Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia Veterinária, 2014. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-10-02T13:39:46Z No. of bitstreams: 1 2014_GeorgeHenriqueLimaMartins.pdf: 373385 bytes, checksum: 4a5dd41346725cd6e6e15dc9bd7a42a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-10-02T13:40:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_GeorgeHenriqueLimaMartins.pdf: 373385 bytes, checksum: 4a5dd41346725cd6e6e15dc9bd7a42a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-02T13:40:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_GeorgeHenriqueLimaMartins.pdf: 373385 bytes, checksum: 4a5dd41346725cd6e6e15dc9bd7a42a6 (MD5) Previous issue date: 2014-03-25 / O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da estimulação ovariana com o uso de FSH, sobre a maturação e competência, de ovócitos obtidos por aspiração transvaginal guiada por ultrassom, bem como sobre as taxas de clivagem e de produção de blastocisto na raça Sindi. Três tratamentos foram utilizados para produzir ovócitos parcialmente maturados in vivo, sendo T1 remoção do folículo dominante (RFD) com uso de doses múltiplas de FSH [RFD+FSH(m)], T2 remoção do folículo dominante e FSH em dose simples [RFD+FSH(s)] e TC ou grupo controle sendo realizada apenas a remoção do folículo dominante e Ovum Pick Up (OPU) [RFD-OPU]. Foram utilizadas 14 vacas cíclicas, vazias, não lactantes da raça Sindi, divididas em três grupos experimentais, sendo um para cada tratamento, sob regime de aspiração semanal, por período de cinco semanas. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso. Os animais dos três grupos receberam um dispositivo intravaginal de progesterona no inicia de cada tratamento, sendo retirado no momento da OPU. O número de folículos aspirados por vaca não diferiu entre os grupos com FSH, havendo diferença estatística apenas entre os grupos T2 e TC, sendo T2 superir a TC (11,36±1,39; 12,52±1,81 e 8,7±0,74 respectivamente) (P<0,05). Para o número de Complexos Cumulus Ovócitos (CCOs) recuperados por vaca, T1 (9,76±1,32) e T2 (9,81±1,83) não diferiram entre si, mas ambos foram superiores a T3 (6,3±0,82) (P<0,05). O número de ovócitos maturados foi superior para os grupos com FSH, mas houve semelhança entre os grupos T1 e TC (6,72±1,04; 7,33±1,32 e 4,45±0,51) (P<0,05). Para taxa de clivagem e média de embriões produzidos não houve diferença significativa (P<0,05). Os tratamentos com FSH foram eficientes para melhorar o número de folículos aspirados, número de CCOs recuperados e o número de ovócitos maturados. Também foi observado nesses grupos um maior número de folículos de 3-8mm, mostrando uma eficiência na resposta estimulatória, porém os valores das taxas de clivagem (87%, 74% e 69%, respectivamente para T1, T2 e TC) e de blastocisto (33%, 35% e 32%, respectivamente para T1, T2 e TC) não diferiram entre si (P<0,05). O uso de FSH nos dois regimes de aplicação (única e múltipla aplicação) foi capaz de aumentar o número de folículos, o número de estruturas aptas à maturação, mas não foi eficaz em promover a aquisição da competência ovocitária refletida nas taxas de clivagem e de blastocisto. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to evaluate the effect of ovarian stimulation using FSH before ovum pick up in Sindhi Cows to improve the maturation and competence of oocytes, as well as increase the cleavage rate and blastocyst production. Three treatments were used to induce in vivo oocyte maturation, T1 [DFR + FSH (m)]: Dominant follicle removal followed by multiple injection of FSH; T2 [DFR + FSH (s)] dominant follicle removal followed by single injection of FSH; T3 [DFR-OPU] dominant follicle removal and OPU. Fourteen non- pregnant and non lacting cycling Sindhi cows were used in a completely randomized experimental design. Animals were divided in three groups (T1, T2 e T3) and had their ovaries aspirated weekly for five consecutive weeks. At the begin of each week animals from three groups received an intravaginal progesterone device. The number of aspirated follicles per cow did not differ between the groups with FSH, but T2 group was statistically higher than T3 (11.36±1.39, 12.52±1.81 and 8.7±0.74, respectively for T1, T2 and T3), (P<0.05). The number of oocytes retrieved per cow was similar between T1 (9.76±1.32) and T2 (9.81±1.83) but lower in T3 (6.3±0.82), (P<0.05). The number of matured oocytes was higher for the groups with FSH, but there was similarity between DFR + FSH (m) and DFR-OPU (6.72±1.04, 7.33±1.32 and 4.45±0.51 matured oocytes, respectively), (P<0.05). There was no difference in the cleavage and blastocyt rates in all groups produced no significant difference (P<0.05). FSH treatments increased the number of follicles aspirated, number of oocytes retrieved and the number of matured oocytes. In these groups was also observed a greater number of follicles 3-8 mm than group without FSH, showing efficiency in stimulatory response. However, the cleavage rate (87%, 74% and 69% of cleavaged embryos, respectively to T1, T2 and T3) and blastocyst rate (33%, 35% and 32% of blastocyst to T1, T2 and T3) did not differ between the groups. The use of FSH multiple or single application was able to increase the number of follicles, the number of structures suitable for maturation, but was not effective in promoting the acquisition of oocyte competence, reflected in the cleavage and blastocyst rates.

