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Valoración histológica de la respuesta pulpar y hepática del formocresol y el hueso liofilizado en dientes de rata.

Alcaina Lorente, Mª Antonia 25 January 2003 (has links)
Son varios los agentes que se han utilizado para las pulpotomías en dientes primarios, siendo el formocresol el más difundido. El objetivo de este estudio fue evaluar la respuesta pulpar en dientes de rata cuando el hueso liofilizado es usado como agente de pulpotomía y analizar los cambios histológicos del tejido hepático. La muestra de este estudio estaba formada por 60 ratas de raza Sprague-Dawley. El tratamiento se realizó en los primeros molares superiores, siendo un total de 120 dientes tratados. Se establecieron seis grupos, según el agente utilizado y el tiempo de evolución de la muestra ( 30 días, 45 días y 60 días). Con la utilización del hueso liofilizado se obtuvo una mejor respuesta del tejido pulpar con menor grado de inflamación. No se hallaron evidencias histológicas de patología hepática con indicio de necrosis o degeneración en ninguna de las muestras de hígado estudiadas.
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A radioautographic and vital staining study of formocresol on the dental pulp following pulpotemy

Udler, Gerald G. January 1973 (has links)
Thesis (M.Sc.D.)--Boston University, School of Graduate Dentistry, 1973. (Pedodontics) / Bibliography included.
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Evaluer le résultat des pulpotomies totales à visée définitive sur les dents permanentes matures / Outcome’s assessment of full pulpotomies on permanent mature teeth

Zanini, Marjorie 04 July 2019 (has links)
Depuis une dizaine d’années, la thérapeutique de pulpotomie totale est proposée dans la littérature pour le traitement pérenne de l’inflammation pulpaire des dents permanentes matures. De nombreuses publications de type essai clinique, étude de cohorte, série de cas ou revue systématique rapportent des résultats convergents qui placent la pulpotomie totale comme une alternative au traitement endodontique conventionnel. Cependant, la procédure reste peu enseignée, la variabilité méthodologique des études, les influences potentielles des fabricants de matériaux et les interprétations dogmatiques peuvent constituer un frein à la diffusion de cette thérapeutique. Des arguments complémentaires semblent nécessaires pour que les cliniciens, les enseignants et les chercheurs puissent appuyer leurs pratiques de soins, d’enseignements et de recherches selon la démarche fondée sur la preuve. Cette thèse constitue une démarche réflexive essentielle à la compréhension des phénomènes qui régissent la guérison à long terme de l’inflammation pulpaire et aux choix méthodologiques qui permettront d’évaluer cette guérison. Ce travail interroge les données bibliographiques pour argumenter les trois questions suivantes : 1°) Pourquoi et comment la pulpotomie totale peut-elle être considérée comme une thérapeutique de l’inflammation pulpaire ; 2°) Quelles procédures doit-on respecter et quels matériaux peut-on utiliser pour considérer la pulpotomie totale comme une thérapeutique à part entière ? 3°) Quels critères peut-on utiliser pour évaluer le succès d’une pulpotomie totale sur dents permanentes ? Ce travail bibliographique est complété par une étude expérimentale au cours de laquelle la fiabilité et la stabilité d’un guide de lecture des images radiologiques ont été vérifiées afin de proposer un outil de formation susceptible d’être appliqué lors de l’évaluation des résultats de la pulpotomie totale. / Full pulpotomy is a therapeutic in which the coronal pulp portion is removed surgically followed by the capping of the remaining radicular pulp. During the last decade, this therapeutic has been reinvestigated as a definitive treatment of pulp pathologies in mature permanent teeth. Converging datas from published studies suggested that full pulpotomy could be recognized as an alternative to root canal treatment. Furthermore, few clinical trials and a meta analysis aimed to evaluate the effect of initial pulp state or pulp capping material on the success of this treatment. However, large variations in the methodology of the studies, potential influence of laboratories of materials and endodontic dogmas are the major obstacles to the promotion of this therapeutic. An evidence-based approach is necessary because incorporates the best evidence in making decisions. This strategy will help clinicians, teachers and researchers to include full pulpotomy in a daily practice This thesis consists to question the scientific literature in order to answer three following questions: 1) Why and how the full pulpotomy should be considered as a treatment of pulp pathologies ? 2) Which procedures could be applied for full pulpotomy ? 3) Which criteria’s could be used to evaluate the outcomes of full pulpotomy ? These literature reviews are completed with an experimental study about an enriched version of a practical guide for the interpretation of PAI score. Its reliability and reproducibility were verified among French undergraduate students. This practical guide will be a useful tool in evaluation of outcomes in endodontics.
