O guajiru (Chrysobalanus icaco L.) é um fruto rico em antocianinas, as quais exercem vários efeitos benéficos à saúde. Embora as folhas do guajiru sejam utilizadas na medicina popular como hipoglicemiante e antioxidante, os efeitos do fruto na saúde permanecem inexplorados. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do fruto do guajiruzeiro sobre danos ao DNA e estresse oxidativo in vivo e inflamação in vitro e in vivo. Ratos machos Wistar (4-5 semanas, 110 g) foram divididos em oito grupos e tratados por 14 dias com água ou fruto do guajiruzeiro liofilizado (100, 200 ou 400 mg/kg p.c.) por gavagem. No 14º dia, os animais receberam solução fisiológica ou DXR (15 mg/kg p.c. i.p.) e foram eutanasiados após 24 horas. A genotoxicidade e antigenotoxicidade foram avaliadas pelo ensaio do cometa em sangue periférico, fígado, rins e coração. A mutagenicidade e antimutagenicidade foram investigadas pelo teste do micronúcleo em medula óssea e sangue periférico. O burst oxidativo foi avaliado em neutrófilos do sangue periférico. Parâmetros de estresse oxidativo envolveram: concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, razão glutationa reduzida e oxidada e atividade da catalase em fígado, rins e coração. As expressões de genes de dano/reparo de DNA Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1) e Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) e dos marcadores pró-inflamatórios Il-1? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B) e Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) foram realizadas por PCR quantitativo em tempo real. Células de cólon humano CCD-18Co (fibroblastos) e HT-29 (adenocarcinoma) foram tratadas com antocianinas do guajiru (1,0 a 20,0 mg/L equivalentes de ácido gálico - GAE) e as expressões de IL-1?, IL-6, NF-kB e TNF-? analizadas a nível de RNA mensageiro e proteína. TNF-? foi utilizado para induzir inflamação em células CCD- 18Co. Os polifenois do fruto do guajiruzeiro foram quantificados/caracterizados por métodos cromatográficos e espectrométricos. As concentrações de 19 elementos químicos foram determinadas por plasma indutivamente acoplado a espectrometria de massas. Delfinidina, cianidina, petunidina e peonidina foram as antocianinas majoritárias encontradas no fruto. Concentrações significantes de polifenois, magnésio e selênio foram encontradas nesse fruto. O fruto do guajiruzeiro exibiu atividade antioxidante in vivo em neutrófilos, antigenotoxicidade em sangue periférico e antimutagenicidade em sangue periférico e medula óssea. O guajiru diminuiu os danos ao DNA no fígado, rins e coração. O fruto também diminuiu as expressões de Gadd45a, Il-1?, e Tnf-? nos tecidos. A proliferação celular foi suprimida em células HT-29, acompanhado por aumento na produção de ROS e diminuição nas expressões de TNF-?, IL-1?, IL-6 e NF-kB. Não foi observado efeito citotóxico das antocianinas em células CCD-18Co. As expressões das proteínas IL- 1?, IL-6 e TNF-? foram reduzidas em células CCD-18Co tratadas com TNF-? e com as antocianinas. Os resultados deste trabalho demonstram que os fitoquímicos e elementos químicos no fruto do guajiruzeiro possuem efeitos antigenotóxico, antimutagênico, antioxidante e anti-inflamatório e encorajam a realização de outros ensaios in vivo e estudos clínicos com esse fruto subutilizado. / Guajiru (Chrysobalanus icaco L.) is a fruit rich in anthocyanins, which exert several beneficial effects on health. Although guajiru leaves are used in folk medicine as hypoglycemic and antioxidant, the fruit effects on health remain unknown. The aim of this study was to evaluate the effects of guajiru fruit against in vivo DNA damage and oxidative stress and in vivo/in vitro inflammation. Male Wistar rats (4-5 weeks old, 110 g) were divided into eight groups and treated for 14 days with water or lyophilized guajiru fruit (100, 200 or 400 mg/kg b.w.) by gavage. On the 14th day, animals received physiologic solution or DXR (15 mg/kg b.w. i.p.) and were euthanized after 24 hours. Genotoxicity and antigenotoxicity were evaluated by comet assay in peripheral blood, liver, kidney, and heart. Mutagenicity and antimutagenicity of guajiru fruit were investigated by micronucleus test in peripheral blood and bone marrow. The oxidative burst was measured in peripheral blood neutrophils. Oxidative stress parameters involved the concentration of thiobarbituric acid reactive substances, reduced/oxidized glutathione ratio, and catalase activity in liver, kidney and heart. The expressions of DNA damage/repair genes Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1), and Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) and pro-inflammatory markers Il-1 ? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B), and Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) were evaluated by real-time quantitative PCR. Human colon cell lines CCD- 18Co (fibroblasts), and HT-29 (adenocarcinoma) were treated with guajiru anthocyanins (1.0 - 20.0 mg/L gallic acid equivalents - GAE) and the expressions of IL-1 ?, IL-6, NF-kB and TNF-? were analyzed at mRNA and protein levels. TNF-? was used to induce inflammation in CCD-18Co cells. Guajiru fruit phytochemicals were quantified and characterized by chromatographic and spectrometric methods. The concentrations of 19 chemical elements were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Delphinidin, cyanidin, petunidin and peonidin were the major anthocyanins in this fruit. Significant amounts of phytochemicals, magnesium, and selenium were found in this fruit. Guajiru fruit displayed in vivo antioxidant activity in neutrophils, antigenotoxicity in peripheral blood and antimutagenicity in bone marrow and peripheral blood. Guajiru fruit decreased DNA damage in liver, kidney, and heart. This fruit decreased the expression of Gadd45a, Il-1 ?, and Tnf-?, in tissues. Cell proliferation was suppressed in HT-29 cells, and this was accompanied by increased intracellular ROS production as well as decreased TNF-?, IL-1 ?, IL-6, and NF-kB expressions. There was no cytotoxic effect of guajiru fruit anthocyanins in CCD-18Co cells. IL-1 ?, IL-6, and TNF-? protein expressions were reduced in TNF-?-treated CCD-18Co cells by guajiru fruit anthocyanins. The findings from this investigation demonstrated that phytochemicals and chemical elements in guajiru fruit possess antigenotoxic, antimutagenic, antioxidant and antiinflammatory effects and encourage other in vivo and clinical studies with this underutilized fruit.

