Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1284492 bytes, checksum: 553a1e66f159f200babfafbb0bac0ccd (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In vitro and greenhouse tests were carried out in order to: (i) assess the compatibility of the nematophagous fungi Pochonia chlamydosporia and Duddingtonia flagrans; (ii) evaluate the control of Meloidogyne javanica by the nematophagous fungi applied together and separately; (iii) evaluate the development of tomato plants inoculated with the nematophagous fungi and study the action of the fungi on plant nutritional status. All the compatibility tests, with the exception of an antibiosis test, indicated that P. chlamydosporia and D. flagrans are compatible to be applied toghether. An experiment in microcosm soil, in which predation of M. javanica by D. flagrans was assessed, the number of juveniles reduced in up to 72.7%. In a second assay, in microcosm soil, with different doses of the fungi applied together and separately, the application of P. chlamydosporia and D. flagrans reduced in up to 81.35% the number of juveniles when 10.000 chlamydospores of each fungus were applied per g of soil. Two experiments were conducted in a greenhouse to evaluate the effect of different concentration of P. chlamydosporia and D. flagrans in the control M. javanica and growth of tomato. The number of galls, number of eggs, height and dry weight of plants were evaluated. In both experiments the antagonists reduced the number of galls and egg production of root-knot nematode and did not affect plant height. In the first experiment, the addition of P. chlamydosporia increased plant dry matter, what was not observed in second one. An assay, in greenhouse conditions, was also carried out to evaluate growth promotion and mineral nutrients content in the tomato plants depending on the application of P. chlamydosporia and D. flagrans in combination and separated. The content of N, P, K, Ca, Mg and S and dry matter of the plants were evaluated. The two fungi increased total dry matter and mineral nutrients content in tomato plants. The combination of the two antagonists provides greater control of root-knot nematode and proved to be a promising strategy in the biological control of plant nematodes. Growth promotion and the positive effect in the nutritional status of the plants inoculated with the studied fungi indicated the great potential of these organisms for agricultural use, not only for the control of nematodes but also by its direct effect on plant growth and for providing better use of fertilizers. / Testes in vitro e em casa de vegetação foram realizados com os objetivos de: (i) avaliar a compatibilidade dos fungos nematófagos Pochonia chlamydosporia (Pc) e Duddingtonia flagrans (Df); (ii) avaliar a influência do nematoide Meloidogyne javanica e de ambos os fungos nematófagos no desenvolvimento de plantas de tomate; (iii) estudar a ação dos fungos sobre o estado nutricional das plantas. Nos ensaios de compatibilidade de Pc e Df in vitro, com exceção do teste de antibiose, todos os testes de compatibilidade dos isolados indicaram que os organismos são compatíveis. No primeiro experimento no solo em microcosmo em que foi avaliado a predação de M. javanica por Df, houve redução no número de juvenis em até 72,7%. No segundo experimento em microcosmo, em que foram avaliadas doses dos fungos em conjunto e em separado, a aplicação em conjunto dos dois organismos aumentou o controle, reduzindo em até 81,35% o número de juvenis quando 10.000 clamidósporos de cada fungo foram aplicados por g de solo. Dois experimentos foram realizados em casa de vegetação para avaliar o efeito de diferentes concentrações dos fungos nematófagos Pc e Df, isoladamente ou em mistura, no controle de M. javanica e no crescimento do tomateiro. Foram avaliadas as variáveis: número de galhas g-¹ de raiz, número de ovos g-¹ de raiz, altura e massa seca das plantas. Em ambos os experimentos observou-se o efeito dos dois antagonistas na redução do número de galhas e de ovos do nematoide das galhas. Os tratamentos não influenciaram a altura das plantas nos dois experimentos. No experimento 1, a adição de Pc aumentou a massa seca das plantas, o que não ocorreu no experimento 2. Um ensaio em casa de vegetação também foi realizado para avaliar a promoção de crescimento e aquisição de nutrientes minerais no tomateiro em função da aplicação de ambos os fungos. Após 60 dias avaliou-se a massa seca das plantas e o conteúdo de N, P, K, Ca, Mg e S. Houve efeito positivo dos dois fungos aplicados sobre a massa seca total do tomateiro e conteúdo de nutrientes minerais nas plantas. Dos resultados obtidos, conclui-se que a ação conjunta dos dois antagonistas proporciona maior controle do nematoide das galhas, mostrando-se uma estratégia promissora no controle biológico de fitonematoides. Adicionalmente, a promoção de crescimento vegetal pelos dois fungos estudados, associada à melhoria do estado nutricional das plantas, indica o potencial de uso agrícola desses organismos, não apenas para o controle de nematoides, mas também por sua ação direta no desenvolvimento do tomateiro e na economia de fertilizantes.