Submitted by Gabriel Oliveira Bernardes Gil (gabrielbgil@yahoo.com.br) on 2018-05-30T18:23:38Z No. of bitstreams: 1 ESTRATÉGIAS PARA PRESERVAÇÃO DA FUNÇÃO OVARIANA EM PACIENTES COM CÂNCER DE COLO UTERINO SUBMETIDAS À RADIOTERAPIA PÉLVICA: DESENVOLVIMENTO DE MODELO MATEMÁTICO E SIMULAÇÕES VIRTUAIS DA TRANSPOSIÇÃO OVARIANA.pdf: 3195823 bytes, checksum: 0bc34c0d93a476873964383e2da6feae (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2018-06-04T13:20:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gil_gob_me_bot.pdf: 3195823 bytes, checksum: 0bc34c0d93a476873964383e2da6feae (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-04T13:20:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gil_gob_me_bot.pdf: 3195823 bytes, checksum: 0bc34c0d93a476873964383e2da6feae (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Introdução: O câncer de colo uterino é uma das neoplasias mais incidentes nas mulheres, frequentemente, acometendo jovens em fase reprodutiva.A radioterapia desempenha importante papel no tratamento após a cirurgia ou no tratamento definitivo. Porém, pode induzir à falência ovariana precoce pela grande sensibilidade ovariana à irradiação ionizante. Além das questões associadas ao futuro reprodutivo, a menopausa induzida está associada a doenças cardiovasculares, osteoporose, atrofia genital, sintomas vasomotores e impacto significativo na qualidade de vida dessas mulheres. Uma das alternativas descritas para preservação da função ovariana é a transposição dos ovários, afastando-os da área a ser irradiada. A associação entre a perda da função e a dose de irradiação recebida pelos ovários não está clara na literatura e não existe consenso sobre o melhor sítio para a transposição. Objetivos: Desenvolver um modelo matemático capaz de associar de maneira prática a dose de irradiação recebida pelos ovários com a função ovariana. Estabelecer uma proposta, por meio de simulações virtuais, para definição do posicionamento dos ovários na transposição, considerando diferentes doses de irradiação e a perda da função ovariana. Materiais e métodos: Através do método de Runge-Kutta de quarta ordem, foram calculadas as idades previstas para falência ovariana induzida, a partir das diversas doses de irradiação recebidas pelos ovários. Para simulação virtual do sítio de transposição, foram selecionadas 13 pacientes portadoras de câncer de colo uterino em idade fértil submetidas à histerectomia e radioterapia adjuvante. Na tomografia computadorizada de planejamento, foram realizados o delineamento de variadas posições virtuais dos ovários na cavidade abdominal e o planejamento da radioterapia pélvica adjuvante com três técnicas: radioterapia conformada, radioterapia de intensidade modulada (IMRT do inglês, Intensity Modulated Radiation Therapy) e radioterapia modulada por terapia em arco (VMAT do inglês, Volumetric Modulated Arc Therapy). A dose de prescrição utilizada foi 45 Gy em 25 frações. Resultados: No modelo matemático desenvolvido, a diminuição no tempo esperado Resumo para falência ovariana após a exposição à irradiação ionizante foi descrita como a perda da função ovariana (PFO) em percentual. Na equação encontrada, PFO = 2,70 + 11,08 x D, observa-se que a perda da função ovariana, está diretamente relacionada com a dose (D) em Gy recebida pelos ovários. As simulações virtuais mostraram que o posicionamento dos ovários, acima de 7 cm ou 10 cm do promontório em sentido cranial, resulta numa perda de função ovariana menor que 50% ou 20%, respectivamente. Não foi evidenciada diferença na preservação ovariana entre as técnicas de radioterapia conformada, IMRT e VMAT testadas. Conclusões: Esse modelo matemático determina a perda da função ovariana de maneira simplificada e facilmente aplicável, durante o planejamento da radioterapia. Através das simulações computadorizadas, pode-se relacionar diretamente a distância os ovários e o promontório à função ovariana. O presente estudo foi o primeiro a utilizar o promontório como referencial de posicionamento na transposição ovariana. Sua aplicação na prática clínica pode ajudar no manejo e aconselhamento das pacientes portadoras de câncer de colo uterino em idade fértil.