A crescente incidência da obesidade e suas comorbidades constituem-se em um grande desafio para a saúde no mundo. Além da doença cardiovascular e do diabetes, dados epidemiológicos demonstraram ligação entre a obesidade e diversos tipos de câncer. As alterações citogenéticas tem sido utilizadas como biomarcadores para identificação de danos celulares. Este estudo teve como objetivos: comparar a frequência dos tipos celulares (células basais e diferenciadas), anormalidades nucleares (células binucleadas, picnóticas, cariorréticas, cariolíticas e com cromatina condensada) e de danos celulares (micronúcleos e brotos nucleares) de células bucais esfoliadas em um grupo de obesos (teste) e em um grupo de indivíduos com peso normal (controle). A amostra foi composta por 30 indivíduos, sendo o grupo teste constituído por indivíduos obesos mórbidos (n=15) e o grupo controle por indivíduos com peso normal (n=15). A classificação do peso corporal foi feita de acordo com o Índice de Massa Corporal (IMC); um questionário forneceu informações sobre exposições ocupacionais e não ocupacionais; hábitos e dieta. As células da mucosa bucal foram coletadas da mucosa jugal, de ambos os lados, processadas e analisadas microscopicamente. Para cada indivíduo foram avaliadas 1000 células para a caracterização dos tipos celulares (basal e diferenciada) e alterações nucleares (células binucleadas, picnose, cariólise, cariorrexe, cromatina condensada) e 2000 células diferenciadas para verificar a presença de danos celulares (micronúcleos e brotos nucleares). Os dados foram processados e analisados estatisticamente, por meio do teste de Mann Whitney. Considerou-se o nível de significância de 5% (p<0,05). Observaram-se diferenças nas frequências de tipos celulares e anomalias nucleares para os dois grupos, porém estas diferenças não foram significativas (p>0,05). Quanto ao tipo de dano celular, notou-se a mesma frequência de brotos nucleares para ambos os grupos, entretanto, a frequência de micronúcleos foi maior para o grupo obeso (p<0,001). Neste estudo, verificou-se maior frequência de micronúcleos nas células esfoliadas da mucosa bucal em indivíduos obesos mórbidos que em indivíduos com peso normal. Este achado sugere que a obesidade possa levar à maior ocorrência de alterações citogenéticas. / The increasing incidence of obesity and its co-morbid conditions poses a great challenge to global health. In addition to cardiovascular disease and diabetes, epidemiological data demonstrate a link between obesity and multiple types of cancer. The buccal micronucleus cytome assay has been used as a biomarker for identification of cell damage. This study aimed to compare the frequency of cell types (basal and differentiated), nuclear anomalies (binucleated, pyknotic, karyorrhectic, karyolitic and condensed chromatin cells), and cell damage (micronuclei and nuclear buds) in exfoliated buccal cells in a group of obese (test) and a group of normal weight (control).The sample consisted of 30 subjects, the test group comprised of individuals with morbid obesity (n = 15) and a control group of normal weight (n = 15). The classification of body weight was made according to Body Mass Index (BMI), a questionnaire provided information on occupational exposures and non-occupational, lifestyle and diet. The oral mucosa cells were collected from the buccal mucosa, on both sides, processed and analyzed microscopically. For each individual 1000 cells were evaluated for the characterization of cell types (basal and differentiated) and nuclear abnormalities (binucleated cells, pyknosis, karyolysis, karyorrhexis, condensed chromatin) and 2000 differentiated cells for the presence of cellular damage (micronuclei and nuclear buds). The data were processed and statistically analyzed using the Mann-Whitney test. We considered the significance level of 5% (p <0.05). Differences were observed in the frequencies of cell types and nuclear abnormalities in both groups, but these differences were not significant (p> 0.05). Regarding the type of cell damage, we noticed the same frequency of nuclear buds for both groups, however, the frequency of micronuclei was higher in the obese group (p <0.001). In this study, there was a higher frequency of micronuclei in exfoliated cells of buccal mucosa in morbidly obese individuals than in individuals with normal weight. This finding suggests that obesity may lead to higher rates of cytogenetic changes.