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 205677 bytes, checksum: 93ca0cf3833e543ffed5592e081337ba (MD5) Previous issue date: 2006-03-23 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The viability of the formulation with nematophagous fungi D. flagrans was evaluated in the biological control of cattle gastrointestinal nematodes. Two groups, with eight Holsteinzebu calves each, it was placed in two lots grazed with Brachiaria decumbens on four hectare each one. The experiment started in March of 2005 and turn off in September of 2005. In the control group (A), each animal received 20 grams without fungus of the pellets; in the treated group (B), the animals received 20 grams of with D. flagrans fungus pellets. The counting of the infective larvae recovered in the paddock of the group B, it harvested until 20 centimeters of the distance in the dung pats, it was lower than in the plot A (P<0.01) harvested until 20 centimeters in the distance in the dung pat), there was significative reduction in the larvae recovered in the pasture in 53, 71, 65 e 85 %, respectably, in the April, July, August and September months. The genera Cooperia was the most prevalence (59.9 %). The monthly averages of the weight were bigger in the group B (P<0.05), there was difference between the group B and A in relation in profit weight, in June, July, August and September in de 21, 13, 8,5 e 20 %, respectably. The accountings of the egg per grams of the feces were obtained by the of the Gordon & Whitlock; modified by Lima, and of the Wisconsin of the Cox & Todd, for dairy cattle, modified by Ito techniques and they present differences in the value of the eggs per grams counts for control and treated group (P<0.05). It was observed significative reduction in the count eggs obtained by Gordon & Whitlock technique in May, June, July and August months in treated group in the 35, 46, 36 e 30 % , respectably e do not significative reduction in September (26 %). By Wisconsin modified technique, it there were difference in the June, July and August months in 58, 47 e 51 %, in the treated group, in relation in the control group and do not significative reduction in May (26 %) and September (25 %). It can to conclude that the application of the sodium alginate pellets with nematophagous fungus D. flagrans is effective in the control of the infective larvae of the bovine. / A viabilidade de uma formulação de fungo nematófago Duddingtonia flagrans foi avaliada no controle biológico de nematóides parasitos gastrintestinais de bovinos. Dois grupos de oito bezerros cada, mestiços Holandês-zebu foram colocados em duas pastagens de Brachiaria decumbens de 4 hectares cada. O experimento foi realizado no período de março a setembro de 2005. No grupo controle (A), os animais receberam 20 gramas de péletes sem fungo; no grupo tratado (B), os animais receberam 20 gramas de péletes com o fungo D. flagrans via oral. As contagens de larvas infectantes encontradas na pastagem B, coletadas até 20 centímetros de distância do bolo fecal, foram significativamente menores (P < 0,01) que na pastagem A (até 20 cm), sendo que houve redução no número de larvas recuperadas nas pastagens de 53, 71, 65 e 85 %, respectivamente nos meses de abril, julho, agosto e setembro do grupo tratado em relação ao controle. sendo que o gênero Cooperia foi o mais prevalente (59,96 %). As médias mensais de peso foram maiores significativamente no grupo B (P < 0,05), sendo que houve diferença no ganho de peso entre os grupos tratado e controle nos meses de junho, julho, agosto e setembro de 21, 13, 8,5 e 20 %. As contagens de ovos por gramas de fezes (OPG) foram obtidas pelas técnicas de Gordon & Whitlock, modificada por Lima e de Wisconsin, de Cox & Todd, modificada por Ito e apresentaram diferenças para valores de contagens de ovos por gramas entre grupo tratado e controle (P<0,05). Foi observada redução significativa nos valores da contagem no grupo tratado obtidos pela técnica de Gordon & Whitlock nos meses de maio, junho, julho e agosto de 35, 46, 36 e 30 % respectivamente e redução não significativa no mês de setembro de 26 %. E os dados obtidos pela técnica de Wisconsin houve redução significativa nos meses de junho, julho e agosto respectivos de 58, 47 e 51 % no grupo tratado em relação ao controle e redução não significativa nos meses de maio (26 %) e setembro (25 %). Pode se concluir que a aplicação de péletes de alginato de sódio contendo o fungo nematófago D. flagrans é efetiva no controle de larvas infectantes de bovinos.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 622999 bytes, checksum: 21bcb1387d971e4d0af79e965757125e (MD5) Previous issue date: 2010-03-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The viability of a formulation using the nematode-trapping fungus Monacrosporiun thaumasium was assessed for the biological control of free living stages of horse cyathostomin. Two groups (fungus-treated and control without fungus treatment) consisted of six crossbred mares in each group, aged between 2.5 and 3.5 years, were fed in Cynodon sp. naturally infected with larvae living stages of equine cyathostomin. Each animal of the treated group received oral doses of sodium alginate mycelial pellets 1 g/10 kg live weight per week), during 6 months. In the control group, animals received 1g/10 kg live weight per week of pellets without the fungus. Significant reduction (p< 0.01) in the number of eggs per gram of feces was found for animals of the fungus-treated group compared with the control group in all months of the experiment. The percentage of reduction of EPG were 87.5%, 89.7%, 68.3%, 58.7%, 52.5% and 35.2% during June, July, August, September, October and November, respectively. In coprocultures difference was found (p<0.05) among animals in the group treated with the fungus compared to the control group in all months of the experiment, with percentage reductions of 67.5%, 61.4% and 31.8% for September, October and November, respectively. There was a difference (p<0.01) of 60.9% reduction in herbage samples collected up to 20 cm from fecal pats between the