Orientador: Agnaldo Lopes da Silva Filho / Resumo: Introdução: O câncer de colo uterino é uma das neoplasias mais incidentes nas mulheres, frequentemente, acometendo jovens em fase reprodutiva.A radioterapia desempenha importante papel no tratamento após a cirurgia ou no tratamento definitivo. Porém, pode induzir à falência ovariana precoce pela grande sensibilidade ovariana à irradiação ionizante. Além das questões associadas ao futuro reprodutivo, a menopausa induzida está associada a doenças cardiovasculares, osteoporose, atrofia genital, sintomas vasomotores e impacto significativo na qualidade de vida dessas mulheres. Uma das alternativas descritas para preservação da função ovariana é a transposição dos ovários, afastando-os da área a ser irradiada. A associação entre a perda da função e a dose de irradiação recebida pelos ovários não está clara na literatura e não existe consenso sobre o melhor sítio para a transposição. Objetivos: Desenvolver um modelo matemático capaz de associar de maneira prática a dose de irradiação recebida pelos ovários com a função ovariana. Estabelecer uma proposta, por meio de simulações virtuais, para definição do posicionamento dos ovários na transposição, considerando diferentes doses de irradiação e a perda da função ovariana. Materiais e métodos: Através do método de Runge-Kutta de quarta ordem, foram calculadas as idades previstas para falência ovariana induzida, a partir das diversas doses de irradiação recebidas pelos ovários. Para simulação virtual do sítio de transposição, foram sel... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Anthony César de Souza Castilho / Resumo: A superestimulação ovariana é uma das biotecnologias utilizadas com objetivo de aumentar o potencial reprodutivo de fêmeas com alto valor econômico através da obtenção de múltiplas ovulações e tem sido amplamente empregada na espécie bovina. O conhecimento da dinâmica folicular permitiu o desenvolvimento de diversos protocolos hormonais capazes de regular o desenvolvimento folicular, o momento e o número de ovulações produzidas. As duas gonadotrofinas mais utilizadas para induzir o crescimento de múltiplos folículos durante esses protocolos são o hormônio folículo-estimulante (FSH) e a gonadotrofina coriônica equina (eCG); e ambos têm se mostrado eficazes. Sabe-se que a utilização da superestimulação ovariana utilizando FSH provoca mudanças positivas nos complexos cumulus-oócito (CCOs) e que a utilização do eCG no final do tratamento superestimulatório aumenta a resposta ovulatória, a ocorrência de estro, as concentrações de progesterona e as taxas de prenhes em programas de inseminação artificial (IA). Deste modo, o uso desses protocolos parece alterar o microambiente folicular e consequentemente a competência dos CCOs que se desenvolvem nele. Dentre os vários fatores presentes nesse microambiente estão as vesículas extracelulares (VEs; incluindo os exossomos), que carregam diversas moléculas como mRNA e microRNAs (miRNAs). Diante disso, o presente estudo visou avaliar o efeito da superestimulação ovariana com FSH ou FSH combinado a eCG, sobre a expressão gênica de embriões ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Ovarian superestimulation is a biotecnology used to increase the reproductive potential of females with high economic value by obtaining multiple ovulations and has been widely used in cattle. The follicular dynamics knowledge allows the development of numerous hormonal protocols able to regulate follicular development, the moment and the number of ovulations produced. Two most used gonadotrophins to induce the growth of multiple follicles during these protocols are follicle stimulating hormone (FSH) and chorionic gonadotropin equine (eCG) and both have proven effective. It is known that the ovarian superstimulation using FSH causes positives changes in cumulus-oocyte complexes (COCs) and the use of eCG at the end of superstimulatory treatment increases the ovulatory response, the oestrus occurrence, progesterone concentrations and pregnancy rates in artificial insemination (AI). Thus, these protocols seems to alter the follicular microenvironment and therefore the competence of COCs that development it. Among the several factors presents in this microenvironment are the extracellular vesicles (EVs; including the exosomes), that carry different molecules such mRNA and microRNA (miRNAs). Therefore, this study aimed to assess the effects of ovarian superstimulation with FSH or FSH combined with eCG on embryo gene expression produced from COCs recovered from superstimulated cows. Additionally, it was checked if the exosomes presents in follicular fluid from these cows, when adde... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-26T15:12:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Leandro, Danilo de Carvalho. Doutorado Acadêmico em Biologia.pdf: 5056189 bytes, checksum: 0f4442baabaf84edda19f8013a0c4012 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-26T15:12:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Leandro, Danilo de Carvalho. Doutorado Acadêmico em Biologia.pdf: 5056189 bytes, checksum: 0f4442baabaf84edda19f8013a0c4012 (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / FACEPE / O mosquito Aedes aegypti, devido à sua importância na transmissão do vírus dengue, vem sendo estudado para compreensão de aspectos relacionados à competência vetorial. Os ovários, importante órgão envolvido na reprodução do vetor e implicado na transmissão viral transovariana, tem sido negligenciados nas análises de infecção viral. Diante disso, o presente trabalho analisou diversos aspectos da transmissão transovariana, como a cinética de infecção dos ovários pelo vírus Dengue, as taxas de transmissão transovariana na primeira geração filial (F1), a influência viral na fertilidade e fecundidade vetorial, os aspectos citopatológicos e ultraestruturais provocados pelo vírus no tecido ovariano, bem como a expressão diferencial de genes de resposta imune e pró-apoptóticos em ovários de A. aegypti. Experimentos de infecção artificial com vírus Dengue sorotipo 2 (DENV-2) foram conduzidos em laboratório, utilizando a população de A. aegypti proveniente de campo (Petrolina). Para as análises de cinética de infecção ovariana ao 7º, 14º, 21º e 28º dia após a infecção (dpi), dois