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Caracterização da lectina de Eugenia malaccensis L. (Emal) : avaliação de atividades biológicasPassos Brustein, Vanessa January 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006 / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não imune cuja ligação
reversível a carboidratos resulta em aglutinação celular. A Eugenia malaccensis
L. pertence à família Mirtaceae. Uma lectina de sementes de E. malaccencis,
EmaL, foi purificada usando fracionamento com sulfato de amônio (F 0-80),
seguida por cromatografia de afinidade em Sephadex G-50. A atividade
hemaglutinante (AH) de EmaL foi avaliada em presença de soluções de íons
(Ca2+ e Mg2+), de soluções de carboidratos e glicoproteínas, diferentes valores
de pH (2 12) e tratamento com diferentes temperaturas. As massas
moleculares da proteína nativa e de suas subunidades foram determinadas pelo
sistema ÄKTAFPLC em coluna Sephacryl S-300 e por SDS-PAGE,
respectivamente. A atividade antimicrobiana de EmaL foi avaliada com
amostras de bactéria Gram-positivas e Gram-negativas pela metodologia de
difusão em disco. A cromatografia em Sephadex G-50 apresentou um único
pico (EmaL) após eluição com glicose, resolvido em três picos protéicos de 112,
28 e 14 kDa pela cromatografia em Sephacryl S-300 e uma banda de 14 kDa
por SDS-PAGE. A AH de EmaL é totalmente inibida por glicose, caseína,
ovoalbumina e fetuína, não é dependente de íons, é dependente de pH e é
totalmente perdida após aquecimento a 30 °C. EmaL inibe o crescimento de
bactérias Gram positivas e negativas; o melhor resultado (26.5 mm ± 1.2 halo)
foi obtido com Staphylococcus aureus, apresentando uma concentração mínima
inibitória (CMI) de 1,5 μg/ml e uma concentração mínima bactericida (CMB) de
15 μg/ml. Um nova lectina (EmaL) glicose específica foi obtida, com potencial
uso como agente antimicrobiano e de amplo espectro de ação
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Avaliação da remoção de fitoplâncton e formação de trialometanos em águas de abastecimento em processo de tratamento por FAD, interoxidação e desinfecção com cloroJUSTINO, F. F. 26 August 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-08-26 / A presença de populações algais nos reservatórios torna mais problemática a operacionalidade
dos sistemas de tratamento e pode causar impactos negativos na qualidade das águas
distribuídas ao gerar sabores e odores na água e interferir no processo de clarificação. Além
disto, uma das grandes preocupações ambientais e de saúde pública em lagos e represas e a
floração de algas e cianobactérias produtoras de toxinas. Em águas de abastecimento, a
matéria orgânica natural, as algas/microalgas e as cianobactérias e seus metabólitos, inclusive
suas toxinas, são os principais precursores com os quais os halogênios reagem para formar
subprodutos da cloração, entre estes os trialometanos. O processo de clarificação utilizando o
sistema de flotação vem sendo utilizado para remoção de algas, cianobactérias e suas toxinas
em substituição ou conjuntamente com os processos de decantação e filtração direta. Este
estudo consistiu da avaliação, em escala de bancada, dos processos de coagulação e
floculação com sulfato de alumínio, flotação por ar dissolvido (FAD), inter-oxidação com
cloro, filtração em areia e desinfecção com cloro, com o objetivo de investigar a remoção de
fitoplâncton e a formação de trialometanos em águas de abastecimento com presença de
microalgas e cianobactérias. O estudo de coagulação com sulfato de alumínio resultou em
regiões semelhantes de remoção (pH 6,3 e 6,5 e 25 a 35mg/L Al2(SO4)3) dos parâmetros cor
aparente e cor real e turbidez para os períodos de seca (71%) e de chuvas (93%). Na
otimização da flotação os resultados indicaram uma melhor remoção do material particulado
(95%) e cor real (74%) na velocidade ascensional de 5cm/min. Os testes de inter-oxidação
resultaram em baixa demanda de cloro, indicando a eficiência da flotação na remoção da
matéria orgânica. A caracterização da água do manancial Duas Bocas mostrou qualidade de
água satisfatória para águas de abastecimento no período observado. Na avaliação qualiquantitativa
do fitoplâncton foram registrados 22 táxons, sendo a Classe Cyanophyceae a mais
