A dor constitui uma experiência complexa, mediada por distintos sistemas de transmissão sendo integrados por diversos mecanismos neurais. Um dos modelos mais empregados para o estudo da dor neuropática é a secção nervosa periférica, a qual resulta em alterações neuroquímicas e neuroanatômicas em neurônios sensoriais primários e em seus territórios de projeção. Após a secção do nervo ciático, os mamíferos apresentam um aumento na expressão de genes precocemente expressos, como o c-Fos e o c-Jun, no corno dorsal da medula espinal. Animais não mamíferos, como os anfíbios, também vem sendo utilizados como modelos para os estudos dos mecanismos acerca da nocicepção. No presente estudo foi analisado o padrão de imunorreatividade à proteína c-Fos na medula espinal lombossacral e no gânglio da raiz dorsal (GRD) de rãs Rana catesbeiana em condições basais, bem como de rãs submetidas à manipulação e à secção do nervo ciático. Para isso foram utilizados animais adultos, de ambos os sexos, sendo que os mesmos foram sacrificados 3 dias após o procedimento cirúrgico. A técnica imunoistoquímica utilizada foi a do anticorpo não marcado de Sternberger (1979), sendo utilizado anticorpo primário do tipo policlonal, na concentração de 1:700. As alterações no padrão de imunorreatividade a esta proteína no GRD dos três grupos experimentais foram quantificadas através das técnicas de densitometria óptica e contagem neuronal. Para a quantificação da proteína c-Fos na medula espinal lombossacral dos 3 grupos experimentais, utilizou-se a técnica de western blot. Em GRD, a imunorreatividade foi mais pronunciada no citoplasma de neurônios de pequeno (10-20μm), médio (25-35μm), e grande 40-50μm) diâmetro dos 3 grupos experimentais. A manipulação e a secção do nervo ciático provocou aumento no número de núcleos imunorreativos de células de pequeno diâmetro. A densitometria óptica foi significativamente maior no citoplasma das células dos GRDs localizados ipsilateralmente quando comparada com aquela das células pertencentes aos GRDs localizados contralateralmente à lesão. Todavia, não houve diferenças estatisticamente significativa entre a imunorreatividade nuclear nos GRDs entre os 3 grupos experimentais. O número de células imunorreativas nestes gânglios não mostrou mudanças significativas nos 3 grupos experimentais. Na medula espinal, a imunorreatividade à proteína c-Fos ocorreu predominantemente em núcleos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, na banda mediolateral, na região ventral medial do corno ventral e nos funículos lateral e ventral medial. Os neurônios motores sempre foram imunorreativos. A manipulação e a secção do nervo ciático resultaram em um acréscimo no número de núcleos imunorreativos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, e banda mediolateral, sendo este aumento maior na região do campo terminal dorsal. As demais regiões não mostraram modificações significantes no padrão de imunorreatividade da proteína c-Fos. A expressão desta proteína não modificou significativamente nos 3 grupos experimentais. Estes resultados mostram que, em rãs, similar ao que ocorre em mamíferos, a ativação de fibras aferentes primárias ativam a proteína c-Fos. No entanto, diferente de mamíferos, esta proteína ocorre no citoplasma de células sensoriais. Assim, apesar das rãs constituírem excelentes modelos para o estudo do papel do c-Fos nos mecanismos da transmissão nociceptiva, os estudos futuros abordando esta questão deverão considerar esta particularidade das rãs.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-20T11:05:38Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 654304 bytes, checksum: 61b1fd69081c4ecaac9959eb87d545ca (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-20T11:05:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 654304 bytes, checksum: 61b1fd69081c4ecaac9959eb87d545ca (MD5) Previous issue date: 2004-03-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As doenças cardiovasculares são as causas mais comuns de morte nas sociedades ocidentais devido em grande parte ao seu padrão alimentar, existindo uma correlação positiva entre o consumo de carnes, tanto as brancas como as vermelhas, com os níveis de LDL-colesterol, o qual é considerado fator de risco para tais doenças. No presente estudo investigou-se, por meio de dois ensaios biológicos, se a carne de rã, com proteína considerada de alto valor biológico e sendo pobre em lipídios, poderia exercer efeito positivo nas proteínas séricas, no metabolismo lipídico e no processo de formação de placa aterosclerótica em animais sadios, diabéticos e hipercolesterolêmicos. Utilizou- se dietas AIN-93M semi-purificadas, porém com 20% de proteína derivada de carne de rã ou caseína. No