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Pulpotomy to Stainless Steel Crown Ratio in Children with Early Childhood Caries: A Cross Sectional Analysis

Matracia, Yoon-Mi(Sophie) L. 26 June 2009 (has links)
No description available.
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Vital Pulp Therapy Survivability Based on Radiographic Depth of Caries

Schmick, Aaron T 01 January 2016 (has links)
Purpose: The purpose of this retrospective chart review was to determine if the survival of two methods of vital pulp therapy (VPT) were influenced by the pre-operative radiographic depth and location of caries. Methods: Electronic patient records (axiUm®) that contained the procedure codes D3120, Indirect Pulp Therapy (IPT), or D3220, Therapeutic Pulpotomy (TP), were queried. Qualifying charts’ pre-operative and post-operative radiographs were viewed in MiPACS® by two raters. Visit records were queried again to identify any other treatment failures. Results: A total of 568 primary molars met the eligibility criteria. There was a difference in survival depending upon the treatment procedure (P < .0001), with D3220 having a significantly higher failure rate than D3120. In the 182 total cases with caries 2/3 to encroaching the pulp, therapy success was greater with IPT (P < .0001). Conclusion: IPT results in longer overall clinical success even at the deepest level of caries.
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Estudo clínico, radiográfico e microscópico dos efeitos do formocresol de Buckley diluído a 1/5, hidróxido de cálcio PA e agregado trióxido mineral (MTA) em pulpotomias de dentes decíduos humanos / Clinical, radiographic and microscopic study on 1:5 dilution of Buckley\'s formocresol, calcium hydroxide and trioxide mineral agregate a used for pulpotomies of human primary teeth

Moretti, Ana Beatriz da Silveira 11 April 2008 (has links)
O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia clínica, radiográfica e microscópica do formocresol (FC) de Buckley diluído a 1/5, hidróxido de cálcio PA (HC) e Agregado Trióxido Mineral (MTA) como agentes capeadores pulpares em dentes decíduos humanos acometidos por cárie extensa. Quarenta e cinco molares decíduos inferiores de 23 crianças com idades entre 5 e 9 anos foram tratados pela técnica convencional de pulpotomia. Os dentes foram aleatoriamente divididos entre os grupos experimentais (HC e MTA) e o grupo controle (FC). Após a remoção da polpa coronária e hemostasia, o tecido pulpar remanescente foi coberto com pasta de MTA ou pó de HC nos grupos experimentais. No grupo controle, uma bolinha de algodão umedecida na solução de FC diluído foi colocada por 5 minutos sobre o remanescente pulpar e então a câmara pulpar preenchida com óxido de zinco e eugenol. Todos os dentes foram restaurados com uma base de óxido de zinco e eugenol reforçado (IRM) e cimento de ionômero de vidro modificado por resina. As avaliações clínicas e radiográficas foram realizadas nos períodos de 3, 6, 12, 18, 24 e 30 meses do pós-operatório. Durante as avaliações, os dentes que se apresentavam no período normal de esfoliação, bem como, dentes considerados fracasso ao tratamento foram extraídos e processados para análise microscópica. Os cortes foram feitos seriadamente, no sentido vestíbulo-lingual e corados pela hematoxilina e eosina. A análise microscópica foi realizada de forma descritiva dos fenômenos mais marcantes ocorridos no tecido pulpar remanescente. Pelos resultados clínicos e radiográficos obtidos foi possível observar uma taxa de sucesso para os grupos FC, HC e MTA de 100%, 35,7% e 100%, respectivamente. Diferença estatisticamente significativa foi observada quanto à presença de reabsorção interna, lesão inter- radicular, mobilidade e fístula para o grupo HC (p < 0,05). A análise microscópica para o grupo FC revelou presença de intenso infiltrado inflamatório e deposição de tecido mineralizado, irregular por todo canal radicular. Para o grupo MTA, notou-se deposição de material mineralizado de aspecto dentinóide, obliterando todo o canal radicular, além de áreas centrais preenchidas por tecido conjuntivo frouxo com inúmeros vasos sanguíneos. O grupo HC apresentou, na maioria dos cortes, extensa área de necrose tanto na câmara pulpar quanto no canal radicular. Em outros poucos cortes, presença de barreira de dentina reacional, obliterando a abertura coronária do canal radicular, com discreto infiltrado inflamatório crônico. O MTA parece ser um possível substituto do FC, no entanto, o hidróxido de cálcio mostrou ser uma técnica muito sensível