Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-28 / O efeito estimulante do etanol (EtOH) está associado ao aumento de atividade dos neurônios dopaminérgicos nas vias mesolímbica e mesocortical, sendo este processo modulado pelo sistema serotoninérgico, particularmente pelo receptor 5-HT2C. Este receptor parece também ter um papel importante no processo de sensibilização comportamental ao efeito estimulantede psicoestimulantes.O objetivo deste trabalho foi comparar animais sensibilizados e não sensibilizados ao efeito estimulante do etanol quanto à sua resposta locomotora a administrações sistêmica (i.p.) e intra núcleo accumbens (intra-NAc) de um antagonista específico deste receptor (SB-242084) e, também, em relação à expressão gênica dos receptores 5-HT2C na via mesolimbocortical.Foram utilizados camundongos machos da linhagem Suíços Albino provenientes do CEDEME-UNIFESP com idade entre 75 a 90 dias antes de todos os experimentos. Em todos os experimentos, os animais foram tratados diariamente por 21 dias com etanol (2,2 g/kg) ou salina i.p., semanalmente testadosquanto aos níveis de atividade locomotora durante o tratamento, sendo classificados em sensibilizados ou não sensibilizados no 21º dia. Duas semanas após o término desta fase de indução da sensibilização, diferentes grupos de camundongos foram submetidos a quatro desafios farmacológicos (i.p. /i.p. ou intra NAc/i.p) na seguinte ordem: a) salina + salina; b) salina + EtOH (2,2g/kg); c) SB-242084 (0,5; 1,0 ou 2,0 mg/kg i.p. ou 1,0 ou 2,0 μg se intra-NAc) + EtOH (2,2 g/kg) ou salina; d) SB-242084 (idem anterior) + salina. Antes dos experimentos com a administração intra NAc os animais foram submetidos a procedimento cirúrgico para a implantação de cânulas-guia. A administração sistêmica de SB-242084 não afetou os níveis de atividade locomotora dos animais em relação aos seus próprios níveis sob etanol + salina. Por outro lado, a administração intra NAc atenuou a expressão da sensibilização comportamental induzida por etanol. A quantificação da expressão gênica dos receptores 5-HT2C em amostras da Área Tegmental Ventral (ATV), Núcleo Accumbens (NAc) e Córtex Pré Frontal Medial (CPFm) foi realizada utilizando-se outro grupo de animais submetidos ao mesmo tratamento de 21 dias para indução da sensibilização. Os animais sensibilizados apresentaram maiores níveis de expressão do gene 5-HT2C na ATV do que animais não sensibilizados ou controle. No CPFm e no NAc, os amuundongos não sensibilizados apresentaram menores níveis de expressão do 5-HT2C do que os sensibilizados ou controle. Esses dados sugerem que os receptores 5-HT2C possam ter um importante papel na modulação do efeito estimulante induzido por etanol e que sua atividade no NAc seja crítica para a expressão da sensibilização comportamental. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:23:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissGCS.pdf: 483128 bytes, checksum: f89fd5c8f1141c0a1005cce46caa511c (MD5) Previous issue date: 2005-06-06 / Behavioral sensitization is a progressive and enduring enhancement of the motor stimulant effects of psychostimulants and other drugs of abuse, elicited by repeated administration of these drugs. This phenomenon has been extensively studied in experimental animals and has been implicated as a key component in drug addiction. Nicotine and psychostimulants are often abused in combination. The aim of the present study was to examine the cross-sensitization between nicotine and amphetamine in rats exposed to repeated treatment with the drugs during adolescence. We evaluated the effects of the treatment with nicotine (0.4 mg/kg; s.c.) or amphetamine (5.0 mg/kg, i.p.) from postnatal day (P) 28 P34 on amphetamine- (1.0, 2.5, 5.0 mg/kg, i.p.) or nicotine induced locomotor activity 3 (P37) or 10 days (P44) after drug treatment ended. Further, the effects of amphetamine or nicotine were examined 36 days (P70) after nicotine or amphetamine treatments to determine whether the effects of drug exposure during periadolescence persisted into adulthood. Adolescent animals pretreated with amphetamine were sensitized to the locomotor-activating effects of nicotine. Moreover, the pretreatment with nicotine during adolescence increased locomotor activity induced by 5.0 mg/kg of amphetamine. Although adult rats are less sensitive to nicotine, this drug