primeiro ensaio, 45 ratos Wistar adultos foram divididos em grupos C (animais sadios recebendo dieta com caseína), R (animais sadios recebendo dieta com carne de rã), D (animais diabéticos recebendo dieta com caseína) e DR (animais diabéticos recebendo dieta com carne de rã), tratados durante 4 semanas. A carne de rã reduziu o colesterol total dos ratos não diabéticos, mas aumentou a glicemia nos diabéticos. As concentrações séricas de proteínas totais, albumina, triacilgliceróis, LDL e HDL-colesterol, como também de lipídios totais hepáticos, foram semelhantes entre os grupos. O segundo ensaio foi realizado com 40 camundongos Knock- out para apoE tratados durante 10 semanas com dieta normolipídica (4% de lipídio), de acordo com o padrão AIN-93M, ou hiperlipídica (acréscimo de 11% de gordura vegetal hidrogenada e 1% de colesterol), divididos nos grupos NC (animais recebendo dieta normolipídica com caseína), NR (animais recebendo dieta normolipídica com carne de rã), HC (animais recebendo dieta hiperlipídica com caseína) e HR (animais recebendo dieta hiperlipídica com carne de rã). Com a dieta normolipídica, a carne de rã aumentou excreção de lipídios nas fezes, colesterol total e proteínas totais séricas e desenvolveu lesão aterosclerótica mais avançada. Na dieta hiperlipídica com carne de rã também houve excreção aumentada de lipídios nas fezes, mas as concentrações séricas de colesterol total e proteínas totais, como também o desenvolvimento da lesão aterosclerótica, não diferiram entre os dois grupos. Não houve efeito da carne de rã nas concentrações de LDL-colesterol, triacilgliceróis, glicose, como também de lipídios totais hepáticos, tanto nas dietas normolipídicas quanto nas hiperlipídicas. Em conclusão, a carne de rã não demostrou ser benéfica na prevenção de doenças cardiovasculares em animais diabéticos e em camundongos hipercolesterolêmicos quando comparado à caseína. É necessário realização de estudos posteriores comparando o efeito da carne de rã com outros tipos de carnes, como também em outros modelos animais e em humanos. / Cardiovascular diseases are the most common causes of death in western societies largely due to its food habits, with a positive correlation between the consumption of meat, both white and red, with LDL-cholesterol levels, which is considered risk factor for such diseases. In the present study it was investigated, by two biological assays, whether frog meat, considered high biological value protein and low in lipids, could have positive effect on serum proteins, lipid metabolism and on the process of atherosclerotic plaque formation in healthy, diabetic and hypercholesterolemic animals. Semi-purified AIN-93M diets were used, with 20% of protein derived from frog meat or casein though. In the first assay, 45 adult Wistar mice were separated in the following groups C (healthy animals on diet with casein), R (healthy animals on diet with frog meat), D (diabetic animals on diet with casein) and DR (diabetic animals on diet with frog meat), treated for 4 weeks. Frog meat reduced non-diabetic mouse total cholesterol, but it increased glycemia in the diabetic ones. The concentration of total serum protein, albumin, triacylglycerol, LDL and HDL- cholesterol, as well as total hepatic lipid, were similar among the groups. The second assay was carried out with 40 apoE knockout mice treated for 10 weeks with normo (4%), according to AIN-93M standard, or hyperlipidic diet (with 11% hydrogenated vegetable fat and 1% cholesterol increase), separated in the following groups NC (animals on normolipidic diet with casein), NR (animals on normolipidic diet with frog meat), HC (animals on hyperlipidic diet with casein) and HR (animals on hyperlipidic diet with frog meat). Under normolipidic diet, the frog meat increased lipid excretion in the feces, total cholesterol and total serum proteins and it developed more advanced atherosclerotic lesion. Under hyperlipidic diet with frog meat there was also increase in lipid excretion in the feces, but the serum concentration of total cholesterol and total protein, as well as the development of atherosclerotic lesion did not differ between the two groups. There was no effect of frog meat on the concentrations of LDL- cholesterol, triacylglycerol, glucose, and total hepatic lipid, in both normo and hyperlipidic diets. In conclusion, frog meat was not shown to be beneficial in the prevention of cardiovascular diseases in diabetic animals and in hypercholesterolemic mice when compared to casein. It is necessary to accomplish further studies to compare the effect of frog meat with other types of meat, as well as using other animal models and humans. / Não foram encontrados o cpf do autor e o currículo lattes.