fungus-treated group and the control group, during the experimental period (May October). Difference of 56% (p<0.01) was found between the fungus-treated group and the control group in the sampling distance 20-40 cm from fecal pats. There was no difference (p>0,05) between the mean weight gain of animals in both groups. The treatment with sodium alginate pellets containing the nematode- trapping fungus M. thaumasium reduced cyathostomin in tropical southeastern Brazil and could be an effective tool for biological control of this parasitic nematode in horses. / A viabilidade de uma formulação do fungo predador de nematóides Monacrosporium thaumasium foi avaliada no controle biológico de ciatostomíneos de eqüinos. Dois grupos (tratado com o fungo e controle) constituídos por seis éguas em cada grupo, mestiças, com idade entre 2,5 a 3,5 anos, foram colocados em pastagens de Cynodon sp. naturalmente infectadas com larvas de ciatostomíneos de eqüinos. No grupo tratado, cada animal recebeu 1g/10 kg de peso corporal (0,2g/10kg de peso vivo de fungo) de péletes em matriz de alginato de sódio contendo o fungo M. thaumasium via oral, duas vezes por semana e durante seis meses. No grupo controle, os animais receberam 1g/10 kg de peso corporal de péletes sem o fungo. As contagens de ovos por grama de fezes demonstraram diferença (p<0,01) no grupo de animais tratados com o fungo em relação aos animais do grupo controle em todos os meses do experimento. Os percentuais de redução do OPG foram de 87,5%, 89,7%, 68,3%, 58,7%, 52,5% e 35,2% nos meses de junho, julho, agosto, setembro, outubro e novembro, respectivamente. Nas coproculturas foi encontrada diferença (p<0,05) entre os animais do grupo tratado com o fungo em relação aos animais do grupo controle em todos os meses do experimento, com percentuais de redução de 67,5%, 61,4% e 31,8% para setembro, outubro e novembro, respectivamente. Diferença (p<0,01) foi observada na recuperação de larvas infectantes das pastagens que foram coletadas até 20 cm de distância do bolo fecal no pasto do grupo tratado com o fungo em relação ao grupo controle com uma redução de 60,9% e, entre 20 e 40 cm do bolo fecal a redução (p<0,01) foi de 56% no pasto do grupo tratado com o fungo M. thaumasium em relação ao pasto do grupo controle. Não foi observada diferença (P>0,05) entre as médias de ganho de peso dos animais dos dois grupos. O tratamento de eqüinos com péletes contendo o fungo nematófago M. thaumasium, pode ser efetivo no controle de ciatostomíneos em região tropical do sudeste do Brasil.

This M.Sc. thesis is aimed to describe growth and production parameters of nematophagous fungus Arthrobotrys oligospora. There was determinated information about growth and sporulation of fungus on artificial and natural substrates, influence of cultivation condition on production biomass and possibility of formulation alginate pellets.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_juliana_nunes_vieira.pdf: 749761 bytes, checksum: d10f921e3d83dd0cb845cc767149a9f3 (MD5) Previous issue date: 2012-03-14 / The rapid development of resistance to gastrointestinal parasites anthelmintics has shown the limited efficiency of this method in the suppression of endoparasitoses in ruminants, and has furthered research in alternative control methods. The use of chemicals in animal anthelmintic treatment, in association with nematophagous fungi used for biological control, is a strategy that has proven to be effective in reducing the nematode population density of farm animals. This study aims to verify the in vitro susceptibility of the nematophagous fungi Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii and Paecilomyces variotii against the antiparasitic drugs albendazole, thiabendazole, ivermectin (100%), levamisole (7.5%) and closantel (10%) by using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). MICs ranged between 4 and 0,031µg/mL for albendazole, thiabendazole and ivermectin, between 0,937 and 0,117µg/mL for levamisole, and between 0,625 and 0,034 for closantel. The results obtained showed that all antiparasitic drugs tested had an in vitro inhibitory effect on nematophagous fungi, being able to jeopardize the fungus action as a biological control bioagent. / O rápido desenvolvimento de resistência de parasitos do trato gastrintestinal a antihelmínticos tem demonstrado limitada eficiência desse método para o controle de determinadas endoparasitoses em ruminantes, incentivado assim, pesquisas com métodos alternativos de controle parasitário. A utilização de compostos químicos no tratamento anti-helmíntico de animais, em associação com fungos nematófagos usados no controle biológico, é uma estratégia que vem se mostrando eficaz para a redução da densidade populacional de nematódeos nos animais de produção e pouco se sabe sobre seu emprego simultâneo. Este trabalho teve por objetivo verificar, através da Concentração Inibitória Mínima (CIM), a suscetibilidade in vitro dos fungos nematófagos Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans, Paecilomyces fumosoroseus, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces marquandii e Paecilomyces variotii aos antiparasitários albendazol, tiabendazol e ivermectina (100%), levamisol (7,5%) e closantel (10%). As CIMs variaram de 4 a 0,031µg/mL para albendazol, tiabendazol e ivermectina, de 0,937 a 0,117µg/mL para o levamisol e de 0,625 a 0,039µg/mL para o closantel, dependendo do fungo testado. Os resultados mostram que todos os antiparasitários testados tiveram efeito inibitório in vitro sobre os fungos nematófagos, podendo comprometer suas ações como bioagentes de controle biológico.