e, portanto, não indicada para pulpotomias de dentes decíduos. / The aim of this study was to compare the clinical, radiographic and microscopic effectiveness of formocresol (FC), calcium hydroxide (CH) and trioxide mineral aggregate (MTA) as pulp dressing agents in carious primary teeth. Forty-five primary mandibular molars of 23 children between 5 and 9 years old were treated by conventional pulpotomy technique. The teeth were randomly assigned to the experimental (CH and MTA) or control (FC) groups. After coronal pulp removal and hemostasis, remaining pulp tissue was covered with a MTA paste or CH powder in the experimental groups. In the control group, diluted FC was placed over the pulp tissue with a cotton pellet for 5 minutes and removed; the pulp tissue was covered then with zinc oxide-eugenol (ZOE) paste. All the teeth were restored with reinforced zinc oxide-eugenol base and resin modified glass ionomer cement. Clinical and radiographic evaluations were recorded at 3, 6, 12, 18, 24 and 30-month follow-up. During the assessments, the teeth in the regular exfoliation period, as well as those considered as treatment failures were extracted and further processed for microscopic analysis. Serial sections were performed in the bucco-lingual direction and stained with hematoxylin and eosin. Microscopic analysis was performed as a description of the most remarkable phenomena in the remaining pulp tissue. Through clinical and radiographic results, success rates of 100%, 35.7% and 100% for FC, CH and MTA were found, respectively. Statistically significant differences were observed regarding to the presence of internal resorption, inter-radicular bone destruction, mobility and fistula for CH group (p < 0.05). Microscopic analysis revealed the presence of intense inflammatory infiltrate and mineralized tissue deposition, which was irregular throughout the root canal, in the FC group. As far as MTA group, dentin-like mineralized material deposition obliterating the root canal, and central areas filled by loose conjunctive tissue with several blood vessels were noticed. CH group presented, in most of the sections, extensive necrotic areas both in pulp chamber and root canal. Other sections revealed the presence of extensive reactive dentin barrier, which obliterated the coronal opening of the root canal, and a discrete chronic inflammatory infiltrate. MTA may serve as an effective substitute of FC in primary molar pulpotomies. However, CH seems to be a technique sensitive-material and therefore not indicated for pulpotomies of primary teeth.
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Estudo clínico e radiográfico do formocresol de Buckley diluído a 1/5 e do cimento Portland utilizados para pulpotomia em dentes decíduos humanos / Clinical and radiographic study on 1: 5 dilution of Buckley\'s formocresol and Portland cement used for pulpotomias of human primary teeth

Fornetti, Ana Paula Camolese 18 December 2007 (has links)
O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia clínica e radiográfica do formocresol de Buckley diluído a 1/5 e do cimento Portland como agentes capeadores pulpares em dentes decíduos humanos acometidos por cárie extensa. Sessenta e oito molares decíduos inferiores de 52 crianças com idades entre 5 e 9 anos foram criteriosamente selecionados. Os dentes foram aleatoriamente divididos nos grupos formocresol ou cimento Portland e tratados pela técnica convencional de pulpotomia. Após a remoção da polpa coronária e hemostasia, no grupo do formocresol (34 dentes), uma bolinha de algodão embebida na solução foi colocada por 5 minutos sobre o remanescente pulpar e então a câmara pulpar preenchida com óxido de zinco e eugenol. No outro grupo (34 dentes), uma camada de 1mm de espessura de cimento Portland foi acomodada sobre o remanescente pulpar. Todos os dentes foram restaurados com uma base de óxido de zinco e eugenol reforçado (IRM) e cimento de ionômero de vidro modificado por resina. As avaliações clínicas e radiográficas foram realizadas nos períodos de 3, 6 e 12 meses do pós-operatório. Os 68 dentes foram avaliados nos períodos de 3 e 6 meses. Entretanto, aos 12 meses, 6 dentes não puderam ser avaliados (4 dentes esfoliaram naturalmente e 2 crianças mudaram de endereço). Nenhum sinal de falha clínica foi observado, para ambos os grupos, em todos os períodos avaliados. A avaliação radiográfica revelou apenas um caso de reabsorção interna, detectada aos 3 meses do pós-operatório, no grupo do formocresol. A presença de barreira dentinária foi detectada em 2 dentes do