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Desenvolvimento de um método computadorizado para avaliação funcional das lesões de nervos periféricos através da análise da marcha: modelo experimental em ratos / not availableMarcelo Fernando Selli 15 December 1998 (has links)
Métodos histológicos e eletrofisiológicos de avaliação da regeneração dos nervos periféricos não provêm dados sobre o real estado funcional do membro interessado, mesmo em condições experimentais controladas. Métodos de avaliação funcional têm sido propostos, mas a correlação entre os seus resultados e aqueles dos métodos histológicos e eletrofisiológicos ainda não está perfeitamente estabelecida, o que demanda maiores investigações. Estas, por outro lado, necessitam do aprimoramento dos métodos de captação, armazenamento e processamento dos dados obtidos. Neste trabalho, foi desenvolvido um programa de computador capaz de captar, armazenar e processar as imagens das pegadas de ratos submetidos a diferentes tipos de lesão dos nervos ciático, peroneiro e tibial, obtidas numa trilha de marcha (walking track), com base nos métodos de DE MEDINACELI, FREED & WYATT (1982), DE MEDINACELI, DERENZO & WYATT (1984), CARLTON & GOLDBERG (1986) e BAIN , MACKINNON & HUNTER (1989). O programa desenvolvido é compatível com o sistema Microsoft® Windows(TM) NT/95/98, possibilitando a utilização de recursos gráficos e a geração e impressão de gráficos resultantes, tendo sido testado em estudos experimentais em andamento sobre lesões do nervo ciático do rato, submetido a diferentes formas de tratamento. Ficou demonstrado que o programa, ao automatizar e dar maior agilidade à avaliação, permite ao pesquisador a utilização de um número maior que o usual de animais nos grupos experimentais e a captação, armazenamento e processamento de um volume maior de dados, possibilitando a obtenção de índices independentes para os nervos ciático, peroneiro e tibial, bem como a comparação entre os índices propostos pelos autores supramencionados, através de gráficos de média e desvio padrão. O desempenho do programa, que é de rápido aprendizado e fácil emprego, foi altamente satisfatório e a precisão e uniformidade das avaliações levaram a resultados mais confiáveis. / Histologic and electrophysiological methods for evaluation of the regeneration of peripheral nerves do not provide data on the actual functional state of the involved limbs, even in controlled experimental conditions. Functional evaluation methods have been proposed, but the correlation between the results obtained and histologic and electromyographic data are not yet well established, what demands more investigations. On the other hand, these require improved methods of acquisition, storing and processing of data obtained either experimentally or clinically. In this work, a computer program was developed to allow for acquisition, storing and processing the images of footprints of rats submitted to different types of lesion to the sciatic, peroneal and tibial nerves, obtained on a walking track, based on the methods proposed by DE MEDINACELI, FREED & WYATT (1982), DE MEDINACELI, DERENZO & WYATT (1984), CARLTON & GOLDBERG (1986) and BAIN, MACKINNON & HUNTER (1989). The program developed is compatible with the Microsoft Windows(TM) NT/95/98 system, permitting the use of graphic resources and generation and printing of the resulting graphics, since it was tested with ongoing experimental studies on the regeneration of the sciatic nerve of rats submitted to different types of treatment. lt was demonstrated that by automatizing and providing evaluation with greater agility, the program permitted the use of a wider number of animais than usual in the experimental groups and the acquisition, storing and processing of a larger volume of informations, allowing for obtaining independent functional indexes for the sciatic, peroneal and tibial nerves, as well as the comparison between the indexes proposed by the above mentioned authors, by graphics of mean and standard deviation. The performance of the program, which is of quick learning and easy to use, was highly satisfactory and the precision and uniformity of the evaluations carried out made the results more reliable.
