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Obtenção e caracterização de imunoconjugados baseados em pontos quânticos de CdTe para diagnóstico da Leishmaniose Tegumentar Americana

CARVALHO, Kilmara Higia Gomes 01 September 2014 (has links)
Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-17T20:27:52Z No. of bitstreams: 1 TESE Kilmara Higia Gomes Carvalho.pdf: 12352315 bytes, checksum: 5ada39abe3cab7c5edbd394847c93eae (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T20:27:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE Kilmara Higia Gomes Carvalho.pdf: 12352315 bytes, checksum: 5ada39abe3cab7c5edbd394847c93eae (MD5) Previous issue date: 2014-09-01 / FACEPE / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma infecção causada por várias espécies de protozoários pertencentes à ordem Kinetoplastida, família Trypanosomatidae e ao gênero Leishmania, tendo L. (Viannia) braziliensis como agente etiológico de maior incidência no Brasil. A LTA é uma doença endêmica no país e que ainda apresenta dificuldades de diagnóstico laboratorial. Os pontos quânticos (PQ) são nanocristais fluorescentes de materiais semicondutores que recentemente vêm sendo empregados como fluoróforos no desenvolvimento de novos métodos imunoquímicos como alternativa diagnóstica, visando inovar e otimizar as técnicas atuais. O presente estudo demonstrou a viabilidade dos PQ como insumos fluoróforos em ensaios sorológicos para diagnóstico da LTA. PQ fluorescentes de Telureto de Cádmio (~3 nm) estabilizados com ácido mercaptosuccínico (AMS) foram preparados em meio coloidal e acoplados covalentemente à anti-imunoglobulinas G, via carbodiimida. Foi desenvolvida uma técnica de análise semiquantitativa para o monitoramento da bioconjugação baseada em leitura de fluorescência em microplacas negras. Os bioconjugados obtidos (PQ-Anti-IgG humana) foram submetidos à avaliação de desempenho para a pesquisa de anticorpos humanos anti-L. (Viania) braziliensis. pelas técnicas de citometria de fluxo, imunofluorescência indireta (IFI) e por ensaio imunofluorescente de adsorção baseado em pontos quânticos (PQ-FLISA). Empregou-se as formas promastigotas da cepa de referência (MHOM/BR/75/M2903) de Leishmania (V.) braziliensis na IFI e citometria de fluxo, enquanto que no PQ-FLISA utilizou-se o antígeno solúvel bruto de L. (V.) braziliensis. Os experimentos realizados por meio das técnicas de citometria de fluxo, IFI e PQ-FLISA em imunodiagnóstico para LTA demonstraram a afinidade dos conjugados obtidos de CdTe/AMS-Anti-IgG em se ligar a imunoglobulinas G, fornecendo resposta diferencial entre controles e amostras analisadas demonstrando a capacidade destes materiais como novos insumos em imunodiagnósticos. / The American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is an infection caused by various species of protozoa belonging to the Kinetoplastida order, family Trypanosomatidae of the Leishmania genre. The L. (V.) braziliensis genus is the most prevalent ethiologic agent of ATL in Brazil. ATL is endemic in the countrie and still presents difficulties in its laboratorial diagnosis. Quantum dots (QDs) are fluorescent semiconductor nanocrystals that have been applied as markers in the development of new immunochemical methods as diagnostic alternative protocols, aiming to innovate and optimize as current techniques. The present study demonstrated the feasibility of QDs as new fluoroimmunoassay active material for the serological diagnostic of ATL. Fluorescent CdTe QDs (~3 nm) stabilized with mercaptosuccinic acid (MSA) were prepared in aqueous colloidal media and coupled covalently to antiimmunoglobulin G by carbodiimide. A semiquantitative technique using a fluorescence plate reader was developed to monitor the bioconjugation procedure. The human QD-anti-IgG bioconjugates were tested for the detection of human antibodies against L (Viania) braziliensis, applying flow cytometry, indirect immunofluorescence (IIF) and adsorption fluoroimmunoassay (QD-FLISA). The promastigote forms of the reference strain (MHOM / BR / 75 / M2903) of Leishmania (V.) braziliensis were used in IFI and flow cytometry, whereas in the QD-FLISA the crude soluble antigen of L. (V.) braziliensis was used. The analysis of all the data demonstrated the capacity of the CdTe/MSA-Anti-IgG bioconjugates to bind to immunoglobulin G and succesfully detect the LTA positive serum compared to the controls. The results showed that these materials may be applied as new tools in the diagnosis of LTA.