grupo do cimento Portland. Diferenças estatisticamente significante entre os grupos foram observadas apenas quando avaliadas a coloração da coroa dentária e a obliteração do canal radicular, verificadas em todos os períodos avaliados, em todos os dentes do grupo do cimento Portland. O cimento Portland parece ser um possível substituto do formocresol em pulpotomias de dentes decíduos. Embora os resultados sejam encorajadores, estudos futuros e com acompanhamentos em longo prazo são necessários para se determinar a indicação clínica segura do cimento Portland / The aim of this study was to compare the clinical and radiographic effectiveness of formocresol and Portland cement as pulp dressing agents in carious primary teeth. Sixty eight primary mandibular molars of 52 children between 5 and 9 years old were criteriously selected. The teeth were randomly assigned to formocresol or Portland cement groups, and treated by a conventional pulpotomy technique. After coronal pulp removal and hemostasis, in the formocresol group (34 teeth), a cotton pellet, soaked in the solution, was placed for 5 minutes over the pulp stumps and then the pulp chamber was filled with zinc oxide-eugenol paste. In the other group (34 teeth), an 1 mm-thick paste of Portland cement was placed over the pulp stumps. All the teeth were restored with reinforced zinc oxide-eugenol base and resin modified glass ionomer cement. Clinical and radiographic evaluations were recorded at 3, 6 and 12-month follow-up. The sixty eight teeth were available for 3 and 6-month follow-up; however, at 12-month follow-up appointment, 6 teeth could not be assessed (4 teeth exfoliated and 2 children had their address changed). No signs of clinical failure were observed at all follow-up appointments in both group. The radiographic evaluation revealed only one case of internal resorption detected at 3-month follow-up in the formocresol group. Dentine bridge was detected in 2 teeth in the Portland cement group. Statistically significant difference was only observed between both groups when assessing tooth crown discoloration and pulp canal obliteration, which were observed in all teeth treated with Portland cement at all follow-up appointments. Portland cement may serve as an effective substitute of formocresol in primary molar pulpotomies. Although our results are very encouraging, further studies and longer follow-up assessment are needed in order to determine the safety clinical indication of Portland cement.
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Estudo clínico e radiográfico comparativo entre o Formocresol de Buckley a 1/5, hidróxido de cálcio P.A. e hidróxido de cálcio P.A. precedido por antiinflamatório para pulpotomia em dentes decíduos humanos / Clinical and radiographic study on 1:5 dilution of Buckleys formocresol, calcium hydroxide and calcium hydroxide preceded by an anti-inflammatory medicine used for pulpotomias of human primary teeth

Lourenço Neto, Natalino 06 March 2009 (has links)
O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia clínica e radiográfica do formocresol de Buckley diluído a 1/5, do Hidróxido de cálcio e do Hidróxido de cálcio precedido de um medicamento antiinflamatório o Otosporin® como agentes capeadores pulpares em dentes decíduos humanos acometidos por cárie extensa. Quarenta e cinco molares decíduos inferiores de 35 crianças com idades entre 5 e 9 anos foram criteriosamente selecionados. Os dentes foram aleatoriamente divididos nos grupos formocresol, hidróxido de cálcio ou hidróxido de cálcio precedido de antiinflamatório e tratados pela técnica convencional de pulpotomia em uma única sessão. Após a remoção da polpa coronária e hemostasia, no grupo do formocresol, uma bolinha de algodão embebida na solução foi colocada por 5 minutos sobre o remanescente pulpar e então a câmara pulpar preenchida com óxido de zinco e eugenol. Para o grupo hidróxido de cálcio, o pó foi acomodado sobre o remanescente pulpar com o auxílio de um porta amálgama estéril. No terceiro grupo uma bolinha de algodão embebida em Otosporin® foi colocada por 5 minutos sobre o remanescente pulpar e em seguida o pó de hidróxido de cálcio foi acomodado sobre o remanescente pulpar com o auxílio de um porta amálgama estéril. Todos os dentes foram restaurados com uma base de óxido de zinco e eugenol reforçado (IRM) e cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Vitremer®). As avaliações clínicas e radiográficas foram realizadas nos períodos de 3, 6 e 12 meses do pós-operatório. Dos 45 dentes apenas 43 foram avaliados nos períodos de 