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Ação da ciclosporina A na via de ativação do fator de crescimento de nervo (NGF) em células neurais do SNPJESUS, Jessica Batista de 26 August 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-08-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Ciclosporina A é um imunossupressor químico com ação conhecida sobre células T do sistema imune. No sistema nervoso, a Ciclosporina A age inibindo a ação da Calcineurina, um importante segundo mensageiro da via de transdução de sinal do Fator de Crescimento de Nervo (NGF) resultando na hiperfosforilação do Fator Nuclear de Células T Ativadas (NFAT) e regulação negativa de NGF, TrkA e outros fatores que participam da via. As isoformas da família de NFAT1-4 são dependentes de calcineurina, enquanto a isoforma NFAT5 é independente. Já foi demonstrado o papel neuroprotetor da Ciclosporina A por via dependente ou independente de calcineurina. No presente trabalho, procuramos avaliar a ação da Ciclosporina A no sistema nervoso periférico, associando níveis de NGF, TrkA e o fator de transcrição independente de calcineurina, NFAT5 com a plasticidade de células neuronais oriundas de Gânglios da Raiz Dorsal (GRD) mantidas em culturas. Usamos culturas de GRD E10, suplementado com Meio Condicionado de Retina de E9, tratados com Ciclosporina A por 48 e 72 horas. Culturas enriquecidas de Neurônios foram confirmadas pelo método de imageamento de cálcio. A ação da Ciclosporina A sob a neuritogênese foi avaliada por microscopia de campo claro, a expressão de NGF, TrkA e NFAT5 foi realizada por RT-PCR e o acúmulo de NGF intracelular foi avaliado por Imunofluorescência, assim como a presença de TrkA em neurônios. O teste de viabilidade das culturas tratadas ou não com as concentrações de 1-40μM de Ciclosporina A foi realizado pelo método de MTT. Os resultados mostram aumento dos níveis de NGF em culturas mistas, e de receptor TrkA e NFAT5 em culturas enriquecidas em neurônios após o tratamento com a Ciclosporina A. Dada a importância da via de NGF no desenvolvimento e manutenção do SNP, o uso da Ciclosporina A, pode vir a ser usado na clínica como novo alvo para novas terapias. / A is an immunosuppressive drug with known action on T cells of the immune system used in organ transplantation and autoimmune diseases. In the nervous system, cyclosporin A acts by inhibiting the action of Calcineurin, an important second messenger from pathway of signal transduction Nerve Growth Factor (NGF), resulting in hyperphosphorylation of the nuclear factor of activated T cells (NFAT), and downregulation of NGF, TrkA and other factors that participating in this pathway. The NFAT1-4 family are dependent isoforms of calcineurin, while NFAT5 isoform is independent. It has been demonstrated the neuroprotective role of Cyclosporin A via calcineurin dependent or independent. In this study, we evaluate the action of Cyclosporine A in the PNS system, that could be associated with levels of NGF, TrkA and an independent of calcineurin transcription factor (NFAT5) that interplay the plasticity of neuronal cells derived from Dorsal root ganglia (DRG) maintained in cultures. We use E10 DRG cultures supplemented with medium conditioned E9 Retinal treated with Cyclosporin A for 48 and 72 hours. Cultures enriched neurons were confirmed by calcium imaging method. The action of Cyclosporine A in the neuritogenesis was assessed by bright field microscopy, expression of NGF, TrkA and NFAT5 was performed by RT-PCR, intracellular accumulation of NGF was evaluated by immunofluorescence and the presence of TrkA in neurons. The viability test of the cultures treated or not with the concentrations of 1-40μM Cyclosporine A was performed by MTT method. The results show an increase of NGF levels in mixed cultures, and TrkA receptor and NFAT5 in cultures enriched in neurons following treatment with cyclosporine A. Given the importance of NGF pathway in the development and maintenance of the SNP, the use of Cyclosporin A have activity in the peripheral nervous system cells, which might be used in the clinic with new target for new therapies.
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Neuromodulação do sistema nervoso periférico para tratamento da dor neuropática na mononeuropatia hansênica : seguimento em um anoFreitas, Tiago da Silva 25 July 2018 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / 1) Objetivo: a Hanseníase afeta cerca de 10 a 15 milhões de pacientes em todo o mundo e continua sendo um importante problema de saúde pública. A dor crônica secundária à hanseníase é a principal causa de morbidade, e seu tratamento continua sendo um desafio. Avaliamos a viabilidade e segurança da estimulação de nervos periféricos para a tratamento da mononeuropatia dolorosa secundária à hanseníase que é refratária à terapia farmacológica e à intervenção cirúrgica (descompressão). 