grupos experimentais foram analisados: grupo alimentação única (AU) e grupo múltiplas alimentações (MA). Investigações das taxas de transmissão viral transovariana foram conduzidas a partir da detecção viral em mosquitos machos e fêmeas, oriundos de ovos de insetos que receberam alimentação sanguínea infectada. Experimentos de fertilidade e fecundidade foram conduzidos em fêmeas que realizaram o repasto sanguíneo infectado, e posteriormente foram individualizadas para coleta de ovos. Ovários foram coletados ao 14º dpi e submetidos a processamento e análise histopatológica e ultraestutural. Análises da expressão diferencial dos genes Relish-1 (via Toll), Hop (Via JAK-STAT), Argonaute 2 (mecanismo de RNA de interferência), e dos genes envolvidos na via apoptótica Caspase 16, AeDronc, Ae IAP1, foram conduzidas em ovários de fêmeas do grupo infectado positivas para o DENV-2, no grupo infectado negativo para o DENV-2, no grupo controle, e posteriormente comparadas pelo método ΔΔCt. A positividade para o DENV-2 no tecido ovariano foi registrada ao 14º, 21º e 28º dpi nos dois grupos (AU e MA). A quantificação viral das amostras positivas para DENV-2 apresentou resultados muito similares, com exceção do 28º dpi do grupo MA. A transmissão transovariana na F1 foi registrada apenas em machos ao 14° e 21º dia após a emergência, com 13,3% e 20% de positividade, respectivamente. Nenhuma diferença significativa foi observada nos padrões reprodutivos (fecundidade e fertilidade) nas fêmeas infectadas. Nas análises histopatológicas, observou-se uma invaginação do epitélio folicular dos oócitos do grupo infectado. Nenhuma alteração a nível ultraestrutural foi observada. A expressão de todos os genes avaliados foi maior nos ovários do grupo infectado positivo para o DENV-2, quando comparado a ovários do grupo infectado negativo e controle. A infecção ovariana e a transmissão transovariana ocorrem a níveis muito reduzidos, porém, quando o vírus está presente no tecido ovariano, os títulos virais são muito similares a outros órgãos relatados na literatura. A expressão de genes envolvidos na resposta imune do hospedeiro ao vírus justifica a baixa infectividade, uma vez que se observa no ovário do grupo infectado, a expressão aumentada de todos os genes avaliados. Diante disso, concluímos que a transmissão transovariana é um evento raro e que não causa alterações importantes na biologia reprodutiva do vetor, porém, não deve ser negligenciada, uma vez que é a principal forma da permanência viral nas populações de mosquitos. / The mosquito Aedes aegypti, due to its importance in the transmission of the dengue virus, has been studied for the comprehension of aspects related to vector competence. The ovaries, important organ involved in the reproduction of the vector and implied in the viral transovarian transmission, have been neglected in the analysis of viral infection. Accordingly, the present study analyzed several aspects of the transovarian transmission as the kinetics of the ovaries infection by the dengue virus, the taxes of the transovarian transmission in the first filial generation (F1), the viral influence in the vector fertility and fecundity, the cytopathological and ultrastructural aspects motivated by the virus in the ovarian tissue, as well as the differential expression of the genes of immune response and pro-apoptotic in A. aegypti ovaries. Experiments of the artificial infection with the Dengue virus serotype 2 (DENV-2) were performed in laboratory by A. aegypti population derived from the field (Petrolina). For the analysis of the kinetics of ovarian infection to the 7th, 14th, 21st and 28th day post the infection (dpi), two experimental groups were analyzed: unique alimentation group (UA) and multiple alimentations group (MA). Investigations of the taxes of transovarian transmission were conducted starting from the viral detection in male and female mosquitoes coming from the eggs of insects which received infected blood alimentation. Fertility and fecundity experiments were directed in females which reached the infected blood repast and subsequently were individualized for the eggs collection. Ovaries have been collected to the 14th dpi and submitted to the process and histopathology and ultra-structural analysis. Analysis of differential gene process Relish-1 (Toll pathway), Hop (JAK-STAT pathway), Argonaute 2 (mechanism of the RNA interference), and of the genes involved in the via apoptotic Caspase 16, AeDronc, Ae IAP1 were conducted to the ovaries of females in the infected group positive for DENV-2 in the group infected negative for the DENV-2 and in the control group and afterwards compared by the method ΔΔCt. The positivity for the DENV-2 in the ovarian tissue was registered to the 14th, 21st and 28th dpi in the two groups (UA and MA).The viral quantification of the positive samples for DENV-2 presented similar results, with the exception of 28th dpi from the group MA. The transovarian transmission in the F1 was registered only in males in their 14th and 21st after the emergency, with 13,3% and 20% of positivity respectively. No significant difference was observed in the reproductive standards (fertility and fecundity) in the infected females. In the histopathology analysis, it was observed an invagination of the follicular epithelium of the oocytes of the infected group. No alteration to the level ultrastructural was observed. The expression of all evaluated genes was bigger in the ovaries from the infected group positive for the DENV-2, when compared to the ovaries of the infected group negative and control. The ovarian infection and the transovarian transmission happen in vey reduced levels, but if the virus is present in the ovarian tissue, the viral titles are very similar to the other organs related to the literature. The expression of the genes involved in the immune response of the host to the virus justifies the low infectivity, once it was observed in the ovary of the group infected, the expanded expression of all evaluated genes. Faced with this, we may conclude that the transovarian transmission is a rare event and that cannot cause important alterations in the vector reproductive biology, but it should not be neglected, once it is the main way of the viral permanence in the mosquitoes’ populations.