significantly increased the locomotor activity in adult rats that were pretreated with amphetamine during adolescence. In addition, in adult rats, the pretreatment with nicotine during adolescence increased locomotor activity induced by 1.0 mg/kg of amphetamine. These data suggest the crossensitization between amphetamine and nicotine in adolescent rats. Moreover, the sensitization is long-lasting and persists until adulthood. / A sensibilização comportamental é caracterizada pelo aumento progressivo e duradouro da atividade locomotora induzida pelos psicostimulantes e outras substâncias de abuso, decorrente da administração repetida dessas substâncias. Esse fenômeno tem sido extensivamente estudado em animais experimentais e tem sido implicada como um componente fundamental na dependência a substâncias psicoativas. Nicotina e psicostimulantes são sempre utilizados em combinação. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a sensibilização cruzada entre nicotina e anfetamina em ratos expostos ao tratamento repetido com essas substâncias na adolescência. Nós avaliamos o efeito do tratamento com nicotina (0,4 mg/kg; s.c.) ou anfetamina (5 mg/kg, i.p.) do dia pós natal (P) 28-34 sobre os efeitos na atividade locomotora induzida pela anfetamina (1,0; 2,5; 5,0 mg/kg, i.p.) ou nicotina 3 (P37) e 10 (P44) dias após o término do tratamento. Além disso, os efeitos da anfetamina ou nicotina foram avaliados 36 dias (P70) após os tratamentos com nicotina ou anfetamina para determinar se os efeitos da exposição da exposição às substâncias na adolescência persistiam até a idade adulta. Os animais adolescentes pré-tratados com anfetamina foram sensibilizados aos efeitos sobre a atividade locomotora induzidos pela nicotina. Além disso, o pré-tratamento com nicotina na adolescência aumentou a atividade locomotora induzida por 5,0 mg/Kg de anfetamina. Apesar de ratos adultos serem menos sensíveis à nicotina, essa substância aumentou significativamente a atividade locomotora em ratos adultos pré-tratados com anfetamina na adolescência. E ainda, em ratos adultos, o prétratamento com nicotina na adolescência aumentou a atividade locomotora induzida por 1,0 mg/Kg de anfetamina. Esses resultados sugerem a sensibilização cruzada entre anfetamina e nicotina em ratos adolescentes. Além disso, que a sensibilização é duradoura e persiste até a idade adulta.

O enriquecimento ambiental (EA) reverte a sensibilização comportamental (SC) ao etanol em camundongos e diminui os níveis de BDNF no córtex pré-frontal (CPF). O objetivo deste trabalho foi estudar os efeitos do EA sobre parâmetros comportamentais, resposta de corticosterona ao estresse, expressão de microRNAS e a participação da via BDNF-TrkB no CPF frente à SC ao etanol. Camundongos mantidos em EA foram submetidos a testes comportamentais (ansiedade, depressão, anedonia e comportamentos repetitivos). Também foram tratados repetidamente com etanol e expostos ao EA para a avaliação da corticosterona plasmática e da expressão de microRNAs no CPF. A via BDNF-TrkB foi inibida no CPF de camundongos que desenvolveram a SC ao etanol. O EA diminuiu a atividade locomotora e exploratória, a ativação do eixo HPA após estresse agudo, aumentou o peso do baço e diminuiu a expressão de miR-132 e let-7d. Os resultados sugerem o envolvimento de microRNAs na reversão da SC ao etanol; contudo, a via BDNF-TrkB no CPF não parece estar diretamente envolvida neste processo. / The environmental enrichment (EE) reverts the ethanol-induced behavioral sensitization (EIBS) in mice and decreases BDNF levels in the prefrontal cortex (PFC). The aim of this work was to evaluate the effects of EE on behavioral parameters, on the corticosterone response to stress and on microRNA expression and to assess the involvement of the BDNF-TrkB pathway in the PFC on the EIBS. Mice kept in EE were submitted to behavioral tests (anxiety, depression, anhedonia and repetitive behaviors). Mice were also treated repeatedly with ethanol and exposed to EE for the assessment of plasma corticosterone levels and microRNA expression in the PFC. The BDNF-TrkB pathway was blocked in the PFC of mice that developed EIBS. EE decreased locomotion, exploratory activity and HPA axis activation after acute stress, increased spleen weight and decreased miR-132 and let-7d expression. The results suggest the involvement of microRNAs in the reversal of EIBS promoted by EE; however, the BDNF-TrkB pathway in the PFC does not seem to be directly involved in this process.