3 e 6 meses, devido a desistência de 2 crianças, e aos 6 meses 2 dentes do grupo hidróxido de cálcio necessitaram ser extraídos devido falha clínica. Aos 12 meses, 7 dentes não puderam ser avaliados (3 dentes esfoliaram naturalmente e 4 dentes necessitaram ser extraídos devido falha clínica). Nenhum sinal de falha clínica ou radiográfica foi observado no grupo formocresol em todos os períodos avaliados. Os demais grupos estudados apresentaram reabsorções internas já aos 3 meses de controle pós-operatório, assim como a presença de barreira dentinária também foi observada já nesse período, e o grupo hidróxido de cálcio foi o único a apresentar falhas clínicas. O uso de um antiinflamatório parece auxiliar para um maior índice de sucessos clínicos quando do uso de hidróxido de cálcio em pulpotomias de dentes decíduos, pois esta se mostrou uma técnica extremamente sensível. / The aim of this study was to compare the clinical and radiographic effectiveness of formocresol, calcium hydroxide and calcium hydroxide preceded by an anti-inflammatory medicine: Otosporin® as pulp dressing agents in carious primary teeth. Forty-five primary mandibular molars of 35 children between 5 and 9 years old were carefully selected. The teeth were randomly assigned to formocresol, calcium hydroxide or calcium hydroxide proceeded of anti-inflammatory medicine groups, and treated by a conventional pulpotomy technique in a single session. After coronal pulp removal and hemostasia, in formocresol group, a cotton pellet, soaked in the solution, was placed for 5 minutes over the pulp stumps and the chamber was filled with zinc oxide-eugenol paste. For the group of calcium hydroxide, the powder was accommodated over the pulp stumps with the aid of a sterile door amalgamation. In the third group a cotton pellet, soaked in Otosporin® was placed for 5 minutes over the pulp stumps and then the calcium hydroxide powder was accommodated over the pulp stumps with the aid of a sterile door amalgamation. All the teeth were restored with reinforced zinc oxide-eugenol base and resin modified glass ionomer cement (Vitremer®). Clinical and radiographic evaluations were recorded at 3, 6 and 12-month follow-up. Only 43 of 45 teeth were available for 3 and 6 month follow-up due to withdrawal of 2 children. But at 6 month follow-up 2 teeth of the calcium hydroxide group need to be extracted because clinical failure. At 12 month follow-up, 7 teeth could not be assessed (3 teeth naturally exfoliate and 4 teeth need to be extracted because clinical failure). No sign of clinical or radiographic failure was observed in the formocresol group in all periods. The other groups of the study revealed internal resorption already at 3 month follow-up, as well as the presence of dentin barrier was also observed that time already, and calcium hydroxide group was the only one to show clinical failure. The use of an anti-inflammatory medicine seems to help a larger index of clinical success when the use of calcium hydroxide for pulpotomies in primary teeth, because this seems to be a extremely sensitive technique.
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Expressão de marcadores da mineralização na resposta pulpar, in vitro e in vivo, frente à BiodentineTM e ao agregado de trióxido mineral / Mineralization markers expression in pulp response to BiodentineTM and mineral trioxide aggregate, in vitro and in vivo

Daltoé, Mariana de Oliveira 28 August 2015 (has links)
A BiodentineTM, novo material composto principalmente de silicato tricálcio (Ca3SiO5), apresenta vantagens com relação ao MTA, como menor tempo de presa e uso como material restaurador temporário para esmalte e permanente para dentina. As diferenças no mecanismo de ação entre os dois materiais ainda não estão esclarecidas, assim, o objetivo deste estudo foi avaliar in vitro a viabilidade de células extraídas da polpa dental de humanos, bem como a expressão de diferentes marcadores da mineralização após o estímulo com BiodentineTM e MTA. Além disso, foi avaliada in vivo a expressão dos marcadores previamente observados após a realização de pulpotomia em dentes de cães. Nos experimentos in vitro foram utilizadas células da polpa dentária obtidas a partir de dentes extraídos por razões ortodônticas (n=6). As células foram plaqueadas na concentração de 1x105 células/poço e expostas aos materiais em diferentes concentrações (1:1, 1:10 e 1:100), por 24 e 48 horas. Ao fim dos períodos, foi realizado o Ensaio Colorimétrico MTT para verificação da viabilidade celular e o qRT-PCR para detecção de RNA