Orientador: Jaime Maia dos Santos / Banca: Maria Amélia dos Santos / Banca: José Carlos Barbosa / Resumo: Embora numerosas espécies de fitonematóides já tenham sido encontradas em pomares de citros em todo o mundo, poucas são consideradas pragaschave da cultura. No Brasil, apenas o nematóide dos citros (Tylenchulus semipenetrans Cobb) e o nematóide das lesões radiculares dos citros (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) detêm esse status. Entre esses, T. semipenetrans é o mais distribuído, enquanto P. jaehni é o mais agressivo. Essa praga já foi encontrada em pomares de mais de 30 municípios paulistas, dois mineiros e três paranaenses. O objetivo deste estudo foi isolar, identificar, documentar ao microscópio fotônico e eletrônico de varredura e avaliar a eficácia de fungos nematófagos para o controle biológico dos nematóides dos citros (P. jaehni e T. semipenetrans). Foram analisadas 38 amostras coletadas em pomares de citros de municípios paulistas e goiano no Laboratório de Nematologia da UNESP/FCAV, Câmpus de Jaboticabal-SP. Dessas amostras, foram isolados Arthrobotrys robusta de 23,7% das amostras, A. musiformis de 18,4%, A. oligospora de 10,5% e A. conoides de 5,2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora e Paecilomices lilacinus foram encontrados em 2,6% das amostras. Do total de 26 isolados dos fungos obtidos, 92,8% foram patogênicos a T. semipenetrans e 82,1% a P. jaehni. Um isolado de cada espécie desses fungos foi incluído na documentação das características mais marcantes ao microscópios fotônico e eletrônico de varredura. Em testes in vitro, foram selecionados isolados de cinco espécies de fungos nematófagos, sendo Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides e Paecilomyces lilacinus formulados para T. semipenetrans. Para P. jaehni, foram formulados Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora e Monacrosporium eudermatum...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Although many species of nematodes have already been found in orchards of citrus in the world, few are considered key pests of the culture. In Brazil, only the citrus nematode (Tylenchulus semipenetrans Cobb) and the lesion nematode of citrus (Pratylenchus jaehni Inserra et al.) have that status. Between these, T. semipenetrans is more distributed, but P. Jaehni is the most aggressive. This pest has been found in orchards of more than 30 counties in São Paulo State, two in Minas Gerais and three in Paraná State. The aim of this study was to isolate, identify, document and assess the effectiveness of nematophagous fungi for the biological control of the citrus nematode (P. jaehni and T. semipenetrans). Were analyzed 38 samples collected in the citrus orchards of Counties of Sâo Paulo State and one in Goiás, in Laboratório de Nematologia of UNESP/FCAV, Câmpus of Jaboticabal, SP. From these samples were isolated Arthrobotrys robusta, 23.7% of the samples, A. musiformis 18.4%, A. oligospora 10.5% in A. conoides 5.2%. Monacrosporium elegans, M. eudermatum, Dactyllela leptospora and Paecilomices lilacinus were found in 2.6% of samples. From a total of 26 isolates of the fungi obtained, 92.8% were pathogenic to T. semipenetrans and 82.1% to P. Jaehni. An isolate from each species of these fungi was included in the documentation of the most remarkable characteristics at the light microscope and scanning electron microscope. In tests in vitro were selected five isolates of nematophagous fungi being Monacrosporium eudermatum, Dactylella leptospora, Arthrobotrys musiformis, A. conoides and Paecilomyces lilacinus formulated for T. Semipenetrans. For, P. Jaehni were formulated Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora and Monacrosporium eudermatum. These fungi have been applied in doses of 1, 2, 4 and 6 liters of a formulation consisting of equal parts of mixing ...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

The biological control is an alternative method to reduce the population of parasites by the use of natural antagonist. In the present study, the efficacy of nematophagous fungus Duddingtonia flagrans was tested to control gastrointestinal nematodes parasites of cattle livestock in the field. Twenty calves were used, distributed equally in two distinct plots formed for native pasture. . Group A was treated with D. flagrans fungus, cultivated in sorghum, in a concentration with 1x106 clamidospores/kg body weight, mixed with maintenance ration, each day, during eight months. Group B served as a control and did not receive the fungus. Samples for faecal egg count (FEC), were collected each week. There were monthly counts in faecal cultures to identify the species of nematodes larvae, weight of the animals, collection of blood to determine red cell counts and collection of pasture to the counting of larvae. Temperature and rainfall data were registered daily. The FEC reduced around 56,84% in the last 3 months of the experiment, with a variation between 40,44 and 67,14% in the treated group (P<0,001). The faecal cultures demonstrated that the main nematodes been found were Cooperia and Haemonchus in a percentage of 47,9 and 35,3%, respectively. The counting of larvae in the pasture