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Caracterização das espermatogônias indiferenciadas e dos nichos espermatogoniais em Astyanax altiparanae Garutti e Britski, 2000 (Teleostei, Characidae). / Characterization of undifferentiated spermatogonia and spermatogonial niche in Astyanax altiparanae GARUTTI and Britski 2000 (Teleostei, Characidae).

Marília de Paiva Camargo 01 March 2016 (has links)
Ao se observar ao microscópio de luz e eletrônico de transmissão as espermatogônias indiferenciadas de lambari (Astyanax altiparanae), espécie de grande valor econômico e comercial, as mesmas se subdividem em Aund* e Aund. A do tipo Aund* apresentou núcleo irregular, excêntrico, cromatina descondensada e nuages próximas ao envoltório nuclear e/ou ainda, associadas às mitocôndrias e, a do tipo Aund, apresentou núcleo esférico, central, com cromatina levemente condensada e nuages. Análise por meio de morfometria demonstrou que o nicho espermatogonial das espermatogônias indiferenciadas do tipo Aund* é próximo ao interstício, enquanto as do tipo Aund, próximas às regiões entre dois túbulos (intertúbulo). Adicionalmente, de acordo com a técnica de incorporação e retenção de BrdU foi possível analisar a existência de possíveis candidatas às espermatogônias-tronco, chamadas de labeling-retaining cells, visto que estas células retiveram BrdU ao longo de todo período avaliado, demonstrando um longo ciclo celular, característica esta de célula-tronco. / Observing by light and transmission electron microscope, undifferentiated spermatogonia of lambari (Astyanax altiparanae), species of great economic and commercial value, they are divided into Aund * and Aund. The type Aund* presents irregular nucleus, eccentric and decondensed chromatin, and nuages near the nuclear envelope and/or associated to mitochondria. The type Aund presents spherical central nucleus, with slightly condensed chromatin and nuages. Morphometric analysis showed that the niche of the type Aund* spermatogonia is near the interstitium, while the type Aund, next to the regions between two tubules (intertubule). Additionally, by the BrdU incorporation and retention technique, we found the possible candidates to spermatogonial stem cells, called \"labeling-retaining cells\", since these cells have retained BrdU over the entire study period (21 days), showing a long cell cycle, a stem cells characteristic.
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Caracterização morfométrica e molecular de Anastrepha bistrigata Bezzi e Anastrepha striata Schiner (Diptera: Tephritidae) / Morphometric and molecular characterization of Anastrepha bistrigata Bezzi and Anastrepha striata Schiner (Diptera: Tephritidae)

Tibério Graco Araújo da Silva 18 August 2008 (has links)
Considerando-se a semelhança morfológica e ocorrência simpátrica de Anastrepha striata Schiner e Anastrepha bistrigata Bezzi, este trabalho propôs identificar formas para melhor caracterizá-las através de análises morfométricas do acúleo e asas de populações simpátricas e alopátricas dessas espécies, e molecular, por meio da análise de seqüências parciais do gene da citocromo oxidase I (COI). O trabalho também teve por objetivo desenvolver iniciadores espécie-específicos que possam vir a ser utilizados em estudos ecológicos em regiões em que ambas as espécies ocorram simpatricamente. As populações analisadas A. striata (seis populações) e A. bistrigata (duas populações) foram provenientes de diferentes regiões do Brasil, Colômbia e Bolívia. Para os estudos morfométricos, os acúleos e asas foram montados em lâminas para captura e análise de imagens com auxílio de câmera fotográfica acoplada ao microscópio estereoscópico, utilizando-se de software apropriado. Foram traçados e mensurados oito segmentos no acúleo e 16 na asa direita de cada indivíduo, obtendo-se assim as medidas nas quais se basearam as análises. Nos estudos moleculares, os produtos de amplificação obtidos para a COI foram seqüenciados e analisados para o estudo da caracterização molecular das diferentes populações desses insetos e desenvolvimento de iniciadores espécie-específicos. Os resultados indicam a existência clara de distinção morfométrica entre as duas espécies e confirmaram as identificações baseadas na largura e comprimento do acúleo. Os dados morfométricos mostraram também a ausência de padrões geográficos distintos entre as populações de A. striata e A. bistrigata. A. striata apresentou maior variação morfométrica entre suas populações quando comparada à diferenciação encontrada para A.bistrigata. Nas duas espécies, populações encontradas em maiores altitudes apresentaram maiores dimensões. A análise de nucleotídeos da seqüência da COI obtida para as populações de A. striata em questão indicou a ocorrência de alta similaridade entre as mesmas. As análises realizadas também indicaram que a divergência genética encontrada no fragmento da COI analisado para as diferentes populações de A. striata não permitiu o agrupamento de acordo com a distribuição geográfica dessas populações. A análise do fragmento do gene da COI permitiu o desenvolvimento de iniciadores com divergência suficiente entre as espécies em questão para permitir a amplificação de porção específica do gene da COI, que possibilita a diferenciação entre as mesmas. Os iniciadores propostos reúnem características que permitem a sua utilização em reações de PCR multiplex para a diferenciação entre espécimes de ambas as espécies. / Because of the fact that Anastrepha striata Schiner and Anastrepha bistrigata Bezzi are very similar morphologically and may also occur sympatrically, this study aimed to propose different ways to characterize them by using wing and aculeus morphometry, and mitochondrial DNA sequencing. This work also aimed to develop species-specific primers to allow for the differentiation between both species in sympatric areas. Six A. striata and two A. bistrigata populations were obtained from different regions from Brazil, Colombia and Bolivia. Specimens from different populations had their aculeus and wings removed and slide mounted for image acquisition under a stereomicroscope and morphometric analysis. Data collection for morphometry were taken for each specimen on eight segments of the aculeus and on 16 of the right wing. The molecular characterization consisted of the sequencing and analysis of a fragment of the cytochrome oxidase I (COI) gene, and the development of species-specific primers. Morphometry did not indicate any consistent variation to allow for geographical characterization of different populations, but indicated A. striata and A. bistrigata are consistently different morphologically. Populations of either species from higher altitudes were larger than the ones at lower altitudes, and A. striata displayed a much higher intraespecific variation in morphology than A.bistrigata. COI nucleotide sequences for A. striata were very similar among the populations studied, and the molecular analysis did not yield groups that were related geographically. The COI analysis allowed the development of a set of species-specific primers that were divergent enough to allow for the discrimination of A. striata and A. bistrigata in multiplex PCR reactions.
