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Regulação populacional em Ithomiinae (Lep.: Nymphalidae) : ecologia da interação parasitoide x hospedeiro

Monteiro, Ricardo Ferreira 15 July 2018 (has links)
Orientador: Keith Spalding Brown Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T17:44:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_RicardoFerreira_M.pdf: 8030798 bytes, checksum: d821241580f3659896be627fcb6f6920 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: Este trabalho procurou analisar a influência do parasitismo na regulação de populações de quatro espécies da sub-família Ithomiinae (Lepidóptera ¿ Nymphalidae) no Horto Florestal de Sumaré, São Paulo. Foram feitas coletas mensais de imaturos de Mcclungia salonina, Mechanitis lysimnia, Mechanitis polymnia e Hypothyris ninonia, e verificadas as taxas de parasitismo, o número de adultos por hospedeiro, razão sexual e tempo de desenvolvimento dos parasitóides. O parasitismo de ovo exerceu pouca influência na regulação das espécies estudadas. Os parasitóides de ovo, Trichogramma semifumatum e Telenomus sp. n., apresentaram estratégias reprodutivas e alimentares distintas. O número de adultos de T. semifumatum emergidos por ovo parasitado de Mechanitis lysimnia foi significativamente maior do que nos ovos menores de Mcclungia salonina. A razão sexual nessas duas espécies de parasitóides foi semelhante, com cerca de 80% de fêmeas. O parasitismo larval foi também pequeno nos ithomiíneos, com exceção de Mcclungia salonina, espécie monófaga, que apresentou uma porcentagem de cerca de 73% de suas larvas parasitadas, quase exclusivamente pelo braconídeo Apanteles concinnus. É discutido a efetividade deste parasitóide em função de sua especialização e o hábito monófago de seu hospedeiro. A porcentagem de fêmeas nesse parasotóide foi de 63% e, como nos parasitóides de ovo, não mostrou nenhuma relação aparente com densidade de hospedeiros... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: An analysis was undertaken, of the importance of parasitism in population egulation of four species in the subfamily Ithomiinae (Lepidoptera-Nymphalidae) in the Horto Florestal of Sumaré, São Paulo. Intensity of parasitism, number of adult parasitoids per host, sex ratio and length of development time of the parasitoids were verified through monthly collections of immatures of Mcclungia salonina, Mechanitis lysimnia, Mechanitis polymnia, and Hypothyris ninonia. Egg parasitism was of limited importance in the regulation of the populations studied. The two egg parasites, trichogramma semifumatum and Telenomus n. sp., showed different reproductive and feeding strategies. The number of adults of T. semifumatum emerging from each parasitized egg of Mechanitis lysimnia was significantly greater than from the smaller eggs of Mcclungia salonina. The sex ratio was similar in both parasitoid species, with about 80% females. Larval parasitism was also smll in the ithmiines, with the exception of Mcclungia salonina, a monophagpus species, which showed about 73% of its larvae parasitized, almost exclusively by the braconid Apanteles concinnus. The effectiveness of this parasitoid is discussed with relation to its specialization and the monophagy of its host. Females made up 63% of the emerged Apanteles parasitoids, and as in the egg parasites this percentage showed no clear relationship to host density... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ciências Biológicas
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O papel da coevolução e do comportamento de seleção de recurso na arquitetura de redes de interações antagonistas

Von Hartenthal, Francisco Westphalen January 2015 (has links)
Orientadora : Profª Drª Sabrina B. Lino Araújo / Co-orientador : Profª. Drª. Isabela G. Varassin / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Conservação. Defesa: Curitiba, 19/06/2015 / Inclui referências : f. 47-54 / Resumo: O termo coevolução refere-se às mudanças evolutivas entre espécies que interagem e exercem pressões seletivas recíprocas. Diversos processos coevolutivos já foram descritos, mas o papel da coevolução na natureza continua sendo debatido. Uma das dificuldades para o estudo sobre coevolução vem da complexidade das interações em comunidades, com diferentes tipos e intensidades de relações ecológicas simultâneas. Obstáculo que vem sendo enfrentado com o uso da Teoria de Redes. O presente trabalho teve o objetivo principal de investigar a influência de processos