representativa em riqueza e em densidade relativa total nos dois meses de estudo, destacando
o domínio das espécies Synechococcus nidulans e Anabaena sp. Esta última apresenta
potencial de produção de neurotoxinas e hepatotoxinas, 9 dos 15 gêneros listados são
mencionados como causadores de problemas operacionais como gosto, odor, colmatação dos
filtros, entre outros. No estudo comparativo entre duas linhas de tratamento, apesar de um
maior gasto com coagulante e alcalinizante, o tratamento 2 (30mg/L Al2(SO4)3 em pH 6,4)
mostrou-se adequado nos dois meses estudados (maio e junho). A inter-oxidação apresentou
baixa eficiência de remoção dos parâmetros cor aparente, turbidez e absorbâncias 254 e 665,
nos tratamentos 1 e 2. O meio filtrante misto, composto com de grãos de areia de tamanho
1,20 a 0,60mm (70%) e 0,60 a 0,30mm (30%) seguido de desinfecção com cloro (5mg
Cl2/mL), mostrou-se eficiente na remoção dos parâmetros analisados para os quatro
tratamentos estudados, compensando os valores menores de remoção observadas nas etapas
anteriores. Todos os tratamentos estudados apresentaram resultados positivos para a formação
de clorofórmio e bromodiclorometano, porém abaixo dos limites estabelecidos pela Portaria
MS 518/04 para TTHM.
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Modelagem e simulação de purificação de cefalosporina C em coluna de leito fixoRuiz Paredes, Roger 20 September 1996 (has links)
Orientador: Francisco Mangeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T16:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1996 / Resumo: No processo total de obtenção de cephalosporin C, a purificação ocupa a segunda etapa, sendo a primeira fase a produção em meio de cultura pelo fungo Cephalosporium acremonium. O processo de purificação é efetuado em colunas de troca iônica. Neste trabalho foi proposto um modelo matemático para descrever o comportamento do processo de adsorção, obtido a partir de balanços de massa e equações cinéticas de adsorção por troca iônica, determinadas previamente em resina XAD-2, levando em consideração a resistência à transferência de massa externa e interna assim como a dispersão axial. As equações analíticas descritivas do processo foram transformadas em algoritmos numéricos aplicando os métodos numéricos de Crank-Nicholson para as equações diferenciais parciais e Runge-Kutta de 4ª ordem para as equações diferenciais ordinárias. O programa foi desenvolvido em linguagem Turbo-Pascal, para calcular a distribuição de concentração de cephalosporin na coluna, fase líquida e fase sólida, com o tempo, usando as equações numéricas. Verificou-se as influências dos parâmetros cinéticos e operacionais na eficiência da coluna, através de um estudo paramétrico, onde observou-se que a porosidade do leito, concentração da cephalosporin e diâmetro da coluna são os parâmetros de maior sensibilidade. Por outro lado, parâmetros como Qm (capacidade máxima de adsorção), KI e K2 (constantes cinéticas de adsorção) devem ser otimizados previamente, através da escolha do adsorvente e condições de adsorção adequadas. Verificou-se que o comprimento da coluna e a velocidade superficial, quando incrementados, melhoram a eficiência da coluna. Foi verificado que a dispersão axial, é desprezível e que o aumento tanto da difusividade efetiva como do coeficiente de transferência de massa, melhoram a eficiência do processo. Demonstrou-se igualmente que a coluna de adsorção de leito fixo apresenta considerável estabilidade, tendo em conta que nenhum parâmetro afeta significativamente a operação da coluna. Em outros termos, pode-se dizer que a eficiência do processo é relativamente pouco afetada dentro da amplitUde de alteração efetuada dos parâmetros. Com relação aos problemas de limitações do processo de adsorção dentro da coluna, observou-se que este é limitado pela transferência de massa interna, ou seja a difusão é a etapa limitante do processo. Finalmente a resina XAD-2 utilizada neste estudo apresenta uma baixa eficiência, sendo uma desvantagem de sua utilização na adsorção da cephalosporin C / Abstract: In the "cephalosporin C" production process, the purification is the second step, after the antibyotic been produced by Cephalosporium acremonium in submerged