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Caracterização de espécies de Trichogramma Westwood (Hymenoptera: Trichogrammatidae), parasitoides de ovos de Erinnyis ello (L.) (Lepidoptera: Sphingidae) / Characterization of the Trichogramma species Westwood (Hymenoptera: Trichogrammatidae), egg parasitoids of Erinnyis ello (L.) (Lepidoptera: Sphingidae)

Jaci Mendes Vieira 13 October 2011 (has links)
Trichogramma demoraesi Nagaraja, 1983, T. manicobai Brun, Moraes e Soares, 1984 e T. marandobai Brun, Moraes e Soares, 1986 têm sido referidos como parasitoides de ovos do mandarová-da-mandioca, Erinnyis ello (L., 1758), em plantações de mandioca no Brasil. Entretanto, com base na a análise comparativa dos caracteres morfológicos do parátipo (macho) de T. demoraesi, depositado no The Natural History Museum, Londres, com os exemplares, obtidos de ovos do mandarová-da-mandioca, identificados anteriormente como T. demoraesi (coleção da ESALQ), verificou-se que esses exemplares não pertencem a T. demoraesi, mas são realmente espécimes de T. marandobai. Portanto, T. demoraesi não parasita ovos de E. ello no Brasil. Assim, apenas T. manicobai e T. marandobai foram caracterizadas e ilustradas detalhadamente, pois as descrições originais dessas espécies são sucintas e não foram adequadamente ilustradas. O processo intervolselar de T. marandobai apresenta variações no ápice (arredondado ou truncado). Entretanto, com base nas análises biológicas (cruzamentos), morfométricas e moleculares, comprovou-se que os espécimes com processo intervolselar truncado ou arredondado são variações intraespecíficas de T. marandobai. / Trichogramma demoraesi Nagaraja, 1983, T. manicobai Brun, Moraes e Soares, 1984 e T. marandobai Brun, Moraes e Soares, 1986 have been reported as egg parasitoids of Erinnyis ello (L.) on cassava in Brazil. However, the comparative analysis of the morphological characters of the paratype (male) of T. demoraesi, deposited at The Natural History Museum, London, with specimens from eggs of Erinnyis ello, previously identified as T. demoraesi (ESALQ collection), indicated, in fact, that these specimens do not belong T. demoraesi, but to T. marandobai. Therefore, T. demoraesi does not parasitize eggs of E. ello in Brazil. Then, only T. manicobai and T. marandobai were characterized and illustrated in detail, because original descriptions for both species are succinct and poorly depicted. The intervolsellar process (blunt or truncated apically) of T. marandobai was found to be plastic. However, based on biological (crossings), morphometric and molecular analyses, it was proved that specimens with blunt or truncated intervolsellar process are intraspecific variations of T. marandobai.
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Relações morfométricas e genética populacional de Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) / Morphometric relationships and population genetics of Culex quinquefasciatus

Sirlei Antunes de Morais 01 March 2011 (has links)
Objetivo. Culex (Culex) quinquefasciatus Say 1823 tem distribuição expansiva em aglomerados humanos e é vetor em ciclos de transmissão de agentes patogênicos, como filarídeos e arbovírus. Taxonomicamente, essa espécie está dentro do subgrupo pipiens, cuja principal característica é a similaridade morfológica dos seus integrantes. Este estudo objetivou caracterizar genética e morfologicamente espécies Cx. quinquefasciatus de dez localidades brasileiras e da região da bacia do Prata, na Argentina. Métodos. Para análises morfológicas foram utilizados valores morfométricos das veias alares de fêmeas e a razão DV/D do edeago, na genitália de machos adultos. Para testes genéticos foram sequenciados os genes mitocondriais cox1 e nd4, clonados fragmentos do segundo espaçador ribossomal ITS2 e analisado o padrão de bandas eletroforéticas do segundo intron do lócus da Acetilcolinesterase (ace2). Resultados. A forma das veias alares de fêmeas agrega dois principais grupos, um com mosquitos do Brasil e outro de La Plata, tendo este último maior variança interna. Esses dados estão relacionados à distribuição encontrada no fragmento ace2, que indica La Plata como área de hibridação entre Cx. quinquefasciatus e Cx. pipiens. Os valores de tamanho da asa apresentam três principais agrupamentos. Um deles em áreas ao norte do Brasil, outro no sudeste e sul, e outro na Argentina. O mesmo ocorre com a razão DV/D da genitália masculina. Os dados de sequências de bases do gene cox1 apresentam polimorfismos, com baixa diversidade e agrupamento populacional na região Sul do Brasil. Os SNPs encontrados são silenciosos, pois não apresentam modificação na estrutura da proteína produzida. O gene nd4 é idêntico em todas as amostras. Esses fragmentos sugerem características de homoplasmia em Cx. quinquefasciatus. O espaçador ITS2 mostrou variedade de polimorfismos, por eventos intra-genômicos de inserção, deleção, translocação e transição de bases. Porém, esses eventos são sincrônicos em populações de diferentes áreas geográficas; assim como, mostra pouca variação nas estruturas dos transcritos RNAr. Por outro lado, os dados ITS2 apontam a segregação de um trinucleotídeo GTC, em mosquitos de La Plata, caracterizando essa área como de isolamento geográfico de mosquitos do complexo pipiens. Conclusão. A espécie Cx. quinquefasciatus possui baixa diversidade genética e morfológica, duas linhagens mitocondriais no Brasil e mosquitos de origem híbrida com Cx. pipiens na Bacia do Prata, na Argentina / Objective. The Culex (Culex) quinquefasciatus Say 1823 is widely distributed in human settlements, and is a vector in the transmission cycles of