2) Métodos: Entre 2011 e 2013, 23 pacientes com mononeuropatia dolorosa secundária à hanseníase foram recrutados para este estudo prospectivo de casos. Todos os pacientes foram refratários ao tratamento conservador otimizado e à descompressão neurocirúrgica. A dor foi avaliada ao longo do estudo utilizando-se a escala de dor neuropática e a escala analógica visual para dor. Inicialmente, os pacientes foram submetidos a implante com um eletrodo temporário que estava conectado a um estimulador externo, sendo feito teste com estimulação do nervo periférico por sete dias. Pacientes com melhora de mais de 50% nas escalas de dor receberam um implante definitivo. Os seguimentos foram realizados aos 1, 3, 6 e 12 meses. 3) Resultados: após sete dias de teste, 10 pacientes apresentaram redução de dor de 50% ou superior. No acompanhamento de 12 meses,no segundo estágio, seis dos 10 pacientes submetidos à implantação permanente de dispositivo apresentaram redução de dor de 50% ou maior (redução de 75% em média) e dois pacientes apresentaram redução de dor de 30%. Dois pacientes apresentaram migração de eletrodos que exigiu o reposicionamento durante o período de seguimento de 12 meses. 4) Conclusões: a estimulação do nervo periférico pode ter utilidade significativa no tratamento da mononeuropatia dolorosa secundária à hanseníase, em longo prazo. Estudos futuros, em uma população maior, devem ser realizados para corroborar nossos achados e permitir a implementação clínica dessa técnica. / 1) Objective: Leprosy affects approximately 10–15 million patients worldwide and remains a relevant public health issue. Chronic pain secondary to leprosy is a primary cause of morbidity, and its treatment remains a challenge. We evaluated the feasibility and safety of peripheral nerve stimulation for painful mononeuropathy secondary to leprosy that is refractory to pharmacological therapy and surgical intervention (decompression). 2) Methods: Between 2011 and 2013, twenty-three patients with painful mononeuropathy secondary to leprosy were recruited to this prospective case series. All patients were considered to be refractory to optimized conservative treatment and neurosurgical decompression. Pain was evaluated over the course of the study using the neuropathic pain scale and the visual analog scale for pain. In the first stage, patients were implanted with a temporary electrode that was connected to an external stimulator, and were treated with peripheral nerve stimulation for 7 days. Patients with 50% or greater pain relief received a definitive implantation in the second stage. Followups in the second stage were conducted at 1, 3, 6, and 12 months. 3) Results: After 7 days of trial in the first stage, 10 patients showed a pain reduction of 50% or greater. At 12-month follow-up in the second stage, 6 of the 10 patients who underwent permanent device implantation showed a pain reduction of 50% or greater (75% reduction on average), and 2 patients showed a 30% reduction in pain. Two patients presented with electrode migration that required repositioning during the 12- month follow-up period. 4) Conclusions: Our data suggest that peripheral nerve stimulation might have significant long-term utility for the treatment of painful mononeuropathy secondary to leprosy. Future studies should be performed in order to corroborate our findings in a larger population and encourage the clinical implementation of this technique.
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Reparo de nervo periférico utilizando a veia jugular como tubo assoaciado à cultura de células-tronco extraídas de tecido adiposo. Estudo no ratoRosa Junior, Geraldo Marco [UNESP] 26 August 2013 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2013-08-26Bitstream added on 2014-08-13T18:01:15Z : No. of bitstreams: 1
000733095_20141006.pdf: 458818 bytes, checksum: 5c6dc7bade9ad320ceb2ea1f2092fd78 (MD5) / As lesões de nervos periféricos representam um grande desafio para a medicina. Inúmeras técnicas visam solucionar a regeneração do nervo periférico. Os protocolos de recuperação funcional destes nervos são diversos e os resultados nem sempre apresentam soluções que promovam a regeneração da via motora e sesitiva. Com o advento da engenharia tecidual, a partir da diferenciação de células-tronco, surgiu uma nova alternativa terapêutica para a regeneração de nervos. O objetivo deste trabalho é estudar a regeneração de nervo mediante tubulização por enxerto de veia autóloga e verificar se o uso da combinação de células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTM-TA) e plasma rico em plaquetas (PRP) na tubulização do nervo fibular comum altera a morfologia e fisiologia deste nervo e de músculos inervados por ele. Os animais foram divididos em seis grupos, sendo três controles e três experimentais. O G1 (n=10) representou o controle inicial. Os grupos G2, G3 e G4 (n=20) representaram os Grupos Experimentais e receberam, após ressecção do segmento nervoso, enxerto de veia jugular externa de 20 mm tubulizando os dois cotos do nervo, sendo que G2 não recebeu preenchimento, G3 foi preenchido com PRP, G4 foi preenchido com PRP e células tronco, G5 (n=10) representou o controle final e o G6 (n=20) representou o controle de desnervação. Foram obtidas células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTM-TA) do mesmo animal, com caracterização fenotípica, utilizando CD90 e CD44 identificando a expressão média de 86,5%. As CTM-TA foram expandidas