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Avaliação do efeito do tratamento com alendronato, a longo prazo, sobre a reparação do tecido ósseo em defeitos de calvárias. Estudo em ratas /

Fiori, Leslie Cristine. January 2016 (has links)
Orientador: Silvana Regina Perez Orrico / Co-orientador: Ana Paula de Souza Faloni / Resumo: Os bifosfonatos têm sido amplamente utilizados no tratamento de doenças relacionadas a distúrbios no metabolismo ósseo. Dentre os bifosfonatos mais potentes, o alendronato (ALD), possui grande potencial em inibir a reabsorção óssea. O objetivo deste estudo foi avaliar, in vivo, o efeito da administração de alendronato, a longo prazo, na reparação óssea em defeitos críticos confeccionados em calvárias de ratas. Para isto, 160 ratas foram distribuídas aleatoriamente em 2 grupos que receberam, semanalmente, injeções subcutâneas de placebo [grupo controle (CTL)] e de alendronato [grupo alendronato (ALD)]. Após 120 dias do início do tratamento, foi confeccionado um defeito crítico na calvária de todos os animais e 10 animais de cada grupo foram sacrificados aos 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 e 60 dias após a confecção do defeito. No dia do sacrifício foram coletadas amostras de urina e sangue e foram removidas as calvárias e os fêmures dos animais. Os fêmures foram avaliados quanto à densidade mineral óssea (BMD). Para a avaliação sistêmica do efeito do medicamento no metabolismo ósseo, foram investigados os níveis urinários de deoxipiridinolina (DPD) e os níveis séricos de propeptídeo amino terminal do procolágeno tipo I (P1NP), de telopeptídeo carboxiterminal do colágeno tipo I (CTX) e de osteocalcina por ensaio imunoenzimático (ELISA). Secções de calvárias submetidas ao processamento para inclusão em parafina foram empregados para: 1) imuno-histoquímica para detecção de RANKL (ligan... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The bisphosphonates have been widely used for the treatment of diseases related to osseous metabolism disturbances. Among the most powerful bisphosphonates, the alendronate (ALD) presents great potential to inhibit the osseous reabsorption. This aim of this study was to evaluate, in vivo, the effect of the administration of alendronate in the long run, in bone repair in critic defects produced in rats' calvarias. For so, 160 rats were randomly distributed into 2 groups which received, weekly, placebo subcutaneous injections [control group (CTL)] as well as alendronate injections [alendronate group (ALD)]. After 120 days from the beginning of treatment, a critic defect was produced in all animals and 10 animals from each group were sacrificed at 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 and 60 days after the defect production. On the day of sacrifice, urine and blood samples were collected and the calvarias and femurs were removed. The femurs were evaluated as for their bone mineral density (BMD). For the systemic evaluation of the medicine effect over the bone metabolism, the deoxypyridinoline urinary levels were investigated (DPD) as well as the serum levels of amino-terminal procollagen propetide of type 1 (P1NP), of carboxy-terminal telopeptide of collagen type I (CTX) and of osteocalcin by means of enzyme-linked immunosorbent essay (ELISA). Parts of calvarias undergone processing for inclusion in paraffin were employed to: 1) immuno-histochemistry for detection of RANKL (receptor activator of nuclear factor kß ligand), osteoprotegerin (OPG), Cathepsin K, RUNX2 (transcription factor 2 related to Runt), Osteopontin (OPN), iNOS (inducible nitric oxide synthase) and Vascular Endothelial Growing Factor (VEGF); 2) coloration with Goldner's Trichrome for analyzing the quantity of mineralized tissue and of osteoid matrix and defect closing; 3)...(Complete abstract electronic access below) / Mestre
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Atividades anti-inflamatória e antirreabsortiva ósseas do ácido zoledrônico durante a movimentação dentária induzida em ratos / Bone anti-inflammatory and antirreabsortive activities of zoledronic acid during induced tooth moovement in rats

Kurita, Bianca Moreira 16 January 2017 (has links)
KURITA, B. M. Atividades anti-inflamatória e antirreabsortiva ósseas do ácido zoledrônico durante a movimentação dentária induzida em ratos. 2017. 109 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-06T13:27:07Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_bmkurita.pdf: 7919454 bytes, checksum: e2483116e49db512ecb25e7c752b56d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-06T13:27:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_bmkurita.pdf: 7919454 bytes, checksum: e2483116e49db512ecb25e7c752b56d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-06T13:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_bmkurita.pdf: 7919454 bytes, checksum: e2483116e49db512ecb25e7c752b56d2 (MD5) Previous issue date: 2017-01-16 / The induced tooth movement (ITM) combines bone resorption and neoformation that depends on chemical mediators of inflammation, thus culminating in bone remodeling. This observation has encouraged the evaluation of the effect of zoledronic acid (ZOL), a bisphosphonate that inhibits osteoclastic activity, being widely used for treating bone metabolic disorders, such as osteoporosis and bone metastasis. However, literature has not addresses the participations of proinflammatory cytokines on RANKL-OPG axis modulation during MDI and ZOL treatment. On this, we evaluated the effect of ZOL on bone remodeling of ITM. ITM was performed in 72 anesthetized Wistar rats by the