A dor constitui uma experiência complexa, mediada por distintos sistemas de transmissão sendo integrados por diversos mecanismos neurais. Um dos modelos mais empregados para o estudo da dor neuropática é a secção nervosa periférica, a qual resulta em alterações neuroquímicas e neuroanatômicas em neurônios sensoriais primários e em seus territórios de projeção. Após a secção do nervo ciático, os mamíferos apresentam um aumento na expressão de genes precocemente expressos, como o c-Fos e o c-Jun, no corno dorsal da medula espinal. Animais não mamíferos, como os anfíbios, também vem sendo utilizados como modelos para os estudos dos mecanismos acerca da nocicepção. No presente estudo foi analisado o padrão de imunorreatividade à proteína c-Fos na medula espinal lombossacral e no gânglio da raiz dorsal (GRD) de rãs Rana catesbeiana em condições basais, bem como de rãs submetidas à manipulação e à secção do nervo ciático. Para isso foram utilizados animais adultos, de ambos os sexos, sendo que os mesmos foram sacrificados 3 dias após o procedimento cirúrgico. A técnica imunoistoquímica utilizada foi a do anticorpo não marcado de Sternberger (1979), sendo utilizado anticorpo primário do tipo policlonal, na concentração de 1:700. As alterações no padrão de imunorreatividade a esta proteína no GRD dos três grupos experimentais foram quantificadas através das técnicas de densitometria óptica e contagem neuronal. Para a quantificação da proteína c-Fos na medula espinal lombossacral dos 3 grupos experimentais, utilizou-se a técnica de western blot. Em GRD, a imunorreatividade foi mais pronunciada no citoplasma de neurônios de pequeno (10-20μm), médio (25-35μm), e grande 40-50μm) diâmetro dos 3 grupos experimentais. A manipulação e a secção do nervo ciático provocou aumento no número de núcleos imunorreativos de células de pequeno diâmetro. A densitometria óptica foi significativamente maior no citoplasma das células dos GRDs localizados ipsilateralmente quando comparada com aquela das células pertencentes aos GRDs localizados contralateralmente à lesão. Todavia, não houve diferenças estatisticamente significativa entre a imunorreatividade nuclear nos GRDs entre os 3 grupos experimentais. O número de células imunorreativas nestes gânglios não mostrou mudanças significativas nos 3 grupos experimentais. Na medula espinal, a imunorreatividade à proteína c-Fos ocorreu predominantemente em núcleos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, na banda mediolateral, na região ventral medial do corno ventral e nos funículos lateral e ventral medial. Os neurônios motores sempre foram imunorreativos. A manipulação e a secção do nervo ciático resultaram em um acréscimo no número de núcleos imunorreativos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, e banda mediolateral, sendo este aumento maior na região do campo terminal dorsal. As demais regiões não mostraram modificações significantes no padrão de imunorreatividade da proteína c-Fos. A expressão desta proteína não modificou significativamente nos 3 grupos experimentais. Estes resultados mostram