A crescente incidência da obesidade e suas comorbidades constituem-se em um grande desafio para a saúde no mundo. Além da doença cardiovascular e do diabetes, dados epidemiológicos demonstraram ligação entre a obesidade e diversos tipos de câncer. As alterações citogenéticas tem sido utilizadas como biomarcadores para identificação de danos celulares. Este estudo teve como objetivos: comparar a frequência dos tipos celulares (células basais e diferenciadas), anormalidades nucleares (células binucleadas, picnóticas, cariorréticas, cariolíticas e com cromatina condensada) e de danos celulares (micronúcleos e brotos nucleares) de células bucais esfoliadas em um grupo de obesos (teste) e em um grupo de indivíduos com peso normal (controle). A amostra foi composta por 30 indivíduos, sendo o grupo teste constituído por indivíduos obesos mórbidos (n=15) e o grupo controle por indivíduos com peso normal (n=15). A classificação do peso corporal foi feita de acordo com o Índice de Massa Corporal (IMC); um questionário forneceu informações sobre exposições ocupacionais e não ocupacionais; hábitos e dieta. As células da mucosa bucal foram coletadas da mucosa jugal, de ambos os lados, processadas e analisadas microscopicamente. Para cada indivíduo foram avaliadas 1000 células para a caracterização dos tipos celulares (basal e diferenciada) e alterações nucleares (células binucleadas, picnose, cariólise, cariorrexe, cromatina condensada) e 2000 células diferenciadas para verificar a presença de danos celulares (micronúcleos e brotos nucleares). Os dados foram processados e analisados estatisticamente, por meio do teste de Mann Whitney. Considerou-se o nível de significância de 5% (p<0,05). Observaram-se diferenças nas frequências de tipos celulares e anomalias nucleares para os dois grupos, porém estas diferenças não foram significativas (p>0,05). Quanto ao tipo de dano celular, notou-se a mesma frequência de brotos nucleares para ambos os grupos, entretanto, a frequência de micronúcleos foi maior para o grupo obeso (p<0,001). Neste estudo, verificou-se maior frequência de micronúcleos nas células esfoliadas da mucosa bucal em indivíduos obesos mórbidos que em indivíduos com peso normal. Este achado sugere que a obesidade possa levar à maior ocorrência de alterações citogenéticas. / The increasing incidence of obesity and its co-morbid conditions poses a great challenge to global health. In addition to cardiovascular disease and diabetes, epidemiological data demonstrate a link between obesity and multiple types of cancer. The buccal micronucleus cytome assay has been used as a biomarker for identification of cell damage. This study aimed to compare the frequency of cell types (basal and differentiated), nuclear anomalies (binucleated, pyknotic, karyorrhectic, karyolitic and condensed chromatin cells), and cell damage (micronuclei and nuclear buds) in exfoliated buccal cells in a group of obese (test) and a group of normal weight (control).The sample consisted of 30 subjects, the test group comprised of individuals with morbid obesity (n = 15) and a control group of normal weight (n = 15). The classification of body weight was made according to Body Mass Index (BMI), a questionnaire provided information on occupational exposures and non-occupational, lifestyle and diet. The oral mucosa cells were collected from the buccal mucosa, on both sides, processed and analyzed microscopically. For each individual 1000 cells were evaluated for the characterization of cell types (basal and differentiated) and nuclear abnormalities (binucleated cells, pyknosis, karyolysis, karyorrhexis, condensed chromatin) and 2000 differentiated cells for the presence of cellular damage (micronuclei and nuclear buds). The data were processed and statistically analyzed using the Mann-Whitney test. We considered the significance level of 5% (p <0.05). Differences were observed in the frequencies of cell types and nuclear abnormalities in both groups, but these differences were not significant (p> 0.05). Regarding the type of cell damage, we noticed the same frequency of nuclear buds for both groups, however, the frequency of micronuclei was higher in the obese group (p <0.001). In this study, there was a higher frequency of micronuclei in exfoliated cells of buccal mucosa in morbidly obese individuals than in individuals with normal weight. This finding suggests that obesity may lead to higher rates of cytogenetic changes.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2018-04-19T11:44:34Z No. of bitstreams: 1 CLÁUDIA RACHID COSTA.pdf: 740066 bytes, checksum: 10863a04e188cbf0c2ad0d2d4fd873fd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-19T11:44:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CLÁUDIA RACHID COSTA.pdf: 740066 bytes, checksum: 10863a04e188cbf0c2ad0d2d4fd873fd (MD5) Previous issue date: 2018-04-19 / The malignant neoplasms are a public health problem worldwide, being the biggest cause of premature mortality of the planet. In Brazil, in 2012, more than 200 thousand people died, and it is estimated that within 20 years, there will be an increase of approximately 70% of new cases. Therefore, since a long time, the alternative therapies constitute a way of promoting "miracle" for the cure of cancer. However, the miraculous empiricism has no scientific basis and not enough documentation to prove the efficacy and quality these substances used in this self-treatment. Thus, the fosfoetanolamina, an experimental substance caused a great international repercussion and expos Brazil to an embarrassing situation. A governmental law, imposed the use of synthetic fosfoetanolamina for cancer treatment, without scientific bases for the confirmation of the effects and efficacy of anticancer treatment, by means of experimental laboratory studies and clinical trials. Thus the objective of this work