cultures. The purification is carried on in ionic exchange columns. In this work a mathematical model to describe the adsorption process is suggested. The model was obtained from a mass balance and kinetic equations for ionic exchange adsorption, previously determinated in XAD-2 resin. Resistance to the internal and external mass transfer and axial dispersion were also considered in the model. The analytic equations to describe the process were transformed to numeric algorithms using Crank-Nicholson method for the partial differential equations and the 4th order Runge - Kutta method for ordinary differential equations. The computer program was developed using Turbo Pascal language to calculate the distribution of cephalosporin in the column as a time function, both in the liquid phase and in the solid phase. The influence of kinetics and operation parameters in the column efficiency was verified by means of a parametric study. It was observed that the main parameters were the bed porosity, the cephalosporin concentration, and the column diameter. On the other hand, some parameters as Qm (maximum capacity of adsorption), Kl and K2 (kinetics constants of adsorption) must be previously optimized in terms of adsorbent selection and appropriated adsorption conditions. It was also verified that the increase in the column length and the superficial velocity intrances the column efficiency. lt was demonstrated that the fixed bed adsorption column is stable considering that there is no critical parameter for the column operation. It was verified that the axial dispersion is not significant, and the increase both in the effective diffusivity and in the mass transfer coefficient gives a better process efficiency. It was observed that the adsorption process limitation in the column is caused by internal mass transfer, that is the diffusion is the process critical step. Finally, the XAD-2 resin used in this work show low efficiency. Which is a disadvantage in the cephalosporin C adsorption process / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Produção, purificação, caracterização bioquimica e aplicações da lipase de Alcaligenes sp.Sousa Neto, Roseli de 23 October 1996 (has links)
Orientador: Glaucia M. Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T18:50:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1996 / Resumo: Quinhentas e cinquenta linhagens de microrganismos foram isolados do solo, frutas, resíduos industriais e testados quanto à capacidade de hidrolisar glicerídeos em meio alcalino. Cinco linhagens de bactérias foram selecionadas como produtoras de lipase alcalina. Entre elas, uma linhagem identificada como Alcaligenes sp., apresentou alta produção de lipase alcalina em meio de cultivo composto por: 2% de farinha de soja torrada, 1% farinha de trigo, 0,5% de K2HPO4, 1 % de água de maceração de milho (com steep liquor) e 0,2% de Na2CO3. A enzima lipolítica de Alcaligenes sp. hidrolisou as ligações éster de triglicerídeos insolúveis em água, podendo assim, ser classificada como lipase (Glicerol Éster Hidrolase E.C.3.1.1.3). Estudou-se a produção da lipase extracelular pela linhagem selecionada, a caracterização da enzima no estado bruto e a purificação através de fracionamento com sulfato de amônio e cromatografia em coluna DEAE- Sephadex A-50. Na purificação das proteínas, foram detectadas 2 frações com atividade de lipase, sendo denominadas de frações I e II. As frações foram coletadas e concentradas em membrana de ultrafiltração. A fração I apresentou atividade ótima. em pH 8 a 40°C. A fração II apresentou atividade ótima em pH 9 a 45°C. A presença de MgSO4 e CaCl2 provocaram um aumento da atividade enzimática das duas frações, por outro lado, ZnSO4 e FeSO4 inibiram moderadamente a atividade enzimática de ambas frações. Os reagentes cisteína e f3-mercaptoetanol inibiram significativamente a atividade enzimática das frações I e II. A esterificação de ácido graxo e glicerol pela lipase bruta de Alcaligenes sp. foi examinada e verificou-se que a enzima esterificou apenas 34% após 48 horas de incubação. A lipase bruta de Alcaligenes sp. mostrou-se estável na presença de detergentes e protease a pH 9. / Abstract: The screening of alkaline lipase of producing microorganisms was performed