pathogens such as arboviruses and filarids. This species belongs to Cx pipiens complex, whose main characteristic is the morphologic similarity of their species. This study aimed to characterize genetic and morphological Cx quinquefasciatus species from different regions of Brazil and La Plata, Argentina. Methods. Were used morphometric values of wing veins of females and the DV/D ratio of aedeagus in adult male genitalia. For genetic testing were sequenced mitochondrial cox1 and nd4 genes, cloned fragments of ribosomal ITS2 spacer and examined the pattern of electrophoretic bands of the second intron of Acetylcholinesterase (ace2) locus. Results. The shape of the wing veins of female aggregates two main groups, one with mosquitoes of the Brazil and one from La Plata, the latter having greater internal variance. These data are related to the distribution found in ace2 fragment, which indicates La Plata as hybridization area between Cx. pipiens and Cx. quinquefasciatus. The values of wing size form a geographical cline, with three main groupings. One of these areas in the north of Brazil other in the southeast and south, and another in Argentina. The same happens with reason DV/D of the male genitalia. Sequence data bases have cox1 gene polymorphisms with low diversity and clustering of population in southern Brazil. The cox1 SNPs found are trace, because it does not show modification in the structure of the protein produced. The nd4 gene is identical in all samples. These fragments suggest homoplasmic features in Cx. quinquefasciatus. ITS2 showed polymorphisms and intragenomic events by insertion, deletion, translocation and transition bases. However, these events are synchronous in populations from different geographic areas and shows little variation in the structures of rRNA transcripts. Moreover, the data indicate ITS2 segregation of a trinucleotide GTC in mosquitoes from La Plata, featuring this area as the geographic isolation of the subgroup pipiens mosquitoes. Conclusion. Cx quinquefasciatus species has low genetic and morphological diversity, two mitochondrial lineages in Brazil and mosquitoes of hybrid origin with Cx pipiens in La Plata, Argentina
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AvaliaÃÃo da degradaÃÃo do AÃude Acarape do Meio-CE com uso de modelo matemÃtico e geotecnologia / Assessment of degradation dam Acarape do Meio - CE with the use of mathematical model and geotechnology

Josefa Marciana Barbosa de FranÃa 27 September 2013 (has links)
Um dos grandes desafios da gestÃo ambiental à compatibilizar a preservaÃÃo com os usos mÃltiplos, sendo fundamental o conhecimento dos fatores condicionantes das modificaÃÃes das condiÃÃes naturais dos reservatÃrios e respectiva bacia hidrogrÃfica. Neste contexto, o presente trabalho aborda temas como: caracterizaÃÃo morfomÃtrica da bacia hidrogrÃfica e hidrÃulica do aÃude Acarape do Meio â CE; simulaÃÃo da circulaÃÃo hidrodinÃmica para o ano de 2012 a partir do programa SisBaHiA, assim como, a estimaÃÃo do tempo de residÃncia e das taxas de renovaÃÃo; e para averiguar aspectos da evoluÃÃo dos processos de degradaÃÃo da qualidade da Ãgua, processou-se quatro imagem de satÃlite Landsat 5 â TM. A partir da anÃlise dos resultados da pesquisa, constatou-se que: a bacia hidrogrÃfica do aÃude Acarape do Meio tem aproximadamente 10,31% da Ãrea degradada; identificou-se que a bacia hidrÃulica tem formato dendrÃtico com elevado desenvolvimento de perÃmetro. Quanto aos aspectos relacionados à modelagem ambiental estimou-se que o comportamento da circulaÃÃo hidrodinÃmica apresentou baixa velocidade das correntes; a taxa de renovaÃÃo da Ãgua no perÃodo de chuva atingiu 100% nas Ãreas de reentrÃncias; tambÃm se identificou que o tempo de residÃncia à mais elevado nas Ãreas rasas e dendrÃticas. Com relaÃÃo à presenÃa de componentes Ãpticos ativos, constatou-se que ocorreu o aumento na resposta espectral das imagens Landsat 5 â TM, referente ao perÃodo de 11 anos (2001 a 2011), que se relaciona com o aumento da clorofila a ao longo dos anos, que à consequÃncia do processo de eutrofizaÃÃo. / One of the great challenges of environmental management is compatible the preservation with the water multiple uses, with fundamental knowledge of the factors conditioning the changes of the natural conditions of the reservoirs and their watershed. In this context, this paper ad-dresses topics such as: morphometric characterization of the Acarape do Meio (Cearà State) river basin and it hydraulic weir; simulation of hydrodynamic circulation for the year 2012 with the SisBaHiA program, as well as the estimation of the residence time and renewal fees, and to investigate aspects of the evolution of the processes of degradation of water quality, from four satellite images Landsat 5 - TM. From the analysis of the survey results, it was found that the catchment area of the dam Acarape do Meio has approximately 10,31% of the degraded area and it was found that the hydraulic basin has dendritic format with high perimeter development. For the aspects related to environmental modeling, it was estimated that the hydrodynamic behavior of circulating currents showed low speeds, the renewal rate of the water during the rainy season reached 100% in the areas of recesses and also it was found that the residence time is higher in the shallow and dendritic areas. With respect to the presence of active optical components, it was found that there was an increase in the spectral response of Landsat 5 - TM for the 11 years period (2001 to 2011), which relates to the increase of chlorophyll a throughout the years, which is a eutrophication consequence.