showed a reduction percentage around 77,05% in the treated group at the end of experiment (P<0,01). It could be concluded with this study, that fungus Duddingtonia flagrans is, without a doubt important, mainly in the reduction of the FEC and the significant reduction of larvae in the pasture. Therefore, this nematophagous fungus is efficient as a biological tool to be used in an integrated control of nematodes of bovine raised in the fields. / O controle biológico é um método para diminuir a população de parasitas pela utilização de antagonista natural. No presente estudo, testou-se a eficácia do fungo nematófago Duddingtonia flagrans no controle de nematódeos parasitos gastrintestinais de bovinos criados a campo no município de Julio de Castilhos. Utilizaram-se 20 bezerros, distribuídos igualmente em duas áreas formadas por pastagem nativa. O grupo A foi tratado com o fungo D. flagrans, cultivado em sorgo, numa concentração de 1x106clamidósporos/Kg de peso animal, misturados em ração de manutenção, diariamente, durante oito meses. O grupo B serviu como controle e não recebeu fungo, apenas ração. Foram coletadas amostras para contagem de ovos por grama de fezes (OPG), semanalmente. Mensalmente foram realizadas coprocultura para identificar as espécies de larvas de nematódeos, pesagem dos animais, colheita de sangue para determinar contagem sanguínea de série vermelha e coleta de pasto para contagem das larvas na pastagem. Dados de temperatura e índice pluviométrico foram registrados diariamente. O OPG foi reduzido no grupo tratado, em média 56,84,% nos últimos 3 meses de experimento, variando entre 40,44 a 67,14% no grupo tratado (P< 0,001). A coprocultura demonstrou que os principais nematódeos encontrados foram dos gêneros Cooperia e Haemonchus em uma percentagem de 47,9 e 35,3%, respectivamente. A contagem de larvas na pastagem obteve um percentual de redução 77,05% no grupo tratado ao final do experimento (P<0,01). Pôde-se concluir com este estudo, que o papel do fungo Duddingtonia flagrans, é sem dúvida importante, principalmente na diminuição do OPG e na redução significativa de larvas na pastagem. Portanto, este fungo nematófago é uma ferramenta biológica eficaz para ser empregado em um controle integrado de nematódeos de bovinos criados a campo.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 567180 bytes, checksum: c6e7ebd48ed3a1d70a13bb1e86f0d3a6 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Alternative methods that use a combination of nematophagous fungi associated with organic mineral fertilizer have been little used and shall be studied further, since they present potential for nematode control in addition to supplement fertility and improve soil biota. Moreover, there is a growing demand of the society, which has become more demanding on the use of management practices more environmentally appropriate. Thus, the objective of this work was to test the compatibility of an organic mineral fertilizer based on castor bean cake to Pochonia chlamydosporia for the control of Meloidogyne javanica in lettuce. Two tests were performed to study the viability of P. chlamydosporia in Rizomax (which contains fungus P. chlamydosporia), and UFV-TM100 (organic mineral fertilizer) with or without addition of water. One hundred grams of UFV-TM100 and 1 g of Rizomax were placed in a 3-L plastic bag with no addition of water. The bag was sealed and vigorously shaken until homogenization of the mixture and kept in a closed room. The determination of the CFU of P. chladoutmydosporia was carried out on days 0, 15, 30 and 45 both in pure Rizomax and Rizomax + UFV-TM100. The same methodology was used in the second test, but with the addition of water in the mixture and determination of CFU of P. chlamydosporia was carried out on days 0, 7 and 14. The number of CFU of P. chlamydosporia did not increase within the addition of water in Rizomax in the assessed period; however, the number of CFU was reduced by 27, 54 and 100% in the Rizomax + UFV-TM100 on days 0, 7 and 14, respectively, for the product Rizomax. The number of CFU of P. chlamydosporia in Rizomax did not decrease in the test with no addition of water, but the number of P. chlamydosporia in Rizomax + UFV-TM100 was reduced by 30% on day 45 in comparison to day 0, 15 and 30. A third test was conducted to study the colonization by P. chlamydosporia in a substrate in the presence of UFV-TM100. One litter of substrate was poured in a 5-L plastic bag containing 18 g of UFV- TM100 and 0.18 g of Rizomax. The bag was sealed and shaken vigorously for two minutes to homogenize the mixture, which was distributed into three 200 mL plastic glasses. A second treatment, with no UFV-TM100, was used to evaluate the development of P. chlamydosporia in the absence of UFV-TM100. The substrate in each of the plastic glass was kept moist and samples were taken on days 0 and 14 to determine the number of CFU of P. chlamydosporia. The CFU number of P. chlamydosporia did not differ between Rizomax and Rizomax + UFV-TM treatments in the evaluation periods but the CFU number for P. chlamydosporia was 61% higher on day 14 than on day 0. A forth test was carried out to study the effect of the