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Síntese e caracterização de pontos quânticos de CdTe e CdS/Cd(OH)₂ revestidos com sílica

SANTOS, Polyana Bezerra Souto 12 August 2013 (has links)
Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-01T22:01:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Polyana Bezerra Souto Santos.pdf: 1516141 bytes, checksum: 79446e34bb456c48ff32b22a198b754d (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-03T17:23:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Polyana Bezerra Souto Santos.pdf: 1516141 bytes, checksum: 79446e34bb456c48ff32b22a198b754d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Polyana Bezerra Souto Santos.pdf: 1516141 bytes, checksum: 79446e34bb456c48ff32b22a198b754d (MD5) Previous issue date: 2013-08-12 / Materiais semicondutores nanoestruturados em regime de confinamento quântico, também conhecidos como pontos quânticos, PQs, que correspondem desde 1998 a uma nova classe de fluoróforos, sofrem influência do tamanho em suas propriedades ópticas. Além dos efeitos quânticos, a modificação química da superfície também tem um grande efeito sobre suas propriedades óticas e elétricas. Uma forma de contornar os problemas decorrentes de modificações químicas na superfície impostas pela vizinhança é o recobrimento de PQs com algum material pouco reativo, tal como a sílica (SiO₂), quimicamente estável e que propicia excelente isolamento do meio. O presente trabalho visou desenvolver e otimizar metodologias que resultassem no recobrimento superficial de pontos quânticos de CdTe e CdS/Cd(OH)₂ com sílica (SiO₂) de forma tanto a propiciar melhor estabilidade de suas propriedades ópticas em meio biológico bem como minimizar a liberação de componentes citotóxicos presente nas partículas. As nanopartículas de CdTe e CdS/Cd(OH)₂ foram sintetizados em meio aquoso segundo metodologias baseadas em química coloidal, descritas na literatura, aplicando polifosfato de sódio, ácido mescaptosuccínico (MSA) e ácido mercaptopropiônico (AMP) como agentes estabilizantes. A silanização aplicou o método de Stöber usando o tetraetilortossilicato (TEOS) como precursor da sílica em meio básico. Foi realizado um estudo sistemático variando-se as condições experimentais (concentração de TEOS, de NH₄OH e volume de EtOH) para a silanização do CdTe-MSA. As nanopartículas obtidas após o processo de silanização foram caracterizadas por espectroscopia de absorção eletrônica, espectroscopia de emissão e excitação, bem como através de espectroscopia de absorção na região do infravermelho. As frequências de absorção observadas no espectro de infravermelho demonstram a presença de sílica. De uma forma geral, as nanopartículas de CdTe-MSA (3 nm) e as de CdS/Cd(OH)₂ (5 nm) silanizadas obtiveram uma estabilidade e intensidade de fluorescência maior que as nanopartículas não-silanizadas. / Quantum dots are nanostructured semiconductor materials in the quantum confinement region, also known as quantum dots (QDs). Since 1998 they represent a new class of fluorescent labels. In addition to the quantum effects, the chemical modification of their surface has also a large effect on the optical and electrical properties of the materials. One way to circumvent problems arising from unwanted chemical modifications on the surface is coating the QDs with a less reactive material in a biological medium. This work aimed to develop new methodologies that results in the surface coating of CdS/Cd(OH)₂ and CdTe quantum dots with a layer of silica (SiO₂), which is an extremely stable material which provides excellent environmental insulation, providing better stability in water and preventing the release of cytotoxic components. The semiconductor nanoparticles were synthesized in aqueous medium according to known methods based on colloidal chemistry using mercaptopropionic acid, mercaptosuccinic acid or sodium polyphosphate as the stabilizing agents. The Stöber based colloidal methodology was applied in the silanization procedure . Several tests were performed for coating using tetraethylorthosilicate (TEOS) as a precursor of silica in different concentrations. The silanized nanoparticles were characterized by absorption and emission spectroscopy and infrared absorption spectroscopy. A systematic study on the optimization of the emission intensity of silanized CdTe-MSA varying some experimental conditions (EtOH volume, TEOS and NH₄OH concentration) was performed. The infrared absorption frequencies show the presence of silica in CdTe- MSA QDs. A general conclusion demonstrate that silanized CdTe-MSA (3 nm) and CdS/Cd(OH)₂ (5 nm) QDs showed an increased stability and emission intensity when compared to the non-silanized nanoparticles.