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Comparação microscópica de glândulas sublinguais de cadáveres humanos e de pacientes desdentados portadores de tumefações do soalho da boca relacionadas às glândulas sublinguais: estudo morfológico e morfométrico / Microscopic comparative study of human cadaver sublingual glands and mouth floor enlargements related to the sublingual glands in edentulous patients: morphological and morphometric analysis

Josiane Costa Rodrigues de Sá 14 September 2009 (has links)
O soalho da boca de alguns pacientes desdentados parciais ou totais pode apresentar tumefações do soalho da boca relacionadas às glândulas sublinguais que dificultam a adaptação de próteses totais ou parciais, às vezes requerendo tratamento cirúrgico. Erroneamente, estas tumefações têm sido atribuídas à hiperplasia glandular. Alterações decorrentes do envelhecimento têm sido aventadas como possível causa, mas a etiopatogenia continua incerta. Na busca de explicar a causa das tumefações do soalho da boca de desdentados, foi elaborada a presente pesquisa. Foram comparadas microscopicamente as glândulas sublinguais de cadáveres humanos com glândulas removidas em tratamento cirúrgico pré-protético das tumefações do soalho da boca de desdentados. Estudo morfológico e morfométrico foram realizados em indivíduos de idades cronológicas semelhantes. Os resultados foram analisados com nível de significância de 5%. No estudo morfológico foram analisados: atrofia acinar (p=0,758), autólise acinar (p=0,014), infiltrado mononuclear focal (p=1,000) e difuso (p=0,142), substituição do parênquima por tecido fibroso (p=0,547), substituição do parênquima por tecido adiposo (p=0,547), extravasamento de muco focal (p=0,192) e difuso (p=0,758) e oncocitose (p=0,883). As variáveis ductos e/ou estruturas ductiformes (p=1,000) e vasos sangüíneos congestos (p=0,043) foram classificadas em ausentes e presentes. Morfometricamente foi determinada a densidade de volume de ácinos (p=0,752), ductos (p=0,444), estroma (p=0,209) e tecido adiposo (p=0,794). A análise dos resultados mostrou diferença estatisticamente significante para os aspectos microscópicos autólise (p=0,014) e vasos sanguíneos congestos (p=0,043). As características microscópicas das glândulas sublinguais nas tumefações do soalho da boca de desdentados retratam o processo normal de envelhecimento das glândulas salivares. Concluiu-se que nas tumefações do soalho da boca de pacientes desdentados as glândulas sublinguais não são patológicas. / Mouth floor enlargements related to sublingual glands in edentulous or partially edentulous patients may be present, impairing denture fitting. Sometimes surgical treatment is needed. Erroneously, these enlargements have been attributed to glandular hyperplasia. Changes due to aging process have been suggested as a possible cause but the etiopathogenesis continues uncertain. The aim of the study was to explain the cause of mouth floor enlargements in edentulous patients. Human sublingual glands from necropsies and glands removed in pre-prosthetic surgical treatment of mouth floor enlargements in edentulous patients were microscopically compared. Morphological and morphometric studies were performed in individuals of similar chronological ages. Results were analyzed with significance set for p0,05. The morphological study analyzed: acinar atrophy (p=0,758), acinar autolysis (p=0,014), focal (p=1,000) and diffuse mononuclear infiltrate (p=0,142), replacement of parenchyma by fibrous tissue (p=0,547), replacement of parenchyma by adipose tissue (p=0,547), focal (p=0,192) and diffuse mucus overflow (p=0,758) and oncocytosis (p=0,883). The variables ducts and/or duct-like structures (p=1,000) and congested blood vessels (p=0,043) were classified in absent and present. The volumes densities of acini (p=0,752), ducts (p=0,444), stroma (p=0,209) and adipose tissue (p=0,794) were determined by the morphometric study. The results showed statically significant difference to the microscopic aspects: autolysis (p=0,014) and congested blood vessels (p=0,043). The microscopic aspects of the sublingual glands in mouth floor enlargements in edentulous patients revealed the normal aging process of the salivary glands. Concluding, the sublingual glands in mouth floor enlargements in edentulous patients are not pathological glands.
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Histórico de introdução do siri invasor Charybdis hellerii (A. Milne-Edwards, 1867) (Decapoda, Portunidae) na costa americana: ferramentas moleculares e morfologia comparativa / Introduction history of the invasive swimming crab Charybdis hellerii (A. Milne-Edwards, 1867) (Decapoda, Portunidae) on the American coast: molecular tools and comparative morphology

Mariana Negri Pereira 30 May 2016 (has links)
Charybdis hellerii (A. Milne-Edwards, 1867), espécie de siri nativa do Indo-Oeste Pacífico, dispersou-se para o mar Mediterrâneo com a abertura do canal de Suez. Em 1987, foi registrada pela primeira vez no Atlântico Ocidental, onde populações estabelecidas são reconhecidas dos EUA ao sul do Brasil. Acredita-se que sua introdução no continente americano teria ocorrido por meio de água de lastro de navios provenientes do mar Mediterrâneo. Por meio de análises moleculares utilizando-se três marcadores genéticos (um nuclear, H3, e dois mitocondriais, COI e 16S rDNA), de forma integrada à morfologia comparativa, realizou-se uma investigação do status taxonômico de C. hellerii e dos aspectos relacionados ao seu histórico de introdução. Para este último fim, objetivou-se: (1) o reconhecimento de regiões de origem e rotas de introdução; (2) a detecção ou não de gargalo genético e (3) de introduções múltiplas. A validade de C. hellerii como uma única entidade foi corroborada por alguns resultados: 100% de similaridade no marcador nuclear; monofilia de C. hellerii nos filogramas construídos com diversas espécies de