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-28 / Associação Fundo de Incentivo à Psicofarmacologia (AFIP) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A sensibilização comportamental refere-se ao aumento progressivo do efeito estimulante induzido após repetidas administrações de drogas de abuso como cocaína e anfetaminas. Estudos prévios sugerem que o ambiente pareado aos efeitos destas drogas parece ter um importante envolvimento no fenômeno da sensibilização comportamental. Além disso, o tratamento com uma droga de abuso pode interferir com a resposta comportamental eliciada por outra, quando essas possuirem algum mecanismo de ação comum. O presente estudo teve como objetivo investigar o envolvimento da aprendizagem contextual no fenômeno da sensibilização comportamental induzida pelo modafinil e metanfetamina e se haveria uma sensibilização cruzada entre as duas drogas. Os animais foram treinados e testados na tarefa do condicionamento de medo ao contexto (CMC). Após 15 dias foi realizado o teste da novidade, sem nenhuma manipulação farmacológica, às caixas de atividade locomotora. Para avaliar o desenvolvimento da sensibilização comportamental, após 24 horas do teste da novidade grupos diferentes de animais receberam injeções diárias de modafinil (50mg/kg) ou veículo (Experimento 2) e metanfetamina (1mg/kg) ou salina (Experimento 3) via ip por 10 dias e a atividade locomotora foi registrada nos dias 1, 5 e 10. Para avaliar a expressão da sensibilização comportamental, todos os animais foram desafiados com veículo e modafinil (50mg/kg - Experimento 2) e salina e metanfetamina (1mg/kg - Experimento 3) nas caixas de atividade e no campo aberto. No teste de sensibilização cruzada animais pré-tratados com veículo e modafinil receberam uma dose aguda de metanfetamina (Experimento 2) e animais pré-tratados com salina e metanfetamina receberam uma dose aguda de modafinil (Experimento 3). Em ambos os experimentos foi verificado um aumento progressivo na atividade locomotora e uma evidente diferença individual nos níveis de sensibilização comportamental entre os animais tratados com as drogas. Nos experimentos 2 e 3, todos os animais apresentaram resposta similar de tempo de congelamento no teste CMC. A expressão da sensibilização ao modafinil foi observada no ambiente previamente pareado com as administrações e foi bloqueada no ambiente não pareado. No caso da metanfetamina a expressão ocorreu em ambos ambientes. Também foi observado sensibilização cruzada simétrica entre modafinil e metanfetamina. Os resultados do presente estudo apontam para um envolvimento da aprendizagem contextual na sensibilização comportamental, porém parece não ser generalizado para todas as drogas psicoestimulantes. Além disso, apontam que existe uma grande variabilidade individual ao desenvolvimento da sensibilização comportamental ao modafinil e à metanfetamina. Ainda pode-se sugerir que exista um mecanismo similar de ação entre o modafinil e a metanfetamina. / The behavioral sensitization refers to the progressive increase of the stimulatory effect induced by repeated administration of drugs of abuse such as cocaine and amphetamine. Previous studies suggest that the environment paired with the drug stimulant effect of those drugs has an important role in the behavioral sensitization phenomena. Besides, the chronic treatment with one drug of abuse can induce a different patter of response to the administration of other drug indicating that both drug share some similar mechanism of action. The present study aimed to investigate the involvement of contextual learning in the modafinil and methamphetamine behavioral sensitization phenomena and if there is cross-sensitization between the two drugs. Fifteen days after the contextual fear conditioning task, mice received repeated administration of vehicle or modafinil (50mg/kg - Experiment 2) and saline or methamphetamine (1mg/kg - Experiment 3) for 10 days; they were tested in activity cages on days 1, 5 and 10. To evaluate the expression of behavioral sensitization the mice were challenged with vehicle or modafinil (50mg/kg - Experiment 2) and saline or methamphetamine (1 mg/kg - Experiment 3) and then they were tested in the activity cages and in the