coevolutivos na estrutura de redes de interações antagonistas, do tipo parasito-hospedeiro. Para isso, foi construído um modelo matemático baseado em indivíduos com interações por ajuste de fenótipos, que incorporou o comportamento de seleção de recurso pelos parasitos. Diversas combinações de intensidade de força de seleção pela interação antagonista sobre os parasitos (?) e sobre os hospedeiros (?) foram testadas em diferentes cenários de eficiência na seleção de recurso pelos parasitos. O modelo foi utilizado para simular interações entre pares, bem como em comunidades com 50 espécies em cada nível trófico. Os padrões de distribuição dos fenótipos dos indivíduos resultantes das interações entre pares foram analisados qualitativamente, como forma de verificação da dinâmica coevolutiva predominante. Os resultados das interações em comunidade foram acessados através do aninhamento (NODF), modularidade (QB), especialização (H2 ') e conectância (C) das redes. Um modelo nulo, sem coevolução e sem seleção de recurso pelos parasitos, foi usado para avaliar as redes do modelo principal. Nas interações entre pares, o modelo revelou um novo mecanismo coevolutivo antagonista, aqui chamado de padrão Assimétrico, resultante do efeito conjunto das intensidades de força de seleção pela interação sobre parasitos e hospedeiros e do comportamento de seleção de recurso pelos parasitos. Nas interações com várias espécies, sem o comportamento de seleção de recurso, interações com alta pressão de seleção antagonista deram origem a redes com estruturas equivalentes às de redes formadas por interações sem coevolução. Esse resultado foi visto também em cenários com possibilidade de seleção pelos parasitos. Portanto, a presença de coevolução não foi condição suficiente para alterar as propriedades das redes. Quando a coevolução e o comportamento de seleção de recurso alteravam a estrutura das redes, NODF e H2 ' tenderam a valores maiores do que o explicável pelo modelo nulo, QB e C a resultados menores. Apesar de condizente com o esperado para redes antagonistas, esse resultado não pôde ser diretamente relacionado ao aumento da força de seleção pela interação. Palavras-chave: Redes ecológicas. Antagonismo. Parasito-hospedeiro. Coevolução assimétrica. / Abstract: Coevolution means reciprocal evolutionary change between interacting species that impose selective strength on each other. Several coevolutionary processes are known, but the role of coevolution on natural systems is still debated. One of the major challenges for the study of coevolution comes from the complexity of interactions in communities with different types and strengths of simultaneous ecological relationships. The Network Theory is been used to face this challenge. The main goal for this work was to explore how coevolutionary processes affect the architecture of host-parasite networks. For that, a phenotype matching individualbased model (IBM) was built and the parasites' host-choice behavior was embedded on the model. Several combinations of antagonism selection strength on the parasites (?) and on the host (?) were tested in different scenarios of efficiency in host-choice by the parasites. The model also was used to simulate pairwise interactions. The pairwise interactions were qualitatively analyzed from their phenotype patterns. The networks properties were accessed by their nested (NODF), modularity (QB), specialization (H2 ') and connectance (C). A null model, with no coevolution and no host-choice behavior, was built to evaluate the main model. A new coevolutionary mechanism was revealed from the pairwise interactions, hereby named Asymmetric pattern, an outcome of the simultaneous effects due to the antagonistic selection strengths and the host-choice behavior. On the interactions among assemblages, with no choice behavior, strong antagonistic selection could result on networks equivalent to that formed with no coevolution. This outcome was also present in some scenarios with host-choice behavior. Therefore coevolution was not a sufficient condition to drive changes in the networks properties by itself. When coevolution and choice behavior together changed the network properties, NODF and H2 ' tended to high values, and QB and C to low values, than that obtained from the null model. Although expected for antagonistic networks, this outcome could not be related to the increase of selection strength. Keywords: Ecological networks. Antagonism. Host-parasite. Asymmetrical coevolution.