doses of Rizomax on the growth of lettuce and on the development of M. javanica. Plastic pots containing 2 L of substrate received 36 g of UFV - TM100, and after 15 days, lettuce seedlings at 21 days of age were transplanted. Rizomax was added together with TM100-UFV at doses of 0, 0.36 and 0.45 g/kg substrate, which corresponded to 0, 1, and 1.25% Rizomax . The substrate in each pot was infested with 5,000 eggs of M. javanica on same day of incorporation of UFV- TM100 and Rizomax incorporation. The same doses of Rizomax , but in the absence of UFV - TM100 were tested as control treatment. Sixty days after transplanting, the diameter of the head of lettuce (cm) , the fresh matter weight , the dry matter weight, the fresh root system weight, the number of galls and eggs of M. javanica per gram of root system were evaluated. The diameter of the head of the lettuce, the weight of the shooting fresh matter and the weight of shooting dry matter increased by 41, 44 and 29% , respectively, in the presence of UFV-TM100. The number of gals and eggs per gram of root system was reduced up to 99% when UFV-TM100 + Rizomax were applied at the dose of 1.25%. The application of Rizomax in the absence of UFV-TM100pla root system and the numb also reduced the number of galls per root system and the number of galls per gram of root system, with reductions of up to 50 and 60%, respectively. Therefore, the use of organic mineral fertilizer with the addition of a biological control agent is an efficient alternative to the control of nematodes, in addition to improve plant development. / Métodos alternativos, utilizando a combinação de fungos nematófagos associados a um adubo organomineral têm sido pouco utilizados e devem ser mais estudados, visto que apresentam potencial de controle dos nematoides, além de suplementar a fertilidade e favorecer a biota do solo. Alia-se à isso a demanda crescente da sociedade, que está mais exigente quanto à utilização de práticas de manejo mais ecologicamente adequadas. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi testar a compatibilidade de um fertilizante organomineral à base de torta de mamona com o fungo Pochonia chlamydosporia, visando o controle de Meloidogyne javanica em alface. Dois testes foram realizados para estudar a viabilidade de P. chlamydosporia nos produtos Rizomax (contém o fungo P. chlamydosporia), e UFV-TM100 (fertilizante organomineral), com e sem adição de água. Foram colocados em saco plástico de 3 L, 100 g de UFV-TM100 e 1 g de Rizomax, sem adição de água. O saco foi fechado e agitado vigorosamente até homogeneização da mistura e mantido em uma sala fechada. A determinação do número de UFC de P. chlamydosporia foi realizada aos 0, 15, 30 e 45 dias, tanto no produto Rizomax puro como na mistura Rizomax + UFV-TM100. Para o segundo teste foi utilizada a mesma metodologia, porém com adição de água e a determinação do número de UFC de P. chlamydosporia foi realizada aos 0, 7, e 14 dias. No teste com adição de água não houve decréscimo do número de UFC de P. chlamydosporia no produto Rizomax no período estudado, porém o número de UFC de P. chlamydosporia na mistura Rizomax + UFV-TM100 foi reduzido em de 27, 54 e 100%, respectivamente, aos 0, 7 e 14 dias em relação ao produto Rizomax. No teste sem adição de água não houve decréscimo do número de UFC de P. chlamydosporia no produto Rizomax no período estudado, porém o número de UFC de P. chlamydosporia na mistura Rizomax + UFV-TM100 foi reduzido em 30% aos 45 dias em relação aos 0, 15 e 30 dias. Um terceiro teste foi realizado com objetivo de estudar a colonização de um substrato por P. chlamydosporia na presença do UFV-TM100. Um litro de substrato foi colocado em um saco plástico de 5 L contendo 18 g de UFV-TM100 e 0,18 g de Rizomax. O saco foi fechado e agitado vigorosamente por dois minutos para homogeneizar a mistura, a qual foi distribuída em três copos plásticos de 200 mL de capacidade cada. Um segundo tratamento, sem UFV-TM100, foi utilizado para avaliar o desenvolvimento de P. chlamydosporia na ausência do UFV-TM100. O substrato em cada copo plástico foi mantido úmido e amostras foram retiradas aos 0 e 14 dias para determinar o número de UFC de P. chlamydosporia. Não houve diferença no número de UFC de P. chlamydosporia entre os tratamento Rizomax e Rizomax + UFV-TM no períodos de avaliação, porém o número de UFC de P. chlamydosporia foi 61% maior aos 14 dias com relação ao 0 dia. Um quarto teste foi realizado para estudar o efeito das doses do produto Rizomax nas variáveis de crescimento da alface e no desenvolvimento de M. javanica. Vasos plásticos contendo 2 L de substrato receberam 36 g de UFV- TM100 e, após 15 dias, mudas de alface com 21 dias de idade foram transplantadas. Juntamente com o UFV-TM100, adicionou-se o produto Rizomax nas doses de 0, 0,36 e 0,45 g/2 Kg de substrato, as quais corresponderam a 0, 1 e 1,25% de Rizomax. O substrato em cada vaso foi infestado com 5000 ovos de M. javanica no mesmo dia da incorporação do UFV-TM100 e Rizomax. Como tratamento testemunha, foram testadas as mesmas doses de Rizomax, porém na ausência do UFV-TM100. Após 60 dias do transplantio, avaliou-se o diâmetro da cabeça da alface (cm), o