que, em rãs, similar ao que ocorre em mamíferos, a ativação de fibras aferentes primárias ativam a proteína c-Fos. No entanto, diferente de mamíferos, esta proteína ocorre no citoplasma de células sensoriais. Assim, apesar das rãs constituírem excelentes modelos para o estudo do papel do c-Fos nos mecanismos da transmissão nociceptiva, os estudos futuros abordando esta questão deverão considerar esta particularidade das rãs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-17Bitstream added on 2014-06-13T20:35:26Z : No. of bitstreams: 1 alfani_r_me_botfmvz.pdf: 1580787 bytes, checksum: 9d1168d0864b69db5108b386caa718f8 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência de Salmonella spp. nos vários pontos do fluxograma do abate de rãs (Rana catesbeiana – Rã Touro), desde os currais de espera até o produto final, bem como nas vísceras não comestíveis e no fígado. Das 120 amostras analisadas ao longo do abate (15 amostras por ponto / 8 pontos de colheita), 39 (32,5%) mostraram-se positivas, independentemente do ponto de colheita. Em relação a estes, obtiveram-se os seguintes resultados: 26,7% de positividade na água dos currais de espera, 13,3% após a insensibilização e após a sangria, 26,7% após a retirada da pele, 46,7% após a evisceração, 40% no produto final não embalado e nas vísceras, e 53,3% para o fígado. Conclui-se que a carne de rã, produto final, obtida nas condições estudadas, pode representar um sério risco à saúde pública, como veículo de Salmonella spp. A contaminação detectada nos vários pontos de colheita se dá de forma gradativa e contínua ao decorrer do abate. Das etapas estudadas, a evisceração é a mais crítica em relação à contaminação por Salmonella spp. É necessária a implementação de pontos críticos de controle no processo de abate e, consequentemente, ações corretivas para minimizar tais contaminações. / The study aimed to assess the occurrence of Salmonella spp. in several parts of the flowchart of the slaughter of frogs (Rana catesbeiana - Bullfrog), since the waiting pens until the final product, as well as in viscera not edible and in the liver. Of the 120 samples analyzed over the slaughter (15 samples per point / 8 points of collection), 39 (32,5%) have proved positive, regardless of the point of harvest. For these, obtained the following results: 26,7% of positivity in the water of waiting pens, 13,3% after stunning and after the bleeding, 26,7% after the withdrawal of skin, 46,7% after evisceration, 40% in the final product not packed and for the viscera, and 53,3% for the liver. It follows that the meat of frog, the final product, obtained under the conditions studied, may represent a serious risk to public health, as a vehicle of Salmonella spp. The contamination detected in the various points of collection occurs in a gradual and continuous course of the slaughter. In stages studied, the evisceration is the most critical point of the contamination by Salmonella spp. It’s necessary establish critical points of control in the process of slaughter and, therefore, correct actions to minimize such contamination.

