Orientador: Fabio Ramoa Pires / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T12:19:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Azevedo_RebecadeSouza_M.pdf: 4868074 bytes, checksum: 58d90f52fd964c01b78efa26a4a55ae8 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O carcinoma mucoepidermóide (CME) é a neoplasia maligna de glândulas salivares mais comum, apresentando grande diversidade de tipos celulares e histogênese incerta e controversa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão imunohistoquímica de citoqueratinas (CKs) de epitélios simples (CKs 7, 8, 18 e 19) e de epitélios complexos (CKs 6, 13 e 14) e de um marcador de diferenciação mioepitelial (actina de músculo liso - AML) em CMEs de glândulas salivares maiores e menores nas diferentes gradações histológicas, na tentativa de estabelecer correlação entre a imunopositividade das células tumorais e o processo de diferenciação e histogênese. Foram selecionados 80 casos de CMEs de glândulas salivares do Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço e Otorrinolaringologia do Hospital do Câncer/A.C. Camargo, São Paulo, entre 1957 e 1997. Os locais mais acometidos foram parótida (47,5%) e palato (26,3%). Do total, 45% dos casos foram classificados como de alto grau, 44% de baixo grau, e somente 11% de grau intermediário de malignidade. Células escamosas estavam presentes em 98% dos casos, intermediárias em 71%, mucosas em 54%, claras em 30%, colunares em 29% e oncocíticas em 3%. O padrão de crescimento neoplásico mostrou proporção similar entre os arranjos sólido (89%) e cístico/ductal (81%). A expressão das CKs variou de acordo com o tipo celular: células escamosas apresentaram alta expressão de CKs 6, 7, 8, 14, 18 e 19; células intermediárias de CKs 6, 7 e 8; células mucosas somente de CK7; células claras de CKs 6, 7 e 8; e células colunares de CKs 6, 7, 8 e 18. A CK13 mostrou expressão reduzida em todos os tipos celulares. Diferenciação mioepitelial, embora infreqüente, foi mais observada nas células escamosas e intermediárias. Nas glândulas salivares normais adjacentes, ácinos serosos e mucosos apresentaram alta expressão imunohistoquímica de CK18; ductos intercalados de CKs 6, 7, 18 e 19; ductos estriados de CKs 6, 7, 8, 13, 18 e 19; células ductais excretoras de CKs 6, 7, 8, 18 e 19; células basais excretoras de CK14; e células mioepiteliais de AML e CK14. A grande variedade de tipos celulares associada à expressão imunohistoquímica de diferentes CKs e em menor proporção de AML, similar aos ductos excretores, reforça o conceito de origem do CME a partir de células indiferenciadas pluripotentes localizadas nos ductos excretores das glândulas salivares normais / Abstract: Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignat salivary gland tumor, composed of several different cell types, with unsettled and controversial histogenesis. The purpose of this study was to analyze the immunohistochemical expression of cytokeratins (CKs) of simple epithelia (7, 8, 18 and 19) and stratified epithelia (6, 13 and 14) and a myoepithelial marker (smooth muscle actin - SMA) â?¿in MECs from major and minor salivary glands in their different histological grading, in order to establish a correlation between tumor cells immunostain and MEC histogenesis and differentiation. Eighty cases of salivary gland MECs retrieved from the Department of Head and Neck Surgery and Otorhinolaryngology/A.C. Camargo Cancer Hospital, São Paulo, Brazil, from 1957 to 1997, were selected. The most common sites were parotid (47,5%) and palate (26,3%). From the total, 45% of the cases were classified as high grade, 44% as low grade, and only 11% as intermediate grade. Squamous cells were present in 98% of the cases, intermediate cells in 71%, mucous cells in 54%, clear cells in 30%, columnar cells in 29% and oncocytic cells in 3%. Tumor organization showed similar amount of solid nests (89%) and cystic structures or duct-like elements (81%). Cytokeratin expression was variable according to the cellular type: squamous cells presented high expression of CKs 6, 7, 8, 14, 18 and 19; intermediate cells of CKs 6, 7 and 8; mucous cells only of CK7; clear cells of CKs 6, 7 and 8; and columnar cells of CKs 6, 7, 8 and 18. CK13 was infrequently expressed in all cell types. Myoepithelial expression, albeit uncommon, was more frequently observed in squamous and intermediate cells. In normal salivary gland tissue found adjacent to the tumors, serous and mucous acini showed high immunohistochemical expression of CK18; intercalated ducts of CKs 6, 7, 18 and 19; striated ducts of CKs 6, 7, 8, 13, 18 and 19; ductal cells of excretory ducts of CKs 6, 7, 8, 18 and 19; basal cells of excretory ducts of CK14; and myoepithelial cells of SMA and CK14. The diversity of cellular types associated to the immunohistochemical expression of different CKs and, in less amount of SMA, similarly to excretory ducts reinforces the concept of MEC origin from pluripotential cells localized at the excretory ducts of normal salivary glands / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

