Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-30T09:26:06Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 11521311 bytes, checksum: 70a7d0d955f6314148fafbb74c41e32e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-30T09:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 11521311 bytes, checksum: 70a7d0d955f6314148fafbb74c41e32e (MD5) Previous issue date: 2014-04-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A nutrição das orquídeas é um dos principais fatores que influenciam a propagação e produção dessas plantas durante as fases de cultivo in vitro e ex vitro. Assim, para o presente estudo foram realizados dois trabalhos contemplando tal tema. O primeiro teve como objetivo desenvolver e acrescentar uma terceira fase ao método Requerimento- Suprimento (método ReSu) de elaboração de composição nutricional de meios de cultura, a qual, ao utilizar-se de matrizes experimentais com reduzido número de tratamentos, permite o estudo do efeito da concentração de cada nutriente e de suas interações sobre a germinação de sementes e o crescimento de plântulas de orquídeas, permitindo, assim, a otimização da composição nutricional de dois novos meios de cultura, um para o semeio e outro para o recultivo in vitro de Cattleya perrinii Lindl. Este método passou a ser denominado de Requerimento-Suprimento-Otimização (método ReSuOti). No segundo trabalho, o objetivo foi realizar um estudo sobre a nutrição de orquídeas do gêneros Phalaenopsis, Cattleya e Dendrobium e desenvolver um modelo de recomendação de fertilização de orquídeas fundamentado no balanço nutricional entre requerimento e suprimento e que, ao determinar o fertilizante e a sua dose, considere as variáveis genótipo, tipo de substrato utilizado, manejo da irrigação, fase do cultivo, nível tecnológico do sistema de produção e produtividade esperada. No primeiro trabalho, foram montados três experimentos para a fase de semeio e três para a de recultivo in vitro, sendo um experimento para estudar a interação N × P × S, outro para a intração K × Ca × Mg, nesses dois experimentos utilizou-se a matriz experimental Box Berard aumentada (3) modificada, e um terceiro para avaliar, isoladamente, os efeitos das concentrações de Fe, Zn e Mn. Teve-se como conclusão do primeiro trabalho que a utilização da terceira fase do método ReSuOti permitiu, com a utilização de um número reduzido de tratamentos, o estudo do efeito da concentração de cada nutriente e de suas interações sobre a germinação de sementes e o crescimento de plântulas de orquídeas, e possibilitou a otimização da composição nutricional de dois novos meios de cultura, um para o semeio e outro para o recultivo in vitro de C. perrinii. A composição nutricional otimizada no meio de cultura para a fase de semeio foi 539 (N); 323 (P); 30 (S); 935 (K); 140 (Ca); 40 (Mg); 9,4 (Fe); 1,3 (Zn) e 5,1 (Mn) mg L-1, o qual fora denominado de meio Suprimento-Orquídea-Fase Semeio (meio SuOS). No meio de cultura para a fase de recultivo a composição nutricional otimizada foi 455 (N); 206 (P); 214 (S); 655 (K); 39 (Ca); 12 (Mg); 3 (Fe); 2,3 (Zn) e 3,7 (Mn) mg L-1, este meio foi denominado de meio Suprimento-Orquídea-Fase Recultivo (meio SuOR). No segundo trabalho, baseado no balanço nutricional entre requerimento e suprimento e utilizando a modelagem como ferramenta, desenvolveu-se a primeira versão de um modelo de recomendação de fertilização de orquídea, denominado Ferticalc-Orquídea, que possibilita recomendar as doses dos nutrientes N, P, K, Ca, Mg, S, Fe, Zn, Mn, Cu, B e Mo em função do grupo da orquídea cultivada, da fase do cultivo dessas plantas, do volume e do tipo de substrato utilizado, da produtividade esperada, do manejo da irrigação, da existência ou não do controle de temperatura na casa de vegetação e do objetivo com a cultura (produção de orquídea em vaso ou de flor para corte). Os grupos de orquídeas contemplados nesta primeira versão foram: grupo falenópsis (G1); grupo dendróbio nobile (G2); grupo denfal (G3); grupo catleia monofoliada (G4); grupo catleia bifoliada (G5) e grupo catleias pequenas (G6). / The mineral nutrition of orchids is one of the main factors that influence the propagation and production of these plants during the in vitro and ex vitro growing phases. Thus, for this paper, we carried out two studies on this theme. The aim of the first was to analyze the nutrition of orchids of the genera Phalaenopsis, Cattleya, and Dendrobium and develop a model for recommendation of orchid fertilization based on the nutritional balance between requirement and supply, and which, upon determining the fertilizer and application rate, considers the variables of genotype, type of substrate used, irrigation management, growth phase, technological level of the production system, and expected