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Síntese eletroquímica de pontos quânticos

MONTEIRO, Jéssica Maria 20 March 2015 (has links)
Submitted by Haroudo Xavier Filho (haroudo.xavierfo@ufpe.br) on 2016-02-25T17:10:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese - BibliotecaFinal.pdf: 6903588 bytes, checksum: e6d9d707b7bca76279831e951a6f6c9d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-25T17:10:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese - BibliotecaFinal.pdf: 6903588 bytes, checksum: e6d9d707b7bca76279831e951a6f6c9d (MD5) Previous issue date: 2015-03-20 / CNPq / Neste trabalho foi desenvolvida uma nova metodologia para síntese eletroquímica de pontos quânticos (PQs) em meio aquoso. A metodologia é de fácil execução, rápida, limpa e eficiente, além de evitar o uso de agentes redutores químicos. Devido à ausência de impurezas, a solução coloidal de PQs obtida pode ser diretamente utilizada em aplicações biológicas. A metodologia consiste em duas etapas: (1) a redução eletroquímica de Te0, Se0 ou S0 em meio aquoso; (2) seguida da adição da solução do respectivo calcogeneto obtido a uma solução contendo os precursores (Cd2+ ou Zn2+) para formação dos PQs que são estabilizados por ligantes carregados positivamente (hidrocloreto de cisteamina), ou carregados negativamente (ácido 3-mercaptopropiônico ou ácido mercaptoacético). Foram sintetizados nanocristais de CdTe, CdSe, CdS, ZnSe e ZnS estáveis e altamente luminescentes, com comprimentos de onda de emissão variando entre 420-610 nm e diâmetros médios entre 2 e 6 nm. Os PQs obtidos foram caracterizados por medidas de potencial zeta, Raio-X e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados obtidos são comparáveis aos métodos tradicionais e a metodologia se mostrou eficiente sendo possível produzir PQs em larga escala. / In this work, a new electrochemical methodology was developed for the synthesis of quantum dots (PQs) in aqueous medium. The method is easy to perform, quick, clean and efficient, avoiding the use of chemical reducing agents. Due to the absence of impurities, the PQs colloidal solution obtained can be directly used in biological applications. The methodology consists of two stages: (1) electrochemical reduction Te0, Se0 or S0 in an aqueous medium; (2) followed by addition of the respective chalcogenide solution obtained to a solution containing the PQs precursors (Cd2+ or Zn2+), which are stabilized by positively charged (cysteamine) or negatively charged (3-mercaptopropionic or mercaptoacetic acid) ligands. CdTe, CdSe, CdS, ZnSe and ZnS nanocrystals were synthesized which showed high luminescence and stability, with emission wavelengths ranging from 420-610 nm and particles diameter ranging between 2 and 6 nm. The obtained PQs were characterized measurements by zeta potential, X-ray and transmission electron microscopy. The results obtained are comparable to traditional methods. The methodology was efficient and could allow to produce PQs in large scale.
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Obtenção de bioconjugados anti-NS1 DENV com pontos quânticos fluorescentes como insumos para ensaios diagnósticos da dengue

BRASIL JÚNIOR, Aluízio Gonçalves 01 August 2014 (has links)
Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-17T21:26:24Z No. of bitstreams: 1 TESE Aluizio Gonçalves Brasil Junior.pdf: 9131459 bytes, checksum: 6f52829993bc444f3d7aa2e53d6ff20f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T21:26:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE Aluizio Gonçalves Brasil Junior.pdf: 9131459 bytes, checksum: 6f52829993bc444f3d7aa2e53d6ff20f (MD5) Previous issue date: 2014-08-01 / CAPES / O vírus do dengue (DENV) pertence ao gênero Flavivirus, família Flaviviridae, possuindo RNA genômico de fita simples e apresentando quatro sorotipos antigenicamente relacionados (DENV 1-4). A identificação precoce dos casos de dengue é de vital importância para a tomada de decisões e implementação de medidas de maneira oportuna. No entanto, os métodos de eleição para o diagnóstico das infecções pelos DENV (ensaios imunoenzimáticos de captura de anticorpos das classes IgM e IgG) apesar de possibilitarem a análise rápida e reprodutível, apresentam a limitação da não detecção da enfermidade em sua fase inicial. Tendo por finalidade suplantar essa dificuldade, a obtenção de insumos que possam ser empregados em fluoroimunoensaios de detecção da proteína viral solúvel NS1, apresenta acentuada relevância. Pontos quânticos (PQs) fluorescentes de CdTe foram preparados em água com os estabilizantes, cisteamina (CTM) e ácido mercaptosuccínico (MSA). Os PQs obtidos exibiram elevada fluorescência e estabilidade coloidal, realizando-se a caracterização óptica (emissão/excitação/absorção) e estrutural (DRX/MET). Anticorpos monoclonais anti-NS1 DENV (Mab-anti NS1) específicos para os quatro sorotipos do DENV foram acoplados covalentemente aos PQs, via agentes de acoplamento. Microplacas negras de poliestireno foram previamente sensibilizadas com a proteína viral NS1 nativa, e os bioconjugados obtidos (PQs-Mab anti-NS1) foram utilizados em fluoroimunoensaios de detecção da proteína viral. Os bioconjugados de CdTe/MSA-anti-NS1 DENV para os quatro sorotipos apresentaram resultados promissores nos ensaios de detecção da proteína viral NS1, destacando-se o bioconjugado constituído pelo anticorpo monoclonal anti-NS1 DENV-2. Os bioconjugados foram empregados em ensaios de marcação de células fixadas e não fixadas clone C6/36 infectadas com DENV2, obtendo-se resultados satisfatórios para as células não fixadas. / The dengue virus (DENV) belongs to the Flavivirus gender, Flaviviridae family possessing a single-stranded RNA genome and 4 antigenic related serotypes (DENV1 – 4). The early dengue diagnosis is vital for the efficient medical intervention. The existing diagnostic methods for the DENV infections (immunoenzymatic antibody capture based methods of the IgM and IgG classes) although precise and fast still present limitations related to the diagnosis at early stages of the patology. Aiming the development of new diagnostic products for the immunodetection of the NS1 soluble viral protein is still of great importance. Fluorescent CdTe quantum dots (QDs) were prepared in aqueous medium applying mercaptosuccinic acid (MSA) and cysteamine (CTM) as stabilizing agents and used to produce an immunodiagnostic tool for the DENV detection. The QDs showed high fluorescent yield and great colloidal stability and were characterized by X-ray diffractometry, Electronic transmission microscopy, zeta potential and spectroscopic measurements. Monoclonal anti-NS1 DENV (Mab-anti NS1) antibodies specific for the 4 serotypes were covalently attached to the QDs via coupling agents. Black polystyrene microplates were sensibilized with the viral NS1 native protein and the (QDs-Mab anti-NS1) bioconjugates were applied in immunoassays aiming the detection of the viral protein. The CdTe/MSA-anti-NS1 DENV bioconjugates applied for the four serotypes showed promising results in the detection assays of the viral NS1 protein, being the most efficient the bioconjugate that used the monoclonal anti-NS1 DENV-2. The bioconjugates were used in the staining of fixed and live cells of the clone C6/36 infected with DENV2. The results were satisfactory for the live cells.
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A Construção Narrativa da Relação Eu-corpo em Pacientes Acometidos de Queimaduras de 2° e 3° Graus

Gonçalves, Fabiane Mônica da Silva 31 January 2013 (has links)
Submitted by Paula Quirino (paula.quirino@ufpe.br) on 2015-03-03T19:21:41Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Fabiane Gonçalves.pdf: 1086400 bytes, checksum: b48f0bcdf794066bd9c7e324c25bd1e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T19:21:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Fabiane Gonçalves.pdf: 1086400 bytes, checksum: b48f0bcdf794066bd9c7e324c25bd1e8 (MD5) Previous issue date: 2013 / CNPQ; REUNI / Vários estudos apontam que vítimas de situações traumáticas são propensas a narrar a sua história na tentativa de dar sentido a essas experiências. A pesquisa em questão ressalta a construção dos sentidos configurados narrativamente pelo sujeito vítima de queimadura, pois entendemos que as marcas, sequelas e cicatrizes produzidas pelo incidente convocam o sujeito a se reposicionar subjetivamente frente a sua nova condição. Assim, o objetivo principal deste estudo foi investigar como o paciente organiza narrativamente a sua relação eu-corpo, tendo como referência o incidente da queimadura. Os objetivos específicos consistiram em: (i) analisar se o evento da queimadura conduz o paciente à re-historiação; (ii) circunscrever os sentidos configurados narrativamente pelo sujeito acerca do incidente da queimadura; e (iii) identificar se há mudança no posicionamento do paciente no que se refere à relação eu-corpo. O delineamento da pesquisa se constituiu em três estudos de casos. Desse modo, participaram da pesquisa três mulheres adultas, vítimas de queimadura, que estavam em atendimento no Hospital da Restauração, em fase de reabilitação de longa duração. Foram utilizadas três estratégias para a construção dos dados: a técnica da observação espontânea, o questionário misto e uma entrevista com depoimento pessoal. O procedimento de produção dos dados aconteceu em dois momentos: (i) observação do funcionamento do Centro de Tratamento de Queimados e, ao mesmo tempo, a escolha dos possíveis participantes; (ii) aplicação do questionário e, por conseguinte, a entrevista com o paciente. Para analisar os dados, utilizamos a análise do discurso de Orlandi. Essa análise nos possibilitou constatar que o sujeito, ao sofrer um acidente traumático proveniente de queimaduras, é propenso a revisitar a sua história de vida, enfatizando o antes e o depois do incidente. Também visualizamos que os sentidos produzidos por eles são configurados em tramas discursivas carregadas de muita dor e sofrimento, marcadas pelo real do seu corpo. Em síntese, compreendemos que a representação da relação eu-corpo é construída narrativamente a partir da interface que o sujeito estabelece com o seu corpo e com a cultura, pois as experiências sentidas e vividas nessas relações, sejam elas conscientes e/ou inconscientes, possibilitam ao sujeito narrar essas experiências como histórias. Portanto, o eu e o corpo formam uma relação íntima na qual o sujeito constrói a representação de si através do discurso narrativo.
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Abundância populacional de Crypturellus noctivagus em fragmento florestal no estado do Rio Grande do sul, Brasil

Corrêa, Luiz Liberato Costa 12 May 2014 (has links)
Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2014-09-29T17:55:07Z No. of bitstreams: 3 license_text: 22302 bytes, checksum: 1e0094e9d8adcf16b18effef4ce7ed83 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2014LuizLiberatoCostaCorrea.pdf: 861663 bytes, checksum: aebd96f2fd9f1fc545903347e3564ac5 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2014-10-06T14:05:32Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_text: 22302 bytes, checksum: 1e0094e9d8adcf16b18effef4ce7ed83 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2014LuizLiberatoCostaCorrea.pdf: 861663 bytes, checksum: aebd96f2fd9f1fc545903347e3564ac5 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-06T14:05:32Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_text: 22302 bytes, checksum: 1e0094e9d8adcf16b18effef4ce7ed83 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) 2014LuizLiberatoCostaCorrea.pdf: 861663 bytes, checksum: aebd96f2fd9f1fc545903347e3564ac5 (MD5) / O presente estudo teve por objetivo avaliar a abundância e densidade populacional de Crypturellus noctivagus em um fragmento florestal entre os municípios de São Sepé e Formigueiro, Rio Grande do Sul. Dois métodos foram utilizados para a coleta de dados: transectos com bandas e amostragem por pontos. Para as amostragens foram estabelecidas cinco trilhas variando entre 500 a 900 metros, totalizando 3.400 metros de extensão. No transcorrer das trilhas foram locados 15 pontos de escuta. As amostragens foram quinzenais entre setembro de 2012 e março de 2013, utilizando os dois turnos diurnos para as amostragens, totalizando 24 amostragens por cada método. Os dados obtidos através da amostragem por transecto com bandas em 81.600m percorridos foram modelados pelo tamanho total do fragmento (450 ha) com o uso do programa Distance 5.0, indicando densidade de 3.38 espécimes por km². O esforço por pontos de escuta totalizou 120hs apresentando abundância em 1.26. Conforme os resultados obtidos, Crypturellus noctivagus se encontra isolado de outras possíveis populações que possam a vir ocorrer no Rio Grande do Sul. Devido a sua única e reduzida população conhecida caracteriza-se como uma espécie Criticamente em perigo de extinção no estado.
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Estudo da localização ideal dos pontos de controle das terraplanagehs para diferentes plataformas

Lisboa, Ricardo Taveira January 2012 (has links)
Dissertação de mestrado integrado. Mestrado Integrado em Engenharia Civil - Especialização em Vias de Comunicação. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012
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Avaliação do efeito antinociceptivo causado pela estimulação do acuponto BL60 (KUNLUN) em camundongos

Emmel, Vanessa Guillaumon January 2008 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências. / Made available in DSpace on 2012-10-24T05:06:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 252388.pdf: 1008381 bytes, checksum: 81360b69797bc2a00874c3d188a6b44e (MD5) / A acupuntura é uma técnica milenar que tem sido usada para o tratamento de diversos tipos de dores. O presente estudo analisou a ação antinociceptiva da estimulação do acuponto BL60 (Kunlun) em modelos de nocicepção induzida pelo ácido acético, glutamato e formalina em camundongos. Primeiramente foi avaliada a possível atividade antinociceptiva causada pela acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun), bem como se o tempo em que a agulha permanece retida no acuponto tem influência nestes resultados no teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético. Observou-se que a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) reduziu o número de contorções abdominais de maneira dependente do tempo, sendo que as inibições observadas foram 38±7%, 38±8%, 27±8% e 54±15% para os tempos de 5, 10, 20 e 30 minutos de estímulo, respectivamente. Além disso, foi observado que esta antinocicepção dura até duas horas após o estímulo com inibições de 49±5%, 70±7%, 63±7% e 42±5% do número de contorções abdominais para os tempos de zero, 30 minutos, 1 e 2 horas após o estímulo, respectivamente. A estimulação de um falso ponto (Sham) não causou redução significativa do número de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético. No modelo de nocicepção induzida pela injeção intraplantar de glutamato, a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) também se mostrou efetiva em reduzir o comportamento nociceptivo com inibição 38±7%. Da mesma forma, causou inibição significativa da nocicepção de origem neurogênica (29+10 %) e inflamatória (44+9%) induzida pela injeção intraplantar de formalina. A antinocicepção causada pela estimulação do acuponto BL60 (Kunlun) foi revertida de forma significativa pelo prétratamento dos animais com naloxona (antagonista não seletivo de receptores opióides, 1 mg/kg, i.p.), naloxona metiodida (antagonista não seletivo de receptores opióides que não atravessa a barreira hemato-encefálica, 1 mg/kg, s.c.), PCPA (inibidor da síntese de serotonina, 100 mg/kg, i.p., por 4 dias) e WAY100635 (antagonista dos receptores 5-HT1A, 0,1 mg/kg, i.p.), mas não foi alterada pelo tratamento dos animais com cetanserina (antagonista dos receptores 5-HT2A, 0,3 mg/kg, i.p.), ondansetrona (antagonista dos receptores 5-HT3, 0,5 mg/kg, i.p.), prasozina (antagonista R1 adrenérgico 0,15 mg/kg i.p.), ioimbina (antagonista dos receptores R-2 adrenérgicos, 0,15 mg/kg, i.p.) ou sulpirida (antagonista dopaminérgico tipo D2, 1,0 mg/kg, i.p.). Os dados do presente estudo demonstram claramente que a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) produz antinocicepção em vários modelos de nocicepção química em camundongos. O mecanismo de ação envolve, pelo menos em parte, a estimulação do sistema opióide central e periférico e serotoninérgico (via receptores 5-HT1A), mas não adrenérgico nem dopaminérgico. Acupuncture is a millenary technique which has been used in the treatment of many kinds of pain. The present study analysed the antinociceptive action of the stimulation at BL60 acupoint (Kunlun) in models of nociception caused by acetic acid, glutamate and formalin in mice. Initially it was evaluated the possible antinociceptive activity of acupuncture at BL60 (Kunlun) and if the period of permanence of the needle at the acupoint has influence in these results, in the test of abdominal writhes induced by acetic acid. It was observed that acupuncture at BL60 (Kunlun) reduced the abdominal writhes in a time-dependent condition with inhibitions of 38±7%, 38±8%, 27±8% and 54±15%, respectively for the periods of 5, 10, 20 and 30 minutes of stimulation. It was also observed that this antinociception lasts until two hours after stimulation, with inhibitions of 49±5%, 70±7%, 63±7% and 42±5% in the abdominal writhes number for the periods of zero, 30 minutes, 1 and 2 hours of stimulation, respectively. The stimulation at a false-point (Sham) does not cause significant decrease in the abdominal writhes number induced by acetic acid. In the model of nociception by intraplantar injection of glutamate, acupuncture at BL60 (Kunlun) was also effective in decrease the nociceptive behavior, with inhibition of 38±7%. In the same way, significant inhibition at the nociception of neurogenic (29 + 10 %) and inflammatory (44 + 9%) origin induced by formalin was observed. The antinociceptive effect caused by acupuncture at BL60 (Kunlun) was significantly reversed by the pretreatment of animals with naloxone (non selective opioid receptor antagonist, 1 mg/Kg, i.p.), naloxone methiodide (non selective opioid receptor antagonist that does not cross the hemato-encephalic barrier, 1 mg/Kg, s.c.), PCPA (inhibitor of serotonin synthesis, 100 mg/Kg i.p., 4 consecutive days) and WAY100635 (selective 5HT1A receptor antagonist, 0.1mg/Kg i.p.), but it was not reversed by the pre-treatment with ketanserin (5-HT2A receptor antagonist, 0.3 mg/kg, i.p.), ondansetron (5-HT3 receptor antagonist, 0.5 mg/kg, i.p.), prasozin (R1 adrenergic antagonist, 0.15 mg/kg i.p.), yoimbine (R-2 adrenergic antagonist, 0.15 mg/kg, i.p.) or sulpiride (D2 dopaminergic receptor antagonist, 1.0 mg/kg, i.p.). The present study clearly show that acupuncture at BL60 (Kunlun) produces antinociception in various models of chemical nociception in mice. The action mechanism involves the stimulation of opioid and serotonergic systems (5HT1A receptor), but does not involve adrenergic and dopaminergic systems.
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Magnetic Nanoparticles and Carbon Quantum Dots: Interdisciplinary Nanoparticles for Sensing and/or Education

Freire, Rafael Melo January 2016 (has links)
FREIRE, Rafael Melo. Magnetic nanoparticles and carbon quantum dots: interdisciplinary nanoparticles for sensing and/or education. 182 f. 2016. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-04-04T18:36:04Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_rmfreire.pdf: 11804231 bytes, checksum: 1a676a521f06fad619e4adfb61cc2a45 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-04-04T18:36:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_rmfreire.pdf: 11804231 bytes, checksum: 1a676a521f06fad619e4adfb61cc2a45 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:36:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_rmfreire.pdf: 11804231 bytes, checksum: 1a676a521f06fad619e4adfb61cc2a45 (MD5) Previous issue date: 2016 / In this work, a sensing strategy for detection and identification of proteins with magnetic nanoparticles (MNPs) and carbon quantum dots (CQDs) was developed. In this sense, mixed ferrites of general formula M0.5Zn0.5Fe2O4 (M=Mn or Ni) were first investigated. Therefore, the hydro/solvothermal synthesis of these magnetic nanoparticles was performed under different conditions (solvent, reaction time and base concentration). Based on the magnetic properties of the two MNPs investigated, the mixed ferrite of formula Mn0.5Zn0.5Fe2O4 (MnZn) synthesized using water showed the greatest potential for sensing. Since among all synthesized MNPs, this sample displayed the highest saturation magnetization value ( M S  50 emu/g), lower crystallite size around 12 nm and superparamagnetic behavior. Once the first part of the doctoral thesis was concluded, the next step was to find a fluorescence probe. In this regard, it was performed the synthesis, as well as the application of branched poliethylenimine-functionalized carbon quantum dots (CQDs.BPEI). These new carbon-based nanoparticles were found to be protein-responsive. Since CQDs.BPEI were able to detect eight different proteins (four metallic and four non-metallic) even using concentrations in the range of 5 – 40 nM. Fluorescence titrations performed at 298 and 310 K displayed the fluorescence quenching through collisional mechanism. Therefore, it was also possible to conclude that the fluorescence quench comes from the amino acid residues on the surface of the proteins. To further check the potential of the CQDs.BPEI, it was developed a “nose” based methodology to identify proteins. Using materials as cheap as Cu2+ and ethylenediaminetetraacetic acid, the chemical “nose” approach was able to discriminate six different proteins at 40 nM concentration in phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4). The identification accuracy of the random unknown set was 90% with all misclassification occurring for albumin proteins (e.g., Bovine Serum Albumin and Human Serum Albumin). The displayed results evidence the great potential of CQDs.BPEI as a protein-responsive probe to detect and identify proteins. Taken together, MnZn and CQDs.BPEI were capable to build up a powerful protein sensing approach. In addition, realizing the great potential of CQDs in the educational field, it was also developed and successfully applied (for more than 70 students from biotechnology, pharmacy, engineers and geology courses) a lab experiment to demonstrate lightrelated quantum phenomena. / Neste trabalho, uma estratégia para detecção e identificação de proteínas incluindo nanopartículas magnéticas (MNPs) e pontos quânticos de carbono (CQDs) foi desenvolvida. Assim, ferritas mistas de fórmula M0.5Zn0.5Fe2O4 (M=Mn or Ni) foram inicialmente investigadas. Neste sentido, suas sínteses foram feitas utilizando diferentes condições (solvente, tempo reacional e concentração de base). Logo, baseado nas propriedades magnéticas das MNPs sintetizadas, escolheu-se a Mn0.5Zn0.5Fe2O4 (MnZn) sintetizada em água por mostrar grande potencial, uma vez que essa amostra apresentou alto valor de magnetização de saturação ( M S  50 emu/g) em comparação com outras ferritas de composição semelhante, baixo tamanho de cristalito por volta de 12 nm e comportamento superparamagnético. Com a primeira parte do trabalho concluída, a próxima etapa foi encontrar uma sonda fluorescente. Assim, realizou-se a síntese dos CQDs funcionalizados com grupamentos amina (CQDs.BPEI). Quando testada contra 8 diferentes proteínas (4 metálicas e 4 não-metálicas), apresentou variação da emissão para concentrações na faixa de 5 – 40 nM. Titulações fluorescentes também foram realizadas e observou-se que a supressão da fluorescência ocorre via mecanismo colisional a partir de resíduos aminoácidos na superfície da proteína. Para adicionalmente checar o potencial dos CQDs.BPEI, foi desenvolvida abordagem para identificar proteínas utilizando materiais Cu2+ e o ácido etilenodiamino tetraacético. No total, a estratégia desenvolvida foi capaz de identificar corretamente 6 diferentes proteínas a 40 nM. A precisão da identificação encontrada foi 90% para as amostras desconhecidas. Contudo, vale ressaltar que os 10% de engano foram apenas entre BSA e HSA, duas proteínas albumínicas muito similares. Os resultados obtidos nessa parte do trabalho evidenciam o alto potencial de CQDs.BPEI para detecção e identificação de proteínas. Observando os resultados do trabalho como um todo, pode-se afirmar que MnZn e CQDs.BPEI são capazes de compor excelente abordagem para detecção e identificação de proteínas. Adicionalmente, foi explorada a utilidade dos CQDs para o campo educacional. Dessa forma, foi também desenvolvido e aplicado (mais de 70 estudantes de graduação oriundos dos cursos de biotecnologia, farmácia, engenharias e geologia) um experimento de laboratório para demonstrar fenômenos quânticos relacionados com a luz.