using 550 strains of microorganisms wich were isolated from samples of soil, fruits and industrial residues. It was found that five strains of bacteria produced high activity of extracellular lipase and one of them produced exceptionally high alkaline lipase activity. This strain was identified as Alcaligenes sp. The medium for lipase production was composed of 2% roasted soybean meal, 1 % wheat meal, 0,5% K2HP04, 1 % of com steep liquor and 0,2% Na2C03. Maximum enzyme activity with olive oil as substrate was observed at pH 9,0 at 45°C. The enzyme extract was purified by fractionation with ammonium sulfate and DEAE Sephadex A-50 column chromatography. In the elution between 0,lM and 0,3M of NaCI, two active fractions were separately, collected, concentrated by ultrafiltration on membrane and characterized. It was observed that optimum pH activity for the fraction I was 8,0 at 40°C with olive oil as substrate. The optimum pH activity for the fraction II was 9,0 at 45°C with olive oil as substrate. The effects of various metal ions and other reagentes at the final concentration of 1 mM on the lipase activity were studied. The fractions I and II were inhibited by ZnS04 and FeS04, on other hand CaCl2 and MgS04 increased the activity. Both fractions were inhibited by f3- mercaptoethanol and cysteine. The enzimatic esterification using oleic acid and glycerol by lipase from Alcaligenes sp was examined. It was found that the reaction system esterified only 34% after 48 hours of reaction time. The lipase from Alcaligenes sp was estable on detergents and protease systems / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Influencia do uso de carvão ativado em po no pre-tratamento de aguas de abastecimentoStahl, Nilson Sergio Peres, 1958- 14 November 1997 (has links)
Orientador: Ruben Bresaola Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Civil / Made available in DSpace on 2018-07-23T00:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1997 / Resumo: : A utilização do carvão ativado em pó (CAP) em algumas estações de tratamento de águas de abastecimento, principalmente em determinadas regiões do Brasil, tem ocorrido, sem que qualquer acompanhamento da variação da qualidade final da mesma, tenha, realmente, acontecido devido a essa tecnologia aplicada. Deste modo foi objetivo deste trabalho, estudos sobre a influência do uso do CAP, no tratamento de águas de abastecimento oriundas de um manancial, sanitariamente desprotegido, que abastece uma grande parte da "Região Metropolitana" de Campinas, SP, Brasil. Foi desenvolvida investigação experimental da influência do pré tratamento de águas de mananciais superficiais, com o uso do CAP em diferentes dosagens, bem como em relação a diferentes tempos de detenção. CAP oriundos de diferentes fornecedores foram utilizados durante o desenvolvimento do trabalho, apresentando resultados bastante diferenciados. Foram obtidos diagramas de coagulação no mecanismo de varredura, para a determinação das melhores faixas de operação, para o processo seguinte ao de aplicação do CAP. Foram estudados quesitos relativos à remoção de turbidez, cor parente, variação de valores de pH, de sais de ferro e manganês total, bem como de carbono orgânico total (COT). Os resultados obtidos puderam mostrar a importância dos diagramas de coagulação, quando se trata da aplicação do CAP em ETAs do tipo convencionais, bem como a importância da fonte de fornecimento do carvão ativado no tocante às características física~ e propriedades de adsorção. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The use of powdered activated carbon (PAC) in some Brazilian plants has happened without any accompaniment in the variation of the final water quality, as a result of this tecnology. This way, the objective of this work is to study the PAC influence on the water treatment supply from sanitary umprotected sources that provide a large part of the Campinas 'Metropolitan Region', SP, Brazil. An experimental investigation was developed about the influence of the use of PAC on the superficial water supply pretreatment, in different dosages and residence times, as well. PAC from different manufactures were used during the work, presenting different results. Coagulation diagrams were