open field arena. For cross-sensitization test, mice from Experiment 2 were challenged with saline and methamphetamine (1mg/kg) and those mice from Experiment 3 were challenged with vehicle and modafinil (50mg/kg). In both experiments we did not find any correlation between the levels of freezing in the contextual fear conditioning task and different levels of sensitization. Modafinil-sensitized subgroup of mice expressed clear behavioral sensitization in the activity cage, but not in the open field, suggesting a context-dependent expression of modafinil sensitization. We also observed a symmetric cross-sensitization between modafinil and methamphetamine. Our findings indicate that there are a important individual variability to the development of behavioral sensitization to methamphetamine and to modafinil. Besides, we suggest that modafinil and methamphetamine seem to share similar mechanisms of action. / FAPESP: 08/56049-0 / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2282.pdf: 1838286 bytes, checksum: 7d4dd1d44a59556a7f728e6a88087367 (MD5) Previous issue date: 2009-03-05 / Universidade Federal de Minas Gerais / We investigated the interaction between ontogeny, stress and environment where the drug is administered on the behavioral sensitization to cocaine and related neuroadaptations. This study was divided in two parts. In the first one we evaluated the behavioral sensitization to cocaine and alterations of glutamate receptors and tyrosine hydroxylase enzyme following repeated cocaine administrations or stress exposure on adolescent rats. These alterations were evaluated from adolescence to adulthood. The results showed that cocaine administration during adolescence produced long-term behavioral sensitization to cocaine until adulthood and increased of GluR1 glutamate receptor subunit in the medial prefrontal cortex. The stress-induced behavioral sensitization was evident during adolescence but did not reach adulthood. In the second part, we evaluated the environmental modulation of behavioral sensitization to cocaine and alterations of CREB and upstream kinases activation in adult rats. The results showed that the expression of cocaine-induced behavioral sensitization was specific to the environment paired with previous cocaine administration. Moreover, the number of neurons with CREB activation in the nucleus accumbens was increased in sensitized animals and specific to the paired environment. Thus, our results add new findings on addiction related alterations in adolescent animals, its long-term effects and the environmental modulation of cocaine behavioral and neuronal sensitization. / Investigamos a influência da ontogênese, do estresse e do ambiente onde a substância psicoativa é administrada sobre a sensibilização comportamental à cocaína e o desenvolvimento de neuroadaptações. Para tanto, esse trabalho de tese foi dividido em duas partes. Na primeira, avaliamos os efeitos da administração repetida à cocaína ou exposição ao estresse em ratos adolescentes na sensibilização comportamental à cocaína e neuroadaptações dos receptores de glutamato e da enzima tirosina hidroxilase. Essas alterações foram avaliadas durante a adolescência e também acompanhadas até a idade adulta. Demonstramos nesses experimentos que a administração repetida de cocaína durante a adolescência provoca sensibilização comportamental que perdura até a idade adulta e causa aumento da proteína GluR1 dos receptores glutamatérgicos no córtex pré-frontal medial. A exposição ao estresse provoca sensibilização comportamental em adolescentes, mas esse efeito não permanece até a idade adulta. Na segunda parte da tese, avaliamos a influência do pareamento do ambiente onde a cocaína é administrada sobre a expressão da sensibilização comportamental a essa substância e alterações de CREB e enzimas cinases que ativam CREB em ratos adultos. Demonstramos que o pareamento do ambiente com as administrações de cocaína facilita a expressão da sensibilização comportamental. A sensibilização comportamental dependente do ambiente está relacionada ao aumento do número de neurônios com ativação de CREB no núcleo acumbens dos animais. Portanto, nosso estudo pretende contribuir para o entendimento de alterações relacionadas à dependência em animais adolescentes, seus efeitos duradouros e a influência do ambiente onde a substância é administrada.