was to evaluate the angiogenic activity/Antiangiogenic, mutagênica/antimutagênica this substance. The test of angiogenesis was performed using an experimental model (MCA) corioalantóide membrane of chicken egg. While the tests for mutagenicity and antimutagenicity, were performed by a micronucleus test in mouse bone marrow. The results were significant in all tests performed. / As neoplasias malignas são um problema de saúde pública mundial, sendo a maior causa de mortalidade prematura do planeta. No Brasil, em 2012, mais de 200 mil pessoas foram a óbito, e estima-se que num prazo de 20 anos, haverá aumento de cerca de 70% de novos casos. Por isso, desde muito tempo, as terapias alternativas constituem uma forma de promover o "milagre" para a cura do câncer. Contudo, o empirismo milagroso não tem base científica e nem documentação suficiente para comprovar a eficácia e qualidade destas substancias utilizadas neste autotratamento. Assim sendo, a fosfoetanolamina, uma substância experimental causou uma grande repercussão internacional e expos o Brasil a uma situação embaraçosa. Uma lei governamental, impôs a utilização da fosfoetanolamina sintética para o tratamento do câncer, sem bases científicas para a confirmação dos efeitos e eficácia do tratamento anticâncer, por meio de estudos laboratoriais experimentais e ensaios clínicos. Assim o objetivo deste trabalho, foi avaliar as atividades angiogênica/antiangiogênica, mutagênica/antimutagênica desta substância. O teste de angiogênese foi realizado através do modelo experimental em membrana corioalantóide (MCA) de ovo de galinha. Enquanto os testes de mutagenicidade e antimutagenicidade, foram realizados pelo Teste de Micronúcleo em medula óssea de camundongo. Os resultados foram significativos em todos os testes realizados.

Einleitung: Methylphenidat (MPH) als Medikament der ersten Wahl bei Patienten mit einem Aufmerksamkeitsdefizit- /Hyperaktivitätssyndrom (ADHS) ist für die Therapie von Kindern aber auch von Erwachsenen weit verbreitet. Weil es immer noch Sicherheitsbedenken gegen dieses Medikament gibt, wurde in der vorliegenden Studie untersucht, ob die Langzeiteinnahme von MPH unschädlich hinsichtlich eines zytogenetischen Effektes ist. Ein weiteres Ziel war die Beurteilung von chronischer psychosozialer Stressbelastung von Patienten im Vergleich zu Kontrollprobanden und zu beurteilen ob die Medikation einen Einfluss auf die Höhe des Stresses hat. Nicht zuletzt war das dritte Ziel der Studie zu untersuchen, ob Stress selbst zu zytogenetischen Schäden führt. Material und Methoden: Lymphozyten von 72 (42 ADHS- und 28 gesunde Kontrollprobanden) geschlechts- und altersgematchte Probanden im Alter von 18-28 Jahren, wurden aus venösem Blut für den Mikronukleusassay isoliert. Hauptendpunkt der Studie war die Mikrokernanzahl in binukleären Zellen. Die psychosoziale Stressbelastung der letzten drei Monate wurde mit dem Trier Inventar zum chronischen Stress (TICS) gemessen. Zusätzlich wurden Speichelproben für eine Cortisolmessung gesammelt. Ergebnisse: Ein Einfluss der MPH-Einnahme auf die Mikrokernfrequenz konnte nicht gefunden. ADHS-Patienten wiesen eine signifikant höhere Stressbelastung im Vergleich zu den Kontrollprobanden auf. Ein signifikanter positiver Einfluss auf das chronische Stresserleben unter MPH-Einnahme konnte bei Einnahme von mehr als 1 Jahr beobachtet werden. Die Stressbelastung der ADHS-Patienten und Kontrollprobanden zeigte keine Korrelation zu zytogenetischen Endpunkten. Eine kleine Untergruppe, ADHS-Patienten mit Komorbidität Depression, zeigte jedoch signifikante erhöhte Mikrokernfrequenzanzahlen unter stark erhöhtem chronischen Stress. Aussichten: Aus unserer Sicht kann MPH auch in der Langzeittherapie sicher hinsichtlich eines Krebsrisikos in gewichts- und symptomadaptierter Dosis eingesetzt werden. Weitere Studien sind nötig um das Krebsrisiko bei chronischer erhöhter Stressbelastung abzuschätzen. / Introduction: Methylphenidate (MPH) as first line treatment for patients with attention deficit hyperactivity disorder (ADHD) is widely used not only for therapy in children but also in adults. Because there are still safety concerns for this medication this study investigated if the long term treatment of MPH is harmless regarding to cytogenetic effects. A further aim was to compare the psychosocial stress levels of ADHD patients to those in control subjects and to investigate if MPH medication has an influence on self-perceived stress levels in ADHD. The third aim of this study was to explore if psychosocial stress leads to cytogenetic damage. Materials and methods: Lymphocytes of 72 subjects (42 ADHD and 28 healthy control subjects), matched in age and gender(aged 18-28 years) were isolated from venous blood for micronucleus assay. Main endpoint was the micronucleus frequency in binucleated cells. Psychosocial stress exposure of the last three month was measured by Trier Inventory for Chronic Stress (TICS). Additionally saliva samples were collected for cortisol measurement. Results: An influence of MPH intake on cytogenetic markers could not be found. ADHD patients showed significantly higher stress levels in comparison to control subjects. Patients taking MPH for more than one year displayed significantly lower chronic psychosocial stress levels than patients taking it less than one year or not-treated patients. Stress exposure of ADHD patients and control subjects showed no correlations to cytogenetic endpoints. A small subgroup of ADHD patients with comorbid depression showed significantly higher micronuclei frequencies and reported greater increased chronic stress. Views: We conclude that MPH in weight - and symptom - adjusted dose can be safely used also for long term treatment regarding to cancer risk. Further studies are necessary to estimate cancer risk for increased chronic stress exposure.