gotten in the 'sweep coagulation' in order to get the best operation zone for the next process of PAC application. Points on turbity and color removal, pH values variation, iron and manganese salts, and total organic carbon (TOC) as well, were investigated. The investigation results show the importance of using the coagulation diagram in the PAC application in convencional plants, as weIl the PAC sources, concerning at its fisical characteristics and adsorption proprierties. The work outstands the necessity of making the phisical, adsorption, chemical and phisiochemical tests before the PAC application. Afier filtration by a ' / Mestrado / Mestre em Engenharia Civil
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Estudo do potencial da tecnica de fusão por feixe de eletrons para a purificação de slicio grau metalurgicoBraga, Adriana Franco Bueno 19 December 1997 (has links)
Orientador: Paulo Roberto Mei / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-23T14:40:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Braga_AdrianaFrancoBueno_D.pdf: 19574912 bytes, checksum: b4d7439ea0ae999750ad2ccb3f9d2e3b (MD5)
Previous issue date: 1997 / Resumo: O Brasil é o segundo maior produtor mundial de silício grau metalúrgico (Si-GM). Este material é destinado à indústria metalúrgica (ligas de alumínio, por exemplo) e química ( produção de silicone e como material de partida para a produção de dispositivos fotovoltaicos ). O mercado de células fotovoltaicas tem crescido a uma taxa anual de 15 a 20% e o emprego de silício policristalino para esse fim cresceu 300% nos últimos 10 anos Neste trabalho Si-GM lixiviado (99,97% em massa) foi purificado em um forno de fusão por feixe de elétrons sob 10-3 Pa. Foram empregadas condições variadas de potência do feixe e tempo de incidência do mesmo sobre a massa liquida. Os resultados de análise química mostraram que o processo remove C. O, Al, P, Ca. Fe, Ti, V, B. Até então a literatura indicava que este tipo de processo não removia B. Fe e Ti. A incidência de um feixe com 16 kW por 20 minutos na massa líquida, permitiu obter Si 99,999% de pureza (em massa), com resistividade elétrica de 0,6 O.cm, indicando ser um silício adequado para a fabricação de células solares / Abstract: Brazil is the second world largest producer of metallurgical grade silicon (MG-Si). This material is destined to the metallurgical industry (aluminum alloys, for example) and chemistry (production of silicones and as raw material for the production of photovotaic devices ). The market of photovoltaic cells has been growing to at an annual rate from 15 to 20% and the usage of polycrystalline silicon for that purpose has grown 300% in the last 10 years. In this work leached MG-Si (99,97% in mass) was purified in an electron beam furnace under 10-3 Pa. Different conditions of the beam power and time of incidence of the beam on the liquid mass were applied. The results of chemical analysis showed that the process removes C, O, Al, P, Ca, Fe, Ti. V, B. Until now the literature indicated that this process didn't remove B, Fe and Ti. The incidence of a 16 kW beam for 20 minutes in the liquid mass, allowed to obtain Si 99,999% of purity (in mass), with electrical resistivity of 0.6 O.cm, indicating to be a silicon suitable for the production of solar cells / Doutorado / Materiais e Processos de Fabricação / Doutor em Engenharia Mecânica
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Purificação e caracterização bioquimica da polifenoloxidase (PPO)em fruto da anonacea Pinha (Annona squamosa L.)Lima, Eliza Dorotea Pozzobon de Albuquerque 24 July 2018 (has links)
