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Modelos de indução de hiperlipidemia e avaliação do efeito hipolipidêmico de flavonóides e corantes naturais em frangos de corte / Induction models of hyperlipidaemia and evaluation of the hypolipidaemic effect flavonoids and natural colorants in chicksSilva, Rosimar Regina da 20 February 2001 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-26T17:02:38Z
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Previous issue date: 2001-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Vários estudos têm mostrado que os flavonóides e corantes naturais apresentam propriedades biológicas como antioxidante, antiinflamatória, hipolipidêmica, anticancerígena, antibacteriana e hipotensora. Além disso, o uso de corantes naturais em alimentos constitui atualmente uma tendência mundial, em função da maior demanda por produtos naturais. Objetivando avaliar o efeito hipolipidêmico dos flavonóides naringina e rutina, e dos corantes naturais cúrcuma e norbixina, isoladamente, e avaliar o efeito de colesterol, ácido cólico e diferentes concentrações de gordura suína na indução de hiperlipidemia em aves da linhagem Avian farms, foram realizados três ensaios. O primeiro e segundo ensaios foram realizados com pintos de corte, machos, de um dia de idade, normolipidêmicos, sendo que no primeiro ensaio os flavonóides e corantes naturais foram administradas via oral, misturados à ração, na dose de 20 mg por ave por dia. O segundo ensaio foi realizado para induzir a hiperlipidemia, com a administração, via oral, misturados à ração, das seguintes substâncias: 1% de colesterol e 0,1% de ácido cólico, 5% de gordura suína e 10% de gordura suína. No terceiro ensaio, os flavonóides e corantes naturais foram administrados via oral, misturados à ração, na dose de 20mg por ave por dia, sendo que este ensaio foi realizado com pintos machos, com hiperlipidemia induzida com 0,7% de colesterol, 0,1% de ácido cólico e 10% de gordura suína. Foram determinados os níveis plasmáticos de colesterol total, colesterol-HDL, colesterol-LDL, colesterol-VLDL e triacilgliceróis em todos os ensaios. No primeiro ensaio, os flavonóides e corantes naturais administrados em pintos de corte normais, não apresentaram efeito hipolipidêmico. No ensaio de indução de hiperlipidemia observou-se que os animais que receberam ração suplementada com 10% de gordura suína e os que receberam 0,7% de colesterol e 0,1% de ácido cólico apresentaram aumentos significativos nos níveis de todos os constituintes avaliados, constatando-se que estas substâncias, nas concentrações testadas, são efetivas na indução de hiperlipidemia. No terceiro ensaio, observou-se que todas as substâncias testadas (naringina, rutina, cúrcuma e norbixina) apresentaram reduções significativas nos níveis de colesterol total, colesterol- LDL, colesterol-VLDL e triacilgliceróis, não alterando os níveis de colesterol- HDL. Estes resultados demonstram que estas substâncias apresentam efeito hipolipidêmico quando administradas em aves com hiperlipidemia induzida pela dieta. / Several studies have been showed that flavonoids and natural colorants present biological properties as antioxidant, antiinflammatory, hypolipidemic, anticarcinogenic, antibactericidal, antihypertensive. Natural colorants are important in foods and constitutes a world tendency due the largest demand for natural products. In order to evaluate the hypolipidaemic effect of flavonoids naringin, rutin and the natural colorants curcumin and norbixin, isolately, besides the cholesterol, colic acid and different concentrations of pig fat effects in the hyperlipidaemia induction in chicks of the lineage Avian farms, three experiments were accomplished. The first and second experiments were accomplished in male chicks, day one old, normolipidaemic, beeing the first by using flavonoids and natural colorants were administered orally, mixed to the ration, in the dosis of 20 mg/chick/day. The second experiment was accomplished by inducing the hyperlipidaemia, with the orally administration, mixed in the ration, of the following substances: 1% of cholesterol and 0,1% of colic acid and pig fat 5% and 10% concentration. In the third experiment, the flavonoids and natural colorants were orally administered, mixed to the ration, in the dosis of 20 mg/chick/day, and this experiment was accomplished in male chicks, with hyperlipidaemia induced by using 0,7% of cholesterol, 0,1% of colic acid and 10% of pig fat. The serum levels of total cholesterol, cholesterol-HDL, cholesterol-LDL, cholesterol-VLDL and triacilglycerols were dosed. The results showed that in the first experiment, was not observed hypolipidaemic effect. In the second experiment could be observed that the animals which received ration with 10% of pig fat and the others which received 0,7% of cholesterol and 0,1% of colic acid presented significant increases in all parameters evaluated, showing that these substances, were effective in hyperlipidaemia induction. In the third experiment, the results showed that naringin, rutin, curcumin and norbixin presented significant reductions in the total cholesterol, cholesterol-LDL, cholesterol-VLDL and triacilglycerols levels without increasing of cholesterol-HDL level. These results demonstrate that these substances present effect hypolipidaemic when administered in chicks with hyperlipidaemia induced by diet.