yield. The aim of the second study was to develop and add a third phase to the Requirement-Supply method (ReSu method) of preparation of the nutritional composition of growth media which, upon using experimental matrices with a smaller number of treatments, allows the effect of the concentration of each nutrient and of nutrient interactions on seed germination and orchid seedling growth to be studied. This, in turn, allows optimization of the nutritional composition of two new growth media, one for seeding and the other for regrowth in vitro propagation of Cattleya perrinii Lindl. This method came to be called the Requirement-Supply-Optimization method (ReSuOpt method). In this second study, three experiments were set up for the seeding phase and three for regrowth in vitro, with one experiment for studying the N × P × S interaction, and another for the K × Ca × Mg interaction – in these two experiments, the modified Box Berard increased 3 experimental matrix was used – and a third experiment to separately evaluate the effects of the Fe, Zn, and Mn concentrations. In the first study, based on the nutritional balance between requirement and supply and using modeling as a tool, the first version of a fertilizer recommendation model for orchid was developed, called the Ferticalc-Orquídea, which allows recommendation of application rates of the nutrients N, P, K, Ca, Mg, S, Fe, Zn, Mn, Cu, B, and Mo as a function of the orchid group grown, the growth phase of these plants, the volume and the type of substrate used, the expected yield, the irrigation management, the existence or lack of temperature control in the greenhouse, and the purpose of the plants (for orchid production in pots or flowers for cutting). The orchid groups considered in this first version were the phalaenopsis group (G1), nobile dendrobium group (G2), denphal group (G3), unifoliate cattleya group (G4), bifoliate cattleya group (G5), and small cattleya group (G6). The conclusion of the second study was that the use of the third phase of the ReSuOpt method, employing a reduced number of treatments, allowed evaluation of the effect of the concentration of each nutrient and of their interactions on seed germination and the growth of orchid seedlings, and allowed optimization of the nutritional composition of two new growth media, one for seeding and the other for regrowth in vitro of C. perrinii. The optimized nutritional composition in the growth medium for the seeding phase was 539 (N), 323 (P), 30 (S), 935 (K), 140 (Ca), 40 (Mg), 9.4 (Fe), 1.3 (Zn), and 5.1 (Mn) mg L-1, which had been called the Orchid-Seeding Phase-Supply medium (OSSu medium). In the growth medium for the regrowth phase, the optimized nutritional composition was 455 (N), 206 (P), 214 (S), 655 (K), 39 (Ca), 12 (Mg), 3 (Fe), 2.3 (Zn), and 3.7 (Mn) mg L-1, and this medium was called the Orchid- Regrowth Phase-Supply medium (ORSu medium).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:37:45Z : No. of bitstreams: 1 moraes_la_me_botfca.pdf: 1082643 bytes, checksum: a98a243243226985befa640173e58d81 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As doenças causadas por vírus são um dos principais entraves sanitários nos sistemas de produção de orquídeas, uma vez que promovem consideráveis danos ao seu valor comercial, já que afetam diretamente sua estética e produtividade. São escassos os estudos relacionados aos principais vírus que ocorrem nessa planta ornamental em condições brasileiras. Em termos mundiais, Cymbidium mosaic virus (CymMV) e Odontoglossum ringspot virus (ORSV) prevalecem e são os vírus de maior importancia econômica.Tendo em vista esta questão, o presente trabalho objetivou avaliar, através de métodos sorológicos e moleculares, 385 amostras pertencentes a diferentes gêneros de orquídeas oriundas do estado de São Paulo a fim de estabelecer qual o(s) de maior importância fitossanitária. A análise de detecção foi realizada atraves do Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), com os antissoros comerciais contra: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) e para o gênero Potyvirus. Para a análise de variabilidade, oligonucleotídeos foram desenhados para amplificar a região codificadora da proteína capsidial do CymMV e ORSV, bem como foi obtido da literatura um par de primers para detecção do Orchid fleck virus (OFV). O vírus de maior prevalência foi o CymMV, presente em 274 amostras (71,16%), seguido do ORSV presente em 61 amostras (15,85%), e OFV em 11 amostras (2,85%). Os demais vírus testados não foram identificados em nenhuma das amostras analisadas. Os sintomas causados pelo CymMV e ORSV são muito variaveis, além de serem confundidos com fatores abióticos, problemas nutricionais e fitotoxidez. Aparentemente a expressão de sintomas está