Thalamitinae; divergência genética intraespecífica (COI - 0 a 4,2% e 16S rDNA - 0 a 0,9%) inferior à interespecífica esperada (COI - 6,2 a 21,5% e 16S rDNA - 3,9 a 15,2%) e total similaridade genética entre indivíduos com características morfológicas distintas. Estruturação genética e morfométrica foi detectada nas localidades nativas (+ mar Mediterrâneo), evidenciando dois grupos: Índico oeste + mar Mediterrâneo e Índico leste + Pacífico. A AMOVA para COI mostrou que 38,739% da diversidade encontrada está entre esses dois grupos (ct = 0,38, p = 0,00). A diferenciação genética entre o Índico e o Pacifico é recorrentemente associada a baixas do nível no mar na conexão entre estes oceanos no Pleistoceno. Essa estruturação nas áreas de origem foi fundamental para a detecção de introduções múltiplas na costa americana. A maior parte dos indivíduos da América se agrupou com o Índico oeste + mar Mediterrâneo, suportando o mar Mediterrâneo como a principal origem das populações americanas. No entanto, o agrupamento de espécimes do sul do Brasil com o grupo Índico leste + Pacífico também revelou introduções provenientes dessa região. Um grupo geneticamente distinto detectado na costa americana e geneticamente mais próximo do Índico leste + Pacífico sugere introdução proveniente de uma localidade não amostrada nas áreas de origem. Para ambos os marcadores mitocondriais, os valores de diversidade haplotípica nas áreas exóticas foram comparáveis aos das de origem e a diversidade nucleotídica foi predominantemente superior nas primeiras em relação às segundas. Estes resultados estão possivelmente relacionados à ocorrência de introduções múltiplas de áreas geneticamente distintas. Dos haplótipos de COI detectados no agrupamento Índico oeste + mar Mediterrâneo, apenas dois não foram encontrados nas populações americanas, sugerindo a não ocorrência de um gargalo genético expressivo. Para a introdução proveniente do Índico oeste + Pacífico, gargalo genético significativo possivelmente ocorreu, uma vez que dos 22 haplótipos encontrados nos 40 espécimes do agrupamento Índico leste + Pacífico, apenas três foram encontrados em quatro dos 87 indivíduos amostrados na América. Por fim, análises moleculares e morfológicas demonstraram que Charybdis variegata, espécies congênere recentemente registrada como uma nova espécie exótica na América, consiste na realidade em mais um exemplar de C. hellerii. / Charybdis hellerii (A. Milne-Edwards, 1867), an invasive swimming crab species native to the Indo-West Pacific, dispersed to the Mediterranean Sea via Suez Canal. In 1987, it was first reported to the western Atlantic, where self-maintaining populations are currently found from the USA to southern Brazil. It is suggested that animals were transported to America in their larval stages through ballast water from ships probably loaded at Mediterranean ports. An integrative approach of morphological and molecular analyses using three molecular markers (one nuclear, H3 and two mitochondrial, COI and 16S rDNA) was performed in order to check the taxonomic status of C. hellerii and investigate its introduction history. For the latter purpose, this study aimed: (1) to track potential sources, routes of introduction, (2) assess the occurrence or not of multiple introductions and (3) of genetic bottlenecks. C. hellerii was confirmed as a single entity according to the following results: 100% of similarity for the nuclear marker; monophyly of C. hellerii clade in the phylograms including several species of the subfamily Thalamitinae; intraspecific genetic diversity (COI - 0 to 4.2% and 16S rDNA - 0 to 0.9%) inferior to interspecific value expected for the studied loci (COI - 6.2 to 21.5% and 16S rDNA - 3.9 a 15.2%) and total genetic similarity of individuals with different morphological traits. Genetic and morphometric structure was detected in C. hellerii native range (and the Mediterranean Sea), showing two groups: Western Indian Ocean + Mediterranean Sea and Eastern Indian + Pacific Oceans. The AMOVA results for COI revealed that 38.739% of variation was between both groups (ct = 0.38, p = 0.00). This genetic break between the Pacific and Indian Oceans is constantly associated with sea level fluctuations in the connection between both Oceans during the Pleistocene glaciation events. This genetic structure allowed the detection of independent introduction events along the American coast. As most animals from this exotic range were clustered with the Western Indian Ocean + Mediterranean Sea group, the Mediterranean populations were supported as the main source of the American ones. However, the cluster of animals from the southern Brazil with the Eastern Indian + Pacific Oceans group indicated that introductions from these native regions might also have occurred. A third group found solely in the American range and genetically related to Eastern Indian + Pacific also suggested introductions from an unsampled locality of native range. The haplotype diversities of American localities were comparable to those of source ones, whereas the nucleotide diversities were predominantly higher in the non-native localities. These diversity indexes results might be related to the occurrence of multiple introductions from genetic distinct areas. Among all haplotypes of the Indian Ocean + Mediterranean Sea cluster, only two were not found in America, what suggests no expressive bottleneck in the introduction from this source. However, a genetic bottleneck might explain the low number of equal haplotypes between the Eastern Indian + Pacific Ocean cluster and the Atlantic range. Only three haplotypes were detected in four specimens out of 87 collected in American localities in comparison to 22 found in the native group. In addition, the molecular and morphological analyses confirmed that a congeneric species, Charybdis variegata, recently recorded on the American coast, is actually another C. hellerii specimen.