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AVALIAÇÃO DO EFEITO NEUROPROTETOR DA NARINGINA E NARINGENINA NANOENCAPSULADAS EM MODELO DE DEMÊNCIA INDUZIDA POR ESTREPTOZOTOCINA EM CAMUNDONGOSFerreira, Carla Fontoura 30 March 2017 (has links)
Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-20T12:34:53Z
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Previous issue date: 2017-03-30 / Reactive species (ERs) and oxidative stress contribute to the pathophysiology of several
diseases including dementia. An innovative alternative for protecting organs such as the
brain is the use of antioxidant-like flavonoids such as naringin and naringenin.
However, these two compounds have low bioavailability when administered orally. An
alternative to overcome this limitation is the use of nanocarriers, such as nanocapsules
(NC). Therefore, the present study aimed to evaluate the neuroprotective effect of
naringin and naringenin in a model of streptozotocin (STZ) -induced dementia in mice.
The profile of drug release from in vitro suspensions was evaluated as well as the
effects of nanoencapsulated drugs on cell viability with Vero cell line. In addition, the
involvement of oxidative stress in the brain tissue of mice was verified. Naringin and
naringenin NC had acid pH, particle diameter less than 95 nm, polydispersity index
(IPD) of less than 0.2. The zeta potential was negative, between -12.46 and -17.6 mV,
and the encapsulation efficiency was 93% for naringin and 95% for naringenin. For the
study of the release profile, the dialysis technique was used, with 46.5% of naringin and
6.9% of naringenin being released in the medium, in a period of 9h. The results of the
cell viability assay showed that the NC suspensions caused a reduction in cell viability
of Vero cells at concentrations of 5, 50 and 500 μg / ml when compared to the control at
the 24 and 72h incubation periods. For in vivo evaluation of neuroprotection the mice
were pretreated for 15 days by oral (vo) with the suspension of white nanocapsules
(NB), NC containing the mixture naringin and naringenin (N-NANG), suspension of
naringin and naringenin in the form Free (NANG) and vehicle (Sham) at dose 10 mg /
kg body weight. Subsequently, stereotactic surgery was performed for
intracerebroventricular (i.c.v) infusion of STZ or FAC (cerebral artificial fluid).
Behavioral tasks were then initiated. In the open field task the locomotor activity
differed in the test section in the NB + STZ group evidenced by a hyperlocomotion
between the mice of this experimental group. For exploratory activity there was no
significant difference between groups. In the evaluation of the short-term memory in the
task of object recognition the animals treated with N-NANG did not recognize the new
object. For the long-term memory there was learning only for the mice treated with NB.