peso da matéria fresca, o peso da matéria seca, o peso do sistema radicular fresco, o número de galhas e de ovos de M. javanica por sistema radicular e o número de galhas e de ovos de M. javanica por grama de sistema radicular. Na presença do produto UFV-TM100 houve aumento de 41, 44 e 29% no diâmetro da cabeça da alface, no peso da matéria fresca da parte aérea e no peso da matéria seca da parte aérea, respectivamente. O número de galhas e ovos pos grama de sistema radicular sofreram reduções de até 99% quando aplicado o UFV- TM100 + Rizomax na dose de 1,25%. A aplicação do Rizomax na ausência do UFV- TM100 também reduziu o número de galhas por sistema radicular e número de galhas por grama de sistema radicular, com reduções de 50 e 60%, respectivamente. Assim, na aplicação do fertilizante organomineral com a adição de um agente de controle biológico é uma alternativa eficiente de controle de nematoides, além de aumentar o desenvolvimento das plantas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 522894 bytes, checksum: 671c96196d8b0b7e8b4f7498d0e04248 (MD5) Previous issue date: 2014-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Echinostoma paraensei is a trematode of the genus Echinostoma that can cause echinostomiasis in humans. The aims of this study were to evaluate the ovicidal activity of the isolates VC1 and VC4 of the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia on solid medium containing 2% water-agar(2% WA) on eggs of E. paraensei, selecting the most efficient isolate (assay A), evaluate the ovicidal effect (destruction of eggs) of most effective isolate on supplemented agar culture media (assay B), and to evaluate the ovicidal capacity of crude enzymatic extract of most effective isolate on E. paraensei eggs (assay C). One thousand eggs of E. paraensei (assay A) were placed in Petri dishes containing 2% WA with one isolate of fungus P. chlamydosporia (VC1 or VC4) grown for 10 days, and without fungus as control. Both the treated and control group consisted of six replicates. After 15 days, approximately one hundred eggs were removed from each dish and classified according to the following parameters: type 1 effect, physiological effect without morphological damage to eggshell, where hyphae are observed attached to the shell; type 2 effect, lytic effect with morphological alteration of embryo and egg shell with hyphal penetration through the shell; and type 3 effect, lytic effect with morphological alteration of embryo and eggshell, in addition to hyphal penetration and internal egg colonization. In assay B, E. paraensei eggs were placed in Petri dishes with different supplemented agar culture media: 2% chitin- agar (2% AC), 2% corn-meal-agar (2% CMA), 2% WA and 2% starch- agar (2% SSA) with isolate VC4 (the most effective); in control group were not used fungus. Each treatment consisted of six replicates. After 25 days, one hundred eggs were removed from each dish and the ovicidal effect was evaluated according to the parameters already mentioned. In assay C, one thousand E. paraensei eggs were poured into Petri dishes with 5 ml of isolate VC4 crude extract constituting the treated group. The control group contained one thousand eggs in 10 ml of distilled water in Petri dishes. Each treatment consisted of six replicates. After 7 days, the total number of E. paraensei eggs present on each dish of the treated and control groups were counted according to the methodology described by Mukhtar and Pervaz. In assay A, there was no difference (p > 0.05) in ovicidal activity among the tested isolates; however, the highest percentage for ovicidal activity (type 3 effect) was demonstrated by the isolate VC4. In assay B, the culture medium starch agar showed the best results for the destruction of the eggs at the end of 25 days of interaction, with a percentage of 46.6%. In assay C, the crude extract of VC4 was effective in the destruction of E. paraensei eggs at the end of 7 days, with a percentage reduction of 53%. Results of in vitro experimental assay A, B and C have shown that P. chlamydosporia (VC1 and VC4) had negative influence on the E. paraensei eggs, and thus can be considered as a potential candidate for the biological control of this helminth. / Echinostoma paraensei é um trematóide do gênero Echinostoma que pode causar a equinostomíase em humanos. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a atividade ovicida dos isolados VC1 e VC4 do fungo nematófago Pochonia chlamydosporia em meio sólido ágar- água 2% sobre ovos de Echinostoma paraensei, selecionando o isolado mais eficaz (ensaio A); avaliar o efeito ovicida (destruição dos ovos) do isolado mais eficaz em meios de cultura ágar suplementados (ensaio B) e avaliar a capacidade ovicida do extrato bruto enzimático do melhor isolado sobre ovos de E. paraensei (ensaio C). Mil ovos de E. paraensei (ensaio A) foram colocados em placas de Petri contendo ágar-água 2% (AA 2%) com um isolado do fungo P. chlamydosporia crescido (VC1 ou VC4) durante 10 dias, e sem fungo como controle. Seis repetições foram feitas para ambos o grupo tratado e controle. Após 15 dias, cerca de cem ovos foram retirados de cada placa e classificados de acordo com os