mensageiro para osteopontina (SPP1), sialoproteína óssea (BSP), sialofosfoproteína dentinária (DSPP), fosfatase alcalina (ALP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1) e fator de transcrição relacionado ao Runt 2 (RUNX2). Os dados foram comparados por meio da análise de variância (ANOVA) de uma via seguido pelo pós-teste de Tukey ou Bonferroni (&alpha; = 0,05). Nos experimentos in vivo, foram utilizadas lâminas obtidas do banco de lâminas do Departamento de Clínica Infantil da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, nas quais foi realizada pulpotomia com MTA (n=35) e BiodentineTM (n=52) em dentes de cães. Foram realizados ensaios de imunoistoquímica para osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP) sendo a intensidade da marcação descrita como suave, moderada e intensa. Além disso, foi realizada imunofluorescência indireta para o fator de transcrição Runx-2, na qual a porcentagem de células positivamente marcadas foi calculada pelo software Image J. Ambas as análises foram realizadas nas regiões de ponte de tecido mineralizado e tecido pulpar. Os grupos foram comparados por meio do teste exato de Fisher ou qui-quadrado ou por análise de variância (ANOVA) de uma via, seguido pelo pós-teste de Tukey (&alpha; = 0,05). No estudo in vitro, após 24 e 48 horas, a diluição 1:100 de ambos os materiais não afetou a viabilidade celular (p > 0,05) em relação ao controle. Após 48 horas, MTA e BiodentineTM induziram a expressão gênica de SPP1, ALP e RUNX2 em relação ao controle (p < 0,05). Já no estudo in vivo, na marcação da ponte de tecido mineralizado para OPN, o MTA apresentou marcações suaves em 29% dos casos e a BiodentineTM marcações suaves em 26%, moderadas em 43% e intensas em 22% (p < 0,0001). A ALP na ponte de tecido mineralizado mostrou marcações suaves para o MTA em 14% dos casos e para a BiodentineTM em 48% (p < 0,0001). A OPN no tecido pulpar radicular para o MTA apresentou 29% de marcação no terço cervical e 29% no médio, sem marcação no apical e para a BiodentineTM apresentou 52% de marcação no cervical, 26% no médio e 26% no apical (p < 0,0001). A marcação para ALP no tecido pulpar não apresentou diferença entre os materiais (p = 0,2). Não houve diferença no número de células positivamente marcadas pela imunofluorescência para Runx-2, entre os materiais estudados e o controle (p > 0,05). A BiodentineTM foi capaz de estimular marcadores da mineralização de forma semelhante ao MTA, porém mais intensamente, com maior formação de pontes de tecido mineralizado, o que poderia ser vantajoso a longo prazo nos casos de tratamentos endodônticos conservadores. / BiodentineTM, a new material composed mainly of tricalcium silicate (Ca3SiO5), shows advantages compared to the MTA, as such less setting time and use as temporary restoring material to enamel and permanent to dentine. Differences in action mechanisms between the two materials are not clarified yet, therefore, the aim of this study was to compare the cellular viability of dental pulp cells when in contact with BiodentineTM and MTA in addition to the mineralization markers expression induced by both, in vitro and in vivo. For the in vitro experiments, dental pulp cells obtained from teeth extracted for orthodontic reasons (n=6) were used. The cells were plated in a density of 1x105 cells/well and exposed to both materials in different concentrations (1:1, 1:10 and 1:100), obtained from serial dilution of an initial extract (1:1), for 24 and 48 hours. At the end of the periods, the Colorimetric MTT Assay was used for cellular viability verification and the qRT-PCR for messenger RNA detection of osteopontin (SPP1), bone sialoprotein (BSP), dentin sialophosphoprotein (DSPP), alkaline phosphatase (ALP), dentin matrix protein 1 (DMP1) and Runt-related transcription factor 2 (RUNX2) was performed. Data were compared through analysis of variance (one-way ANOVA) followed by the Tukeys or Bonferroni post-test (&alpha; = 0.05). For in vivo experiments, histological slides derived from teeth of dogs, on which it was performed pulpotomy with MTA (n=35) and BiodentineTM (n=52), were obtained from a slides bank of Departamento de Clínica Infantil da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto. Immunohistochemistry for osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) were performed and the percentage of positively marked cells for the transcription factor Runx-2 by indirect immunofluorescence was calculated with the assistance of the software Image J. The groups were compared through the exact Fishers test or