The mice treated with NB + STZ had memory impairment assessed in the task of
inhibitory avoidance, and pre-treatment with N-NANG prevented this effect. In the
evaluation of the anti-depressive and anxiolytic-type effects, it was observed that the NNANG
+ STZ induced greater body activity in the twist parameter in the tail suspension
task and in the high "zero" labyrinth there was an increase in the number of spies
Relative to the free drug. Regarding the levels of brain antioxidants, there were no
changes in the levels of reduced glutathione (GSH) and catalase activity (CAT). The NB
+ STZ group significantly increased levels of brain lipid peroxidation of thiobarbituric
acid reactive species (TBA). N-NANG administration reduced the peroxidation induced
by STZ. Thus, it can be concluded that the CNs present characteristics suitable for oral
administration. In vivo studies demonstrate that pre-treatment with naringin and
naringenin NC was preventative and able to reverse memory deficits, type-depressive
and anxiolytic behavior caused by STZ in mice. However, this preventive effect was not
observed with the flavonoids in the free form. / As espécies reativas (ERs) e o estresse oxidativo contribuem para a fisiopatologia de
diversas doenças entre elas a demência. Uma alternativa inovadora de proteção aos
órgãos como o cérebro é o uso de flavonoides com ação antioxidante como a naringina
e naringenina. No entanto, esses dois compostos apresentam baixa biodisponibilidade
quando administrados pela via oral. Uma alternativa para contornar esta limitação é o
uso de nanocarreadores, como as nanocápsulas (NC). Diante disso, o presente estudo
teve por objetivo avaliar o efeito neuroprotetor de NC contendo naringina e naringenina
em modelo de demência induzida por estreptozotocina (STZ) em camundongos. Foram
avaliados o perfil de liberação dos fármacos a partir das suspensões in vitro assim como
determinados os efeitos dos fármacos nanoencapsulados na viabilidade celular com
linhagem de células Vero. Além disso, foi verificado o envolvimento do estresse
oxidativo no tecido cerebral dos camundongos. As NC de naringina e naringenina
apresentaram pH ácido, diâmetro de partícula inferior a 95 nm, índice de polidispersão
(IPD) menor que 0,2. O potencial zeta foi negativo, entre -12,46 e -17,6 mV e a
eficiência de encapsulação foi de 93% para naringina e 95% para a naringenina. Para o
estudo do perfil de liberação, foi empregada a técnica de diálise, sendo que 46,5% da
naringina e 6,9% da naringenina foram liberadas no meio, em um período de 9h. Os
resultados do ensaio de viabilidade celular mostraram que as suspensões de NC
causaram redução da viabilidade celular das células Vero nas concentrações de 5, 50 e
500 μg/mL quando comparadas ao controle nos períodos de 24 e 72h de incubação. Para
avaliação in vivo da neuroproteção os camundongos foram pré-tratados durante 15 dias
via oral (v.o) com a suspensão de nanocápsulas brancas (NB), NC contendo a mistura
naringina e naringenina (N-NANG), suspensão de naringina e naringenina na forma
livre (NANG) e veículo (Sham) na dose 10 mg/kg corporal. Subsequentemente foi
realizada a cirurgia estereotáxica para a infusão via intracerebroventricular (i.c.v) de
STZ ou FAC (fluido artificial cerebral). Posteriormente foram iniciadas as tarefas
comportamentais. Na tarefa do campo aberto a atividade locomotora diferiu na seção
teste no grupo NB+STZ evidenciada por uma hiperlocomoção entre os camundongos
deste grupo experimental. Para atividade exploratória não houve diferença significativa
entre os grupos. Na avaliação da memória de curto prazo na tarefa de reconhecimento
de objetos os animais tratados com N-NANG não reconheceram o objeto novo. Para a
memória de longo prazo houve aprendizagem somente para os camundongos tratados
com NB. Os camundongos tratados com NB+STZ tiveram prejuízo de memória
avaliado na tarefa da esquiva inibitória, e o pré-tratamento com N-NANG preveniu esse
efeito. Na avaliação do efeito tipo anti-depressivo e tipo-ansiolítico observa-se que as
N-NANG+STZ induziram maior atividade corporal no parâmetro torções na tarefa da
suspensão da cauda e no labirinto em “zero” elevado houve um aumento do número de
espiadas em relação ao fármaco livre. Com relação aos níveis de antioxidantes cerebrais
não houve alterações nos níveis de Glutationa reduzida (GSH) e na atividade da catalase
(CAT). O grupo NB+STZ aumentou significativamente os níveis de peroxidação
lipídica cerebral de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA). Já administração de
N-NANG reduziu a peroxidação induzida pela STZ. Com isso pode-se concluir que as
NC apresentam características adequadas para administração via oral. Os estudos in vivo
demonstram que o pré- tratamento com as NC de naringina e naringenina foi preventivo
e capaz de reverter os déficits de memória, comportamento tipo-depressivo e ansiolítico
causado pela STZ nos camundongos. Contudo, esse efeito preventivo não foi observado
com os flavonoides na forma livre.