When food is heated, a vast number of compounds are formed. Some of these are known to be toxic. Among these are furan, HMF, PhIP, IQ, and MeIQx, the subjects of this thesis. All these compounds are known or suspected carcinogens but the detailed mechanisms behind their carcinogenicity have not yet been fully examined. The aim of this thesis was to study genotoxic properties of these compounds using both in vitro and in vivo methods. Clastogenic effects of all five compounds were assessed with the flow cytometer-based micronucleus assay in vivo and for furan also with the micronucleus assay in vitro. DNA-damaging effects of HMF were studied using the comet assay. No induction of micronuclei was obtained after exposure to IQ, MeIQx or furan. Hence, it can be argued that non-genotoxic mechanisms are partly responsible for the carcinogenic properties of these compounds. PhIP, on the other hand, generated a clear response in the in vivo test. Comparing these result with previous results on acrylamide indicates that PhIP is much more potent. However, acrylamide probably poses a higher risk for humans as the intake is considerably higher. For HMF no effects were seen using the in vivo setup. To further investigate the influence of bioactivation of HMF by sulfotransferases (SULTs) the comet assay was performed in cell lines expressing different levels of SULT. However, no correlation between SULT-expression and DNA-damage was observed. Thus, the DNA-damaging effects found in our experimental setup is probably due to other factors than SULT mediated effects. Furthermore, in this thesis the effects of folic acid on chromosomal stability in healthy people were studied. A negative correlation was found between micronucleus frequency and folate status. The results gained within this thesis will hopefully contribute to the risk assessment of compounds present in our diet.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:55:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnuskaCFSG_DISSERT.pdf: 2730570 bytes, checksum: 99e9352dede08f56c7542f82fe889d15 (MD5) Previous issue date: 2011-02-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The water quality of many reservoirs in the world has been reduced due to percolation of contaminants to water, which can have natural or anthropogenic origin, increasing the level of genotoxic compounds in aquatic ecosystems. This fact has contributed to the reduction of environmental quality, and commitment the health of living beings that inhabit these ecosystems, including the human population. In this backdrop of reduced water quality, is the Lucrecia dam, which is a major surface water reservoirs by volume of semi-arid region of Rio Grande do Norte, and that has shown contamination by heavy metals, cyanobacteria toxic and the natural presence of Radon. The population that use this source has been showing high rates of cancer, popularly associated with the consumption of this water, with a prevalence about three times higher compared to the whole state of Rio Grande do Norte. Based on this, the present study aimed to evaluate the mutagenic potencial of surface water from the Lucrecia dam, using the Micronucleus Test in Tradescantia pallida (Trad-MN) and in human peripheral blood lymphocytes (CBMN) assay, as well as identify the concentrations of some heavy metals in this water. Water samples were collected on a dry season and a rainy season, in two distinct points. Moreover, in order to bring a completely view about the relationship of man-health-environment in this local, through the knowledge of knowing / acting environmental from residents of Lucrecia, and the use and perceptions they have about the dam of your city, a study of Environmental Perception was carried out with local residents. The results obtained for the both micronucleus test, showed significant results for the three points analyzed. The strongest mutagenic effect was observed in the dry season for both assays. Chemical analyses detected an increase of heavy metal levels in different points and season above the maximum allowed by legislation. Regarding the study of Environmental Perception with local residents, it was observed the knowledge of the environment that the residents have, as well as the strong ties and perceptions with the dam of the city. Thus, the combination of these two aspects (the genetic toxicity tests conducted in the dam together with analysis of environmental perception with the residents of Lucrecia) allowed to draw a more complete diagnosis on the local situation / A qualidade h?drica de diversos mananciais tem sido reduzida devido ? percola??o de contaminantes, seja de origem antr?pica ou natural, aumentando consideravelmente o n?vel de compostos genot?xicos nos ecossistemas aqu?ticos. Tal fato vem contribuindo para a redu??o da qualidade ambiental, bem como para o comprometimento da sa?de dos seres vivos que habitam esses ecossistemas, inclusive o homem. Diante deste cen?rio, est? o a?ude de Lucr?cia, que ? um dos principais reservat?rios h?dricos superficiais, da regi?o Semi-?rida do Estado do RN, e que tem demonstrado contamina??o por metais pesados, cianobact?rias t?xicas e a presen?a natural do Rad?nio. Aliado