A dor constitui uma experiência complexa, mediada por distintos sistemas de transmissão sendo integrados por diversos mecanismos neurais. Um dos modelos mais empregados para o estudo da dor neuropática é a secção nervosa periférica, a qual resulta em alterações neuroquímicas e neuroanatômicas em neurônios sensoriais primários e em seus territórios de projeção. Após a secção do nervo ciático, os mamíferos apresentam um aumento na expressão de genes precocemente expressos, como o c-Fos e o c-Jun, no corno dorsal da medula espinal. Animais não mamíferos, como os anfíbios, também vem sendo utilizados como modelos para os estudos dos mecanismos acerca da nocicepção. No presente estudo foi analisado o padrão de imunorreatividade à proteína c-Fos na medula espinal lombossacral e no gânglio da raiz dorsal (GRD) de rãs Rana catesbeiana em condições basais, bem como de rãs submetidas à manipulação e à secção do nervo ciático. Para isso foram utilizados animais adultos, de ambos os sexos, sendo que os mesmos foram sacrificados 3 dias após o procedimento cirúrgico. A técnica imunoistoquímica utilizada foi a do anticorpo não marcado de Sternberger (1979), sendo utilizado anticorpo primário do tipo policlonal, na concentração de 1:700. As alterações no padrão de imunorreatividade a esta proteína no GRD dos três grupos experimentais foram quantificadas através das técnicas de densitometria óptica e contagem neuronal. Para a quantificação da proteína c-Fos na medula espinal lombossacral dos 3 grupos experimentais, utilizou-se a técnica de western blot. Em GRD, a imunorreatividade foi mais pronunciada no citoplasma de neurônios de pequeno (10-20μm), médio (25-35μm), e grande 40-50μm) diâmetro dos 3 grupos experimentais. A manipulação e a secção do nervo ciático provocou aumento no número de núcleos imunorreativos de células de pequeno diâmetro. A densitometria óptica foi significativamente maior no citoplasma das células dos GRDs localizados ipsilateralmente quando comparada com aquela das células pertencentes aos GRDs localizados contralateralmente à lesão. Todavia, não houve diferenças estatisticamente significativa entre a imunorreatividade nuclear nos GRDs entre os 3 grupos experimentais. O número de células imunorreativas nestes gânglios não mostrou mudanças significativas nos 3 grupos experimentais. Na medula espinal, a imunorreatividade à proteína c-Fos ocorreu predominantemente em núcleos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, na banda mediolateral, na região ventral medial do corno ventral e nos funículos lateral e ventral medial. Os neurônios motores sempre foram imunorreativos. A manipulação e a secção do nervo ciático resultaram em um acréscimo no número de núcleos imunorreativos localizados nos campos terminais dorsal e ventral, e banda mediolateral, sendo este aumento maior na região do campo terminal dorsal. As demais regiões não mostraram modificações significantes no padrão de imunorreatividade da proteína c-Fos. A expressão desta proteína não modificou significativamente nos 3 grupos experimentais. Estes resultados mostram que, em rãs, similar ao que ocorre em mamíferos, a ativação de fibras aferentes primárias ativam a proteína c-Fos. No entanto, diferente de mamíferos, esta proteína ocorre no citoplasma de células sensoriais. Assim, apesar das rãs constituírem excelentes modelos para o estudo do papel do c-Fos nos mecanismos da transmissão nociceptiva, os estudos futuros abordando esta questão deverão considerar esta particularidade das rãs.

Current municipal wastewater treatment plants (MWWTP) technologies are insufficiently removing emerging contaminants of concern. These emerging contaminants are an issue as many are known endocrine disrupting compounds (EDCs). EDCs are contaminants that can have severe and irreversible impacts on highly conserved endocrine systems that are critical during developmental periods in vertebrates as well as during adult life. Many EDCs have non-monotonic dose-response curves yet they are not often tested at low, environmentally relevant concentrations. EDC research to date has focused heavily on xenoestrogenic compounds whereas thyroid hormone (TH) disruption has been largely overlooked. TH is conserved in all vertebrates and plays crucial roles in neural development, basal metabolism, and thermoregulation. TH is comprised of thyroxine (T4), often known as the transport form of TH, and triiodothyronine (T3), the more bioactive form of TH. A TH spike occurs in the perinatal period of humans, and when disrupted, this spike can cause severe developmental defects. An analogous, but perhaps more overt, TH spike occurs in amphibians. TH is the sole hormone that drives amphibian metamorphosis, thus providing an excellent model for TH action. Our lab has previously developed the cultured tailfin (C-fin) assay, which uses biopsies from premetamorphic Rana catesbeiana tadpole tailfins cultured in the presence of an exogenous chemical of concern to assess perturbations to TH- and stress-responsive gene transcript levels by QPCR. This thesis uses the C-fin assay to assess the efficacy of removal of biological TH- and stress-altering activity in conventional municipal