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Associação de ciclosporina e Heteropterys aphrodisiaca (no-de-cachorro) adminstrados a ratos wistar : estrutura, ultra-estrutura e morfometria testicular / Association of cyclosporine and Heteropterys aphrodisiaca (no-de-cachorro) administered to Wistar rats : testicular structure, ultrastructure and morphometry

Monteiro, Juliana Castro 16 February 2007 (has links)
Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_JulianaCastro_M.pdf: 5278625 bytes, checksum: 63e213bed61e034d07b8ef348696a065 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: TA ciclosporina A (CsA) possui potentes propriedades imunossupressivas e tem sido amplamente usada na terapia de transplantes de órgãos, aumentando as taxas de sobrevivência dos enxertos, e no tratamento de algumas doenças auto-imunes. Apesar de ser um importante medicamento, diversas reações colaterais são verificadas, entre elas a toxicidade testicular, levando à infertilidade masculina. Heteropterys aphrodisiaca é uma planta com indicações de estimulante e potente afrodisíaco, que aumenta o peso corporal e testicular e o volume das células de Leydig nos testículos de ratos adultos. Assim o efeito da associação dessas drogas foi estudado em ratos Wistar em idade reprodutiva, com avaliação da morfometria, estrutura e ultra-estrutura testicular. Foram utilizados 30 ratos divididos em 5 grupos: I- controle; II- tratamento com CsA; III- concomitante uso de CsA e H. aphrodisiaca; IV- pré-tratamento com H. aphrodisiaca por 30 dias, seguido de CsA por 26 dias; V- tratamento com H. aphrodisiaca. CsA foi administrada na dose de 15 mg/kg/dia e H. aphrodisiaca na dose de 0.5 ml de infusão preparada com 25g de raízes secas/100 ml água fervente. Os tratamentos foram administrados diariamente por gavagem, durante 56 dias. Aumento do peso corporal foi observado em todos os grupos, mas os grupos II e III tiveram menor ganho de peso. O peso dos testículos e dos órgãos sexuais acessórios, assim como a proporção e o volume dos compartimentos tubular e intersticial não alteraram nos grupos tratados. Com a administração de CsA houve aumento na proporção de tecido conjuntivo e redução na proporção de células de Leydig que, além disso, eram menores e com citoplasma mais denso que as células dos animais de outros grupos tratados. Por outro lado, a infusão de H. aphrodisiaca resultou em aumento do volume nuclear das células de Leydig. Os níveis de testosterona plasmáticos, o número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo aumentou significativamente nos animais do grupo III. CsA causou degeneração das células germinativas, vacuolização nas células de Sertoli, espermátides arredondadas anormais e atrofia das organelas envolvidas na síntese de esteróides nas células de Leydig. H. aphrodisiaca causou vacuolização nas células de Sertoli, perda do contato e espaçamento entre as células germinativas e aumento de retículo endoplasmático liso e mitocôndrias nas células de Leydig. O tratamento concomitante e sequencial com CsA e H. aphrodisiaca foi efetivo em manter a ultra-estrutura das células de Leydig. Nesses tratamentos, as alterações observadas no epitélio seminífero foram a combinação das modificações observadas em cada tratamento separadamente. Entretanto, H. aphrodisiaca exerceu um efeito protetor no epitélio germinativo, uma vez que as modificações encontradas nesses grupos foram menos severas em relação ao grupo tratado somente com CsA / Abstract: Cyclosporine A (CsA) has potent immunosuppressive properties and it has markedly improved the ability of transplant patients to survive grafts and is also used in some autoimmune diseases. However, the drug has several side effects, including testicular toxicity, leading to male infertility (and temporary impotence?). Stimulant and aphrodisiac properties has been attributed to the plant, Heteropterys aphrodisiaca. Data from other experiments suggests that the root extract can increase body and testicular weight and the volume of Leydig cells in rat testis. Thus, the present work was undertaken to study the association of the drug and the medicinal herb in Wistar rats, evaluating testicular morphometry, structure and ultrastructure. Thirty adult rats were used, divided into five groups: I- control; II¿ CsA; III¿ simultaneous use of CsA and H. aphrodisiaca; IV- H. aphrodisiaca for 30 days and CsA sequentially for another 26 days; V- H. aphrodisiaca. CsA was administered at a dose of 15 mg/kg/day and/or H. aphrodisiaca at a dose of 0.5 ml of the infusion prepared with 25g of roots/100ml boiling water, daily by gavage, during 56 days. Increased body weight was observed for all groups, but the animals that received CsA for 56 days showed the smallest body weight gain. The testis and accessory sex organs weights were unchanged. The volume and volumetric proportion of seminiferous tubules and interstitial compartments did not alter in all treated groups. Morphometry showed increased connective tissue volumetric proportion and decreased Leydig cell volumetric proportion in CsA-treated rats. The Leydig cells of CsA-treated animals were smaller and more dense than other groups. On the other hand, the H. aphrodisiaca infusion resulted in an increase in Leydig cell nuclear volume. The plasma testosterone levels and number of Leydig cells per testis increased significantly in group III. Using transmission electron microscopy, it was possible to ascertain that CsA caused germ cell degeneration, Sertoli cell vacuolization, abnormal round spermatids and atrophy of the organelles involved in steroid synthesis in Leydig cells. H. aphrodisiaca caused Sertoli cell vacuolization, loss of germ cell attachment and expanded intercellular spaces between germ cells and Leydig cells with more mitochondria and smooth endoplasmic reticulum. The simultaneous and sequential treatment with H. aphrodisiaca and CsA was effective in maintaining the Leydig cell ultrastructure. In these treatments, the seminiferous epithelium alterations were a combination of the modifications observed for each isolated treatment. However it can be stated that H. aphrodisiaca had a protective effect on the testicular tissue, since less severe modifications were found for this group in relation to the rats that received only CsA / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Associação de cadmio e Ginko biloba em ratos : avaliação dos testiculos quanto a modificações de estrutura, ultra-estrutura e morfometria / Association of cadmium and Ginko biloba in rats tests : structure, ultrastructure and morphometry