installation and activation of a nickel-titanium coil-spring, with 50 gf, fixed on upper left 1st molar and upper incisors. The same received distilled water, being considered as non-treated group (NT - 1 ml/kg-i.v.) or ZOL (50, 100 e 200 g/kg-iv), 5 minutes before the dispositive insertion, and on 7th day. On day zero, blood samples were collected for leukogram assay (mm3) and bone alkaline phosphatase dosage (BALP: U/I), and the space between the teeth were measured. On the 11th day, the collects and measures were repeated and the gingivas and hemimaxillas were removed for myeloperoxidase activity dosage (MPO: 103 mg of tissue) and TNF- e IL-1 gingival levels analysis (pg/mg of tissue), histomorphometric analysis of periodontal ligament areas of compression, traction and hyalines, histological evaluation by scores (0 to 3) of root and bone resorptions and immunohistochemical staining for RANKL, OPG, TRAP, TNF- e IL-1. The animals were weighted daily during the all-experimental period, and then, were related to basal values; Ethics Committee on the Use of Animals-UFC nº 28/15. The NT group, had an increase of tooth movement, high scores of root and bone resorption, increased activity of MPO and high gingival levels of TNF- e IL-1, intense immunostaining for RANKL, TRAP e TNF- on the compression side and for RANKL and OPG on the traction side of periodontal ligament, resulting on increased RANKL/OPG ratio on compression side (p<0.05). Still, they do not presented changes in serum levels of BALP, in total and differential leukogram assay and histomorphometric analysis (p>0.05), but they lost weight initially, being the initial weight, recovered from the 7th day. ZOL treatment in three doses used reduced tooth movement in a dose-dependent manner, as well as resulted in low scores of root and bone resorption and reduction of MPO activity. However, ZOL in the high dose (200 g/kg) did not change TNF- e IL-1 gingival levels (p>0.05). Still, this dose reduced the immunostaining of TRAP on compression side, OPG on traction side and RANKL and TNF- on both sides, resulting on a decrease of RANKL/OPG ratio on both regions analyzed (p<0.05). In addition, ZOL treatment did not induce changes on leukogram values and body mass variation in comparison to the animals that received dH2O (p>0.05). In short, ZOL reduced the ITM by decreasing bone biomarkers essential for osteoclastic differentiation and activity and reducing bone anabolism. / A movimentação dentária induzida (MDI) combina respostas de reabsorção e neoformação ósseas, que dependem da atividade de mediadores químicos da inflamação, culminando em remodelação óssea. Tal observação tem incentivado a avaliação do efeito do ácido zoledrônico (ZOL), um bisfosfonato que inibe a atividade osteoclástica, sendo amplamente utilizado para tratamento de desordens metabólicas ósseas, como a osteoporose e metástases ósseas. Contudo a literatura não tem abordado a participação de citocinas pró-inflamatórias e a modulação do eixo RANKL-OPG durante a MDI e tratamento com ZOL. Diante, disso, avaliou-se o efeito do ZOL na remodelação óssea da MDI. A MDI foi realizada em 72 ratos Wistar anestesiados pela instalação e ativação de uma mola fechada de níquel-titânio com 50 gf, fixada ao 1° molar superior esquerdo e aos incisivos superiores. Os mesmos receberam H2O destilada, sendo considerados animais não tratados (NT - 1 ml/kg-i.v.) ou ZOL (50, 100 e 200 g/kg-i.v.), 5 min antes da inserção do dispositivo, e no 7º dia. No dia zero, foram coletadas amostras sanguíneas para avaliação do leucograma (mm3 de sangue) e dosagem de fosfatase alcalina óssea (FAO: U/I) e mensurados os espaços entre os dentes. No 11º dia, as coletas e as mensurações foram repetidas e as gengivas e hemiarcadas removidas para as avaliações da atividade da mieloperoxidase (MPO: x 103 mg de gengiva) e dos níveis de TNF- e IL-1 (pg/mg de gengiva), análise histomorfométrica das áreas de compressão, tração e hialinas do ligamento periodontal (LP), análise histológica por escores (0 a 3) das reabsorções radicular (RR) e óssea (RO) e análise imunohistoquímica para RANKL, OPG, TRAP e TNF-. Os animais foram pesados diariamente durante todo o período experimental, sendo os valores encontrados, relacionados à massa do dia zero; Comissão de Ética no Uso de Animais-UFC nº 28/15. O grupo NT apresentou aumento do deslocamento dentário, escores altos para as RR e RO, aumento da atividade de MPO e dos níveis gengivais de TNF- e IL-1, maior imunomarcação para RANKL, TRAP e TNF- no lado de compressão do LP e para RANKL e OPG no lado de tração, resultando em aumento da razão RANKL/OPG no lado de compressão (p<0,05). Não apresentaram alterações nos níveis séricos de FAO, leucograma e na análise histomorfométrica (p>0,05), mas perderam peso inicialmente, alcançado os valores basais ao 7º dia. O tratamento com ZOL nas três doses reduziu o movimento dentário de forma dose-dependente, bem como reduziuos escores de RR e RO e a atividade de MPO (p<0,05). No entanto, a maior dose de ZOL (200 g/kg) não alterou os níveis gengivais de TNF- e IL-1 (p>0,05). Nessa mesma dose, o ZOL reduziu a imunomarcação para TRAP no lado de compressão, OPG no lado de tração e RANKL e TNF- em ambos os lados, resultando em decréscimo na razão RANKL/OPG nas duas regiões avaliadas (p<0,05). Ademais, o tratamento com o ZOL não induziu alterações do leucograma e não promoveu perda de peso significante em relação aos animais não tratados (p>0,05). Em suma, o ZOL reduziu a MDI por meio da inibição de biomarcadores ósseos essenciais à diferenciação e atividade osteoclástica e redução do anabolismo ósseo.