Introdução: A avaliação da reserva ovariana em reprodução assistida (RA) busca identificar mulheres em que a exaustão folicular determine as dificuldades reprodutivas. Além da idade, a presença de causas outras de subfertilidade, como a endometriose (EDT), implica interferências negativas potenciais sobre a resposta ovariana. Objetivo: Avaliar a reserva folicular ovariana de mulheres subférteis portadoras de endometriose e determinar o melhor preditor de má resposta em RA. Métodos: Foram analisados 87 ciclos de RA em mulheres com idade inferior a 40 anos, ciclos menstruais regulares, sem patologias endócrinas e com ambos os ovários, sendo 30 ciclos em portadoras de EDT (casos) e 57 ciclos em mulheres subférteis por fator masculino exclusivo (controles). A reserva ovariana foi inferida pelas dosagens basais dos hormônios anti-mülleriano (AMH) e folículo estimulante (FSH), a contagem de folículos antrais pequenos (CFA) e a medida do volume ovariano médio (VOM). Curvas Receiver Operating Characteristic (ROC AUC) foram traçadas para avaliação da capacidade discriminatória de cada teste em identificar má resposta. Resultados: Pacientes com EDT apresentaram FSH basal significativamente maior em relação aos controles (9,13 ± 5,09 mUI/mL vs. 6,28 ± 2,45 mUI/mL; p < 0,05), sem diferenças para AMH, CFA e VOM. O número total de oócitos aspirados foi menor na EDT em relação aos controles (5,33 ± 3,43 vs. 8,28 ± 5,8; p < 0,05) e correlacionou-se significativamente com o AMH em ambos os grupos (EDT: r = 0,61; Controles: r = 0,58; p<0,0001). O FSH basal apresentou correlação significativa com o total de oócitos aspirados apenas na EDT (r = -0,48; p<0,01); também na EDT, o AMH basal foi o marcador individual com melhor potencial discriminatório para má resposta (AUC = 0,875), seguido de FSH basal (AUC = 0,682) e VOM (AUC = 0,665), enquanto no grupo controle, o AMH foi o melhor marcador (AUC = 0,8372), seguido do VOM (AUC = 0,709) e da CFA (AUC = 0,686). Conclusões: O FSH basal está significativamente maior nas pacientes subférteis com EDT e correlaciona-se com a resposta em RA apenas nas portadoras da doença. Já o AMH basal, é o marcador com o melhor potencial discriminatório de má resposta, independentemente da presença da endometriose. CFA e VOM não se apresentaram como bons preditores de má resposta. Sendo assim, a associação entre endometriose e subfertilidade deve estar vinculada a alterações do crescimento/desenvolvimento do folículo ovariano e não a prejuízos sobre a reserva folicular gonadal propriamente dita. / Introduction: Ovarian reserve evaluation in assisted reproduction (AR) aims to identify women in whom follicular exhaustion determines reproductive difficulties. More than age, the presence of other subfertility factors, such as endometriosis (EDT), implies potential negative interference on ovarian response. Objective: To evaluate follicular ovarian reserve in subfertile patients with endometriosis and determine the best predictor of poor response in AR. Methods: We evaluated 87 AR cycles of women presenting with less than 40 years of age, regular menses, no endocrine diseases and with both ovaries, divided in 30 EDT cycles (cases) and 57 cycles in women with subfertility associated to male factor (controls). Ovarian reserve was determined based on basal levels of anti-müllerian hormone (AMH) and follicle- stimulating hormone (FSH), small antral follicle count (AFC) and medium ovarian volume (MOV). Receiver Operating Characteristic curves (ROC AUC) were obtained for evaluation of discriminatory capacity of each test in identifying poor response. Results: EDT patients presented significantly higher basal FSH levels when compared to controls (9,13 ± 5,09 mUI/mL vs. 6,28 ± 2,45 mUI/mL; p < 0,05) and there were no differences in AMH, AFC and MOV between groups. The total number of oocytes retrieved was lower in endometriosis when compared to controls (5,33 ± 3,43 vs. 8,28 ± 5,8; p < 0,05) and significantly correlated with AMH in both groups (EDT: r = 0,61; Control: r = 0,58; p<0,0001). Basal FSH presented significant correlation with the number of oocytes retrieved only among EDT patients (r = - 0,48; p<0,01); in EDT patients, either, basal AMH was the individual marker with the best discriminatory potential for poor responders identification (AUC = 0,875), followed by basal FSH (AUC = 0,682) and MOV (AUC = 0,665), whereas among controls, AMH was the best marker (AUC = 0,8372), followed by MOV (AUC = 0,709) and AFC (AUC = 0,686). Conclusions: Basal FSH is significantly higher in subfertile patients with endometriosis and correlates with ovarian response in AR among these patients. Basal AMH, by the way, is the individual marker with the best discriminatory potential in determining poor response, which is not dependent on endometriosis presence. AFC and MOV did not presented as good predictors of poor response. The association between endometriosis and subfertility, therefore, may be linked to prejudice to growth/development of the ovarian follicle, but not to damage to the real ovarian follicular reserve.