em cultura e aplicadas na concentração de 5x106 por animal. O índice funcional foi avaliado pela marcha, testes eletrofisiológicos de latência e amplitude e ainda foi realizada a análise morfométrica das fibras nervosas, observando o diâmetro mínimo da fibra, diâmetro mínimo do axônio, área das fibras, área do axônio, área ... / As lesões de nervos periféricos representam um grande desafio para a medicina. Inúmeras técnicas visam solucionar a regeneração do nervo periférico. Os protocolos de recuperação funcional destes nervos são diversos e os resultados nem sempre apresentam soluções que promovam a regeneração da via motora e sesitiva. Com o advento da engenharia tecidual, a partir da diferenciação de células-tronco, surgiu uma nova alternativa terapêutica para a regeneração de nervos. O objetivo deste trabalho é estudar a regeneração de nervo mediante tubulização por enxerto de veia autóloga e verificar se o uso da combinação de células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTM-TA) e plasma rico em plaquetas (PRP) na tubulização do nervo fibular comum altera a morfologia e fisiologia deste nervo e de músculos inervados por ele. Os animais foram divididos em seis grupos, sendo três controles e três experimentais. O G1 (n=10) representou o controle inicial. Os grupos G2, G3 e G4 (n=20) representaram os Grupos Experimentais e receberam, após ressecção do segmento nervoso, enxerto de veia jugular externa de 20 mm tubulizando os dois cotos do nervo, sendo que G2 não recebeu preenchimento, G3 foi preenchido com PRP, G4 foi preenchido com PRP e células tronco, G5 (n=10) representou o controle final e o G6 (n=20) representou o controle de desnervação. Foram obtidas células-tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTM-TA) do mesmo animal, com caracterização fenotípica, utilizando CD90 e CD44 identificando a expressão média de 86,5%. As CTM-TA foram expandidas em cultura e aplicadas na concentração de 5x106 por animal. O índice funcional foi avaliado pela marcha, testes eletrofisiológicos de latência e amplitude e ainda foi realizada a análise morfométrica das fibras nervosas, observando o diâmetro mínimo da fibra, diâmetro mínimo do axônio, área das fibras, área do ...
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Enxerto venoso ao avesso e normal, com ou sem preenchimento de músculo, em regeneração nervosa de ratos /Roque, Domingos Donizeti. January 2008 (has links)
Orientador: Fausto Viterbo / Banca: Antonio de Castro Rodrigues / Banca: Gerson Chadi / Banca: Antonio João Tedesco-Marchese / Banca: Jesus Carlos Andreo / Resumo: Foram estudadas neste trabalho quatro maneiras de regenerar o nervo ciático do rato em "gap" de 1O milímetros mediante tubulização com v4e'ia n.o.r.m. al e ao avesso, preenchida ou não com o músculo tibial caudal direito:"Foram utilizados 70 ratos Wistar, machos, pesando entre 180 a 210 g, divididos em quatro grupos experimentais com 15 animais cada grupo (VASP - veia ao avesso sem preenchimento; VAME - veia ao avesso preenchida com músculo esquelético; VNSP - veia normal sem preenchimento e VNME - veia normal preenchida com músculo esquelético) e um grupo com 10 animais (Sham) usado como controle. A veia jugular externa esquerda foi utilizada como enxerto venoso. No grupo "Sham" o nervo ciático direito foi exposto sem realizar-se nenhum procedimento sobre o mesmo. Os animais foram sacrificados 12 semanas após a cirurgia. Retirou-se amostras nos locais dos enxertos e nos cotos distais do nervo reparado, destinadas às observações histomorfológicas e morfométricas. Para a análise estatística dos cinco grupos experimentais utilizou-se a análise de variância (ANOV A) com teste F e o método de Scheffé. Observou-se regeneração nervosa em todos os grupos. Os melhores resultados foram obtidos nos grupos VASP, VAME e VNSP. O pior resultado foi com o grupo VNME na maioria dos atributos analisados, tanto no enxerto quanto no coto distal. / Abstract: The venous tubulization procedure filled with muscle was used to study nerve regeneration of the right sciatic nerve a 10 mm gap using different procedures. Seventy male Wistar rats weighting 180 to 210 g were divided into four experimental groups: inside-out vein graft (lOVG); inside-out vein graft filled with skeletal muscle (lOVGSM); standard vein graft (SVG) and standard vein graft filled with skeletal muscle (SVGSM), with 15 animaIs each. Ten rats were used as sham control. Left external jugular vein were harvested and used to bridge a 10 mm gap. 1n sham group the right sciatic nerve was expose without achieve someone procedure on nerve. AnimaIs were sacrificed 12 weeks after tubulization and fragments obtained from the grafts and distal stumps were histomorphometric analyzed. Statistical analysis (ANOVA, F-test and Scheffe's method) indicated that the best results regarding nerve regeneration were observed in 10VG; 10VGSM and SVG groups. The worst result was obtained with SVGSM. / Doutor
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Lesão do nervo fibular comum. Avaliação neuronal, muscular e funcional após neurotmese parcial : estudo no rato /Romão, Adriana Maria. January 2011 (has links)