a esses problemas, a popula??o deste munic?pio vem apresentando elevada incid?ncia de c?ncer associada popularmente ao consumo dessa ?gua, sendo a preval?ncia cerca de tr?s vezes maior, quando comparada a todo o Estado do Rio Grande do Norte. Visto isso, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial mutag?nico da ?gua superficial do a?ude de Lucr?cia por meio do teste de micron?cleo em Tradescantia pallida e em cultura de Linf?citos Humanos, assim como identificar as concentra??es de metais pesados presentes nesta ?gua. A coleta de ?gua foi realizada em dois pontos amostrais, no per?odo de seca e no per?odo chuvoso. Ademais, com o intuito de trazer um panorama mais completo da rela??o homem-sa?de-ambiente nesta localidade, atrav?s do conhecimento do saber/agir ambiental dos moradores de Lucr?cia, assim como o uso e percep??es estes t?m sobre o a?ude do seu munic?pio, foi realizado um estudo de Percep??o Ambiental com os moradores locais. Os resultados obtidos para o teste de Micron?cleo, para ambos os modelos utilizados, mostraram resultados significantes para os pontos coletados. O per?odo de seca apresentou uma m?dia maior de micron?cleos quando comparado ao per?odo chuvoso. Foi observado tamb?m concentra??es acima do permitido pela legisla??o brasileira de alguns metais pesados. Com rela??o ao estudo de Percep??o Ambiental com os moradores locais, a an?lise dos dados permitiu observar os conhecimentos sobre meio ambiente que os moradores possuem, assim como a forte liga??o e as concep??es que os mesmos possuem com o a?ude do munic?pio. Assim, a jun??o dessas duas vertentes (os testes de toxicidade gen?tica realizados no a?ude desta cidade aliado a an?lise de percep??o ambiental com os moradores de Lucr?cia) permitiu tra?ar um diagn?stico mais completo sobre a situa??o local

Orientador: Edson Luis Maistro / Resumo: A Salix alba L. (SA), popularmente conhecida como Salgueiro Branco, é uma planta utilizada na medicina popular para o tratamento de inflamações crônicas e agudas, infecções, dores, febre, entre outros. A caracterização fitoquímica do extrato da casca desta planta revelou que seu principal componente é a salicina, com uma concentração de 4,94 mg/mL, um precursor do anti-inflamatório ácido acetilsalicílico. Considerando que existem poucos estudos que avaliam a ação tóxica e citotóxica do extrato da SA, o presente estudo foi elaborado visando investigar o potencial citotóxico, genotóxico e mutagênico da SA em células mononucleares do sangue periférico humano e de hepatocarcinoma humano HepG2 in vitro, e em diferentes células de camundongos in vivo, utilizando alguns dos testes tradicionais na área de mutagênese, como o teste do MTT, o Ensaio do Cometa e o Teste do Micronúcleo, bem como a verificação de potencial citotoxicidade por meio de análises histológicas e histoquímicas. Os testes de viabilidade celular e citotoxicidade (azul de tripan e MTT) permitiram a escolha de 3 concentrações do extrato da SA para serem analisadas nos ensaios de genotoxicidade in vitro: 5, 50 e 100 µg/mL. Pelo ensaio cometa com as células mononucleares de sangue periférico, pôde-se observar que as concentrações de 50 e 100 µg/mL acarretaram um aumento estatisticamente significativo de danos no DNA, em comparação ao controle negativo. Já no teste do micronúcleo, as 3 concentrações avaliadas (5, 50 e 1... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Salix alba L. (SA), popularly known as White Willow, is a plant used in folk medicine for the treatment of chronic and acute inflammations, infections, pains, fever, among others. The phytochemical characterization of the bark extract of this plant revealed that its main component is salicin, with a concentration of 4.94 mg/mL, a precursor of the antiinflammatory acetylsalicylic acid. Considering that there are few studies evaluating the toxic and cytotoxic action of SA extract, the present study was designed to investigate the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potential of SA bark wood extract in human peripheral blood mononuclear cells and human hepatoma cell line HepG2 in vitro and in different mouse cells in vivo using some of the traditional mutagenesis tests such as the MTT test, the Comet assay and the Micronucleus test, and cytotoxicity in the liver of mice also by histological and histochemical analysis. Cell viability and cytotoxicity tests (trypan blue and MTT) allowed the choice of 3 concentrations of the SA extract to be analyzed in the in vitro genotoxicity assays: 5, 50 and 100 μg/mL. By the comet assay with the peripheral blood mononuclear cells, it was observed that concentrations of 50 and 100 μg/ml resulted in a statistically significant increase in DNA damage, as compared to the negative control. In the micronucleus test, the 3 concentrations evaluated (5, 50 and 100 μg/mL) did not produce significant increases of micronucleated binucleate cells, as well ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