Orientador: Glaucia Maria Pastore / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-24T19:30:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1999 / Resumo: As enzimas polifenoloxidases (PPO) são amplamente distribuídas na natureza, sendo primeiramente relacionadas com o escurecimento enzimático dos vegetais "in natura", ocasionando perda da cor dos produtos de frutas e hortaliças processados e ou congelados, diminuição do valor nutricional, modificando as propriedades organolépticas, resultando na maioria dos casos em produtos com aparência ruim, os quais são rejeitados pelos consumidores. Por outro lado, a PPO tem papel importante no desenvolvimento do sabor e cor dos alimentos como por exemplo do chá preto, diminuição do amargor e adstringência dos produtos do cacau e formação de aldeídos de aminoácidos. o objetivo do presente trabalho foi extrair, purificar e estudar as características bioquímicas da PPO (EC 1.10.3.2) de polpas de pinhas maduras (Annona squamosa L.), com a finalidade de obter informações necessárias à sua conservação com melhor qualidade organoléptica, bem como estudar a utilização da enzima no processamento de alimentos. O pH ótimo de atividade encontrado para a PPO parcialmente purificada foi 6,5 e para a enzima purificada 7,0, com pH de estabilidade entre 6,5 e 7,5. A temperatura ótima de atividade para a enzima parcialmente purificada e purificada foi 20°C. A enzima purificada apresentou rápida inativação em temperaturas acima de 50°C, quando incubada por 30 minutos, utilizando catecol como substrato. A PPO foi purificada 411 (Fração I) e 118 (Fração TI) vezes após cromatografia em coluna de troca iódica em DEAE-Toyopearl650M e 566 vezes em coluna de Toyopearl HW 5 5F. A enzima da fração mais ativa foi caracterizada bioquimicamente. A atividade enzimática, tanto da PPO parcialmente purificada como purificada, foi fortemente inibida pelos reagentes químicos glutationa, (3mercaptoetanol, L-cisteína, ácido ascórbico e metabissulfito de sódio e com menor intensidade para KCN e tiouréia nas concentrações de 1,5, 5,0 e 10,0 mM em relação ao volume final da mistura de reação, na temperatura de 20°C. Pouca inibição foi constatada com KCI, NaCI, ácido cítrico e EDTA nestas mesmas concentrações. No estudo comparativo entre tratamentos de inibição da PPO parcialmente purificada e purificada com concentrações de acordo com as permitidas pela legislação, o tratamento com ácido ascórbico 10mM e temperatura de 70°C durante dois minutos foi muito eficaz e adequado para substituir o uso de sulfitos. As enzimas parcialmente purificada e purificada utilizaram os ortodifenóis como substrato, não sendo detectado nenhum nível de atividade para monofenóis. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima purificada apresentou valores de Km e). Vmax de 7,14 mM e 302,0 unidades/min/ml para catecol e 25,0 mM e 180,2 unidades/min/ml para L-dopa respectivamente, substratos que demonstraram maior especificidade. O peso molecular foi estimado em 90.000 daltons através de filtração em gel Sephadex G-200 e ao redor de 79.000 a 84.000 daltons através de SDS-PAGE. O teor de cobre da enzima purificada encontrado foi de llpprn/peso da amostra liofilizada. Quanto à composição de aminoácidos, a PPO apresentou maiores teores de ácido aspártico, ácido glutâmico e lisina e menores teores de metionina, arginina e tirosina, com ausência de cisteína. As enzimas parcialmente purificada e purificada apresentaram-se bastante estáveis quando armazenadas durante o período de 6 meses a -10°C / Abstract: Polyphenoloxidases (PPO) are widely distributed in nature, being first1y related to the enzymatic browning of vegetables "in natura", causing a loss of color in fruit products and processed or frozen vegetables, decrease in nutritional value and modification of the organoleptic properties, resulting in products with bad appearance, which are rejected by the consumers. On the other hand, PPO has an important role in the flavor and color of black tea, in the decrease of bittemess and astringency of cocoa products and in the formation of aldehydes from amino acids. The objective of the present work was to extract, purifyand study the biochemical characteristics ofthe PPO (EC 1.10.3.2) ofripe custard apple (Annona squamosa L.) pulps, with the purpose of obtaining the necessary information for the conservation of fruits pulps with better organoleptic properties, as well as to study the use of the enzyme in food processing. The optimum pH for activity of the partially purified PPO was 6.5 and for the purified enzyme 7.0, with pH stability between 6.5 and 7.5. The optimum temperature for activity of the partially purified and purified enzyme was 20°C. The purified enzyme showed fast inactivation at temperatures above 50°C, when incubated for 30 minutes with catechol substrate. PPO was purified 411 (Fraction I) and 118 (Fraction