Orientador: Fausto Viterbo / Banca: Antonio de Castro Rodrigues / Banca: Nivaldo Antonio Parizotto / Banca: José Antonio Garbino / Banca: Aristides Palhares / Resumo: Inúmeras patologias determinam lesões musculares parciais. Exemplos são as paralisias faciais, lesões do plexo braquial, entre outras. Até o momento não se tinha modelo experimental capaz de determinar lesão muscular parcial permanente. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um modelo de lesão parcial no nervo que determine uma lesão parcial no músculo por ele inervado de forma permanente. Foram utilizados 60 ratos distribuídos em três grupos com 20 animais cada. O grupo 1 foi o controle de normalidade, o grupo 2 sofreu lesão no nervo fibular comum e o grupo 3 foi o controle de desnervação. Foram analisados os seguintes atributos: massa inicial e final, massa dos músculos tibiais craniais direto e esquerdo, morfometria do músculo tibial cranial e do nervo fibular comum, temperatura, contagem do número de fibras musculares, estudo neurofisiológico e avaliação de marcha (Walking Track Analysis). Os resultados obtidos para a massa do músculo tibial cranial direito, em gramas, no grupo 1 foi 0,82g, no grupo 2 foi 0,44g e no grupo 3 foi 0,17g: G1>G2>G3 (.p < 0,05); a média da área das fibras musculares, em μm2, no grupo 1 foi de 81,4, no grupo 2 foi de 74,1 e no grupo 3 foi de 28,5: G1=G2>G3 (.p < 0,05); a média da área das fibras nervosas, em μm2, no grupo 1 foi de 34,2, no grupo 2 foi de 24,7 e no grupo 3, no coto proximal foi de 15,3 , no coto distal foi de 13,5: G1>G2=G3 (p < 0,05); a média para o exame funcional da marcha dos ratos, conforme Bain et. al.39no período de 90 dias de pós operatório no grupo 1 foi de no grupo 1 foi de10,04, no grupo 2 foi de 10,22 e no grupo 3 foi de -40,30: G1=G2<G3. (p < 0,05); a média da contagem do número de fibras musculares no grupo 1 foi de 25,95, no grupo 2 foi de 27,00 e no grupo 3 foi de 138,15: G1=G2<G3. (p < 0,05); a media para amplitude, em milivolts, do potencial de ação muscular... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Several pathologies determine partial muscle injuries. Examples are the facial paralysis, brachial plexus injuries, among others. So far there was not an experimental model to determine permanent partial muscle injury. The aim of this study was to develop a model of partial nerve injury to determine a partial lesion in the muscle innervated by it permanently. We used 60 rats divided into three groups with 20 animals each. Group 1 was normal control, group 2 suffered lesion on common fibular nerve and group 3 was the denervation control. We analyzed the following attributes: initial mass and final mass of the tibial cranial muscle, right and left tibial cranial muscle morphology and common fibular nerve, temperature, total number of muscular fibres count, neurophysiological assessment and Walking Track Analysis. The results for the mass of the right tibial cranial muscles, in grams, in group 1 was 0.82 g in group 2 was 0.44 g and in group 3 was 0.17 g: G1>G2>G3 (. P <0, 05), the average area of muscle fibers in μm2, in group 1 was 81.4 in group 2 was 74.1 and in group 3 was 28.5: G1=G2>G3 (. p < 0.05), the mean area of nerve fibers, in μm2, in group 1 was 34.2, in group 2 was 24.7 and in group 3, the proximal stump was 15.3 in the distal stump was 13.5: G1>G2=G3 (p <0.05) and the average for the functional examination of walking track of rats according to Bain et. al.39 in the period of 90 days postoperatively in group 1 was -10, 04 in group 2 was 10.22 and in group 3 was -40.30: G1=G2<G3 (P <0.05) and the average of total number of muscular fibres count in group 1 was 25.95 in group 2 was 27.00 and in group 3 was 138.15: G1=G2<G3. (P <0.05) for the average of amplitude, in millivolts, the potential of the muscular action in group 1 was 25.71 in group 2 was 16.77 and in group 3 was 3.94: G1>G2> G3 (p <0.05). With the experimental model used, it was concluded that the partial lesio... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Análise morfológica dos forames e nervos cranianos do equino por meio da ressonância magnética e tomografia computadorizadaOliveira, Fernanda Gabriela da January 2017 (has links)
Orientador: Vânia Maria de Vasconcelos Machado / Resumo: Este estudo teve por objetivo proporcionar fotos macroscópicas dos nervos cranianos e forames do crânio de equinos comparadas com imagens de ressonância magnética (RM) e tomografia computadorizada (TC), com o intuito de promover a identificação e interpretação precisa da origem e trajeto dos nervos cranianos. Foram obtidas imagens de RM dos nervos cranianos de 11 equinos adultos e imagens dos forames do crânio na TC de 12 equinos adultos. Para ilustrar a anatomia óssea dos forames do crânio, foi realizada a reconstrução 3D. Encéfalos de 11 equinos em conjunto com os nervos cranianos foram retirados do neurocrânio e fixados em solução aquosa de formol a 10%. Após a secagem, os mesmos foram coloridos com esmalte poliuretano e fotografados. A base do crânio de dois equinos foram removidas com os nervos cranianos que foram coloridos e posteriormente fotografados. Adicionalmente, o crânio macerado de um equino também foi utilizado para evidenciação dos forames do crânio. Os nervos cranianos e forames do crânio foram indicados e nomeadas de acordo com livros clássicos de anatomia. As peças anatômicas colaboraram com a identificação da maioria dos nervos cranianos nas imagens de RM e de todos os forames do crânio nas imagens de TC. Uma vez que o conhecimento anatômico é fundamental para a identificação dessas estruturas nas imagens de RM e TC. / Mestre