wastewater treatment systems. We first assess the successive levels of a full-scale conventional activated sludge (CAS) MWWTP in its ability to reduce perturbations of mRNA transcript levels of the critical TH receptors alpha (thra) and beta (thrb), and stress responsive gene transcripts superoxide dismutase (sod), catalase (cat) and heat shock protein 30 (hsp30). Secondary treatment of wastewater effluents removes cellular stress perturbations when compared to influents, but thr disruptions remain after conventional secondary wastewater treatment. We then assess three pilot-sized conventional secondary MWWTP configurations run at two operational conditions. The C-fin assay results suggest that the current understanding of operational conditions and the efficiency of complex MWWTP configurations is not clear-cut when assessed by biological endpoints such as the transcript abundance perturbations in the C-fin assay. Finally, the C-fin assay is used to investigate transcript profiles of genes of interest when the tissues are treated with the endogenous hormones T3, T4, and estradiol (E2). Our results indicate that T4 acts as more than solely a T3-prohormone and that gene expression levels in response to the two different forms of TH can be T3 or T4 specific. E2 effects, although implicated in altering TH-mediated responses in other contexts, do not affect TH-responsive gene transcripts in the C-fin. The data presented use the novel C-fin assay to challenge and advance the currently accepted views of TH-action, as well as develop necessary yet practical biological knowledge for management of emerging contaminant release from MWWTPs. / Graduate / 0383 / 0768 / 0307 / polaw@uvic.ca

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-24T10:28:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1292318 bytes, checksum: adf0d8ebb06a97579d24ee6101cf8ddf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-24T10:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1292318 bytes, checksum: adf0d8ebb06a97579d24ee6101cf8ddf (MD5) Previous issue date: 1996-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram estudados dois sistemas de evisceração de rãs (tradicional e alternativo), com o objetivo de verificar sua influência na qualidade das carcaças, estocadas sob refrigeração (4±1oC) até 15 dias, ou sob congelamento (-18±2oC), durante 180 dias. Periodicamente (0, 2, 4, 7, 10 e 15 dias, no caso da refrigeração, e 0, 30, 60, 90, 120, 150 e 180 dias, no caso do congelamento) foram realizadas análises microbiológicas (contagens de mesófilos, psicrotróficos, fungos e leveduras e NMP de coliformes totais e fecais), físico-químicas (pH, NNP, BVT e TBA) e sensorial (limosidade, textura, odor, brilho e cor). Os resultados das análises mostraram que o índice de BVT e as contagens de mesófilos e psicrotróficos foram os melhores indicadores das alterações, ocorridas no produto estocado sob refrigeração, o qual foi considerado apto para consumo até o oitavo dia. O odor, seguido da cor e da textura, foi o melhor atributo sensorial para se determinar a qualidade da carne refrigerada. Na carne de rã congelada, até 180 dias de estocagem, não foram detectadas alterações físico-químicas, microbiológicas ou sensoriais, que prejudicassem sua qualidade. Nenhum dos atributos sensoriais mostrou um comportamento, que permite ser utilizado como índice de qualiade de carne congelada. O sistema de evisceração alternativo mostrou-se superior ao tradicional, por apresentar menor contaminação com coliformes e por permitir menos operários na linha de abate. Sugere-se, portanto, a utilização do sistema de evisceração alternativo para o abate de rãs. / Two frog evisceration systems (traditional and alternative) were tested to verify their influence upon the quality of carcasses stored under refrigeration (4±1oC) or freezing (-18±2oC) for 15 or 180 days, respectively. Microbiological (mesophilic, psycrotrophic, molds and yeasts counts, MPN of total and fecal coliforms), physical-chemical (pH, TVB, NPN, TBA), and sensory (slime, texture, odour, brightness and color) evaluations were made periodically (0, 2, 4, 7, 10 and 15 days under refrigeration, and 0, 30, 60, 90, 120, 150 and 180 days, under freezing). The results showed that, TVB, mesophilic and psycrotrophic counts were the best indicators of the changes occuring on the product stored under refrigeration. Refrigerated frog meat was considered fit for consumption up to the eighth day of storage. Odour, followed by color and texture, was the best sensory attribute determining the quality of the refrigerated frog meat. On frozen frog meat, stored up to 180 days, no physical-chemical, microbiological or sensory alterations were detected that impair its quality. No sensory attribute showed a behavior that allow their utilization as a quality indicator of frozen frog meat. The alternative evisceration system showed to be superior than the traditional since it lead to less contamination with coliform and because it allows less workers in the slaughter line. It is sugested that the alternative evisceration system must be used for slaughtering frogs. / Não foram localizados o cpf do autor e o currículo lattes.