Predes, Fabricia de Souza 16 February 2007 (has links)
Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Predes_FabriciadeSouza_M.pdf: 1559316 bytes, checksum: e206924da33f15ad0daf61b7e2a85726 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: o cádmio (Cd) é um dos poluentes ambientais importantes que causam danos a vários órgãos e tecidos, incluindo os testículos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito protetor e curativo do extrato de G biloba (GbE) nos testículos de ratos adultos Wistar tratados com dose única de Cd. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em 5 grupos que receberam: Grupo 1: água por 56 dias ( controle); Grupo 2: GbE por 56 dias; Grupo 3: CdClz (dose única) e água por 56 dias; Grupo 4: CdCh (dose única) e GbE por 56 dias (Cd + GbE); Grupo 5: pré-tratamento com GbE por 30 dias e CdCh no 31° dia (GbE-Cd). O GbE foi administrado diariamente na dose de 100 mg/Kg de peso corporal por gavagem. O cloreto de cádmio (CdCh) foi injetado intraperitonealmente em dose única de 3 umol/Kg de corporal. Após a coleta de sangue, os ratos foram fixados por perfusão com Kamovsky modificado. Fragmentos de testículo incluídos em metacrilato foram secionados na espessura de 3um e corados com azul de toluidina/borato de sódio 1% para estudo morfométrico em miCroscopia óptica. Para observação em microscópio eletrônico de transmissão fragmentos de testículo foram refixados com tetróxido de ósmio 1 % no mesmo tampão a 4°C, desidratados em acetona e incluídos em Epoxy. Cortes ultrafinos foram feitos com navalha de diamante e contrastados com acetato do uranila 2% e citrato de chumbo 2%. Os níveis de testosterona plasmática obtida por RIA não foram alterados neste estudo. Não houve alteração do peso corporal e testicular, do epidídimo e das glândulas acessórias, vesícula seminal e próstata além do índice gonadossomático. A proporção volumétrica e o volume absoluto dos componentes testiculares não alteraram após os tratamentos. O grupo 3 que recebeu somente Cd teve redução significativa no volume individual das células de Leydig. Entretanto, animais que receberam GbE como pré tratamento ou GbE após a dose de Cd não apresentaram esta redução. Isto sugere que GbE é eficaz em manter o volume das células de Leydig em ratos tratados com Cd. O número de células de Leydig não variou nos grupos estudados. Em microscopia eletrônica foram visíveis os efeitos do Cd nos testículos. Nas células de Sertoli foram observados vacuolização citoplasmática, alterações nas junções celulares e acúmulo de gotículas de lipídio e corpos residuais. Espaços intercelulares expandidos foram observados no epitélio germinativo. Cromatina irregularmente condensada e acrossoma anormal foram encontradas em espermátides alongadas. Algumas células endoteliais sofreram alterações morfológicas no núcleo e perderam algumas junções. As células de Leydig mostraram o citoplasma denso com organelas, como retículo endoplasmático liso e mitocôndrias, mal definidas. A administração de GbE após a dose de Cd mostrou-se eficaz em manter a ultraestrutura normal dos testículos do rato. Diferentemente, o pré-tratamento com GbE não foi eficaz em proteger o epitélio seminífero da toxicidade do Cd. Entretanto, as células de Leydig apresentaram morfologia normal com o retículo endoplasmático liso bem definido e numerosas mitocôndrias. Conclui-se que a administração de GbE por 56 dias após dose única de 3 umol de CdCh é capaz de proteger todo o parênquima testicular dos efeitos tóxicos do Cd. Entretanto, o pré-tratamento com GbE não protegeu o epitélio seminífero, mas foi eficaz em proteger as células de Leydig dos efeitos tóxicos do cádmio / Abstract: Cadmium is one of the important environmental pollutants that affect various organs and tissues, including the testis. The aim of this study was to investigate the protective and curative effect of G. biloba extract (GbE) on cadmium-induced testis damage of adult Wistar rats. Thirty rats were randomly divided in five groups that consisted in :Group 1: water for 56 days (control); Group 2: GbE for 56 days; Group 3: CdClz (single dose) and water for 56 days; Group 4: CdCh (single dose) and GbE for 56 days (Cd + GbE); Group 5: pre-treatment with GbE for 30 days and CdCh on the thirty-first day (GbE-+Cd).The GbE was administered daily in a dose of 100 mg/Kg BW by gavage. The cadmium chloride (CdCh) was injected i.p. in a single dosage of 3 umol/Kg BW. After blood collection, rats were fixed by whole-body perfusion in Karnovsky fixative. Methacrylate-embedded testis fi-agments were sectioned at 3um thickness and stained with toluidine blue/sodium borate 1 % for morphometric study in the light microscope. For electron microscopy transmission examination, testis fragments were post-fixed with 1 % osmium tetroxide in the same buffer at 4°C, dehydrated in acetone and embedded in epoxy resin. Ultrathin sections were cut with a diamond knife and stained with 2% uranyl acetate and 2% lead citrate prior to observation. Plasma testosterone values obtained by the RIA method were not modified in this study. No change occurred in the average of corporal and testicular weight, gonadosomatic index, epididymis and accessory glands weight. The volumetric proportion and absolute volume oftesticular componenfs did not change after the treatments. Group 3 had a significant reduction in Leydig cell individual volume. However, animals that received GbE as pre-treatment or GbE after a cadmium dose did not present this reduction of Leydig cell volume. This suggests that GbE is effective in maintaining Leydig cell volume in cadmium-damaged testis. The number ofLeydig cells did not vary in any group studied. In electron microscopy observations, this Cd dose caused visible alterations in the testis. Cytoplasmic vacuolation, disruption oftight junctions, accumulation oflipid droplets and residual bodies were observed in Sertoli cells. Expanded intracellular spaces were observed between the tubule cells. Irregularly condensed chromatin and abnormal acrosomes were found in late spermatids. Endothelium was affected, showing some disruption of tight junetions and morphologieally altered nuclei. Leydig eells showed a dense eytoplasm with poorly defined organelles sueh as SER and mitoehondria. The administration of GbE after the Cd dose is effeetive in maintaining almost normal rat testis ultrastructure. However, GbE pretreatment was not able to protect testis from Cd toxicity, since toxicity signals were observed in the seminiferous epithelium. However, Leydig cells showed the normal morphology with well-defined and abundant smooth endoplasmic reticulum and mitochondria. It can be concluded that, GbE administration for 56 days after a single dose of 3 umol of CdCh could protect the testicular parenchyma from Cd toxic effects. However, GbE pretreatment did not protect the seminiferous epithelium, although it was effective in protecting Leydig cells from Cd toxic effeets / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Efeitos da atividade física na estrutura da cartilagem articular de joelho de ratas ooforectomizadas / The effects of the physical activity in the articular cartilage structure in the knee of ovariectomized rats