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Extensão da troca contínua de hospedeiros em Gyrodactylus Anisopharynx (Platyhelminthes, Monogenoidea, Gyrodactylidae) utilizando marcadores moleculares ISSR

Oliveira, Rodrigo Neves de 22 December 2011 (has links)
Resumo: A fim de testar a extensão em que ocorre a troca de hospedeiros em Gyrodactylus anisopharynx Popazoglo et Boeger, 2000 (Platyhelminthes, Monogenoidea, Gyrodactylidae), foram testadas duas hipóteses: nula: a troca de hospedeiro não ocorreria, esperando-se encontrar um agrupamento de indivíduos próximos genéticamente em infrapopulações, formando grupos familiares com alta taxa de endogamia; alternativa: a troca de hospedeiros seria constante, e grupos familiares de G. anisopharynx estariam distribuídos aleatoriamente entre diferentes infrapopulações. Treze infrapopulações, totalizando 82 indivíduos de G. anisopharynx, foram analisadas utilizando marcadores moleculares ISSR. O baixo valor de Fst encontrado (0,003) indica um alto fluxo gênico entre as infrapopulações, sugerindo que a troca de hospedeiros ocorre continuamente. Entretanto, o alto valor de Fis (0,8) sugere uma alta endogamia nessa população de parasitos, conforme sugerido pela hipótese “nula”. A análise de reconstrução de caráter ancestral mostrou que a distribuição de grupos de parasitos próximos genéticamente sobre os hospedeiros amostrados é aleatória. Entretanto, esta distribuição está bastante próxima ao limite inferior da distribuição ao acaso. Índices de distribuição calculados para quatorze grupos familiares de G. anisopharynx amostrados também indicam um padrão de distribuição aleatório dos mesmos. Os resultados apresentados parecem indicar uma condição intermediária entre as hipóteses nula e alternativa, o que se esperaria considerando o tipo de reprodução (viviparidade) de G. anysopharynx. É possível encontrar, em um determinado momento, animais genealogicamente próximos em uma única infrapopulação, sendo um evento determinístico e esperado enquanto a transmissão para outros hospedeiros, um evento estocástico, reduz a probabilidade de encontrar esses parasitos em um mesmo hospedeiro. A troca contínua de hospedeiros (transmissão contínua) é um processo comum em G. anisopharynx e provavelmente em todas as espécies do clado de girodactilídeos vivíparos e seu padrão, inferido nesse estudo, é consistente com os pressupostos que fundamentam a hipótese de diversificação de girodactilídeos vivíparos de Boeger et al. (2003). alavras-chave: Gyrodactylus anisopharynx, troca de hospedeiro, infrapopulação, ISSR
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Microhimenopteros parasitoides de Cochliomyia hominivorax Coq. (Diptera: Calliphoridae) : ocorrencia e aspectos da relação hospede-hospedeiro

Silveira, Gerson Augusto Ribeiro 03 April 1991 (has links)
Orientador : Crodowaldo Pavan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:33:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_GersonAugustoRibeiro_M.pdf: 3437467 bytes, checksum: 6ba4587ffc9c1a10628a0eeb67230ece (MD5) Previous issue date: 1991 / Mestrado / Genetica / Mestre em Biologia
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Estudo histológico e ultraestrutural do tentáculo e da região anterior do pé de Biomphalaria occidentalis paraense, 1981 (Mollusca Basommatophora Pulmonata)

Cirio, Silvana Maris January 1990 (has links)
Orientador: Pedro Ribas Werner / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias Agrarias / Estudou-se a histologia e a ultraestrutura do tentáculo e da região anterior do pé de B. occidentalis, espécie de planorbídeo não suscetível ao S. mansoni. Os dois órgãos possuem os mesmos elementos celulares variando apenas a predominância de um e outro. A epiderme é composta por uma camada única de células prismáticas ciliadas, não ciliadas e glandulares globosas. As células não ciliadas compõem quase a totalidade da epiderme do tentáculo; sua superfície externa é recoberta por microvilos e numerosas mitocôndrias e vesículas de aspecto lisossomal concentram-se na porção apical da célula. As células ciliadas, características do pé, diferenciam-se das demais pela presença de cílios, cujas raízes longas e estriadas mantêm-se em contato através de pés basais. O tentáculo possui uma artéria central envolta por tecido conjuntivo denso e fibras musculares lisas circulares e longitudinais. Na porção sub-epidermal do tentáculo é característica a presença de tecido conjuntivo frouxo, formado pelas projeções citoplasmáticas de fibroblastos. O número de células secretárias sub-epidermais e de células sensoriais nervosas é reduzido. No pé, encontra-se tecido conjuntivo denso, com grande número de