Uma das consequências mais devastadoras do tratamento do câncer na população jovem do sexo feminino é a falência ovariana, que resulta na diminuição do potencial de fertilidade. Nenhum tratamento curativo para a falência ovariana primária é conhecido, no entanto, as células-tronco mesenquimais, através de seu potencial de auto-renovação e de regeneração, vem sendo utilizadas com o intuito de avaliar o seu papel no tratamento da falência ovariana. O objetivo deste estudo foi explorar o impacto das células-tronco adiposo derivadas (ADSC), células de macerado de ovário e células –tronco femininas germinativas mouse vasa homologue positivas (MVH+) na falência ovariana induzida pela cisplatina em camundongos e esclarecer quais tipos celulares promovem melhor recuperação neste modelo. Quarenta e oito camundongas adultas foram injetadas com 7,5 mg/kg de cisplatina para induzir a falência ovariana. Como doadores de células foram utilizadas fêmeas C57BL6 transgênicas para a proteína verde fluorescente (GFP +) . Os animais foram subdivididos em três grupos: grupo controle (que recebeu somente solução salina) grupo ADSC- animais que receberam injeção intra ovariana de células-tronco mesenquimais adiposo derivadas (1x104), grupo ovário - animais que receberam injeção intra ovariana de células obtidas a partir de macerado de ovário (1x104) e grupo FGSC- animais que receberam injeção de células tronco germinativas MVH positivas(1x104). Todos os grupos foram avaliados em dois tempos de eutanásia: 7 e 14 dias após o transplante das células. A partir das análises histológicas, pode-se perceber um aumento significativo (p≤ 0,05) na probabilidade de obtenção de folículos viáveis nos grupos ADSC (43%) e suspensão de células de ovário (48%) quando comparados ao grupo controle (24%) no dia 7 e um amumento significativo na probabilidade de obtenção de folículos viáveis no número no grupo FGSC (71%) quando comparado aos outros grupos. Nos grupos eutanasiados 14 dias pós transplante os animais do grupo MVH apresentaram 72% de probabilidade de folículos viáves em comparação aos grupos: controle (50%), ADSC (58%) e suspensão de ovário (52%) diferença não foi estatisticamente significativa. A dosagem de estradiol não mostrou diferença estatística entre os grupos, nos diferentes tempos de eutanásia. / One of the most devastating consequences of cancer treatment in the young female population is ovarian damage, resulting in diminished fertility potential. No curative treatment is known for primary ovarian failure; however, mesenchymal stem cells, trough self -renewal and regeneration, was tested to evaluate their role in the treatment of ovarian failure. The aim of this study was to explore the impact of adipose derived stem cells (ADSC), ovarian cells macerated and female germline stem cells MVH + (FGSC) in ovarian failure induced by cisplatin in mice and to clarify the mechanism (s) by which the ADSCs exert their action. Methods: Thirty-six adult female mice were injected with 7.5 mg / kg of cisplatin to induce ovarian failure. As donor cells used C57BL6 females GFP +. Animals were divided into three groups: control group (which received only saline), ADSC-group: animals received intra ovarian 1x104 adipose derived stem cells; Ovarian cell group - animals received intra ovarian 1x104 cells obtained from macerated ovarian tissue and FGSC-group: animals received 1x104 female germline stem cells MVH positive. All groups were assessed at two times of euthanasia: 7 and 14 days after cell transplantation. Results: From the histological analysis, one can see a significant increase in the number of viable follicles in groups and MVH ADSC compared to the control group at day 7. On day 14 we also observed a tendency to better recovery in group MVH compared to the control group and the other groups, although this difference was not statistically significant. There was no difference in estradiol serum levels between all groups.