chi-square or analysis of variance (one-way ANOVA), followed by Tukeys post-test (&alpha; = 0.05). After 24 and 48 hours, the dilutions 1:100 of both materials did not affect the viability (p > 0.05) in comparison to control group. After 48 hours, MTA and BiodentineTM induced higher gene expression of SPP1, ALP and RUNX2 in comparison to control group (p < 0.05). In mineralized tissue bridge immunostaining for OPN, MTA showed mild staining in 29% of the cases and BiodentineTM mild staining in 26%, moderate staining in 43% and intense in 22% of the cases (p < 0.0001). Mineralized tissue bridge immunostaining for ALP showed mild staining for MTA in 14% of the cases and for BiodentineTM in 48% (p < 0.0001). The OPN immunostaining on radicular pulp tissue for MTA showed 29% of staining on cervical third, 29% on the middle third and no staining on the apical third, while BiodentineTM showed 52% stained on cervical third, 26% on the middle third, and 26% on the apical third (p < 0.0001). Immunostaining for ALP on the pulp tissue did not show difference between the two materials (p = 0.2). There was no difference in the number of positively marked cells by the immunofluorescence for RUNX-2, between the studied materials and the control group (p > 0.05). BiodentineTM was able to stimulate mineralization markers in a similar to MTA manner, but more intense, with greater formation of mineralized tissue bridges. These results indicate that BiodentineTM could be useful in long term in cases of conservative endodontic treatments.
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Expressão de marcadores da mineralização na resposta pulpar, in vitro e in vivo, frente à BiodentineTM e ao agregado de trióxido mineral / Mineralization markers expression in pulp response to BiodentineTM and mineral trioxide aggregate, in vitro and in vivo

Mariana de Oliveira Daltoé 28 August 2015 (has links)
A BiodentineTM, novo material composto principalmente de silicato tricálcio (Ca3SiO5), apresenta vantagens com relação ao MTA, como menor tempo de presa e uso como material restaurador temporário para esmalte e permanente para dentina. As diferenças no mecanismo de ação entre os dois materiais ainda não estão esclarecidas, assim, o objetivo deste estudo foi avaliar in vitro a viabilidade de células extraídas da polpa dental de humanos, bem como a expressão de diferentes marcadores da mineralização após o estímulo com BiodentineTM e MTA. Além disso, foi avaliada in vivo a expressão dos marcadores previamente observados após a realização de pulpotomia em dentes de cães. Nos experimentos in vitro foram utilizadas células da polpa dentária obtidas a partir de dentes extraídos por razões ortodônticas (n=6). As células foram plaqueadas na concentração de 1x105 células/poço e expostas aos materiais em diferentes concentrações (1:1, 1:10 e 1:100), por 24 e 48 horas. Ao fim dos períodos, foi realizado o Ensaio Colorimétrico MTT para verificação da viabilidade celular e o qRT-PCR para detecção de RNA mensageiro para osteopontina (SPP1), sialoproteína óssea (BSP), sialofosfoproteína dentinária (DSPP), fosfatase alcalina (ALP), proteína da matriz dentinária 1 (DMP1) e fator de transcrição relacionado ao Runt 2 (RUNX2). Os dados foram comparados por meio da análise de variância (ANOVA) de uma via seguido pelo pós-teste de Tukey ou Bonferroni (&alpha; = 0,05). Nos experimentos in vivo, foram utilizadas lâminas obtidas do banco de lâminas do Departamento de Clínica Infantil da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, nas quais foi realizada pulpotomia com MTA (n=35) e BiodentineTM (n=52) em dentes de cães. Foram realizados ensaios de imunoistoquímica para osteopontina (OPN) e fosfatase alcalina (ALP) sendo a intensidade da marcação descrita como suave, moderada e intensa. Além disso, foi realizada imunofluorescência indireta para o fator de transcrição Runx-2, na qual a porcentagem de células positivamente marcadas foi calculada pelo software Image J. Ambas as análises foram realizadas nas regiões de ponte de tecido mineralizado e tecido pulpar. Os grupos foram comparados por meio do teste exato de Fisher ou qui-quadrado ou por análise de variância (ANOVA) de uma via, seguido pelo pós-teste de Tukey (&alpha; = 0,05). No estudo in vitro, após 24 e 48 horas, a diluição 1:100 de ambos os materiais não afetou a viabilidade celular (p > 0,05) em relação ao controle. Após 48 horas, MTA e BiodentineTM induziram a expressão gênica de SPP1, ALP e RUNX2 em relação ao controle (p < 0,05). Já no estudo in vivo, na marcação da ponte de tecido