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Avaliação do reparo ósseo em mandíbulas de ratas ovariectomizadas e submetidas à distração osteogênica

Souza, Mady Crusoé de 15 December 2011 (has links)
Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-03-08T20:01:59Z No. of bitstreams: 1 Mady.pdf: 3837691 bytes, checksum: 2c30ae18de7f55d27a54cf40469a4951 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-08T20:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mady.pdf: 3837691 bytes, checksum: 2c30ae18de7f55d27a54cf40469a4951 (MD5) Previous issue date: 2011-12-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia / Ainda que os mecanismos de osteogênese na reparação da matriz óssea sejam entendidos, pouco se sabe sobre a influência da deficiência de estrógeno promovida pela ovariectomia neste reparo. A distração osteogênica mandibular, técnica empregada nas correções de deformidades maxilares, constitui um modelo para estudo da reparação óssea. Sabe-se que a angiogênese está relacionada à osteogênese no reparo e que seus fatores locais, como o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), podem também estar relacionados diretamente com a osteogênese. Objetivo: o propósito deste estudo foi avaliar o reparo ósseo de mandíbulas de ratas ovariectomizadas submetidas à distração osteogênica mandibular, utilizando análise morfológica, histomorfométrica, radiográfica e imunohistoquímica. Metodologia: trinta ratas Wistar de três meses de idade foram submetidas à distração osteogênica mandibular. Metade destes animais foi previamente submetida à ovariectomia. Decorridos 7, 14 e 28 dias, os animais foram sacrificados e suas hemimandíbulas foram removidas e radiografadas. Em seguida, os fragmentos foram descalcificados e processados para inclusão em parafina. Alguns cortes foram corados com hematoxilina e eosina (H&E), para análise morfológica e histomorfométrica, outros corados com alcian blue-eosina para confirmação histológica de áreas de cartilagem e outros ainda submetidos ao método imuno-histoquímico para VEGF e seu receptor FLT-1. Resultados: A análise morfológica da distração mostrou uma região de tecido conjuntivo fibrocelular envolvido por matriz de cartilagem que gradualmente foi substituída por tecido ósseo. A fusão completa das extremidades ósseas foi observada apenas nos animais não ovariectomizados. A avaliação radiográfica digital não apresentou diferenças estatísticas entre os grupos e períodos avaliados. O volume ósseo é significativamente maior nos animais não ovariectomizados quando comparados aos animais ovariectomizados no periodo de 28 dias (p≤0,05) e maior no período de 28 dias comparado com o de 7 dias entre os animais não ovariectomizados (p≤0,01). Osteoblastos, osteoclastos e células conjuntivas exibiram imunomarcação para VEGF e seu receptor FLT-1. Conclusões: A osteogênese induzida pela distração osteogênica mandibular em ratas ovariectomizadas foi mais lenta, sugerindo a influência do estrógeno no reparo. A avaliação radiográfica digital não apresentou sensibilidade para detecção de densidade de matriz óssea no reparo ao longo dos períodos. As células imunomarcadas pelo VEGF e seu receptor sugerem que estas moléculas possam estar envolvidas diretamente no reparo ósseo. / Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde
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Alterações teciduais decorrentes da fotobiomodulação laser no movimento dentário induzido em ratos.

Habib, Fernando Antonio Lima 07 May 2013 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-05-06T20:22:46Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fernando Habib.pdf: 2057509 bytes, checksum: 86185d2526b5ceb054b379da0c724547 (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira(flaviaccf@yahoo.com.br) on 2013-05-07T19:08:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fernando Habib.pdf: 2057509 bytes, checksum: 86185d2526b5ceb054b379da0c724547 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-07T19:08:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fernando Habib.pdf: 2057509 bytes, checksum: 86185d2526b5ceb054b379da0c724547 (MD5) / O laser em baixa potência é considerado fator acelerador da reparação óssea, uma vez que estimula a microcirculação e aumenta o metabolismo celular. Sendo assim, pretendeu-se, neste trabalho, verificar as alterações histológicas decorrentes do uso da fotobiomodulação a laser, durante o movimento dentário induzido do primeiro molar superior esquerdo com 40g/F, em Rattus norvegicus, adultos jovens, machos, pesando entre 250 e 300g. Foram utilizados 30 animais, distribuídos, equitativamente, em três grupos (n=10), correspondendo ao tempo da morte dos animais, isto é, sete, 13 e 19 dias (G7, G13 e G19). Metade dos animais de cada grupo foi submetida à fototerapia laser ( 790nm, 40mW, 20J/cm2 por sessão, a cada 48h, Ø~2mm) durante a movimentação ortodôntica, a outra metade, não irradiada, serviu como controle. Após a morte dos animais, as amostras foram seccionadas, processadas e coradas por HE e picro-sirius e utilizadas para avaliação semiquantitativa por meio da microscopia óptica. Os dados foram coletados e comparados através de análises intergrupo e intra-grupos pelos testes de Kruskal-Wallis e exato de Fisher, sendo considerados significantes quando p = 0,05. Os resultados mostraram que a fotobiomodulação a laser influenciou positivamente aspectos importantes para a movimentação dentária como a redução da densidade vascular e da inflamação; aumento da quantidade de osteoclastos e de colágeno; e também modular a reabsorção dentária e a hialinização. Conclui-se que a fototerapia laser pode criar condições mais favoráveis para a remodelação óssea no periodonto de Rattus norvegicus em situações de movimentação ortodôntica induzida. / Salvador
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Avaliação da influência da terapia por infliximabe na cicatrização óssea de alvéolos dentários pós-exodontia em ratos / Therapy influence of evaluation by infliximab on bone healing after tooth extraction dental alveoli in rats

Ferreira Júnior, Antonio Ernando Carlos 19 February 2016 (has links)
FERREIRA JÚNIOR, A. E.C. Avaliação da influência da terapia por infliximabe na cicatrização óssea de alvéolos dentários pós-exodontia em ratos. 2016. 83 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-19T12:48:50Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_aecferreirajunior.pdf: 3340356 bytes, checksum: 7bfe62f8b747a6f031eacf97be445966 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-04-19T12:49:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_aecferreirajunior.pdf: 3340356 bytes, checksum: 7bfe62f8b747a6f031eacf97be445966 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-19T12:49:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_aecferreirajunior.pdf: 3340356 bytes, checksum: 7bfe62f8b747a6f031eacf97be445966 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Bone healing after tooth extraction depends on variables such as surgical technique, local and systemic factors and use of pharmacological substances. Anti-inflammatory drugs can alter the tissue repair, interfering with the inflammatory phase of healing. Infliximab is a chimeric monoclonal antibody, human-murine anti-Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α) which has been widely used to replace corticosteroids in rheumatology clinic because it has fewer side effects in the long term. However, TNF-α pathway acts directly on osteoclastogenesis, can change the physiological response of bone turnover and its inhibition may lead to immunosuppression, increasing the risk of local infection. It was aim of this study to evaluate the influence of infliximab in healing after dental extractions alveoli. For this purpose, 84 Wistar rats (n = 7) were randomized into two groups (infliximab EV 5 mg / kg or saline EV 1ml / kg, pre-treated with 4 weekly administrations prior to extraction, weekly maintained until the day of sacrifice) . The animals were sacrificed 1, 3, 7, 14, 21 and 28 days after surgery. The occurrence of root fractures, surgical time and the weight of extracted teeth were recorded. On the day of sacrifice the weight of animals and organs (liver, spleen, kidneys, stomach) were measured. After fixation in 10% formalin buffered and macroscopic analysis, jaw and fragments of these organs, followed for histological processing and microscopic study. The jaws were submitted to radiographic, histomorphometric (size of the deposition of scar tissue, percentage of area represented by bone tissue and number of polymorphonuclear neutrophils, mononuclear and osteoclasts), immunohistochemistry (Picrossirius Red) and immunohistochemistry (TNF-α) . There were no differences seen in determining the radiolucent area related to post-extraction site between the experimental groups (p = 0.646). However, the histomorphometric analysis was visualized lower completion by bone and a greater amount of tissue remaining in infllximabe group significantly on day 14 (p <0.001). Furthermore, a smaller number of polymorphonuclear neutrophils in 3 (p <0.01) and 7 days (p <0,001) mononuclear on the 7th day (p <0.01) and osteoclasts in the 7th and 14th days (p < 0.01 and p <0.001, respectively) were observed. It also observed lower TNF-α immunoreactivity in the post-extraction sites on days 7,14, 21 and 28 (p <0.01; p <0.05, p <0.05 and p <0.01 respectively). We conclude that TNF-α inhibitors may alter the bone repair capacity in post-extraction sites. These findings suggest the need for further precautions in gory dental procedures in patients undergoing systemic therapy of these drugs. / A cicatrização óssea pós-exodontia depende de variáveis como técnica cirúrgica, fatores locais e sistêmicos e uso de substâncias farmacológicas. Os anti-inflamatórios podem alterar a reparação tecidual, interferindo na etapa inflamatória de cicatrização. O infliximabe é um anticorpo monoclonal quimérico, humano-murino, anti-Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α) que tem sido amplamente utilizado em substituição aos corticosteroides na clínica reumatológica por possuir menos efeitos adversos em longo prazo. No entanto, a via TNF-α age diretamente na osteoclastogênese, podendo modificar a resposta fisiológica do turnover ósseo e sua inibição pode provocar imunossupressão, aumentando o risco de infecção local. Foi objetivo deste estudo avaliar a influência do infliximabe na cicatrização de alvéolos dentários pós-exodontias. Para tanto, 84 ratos Wistar (n=7) foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos de estudo (infliximabe EV 5mg/kg ou salina EV 1ml/kg, pré tratados com 4 administrações semanais antes da exodontia, mantidas semanalmente até o dia do sacrifício). Os animais foram sacrificados 1, 3, 7, 14, 21 e 28 dias após o procedimento cirúrgico. A ocorrência de fraturas radiculares, o tempo cirúrgico e o peso dos dentes extraídos foram anotados. No dia do sacrifício o peso dos animais e dos órgãos (fígado, baço, rins, estômago) foram aferidos. Após fixação em formol 10% tamponado e análise macroscópica, a mandíbula e fragmentos desses órgãos, seguiram para processamento histológico e estudo microscópico. As mandíbulas foram submetidas à avaliação radiográfica, histomorfométrica (dimensão da deposição de tecido conjuntivo cicatricial, percentual da área representada por tecido ósseo e número de polimorfonucleares neutrófilos, mononucleares e osteoclastos), histoquímica (Picrossirius Red) e imuno-histoquímica (TNF-α). Não foram vistas diferenças na aferição da área radiolúcida referente ao sítio pós-exodontia entre os grupos experimentais (p=0,646). Entretanto, na análise histomorfométrica, foi visualizado menor preenchimento por tecido ósseo bem como maior quantidade de tecido conjuntivo remanescente no grupo infllximabe, de forma significante no 14º dia (p<0,001). Além disso, um menor número de polimorfonucleares neutrófilos no 3º (p< 0,01) e 7º dias (p<0,001), de mononucleares no 7º dia (p<0,01) e de osteoclastos no 7º e 14º dias (p<0,01 e p< 0,001, respectivamente) foi observado. Também foi verificada menor imunoexpressão de TNF-α nos sítios pós-exodontia nos dias 7,14, 21 e 28 (p<0,01; p<0,05, p<0,05 e p<0,01 respectivamente). Conclui-se que inibidores de TNF-α podem alterar a capacidade de reparo ósseo em sítios pós-exodontia. Estes achados sinalizam a necessidade de maiores precauções nos procedimentos odontológicos cruentos em pacientes sob terapia sistêmica desses fármacos.
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Análise de peptídeos de defesa do hospedeiro na osteoclastogênese mediada por RANKL in vitro

Amorim, Ingrid Aquino 27 July 2016 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-08T12:12:13Z No. of bitstreams: 1 2016_IngridAquinoAmorim.pdf: 1986782 bytes, checksum: d324e2107a1abb4c35c8ea22be35f4de (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-13T18:42:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_IngridAquinoAmorim.pdf: 1986782 bytes, checksum: d324e2107a1abb4c35c8ea22be35f4de (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T18:42:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_IngridAquinoAmorim.pdf: 1986782 bytes, checksum: d324e2107a1abb4c35c8ea22be35f4de (MD5) / A remodelação óssea representa um processo de suma importância no sistema esquelético humano. Entretanto, um desequilíbrio na função ou ativação excessiva de osteoclastos pode resultar em extensas reabsorções ósseas. Nesse contexto, peptídeos de defesa do hospedeiro (PDHs) podem apresentar um potencial no desenvolvimento de novas terapias. Nessa perspectiva, o presente estudo avaliou o efeito dos peptídeos clavanina A, clavanina MO e LL-37, na supressão da osteoclastogênese in vitro mediada pelo ligante do receptor de ativação do fator nuclear kappa B (RANKL). Estes resultados foram comparados com medicações utilizadas clinicamente, hidróxido de cálcio P.A. e doxiciclina, em terapias endodônticas e periodontais, respectivamente. Os parâmetros analisados em culturas da linhagem celular RAW 264.7, com ou sem recombinante (r) RANKL, PDHs e controles clínicos, foram: (1) viabilidade celular pelo método de MTT; (2) produção de óxido nítrico (NO); e número de osteoclastos diferenciados, após coloração de fosfatase ácida tartarato resistente (TRAP). Os resultados demonstraram que os PDHs e os controles clínicos não foram citotóxicos às células, exceto na presença de 128 μg.mL-1 de doxiciclina após 72 h, na presença e ausência de rRANKL, que apresentou redução de cerca de 50% da viabilidade celular. A produção de NO foi mantida estável ou reduzida na presença de todas as concentrações dos PDHs e controles clínicos, comparados ao grupo controle, na ausência de rRANKL. Como esperado, a presença de rRANKL elevou sutilmente os níveis da produção de NO. No entanto, a presença dos PDHs e controles clínicos permitiram ora estabilidade, ora redução dos níveis de NO, quando comparados ao grupo controle, exceto na presença de 2 μg.mL-1 de doxiciclina após 7 dias, que promoveu aumento significativo na produção de NO. Na osteoclastogênese, todos os PDHs e controles clínicos foram capazes de reduzir a diferenciação de osteoclastos. Em conclusão, os PDHs podem atuar como potenciais supressores da osteoclastogênese in vitro. Dessa forma, o uso dos PDHs se apresenta como uma forma terapêutica promissora para o tratamento de reabsorções ósseas perirradiculares e periodontais. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Bone remodeling is an important process in the human skeletal system. Nevertheless, an imbalance in the osteoclast function or its excessive activation, may result in extensive bone resorption. In this context, host defense peptides (HDPs) may have a potential for novel therapies development. This study evaluated the potential of HDPs clavanin A, clavanin MO and LL-37 in down-regulate in vitro receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL)-mediated osteoclastogenesis. HDPs results were compared to currently available medications for endodontic and periodontal therapies, calcium hydroxide P.A. and doxycycline, respectively. The parameters analyzed in cell line RAW 264.7 cultures stimulated with or without recombinant (r) RANKL and HDPs and clinical controls were: (1) cell viability by MTT method; (2) nitric oxide production (NO); and (3) number of differentiated osteoclasts, after tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining. Results showed that HDPs and clinical controls were not cytotoxic, except in the presence of 128μg.mL-1 of doxycycline after 72 h, in the presence and absence of rRANKL, which decreased about 50% the cell viability. The NO production was kept stable or reduced in the presence of all concentrations of HDPs and clinical controls, compared to the control group, in the absence of rRANKL. Otherwise, the presence of rRANKL subtly up-regulated the NO production levels. However, the presence of HDPs and clinical controls remained stable or reduced the NO production compared to the control group, except in the presence of 2 μg.mL-1 of doxycycline after 7 days, which up-regulated NO production. During the osteoclastogenesis process, all HDPs and clinical controls were capable of reducing the osteoclasts differentiation. In conclusion, host defense peptides can act as potential suppressors of in vitro osteoclastogenesis. Thus, HDPs represent promising drugs for periradicular and periodontal bone resorption treatments.
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Análise molecular e microscópica do reparo ósseo de alvéolos dentários após exodontia em um modelo de osteonecrose dos maxilares induzida pelo ácido zoledrônico em ratos Wistar / Molecular and microscopic analysis of bone repair of dental sockets after tooth extraction in a model of osteonecrosis of the jaws induced by zoledronic acid in rats

Zen Filho, Edson Virgilio 25 April 2014 (has links)
O reparo ósseo de alvéolos após exodontia dos molares superiores em um modelo animal em ratos Wistar (Rattus norvegicus, albinus) de osteonecrose dos maxilares associada ao uso de bisfosfonatos foi avaliado através de analise microscópica e molecular. Foram utilizados 48 ratos (Rattus norvegicus, albinus, Wistar) machos, com 12 semanas de vida e peso aproximado de 300 gramas, que foram dividos em 4 grupos. Cada grupo era composto por 12 animais, sendo 2 grupos experimentais AZ e AZ-Cirúrgico (AZ-C), que foram submetidos a administração de ácido zoledrônico, 0,6 mg/kg a cada 28 dias com um total de 5 doses e 2 grupos controles CO e CO-Cirúrgico (CO-C) com administração de cloreto de sódio 0,9% no mesmo volume e frequencia do ácido zoledrônico. Todas as soluções foram administradas por via intraperitoneal. O grupo AZ-C e o grupo CO-C foram submetidos a exodontia do primeiro, segundo e terceiro molares superiores 45 dias após a primeira aplicação das soluções. Todos os animais foram eutanasiados após 150 dias do início do experimento (105 dias após as exodontias). As maxilas dos animais foram avaliadas macroscopicamente para presença de lesões espontâneas e com uma sonda clinica número 5 as regiões das exodontias dos molares foram avaliadas para presença ou ausência de solução continua do epitélio. Após feita a avaliação macroscópica as regiões das exodontias dos molares superior esquerdo e do lado contralateral de cada animal foram submetidas a análises qualitativa e quantitativa para presença de sequestros ósseos, restos radiculares, área de osteonecrose, área de espaço trabecular, área de reação periosteal, através de estudos por microscopia óptica pela coloração Hematoxilina e Eosina. Análise quantitativa da expressão do RNAm de proteínas envolvidas no processo de reparo ósseo RANK, RANKL, OPG e VEGF, pelo método de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RealTimePCR) também foi realizada. A avaliação macroscópica mostrou que 91,66% dos animais do grupo AZ-C e 41,66% do grupo CO-C apresentaram solução de continuidade do epitélio, sendo estatisticamente significante maior no grupo em terapia com ácido zoledrônico pelo este exato de Fischer (p<0,05). Todos animais do grupo AZ-C e nenhum do grupo CO-C apresentaram sequestros ósseos e todos os animais apresentaram presença de restos radiculares na análise microscópica. A área de osteonecrose foi maior nos animais do grupo AZ-C do que no grupo CO-C (p<0,005), não havendo diferença estatística entre as áreas de espaço trabecular, reação periosteal e osso total. Na análise molecular de RANK, RANKL, OPG e VEGF não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos CO, AZ, COC e AZ-C, mesmo quando comparadas áreas de exodontia com áreas com dentes. Estes resultados levam a conclusão que o modelo animal utilizado no presente estudo é um modelo seguro, que o ácido zoledrônico interferiu no reparo ósseo dos alvéolos, causando um atraso na remodelação óssea da região e uma maior incidência de osteonecrose e sequestros ósseos. O ácido zoledrônico não afetou a expressão de RANK, RANKL, OPG e VEGF 105 dias após as exodontias. / The alveolar bone repair following extraction of maxillary molars in an animal model of bisphosphonate related osteonecrosis of the jaws in Wistar rats (Rattus norvegicus, Albinus) was assessed through microscopic and molecular analysis. A total of 48 rats (Rattus norvegicus, Albinus, Wistar rats) with 12 weeks old and weighing approximately 300 grams were used, they were divided into 4 groups. Each group consisted of 12 animals, with 2 experimental groups AZ and AZ-Cirúrgico (AZ-C), who underwent the administration of zoledronic acid, 0.6 mg / kg every 28 days with a total of 5 doses. And 2 control groups CO and CO-Cirúrgico (CO-C) with administration of sodium chloride at 0.9% in the same volume and frequency of zoledronic acid. All solutions were administered intraperitoneally. The group AZ-C and CO-C underwent to extraction of the first, second and third molars 45 days after the first application of the solutions. All animals were sacrificed after 150 days from the beginning of the experiment (105 days after extractions). The maxilla of the animals were assessed macroscopically for the presence of spontaneous lesions, and with a clinical probe number five the regions of the molar extractions were evaluated for the presence or absence of loss of continuity of the oral epithelium. After macroscopic evaluation, the upper left molar and contralateral side of the extraction regions of each animal were submitted to qualitative and quantitative analyzes for the presence of bone sequestrum, root fragments, osteonecrosis area, trabecular space area, area of periosteal reaction, through optical microscopic studies by hematoxylin and eosin staining. And quantitative analysis of mRNA expression of proteins involved in bone repair (RANK, RANKL, OPG and VEGF), by the method of RealTimePCR were carried out. Macroscopic evaluation showed that 91.66% of the AZ -C group and 41.66% of the CO-C group presented a loss of continuity of the epithelium, which was statistically significant higher in the zoledronic acid group according to the Fisher test (p<0.05). All animals in group AZ-C and none in CO-C group showed bone sequestrum and all animals in both groups had root fragments in microscopic analysis. The area of osteonecrosis was higher in the animals of AZ-C group than in CO-C (p<0.005), with no statistical difference between the areas of trabecular space, periosteal reaction and total bone. In the molecular analysis of RANK, RANKL, OPG e VEGF there was no statistically significant difference between the CO, AZ, CO-C e AZ-C groups, even when extraction regions were compared to non extractions areas. These results lead to the conclusion that the animal model described used in this study is a reliable model and zoledronic acid interferes with alveolar bone repair causing a delay in bone emodeling and a higher incidence of osteonecrosis and bone sequestrum. Zoledronic acid did not affect the expression of RANK, RANKL, OPG and VEGF 105 days after dental extractions.
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Cirurgia bariátrica no tratamento da obesidade com enfoque no metabolismo ósseo e na incidência de câncer

Casagrande, Daniela Schaan January 2013 (has links)
O objetivo dessa tese foi estudar alguns aspectos relacionados aos benefícios e prejuízos da cirurgia bariátrica. Para tanto, dois artigos são apresentados, visando avaliar as alterações no metabolismo ósseo após a cirurgia bariátrica através de um estudo de coorte e a incidência de câncer através de revisão sistemática e meta-análise. O artigo 1 intitulou-se “Alterações na densidade mineral óssea em mulheres após um ano da cirurgia de bypass gástrico” e teve como objetivo avaliar as alterações na densidade mineral óssea (DMO), composição nutricional e marcadores de reabsorção óssea antes e após 1 ano de gastroplastia redutora com derivação gastrojejunal em Y de Roux (GRYR). Foram incluídas 22 mulheres com obesidade classes II-III, idade 37,2 ± 9,6 anos, 86% brancas, 77,2% pré-menopáusicas. O índice de massa corporal pré-operatório (IMC) era 44,4 ± 5,0 Kg/m2 e após 1 ano, 27,5 ± 4,5 Kg/m2 (p <0,001). A 25-OH-vitamina D foi semelhante em ambos os momentos [11,7 (9,7-18,0) vs. 15,7 (10,2-2,7) pg/dL, p = 0,327]. Houve aumento do paratormônio (45,4 ± 16,7 vs. 62,7 ± 28,9 pg/ml, p=0,026) e do N-telopéptido sérico (16,3 ± 3,4 vs. 38,2 ± 7,0 nMBCE, p<0,001) no pós-operatório, evidenciando aumento de reabsorção óssea. A DMO diminuiu após a cirurgia na coluna lombar (1,13 ± 0,11 vs. 1,04 ± 0,09 g / cm ², p=0,001), colo do fêmur (1,03 ± 0,15 vs. 0,94 ± 0,16 g/cm ², p=0,001) e fêmur total (1,07 ± 0,11 vs. 0,97 ± 0,15 g/cm ², p=0,003. Concluímos que a deficiência de vitamina D e aumento de reabsorção óssea ocorreram precocemente após a cirurgia bariátrica, sendo parcialmente responsáveis pela redução de DMO observada nas pacientes. O artigo 2 intitulou-se “Incidência de câncer após a cirurgia bariátrica: revisão sistemática e meta-análise” e teve como objetivo fazer uma revisão sistemática com meta-análise de estudos observacionais para avaliar a possível associação da cirurgia bariátrica com o risco de câncer em pacientes no pós-operatório. Utilizamos as bases de dados Medline, Embase e Cochrane Library. De 898 estudos, 13 preencheram os critérios de inclusão (66.636 participantes). Nos estudos controlados, a cirurgia bariátrica foi associada à redução no risco de câncer (OR 0,42, IC 95% 0,24, 0,73, I2 = 93,3%, P para heterogeneidade <0,001). A taxa de incidência foi de 1,06 casos de câncer por 1000 pessoas-ano (IC 95% 0,64, 1,75, I2 = 96,0%; P para heterogeneidade <0,001) nos pacientes operados. Análises de sensibilidade por idade e sexo não mostraram diferenças. Na meta-regressão, verificou-se uma relação inversa entre o IMC inicial e a incidência de câncer após a cirurgia (beta coeficiente de -0,233, P <0,05). A cirurgia bariátrica se associa com redução do risco de câncer em indivíduos com obesidade grave. O acompanhamento a longo prazo de indivíduos que se submeteram à cirurgia bariátrica, com a devida publicação dos resultados, é de fundamental importância para determinar o diagnóstico e o tratamento dos possíveis efeitos adversos deste tipo de procedimento, assim como de igual importância é realizar estudos para avaliar o impacto da cirurgia bariátrica sobre o câncer, buscando o melhor equilíbrio entre vantagens e desvantagens.
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Estudo do consumo excessivo de aguardente de cana de açúcar na densidade mineral, espessura e resistência às fraturas ósseas em fêmures e tíbias de ratos adultos-jovens /

Silva, Aneliza de Fatima Moraes da. January 2016 (has links)
Orientador: Ana Maria Pires Soubhia / Banca: Wagner Garcez de Mello / Banca: Leonardo Perez Faverani / Resumo: O consumo excessivo de bebidas alcoólicas pode ocasionar problemas econômicos, sociais e psicológicos, além de ser prejudicial a muitos órgãos e tecidos, incluindo o tecido ósseo. O álcool é um fator de desequilíbrio entre a formação e a reabsorção óssea, entre osteoblastos e osteoclastos. Este estudo teve como objetivo analisar os efeitos do consumo excessivo de álcool no tecido ósseo de ratos tratado s com aguardente de cana de açúcar (cachaça), através da análise de fêmures e tíbias de ratos adultos - jovens . 24 ratos foram utilizados ( Rattus norvegicus, albinus, Wistar), divididos em 4 grupos de 6 ani mais, sep arados aleatoriamente, sendo: - Grupo com 90 dias de tratamento, grupo controle (GC90) e grupo experimental (GE90); e g rupo com 105 dias de tratam ento, grupo controle (GC105) e grupo experimental (GE105) . Após tratamento e eutanásia, os fêmures e tíbias foram submetidos as análises radiogr áficas, densitometria óssea e teste biomecânico, respectivamente, avaliados através do Sistema Digital Digora, DEXA (Dual - Energy X - ray Absorptiometry) e Ensaio mecânico. Os dados obtidos foram submeti dos ao test e homocedasticidade com significância de 5% e realizada a nálise de variância - ANOVA - two - way e pós - teste Tukey. Os animais do s grupo s controle s apresentaram maior espessura óssea total e cortical, maior densidade óssea e conteúdo mineral ósseo (p<0,05), assim co mo maior resistência a fraturas comparados com os grupos experimentais. A inda, observou - se que além do padr ão de consumo os efeitos do etilismo sobre o tecido ósseo são influenciados pelo tempo de exposiç ão ao álcool . Conclui - se, assim, qu e o consumo excessivo de aguardente de cana de açúcar além de ocasionar danos ao tecido ósseo, exerce efeito dose dependente nos parâmetros estudados em ratos adultos - jovens. / Abstract: The excessive consumption of alcoholic beverages can cause economic, problems social and psychological, in addition to being harmful to many organs and tissues, including the bone tissue. Alcohol is a factor of an imbalance between the formation and bone resorption, between osteoblasts and osteoclasts. This study aimed to analyze the effects of excessive alcohol consumption in bone tissue of rats treated with Sugarcane brandy (Sugarcane liquor, aqua vitae), through examinations o f femurs and tibias. T wenty - four animals were used (Rattus norvegicus, albinus, Wistar) wer e divided in 4 groups of 6 animals, randomly divided into: - Group with 90 days of treatment, control group (GC90) and experimental group (GE90); and group with 105 days of treatment, control group (GC105) and experimental group (GE105). After treatment and euthanasia, the femurs and tibias radiographic analyzes were submitted, bone densitometry and biomechanical test, respectively, evaluated by Digora Digital System, DEXA (Dual - Energy X - ray Absorptiometry) and mechanical testing. The data were submitted to the homoscedasticity test with 5% significance and performed analysis of variance - ANOVA - two - way and Tukey test . Control group animals showe d highe r total and cortical bone thickness, higher bone density and bone mineral content (p<0,05), as well as greater resistance to fractures comparad to the experimen tal groups. Furthermore, it was observed that in addition to the consumption pattern, the effects of alcohol on bone tissue are influenced by the time of exposure to alcohol. Concluded that the excessive consumption of Sugarcane brandy besides causing damage to the bone tissue exerts dose - dependent effect on the parameters studied in young adult rats. / Mestre
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Relação do perfil da ingestão alimentar com densidade mineral e marcadores ósseos em mulheres idosas / Relationship of the dietary intake profile with mineral density and bone markers in elderly women

Destefani, Silvia Andréa [UNESP] 20 February 2017 (has links)
Submitted by SILVIA ANDREA DESTEFANI null (s.destefani@terra.com.br) on 2017-03-17T00:15:17Z No. of bitstreams: 1 TESE-CORREÇÃO-13-03-17.pdf: 1720076 bytes, checksum: 9fe093290b4ca4cc10befd499d0c872b (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-03-21T18:45:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 destefani_sa_dr_bot.pdf: 1720076 bytes, checksum: 9fe093290b4ca4cc10befd499d0c872b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-21T18:45:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 destefani_sa_dr_bot.pdf: 1720076 bytes, checksum: 9fe093290b4ca4cc10befd499d0c872b (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Introdução: A osteoporose representa um problema de saúde pública em todo o mundo, acometendo particularmente a população feminina acima dos 50 anos de idade. A perda óssea que ocorre com o processo de envelhecimento é devida a várias causas, mas pode ser agravada pelo fornecimento inadequado de nutrientes essenciais para a formação e manutenção do tecido ósseo. Todavia, pouco se sabe sobre o perfil nutricional dos grupos populacionais de risco para a osteoporose, bem como sobre a relação entre esse perfil e parâmetros relacionados à saúde óssea. Objetivos: Avaliar a associação entre dieta recente e saúde óssea, especificamente densidade mineral e marcadores de remodelação ósseos, em um grupo de pacientes do sexo feminino, com mais de 60 anos de idade. Métodos: Foi realizado estudo observacional e transversal, com um grupo de 105 mulheres idosas quanto a características dietéticas, densitométricas e quanto a marcadores de remodelação óssea, investigando a presença de relação entre esses parâmetros. As características dietéticas avaliadas foram: a ingestão de macronutrientes e energia, dos minerais cálcio (Ca) e fósforo (P), das vitaminas A, D, E e K, de alimentos, por grupos alimentares, bem como a qualidade da dieta. A densidade mineral óssea (DMO) foi avaliada em colo de fêmur, fêmur total e coluna lombar, sendo considerados a DMO, em g/cm2, e o desvio padrão em relação ao adulto jovem (T-escore). Foram avaliadas as concentrações séricas dos marcadores de remodelação fosfatase alcalina – fração óssea (FAo) e C-telopeptídeo (CTX). Resultados: Com relação à qualidade da dieta, 58 pacientes (55,2%) apresentaram má qualidade e 47 (44,8%) necessitaram de melhorias, não tendo sido observado pessoas com dieta de boa qualidade. O grupo necessitando de melhorias apresentou concentrações menores de CTX [0,35 (0,05;1,09) vs 0,52 (0,10;1,45); p= 0,03)] e FAo (38,7 ± 12,9 U/L vs 46,10 ± 15,2 U/L; p< 0,01) do que o com dieta de má qualidade. Não foram observadas diferenças entre os grupos com relação à DMO (p> 0,05). Na análise univariada, foram observadas correlações, negativa entre o consumo de leite/derivados e as concentrações de FAo (r= -0,20, p= 0,04), e positiva entre o de legumes/verduras e as de CTX (r= 0,21, p= 0,03), que não se mantiveram na multivariada. Não foram encontradas outras associações significantes entre os demais parâmetros avaliados. Conclusões: Observou-se relação entre a dieta recente e saúde óssea. As pacientes com pior qualidade da dieta apresentaram maiores concentrações de marcadores de remodelação óssea, com a ingestão de leite/derivados tendo apresentado associação negativa com FAo e a de legumes/verduras positiva com CTX, na análise univariada, associações que não se mantiveram na análise multivariada. Não foram observadas associações da DMO ou dos marcadores de remodelação com a ingestão de macronutrientes, minerais Ca e P ou vitaminas A, D, E e K. / Introduction: Osteoporosis is a global health problem that affects mostly women aged more than 50 years. Age-related bone loss is multifactorial, but it can be worsened by inadequate intake of essential nutrients for bone formation and maintenance. Nonetheless, little is known about the nutritional profile of population groups at risk of osteoporosis or about the relationships between such profile and bone health parameters. Objectives: To assess the association between recent diet and bone health, especially bone mineral density and remodeling markers, in a group of females aged more than 60 years. Methods: This cross-sectional study investigated the dietary and bone density characteristics, and the bone remodeling markers of 105 older women, and whether those parameters were interrelated. The study dietary characteristics were: dietary intakes (by food groups) of macronutrients, energy, calcium (Ca), phosphorus (P), and vitamins A, D, E, and K, and quality diet. The bone mineral density (BMD) in g/cm2 of the femoral neck, total femur, and lumbar spine were determined, along with their standard deviation from those of young adults (Tscore). Serum levels of the remodeling markers bone-specific alkaline phosphatase (BSAP) and C-terminal telopeptide (CTx) were measured. Results: Fifty-eight patients (55.2%) had poor diet quality, and the diets of 47 (44.8%) patients needed improvement. No patient had good quality diet. The group that required improvement had lower levels of CTx [0.35 (0.05;1.09) vs 0.52 (0.10;1.45); p= 0.03)] and BSAP (38.7 ± 12.9 U/L vs 46.10 ± 15.2 U/L; p< 0.01) than the group with low quality diet. The DMO of the two groups did not differ (p> 0.05). According to univariate analysis, the intake of milk and dairy products was negatively correlated with BSAP level (r= -0.20, p= 0.04), and the intake of vegetables was positively correlated with CTx level (r= 0.21, p= 0.03), but these correlations disappeared in multivariate analysis. Significant associations between the other study parameters were not found. Conclusions: Recent diet was related to bone health. Patients with worse quality diet had higher levels of bone remodeling markers. In univariate analysis, milk and dairy product intake was negatively associated with BSAP, and vegetable intake was positively associated with CTx. However, these associations disappeared in multivariate analysis. BMD and bone remodeling markers were not associated with the intake of macronutrients, Ca, P, or vitamins A, D, E, and K.

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