Uma das consequências mais devastadoras do tratamento do câncer na população jovem do sexo feminino é a falência ovariana, que resulta na diminuição do potencial de fertilidade. Nenhum tratamento curativo para a falência ovariana primária é conhecido, no entanto, as células-tronco mesenquimais, através de seu potencial de auto-renovação e de regeneração, vem sendo utilizadas com o intuito de avaliar o seu papel no tratamento da falência ovariana. O objetivo deste estudo foi explorar o impacto das células-tronco adiposo derivadas (ADSC), células de macerado de ovário e células –tronco femininas germinativas mouse vasa homologue positivas (MVH+) na falência ovariana induzida pela cisplatina em camundongos e esclarecer quais tipos celulares promovem melhor recuperação neste modelo. Quarenta e oito camundongas adultas foram injetadas com 7,5 mg/kg de cisplatina para induzir a falência ovariana. Como doadores de células foram utilizadas fêmeas C57BL6 transgênicas para a proteína verde fluorescente (GFP +) . Os animais foram subdivididos em três grupos: grupo controle (que recebeu somente solução salina) grupo ADSC- animais que receberam injeção intra ovariana de células-tronco mesenquimais adiposo derivadas (1x104), grupo ovário - animais que receberam injeção intra ovariana de células obtidas a partir de macerado de ovário (1x104) e grupo FGSC- animais que receberam injeção de células tronco germinativas MVH positivas(1x104). Todos os grupos foram avaliados em dois tempos de eutanásia: 7 e 14 dias após o transplante das células. A partir das análises histológicas, pode-se perceber um aumento significativo (p≤ 0,05) na probabilidade de obtenção de folículos viáveis nos grupos ADSC (43%) e suspensão de células de ovário (48%) quando comparados ao grupo controle (24%) no dia 7 e um amumento significativo na probabilidade de obtenção de folículos viáveis no número no grupo FGSC (71%) quando comparado aos outros grupos. Nos grupos eutanasiados 14 dias pós transplante os animais do grupo MVH apresentaram 72% de probabilidade de folículos viáves em comparação aos grupos: controle (50%), ADSC (58%) e suspensão de ovário (52%) diferença não foi estatisticamente significativa. A dosagem de estradiol não mostrou diferença estatística entre os grupos, nos diferentes tempos de eutanásia. / One of the most devastating consequences of cancer treatment in the young female population is ovarian damage, resulting in diminished fertility potential. No curative treatment is known for primary ovarian failure; however, mesenchymal stem cells, trough self -renewal and regeneration, was tested to evaluate their role in the treatment of ovarian failure. The aim of this study was to explore the impact of adipose derived stem cells (ADSC), ovarian cells macerated and female germline stem cells MVH + (FGSC) in ovarian failure induced by cisplatin in mice and to clarify the mechanism (s) by which the ADSCs exert their action. Methods: Thirty-six adult female mice were injected with 7.5 mg / kg of cisplatin to induce ovarian failure. As donor cells used C57BL6 females GFP +. Animals were divided into three groups: control group (which received only saline), ADSC-group: animals received intra ovarian 1x104 adipose derived stem cells; Ovarian cell group - animals received intra ovarian 1x104 cells obtained from macerated ovarian tissue and FGSC-group: animals received 1x104 female germline stem cells MVH positive. All groups were assessed at two times of euthanasia: 7 and 14 days after cell transplantation. Results: From the histological analysis, one can see a significant increase in the number of viable follicles in groups and MVH ADSC compared to the control group at day 7. On day 14 we also observed a tendency to better recovery in group MVH compared to the control group and the other groups, although this difference was not statistically significant. There was no difference in estradiol serum levels between all groups.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006Bitstream added on 2014-06-13T19:02:57Z : No. of bitstreams: 1 lamaita_rm_dr_botfm.pdf: 547479 bytes, checksum: e9a0318c757e33e40fe31e2eccda034f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento Médico e Hospitalar (Famesp) / A anovulação crônica é o distúrbio ovariano mais freqüente associado com quadros de infertilidade. Mecanismos inflamatórios apresentam um importante envolvimento na determinação da anovulação crônica. Esse estudo foi realizado para avaliar a resposta inflamatória no líquido folicular e soro de pacientes com infertilidade causada pôr anovulação crônica comparadas a pacientes ovulatórias e com ciclos Jegulares, submetidas à injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI). Métodos: Treze pacientes com anovulação crônica (casos) e 23 mulheres ovulatórias e com ciclos regulares (grupo controle) foram estudadas prospectivamente. As dosagens de N-acetilglucosaminidase (NAG), Mieloperoxidase (MPO), proteína quimioatrativa de monócitos-1 (MCP-1) e proteína C reativa (PCR) foram avaliadas no soro e líquido folicular obtidos no período da coleta dos oócitos. Resultados: A media de idade das pacientes variou de 20 a 37 anos (28,9±0,6 anos). O valor médio do índice de massa corporal (IMC) foi 21,7±0,4 kg/cm2 (17,6 to 28,0 kg/cm2). Não houve diferenças entre os grupos com relação à média de idade, IMC e dosagens de hormônio folículo estimulante (FSH). As pacientes com anovulação crônica apresentaram níveis maiores de hormônio luteinizante (LH), contagem de folículos antrais e volume ovariano. Nas pacientes com anovulação crônica foram observadas atividades elevadas de NAG (p=0,025) e MPO (p=0,030) no líquido folicular quando comparadas a mulheres ovulatórias, submetidas a ICSI. Os níveis de MCP-1 no líquido folicular foram maiores que no soro em todas as pacientes. O PCR no fluido folicular (p=0,025) e soro (p=0,024) estavam mais elevados nas pacientes com anovulação crônica que no grupo controle. A ocorrência de síndrome do hiperestímulo ovariano (SHO) foi associada... / Chronic anovulation is the most frequently occurring ovarian disorder associated with infertility. Inflammatory mechanisms may play an important role in determining chronic anovulation. This study was performed to evaluate the inflammatory response in follicular fluid and serum in patients with infertility caused by chronic anovulation and.