seguintes parâmetros: tipo 1, efeito fisiológico sem prejuízo morfológico à casca do ovo, onde hifas são observadas aderidas à casca; tipo 2, efeito lítico com alteração morfológica da casca e embrião do ovo, com penetração de hifas através da casca; e tipo 3 efeito lítico com alteração morfológica do embrião e da casca, além de penetração de hifas e colonização interna do ovo. No ensaio B, ovos de E. paraensei foram colocados em placas de Petri com diferentes meios de cultura ágar suplementados: ágar-quitina 2% (AQ 2%), corn-meal-ágar 2% (CMA 2%), ágar-água 2% (AA 2%) e ágar- amido 2% (SSA 2%) com o isolado VC4 (o mais eficaz), no grupo controle não foram utilizados fungos. Seis repetições foram feitas para cada tratamento. Depois de 25 dias, cem ovos foram retirados de cada placa e o efeito ovicida foi avaliado de acordo com os parâmetros já citados. No ensaio C, mil ovos de E. paraensei foram vertidos para placas de Petri com 5ml de extrato bruto do isolado VC4 constituindo o grupo tratado. O grupo controle tinha 1.000 ovos em 10 ml de água destilada nas placas de Petri. Cada tratamento foi constituído por seis repetições. Após 7 dias, foram contados o número total de ovos de E. paraensei presentes em cada placa dos grupos tratado e controle de acordo com a metodologia descrita por Mukhtar e Pervaz. No ensaio A, foi observado que não houve diferença (p>0,05) na atividade ovicida entre os isolados testados, contudo, o maior percentual para a atividade ovicida (efeito do tipo 3) foi demonstrado pelo isolado VC4. No ensaio B, o meio de cultura ágar- amido 2% (SSA 2%) apresentou os melhores resultados para a destruição dos ovos ao final de 25 dias de interação, com um percentual de 46.6%. No ensaio C, o extrato bruto de VC4 demonstrou ser eficaz na destruição dos ovos de E. paraensei ao final de 7 dias com um percentual de redução de 53%. Os resultados dos ensaios experimentais in vitro A, B e C demonstraram que P. chlamydosporia (VC1 e VC4) influenciou de forma negativa sobre os ovos de E. paraensei, e assim pode ser considerado como um potencial candidato a controlador biológico desse helminto.

Biological control is an alternative method used to reduce the population of parasites through natural antagonist. A promising option of biological control to reduce infective larvae in pasture is the use of nematophagous fungus. The efficacy of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans was tested to control gastrointestinal nematode parasites of horses in field. Ten foals with mean age of 12 months were divided in two groups: five males constituted the treated group and five females constituted the control group. Each group was introduced into a plot formed by mixed pasture with approximately 5 hectares. The treated group received D. flagrans fungus in a concentration of 106 clamidospores kg-1 body weight, mixed with horse ration, daily, for five months. The control group did not receive the fungus. Faecal egg count (FEC) samples were carried out weekly. Coproculture and collection of pasture were done monthly for larvae counting. No significant difference was observed in the FEC counting and in the number of larvae recovered from coprocultures, where cyathostomes, Strongylus sp. and Trichostrongylus sp. were found. The number of larvae recovered from pasture was significantly lower in the treated group in the last month of treatment, where the percentage reduction was 73.5%. Therefore, the fungus was able to reduce the number of infective larvae in pasture, but this was not reflected in the reduction of parasite infection during treatment (five months). / O controle biológico é um método para diminuir uma população de parasitos pela utilização de antagonistas naturais. Uma promissora opção de controle biológico para redução de larvas infectantes na pastagem é o uso de fungos nematófagos. No presente estudo, testouse a eficácia do fungo nematófago Duddingtonia flagrans no controle de nematódeos parasitos gastrintestinais de equinos criados a campo. Utilizaram-se 10 potros com idade média de 12 meses, que foram divididos em dois grupos: 5 machos constituíram o grupo tratamento e 5 fêmeas constituíram o grupo controle. Cada grupo foi introduzido em uma área formada por pastagem mista com aproximadamente 5 hectares. O grupo tratamento recebeu o fungo D. flagrans numa concentração de 106 clamidósporos kg-1 de peso animal, misturados em ração, diariamente, durante 5 meses. O grupo controle não recebeu fungo. Foram colhidas amostras para contagem de ovos por grama de fezes (OPG) semanalmente. Mensalmente, foram realizadas coproculturas e colheita de pasto para contagem de larvas. Ao longo do estudo, não foi observada diferença significativa na contagem de OPG e no número de larvas recuperadas das coproculturas, onde foram identificados ciatostomíneos, Strongylus sp. e Trichostrongylus sp. O número de larvas recuperadas da pastagem foi significantemente menor no grupo tratamento no último mês, onde o percentual de redução foi de 73,5%. Portanto, o fungo D. flagrans foi capaz de reduzir o número de larvas infectantes na pastagem, mas isso não se refletiu em diminuição da infecção parasitária dentro do período estudado (5 meses).