células com pigmento que parecem estar repletas de grânulos de melanina. Há uma grande concentração de células secretórias sub-epidermais, freqüentemente dispostas em grupos, com reações distintas ao P.A.S. As fibras musculares lisas são de espessura variada e não possuem orientação determinada / The normal histology and ultrastructure of the tentacle and anterior region of the foot of Biomphalaria occidentalis were studied. This species of planorbid is not susceptible to the infection of Schistosoma mansoni. Both organs were shown to have the same celular elements in variable proportions. The epidermis, in general, is composed by a single layer of tall columnar ciliated cells, non-ciliated cells and glandular goblet cells. The epidermis of the tentacle is almost entirely composed by non ciliated cells. These cells have their surface covered by microvilli and have numerous mitochondria and lysossomal-like vesicles in their apical regions. The ciliated cells, which are more numerous in the foot differenciate from the others by cilia whose roots are long and interconnected by basal feet. The tentacle has a single central artery surrounded by dense connective tissue and smooth muscle fibers disposed circular and longitudinally. The subepidermal portions of the tentacle characteristically has loose connective tissue, formed by the cytoplasmic projections of fibroblasts. Dense connective tissue is found in the foot and in the deep part of the tentacle. In In these regions, there are numerous pigment cells, which appear to be melanine laden. Subepidermal secretory cells and sensory cells are present in small numbers. In the foot there is a great concentration of subepidermal secretory cells, often in groups which react differently to the PAS staining technic. The smooth muscle fibers show variable thickness and do not have any orientation
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Avaliação do parasitismo em capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) e sua atuação como hospedeiro intermediário de Neospora caninum e Toxoplasma gondii

Truppel, Jessé Henrique 29 October 2009 (has links)
No description available.
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Nutrição e mecanismos do parasitismo de fungos do gênero Escovopsis /

Custodio, Bruna Cristina. January 2019 (has links)
Orientador: André Rodrigues / Coorientador: Priscila Cintra Socolowski / Banca: Mauricio Bacci Junior / Banca: Dartanhã José Soares / Resumo: Em interações parasita-hospedeiro é esperado que o parasita obtenha a maior parte de sua nutrição a partir do hospedeiro. Colônias de formigas atíneas podem ser utilizadas como modelo para estudar diferentes mecanismos envolvidos em interações de parasitismo. Esses insetos cultivam um fungo basidiomiceto, o qual é alvo de micoparasitas do gênero Escovopsis. É sabido que o jardim de fungo, local onde as formigas praticam a fungicultura, apresenta uma alta concentração de fontes de carbono simples, de fácil assimilação. No presente estudo investigamos se o parasita se beneficia desses recursos nutricionais e se esses influenciam na infectividade frente ao hospedeiro. Para tanto, realizamos ensaios para avaliar o desenvolvimento de seis isolados de Escovopsis em diferentes fontes de carbono tanto na ausência, quanto na presença do fungo cultivado pelas formigas. Além disso, observamos a interação Escovopsis - fungo cultivado com microscopia de epifluorescência, a fim de verificar em que momento é iniciada a degradação do micélio do hospedeiro. No geral, o parasita apresentou esporulação abaixo de 59 % quando somente uma fonte simples de carbono estava disponível. Quando interagindo com seus hospedeiros em meio com apenas uma ou duas fontes de carbono, três dentre seis isolados do parasita foram menos infectivos do que o esperado. Observamos que a adição de uma fonte nutricional não aumenta a infectividade do parasita, mas influencia seu crescimento, mesmo na presença do hospedei... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In parasite-host interactions it is expected from the former to rely mostly on nutrients derived from the host. Attine ant colonies may be considered as a model system for studying different mechanisms of parasitism. These insects cultivate a basidiomycetous fungus, which is threatened by mycoparasites in the genus Escovopsis. It is known that the fungus garden, the substrate where the ants cultivate the fungal cultivar, has a high concentration of simple carbon sources. Here we investigated whether the parasite benefits from these nutritional resources and whether these nutrients influence host infectivity. We performed bioassays to evaluate the development