O carcinoma mucoepidermoide (CME) é a neoplasia maligna de glândula salivar mais comum, e com maior frequência de metástase linfonodal. Alterações genéticas estão intimamente associadas à carcinogênese e, também, aos processos de metástase tumoral. Para o CME o tratamento de escolha mais aplicado hoje é a cirurgia seguida de radioterapia, pois a quimioterapia não tem mostrado muita eficiência para o tratamento destas neoplasias. Entre os quimioterápicos mais prescritos para o tratamento de cânceres encontra-se a cisplatina, à base de platina, que atua no DNA da célula, induzindo a apoptose. Pouco se sabe a respeito de seu mecanismo de ação sobre o CME, inclusive sobre os genes homeobox. Estes genes compreendem uma família grande e essencial de reguladores do desenvolvimento que são vitais para o crescimento e diferenciação celular, e a expressão anômala destes genes têm sido implicados na carcinogênese. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar a expressão dos genes homeobox em células derivadas de carcinoma mucoepidermoide tratadas com cisplatina. Os genes avaliados neste trabalho foram: PROX1, MEIS1, HOXB5, HOXB7 e HOXB9 por RT-qPCR. Previamente, as linhagens celulares derivadas de carcinoma mucoepidermoide UM-HMC1 UM-HMC2 e UM-HMC3A foram tratadas com a cisplatina por 24h e posteriormente submetidas aos ensaios de RT-qPCR. Adicionalmente, as amostras tratadas e sem tratamento foram analisadas pelo ensaio de formação de esferas e ensaio de ferida para verificar o efeito da cisplatina sobre propriedades relacionadas às células quimiorresistentes (putativas células tronco tumorais). Como resultados, entre os genes analisados foram expressos PROX1, MEIS1 e HOXB7. A UM-HMC3A apresentou maior expressão destes genes que as demais linhagens. Os genes HOXB5 e HOXB9 não foram expressos nas linhagens analisadas. A cisplatina reduziu a expressão de MEIS1 e aumentou a expressão de HOXB7, em todas as linhagens. O gene PROX1 apresentou expressão variável entre as linhagens, sendo expresso na UM-HMC1 apenas quando são tratadas com cisplatina e reduzido nas UM-HMC2 e UM-HMC3A tratadas. O número de esferas formadas não apresentou diferença significativa para UM-HMC1 e UM-HMC3A, o número de esferas aumentou na linhagem UM-HMC2 tratada com cisplatina. No ensaio de ferida, a cisplatina foi capaz de reduzir a migração celular em todas as linhagens quando comparadas com seus controles. Os resultados sugerem que o PROX1 e HOXB7 podem estar relacionados com carcinomas mucoepidermoides mais invasivos, enquanto que o MEIS1 pode estar relacionado à carcinogênese e autorrenovação tumoral. A cisplatina é capaz de afetar a expressão dos genes homeobox PROX1, MEIS1 e HOXB7, os quais foram encontrados nas linhagens de carcinoma mucoepidermoide analisados. A cisplatina não afeta as células formadoras de esferas, mas reduzir a migração das linhagens de carcinoma mucoepidermoide. / Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignant neoplasm of salivary gland and presents higher frequency of lymph node metastasis. Genetic alterations are closely associated with carcinogenesis and also with processes of tumor metastasis. For MEC the treatment of choice most applied today is surgery followed by radiotherapy, since chemotherapy has not shown much efficiency for the treatment of these neoplasms. Among the most commonly prescribed chemotherapic drugs for cancer treatment is platinum-based cisplatin, which acts on the cell\'s DNA, inducing apoptosis. There is no information in the literature regarding its action mechanism on MEC including homeobox genes. These genes comprise a large and essential family of developmental regulators that are vital for cell growth and differentiation and the anomalous expression of these genes have been implicated in carcinogenesis. Therefore, this work aimed to evaluate the expression of the homeobox genes in cells derived from mucoepidermoid carcinoma treated with cisplatin. The genes evaluated in this work were: PROX1, MEIS1, HOXB5, HOXB7 and HOXB9 by RT-qPCR. Previously, cell lines derived from mucoepidermoid carcinoma UM-HMC1 UM-HMC2 and UM-HMC3A were treated with cisplatin for 24h and subsequently subjected to the RT-qPCR assays. In addition, treated and untreated samples were analyzed by the sphere-forming assay and wound assay to verify the effect of cisplatin on chemo resistant cell-related (putative tumor stem cell) properties. As results, PROX1, MEIS1 and HOXB7 were expressed among the analyzed genes. UM-HMC3A showed higher expression of these genes than the other lineages. The HOXB5 and HOXB9 genes were not expressed in the analyzed lineages. Cisplatin reduced MEIS1 expression and increased HOXB7 expression in all lineages. The PROX1 gene showed variable expression between the lineages, being expressed in UM-HMC1 only when treated with cisplatin and reduced in treated UM-HMC2 and UM-HMC3A. The number of spheres formed did not show significant difference for UM-HMC1 and UM-HMC3A, the number of spheres increased in the cisplatin-treated UM-HMC2 lineage. In the wound assay, cisplatin was able to reduce cell migration in all lineages when compared to their controls. The results suggested that PROX1 and HOXB7 may be related to more invasive mucoepidermoid carcinoma, while MEIS1 be related to its carcinogenesis and selfrenew tumoral capacity. Cisplatin is capable to affect the expression of the homeobox genes PROX1, MEIS1 and HOXB7, which were found in the mucoepidermoid carcinoma cell lines analyzed. Cisplatin does not affect sphere formation of cells, but seems to reduce the migration of mucoepidermoid carcinoma lineages.