•..no~_mally ovulating women undergoing intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Methods: Thirteen patients with chronic anovulation (cases) and 23 normally ovulating women (control group) were prospectively studied. Nacetylglucosaminidase (NAG), Myeloperoxidase (MPO), Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and Reactive C protein (PCR) concentrations were evaluated in serum and in follicular fluids obtained at the time of oocyte retrieval. Results: The age of the patients ranged from 20 to 37 years (28.9±0.6 years). The average body mass index (BMI) was 21.7±0.4 kg/cm2 (17.6 to 28.0 kg/cm2). There were no differences between groups regarding mean age, BMI, follicle-stimulating hormone (FSH). The patients with chronic anovulation were associated with higher levels of luteinizing hormone (LH), antral follicles count and ovarian size. The patients with chronic anovulation presented higher NAG (p=0.025) and MPO (p=0.030) activity in follicular fluid compared to normally ovulating women undergoing ICSI. The MCP-1 levels in follicular fluid were higher than the serum levels in ali patients. The PCR in follicular fluid (p=0.025) and serum (p=0.024) were higher in patients with PCR chronic anovulation to the control group. The occurrence of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) was associated with higher follicular fluid levels of MCP-1 (p=0.038) and serum PCR (p=0.016). Conclusions: Patients with chronic anovulation are associated with higher follicle... (Complete abstract click electronic access below)

Uma das consequências mais devastadoras do tratamento do câncer na população jovem do sexo feminino é a falência ovariana, que resulta na diminuição do potencial de fertilidade. Nenhum tratamento curativo para a falência ovariana primária é conhecido, no entanto, as células-tronco mesenquimais, através de seu potencial de auto-renovação e de regeneração, vem sendo utilizadas com o intuito de avaliar o seu papel no tratamento da falência ovariana. O objetivo deste estudo foi explorar o impacto das células-tronco adiposo derivadas (ADSC), células de macerado de ovário e células –tronco femininas germinativas mouse vasa homologue positivas (MVH+) na falência ovariana induzida pela cisplatina em camundongos e esclarecer quais tipos celulares promovem melhor recuperação neste modelo. Quarenta e oito camundongas adultas foram injetadas com 7,5 mg/kg de cisplatina para induzir a falência ovariana. Como doadores de células foram utilizadas fêmeas C57BL6 transgênicas para a proteína verde fluorescente (GFP +) . Os animais foram subdivididos em três grupos: grupo controle (que recebeu somente solução salina) grupo ADSC- animais que receberam injeção intra ovariana de células-tronco mesenquimais adiposo derivadas (1x104), grupo ovário - animais que receberam injeção intra ovariana de células obtidas a partir de macerado de ovário (1x104) e grupo FGSC- animais que receberam injeção de células tronco germinativas MVH positivas(1x104). Todos os grupos foram avaliados em dois tempos de eutanásia: 7 e 14 dias após o transplante das células. A partir das análises histológicas, pode-se perceber um aumento significativo (p≤ 0,05) na probabilidade de obtenção de folículos viáveis nos grupos ADSC (43%) e suspensão de células de ovário (48%) quando comparados ao grupo controle (24%) no dia 7 e um amumento significativo na probabilidade de obtenção de folículos viáveis no número no grupo FGSC (71%) quando comparado aos outros grupos. Nos grupos eutanasiados 14 dias pós transplante os animais do grupo MVH apresentaram 72% de probabilidade de folículos viáves em comparação aos grupos: controle (50%), ADSC (58%) e suspensão de ovário (52%) diferença não foi estatisticamente significativa. A dosagem de estradiol não mostrou diferença estatística entre os grupos, nos diferentes tempos de eutanásia. / One of the most devastating consequences of cancer treatment in the young female population is ovarian damage, resulting in diminished fertility potential. No curative treatment is known for primary ovarian failure; however, mesenchymal stem cells, trough self -renewal and regeneration, was tested to evaluate their role in the treatment of ovarian failure. The aim of this study was to explore the impact of adipose derived stem cells (ADSC), ovarian cells macerated and female germline stem cells MVH + (FGSC) in ovarian failure induced by cisplatin in mice and to clarify the mechanism (s) by which the ADSCs exert their action. Methods: Thirty-six adult female mice were injected with 7.5 mg / kg of cisplatin to induce ovarian failure. As donor cells used C57BL6 females GFP +. Animals were divided into three groups: control group (which received only saline), ADSC-group: animals received intra ovarian 1x104 adipose derived stem cells; Ovarian cell group - animals received intra ovarian 1x104 cells obtained from macerated ovarian tissue and FGSC-group: animals received 1x104 female germline stem cells MVH positive. All groups were assessed at two times of euthanasia: 7 and 14 days after cell transplantation. Results: From the histological analysis, one can see a significant increase in the number of viable follicles in groups and MVH ADSC compared to the control group at day 7. On day 14 we also observed a tendency to better recovery in group MVH compared to the control group and the other groups, although this difference was not statistically significant. There was no difference in estradiol serum levels between all groups.