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Naringina promove efeito inotrópico positivo dependente de catecolaminas endógenas em coração isolado de rato / Naringin promotes positive effect inotropic dependent catecholamines endogenous in heart mouse isolatedSantos, Leonardo Rodrigues dos 19 August 2016 (has links)
Naringin is a flavonoid glycoside (C27H32O14) found in citrus fruits and grapes, recognized for exercising antioxidant, antiatherogenic, hypoglycemic activity, among others. Contractile and electrical effects of naringin were characterized on the heart muscle of rats. The experiments were performed in the left atrium isolated rat (tub with 8 ml, Krebs-Hanseilet, 29 ± 0.1 ° C; Stimulation: 1 gf, 1 Hz, 100 V, 1.5 ms). The force data were obtained by isometric transducer (Grass FT03), amplified (Grass P11T), digitized (DATAQ DI710) and stored in a computer for analysis. The naringin (0.003 to 6 mM) was added cumulatively to the bath to determine their influence on the contractile parameters. Curves concentration-effect of naringin were obtained after atrial preincubation with 1 uM propranolol or 1 uM nifedipine or 1 uM ryanodine or still, using atria of animals with depletion of catecholamine. The effect of naringin on electrocardiograms were obtained by Langendorff technique (10 ml / min - Milan peristaltic pump; Krebs solution at 34 ± 0.1 °C aerated with carbogen), with measurement of the left intraventricular pressure (PVE) by inserting the balloon. Data were expressed as mean ± standard error of the mean and the results were evaluated by one-way analysis of variance (ANOVA) with Tukey post test or Student t test. P values ≤ 0.05 were considered significant and statistical analyzes were performed with the GraphPad Prism© version 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego CA, USA). Naringin (0.03-2 mM) induced a positive inotropic effect on atrium (147%; EC50 of 0.32 ± 0.01 mM, n=5) dependent on concentration. From 3 mM, naringin reduced the contractile force. At maximum positive inotropic effect of naringin there was a decrease of systole duration of 0.11 ± 0.006 sec to 0.09 ± 0.002 sec (p <0.05) and increase in the diastole duration of 0.84 ± 0.019 sec to 0.88 s ± 0.0024 sec (p <0.05). Observed increase dT/dt (+) of 6.16 ± 1.76 gf/sec to 19.74 ± 2.64 gf/sec (p <0.01) and dT/dt (-) of 6.21 ± 1.14 gf/sec to 13.52 ± 1.78 gf /sec (p <0.01). Naringin also promoted diastolic relaxation (44%). Preincubation of the atria with propranolol (Non-selective β-adrenoceptor antagonist) or nifedipine (L- type calcium channels antagonist) or ryanodine (ryanodine receptors antagonist) abolished the positive inotropic effect induced by naringin, as well as no detectable increase in contractile force in atria of animals with depletion of catecholamines. With regard to electrical parameters, naringin shortened PRi of 48.42 ± 0.81ms to 47.31 ± 0.89ms (n = 5, p <0.05) and reduced QT intervals (QTc) of 66, 75 ms ± 2.35 to 64.36 ± 2.24 ms. Conversely, the QRS complex increased (Control: 18.5 ± 1.0 ms and Naringin: 20.83 ± 1.24 ms). This flavonoid also influenced the activity of the cardiac pacemaker, increasing heart rate of 226.9 ± 1.12 bpm to 240.2 ± 3.94 bpm. No cardiac arrhythmia event was recorded during the perfusion of the heart with naringin. The PVE suffered increase of 6%. Naringin exerts positive inotropic and chronotropic effect on cardiac muscle by indirect activation of β-adrenergic receptors through endogenous catecholamines release and promotes significant electrocardiographic changes, reducing