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Estudo da interação in vitro do Mycobacterium leprae com a célula de Schwann: análise morfológica e avaliação da expressão de moléculas funcionaisKontos, Lucineia Alves January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A hanseníase é uma doença sistêmica infecto-contagiosa crônica causada pelo patógeno intracelular obrigatório Mycobacterium leprae, que afeta principalmente a pele e nervos periféricos dos seres humanos. Apesar dos intensos e bem controlados programas de terapia multidroga, a transmissão desta doença continua ocorrendo e um grande número de indivíduos acometidos permanece em risco de desenvolver dano ao nervo. A lesão neural na hanseníase é decorrente da capacidade do M. leprae infectar os nervos periféricos, alojando-se preferencialmente no interior de células de Schwann (CS). O presente trabalho teve como objetivo geral contribuir para o entendimento da interação M. leprae - CS, e como objetivos específicos: 1) estabelecer e caracterizar fenotipicamente culturas de CS de rato (CSPR) e humanas primárias (CSHP), comparando com a linhagem de CS humana ST88-14; 2) determinar a cinética de associação do M. leprae a estas células; 3) analisar aspectos morfológicos da interação do M. leprae com a CS; e 4) estudar o efeito do M. leprae sobre a expressão da cadeia a-2 da laminina-2, Beta-distroglicana, Desert Hedgehog (Dhh) e gangliosídeo 9-O-acetil GD3 pela CS. Os resultados deste trabalho mostraram que as CS ST88-14, as CSPR e as CSHP apresentam características de CS com fenótipo amielínico. Através de microscopia eletrônica de varredura foi observado que as CS ST88-14 tratadas ou não com o M. leprae formaram monocamada e que 50 por cento destas células apresentaram M. leprae aderidos com 2 horas de tratamento. As bactérias apresentavam-se aderidas, envolvidas ou não por filopódios, e em processo de internalização. O grau de associação do M. leprae às CSPR e CSHP foi semelhante ao observado nas CS ST88-14. Uma baixa porcentagem de CS ST88-14 mostraram expressão constitutiva do gangliosídeo 9-O-Acetil GD3
Quando tratadas com o M. leprae letalmente irradiado estas células apresentaram uma modulação positiva para esta molécula e seu padrão de expressão, inicialmente difuso tornou-se pontual com o curso temporal do tratamento com as bactérias. A análise do efeito do M. leprae sobre a expressão da cadeia a-2 da laminina-2 em CSHP mostra que o bacilo não modula a expressão desta molécula tanto ao nível traducional como transcricional. Já o M. leprae modulou negativamente a expressão de RNAm de ß-distroglicana em CSHP. Entretanto não afetou o nível da protéina nas condições experimentais utilizadas. O M.leprae também modulou negativamente a expressão de RNAm de Dhh nestas células. Como camundongos ôknockoutõ para o gene dhh apresentam microfasciculação no nervo e 20 por cento das biopsias de nervo de pacientes com hanseníase apresentam microfasciculação, investigamos a expressão de Dhh em nervos de hanseníase com e sem microfasciculação. Biopsias com microfasciculação apresentaram uma considerável diminuição na expressão de RNAm de Dhh quando comparados com pacientes que apresentaram nervo sem microfasciculação. Com os resultados obtidos nesse trabalho mostramos que o M. leprae é capaz interagir com a CS in vitro e que moléculas potencialmente relevantes nesta interação são afetadas por esta bactéria, podendo isso desencadear e/ou promover a patogenia observada na hanseníase / Leprosy is an infectious and contagious disease caused by Mycobacterium leprae, an
obligate intracellular parasite. The disease affects predominantly the skin and the
peripheral nerves in humans. Despite the control programs implemented and the
establishment of multidrug treatment (MDT), the transmission of the disease still occurs
in high levels. Individuals affected by the disease are at risk of developing severe
disabilities and deformities. The nerve damage observed in leprosy is caused by the
presence of M. leprae in the nerves, mainly inside Schwann cells (SCs). The present
study aimed to investigate the M. leprae-Schwann cell interaction, consisting of the
following objectives: i) establishment and phenotypic characterization of cultures from
primary rat Schwann cells (PRSC) and primary human Schwann cells (PHSC); ii)
analysis of the capacity of M. leprae to associate these cells; iii) morphological analysis
of M. leprae interaction with the ST88-14 human SC cell line by electron microscopy;
and iv) investigation of the effect of M. leprae on the Schwann cell expression of α2-
laminin, -dystroglycan, desert hedgehog (Dhh) and 9-O-acethyl-GD3. The results
showed that ST88-14 SC, PRSC, and PHSC display a non-myelinating phenotype.