As emissões veiculares e as atividades industriais, além de outras relacionadas ao crescimento da população humana, têm gerado uma grande variedade de compostos genotóxicos e/ou carcinogênicos, que podem ser liberados no ar e causar danos à saúde. Os níveis e os tipos de poluentes podem variar de acordo com a região. Entre os indicadores de poluição, as partículas finas inaláveis (MP2,5) podem atingir os alvéolos pulmonares e causar problemas respiratórios, especialmente em crianças, grupo mais sensível a substâncias tóxicas do que adultos. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi caracterizar área de referência para material particulado inalável (MP2,5), através de biomarcadores genéticos e dosagens de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs), associados ao biomonitoramento genético de crianças. O trabalho foi realizado no município de Santo Antônio da Patrulha, RS, Brasil, área livre da pluma de dispersão de contaminantes industriais, classificada em estudos anteriores como área de referência. Os extratos orgânicos obtidos em nove pools de amostras foram avaliados quanto à mutagenicidade através do ensaio Salmonella/microssoma, método de microssuspensão, com as linhagens TA98, TA100, YG1024 (em presença e ausência de metabolização) e YG1021 (sem metabolização). Os pools de amostras de ar foram quantificados quanto aos HPAs considerados poluentes prioritários. Para o biomonitoramento das 45 crianças avaliadas, foram utilizados os ensaios cometa em sangue periférico e micronúcleo (MN) em mucosa oral para medir lesões genômicas precoces. A concentração de MP2,5 no período, apresentou 9% (entre 25,89 e 64,71 μg/m3) de eventos acima do recomendado pela Organização Mundial de Saúde (25 μg/m3). Foram obtidos resultados, em revertentes/m3, para a mutagênese, de negativos no período da primavera a 8,3±0,69 no outono (-S9) e de negativos na primavera a 5,4±0,36 no inverno (+S9) para a linhagem TA98. Os resultados com as linhagens YG mostraram a presença de compostos nitrogenados com prevalência de mononitroarenos e aminas aromáticas. Entre os HPAs, o benzo(g,h,i)perileno apresentou a maior concentração em todas as amostras na área de estudo, seguido do indeno(1,2,3-cd)pireno (1,73 ng/m³ e 1,17 ng/m³, respectivamente). Em relação ao biomonitoramento das 45 crianças avaliadas, não houve correlação entre os parâmetros do ensaio cometa (momento, intensidade e comprimento da cauda) e os do teste do micronúcleo. Os valores observados para crianças em relação a estes biomarcadores foram: 0,27±0,407 para indução de MN em células bucais e 0,56±0,727 para brotos nucleares, 0,51±0,694 para células binucleadas, 46,37±16,330 para cromatina condensada, 6,97±5,746 para picnose, 6,60±5,540 para cariólise e 57,55±24,920 para cariorréxe, suas variantes celulares (‰); para respostas ao ensaio cometa em relação ao comprimento da cauda (23,07±12,442), intensidade da cauda (7,28±11,657) e momento da cauda (0,95±2,30). A análise tanto para o teste do MN quanto para o ensaio cometa relacionada ao sexo e à idade não foi significativa. Entre os fatores de confusão, foram observadas diferenças significativas entre o fumo passivo e indução de MN. A presença de HPAs e a resposta mutagênica podem estar relacionadas às emissões veiculares locais. Estes resultados evidenciam a importância de se estudar áreas de referência para poluição atmosférica, estabelecendo níveis basais, principalmente em populações de crianças. / Vehicular emissions and industrial activities and others involving the growth of the human population have caused a great variety of genotoxic and/or carcinogenic compounds, which may be released into the air and be harmful to health. The levels and types of pollutants may vary according to the region. Among the indicators of pollution fine inhalable particles (PM2.5) can reach the pulmonary alveoli and cause respiratory problems, especially in children, a group that is more sensitive to toxic substances than adults. In this sense, the purpose of this study was to characterize an area of reference for inhalable particulate material (PM2.5), through genetic biomarkers and polycyclic aromatic hydrocarbon (PAHs) dosages, associated with the genetic biomonitoring of children. It was performed in the city of Santo Antônio da Patrulha, RS, Brazil, an area that is free from the industrial pollutant contamination plume, classified in previous studies as an area of reference. The organic extracts obtained in nine pools of samples were evaluated for mutagenicity through the Salmonella/microsome assay, microsuspension method, with TA98, TA100, YG1024 (in the presence and absence of metabolization) and YG1021 (without metabolization). The pools of air samples were quantified as to the PAHs considered priority pollutants. In order to bio monitor the 45 children evaluated, the Comet assays in peripheral blood and mincronucleus (MN) in oral mucosa were used to measure early genomic lesions. The concentration of PM2.5 during the period, obtained 9% (between 25.89 and 64.71 μg/m3) of the values above that recommended by the World Health Organization (25 μg/m3). Results were obtained in revertants/m3, for the mutagenesis, of negatives during the spring to 8.3±0.69 in autumn (-S9) and of negative in spring to 5.4±0.36 in winter (+S9) for strain TA98. The results with strains YG showed the presence of nitrogenated compounds with a prevalence of mononitroarenes and aromatic amines. Among