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Orientador : Marcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T00:25:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_FabioAugusto_D.pdf: 9945598 bytes, checksum: 5d7825a97ef3dd77141a70dd22e719c3 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Além de incomuns, os tumores de glândulas salivares despertam interesses por apresentarem uma grande diversidade histológica, morfológica e de comportamento biológico. Nas últimas décadas vários estudos têm mostrado que tais diversidades estão relacionadas ao acúmulo de alterações genéticas. As investigações de tais alterações são importantes para entender os mecanismos de oncogênese, avaliar o comportamento biológico e conseqüentemente aperfeiçoar terapêuticas favorecendo o prognóstico. O objetivo deste estudo foi analisar as características histopatológicas e imunohistoquímicas dos quatro tumores de glândulas salivares mais freqüentes: adenoma pleomórfico, carcinoma mucoepidermóide, tumor de Warthin e carcinoma adenóide cístico. Para isso foi realizada análise histológica do componente epitelial e mesenquimal dos adenomas pleomórficos, classificação histológica dos tumores de Warthin, carcinomas mucoepidermóides e carcinomas adenóide cístico e estudo imunohistoquímico para Ki-67, EGF, EGFR, ErbB-2, FAS, receptor de andrógeno, receptor de estrógeno e receptor de progesterona. Dos 189 casos de adenoma pleomórfico selecionados para o estudo histopatológico, 99 (52,4%) foram classificados como estroma-rico, 69 (36,5%) como celular e 21 (11,1%) como clássico. Dos 30 casos de tumor de Warthin, 17 casos (56,7%) foram classificados como típicos, 10 (33,3%) como estroma pobre e 3 (10%) como estroma-rico. Dos 30 casos de carcinoma mucoepidermóide, 15 casos (50%) foram classificados histologicamente como de baixo grau, 3 (10%) como grau intermediário e 12 (40%) como de alto grau. Dos 30 casos de carcinoma adenóide cístico, 15 casos (50%) foram classificados como cribriforme, 8 (26,7%) como tubular e 7 (23,3%) como sólido. Ki-67, EGFR e ErbB-2 foram mais freqüentemente encontrados em carcinomas mucoepidermóides, principalmente em tumores de alto grau de malignidade. EGF e FAZ foram encontrados mais freqüentemente em adenomas pleomórficos e carcinomas mucoepidermóides. Todos os casos estudados foram negativos para receptor de estrógeno e receptor de progesterona. Receptor de andrógeno foi positivo em apenas 2 casos de adenoma pleomórfico, 2 de carcinoma mucoepidermóide e 2 de carcinoma adenóide cístico. Concluindo, EGFR, ErbB-2 e FAS parecem desempenhar papel na tumorigênese de tumores de glândulas salivares, especialmente em carcinomas mucoepidermóides, e devem ser mais extensivamente estudados; receptor de estrógeno e receptor de progesterona não desempenham papel na tumorigênese de adenomas pleomórficos, tumores de Warthin, carcinomas mucoepidermóides e carcinomas adenóide cístico; e apesar de poucos casos positivos em tumores de glândulas salivares, receptor de andrógeno deve ser melhor estudado e considerado como potencial alvo em tratamentos com drogas anti-andrógenos / Abstract: Beyond uncommon, salivary gland tumors are interesting because their great diversity of histological, morphological and biological behavior. In the last decades some studies have shown that such diversities are related to the accumulation of genetic alterations. The investigation of such alterations are important to understand the mechanisms of oncogenesis, to evaluate the biological behavior and consequently to improve therapeutics favoring the prognosis. The aim of this study was to analyze the histopathological and immunohistochemical characteristics of the four more frequent salivary gland tumors: pleomorphic adenoma, mucoepidermóide carcinoma, Warthin¿s tumor and adenoid cystic carcinoma. For this, it was realized the histological analysis of the epithelial and mesenchymal components of pleomorphic adenomas, histological classification of Warthin¿s tumors, mucoepidermoid carcinomas and adenoid cystic carcinoma and immunohistochemical study for Ki-67, EGF, EGFR, ErbB-2, FAS, androgen receptor, estrogen receptor and progesterone receptor. Of the 189 