Scanning electron microscopy showed that ST88-14 SC cultures treated or not with M.
leprae formed a monolayer and that 50% of these cells displayed M. leprae on their
surface after a two-hour treatment with the bacteria. The bacteria were in contact with
the cell surface, amid fillipodia or lying on smooth membrane regions; some of them
were in the course of being internalized. A similar degree of association of M. leprae to
PRSC and to PHSC was observed. A low percentage of the ST8814 SC constitutively
expressed the 9-O-acetyl GD3. After treatment with lethally irradiated M. leprae these
cells exhibited an upregulation of this ganglioside, with an additional change in the
expression pattern, which was initially difuse and became spotty. The results obtained
also suggest that M. leprae is unable to modulate the expression of laminin-α2 in PHSC,
both at the transcriptional and at the translational level. In contrast, live M. leprae was
able to downregulate the levels of -dystroglican mRNA to in PHSC cultures, although
protein levels were unaffected. Moreover, M. leprae stimulus induced downregulation of
Dhh mRNA in PHSC. As dhh knockout mice present minifascicles in the nerves, and
about 20% of leprosy biopsies display microfasciculation, we ascertained the Dhh
expression in leprosy nerve biopsies with microfasciculation, comparing it with the ones
without this morphological pattern. Nerve biopsies with microfasciculation exhibited
significantly lower levels of this factor, speculatively related to the structural
disarrangement usually found in the leprosy nerves. The results of this study showed
the possible utilization of Schwann cells in vitro models to study M. leprae-Schwann cell
interaction. M. leprae was able to affect the expression of relevant SC molecules
involved in the interaction with the bacillus, with a potential link of this modulation with
the pathogenesis of the leprosy nerve damage.
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Análise da utilização da prática mental na recuperação funcional de indivíduos com paralisia facial periféricaSousa, Pedro Henrique Côrtes de 04 December 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ceilândia, Programa de Pós-Graduação em Ciências e Tecnologias em Saúde, 2017. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo restrito: Capítulos 3. Materiais e Métodos, 4. Resultados e 5. Discussão. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-04-12T19:39:46Z
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Previous issue date: 2018-04-24 / Introdução: A Paralisia Facial Periférica (PFP) uma alteração na função do nervo facial que acarretam comprometimentos funcionais, estéticos e psicológicos nos sujeitos acometidos por esta condição de saúde. A avaliação destes indivíduos é realizada por meio de escalas subjetivas e/ou avaliações objetivas que fornecem subsídio para uma proposta interventiva, tal como a Prática Mental (PM), técnica de treinamento com objetivo de aumentar a performance do indivíduo. Considerando a escassez de métodos de avaliação aplicados ao ambiente clínico e a falta de estudos sobre a influência da PM nesta condição, o presente estudo teve como objetivo inicial avaliar a confiabilidade do software Tracker para mensurar deslocamentos da mímica facial (MF) e como objetivo secundário analisar a influência da PM na reabilitação de indivíduos com PFP. Materiais e Métodos: Foram realizados um estudo transversal e um ensaio clínico não controlado. O estudo transversal foi realizado para avaliar a confiabilidade do software Tracker para mensurar deslocamentos durantes as MFs. Para este estudo foram recrutados indivíduos com e sem PFP os quais foram filmados realizando MF e tiveram os vídeos analisados por avaliadores independentes, para essa análise foi calculado o Índice de Correlação Intraclasse (ICC). Para o ensaio clínico não controlado foi realizado uma análise comparativa entre os momentos pré e pós intervenção nas medidas FGS, pela COPM, pela FDI e pelos deslocamentos faciais obtidos por meio do Tracker em indivíduos com PFP que foram submetidos a oito sessões de fisioterapia associada a PM. Resultados e Discussão: O software apresentou confiabilidade moderada e forte para avaliar deslocamentos das mímicas de fechar olhos e sorrir, não houve correlação para o movimento de fazer o bico, pois o software não foi capaz de mensurar os movimentos que ocorrem no plano ântero-posterior. Os indivíduos com PFP que finalizaram o protocolo de intervenção apresentaram melhora significativa na FGS, FDI, COPM e deslocamento da comissura labial afetada. Já para as escalas funcionais o grupo Controle do Movimento não apresentou diferença nas escalas, o grupo Facilitação e o grupo Relaxamento não apresentaram para a subescala de bem estar social da FDI. Este fato pode estar relacionado ao tamanho da amostra. Conclusão: O Tracker apresentou correlação forte e moderada para as