o que está de acordo com dados recentes sobre a diminuição da sensibilidade a antifúngicos entre espécies de Candida / Abstract: The susceptibility to antifungal was evaluated for Candida spp isolated from three different sites of the oral cavity from 19 patients with periodontal illness, known as: periodontal pocket, oral mucosa and ridge gengival. A total of 140 yeasts were isolated and identified by classical methods in Micology. From this, 105 were identified as C. albicans, 16 as C. tropicales, 5 as C. parapsilosis, 4 as C. Krusei, 3 as C. famata, 3 as C.norvegensis, 3 as C.dubliensis and 1 as C. lusitaniae. The antifungal Fluconozole, Itraconazole, Ketoconazole and Anfotericin B were tested against the yeasts according to the NCCLS padronization. Among the samples of C. albicans, 88% showed susceptibility depending on the concentration (SCD) and 3,6% were resistant to at least one antifungal azoles studied. Among other species, 57% presented SDC and 42,8% showed resistance to at least one of the antifungal azoles tested. Regarding to Anfotericin B, 90% of the C. albicans isolates and 3% of the ¿non- albicans¿ showed resistance to this antifungal drug. There was no occurrence of resistance to the Fluconozale and only 3,6% of C. albicans and 40% of the ¿non-albicans¿ were SDC to this antifungal. The values of Minimum Inhibitory Concentration (MIC50 and MIC90) of the antifungal azoles to the samples of C. albicans were inferior to the ones found in the other species. For the Anfoterecin B, the values of MIC50 and MIC90 were not different among C. albicans and the other species. Besides the low percentage indice of resistance, it was observed high occurrence of SDC to Itraconazole and Cetoconazole. Patients with periondontal illness presented relevant levels of colonization by Candida spp, mainly at the oral mucosa and periodontal pocket showing important occurrence of SDC and resistance against the antifungals drugs tested according to the recent literature data about the decrease of sensibility to antifungals among Candida species / Mestrado / Microbiologia e Imunologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Historicamente, as bactÃrias foram vistas como organismos que vivem isolados, no entanto, à claro, agora, que a grande maioria de bactÃrias existe em comunidades complexas, conhecidas como biofilmes. As bactÃrias em biofilmes se encontram aderidas a superfÃcies diversas, tanto abiÃticas como biÃticas (dente, osso, mucosa), compondo um ecossistema altamente estruturado, dinÃmico e organizado. Um exemplo de infecÃÃo que pode envolver a presenÃa formaÃÃo de biofilme à a otite - definida como inflamaÃÃo aguda ou crÃnica da orelha, podendo se estender desde o epitÃlio do conduto auditivo externo atà a orelha interna. Descrita como a doenÃa mais comum do canal auditivo externo em cÃes, possui uma etiologia multifatorial, que inclui fungos e bactÃrias, principalmente do gÃnero Staphylococcus. BactÃrias desse gÃnero sÃo comensais de pele e mucosas, mas podem atuar como patÃgenos oportunistas em condiÃÃes propÃcias e sÃo frequentemente associadas a uma ampla variedade de infecÃÃes em seres humanos e animais com vÃrios relatos de refratariedade aos tratamentos usuais. Em um biofilme, as bactÃrias podem ser dezenas de vezes mais resistentes aos antibiÃticos, quando comparadas Ãs mesmas bactÃrias em crescimento planctÃnico. O combate a infecÃÃes envolvendo bactÃrias em biofilme à um grande desafio da microbiologia mundial, que leva à busca de novas opÃÃes terapÃuticas. Com efeito, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito inibitÃrio in vitro de seis substÃncias â trÃs agentes antimicrobianos clÃssicos, ciprofloxacina, cloranfenicol, gentamicina; e trÃs agentes antimicrobianos nÃo-clÃssicos timol, carvacrol, perÃxido de hidrogÃnio (H2O2) â contra cepas estafilocÃcicas de otite canina em crescimento planctÃnico e em biofilme. Foram avaliadas 54 cepas clÃnicas isoladas de secreÃÃo purulenta de cÃes com otite, divididas entre cinco espÃcies: S. intermedius, S. simulans, S. haemolyticus, S. epidermidis e S. lugdunensis. As 16 cepas classificadas como produtoras de biofilme (11 de S. intermedius e cinco de S. simulans), segundo resultado obtido pelo teste do Ãgar vermelho Congo e confirmaÃÃo por microscopia eletrÃnica de varredura (MEV), foram usadas em ensaios de