II) fold in an ion exchange column of DEAE-Toyopearl 650M, and 566 fold in a gel column of Toyopearl HW 55F. The enzyme of the most active fraction was characterized biochemically. The enzymatic activity of both the partially purified and purified PPO was strongly inhibited by the following reagents at concentrations of 1.5, 5.0 and 10. O mM with respect to the final volume of the reaction mixture, at a temperature of 20°C: glutathione, l3-mercaptoethanol, L-cysteine, ascorbic acid and sodium metabisulfite, and to a lesser extent by KCN and thiourea. Little inhibition was verified by KCI, NaCI, citric acid and EDTA. In a comparative study amongst the inhibition treatments for the partially purified and purified PPO, with concentrations in accordance with the limits permitted by the legislation, the treatment with 10mM ascorbic acid + temperature of 70°C for two minutes was effective and adequate to substitute the use of S02. The partially purified and purified enzyme used the 0diphenols as substrates and no activity towards monophenols was detected. With respect to the kinetic parameters, the purified enzyme presented values for Km and Vmax of 7.14 mM and 302.0 units/min/ml for catechol and 25.0 mM and 180.2 units/min/ml for L-dopa respectively, substrates which demonstrated greater specificity. The molecular weight was estimated as 90.000 daltons using gel filtration on Sephadex G-200 and about 79.000 to 84.000 daltons on SDS-PAGE. In the analysis of copper, the purified enzyme gave a value of l1ppm by weight ofthe liofilized sample. The amino acid composition of the custard apple fruit PPO, presented greater amounts of aspartic acid, glutamic acid and lysine and smaller amounts of methionine, arginine and tyrosine, with an absence of cysteine. Partially purified and purified PPO was stable during the period of 6 months of storage at -10°C / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
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Treonil-TRNA sintetase de germen de trigo : purificação e propriedades cineticasRigobello, Marilda 29 April 1991 (has links)
Orientador: Hiroshi Aoyama / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1991 / Resumo: As aminoacil tRNA sintetases são enzimas que catalisam o primeiro passo da síntese de proteínas, ou seja, a formação do aminoáciI -tRNA. São usados como substratos da reação o L-aminoácido, ATP e o tRNA específico para o referido aminoácido. O íon magnésio participa como estabilizador dos fosfatos carregados negativamente. O aminoacil - tRNA é o prinncipaI produto da reação, sendo também liberada uma molécula de AMP e uma de pirofosfato inorgânico. Neste trabalho a treonil-tRNA sintetase foi purificada de germen de trigo através de centrifugações diferenciais, saturação com sulfato de amônio e cromatografias em DEAE-celulose, Fosfocelulose, Hidroxiapatita e Blue Sepharose CL 6B. Deste modo, foi obtida uma enzima purificada cerca de 180 vezes. Usando a reação de intercâmbio isotópico ATP-32PPi para determinação da atividade enzimática foram obtidas as condições ótimas de reação e os seguintes valores de KM aparente:...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Aminoacil - tRNA syntetases are enzymes that catalyse the first step of protein biosynthesis, the aminoacyl - tRNA formation. The substrates of the reaction are the L-aminoacid, ATP and tRNA, specific for this L-aminoacid. Magnesium ion parcipates as the cofactor of the reaction. The products of the reaction are aminoacyl - t.RNA, AMP and inorganic pyrophosphate. In this work, threonyl-t.RNA synthetase was purified from wheat germ through differential centrifugations, ammonium sulfate saturation and chromatographies in DEAE-cellulose. Phosphocallulose, Hydroxylapatite and Blue Sepharose CL 6B. An 180-fold purified enzyme was obtained. Using the ATP- 32PPi isotopic exchange reaction to determine the enzyme activity, it was obtained the optimal conditions of the reaction, and the apparent. KM values: ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas
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Purificação do acido latico atraves de extração liquido-liquidoPereira, Accacia Julia Guimarães 16 November 1991 (has links)
Orientador: Maria Angela de Almeida Meirelles Petenate / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T01:42:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1991 / Resumo: Com o objetivo de elucidar alguns aspectos da extração líquido-líquido como uma alternativa para purificação do ácido tático foi desenvolvi do o presente trabalho, onde foram analisados aspectos referentes & seleção de solventes, determinação experimental dos dados de equilíbrio e sua correlação através de modelos empíricos e termodinâmicos (NRTL e UNIQUAC); estudo da influencia de sais sobre o equilíbrio ternário bem como a simulação experimental (usando funis de separação) e digital de um extrator em contracorrente para o sistema selecionado. Considerando a seletividade favorável, pequena solubilidade e facilidade de separação entre as fases, viscosidade densidade, toxidez, inflamabilidade, custo disponibilidade e outros fatores pertinentes o álcool isoamílico foi o solvente selecionado para a purificação do ácido lático através da extração com solventes. Os dados de equilíbrio obtidos foram bem correlacionados tanto pelos modelos empíricos como pelas equações NRTL e UNIQUAC. O equilíbrio liquido-liquido, solubilidade mútua e os dados das linhas de amarração foram estudados a 25 °C para o sistema água - ácido lático - álcool isoamilico na presença de três sais. A adição de sais aumenta o coeficiente de distribuição e a seletividade. Os resultados quantitativos indicam o efeito de "salting-out" devido à presença dos sais em solução aquosa. A ordem do efeito de "salting-out" foi NaCl > CaCl > Na2SO4. Existe uma relação entre a concentração molar do sal e o efeito de "salting out".A simulação experimental da extração com o uso de funis saiu da separação mostrou que o alcool isoamilico e um solvente altamente seletivo para o ácido lático, eliminando efetivamente a lactose residual e a maior parte dos ácidos contaminantes. O programa desenvolvido para a simulação converge rapidamente fornecendo os perfis de vazão e composição da coluna desde que seja fornecida uma estimativa inicial adequada / Abstract: Liquid-liquid extraction was evaluated as an alternative method to lactic acid purification and different aspects related to solvent selection, experimental determination of equilibria data and its correlation through empirical and thermodynamical models CNRTL and UNIQUAO were studied. The influence of salts over the ternary equilibrium water-lactic acid-isoantyl alcohol were determined. The experimental C using separatory funnels, and computer simulation of a countercurrent extractor were performed. Due to the favorable selectivity low solubility, clear separation between phases viscosity, density, flammability, toxicity, cost, availability and other pertinent factors, isoamyl alcohol was selected as the apropriated solvent for the lactid acid extration. The equilibria data were well correlated by the empirical model and by the equations NRTL and UNIQUAC. Liquid-liquid equilibria with salts were studied at 25°C for the system water-lactic acid isoamyl alcohol in the presence of three salts. The salt addition increases the distribution coefficient and the selectivity. The quantitative results indicate the salting-out effect due to the presence of salt in the water solution. The order of salting-out effects seems to be NaCl > CaCl2 > Na2SO4. The experimental simulation with separatory funnels showed that isoamyl alcohol is an highly selective solvent for lactic acid, eliminating effectively lactose and a great part of the contaminant acids. The computer program developed for the digital simulation converges quickly and gives the column's rate and composition profiles provided that a good initial guess is given / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos
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Analise da eficiencia de extração em colunas de discos rotativos na purificação do acido laticoCoimbra, Jane Selia dos Reis 25 March 1991 (has links)
Orientadores: Antonio Jose de Almeida Meirelles, Elias Basile Tambourgi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:41:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1991 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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