relacionada ao gênero e idade da planta, bem como aos fatores climáticos das regiões de cultivo. Quanto a variabilidade... / Diseases caused by viruses are a major constraint in the production systems of orchids, as they promote considerable damage to its commercial value, as it directly affects their productivity and aesthetics. There are few studies related to major viruses that occur in this ornamental plant in the Brazilian conditions. Globally, Cymbidium mosaic virus (CymMV) and Odontoglossum ringspot virus (ORSV) are prevalent and the virus of greatest economic importance. Considering this issue, the present study aimed to evaluate, through serological and molecular methods, 385 samples of different orchid genera from São Paulo state in order to establish what is(are) the most important virus(es). As for the Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), commercial antisera were used against: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) and the genus Potyvirus. Primers were designed to amplify the coding region of the capsidial protein CymMV and ORSV and a pair of primers for detection of Orchid fleck virus (OFV) was obtained from the literature. The the most prevalent virus was CymMV, present in 274 samples (71.16%), followed by ORSV present in 61 samples (15.85%) and OFV in 11 samples (2,85%). The other viruses tested were not identified in any of the samples analyzed. Symptoms caused by CymMV and ORSV are very variables, and are commonly confused with abiotic factors, nutritional problems and phytotoxicity. Apparently is related to gender and age of the plant, as well as the climate factors. As the genetic variability of CymMV e ORSV, was observed nucleotide identity... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Marcelo Agenor Pavan / Coorientador: Renate Krause Sakate / Banca: Kelly Cristina Gonçalves Rocha / Banca: Jorge Alberto Marques Rezende / Resumo: As doenças causadas por vírus são um dos principais entraves sanitários nos sistemas de produção de orquídeas, uma vez que promovem consideráveis danos ao seu valor comercial, já que afetam diretamente sua estética e produtividade. São escassos os estudos relacionados aos principais vírus que ocorrem nessa planta ornamental em condições brasileiras. Em termos mundiais, Cymbidium mosaic virus (CymMV) e Odontoglossum ringspot virus (ORSV) prevalecem e são os vírus de maior importancia econômica.Tendo em vista esta questão, o presente trabalho objetivou avaliar, através de métodos sorológicos e moleculares, 385 amostras pertencentes a diferentes gêneros de orquídeas oriundas do estado de São Paulo a fim de estabelecer qual o(s) de maior importância fitossanitária. A análise de detecção foi realizada atraves do Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), com os antissoros comerciais contra: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) e para o gênero Potyvirus. Para a análise de variabilidade, oligonucleotídeos foram desenhados para amplificar a região codificadora da proteína capsidial do CymMV e ORSV, bem como foi obtido da literatura um par de primers para detecção do Orchid fleck virus (OFV). O vírus de maior prevalência foi o CymMV, presente em 274 amostras (71,16%), seguido do ORSV presente em 61 amostras (15,85%), e OFV em 11 amostras (2,85%). Os demais vírus testados não foram identificados em nenhuma das amostras analisadas. Os sintomas causados pelo CymMV e ORSV são muito variaveis, além de serem confundidos com fatores abióticos, problemas nutricionais e fitotoxidez. Aparentemente a expressão de sintomas está relacionada ao gênero e idade da planta, bem como aos fatores climáticos das regiões de cultivo. Quanto a variabilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diseases caused by viruses are a major constraint in the production systems of orchids, as they promote considerable damage to its commercial value, as it directly affects their productivity and aesthetics. There are few studies related to major viruses that occur in this ornamental plant in the Brazilian conditions. Globally, Cymbidium mosaic virus (CymMV) and Odontoglossum ringspot virus (ORSV) are prevalent and the virus of greatest economic importance. Considering this issue, the present study aimed to evaluate, through serological and molecular methods, 385 samples of different orchid genera from São Paulo state in order to establish what is(are) the most important virus(es). As for the Enzyme linked immunossorbent assay (ELISA), commercial antisera were used against: CymMV, ORSV, Cymbidium ringspot virus (CymRSV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) and the genus Potyvirus. Primers were designed to amplify the coding region of the capsidial protein CymMV and ORSV and a pair of primers for detection of Orchid fleck virus (OFV) was obtained from the literature. The the most prevalent virus was CymMV, present in 274 samples (71.16%), followed by ORSV present in 61 samples (15.85%) and OFV in 11 samples (2,85%). The other viruses tested were not identified in any of the samples analyzed. Symptoms caused by CymMV and ORSV are very variables, and are commonly confused with abiotic factors, nutritional problems and phytotoxicity. Apparently is related to gender and age of the plant, as well as the climate factors. As the genetic variability of CymMV e ORSV, was observed nucleotide identity... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orchids are ornamental plants cultivated by man long ago. The great diversity of colors and forms of the flowers of the species and natural and artificial hybrids adds to these plants high commercial value. The destruction of natural habitats, coupled with predation has led to the loss of genetic variability of the species, intensifying the already severe process of extinction.The aim of this study was to characterize native orchids of the SergipeState by ISSR molecular markers, as well as to study strategies for in vitro conservation under slow growth of three orchid species belonging to the subtribe Laeliinae. Two in vitro conservation experiments were realized, both in a completely randomized design. The first experiment was in a 3x3x2 factorial scheme, and we tested three combinations of carbon sources and osmotic regulators (20 g L-1of sucrose, 10 g L-1of sucrose + 5g L-1of mannitol, 10 g L-1of sucrose + 5g L-1of sorbitol), three orchid species (Epidendrum secundumJacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr andCattleya tigrina A. Rich) and two temperatures (18 and 25°C).The second experiment was realized in a 4x3x2factorial scheme, and we tested four concentrations of salts of MS medium (100%, 75%, 50% and 25% of salts), three orchid species (Epidendrum secundumJacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr andCattleya tigrina A. Rich) and two temperatures (18 and 25°C). The eight primers used in the study revealed a total of 87 fragments, all polymorphic, which proved effective in characterizing the collection of study. The diversity found within and between studied genera was high and promising for conservation studies.Cattleya tigrina presented 100% of survival at 180 days,and can be kept in medium with 25% of MS salts at 18°C. The temperature 18ºC also allowed the conservation of Epidendrum secundum for 365 days, with 100% of MS salts. Encyclia dichroma presented greater sensitivity to low temperature and can be kept at 25ºC with 25% of the salts of the MS medium for 365 days. / As orquídeas são plantas ornamentais cultivadas pelo homemhá muito tempo. A grande diversidade de cores e formas das flores das espécies e híbridos naturais e artificiais agrega a estas plantas alto valor comercial. A destruição dos habitats naturais, aliada à coleta predatória, tem levado à perda da variabilidade genética das espécies, intensificando o já acentuado processo de extinção. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar por marcadores moleculares tipo ISSR orquídeas nativas do Estado de Sergipe, bem como estudar estratégias para conservação in vitro,sob crescimento lento, para três espécies pertencentes à subtribo Laeliinae. Foram realizados dois experimentos de conservaçãoin vitro, ambos em delineamento inteiramente casualizado.O primeiro experimento foi em esquema fatorial 3x3x2, onde foram testadas três combinações de fontes de carbono e reguladores osmóticos (20 g L-1 de sacarose; 10 g L-1 de sacarose + 5g L-1 de manitol; 10 g L-1 de sacarose + 5g L-1 de sorbitol), três espécies de orquídea (Epidendrum secundum Jacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr eCattleya tigrina A. Rich) e duas temperaturas (18 e 25ºC). O segundo experimento foi em esquema fatorial 4x3x2, onde foram testadas quatro concentrações de sais do meio MS (100%, 75%, 50% e 25% dos sais), três espécies de orquídea (Epidendrum secundum Jacq.,Encyclia dichroma (Lindl.) Schltr, eCattleya tigrina A.Rich) e duas temperaturas (18 e 25ºC). Os oito primers utilizados no trabalho revelaram um total de 87 fragmentos, todos polimórficos, que se mostraram eficientes na caracterização da coleção de estudo. A diversidade encontrada entre e dentro dos gêneros estudados mostrou-se elevada e promissora para estudos de conservação. Cattleya tigrina apresentou 100% de sobrevivência aos 180 dias podendo ser conservada em meio com 25% dos sais MS à 18ºC. Esta temperatura também permitiu a conservação de Epidendrum secundum por 365 dias em meio com 100% dos sais MS. Encyclia dichroma apresentou maior sensibilidade à baixa temperatura e pode ser conservada a 25ºC em meio com 25% dos sais MS por 365 dias.