mímicas de fechar os olhos e sorrir, podendo assim ser utilizado em ambiente clínico para mensurar estas mímicas. Já a PM demonstrou ser capaz de influenciar positivamente na recuperação funcional de indivíduos com PFP. / Introduction: Peripheral Facial Paralysis (PFP) is a alterations in facial nerve function that lead to functional, aesthetic and psychological impairment in the subjects affected by this health condition. The evaluation of these individuals is performed through subjective scales and/or objective assessments that provide support for an interventional proposal, such as the Mental Practice (PM), a training technique aimed at increasing the individual's performance. Considering the scarcity of evaluation methods applied to the clinical environment and the lack of studies on the influence of PM in this condition, the present study had as its initial objective to evaluate the reliability of the Tracker software to measure movements of the facial mime (MF) and as a secondary objective to analyze the influence of MP in the rehabilitation of individuals with PFP. Materials and Methods: A cross-sectional study and an uncontrolled clinical trial were conducted. The cross-sectional study was carried out to evaluate the reliability of the Tracker software to measure displacements during MF. For this study, individuals with and without PFP were recruited who were filmed doing MF and had the videos analyzed by independent evaluators. For this analysis the Intraclass Correlation Index (ICC) was calculated. For the uncontrolled clinical trial, a comparative analysis was performed between the pre and post intervention moments in of the FGS, COPM, FDI and the facial displacements obtained through Tracker in individuals with PFP who underwent eight sessions of physical therapy associated with PM. Results and Discussion: The software presented moderate and strong reliability to evaluate the movements of the mimics of close eyes and to smile, there was no correlation for the movement of the beak because the software was not able to measure the movements that occur in the anteroposterior plane . Individuals with PFP who completed the intervention protocol showed significant improvement in the FGS, FDI, COPM and displacement of the affected labial commissure. For the functional scales, the movement control group showed no difference in any scale, the Facilitation group and the Relaxation group did not present to the FDI social welfare subscale. This fact may be related to the size of the sample. Conclusion: The Tracker software presented a strong and moderate correlation for the mimics of closing the eyes and smiling, being able to be used in clinical environment to measure these mimics. PM has been shown to influence positively the functional recovery of individuals with PFP.
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Dessensibilização dos nervos palmares em eqüinos: estudo comparativo experimental do álcool benzílico 0,75% e álcool etílico absoluto (95,5% PA)Escodro, Pierre Barnabé [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:11:31Z : No. of bitstreams: 1
escodro_pb_me_botfmvz.pdf: 474794 bytes, checksum: b70581e9cc3a3b8c380d9ddab2be8635 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / To test the clinical and histopathological effects of two chemical neurolytics, the left forelimb of ten normal horses were shod with a designed shoe adaptted with 5 screws to produce solar pressure and induced lameness. After gait and lameness score analysis, the lateral and medial branchs of the left palmar nerve of 5 horses was injected with 5 ml of 0,75% benzyl alcohol -Sarapin -(Group A) and 5 horses was injected with 5 ml of pure ethyl alcohol or absolute alcohol (Group B). The animals were submitted to lameness evaluation and solar sensibility tests during the next months. In the Group A, which was injected with benzyl alcohol -Sarapin , the solar pain returned 5 months latter while in the Group B, injected with ethyl alcohol (ethanol or absolute), the solar surface was still desensitized 6 months latter. The histopathological examination of the palmar nerve showed that the perineural injection of benzyl alcohol 0,75% - Sarapin , (Group A), resulted in axonotmesis, characterized by axonal nerve degeneration, without disruption of connective tissue elements (endo, peri and epineurium), with good prognosis for recovery the nerve conduction. In the Group B, the perineural injection of ethyl alcohol absolute (ethanol), resulted in neurotmesis, characterized by disruption of all the axon and supporting connective tissue structures, with poor prognosis for nerve regeneration. It was concluded that chemical neurolysis with alcohol is an option for temporary or permanent nerve blocks in horses but the minimum concentration and number of injections required for neurolysis must be established.
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