microdiluiÃÃo em caldo para determinaÃÃo de concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) e concentraÃÃo inibitÃria mÃnima em biofilme (CIMB). Com relaÃÃo Ãs cepas produtoras de biofilme, foram observados os seguintes resultados: os valores para ciprofloxacina foram 0,12 ≤CIM≤0,5 mcg/mL (mÃdia 0,28 mcg/mL) e 0,5≤CIMB≤8 mcg/mL (mÃdia 1,79 mcg/mL); para cloranfenicol 2≤CIM≤16 mcg/mL (mÃdia 7,41 mcg/mL) e 8≤CIMB≤32 mcg/mL (mÃdia 20,71 mcg/mL); para gentamicina 0,5≤CIM≤4 mcg/mL (mÃdia 2,09 mcg/mL) e 4≤CIMB≤64 mcg/mL (mÃdia 24,24 mcg/mL); para timol 32≤CIM≤512 mcg/mL (mÃdia 137,41 mcg/mL) e 256≤CIMB≤2048 mcg/mL (mÃdia 768 mcg/mL); carvacrol 32≤CIM≤512 mcg/mL (mÃdia 128 mcg/mL) e 256≤CIMB≤4096 mcg/mL (mÃdia 993,88 mcg/mL); e para H2O2 32≤CIM≤128 ppm (mÃdia 99,76 ppm) e 128≤CIMB≤4096 ppm (mÃdia 1874,82 ppm). Os dados obtidos apontam para o potencial terapÃutico dos seis antibiÃticos estudados no tratamento de infecÃÃes estafilocÃcicas associadas a biofilme, sendo necessÃrios novos estudos para investigar os mecanismos de aÃÃo dessas drogas sobre o biofilme, bem como o delineamento de experimentos in vivo para confirmar a significÃncia desses achados. / Historically, bacteria have been seen as isolated organisms; however, it is now clear that the vast majority of bacteria exist in complex communities known as biofilms. Bacteria in biofilms are adhered to various surfaces, both abiotic and biotic (teeth, bones, mucosa), often forming a highly dynamic ecosystem, which is structured and organized. An example of infection, which can involve the formation of biofilm is otitis - defined as an acute or chronic inflammation of the ear, which may extend from the external ear canal to the inner ear. Described as the most common disease of the external ear canal in dogs, it has a multifactorial etiology, including fungi and bacteria, especially of the genus Staphylococcus. Bacteria of this genus are commensal to skin and mucous membranes, but can act as opportunistic pathogens in favorable conditions and are often associated with a wide variety of infections in humans and animals with many reports of refractoriness to usual treatments. In biofilm, bacteria can be ten to a hundred times more resistant to antibiotics when compared to the same bacteria in planktonic growth. The struggle to fight infections involving bacterial biofilms is a major challenge of microbiology today, which, in turn, leads to the search for new therapeutic options. Thus, this study aimed to evaluate the in vitro inhibitory effect of six substances â three classic antimicrobial agents ciprofloxacin, chloramphenicol, gentamicin; and three non-classic antimicrobial agents thymol, carvacrol, hydrogen peroxide (H2O2) - against staphylococcal strains from canine otitis in planktonic growth and in biofilm. We analyzed 54 clinical strains isolated from purulent secretion of canine otitis, divided into five species: S. intermedius, S. simulans, S. haemolyticus, S.epidermidis and S. lugdunensis. The 16 strains classified as biofilm producers (11 S. intermedius and five S. simulans), according to result obtained by the Congo red agar test and confirmed by scanning electron microscopy (SEM), were used in broth microdilution assay for determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum biofilm inhibitory concentration (MBIC). With regards to the biofilm-producing strains, the following results were observed: the values for ciprofloxacin were 0,12 ≤MIC≤0,5 mcg/mL (mean 0,28 mcg/mL) and 0,5≤MBIC≤8 mcg/mL (mean 1,79 mcg/mL); for chloramphenicol 2≤MIC≤16 mcg/mL (mean 7,41 mcg/mL) and 8≤MBIC≤32 mcg/mL (mean 20,71 mcg/mL); for gentamicin 0,5≤MIC≤4 mcg/mL (mean 2,09 mcg/mL) and 4≤MBIC≤64 mcg/mL (mean 24,24 mcg/mL); for thymol 32≤MIC≤512 mcg/mL (mean 137,41 mcg/mL) and 256≤MBIC≤2048 mcg/mL (mean 768 mcg/mL); carvacrol 32≤MIC≤512 mcg/mL (mean 128 mcg/mL) and 256≤MBIC≤4096 mcg/mL (mean 993,88 mcg/mL); and for H2O2 for 32≤MIC≤128 mcg/mL (mean 99,76 ppm) and 128≤MBIC≤4096 ppm (mean 1874,82 ppm). The presented data indicates the therapeutic potential of the six antibiotics studied in the treatment of staphylococcal infections associated with biofilm, which warrants further studies to investigate the mechanisms of action of these drugs on biofilms and the design of in vivo experiments to confirm the significance of these findings.