of six Escovopsis isolates in different carbon sources in the absence as well as in the presence of the ant fungal cultivar. In addition, we observed the interaction Escovopsis - fungal cultivar with epifluorescence microscopy, to assess when the degradation of the host mycelium begins. Overall, the parasite showed sporulation below 59 % when only one carbon source was available. When interacting with their hosts in culture medium with one or two carbon sources, three out of six Escovopsis isolates were less infective than expected, probably due to nutritional stress. We observed that the parasite's infectivity did not increase with the addition of one nutritional source, however, influenced its growth, even in the presence of the host (the expected primary source of nutrition). Our results suggest that in addition to the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Caracterização de respostas imunes locais associadas ao fenótipo de resistência parasitária em cordeiros da raça Morada Nova /

Toscano, João Henrique Barbosa. January 2019 (has links)
Orientador: Ana Carolina de Souza Chagas / Coorientador: Cintia Hiromi Okino / Banca: Maria Cristina de Sena Oliveira / Banca: Alessandro Francisco Talamini do Amarante / Resumo: Tendo em vista o impacto da infecção por Haemonchus contortus na ovinocultura, é crescente o número de estudos acerca da resistência a esse parasita, sendo essencial a compreensão dos mecanismos imunes diretamente relacionados. A resposta a infecções por helmintos é predominantemente de perfil Th2, embora o conjunto de mecanismos imunes que conferem resistência aos ovinos não sejam completamente elucidado. O presente estudo objetivou avaliar as respostas imunes locais (abomaso) associados à resistência à infecção por H. contortus em cordeiros Morada Nova, raça considerada resistente. Um rebanho composto por 287 ovinos foi fenotipado, por meio de contagens de ovos nas fezes, volume globular e peso corporal, após dois desafios parasitários com 4000 L3. Os 20 extremos de infecção (10 mais resistentes e 10 mais susceptíveis) foram submetidos a um terceiro desafio e abatidos sete dias após. Foram quantificados, por RT-qPCR, os níveis de expressão de 22 genes associados às respostas imunes, em abomaso e linfonodos abomasais. Além disso, eosinófilos e mastócitos foram quantificados, e os níveis de IgG e IgA no muco abomasal mensurados. Genes relacionados à resposta inata (TLR2 e CFI) foram superiormente expressos na região pilórica dos animais resistentes. Esses animais também apresentaram, na região fúndica, IL33 (promotor da polarização Th2) e MS4A2 (receptor de IgE) em níveis superiores aos verificados nos susceptíveis. Marcadores pró-infl... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Considering the impact of Haemonchus contortus infection on sheep breeding, there is an increasing number of studies addressing host resistance against to this parasite, and the understanding of directly related immune mechanisms is essential. The response to helminth infections is predominantly Th2- polarized, although the immune mechanisms that confer resistance to sheep are not fully elucidated. The present study aimed to evaluate the local immune responses (abomasum) associated with resistance to H. contortus infection in Morada Nova lambs, a breed considered resistant. A 287 sheep flock was phenotyped, by means of fecal egg counts, packed cell volume and body weight, after two parasitic challenges with 4000 L3. The 20 extremes of infection (10 most resistant and 10 most susceptible) were submitted to a third challenge and slaughtered seven days later. 22 immune-related genes were quantified (RT-qPCR) in abomasum and abomasal lymph nodes. In addition, abomasal eosinophils and mast cells were quantified, and IgG and IgA levels were measured (ELISA) in abomasal mucus. Genes related to innate response (TLR2 and CFI) were superiorly expressed in the pyloric region of the resistant animals. IL33 (Th2 polarization promoter) and MS4A2 (IgE receptor) were also at higher levels in this group. Proinflammatory cytokines (TNFα and IL1β) were superiorly expressed in the fundic region of the susceptible group, which also had IL4 (Th2 response) superiorly expressed in their abomasal lym... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Padrões ecológicos da relação de parasitismo entre ácaros mesostigmata e alguns roedores neotropicais