Orientador: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Vera Lucia Mores Rall / Banca: Luciano dos Santos Bersot / Resumo: O trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência de Salmonella spp. nos vários pontos do fluxograma do abate de rãs (Rana catesbeiana - Rã Touro), desde os currais de espera até o produto final, bem como nas vísceras não comestíveis e no fígado. Das 120 amostras analisadas ao longo do abate (15 amostras por ponto / 8 pontos de colheita), 39 (32,5%) mostraram-se positivas, independentemente do ponto de colheita. Em relação a estes, obtiveram-se os seguintes resultados: 26,7% de positividade na água dos currais de espera, 13,3% após a insensibilização e após a sangria, 26,7% após a retirada da pele, 46,7% após a evisceração, 40% no produto final não embalado e nas vísceras, e 53,3% para o fígado. Conclui-se que a carne de rã, produto final, obtida nas condições estudadas, pode representar um sério risco à saúde pública, como veículo de Salmonella spp. A contaminação detectada nos vários pontos de colheita se dá de forma gradativa e contínua ao decorrer do abate. Das etapas estudadas, a evisceração é a mais crítica em relação à contaminação por Salmonella spp. É necessária a implementação de pontos críticos de controle no processo de abate e, consequentemente, ações corretivas para minimizar tais contaminações. / Abstract: The study aimed to assess the occurrence of Salmonella spp. in several parts of the flowchart of the slaughter of frogs (Rana catesbeiana - Bullfrog), since the waiting pens until the final product, as well as in viscera not edible and in the liver. Of the 120 samples analyzed over the slaughter (15 samples per point / 8 points of collection), 39 (32,5%) have proved positive, regardless of the point of harvest. For these, obtained the following results: 26,7% of positivity in the water of waiting pens, 13,3% after stunning and after the bleeding, 26,7% after the withdrawal of skin, 46,7% after evisceration, 40% in the final product not packed and for the viscera, and 53,3% for the liver. It follows that the meat of frog, the final product, obtained under the conditions studied, may represent a serious risk to public health, as a vehicle of Salmonella spp. The contamination detected in the various points of collection occurs in a gradual and continuous course of the slaughter. In stages studied, the evisceration is the most critical point of the contamination by Salmonella spp. It's necessary establish critical points of control in the process of slaughter and, therefore, correct actions to minimize such contamination. / Mestre

Mosquitoes are considered to be the deadliest animals in the world due to the diseases they spread. Naturally, most research centers around anthropophilic disease vector mosquitoes such as Aedes aegypti or Anopheles gambiae. However, mosquitoes can feed on, and pose a threat to, more than humans. In fact, mosquitoes can specialize in feeding on a wide variety of hosts, including ectotherms such as amphibians and reptiles. Culex territans is a mosquito that feeds primarily on amphibians and reptiles and is known to transmit parasites to its hosts. However, little else is known about this mosquito. This work dives into the biology, physiology, and vector potential of this mosquito species to provide critical insights into understanding the evolution of feeding on endotherms as well as the importance of Cx. territans to amphibian health. The first study investigates activity patterns and feeding behaviors as well as the potential cues that may attract this mosquito to its hosts. We also compare transcriptomics and anatomy of the heads of three Culex species. The second study compares three Culex species' thermopreference and host-seeking to understand the effects of the differences of geographical distribution and preferred hosts. The last three studies determine the presence of ranaviruses, giant anuran trypanosomes, and the fungus Batrachochytrium dendrobatidis at Mountain Lake Biological Station and explore the potential role of Cx. territans in transmitting these pathogens. Overall, this work provides insights into the biology of Cx. territans and the implications it may