cases of pleomorphic adenoma selected for the histopathological study, 99 (52.4%) were classified as stroma-rich, 69 (36.5%) as cellular and 21 (11.1%) as classic. Of the 30 cases of Warthin¿s tumor, 17 cases (56.7%) were classified as typical, 10 (33.3%) as stroma-poor and 3 (10%) as stroma-rich. Of the 30 cases of mucoepidermoid carcinoma, 15 cases (50%) were classified as low grade, 3 (10%) as intermediate grade and 12 (40%) as high grade. Of the 30 cases of adenoid cystic carcinoma, 15 cases (50%) were classified as cribriform, 8 (26.7%) as tubular and 7 (23.3%) as solid. Ki-67, EGFR and ErbB-2 were more frequently found in mucoepidermoid carcinomas, particularly in high grade tumors. EGF and FAS were more frequently found in pleomorphic adenomas and mucoepidermoid carcinomas. All studied cases were negative for estrogen receptor and progesterone receptor. Androgen receptor was positive in only 2 cases of pleomorphic adenoma, 2 of mucoepidermoid carcinoma and 2 of adenoid cystic carcinoma. In conclusion, EGFR, ErbB-2 and FAS seem to play a role in the tumorigenesis of salivary gland tumors, especially in MEC, and they should be more extensively studied; estrogen receptor and progesterone receptor do not play a role in the tumorigenesis of pleomorphic adenomas, Warthin¿s tumors, mucoepidermoid carcinomas and adenoid cystic carcinomas; and regardless of few positive cases in salivary gland tumors, androgen receptor should be better studied and considered as potential targets for treatment with anti-androgens drugs / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T21:50:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_AnaFlaviadeMattos_M.pdf: 3298163 bytes, checksum: 3fb6838b3da137877a94a25afd98a7e4 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Para investigar se carcinomas salivares com e sem diferenciação mioepitelial poderiam apresentar diferenças em relação ao nível de angiogênese, nós comparamos a vascularização tumoral entre os carcinomas adenóide cístico (31 casos) e epitelial mioepitelial (14 casos) versos carcinoma mucoepidermóide (37 casos). A expressão da peroxiredoxina I foi também estudada para verificar a relação potencial entre o metabolismo celular e a densidade microvascular. A densidade microvascular para o CD34 e CD105 foi significantemente menor em carcinomas com diferenciação mioepitelial. Porém, nenhuma relação foi encontrada entre a angiogênese e a quantidade de células mioepiteliaís. A forte expressão de peroxiredoxina I foi encontrada em 73.7% de carcinomas mucoepidermóides enquanto que 85.1% dos carcinomas com diferenciação mioepitelial apresentaram fraca expressão. Em conclusão, carcinomas com diferenciação mioepitelial, independente da quantidade de células mioepiteliaís, estão associados com significante baixa densidade microvascular. As razões para essa baixa atividade angiogênica ainda deve ser esclarecida, mas pode ser relacionada com as características metabólicas das células cancerosas. / Abstract: To investigate whether salivary carcinomas with and without myoepithelial differentiation could present differences regarding degree of angiogenesis, we compared tumor vascularization between adenoid cystic (31 cases) and epithelial- myoepithelial carcinomas (14) versus mucoepidermoid (37) carcinoma. The expression of peroxiredoxin I was also studied to verify the potential relationship between cellular metabolism and microvascular density. Microvascular density for CD34 and CD105 were significantly lower in carcinomas with myoepithelial differentiation. However, no correlation was found between degree of angiogenesis and amounts of myoepithelial cells. High-grade peroxiredoxin I expression was found in 73.7% of mucoepidermoid carcinomas whereas 85.1 of carcinomas with myoepithelial differentiation presented low-grade expression. In conclusion, carcinomas with myoepithelial differentiation, regardless of the amounts of myoepithelial cells, are associated to a significantly lower vascular density. The reasons for this lower angiogenic activity remain to be determined, but could be related to metabolic characteristics of the cancer cells. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas