Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2016-01-12T18:46:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) mariana_resende_castro.pdf: 795870 bytes, checksum: e00feebf3320e268af70b9a9f164f00a (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2016-01-12T18:46:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) mariana_resende_castro.pdf: 795870 bytes, checksum: e00feebf3320e268af70b9a9f164f00a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-12T18:46:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) mariana_resende_castro.pdf: 795870 bytes, checksum: e00feebf3320e268af70b9a9f164f00a (MD5) Previous issue date: 2014 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Foram desenvolvidos sete experimentos para determinar as rela??es metionina + cistina (M+C): lisina (Lis) digest?veis em ra??es de codornas de corte (Coturnix coturnix). Para os per?odos de crescimento (um a sete, oito a 14 e 15 a 21 dias de idade) as codornas foram criadas em lotes mistos, e receberam ra??o basal, contendo 0,76 g metionina + cistina digest?vel, suplementada com cinco n?veis de DL-Metionina, o que correspondeu ?s rela??es M+C: Lis digest?veis de 0,61; 0,66; 0,71; 0,76 e 0,81. Para os per?odos de termina??o (22 a 28 e 29 a 35 dias de idade), aves foram criadas em lotes sexados, e receberam ra??o basal, contendo 0,63 g metionina + cistina digest?vel, suplementada com cinco n?veis de DL-Metionina, o que correspondeu ?s rela??es M+C: Lis digest?veis de 0,68; 0,73; 0,78; 0,83 e 0,88. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e oito repeti??es. Nos per?odos de um a sete e oito a 14 dias de idade observou-se efeito das rela??es M+C: Lis digest?veis para todas as vari?veis de desempenho, exceto para viabilidade das aves. Durante o per?odo de 15 a 21 dias, as crescentes rela??es M+C: Lis digest?veis influenciaram todas as vari?veis, exceto a uniformidade e viabilidade das codornas. N?o houve efeito das rela??es M+C: Lis digest?veis no per?odo de 22 a 28 dias, para as codornas machos, entretanto, para as f?meas observou-se efeito para consumo de ra??o e ganho em peso. No per?odo de 29 a 35 dias para os machos, observou-se efeito para o consumo de ra??o, consumo de metionina + cistina, ganho em peso, extrato et?reo da carca?a, rendimento de coxa+sobrecoxa, prote?na bruta da carca?a e balan?o de nitrog?nio. No entanto, para as codornas f?meas de 29 a 35 dias de idade, n?o observou-se efeito para nenhuma das vari?veis estudadas frente ?s rela??es M+C: Lis digest?veis. As rela??es M+C: Lis digest?veis que otimizaram o ganho em peso foram de 0,81; 0,75 e 0,77 para os per?odos de um a sete, oito a 14 e 15 a 21 dias de idade, respectivamente, para codornas de ambos os sexos. Durante os per?odos de 22 a 28 e 29 a 35 dias de idade das codornas f?meas recomendam-se as rela??es de 0,79 e 0,68, respectivamente, e para as codornas machos, recomendam-se as rela??es de 0,68 e 0,88 M+C: Lis digest?veis. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Zootecnia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT Seven experiments were conducted to determine the relations methionine and cystine (M+C): digestible lysine (Lys) in feed quails (Coturnix coturnix). For the growth periods (one to seven, eight to 14 and 15 to 21 days old) quails were created in mixed batches, and fed a basal diet containing 0.76 g methionine + cystine, supplemented with five levels of DL-Methionine, corresponding to the relations M+C: digestible Lys 0.61, 0.66, 0.71, 0.76 and 0.81. For final periods (22 to 28 and 29 to 35 days old), quails were created in sexed lots, and received basal diet containing 0.63 g methionine + cystine, supplemented with five levels of DL-Methionine, the corresponding to the relations M+C: digestible Lys 0.68, 0.73, 0.78, 0.83 and 0.88. The experimental design was completely randomized with five treatments and eight replicates. In periods of one to seven and eight to 14 days of old was observed effect of the relations M+C: digestible Lys for all performance traits, except for viability of quails. During the period of 15 to 21 days, the growth relations M+C: digestible Lys influenced all traits, except the uniformity and viability of quail. There was no effect of the relations M+C: digestibles Lys in the period 22 to 28 days for male quails, however, for females observed effect on feed intake and weight gain. In the period 29 to 35 days for males, there was effect for feed intake, methionine and cystine intake, weight gain, carcass ether extract, thigh + drumstick yield, carcass crude protein and nitrogen balance. However, for female quails 29 to 35 days of old, there was no effect on any of the traits studied in the face of relations M+C: digestible Lys. The relations M+C: digestibles Lys which optimized the weight gain were 0.81, 0.75 and 0.77 for periods of one to seven, eight to 14 and 15 to 21 days of old, respectively, for quail both sexes. During periods 22 to 28 and 29 to 35 day old females quails are recommended relations of 0.79 and 0.68, respectively, and for males quails are recommended relations of 0.68 and 0 88 M+C: digestible Lys.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423837.pdf: 3323767 bytes, checksum: 8540f43fe0c310d46371629da67c4e9a (MD5) Previous issue date: 2010-03-03 / Originalmente conceituava-se a mielina como uma inova??o evolutiva exclusiva dos vertebrados com mand?bulas, capaz de permitir o aumento na velocidade de transmiss?o de impulsos nervosos gra?as ? transmiss?o saltat?ria. Este conceito tem sido desafiado pela identifica??o de estruturas morfologicamente equivalentes ? mielina em grupos independentes de invertebrados, incluindo anel?deos e crust?ceos capazes de garantir propaga??o de impulsos nervosos em velocidades superiores ? de vertebrados. At? o presente momento, a maioria das descri??es da mielina dos invertebrados ? baseada em dados morfol?gicos e mostram lamelas com variados graus de compacta??o e origem celular, envolvendo espiralmente ou concentricamente ax?nios de diversos calibres nos ap?ndices corporais ou cord?es nervosos destes animais. Para estabelecer as origens evolutivas da mielina e a rela??o intergrupo, elementos important?ssimos, como a descri??o das prote?nas componentes, est?o faltando. Este trabalho teve como objetivo realizar uma an?lise do conte?do prot?ico da mielina do camar?o Litopenaeus vannamei. Para identificar as prote?nas componentes das lamelas da mielina uma sub-fra??o enriquecida em mielina preparada a partir do cord?o nervoso ventral de animais adultos foi submetida ? an?lise prote?mica pela t?cnica de identifica??o multidimensional de prote?nas (MudPit). MudPit foi escolhido para otimizar a chance de detec??o de prote?nas carregadas ou transmebranas, que n?o s?o detectadas por 2D-PAGE. Dos 23668 pept?deos detectados, 311 prote?nas foram identificadas atrav?s do emprego dos algoritmos Mascot e Blast, entre as quais prote?nas constituintes do sistema nervoso previamente reportadas nas fra??es de mielina de vertebrados. Quando prote?nas t?picas da mielina de vertebrados foram procuradas, apenas pept?deos relacionados ? prote?na proteolip?dica (PLP) foram identificados. Uma busca complementar por seq??ncias de PLP no banco de dados de ESTs de L. vannamei resultou na identifica??o de seq??ncias adicionais. Estes achados demonstram que as prote?nas presentes na mielina do L. vannamei refletem um perfil semelhante a fra??es de mielina de vertebrados, e tamb?m a identifica??o de seq??ncias relacionadas a PLP, uma das prote?nas mais abundantes na mielina dos tetr?podes, pela primeira vez. Com base na identifica??o de m?ltiplos pept?deos correspondendo a dom?nios imunoglobulina t?picos de prote?nas de ades?o na fra??o de mielina do camar?o, utilizamos um anticorpo capaz de reconhecer as duas isoformas da glicoprote?na associada ? mielina (MAG) de mam?feros em cortes de cord?o nervoso de L. vannamei. Os resultados demonstraram uma liga??o espec?fica que dever?o ser explorados com estrat?gias complementares a fim de se confirmar a identidade do ant?geno presente na mielina do camar?o. Estes resultados sugerem a presen?a de prote?nas com caracter?sticas pr?ximas ?s j? descritas na mielina dos vertebrados na mielina de L. vannamei. Estes achados, somados a estrat?gias complementares, podem contribuir para o melhor entendimento do surgimento da mielina ao longo da evolu??o e da rela??o entre os grupos de animais que apresentam mielina.

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-10T13:40:31Z No. of bitstreams: 1 VeruscaNajaradeCarvalhoCunhaTese2015.pdf: 1703847 bytes, checksum: a9661f4b3c0b28fe801235efd03b727c (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-10T13:40:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VeruscaNajaradeCarvalhoCunhaTese2015.pdf: 1703847 bytes, checksum: a9661f4b3c0b28fe801235efd03b727c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T13:40:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VeruscaNajaradeCarvalhoCunhaTese2015.pdf: 1703847 bytes, checksum: a9661f4b3c0b28fe801235efd03b727c (MD5) Previous issue date: 2015-07-14 / Telomeres are composed of complex deoxyribonucleic acid and proteins located at the ends of chromosomes, formed by a short sequence of nitrogenous bases (5'-TTAGGGn -3 ') repeated several times. Are connected to a multiprotein complex called "shelterin" consists of six proteins (TRF1, TRF2, POT1, TIN2, RAP1 and TPP1) which maintains telomere homeostasis, preventing degradation. Telomeres are affected by the DNA polymerase inability fully replicate the tape 5' end of the chromosome. The results of such failure are successors shortenings with each cell division, which leads to extremely short telomeres at the end of cell division, resulting in cell senescence. Therefore telomeres are considered a potential biomarker of aging at the cellular level. The shortening of telomeres has been associated with an increased risk of developing age-related diseases such as diabetes, cardiovascular disease and obesity. In contrast, it is believed that physical exercise can attenuate the shortening rate of telomeres, even in the elderly. However, it is possible that there is a 'dose' ideal of physical exercise that can enhance this beneficial effect. The objective of this study was to analyze and compare the effects of aerobic training intensity swimming conducted in two intensity domains (high and low) on the expression of genes encoding the protective telomeric proteins (trf1 and trf2), associated proteins cellular senescence (p53 and Chek2), in addition to measuring telomere length in gastrocnemius and myocardium old mice. Sixteen animals were divided into four groups: two groups submitted to twelve weeks of physical training of swimming at low intensity (BI) and high intensity (AI) and two who remained sedentary for the same period, with a group of young animals (CONTj) and elderly animals (CONTi). Training consisted of swimming exercise three times a week, 20 minutes per session for the group AI and 40 minutes for BI with load corresponding to 3% body weight (%PC) (BI) and 6%PC (AI). An incremental test for functional evaluation was performed every four weeks to measure the maximum load (Gm??x). After the training period, animals were sacrificed for removal of tissue samples for analysis of genes expression related to telomeres. The results suggest that high intensity exercise is "teloprotetor" in the gastrocnemius tissue, since telomere length of the elderly animals did not differ from each other, however, the animals in this group (AI) had a lower expression of genes of proteins protective (trf1 and trf2) and cellular senescence (p53). These results suggest that the intensity at which the exercise is performed interfere with telomere length and that this response is tissue dependent, since the same results were not observed in cardiac tissue of animals. / Tel??meros s??o complexos compostos por ??cido desoxirribonucleico e prote??nas, localizados nas extremidades dos cromossomos, formados por uma pequena sequ??ncia de bases nitrogenadas (5???-TTAGGGn -3???) repetida diversas vezes. Encontram-se ligados a um complexo multiprot??ico denominado ???shelterin??? composto por seis prote??nas (TRF1, TRF2, POT1, TIN2, RAP1 e TPP1) que mant??m a homeostase telom??rica, prevenindo sua degrada????o. Os tel??meros s??o afetados pela incapacidade da DNA polimerase replicar completamente o final da fita 5??? do cromossomo. Os resultados de tal falha s??o sucess??veis encurtamentos a cada divis??o celular, o que leva ?? tel??meros extremamente curtos ao t??rmino das divis??es celulares, resultando na senesc??ncia celular. Sendo assim, considerados um potencial biomarcador do envelhecimento a n??vel celular. O encurtamento dos tel??meros tem sido associado a um maior risco de desenvolvimento de doen??as associadas ao envelhecimento, tais como, diabetes mellitus, doen??as cardiovasculares e obesidade. Em contrapartida, acredita-se que o exerc??cio f??sico possa atenuar a taxa de encurtamento dos tel??meros, mesmo em indiv??duos idosos. Contudo, ?? poss??vel que exista uma ???dose??? ideal de exerc??cio f??sico que possa potencializar este efeito ben??fico. Assim, o objetivo do presente estudo foi analisar e comparar os efeitos do treinamento aer??bio de nata????o realizado em dois dom??nios de intensidade (alta e baixa) sobre a express??o dos genes que codificam as prote??nas de prote????o telom??rica (trf1 e trf2), prote??nas associadas ?? senesc??ncia celular (p53 e Chek2), al??m de mensurar o comprimento do tel??mero no gastrocn??mio e no mioc??rdio de camundongos idosos. Dezesseis animais foram divididos em quatro grupos: dois grupos submetidos a doze semanas de treinamento f??sico de nata????o em baixa intensidade (BI) ou alta intensidade (AI) e dois que permaneceram sedent??rios pelo mesmo per??odo, sendo um grupo de animais jovens (CONTj) e um de animais idosos (CONTi). O treinamento consistiu do exerc??cio de nata????o, tr??s vezes por semana, 20 minutos por sess??o para o grupo AI e 40 minutos para o BI, com carga correspondente a 3% do peso corporal (%PC) (BI) e 6%PC (AI). Um teste incremental para avalia????o funcional fora realizado a cada quatro semanas para mensura????o da carga m??xima (Gm??x). Ap??s o t??rmino do per??odo de treinamento, os animais foram sacrificados para retirada de amostras de tecido para an??lise da express??o dos genes relacionados aos tel??meros. Os resultados obtidos sugerem que o exerc??cio de alta intensidade seja ???teloprotetor??? no tecido gastrocn??mio, uma vez que o comprimento do tel??mero dos animais idosos n??o diferiu entre si, embora, os animais desse grupo (AI) apresentaram uma menor express??o dos genes das prote??nas protetoras (trf1 e trf2) e da senesc??ncia celular (p53). Esses resultados sugerem que a intensidade na qual o exerc??cio ?? realizado interfere no comprimento dos tel??meros e que tal resposta ?? tecido dependente, uma vez que os mesmos resultados n??o foram observados no tecido card??aco dos animais.

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-09-06T17:52:33Z No. of bitstreams: 1 DiannyElizabethJimenezJojoaTese2017.pdf: 3946754 bytes, checksum: 81cb9190de587ca935463b13f7a89e30 (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-09-06T17:52:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DiannyElizabethJimenezJojoaTese2017.pdf: 3946754 bytes, checksum: 81cb9190de587ca935463b13f7a89e30 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T17:52:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DiannyElizabethJimenezJojoaTese2017.pdf: 3946754 bytes, checksum: 81cb9190de587ca935463b13f7a89e30 (MD5) Previous issue date: 2017-03-23 / The physiological and pathological processes are leaded by infinity of mechanisms and metabolic pathways. In the last decades, researches have focused on to small vesicles, the exosomes, from endosomal origin that could be involved in these processes. These vesicles can be released by different cell types carrying important components that could become biomarkers for the diagnosis of diseases or as moldable tools for controlled release of bioactive substances for clinical and therapeutic application. However, one of the challenges in the study of these interesting and versatile microvesicles is the purification process. Currently, significant difficulties are found as the lack of purity, yield and reproducibility revealed in the unreliable data at both the protein and transcriptional levels. Therefore, our aim in the present study was to compare in human serum samples the currently used purification techniques: ExoQuick??? (Systems Biosciences), Total Exosome Isolation (Life Technologies), Ultrafiltration and Ultracentrifugation and Size Exclusion Chromatography as regards to yield, size and purity evaluating, in addition, the reproducibility. The results obtained revealed the existence of differences between the techniques in the amount of particle recovery with sizes corresponding to the exosomes. Ultrafiltration was the most efficient technique followed by polymer precipitation methods and Ultracentrifugation. Protein content diversified considerably, with the Ultrafiltration almost ten times more than Ultracentrifugation. Different profiles of proteins in acrylamide gel were found, with 50 kDa to 70 kDa bands suggesting the co-precipitation of abundant contaminating proteins as albumin. When the chromatography was used to evaluate the recovery efficiency of the other techniques, the result showed no interference in the separation of populations by size, but could represent an additional tool for techniques as Ultrafiltration in the isolation of albumin as the main interfering in the serum samples. Important data were found when particle number normalization was performed in the analysis by the TRPS method, where a reduction of the aggregation and a change in the particle distribution were visible. In our results it was possible to confirm the need for the new reproducible and reliable protocols that can allow the isolation of exosomes for clinical application. On the other hand, our data provide guidance on the use of current methods for obtaining exosomes from serum and other biological fluids. / Os processos fisiol??gicos e patol??gicos s??o regidos por uma infinidade de mecanismos e vias metab??licas. Nas ??ltimas d??cadas, as pesquisas dirigiram-se a pequenas ves??culas, os exossomas, de origem endossomal que poderiam estar involucradas nestes processos. Estas ves??culas podem ser liberadas por diferentes tipos de c??lulas carregando no seu interior componentes importantes que poderiam transformar-se em biomarcadores para o diagn??stico de doen??as ou podem servir como ferramentas mold??veis para libera????o controlada de subst??ncias bioativas de aplica????o cl??nica e terap??utica. No entanto, um dos grandes desafios no estudo destas interessantes e vers??teis microves??culas constitui o processo de purifica????o. Atualmente, dificuldades significantes s??o encontradas no que se refere ?? falta de pureza, rendimento e reprodutibilidade refletidos nos dados pouco confi??veis tanto a n??vel proteico como transcricional. Por conseguinte, o nosso objetivo no presente estudo foi comparar em amostras de soro humano as t??cnicas de purifica????o atualmente utilizadas: ExoQuick??? (Systems Biosciences), Total Exosome Isolation (Life Technologies), Ultrafiltra????o e Ultracentrifuga????o e Cromatografia de exclus??o pelo tamanho em termos de rendimento, tamanho e pureza avaliando, al??m disso, a sua reprodutibilidade. Os resultados obtidos demonstraram a exist??ncia de diferen??as marcantes entre as t??cnicas na quantidade de recupera????o de part??culas com tamanhos correspondentes aos exossomas. A Ultrafiltra????o foi a t??cnica mais eficiente seguida pelos m??todos de precipita????o com pol??mero e a Ultracentrifuga????o. O conte??do proteico tamb??m variou consideravelmente sendo na Ultrafiltra????o quase dez vezes maior que a Ultracentrifuga????o. Perfis diferentes de prote??nas em gel de acrilamida foram encontrados, ressaltando a presen??a de bandas de 50 kDa a 70 kDa sugerindo a coprecipita????o de prote??nas contaminantes abundantes como a albumina. Quando a cromatografia foi usada para avaliar a efici??ncia de recupera????o das outras t??cnicas, o resultado obtido revelou que a mesma n??o auxilia na separa????o de popula????es pelo tamanho, mas que poderia representar uma ferramenta adicional para t??cnicas como a Ultrafiltra????o no isolamento de albumina como principal interferente nas amostras de soro. Dados relevantes foram encontrados quando foi realizada a normaliza????o do n??mero de part??culas na an??lise pelo m??todo de TRPS onde foi vis??vel uma redu????o da agrega????o e uma mudan??a da distribui????o das part??culas. Nos nossos resultados foi poss??vel evidenciar a necessidade da cria????o de novos protocolos reprodut??veis e confi??veis que podem permitir o isolamento de exossomas para a sua aplica????o cl??nica. Por outro lado, nossos dados fornecem uma orienta????o no uso dos m??todos atuais para a obten????o de exossomas derivados de soro e outros fluidos biol??gicos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 380548.pdf: 266524 bytes, checksum: a46413371cdc9f2cd8ff77f42e6f29db (MD5) Previous issue date: 2006-03-02 / Introdu??o: Dislipidemia ? um importante fator de risco modific?vel para evento coronariano mas muitos eventos ocorrem em pessoas com n?veis de l?pides normais que aparentemente teriam risco cl?nico baixo. Novos fatores de risco para doen?a coronariana foram definidos, entre eles a dosagem s?rica de prote?na C reativa hipersens?vel (hs-CRP). Angiografia coronariana ? o padr?o ouro para o diagn?stico anat?mico de doen?a coronariana e tem sido utilizada para avalia??o de pacientes que sofreram eventos agudos ou que necessitam manejo cl?nico mais adequado. Objetivos: Estabelecer a rela??o entre o grau de estenose coronariana e os n?veis de hs-CRP. Analisar a correla??o entre fatores de risco cl?ssicos e grau de estenose coronariana. Material e m?todos: Neste estudo transversal foram inclu?dos pacientes submetidos a cateterismo card?aco eletivo no Servi?o de Hemodin?mica do Hospital S?o Lucas da PUCRS, com avalia??o dos resultados obtidos e dos n?veis de hs-CRP e de lip?dios dosados. Resultados: Foram avaliados 138 pacientes (70 mulheres e 68 homens, idade m?dia de 56,9 +/- 11,3 anos) submetidos a angiografia coronariana, avaliada por um profissional experiente cegado para outros dados do estudo, de acordo com 2 escores: escore de vaso (0-3 pontos para 0-3 vasos com doen?a coronariana) e escore de estenose (0-3 pontos; 0 = s/ les?es, 1 = estenose 1-49%; 2 = 50-74%; 3 = >75%). De acordo com o escore total obtido, foram encontrados 72 pacientes sem doen?a ou com doen?a arterial coronariana m?nima (grupo A, escore 0-3), 21 pacientes com doen?a moderada (grupo B, escore 4-7) e 45 pacientes com doen?a severa (grupo C, >7). Foi analisada a correla??o entre esses grupos e os n?veis de hs-CRP, colesterol total, HDL colesterol, triglicer?deos e a idade. Pacientes com idade mais avan?ada apresentaram escore mais elevado (p=0,005). N?o houve signific?ncia estat?stica com rela??o aos n?veis de colesterol total e de PCR e houve rela??o inversa com n?veis de HDL colesterol (p=0,095) e triglicer?deos (p=0,018). Conclus?o: Os fatores de risco cl?ssicos demonstraram rela??o com severidade da doen?a coronariana (idade, HDL colesterol e triglicer?deos). Os n?veis de hs-CRP demonstraram associa??o com a presen?a mas n?o com a severidade da doen?a arterial coronariana de acordo com a angiografia coron?ria.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 417743.pdf: 759580 bytes, checksum: ccd92c57b296af06000f651f2b61a773 (MD5) Previous issue date: 2008-12-22 / O c?ncer de pulm?o ? o mais comum entre os tumores malignos, apresentando um aumento de 2% na sua incid?ncia anual mundial. No Brasil, o c?ncer de pulm?o foi respons?vel por 14.715 ?bitos em 2000 e as estimativas de incid?ncia de c?ncer de pulm?o em 2008 dever? atingir 27.270 pessoas (17.810 homens e 9.460 mulheres). Este estudo analisa quantitativamente, pela t?cnica da PCR em tempo real, a express?o de dois importantes genes: a cicloxigenase-2 (COX-2) uma enzima regulat?ria chave na produ??o de prostaglandina e a oncoprote?na HER-3 que parece estar associada com transforma??es neopl?sicas. Para avaliar se h? rela??o com os achados cl?nicos de pacientes submetidos ? cirurgia de ressec??o por c?ncer de pulm?o, foram obtidas 16 amostras de tecido tumoral e tecido normal de pacientes com indica??o de ressec??o por c?ncer de pulm?o n?o-pequenas c?lulas (NSCLC). Empregou-se a t?cnica da PCR quantitativa baseado na qu?mica LUX (Light Upon Extension). Al?m dos dois genes de interesse foi avaliada tamb?m a express?o do gene da - actina como controle end?geno. A idade dos pacientes variou entre 40 e 73 anos (m?dia de 62 anos). Quanto ao g?nero 68,8% dos pacientes eram do sexo masculino e 31,2% do sexo feminino. Em rela??o ao estadiamento, 81,3% dos pacientes apresentavam doen?a local (IA-IIB) e 18,7% doen?a avan?ada (IIIA-IV), sendo que 75% dos 16 tumores era carcinoma epiderm?ide ou adenocarcinoma e 25% de outros tipos. Uma maior express?o de COX-2 nos tecidos tumorais em rala??o aos tecidos normais foi verificada em 11 (68,5%) pacientes. Da mesma forma, HER-3 apresentou maior express?o em 13 (81,3%) pacientes. A raz?o entre o tecido tumoral e o tecido normal <0,6, foi usada para definir a superexpress?o das prote?nas estudadas. Segundo este crit?rio, encontramos COX-2 e HER-3 superexpressas em dois (12,5%) e tr?s (18,75%) dos pacientes, respectivamente, resultado este, sem signific?ncia estat?stica. Verificou-se uma correla??o forte entre os marcadores estudados (r2 = 0,61; p = 0,01). Foi poss?vel observar a presen?a de COX-2 e HER-3 em 100% das amostras analisadas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389155.pdf: 120483 bytes, checksum: 667f3c4666244e3dd47637233492ec4f (MD5) Previous issue date: 2007-01-19 / Diferentes estudos t?m demonstrado que a Hsp70 de Mycobacterium tuberculosis (TBHsp70) pode induzir a remiss?o de modelos de doen?as auto-imunes. Entretanto, o mecanismo pelo qual esta prote?na exibe propriedades imunorregulat?rias necessita ser elucidado. Neste estudo, nos perguntamos se a TBHsp70 poderia suprimir a rejei??o em um sistema de transplante alogeneico de tumor. N?s observamos que enquanto camundongos BALB/c (H-2d) rejeitam melan?citos B16F10 (H-2b) implantados de forma subcut?nea, animais BALB/c tratados com TBHsp70 n?o rejeitam o enxerto de forma similar aos tratados com Dexametasona (DEXA). O tratamento com TBHsp70 inibiu a prolifera??o de c?lulas T induzidas por mit?geno no linfonodo drenante e, finalmente, c?lulas T CD4, CD25 e Foxp3 foram observadas no s?tio de enxertia e nos linfonodos drenantes de animais tratados com esta prote?na. Nossos resultados apontam para um papel imunossupressor da TBHsp70, e sugerem que a indu??o de c?lulas T regulat?rias poderia ser o mecanismo pelo qual esta prote?na suprime a rejei??o ao enxerto

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-06-02T12:47:54Z No. of bitstreams: 1 MarianaRochaMaximianoDissertacaoParcial2015.pdf: 459398 bytes, checksum: b2185a3a3375dbb7ac1ed82fc658146b (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-06-02T12:48:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MarianaRochaMaximianoDissertacaoParcial2015.pdf: 459398 bytes, checksum: b2185a3a3375dbb7ac1ed82fc658146b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-02T12:48:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarianaRochaMaximianoDissertacaoParcial2015.pdf: 459398 bytes, checksum: b2185a3a3375dbb7ac1ed82fc658146b (MD5) Previous issue date: 2015-06-18 / Sclerotinia sclerotiorum, the causal agent of white mold, is a plant pathogenic fungus that has a characteristic feature, production of sclerotia, resistance structures that can be viable for up to 10 years in the soil, with ability to initiate a new cycle of infection under favorable conditions. The disease control methods are based on integrated management practices, including biological and chemical control. The proteomic study of this interaction may be a strategy for studying this pathosystem, however, the small amount of mycelium produced during the infectious process in vivo greatly limits the study of this pathosystem using this strategy. The main goals of this work were the development and validation of a culture medium that would partially mimic the host and allow the production of large amounts of micelium for in vitro studies of this pathosystem. For this purpose, a protocol was established for the production of culture media prepared with leaf extract of the hosts. These media were inoculated with sclerotia of the monosporic isolate SS 200 of S. sclerotiorum and the differential expression of effectors and candidate effectors of virulence of the fungus was evaluated by qPCR. The results showed that a large amount of micelia grew in the media and effector genes and candidate effector genes were induced in these media. These results indicate that the proposed culture media can be used to study the in vitro interaction between S. sclerotiorum and several plant hosts and that they can be useful especially in proteomic studies. / Sclerotinia sclerotiorum, agente causal do mofo branco, ?? um fungo fitopatog??nico que possui uma caracter??stica marcante, a produ????o de escler??dios, estruturas de resist??ncia que podem ser vi??veis por at?? 10 anos no solo, com capacidade de iniciar um novo ciclo de infec????o em condi????es favor??veis. Os m??todos de controle da doen??a baseiam-se em pr??ticas de manejo integrado, incluindo controle biol??gico e qu??mico. O estudo prote??mico desta intera????o pode ser uma estrat??gia para o estudo deste patossistema, entretanto, a pequena quantidade de mic??lio produzido pelo pat??geno durante o processo infeccioso in vivo limita bastante o estudo deste patossistema utilizando esta estrat??gia. Os objetivos deste trabalho foram o desenvolvimento e valida????o de um meio de cultura que mimetizasse parcialmente o hospedeiro e permitisse a produ????o de grande quantidade de massa micelial para estudos in vitro desse patossistema. Para tal, foi estabelecido um protocolo para a produ????o de meios de cultura, preparados a partir de extratos foliares dos hospedeiros. Estes meios foram inoculados com escler??dios do isolado monosp??rico de S. sclerotiorum SS 200 e a express??o diferencial de genes efetores e candidatos a efetores de virul??ncia do fungo foi avaliada por qPCR. Os resultados mostraram que em todos os meios testados houve crescimento de grande quantidade de massa micelial e que os meios foram capazes de induzir a express??o de genes efetores e candidatos a efetores. Portanto, os resultados indicam que os meios propostos podem ser usados no estudo da intera????o in vitro de S. sclerotiorum com v??rios hospedeiros, especialmente em estudos prote??micos.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:22:30Z No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:25:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:25:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T13:26:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-07T13:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tiago_jose_silva.pdf: 1811358 bytes, checksum: 1654fd6d60ba2571e51302a48d7407c9 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / A produ??o biotecnol?gica de enzimas por fungos filamentosos requer o conhecimento das suas caracter?sticas de crescimento, fisiologia e metabolismo porque a compreens?o das respostas biol?gicas e nutricionais contribui para o ajuste dos bioprocessos. Neste trabalho foram analisados o crescimento apical e alguns par?metros bioqu?micos e fisiol?gicos da resposta das linhagens Aspergillus tubingensis AN1257 e Talaromyces trachyspermus T10.5 a fontes de carbono complexas indutoras de carboidrases. Foi utilizada uma abordagem polif?sica de identifica??o baseada em caracter?sticas fenot?picas e moleculares. As linhagens foram cultivadas em meio suplementado com glicose (controle), amido e carboximetilcelulose (CMC). O crescimento apical foi avaliado quanto aos eventos iniciais, hidrata??o, polariza??o e extens?o do tubo germinativo, bem como foi investigado o papel da via de PKC nestes processos. As linhagens diferiram quanto ao potencial de produ??o de carboidrases sendo o T. trachyspermus T10.5 o mais eficiente para a express?o de amilase. A produ??o de celulase foi verificada apenas em meio s?lido. Os eventos iniciais do crescimento apical de T. trachyspermus T10.5 foram atrasados pelos carboidratos polim?ricos em meio s?lido: ap?s 14h de cultivo a propor??o de con?dios apolares, polares e com tubo germinativo foi de 31,0 ? 5,7%; 34,0 ? 0,0% e 35,0 ? 5,7% (glicose) contra 40,0 ? 0,0%; 45,0 ? 0,8% e 14,0 ? 1,6% (amido) ou 90,0 ? 4,9%; 6,0 ? 1,6% e 4,0 ? 3,3% (CMC). A biomassa de T. trachyspermus T10.5 foi formada exponencialmente no per?odo de 24 a 48h em cultivo submerso e n?o foi diminu?da por nenhuma fonte de carbono. Nas culturas submersas, a fase exponencial de crescimento foi simult?nea ao consumo exponencial do substrato; o esgotamento das fontes de carbono precedeu o in?cio da fase estacion?ria; a atividade de ?-amilase (239,2 ? 11 U/min.mL) induzida por amido coincidiu com o crescimento exponencial, permaneceu est?vel durante a fase estacion?ria e foi reprimida por glicose. O crescimento apical de A. tubingensis AN1257 respondeu mais rapidamente ? fonte de carbono: 36,0 ? 4,3% dos con?dios cultivados em meio suplementado com glicose estavam polarizados ap?s 6h, contra 1,3 ? 0,9% (amido) e 2,7 ? 1,9% (CMC). A extens?o do tubo germinativo da linhagem AN1257 tamb?m foi atrasada e reduzida por amido e CMC. A forma??o de biomassa de A. tubingensis AN1257 nas culturas submersas foi fortemente reduzida por CMC, que apresentou um efeito tamponante no meio. Nas demais culturas submersas, o crescimento exponencial de A. tubingensis AN1257 ocorreu entre 0 a 24h (glicose) ou 12 a 24h (amido) coincidindo com forte acidifica??o do meio e consumo acentuado de substrato. O efeito da ativa??o de PKC foi distinto nas duas linhagens: a ativa??o dessa enzima n?o parece modular a germina??o em A tubingensis AN1257, mas inibe fortemente a germina??o de T. trachyspermus T10.5. Assim, as duas esp?cies apresentaram respostas diferentes ? fonte de carbono e ? ativa??o de PKC, com fisiologia, germina??o e crescimento apical peculiares, cuja compreens?o permitir? direcionar a aplica??o biotecnol?gica das linhagens AN1257 e T10.5 de forma mais eficiente. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The biotechnological production of enzymes by filamentous fungi requires the knowledge of its characteristics of growth, physiology and metabolism because the comprehension of the biological and nutritional responses contributes to the adjustment of the bioprocesses. In this work, it were analyzed the apical growth, and some biochemical and physiological parameters of the response of the strains Aspergillus tubingensis AN1257 and Talaromyces trachyspermus T10.5 to complex carbon sources that induce carbohydrases. It was utilized a polyphasic approach of identification based on phenotypic and molecular characteristics. The strains were cultivated in media supplemented with glucose (control), starch and carboxy-methylcellulose (CMC). The apical growth was evaluated regarding the initial events, hydration, polarization and germtube extension, and the role of the PKC pathway in these processes was investigated as well. The strains differed according to their potential for carbohydrase production and T. trachyspermus T10.5 was the more efficient for amylase expression. Cellulase production was verified only in solid media. The initial events of T. trachyspermus T10.5 apical growth were delayed by the polymeric carbohydrates in solid media: after 14h of cultivation, the proportion of non-polar, polar and germtube-containing conidia was 31.0 ? 5.7%; 34.0 ? 0.0% and 35.0 ? 5.7% (glucose) versus 40.0 ? 0.0%; 45.0 ? 0.8% and 14.0 ? 1.6% (starch) or 90.0 ? 4.9%; 6.0 ? 1.6% and 4.0 ? 3.3% (CMC). The biomass of T. trachyspermus T10.5 was formed exponentially from 24 to 48h during submerged cultivation, and it was not decreased by any carbon source. In the submerged cultures, the exponential growth phase was simultaneous to the exponential consumption of the substrate; depletion of the carbon sources preceded the stationary phase; the ?-amylase activity (239.2 ? 11 U/min. mL) induced by starch coincided with the exponential growth, remained stable during the stationary phase and was repressed by glucose. A. tubingensis AN1257 apical growth responded more promptly to the carbon source: 36.0 ? 4.3% of the conidia cultivated in medium supplemented with glucose were polarized after 6h, versus 1.3 ? 0.9% (starch) and 2.7 ? 1.9% (CMC). Germtube extension by strain AN1257 was also delayed and reduced by starch and CMC. Biomass formation by A. tubingensis AN1257 in submerged cultures was strongly reduced by CMC, which presented a buffering effect in the medium. In other submerged cultures, the exponential growth of A. tubingensis AN1257 occurred from 0 to 24h (glucose) or 12 to 24h (starch), concomitant to a strong acidification of the medium and to intense substrate consumption. The effect of PKC activation was different in the two strains: activation of this enzyme does not seem to modulate germination in A. tubingensis AN1257, but it strongly inhibits T. trachyspermus T10.5 germination. Thus, the two species presented different responses to the carbon source and to PKC activation, with peculiar physiology, germination and apical growth, whose comprehension will allow direct the biotechnological application of strains AN1257 and T10.5 more efficiently.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-07-10T13:03:11Z No. of bitstreams: 1 2010 - Daniel da Silva Guedes Junior .pdf: 3397672 bytes, checksum: fea6a394bbb430b666ddc9c054a24c27 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T13:03:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010 - Daniel da Silva Guedes Junior .pdf: 3397672 bytes, checksum: fea6a394bbb430b666ddc9c054a24c27 (MD5) Previous issue date: 2010-02-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico, CNPq, Brasil. / The geographic distribution of bovine borreliosis is determined by the dispersion of its vector. Borrelia theileri is the predominant species in cattle, and B. coriaceae and B. burgdorferi also been reported causing clinical disease. B. theileri cause mild disease in cattle, and still is important for its potential to be confused with the spirochete of Lyme disease, B. burgdorferi, and agents of epizootic bovine abortion, B. coriaceae. In Brazil, as well as in other South American countries, the agent of this disease has not been isolated further confusing the diagnosis. The objective of this study was to identify genotypically Borrelia sp that affects cattle in Brazil. DNA extraction, was performed from blood and ticks of cattle with positive serology by indirect ELISA with crude antigen of Borrelia burgdorferi. Primers were designed for genes of Borrelia burgdorferi and B. theileri groups: 16S, flaA, flaB, GroEL, hbb, recA, 5s-23s, p66, rrs, rpoB and glpq. After the PCR reaction, only the primers amplified rrs and rpoB sequences. The predictive amino acid sequence of RRS3 revealed 99% homology with B. hermsii and B. duttonii and predictive amino acid sequence of RPOB showed 67% homology with B. duttonii and B. recurrentis. This suggests that the species of Borrelia sp present in Brazil is not owned by group B. burgdorferi. Little is known regarding the genetic variability of genes that encode membrane proteins of Brazilian isolates of A. marginale. The products of these genes constitute an important tool, as there may be significant antigen polymorphism, which may damage cross-protection between isolates and the chances of identifying candidate immunogens. The aim of the present study was to determine the degree of conservation of sequences of these genes in a Brazilian isolate of A. marginale comparing with Saint Maries and Florida isolates. For this, primers were designed to amplify the genes omp1, omp4, omp5, omp7, omp8, omp10, omp14, omp15, sodb, opag1, opag3, virb3, am097 (VirB9-1), am956 (PepA), am254 (ef-tu), am854 by PCR. The genes were then sequenced by Sanger method and the predicted amino acid sequences aligned and homology analyzed by the program CLUSTAL W. With the exception of OMP 7 all proteins (OMP1, OMP4, OMP5, OMP8, OMP10, OMP14, OMP15, SODB, OPAG1, OPAG3, VIRB3, VIRB9-1, PepA, EF-Tu, AM854) exhibited homology greater than 92% with other A. marginale isolates. However, only OMP1, OMP5, EF-Tu, VirB3, SODB, VIRB9-1 e AM854 showed homology greater than 72% regarding to A. marginale centrale which confers cross-protection against A. marginale. / A distribui??o geogr?fica da borreliose bovina ? determinada pela dispers?o do seu vetor. Borrelia theileri ? a esp?cie predominante em bovinos, sendo que B. burgdorferi e B. coriaceae tamb?m foram relatadas causando doen?a cl?nica. Portanto, B. theileri causa doen?a leve em bovinos, e ainda ? importante pelo seu potencial em ser confundido com a espiroqueta da Doen?a de Lyme, B. burgdorferi, e com agentes do Aborto Epizo?tico bovino, B. coriaceae. No Brasil, assim como em outros pa?ses Sul americanos, o agente desta enfermidade ainda n?o foi isolado prejudicando ainda mais o diagn?stico. O objetivo deste trabalho foi ? identifica??o genot?pica da esp?cie de Borrelia sp que acomete bovinos no Brasil. Foram utilizados para extra??o de DNA, o sangue e carrapatos de bovinos com sorologia positiva ao ELISA indireto com ant?geno bruto para Borrelia burgdorferi. Foram desenhados oligonucleot?deos iniciadores para genes dos grupos Borrelia burgdorferi e B. theileri: 16S, flaA, flaB, groel, hbb, recA, 5s-23s, p66, rrs, rpob e glpq. Ap?s a rea??o de PCR, somente os oligonucleot?deos iniciadores rrs e rpob amplificaram seq??ncias. A seq??ncia preditiva de amino?cidos de RRS3 revelou homologia de 99% com B. hermsii e B. duttonii e a seq??ncia preditiva de amino?cidos de RPOB demonstrou 67% de homologia com B. duttonii e B. recurrentis. Isto sugere que a esp?cie de Borrelia presente no Brasil n?o seja pertencente ao grupo de B. burgdorferi. Pouco se sabe sobre a variabilidade gen?tica dos genes que codificam prote?nas de membrana de isolados brasileiros de A. marginale. O produto destes genes constitui uma ferramenta importante, pois pode haver polimorfismo antig?nico, que pode prejudicar a prote??o cruzada entre os isolados e as chances de identifica??o de candidatos a imun?genos. O objetivo do presente estudo foi determinar o grau de conserva??o das seq??ncias destes genes em um isolado brasileiro de A. marginale frente aos isolados Saint Maries, Florida e A. marginale centrale. Para tanto, oligonucleot?deos foram desenhados para amplificar os genes omp1, omp4, omp5, omp7, omp8, omp10, omp14, omp15, sodb, opag1, opag3, virb3, am097 (VirB9- 1), am956 (PepA), am254 (ef-tu), am854 por PCR. Os genes foram ent?o seq?enciados pelo m?todo de Sanger e as seq??ncias preditas de amino?cidos alinhadas e a homologia analisada atrav?s do programa CLUSTAL W. Com exce??o de OMP 7 todas as demais (OMP1, OMP4, OMP5, OMP8, OMP10, OMP14, OMP15, SODB, OPAG1, OPAG3, VIRB3, VIRB9-1, PepA, EF-Tu, AM854) apresentaram n?veis de homologia de 92 a 100% entre os isolados de A. marginale. Destas, apenas OMP1, OMP5, EF-Tu, VirB3, SODB, VIRB9-1 e AM854 apresentaram homologia superior a 72% em rela??o a A. marginale centrale, o qual confere prote??o cruzada contra A. marginale.