have for understanding endotherm-feeding mosquitoes and amphibian disease epidemiology. / Doctor of Philosophy / We are all familiar with the annoying buzzing sound and itching bite of a mosquito. But mosquitoes are more than irritating: they are considered the deadliest animal in the world because of their ability to spread deadly diseases such as malaria and yellow fever to humans. However, not all mosquitoes bite humans. In fact, mosquitoes can feed on the blood of just about any animal, including worms. This work focuses on Culex territans, the northern frog-biting mosquito, which feeds mostly on the blood of amphibians, like frogs and toads. This fascinating mosquito species is present around the world, living in freshwater ponds alongside frogs, but we know very little about it. For example, how does a frog-biting mosquito find a frog host to bite? Once the mosquito bites, how is it able to feed on cold, thick blood through a tiny straw that makes up its mouthparts? While it is feeding, is it spreading diseases that could harm the frog? Because amphibians are experiencing extinctions worldwide, it is important to know if mosquitoes could be involved in their demise. These questions inspired this work to better understand the biology of Cx. territans and to shed light on the biology of other disease-spreading mosquitoes.

Thyroid hormones (THs) are important hormones involved in developmental processes, including foetal brain maturation. THs are also involved in the maintenance of homeostasis. One in three people in Canada are considered to have some form of thyroid disorder. One reason for the high level of thyroid disorders may be the increasing amount of anthropogenic chemicals released into the environment that affect normal hormone action. Amphibian metamorphosis is completely dependent on TH and provides a model to study such chemicals. This thesis uses the Rana catesbeiana tadpole as a model to study potential TH disrupting chemicals by developing a novel screening assay called the cultured tail fin biopsy assay, or the “C-fin” assay. The C-fin assay uses tail biopsies from premetamorphic tadpoles, Taylor-Kollros stage VI-VIII. The biopsies are cultured in serum-free media along with the test chemical for 48 hours. QPCR is used to measure the mRNA steady-state levels of selected gene transcripts. Two TH-responsive gene transcripts were measured: the up-regulated gene transcript, thyroid hormone receptor β (TRβ) and the down-regulated gene transcript, Rana larval keratin type I (RLKI). Heat-shock protein 30 (HSP30) and catalase (CAT) were used as indicators of cellular stress. Another model system used in this thesis is rat pituitary cells, or GH3 cells. QPCR was used to measure the mRNA steady-state levels of three TH-responsive genes growth hormone (GH), deiodinase I (DIOI), and prolactin (PRL); heat-shock protein 70 (HSP70) was used as an indicator of cellular stress. Nanoparticles, used in various consumer products, were one class of chemicals examined. Using the C-fin assay, nanosilver and quantum dots (QDs) caused perturbations in TH-signalling and also showed signs of cellular stress. There was no overt toxicity observed as was determined by the normalizer, house-keeping gene transcript, ribosomal protein L8. The GH3 cells also detected TH disrupting effects by both nanosilver and QDs; however, nanosilver did not appear to cause cellular stress whereas QDs did. Nitrate and nitrite, major waterway contaminants, were also examined and there were no TH-perturbations observed using the C-fin assay. Finally, two antimicrobials used in many consumer products, triclocarban (TCC), triclosan (TCS) and its metabolite, methyl-TCS (mTCS) were examined using both the C-fin assay and GH3 cells. Both the C-fin assay and the GH3 cells determined mTCS to be more potent than TCS in disrupting TH action. TCC also caused perturbations in TH-signalling as well as causing a significant amount of cellular stress. Overall the C-fin assay and the GH3 cells proved to be excellent models in studying the potential disruptors of the TH axis. The C-fin assay and GH3 cells detected novel TH disruptors and gave further insight into already known disruptors of the TH axis.