Cruz, Leonardo Dominici [UNESP] 20 December 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-20Bitstream added on 2014-06-13T19:46:42Z : No. of bitstreams: 1 cruz_ld_dr_rcla.pdf: 1201063 bytes, checksum: cc322ba66d3b7aeaa96f2e1ae46979e9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Ácaros mesostigmatídeos e seus roedores hospedeiros compreendem um dos mais ricos e diversos sistemas parasito-hospedeiro da região Neotropical. A maior parte do conhecimento disponível sobre este sistema refere-se a listas de ocorrências, descrições de espécies parasitas e relações de especificidade hospedeira em escalas locais. Estudos ecológicos com o objetivo de procurar padrões de estruturas de comunidades de espécies parasitas, bem como investigar os possíveis processos subjacentes à organização destas comunidades são escassos. Dessa forma, o presente estudo tenta contribuir para o conhecimento ecológico deste sistema parasito-hospedeiro. No Capítulo 1, investigou-se a existência de padrões organizacionais nas infracomunidades de mesostigmatídeos em duas populações do hospedeiro roedor Oligoryzomys nigripes, bem como possíveis fatores subjacentes aos padrões observados. Demonstrou-se que as infracomunidades de mesostigmatídeos podem apresentar variações na sua organização, indo desde infracomunidades completamente aleatórias, a infracomunidades estruturadas. Fatores relacionados à história de vida dos hospedeiros podem ser responsáveis pela estruturação das infracomunidades de mesostigmatídeos; todavia, a proposição de padrões gerais não foi possível, principalmente devido a grande diversidade de espécies parasitas e hospedeiras envolvidas na região Neotropical. No Capítulo 2, investigou-se a existência de padrões de similaridades entre as comunidades de mesostigmatídeos em duas escalas observacionais: comunidade componente e comunidade composta. Os resultados obtidos demonstraram que as similaridades entre as comunidades componentes e entre as comunidades compostas geralmente são baixas, não sendo influenciadas pela distância geográfica e pela dissimilaridade ambiental entre as localidades... / Mites and their rodent hosts mesostigmatídeos comprise one of the richest and most diverse host-parasite systems of the Neotropical region. Most of the knowledge available about this system refers to occurrence lists, parasite species descriptions and host specificity relationships at local scales. Ecological studies with the aim looking for structure patterns of parasite communities, as well as investigate the possible processes underlying the organization of these communities are scarce. Thus, this study attempts to contribute to the ecological knowledge of this host-parasite system. In Chapter 1, we investigated the existence of organizational patterns in infracommunities of Mesostigmata mites of the two populations of the rodent host Oligoryzomys nigripes as well as possible factors underlying the observed patterns. It was demonstrated that the infracommunities of Mesostigmata mites may vary in their organization, ranging from completely random infracommunities to structured infracommunities. Factors related to the hosts life histories may be responsible for structuring Mesostigmata mites infracommunities. However, the proposition of general patterns was not possible, mainly due to the great diversity of parasites and host species involved in Neotropical region. In Chapter 2, we investigated the existence of similarity patterns among Mesostigmata mites communities in two levels: component community and compound community. The results showed that the similarities among the component communities and among the compound communities generally are low, not being influenced by geographical distance and environmental dissimilarity among the localities. However, the similarities of Mesostigmata mites among the compound communities were positively related to the host faunas similarities among the localities... (Complete abstract click electronic access below)
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The translationally controlled tumor protein is necessary for potyvirus replication / Translationally controled tumor protein é necessária para a replicação de potyvírus

Bruckner, Fernanda Prieto 21 November 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-09-13T16:56:22Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2092738 bytes, checksum: 991c21e0ecefbc7be1990a39f757c9bb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T16:56:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2092738 bytes, checksum: 991c21e0ecefbc7be1990a39f757c9bb (MD5) Previous issue date: 2016-11-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Translationally controlled tumor protein (TCTP) é uma proteína amplamente distribuída em eucariotos. Ela está envolvida na regulação de processos básicos como progressão do ciclo celular, crescimento celular, proteção contra estresses e apoptose. Durante a infecção de tomateiro (Solanum lycopersicum) e Nicotiana benthamiana pelo potyvírus Pepper yellow mosaic virus ocorre aumento dos níveis de seu mRNA. Plantas silenciadas para TCTP acumulam menos vírus do que plantas selvagens, mostrando que esta proteína é importante para a infecção por potyvírus. Neste trabalho, o envolvimento da TCTP na infecção por potyvírus foi analisado detalhadamente utilizando-se o potyvírus Turnip mosaic virus (TuMV). Em plantas de N. benthamiana silenciadas para TCTP também ocorre uma diminuição no acúmulo do TuMV quando comparado com plantas não silenciadas. Além disso, plantas superexpressando TCTP de maneira transiente acumularam mais vírus do que plantas controle, confirmando o efeito positivo desta proteína na infecção por diferentes espécies de potyvírus. Para analisar a localização subcelular de TCTP no contexto da infecção, TCTP fusionada a GFP foi co-expressa com TuMV/6K2:mCherry. TCTP co-localiza-se com as vesículas replicativas e com estrutura a globular perinuclear tipicamente observada em células infectadas. O fracionamento de proteínas celulares demonstrou que TCTP está predominantemente na fração solúvel e uma pequena porção se associa com membranas, tanto em plantas sadias quanto em plantas infectadas. A co- localização com vesículas marcadas por 6K2 e a presença de TCTP em frações membranosas da célula sugerem um possível envolvimento desta proteína na replicação viral. Para verificar esta hipótese, protoplastos obtidos a partir de plantas silenciadas para TCTP foram infectados com TuMV e com o mutante TuMV VNN , o qual não é capaz de replicar-se. Os resultados demonstraram que o acúmulo de TuMV é reduzido em protoplastos silenciados, indicando que TCTP é necessária para a replicação. O acúmulo da proteína TCTP durante a infecção também foi avaliado. A infecção viral induz o aumento dos níveis de mRNA mas não de proteína, sugerindo que o mRNA que codifica TCTP atue na replicação. Desta forma, foi analisado se expressão de um RNA não traduzível de TCTP possui efeito sobre a infecção viral. Os resultados mostraram que apenas a expressão de um RNA traduzível é capaz de aumentar a infecção viral, indicando que a proteína TCTP, ou que a tradução se seu mRNA, é importante para a replicação viral. / The translationally controlled tumor protein (TCTP) is widely distributed among eukaryotes. It is involved in the regulation of basic processes such as cell cycle progression, cell growth, stress protection and apoptosis. During tomato (Solanum lycopersicum) and Nicotiana benthamiana infection by the potyvirus Pepper yellow mosaic virus, an increase of TCTP mRNA levels was observed. Plants silenced for TCTP accumulate fewer viruses than control plants, showing the importance of that gene for potyvirus infection. In this work, TCTP involvement in potyvirus infection was analyzed in details using the potyvirus Turnip mosaic virus (TuMV). N. benthamiana plants silenced for TCTP accumulated fewer viruses than non-silenced plants. In addition, plants overexpressing TCTP transiently accumulated more viruses than control plants, confirming that TCTP has a positive effect on infection by different potyviruses. To study TCTP subcellular localization in potyvirus infected plants, TCTP fused to GFP was co- expressed with TuMV/6K2:mCherry. Confocal analysis has shown that TCTP co- localizes with 6K2-tagged structures such as replicative vesicles and the perinuclear globular structure that is typically observed in potyvirus-infected cells. Cellular fractioning demonstrated that TCTP is mainly present in the soluble fraction but is also associated with membranes. The co-localization of TCTP with 6K2-tagged vesicles and its presence in cellular membranous fractions suggests a possible involvement of TCTP in virus replication. To test this hypothesis, protoplasts obtained from TCTP silenced plants were infected with TuMV and its mutant TuMV VNN , which is defective for replication. The results showed that TuMV accumulation is reduced in silenced protoplasts, indicating that TCTP is necessary for replication. TCTP accumulation during infection was also analyzed. Viral infection induces TCTP mRNA expression, but not protein accumulation, suggesting that the TCTP mRNA and not the protein has a role in viral infection. To check this, we expressed a non-translatable form of TCTP RNA in plants and analyzed its effect in virus accumulation. The results showed that only the expression of a translatable RNA resulting in protein production is able to increase virus infection, indicating that the protein and/or the translation of TCTP is important for potyvirus replication.

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