Renata Gabriel Fontinele 22 January 2008 (has links)
A incidência de osteoartose, ou degeneração da cartilagem articular aumenta na pós-menopausa, condição esta relacionada à deficiência de estrógeno. Por outro lado, tem sido demonstrado que a atividade física regular e moderada tem efeitos benéficos sobre o sistema esquelético, em qualquer condição, mas especialmente na menopausa. Utilizando ratos Wistar, como modelo experimental, os objetivos deste trabalho são: a) verificar se a ooforectomia produz alterações na estrutura da cartilagem articular da epífise proximal da tíbia e b) verificar se a realização de exercícios físicos aeróbicos tem efeito sobre estas alterações. Para a realização deste estudo foram utilizadas 24 ratas com 6 meses de idade, da linhagem Wistar, distribuídas em 3 grupos de oito ratas cada: GC-Ratas com seis meses de idade, não submetidas à ooforectomia nem atividade física; GOS-Ratas com seis meses de idade, que sofreram ooforectomia bilateral, mas que não fizeram atividade física e, GOT-Ratas com seis meses de idade que foram submetidas à ooforectomia bilateral mais atividade física (corrida em esteira) durante 3 meses. Todos os animais foram eutanasiados com 9 meses de idade. A avaliação foi realizada através de microscopia de luz em cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina e pelo Picrossírius e estudos à microscopia eletrônica de varredura. À microscopia de luz, foram feitas medidas da espessura das zonas da cartilagem articular, contado o número de condrócitos por área, determinados os volumes dos núcleos dos condrócitos e a densidade de volume das fibras colágenas e à microscopia eletrônica de varredura foi analisada a superfície da cartilagem nos três grupos. Os dados quantitativos foram comparados estatisticamente pelo ANOVA e teste de Tukey. Os resultados mostraram que houve um aumento de peso nos animais do GOS e GOT em relação ao GC. Quanto ao treinamento, os animais do GOT tiveram melhor rendimento nos TEMs. Quanto à espessura da cartilagem observamos um aumento da espessura da zona superficial no côndilo medial da tíbia no GOS em relação ao GC. O número de condrócitos por campo foi alterado apenas no GOS, que mostrou um aumento de 34% em relação ao GC, o que, ao que parece, se deveu ao aumento do número de condrócitos da camada profunda. O volume nuclear dos condrócitos da zona superficial foi menor no GOS que no GC. O mesmo ocorreu na zona média do côndilo medial. Quanto aos valores da cartilagem da epífise proximal como um todo, observamos que o volume nuclear dos condrocitos do GOS e também do GOT foram menores do que do GC. Para o colágeno observamos um aumento da densidade de volume do colágeno no GOS e no GOT em relação ao GC. A microscopia eletrônica revelou a presença de lesões degenerativas semelhantes tanto para o GOS, quanto para o GOT. Podemos concluir que a depressão dos níveis de estrógeno acarreta alterações importantes na cartilagem articular da epífise proximal da tíbia tanto no componente celular, quanto na matriz e que a realização de exercícios físicos, isoladamente, parece não influenciar essas alterações. / The incidence of osteoarthritis increase in women in the post-menopausal period. This condition is relationed with the estrogen deficiency. Otherwise, it\'s being demonstrated that regular or moderate physical activity have beneficial effects on the skeletal system, in any condition, but especially in the menopause. Using Wistar rats, as an experimental model, the aims of this work are: a) to check if the ovariectomy produces alterations in the articular cartilage structure of the tibial proximal epiphysis and b) To check if aerobic physical exercises have effects on this alterations. To achieve these goals it was used 24 Wistar rats of 6 months of age, distributed in 3 groups of eight rats each: Control group- Rats with six months of age without ovariectomy and physical activity; GOS- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and without physical activity and, GOT- Rats with six months of age with ovariectomy bilateral and physical activity during 3 months. Al rats were euthanasied with 9 months of age. The results were obtained by using light microscopy to observe the histological sections stained with Hematoxylin and Eosin, and Picrosirius stain and the Scanning Electron Microscope. For light microscopy, were measured the thickness of cartilage, counted the number of chondrocytes, determined the volumes nuclei of chondrocytes and the density of volume of the collagens fibers. For the Scanning Electron Microscope, was analyzed the cartilage surface in the three groups. The data were statistically compared for the ANOVA and Tukey´s test. The results showed that there was an increase in the weight in the animals of GOS and of GOT. In relation to training, the animals of GOT obtained the best income in the TEMs. In relation to the thickness of the articular cartilage it was observed a decrease in the superficial layer of the medial condyle in the GOS and GOT. The number of chondrocytes was altered only in the GOS, that obtained an increase of the 34% on GC in the deep layer. The nuclear volume of chondrocytes in the superficial layer was higher in the GC than the GOS .The same occurred in the medium layer when the two tibial condyles, lateral and medial were assessed separately, but when the values of the epiphysial cartilage was considered as a whole, we found that the volume nuclei of chondrocytes in the GC was higher than the GOS and the GOT. For the collagen, the values of density of volume of the collagen fibers was higher in the GOS and in the GOT than the GC. The Scanning Electron microscopy showed the presence of degenerative lesions in both GOS and GOT. We can conclude that the depression levels of estrogen produced important changes in the tibial cartilage and that the physical activity doesn\'t have effects on these changes.

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