PRi, QTc and RRi, and slow down the speed of the QRS. / A naringina é um glicosídeo flavonoide (C27H32O14) encontrado em uvas e frutas cítricas, reconhecida por exercer atividades antioxidante, antiaterogênica, hipoglicemiante, dentre outras. Os efeitos contráteis e elétricos da naringina foram caracterizados sobre o músculo cardíaco de rato. Os experimentos foram realizados em átrio esquerdo isolado de rato (cuba com 8 mL, Krebs-Hanseilet, 29 ± 0,1 °C; Estimulação: 1 gf, 1 Hz; 100 V; 1,5 ms). Os dados de força foram captados por transdutor isométrico (Grass FT03), amplificados (Grass P11T), digitalizados (DATAQ DI710) e armazenados em computador para análise. A naringina (0,003 - 6 mM) foi adicionada cumulativamente ao banho para determinar sua influência sobre parâmetros contráteis. Curvas concentração-efeito da naringina foram obtidas após a pré-incubação do átrio com 1 μM de propranolol ou 1 μM nifedipina ou 1 μM de rianodina ou ainda, usando átrios de animais com depleção de catecolaminas. Os efeitos da naringina sobre o eletrocardiograma foram obtidos através da técnica de Langendorff (10 mL/min - Bomba peristáltica Milan; Solução de Krebs a 34 ± 0,1 °C aerada com carbogênio), com mensuração da pressão intraventricular esquerda (PVE) por inserção de balonete. Os dados foram expressos pela média ± erro padrão da média e os resultados foram avaliados pela análise de variância de uma via (ANOVA) com pós-teste de Tukey ou pelo teste t de Student. Valores de p ≤ 0,05 foram considerados significativos e as análises estatísticas foram realizadas com o GraphPad Prism© versão 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego CA, USA). A Naringina (0,03 - 2 mM) promoveu efeito inotrópico positivo em átrio (147%; CE50 de 0,32 ± 0,01 mM; n = 5) dependente de concentração. A partir de 3 mM, a naringina reduziu a força contrátil. No efeito inotrópico positivo máximo da naringina, houve redução da duração da sístole de 0,11 ± 0,006 s para 0,09 ± 0,002 s (p < 0,05) e aumento na duração da diástole de 0,84 ± 0,019 s para 0,88 ± 0,0024 s (p < 0,05). Observado aumento da dT/dt(+) de 6,16 ± 1,76 gf/s para 19,74 ± 2,64 gf/s (p < 0,01) e da dT/dt(-) de 6,21 ± 1,14 gf/s para 13,52 ± 1,78 gf/s (p < 0,01). A naringina também promoveu relaxamento diastólico (44 %). A pré-incubação dos átrios com propranolol (antagonista β-adrenérgico não-seletivo) ou nifedipina (antagonista de canais de cálcio tipo-L) ou rianodina (antagonista de receptores de rianodina) aboliu o efeito inotrópico positivo induzido pela naringina, assim como, não se evidenciou aumento de força contrátil em átrios obtidos de animais previamente reserpinizados. Quanto aos parâmetros elétricos, a naringina encurtou o PRi de 48,42 ± 0,81 ms para 47,31 ± 0,89 ms (n = 5, p < 0,05) e reduziu o intervalo QT(QTc) de 66,75 ± 2,35 ms para 64,36 ± 2,24 ms. Por outro lado, a duração do complexo QRS aumentou (Controle: 18,5 ± 1,0 ms e Naringina: 20,83 ± 1,24 ms). Este flavonoide também influenciou a atividade do marcapasso cardíaco, aumentando a frequência cardíaca 226,9 ± 1,12 bpm para 240,2 ± 3,94 bpm. Nenhum evento de arritmia cardíaca foi registrado durante a perfusão do coração com a naringina. A PVE sofreu aumento de 6%. A naringina exerce efeito cronotrópico e inotrópico positivos em coração de rato por ativação indireta de receptores β-adrenérgicos através da liberação catecolaminas endógenas e promove alterações eletrocardiográficas significativas, ao reduzir PRi, QTc e RRi, além de lentificar a velocidade do QRS.
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