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Nova técnica para síntese de pontos quânticos coloidais de CdS em meio puramente aquoso / New technique for the synthesis of CdS colloidal quantum dots in medium purely aqueous

Maronesi, Ray Nascimento 01 September 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-13T13:53:31Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4654460 bytes, checksum: 12deb013ebd813cf4586d90b3dfa8e8d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T13:53:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4654460 bytes, checksum: 12deb013ebd813cf4586d90b3dfa8e8d (MD5) Previous issue date: 2016-09-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A produção dos nanocristais semicondutores, também chamados pontos quânticos (PQs), teve destaque na década de 1970 por meio do desenvolvimento da técnica de crescimento por feixes moleculares. Devido a sua expressiva característica óptica tamanho-dependente, este tipo de material atraiu muitas expectativas e diversas aplicações foram sendo desenvolvidas nas mais variadas áreas, de dispositivos optoeletrônicos à nanobiotecnologia. Em função deste grande interesse, diversas técnicas de produção, inclusive rotas químicas, foram surgindo de modo a simplificar a síntese e aumentar a qualidade das amostras. O nosso trabalho consistiu em estabelecer uma nova rota de síntese química para pontos quânticos coloidais de CdS, a qual demos o nome de “síntese em meio puramente aquoso”, por ela ocorrer totalmente em solvente aquoso. Apesar de existentes na literatura pontos quânticos produzidos em meio aquoso, segundo o nosso conhecimento em todos os processos de síntese são necessários procedimentos experimentais difíceis e controlados tais como: refluxo sob atmosfera inerte, controle de pH, controle de temperatura, ao contrário de nossa síntese, que se mostra muito mais simples quando comparados com rotas químicas já estabelecidas. Dentre os semicondutores do tipo II-VI, os pontos quânticos de CdS se destacam devido à sua grande variação em comprimentos de onda de emissão no espectro visível de fotoluminescência em função das variações em seu tamanho. Para a produção dos pontos quânticos de CdS utilizamos soluções salinas apropriadas como as fontes para os íons precursores de Cd 2+ e S 2- e como agente estabilizador utilizamos o dodecil sulfato de sódio, SDS, (C 12 H 25 SO 4 Na), que é um surfactante aniônico de cadeia longa. Conseguimos produzir pontos quânticos coloidais com diferentes tamanhos, que fluorescem em diferentes faixas do espectro visível, através de variações experimentais dos parâmetros que compõe a síntese, tais como as razões entre as concentrações dos precursores e razão entre precursores e o agente estabilizador. Por meio das caracterizações ópticas de fotoluminescência e absorção, juntamente com imagens de AFM, conseguimos mostrar que conseguimos sintetizar nanoestruturas de CdS com grande estabilidade e com tamanhos que variam entre 4 a 16 nm. / The production of semiconductor nanocrystals also called quantum dots, has its origins in the 1970s, with the development of molecular growth technique by electron beams. Due to its incredible size dependent optical properties, such materials has attracted many expectations and many applications have been developed in many fields, ranging from electronic devices to nanobiotechnology. Because this large interest several routes, including chemical routes, had come to simplify the synthesis and increase the quality of the samples. Our work was to establish a new route of chemical synthesis for colloidal quantum dots of CdS, which we call route in purely aqueous medium, since it fully occurs in aqueous solvent. Although quantum dots produced in aqueous medium already exist, according to our knowledge, in all the synthetic procedures, difficult and controlled experimental procedures are required, such as inert gas reflow, pH control, temperature control. Our synthesis turned out to be much simpler when compared to previous established chemical routes instead. Among the II-VI semiconductor quantum dots, CdS stands out due to its great variation in wavelengths in the luminescence and absorbance visible spectrum as a consequence of size variations. Our synthesis use appropriate salt solutions as sources of precursor ion Cd 2+ and S 2- . To stabilize the solution we use an anionic major carbon chain surfactant, sodium dodecyl sulfate, SDS, (C 12 H 25 SO 4 Na). We succeeded in producing colloidal quantum dots of different sizes and that fluoresce in different colors in the visible region, through experimental variations of the parameters that make up the synthesis, such as the ratios between chemical precursors concentrations and the ratio between precursor and stabilizing agent concentrations. Through different optical characterization techniques photoluminescence, absorption, and AFM images, we were able to show that we could synthesize CdS nanostructures with high stability and with sizes in the range of 4 to 16 nm.

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