the PAHs , benzo(g,h,i)perylene presented the highest concentration in all samples in the area of study followed by indeno(1,2,3-cd) pyrene (1.73 ng/m³ and 1.17 ng/m³, respectively). As to the biomonitoring of the 45 children evaluated there was no correlation between the parameters of the comet assay (moment, intensity and tail length) and the micronucleus test. The values reported for children concerning these biomarkers were: 0.27±0.407 for induction of MN in buccal cells and 0.56±0.727 for nuclear buds, 0.51±0.697 for binucleated cells, 46.37±16.330 for condensed chromatin, 6.97±5.746 for picnosis, 6.60±5.540 for caryolysis and 57.55±24.920 for caryorrhexis, its cellular variants (‰), and for responses to the Comet assay in relation to the tail length (23.07±12.442), intensity of the tail (7.28±11.657) and moment of the tail (0.95±2,30). The analysis both for the MN test and for the Comet assay regarding sex and age was not significant. Among the counfounding factors, significant differences were observed for the passive smoking and induction of MN. The presence of PAHs and the mutagen response may be related to the local vehicular emissions. These results show the importance of studying areas of reference for atmospheric pollution, establishing baseline levels, especially in populations of children.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-13Bitstream added on 2014-06-13T19:35:40Z : No. of bitstreams: 1 konta_em_me_arafcf.pdf: 565336 bytes, checksum: 6c84917b1244d00658ee92bffe42aa3f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Os antioxidantes, principalmente os encontrados na dieta, são agentes responsáveis pela inibição e redução dos danos oxidativos causados pelas espécies reativas nas células. A cisplatina (cDDP), um potente agente antineoplásico utilizado com frequência no tratamento de tumores sólidos, tem seu uso clínico limitado devido aos efeitos adversos como nefrotoxicidade, genotoxicidade e supressão da medula óssea. Como a geração de espécies reativas pode resultar em danos ao DNA pela ação destas espécies ou indiretamente via produtos de degradação da peroxidação lipídica, nosso estudo avaliou o possível efeito protetor da adição da polpa de maracujá amarelo na dieta de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e Wistar normotensos, contra a nefrotoxicidade e genotoxicidade induzida pela cDDP. Os resultados obtidos nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho mostraram que a cDDP promoveu um aumento dos níveis das substâncias reativas aos ácido tiobarbitúrico, bem como decréscimo nos níveis de glutationa nos rins dos animais SHR, reforçando a hipótese que a peroxidação lipídica está relacionada com o mecanismo de nefrotoxicidade. O tratamento com doses múltiplas da polpa de maracujá amarelo não alterou os outros parâmetros da função renal no período analisado. Embora o efeito protetor da polpa de maracujá contra os danos induzidos ao DNA em células renais e hepáticas não tenha sido evidente nos resultados obtidos pelo Ensaio do Cometa, a polpa foi eficaz na redução de micronúcleos induzidos pela cDDP. Assim, umas das hipóteses para a redução da pressão arterial sistólica observada neste trabalho, poder ser atribuída à presença de alguns compostos fenólicos e outros ainda não identificados na polpa. Visto que, a interação entre os fitoquímicos presentes na polpa de maracujá demonstraram eficácia na redução da mutagenicidade e efeitos protetores antioxidantes. / The antioxidants, particularly those found in the diet, are responsible for inhibiting and reducing the damage caused by reactive species in the cells. Cisplatin (cDDP), a potent anticancer agent often used in the treatment of solid tumors, has limited clinical use due to adverse effects such as nephrotoxicity, genotoxicity and myelosuppression. As the generation of reactive species can result in DNA damage by direct action of this or indirectly by degradation products of the lipid peroxidation, our study evaluated the potential protector of adding yellow passion fruit pulp to the diet of spontaneously hypertensive rats (SHR) and normotensive wistar rats, against the nephrotoxicity and genotoxicity induced by cDDP. The results showed that the cDDP promoted an increase in the levels of thiobarbituric acid reactive substances and a decrease in the levels of glutathione in the kidneys of the animals, reinforcing the hypothesis that lipid peroxidation be related to the mechanism of nephrotoxicity. The treatment with multiple doses of passion fruit pulp did not change the others parameters of renal function in the schedule. Although the protective effect of passion fruit pulp against the damage caused to the DNA of kidney and hepatic cells has not been evident in the results obtained by Comet assay, the pulp was effective in the reduction of micronuclei induced by cDDP. One of the hypotheses for the reduction in systolic blood pressure observed in the present study attributed this effect to the presence of some phenolic compounds and others not yet identified in the passion fruit pulp. Furthermore, the interaction between the phytochemicals of the pulp demonstrated effectiveness in reducing the mutagenic and antioxidant effects.