mineralizado para OPN, o MTA apresentou marcações suaves em 29% dos casos e a BiodentineTM marcações suaves em 26%, moderadas em 43% e intensas em 22% (p < 0,0001). A ALP na ponte de tecido mineralizado mostrou marcações suaves para o MTA em 14% dos casos e para a BiodentineTM em 48% (p < 0,0001). A OPN no tecido pulpar radicular para o MTA apresentou 29% de marcação no terço cervical e 29% no médio, sem marcação no apical e para a BiodentineTM apresentou 52% de marcação no cervical, 26% no médio e 26% no apical (p < 0,0001). A marcação para ALP no tecido pulpar não apresentou diferença entre os materiais (p = 0,2). Não houve diferença no número de células positivamente marcadas pela imunofluorescência para Runx-2, entre os materiais estudados e o controle (p > 0,05). A BiodentineTM foi capaz de estimular marcadores da mineralização de forma semelhante ao MTA, porém mais intensamente, com maior formação de pontes de tecido mineralizado, o que poderia ser vantajoso a longo prazo nos casos de tratamentos endodônticos conservadores. / BiodentineTM, a new material composed mainly of tricalcium silicate (Ca3SiO5), shows advantages compared to the MTA, as such less setting time and use as temporary restoring material to enamel and permanent to dentine. Differences in action mechanisms between the two materials are not clarified yet, therefore, the aim of this study was to compare the cellular viability of dental pulp cells when in contact with BiodentineTM and MTA in addition to the mineralization markers expression induced by both, in vitro and in vivo. For the in vitro experiments, dental pulp cells obtained from teeth extracted for orthodontic reasons (n=6) were used. The cells were plated in a density of 1x105 cells/well and exposed to both materials in different concentrations (1:1, 1:10 and 1:100), obtained from serial dilution of an initial extract (1:1), for 24 and 48 hours. At the end of the periods, the Colorimetric MTT Assay was used for cellular viability verification and the qRT-PCR for messenger RNA detection of osteopontin (SPP1), bone sialoprotein (BSP), dentin sialophosphoprotein (DSPP), alkaline phosphatase (ALP), dentin matrix protein 1 (DMP1) and Runt-related transcription factor 2 (RUNX2) was performed. Data were compared through analysis of variance (one-way ANOVA) followed by the Tukeys or Bonferroni post-test (&alpha; = 0.05). For in vivo experiments, histological slides derived from teeth of dogs, on which it was performed pulpotomy with MTA (n=35) and BiodentineTM (n=52), were obtained from a slides bank of Departamento de Clínica Infantil da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto. Immunohistochemistry for osteopontin (OPN) and alkaline phosphatase (ALP) were performed and the percentage of positively marked cells for the transcription factor Runx-2 by indirect immunofluorescence was calculated with the assistance of the software Image J. The groups were compared through the exact Fishers test or chi-square or analysis of variance (one-way ANOVA), followed by Tukeys post-test (&alpha; = 0.05). After 24 and 48 hours, the dilutions 1:100 of both materials did not affect the viability (p > 0.05) in comparison to control group. After 48 hours, MTA and BiodentineTM induced higher gene expression of SPP1, ALP and RUNX2 in comparison to control group (p < 0.05). In mineralized tissue bridge immunostaining for OPN, MTA showed mild staining in 29% of the cases and BiodentineTM mild staining in 26%, moderate staining in 43% and intense in 22% of the cases (p < 0.0001). Mineralized tissue bridge immunostaining for ALP showed mild staining for MTA in 14% of the cases and for BiodentineTM in 48% (p < 0.0001). The OPN immunostaining on radicular pulp tissue for MTA showed 29% of staining on cervical third, 29% on the middle third and no staining on the apical third, while BiodentineTM showed 52% stained on cervical third, 26% on the middle third, and 26% on the apical third (p < 0.0001). Immunostaining for ALP on the pulp tissue did not show difference between the two materials (p = 0.2). There was no difference in the number of positively marked cells by the immunofluorescence for RUNX-2, between the studied materials and the control group (p > 0.05). BiodentineTM was able to stimulate mineralization markers in a similar to MTA manner, but more intense, with greater formation of mineralized tissue bridges. These results indicate that BiodentineTM could be useful in long term in cases of conservative endodontic treatments.

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