Vários estudos clínicos demonstram que existem fatores adicionais ao efeito reforçador primário das drogas que determinam por que alguns indivíduos permanecem usuários ocasionais, enquanto outros progridem para a farmacodependência. Evidências clínicas apontam o estresse como uma variável importante na iniciação, manutenção e recaída ao uso da cocaína ou morfina. Em roedores, a cocaína induz a sensibilização comportamental que se caracteriza pelo aumento progressivo da atividade motora no decorrer do seu uso prolongado. Esse fenômeno é um dos eventos que emergem no decurso temporal das adaptações que levam à farmacodependência. Recentemente foi sugerido que a sensibilização é a gênese do uso compulsivo de drogas. Muitos estudos revelam que o estresse induz a sensibilização comportamental cruzada com os psicostimulantes. O objetivo desse trabalho foi avaliar a sensibilização cruzada entre o estresse e a cocaína, bem como os mecanismos neurais subjacentes. Para tanto foram avaliados as concentrações plasmáticas da corticosterona, a atividade locomotora basal e a induzida por cocaína, e a atividade da PKA nos animais expostos aos estresses agudo ou crônico, previsível ou imprevisível. A exposição ao estresse crônico previsível (EP) aumentou a atividade locomotora basal e a induzida por cocaína. A exposição ao EP aumentou as concentrações basais da corticosterona mas não alterou a atividade da PKA no núcleo acumbens e no corpo estriado. Assim, podemos concluir que a exposição a EP induziu sensibilização comportamental cruzada à cocaína, sendo que esse efeito não se correlacionou com as alterações na atividade da PKA. / A potential etiologic factor in substance abuse is stress, and it is possible that chronic exposure to stressful life’s events is related to the development of drug dependence and relapse. Behavioral sensitization is defined as an augmentation of a response to a drug during repeated drug exposure. Behavioral sensitization has been shown to occur to the locomotor and reinforcing effects of cocaine, amphetamine and other drugs of abuse. It has been suggested that sensitization is the genesis of compulsive drug use. Converging evidence suggests that exposure to stress induces behavioral sensitization to psychostimulant drugs. The present study investigates behavioral and molecular aspects of the cross-sensitization between stress and cocaine. We evaluated the basal and cocaine-induced locomotor activity, corticosterone plasma levels and protein kinase cAMP-dependent (PKA) activity in animals exposed to acute or chronic predictable and unpredictable stress. Increased basal and cocaine-induced locomotor activity was observed in animals exposed to chronic predictable stress. Chronic predictable stress increased basal corticosterone levels but did not change protein kinase A activity in both accumbens and striatum. In conclusion, predictable stress produced sensitization to locomotor effects of cocaine but this effect did not correlate with changes in PKA activity.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O condicionamento entre os efeitos farmacológicos de drogas de abuso e os contextos ambientais nos quais tais efeitos são experienciados tem se mostrado um processo crítico para o desenvolvimento e especialmente a recaída da dependência química. Assim, a extinção desse condicionamento parece ser fundamental para o tratamento da dependência química. Paralelamente, nosso grupo de pesquisa tem demonstrado que os efeitos farmacológicos de neurolépticos (isto é, drogas bloqueadoras de receptores dopaminérgicos) também podem estar sujeitos ao condicionamento ambiental. Esse fato descortina a possibilidade de estratégias que aliem processos de extinção aos efeitos farmacológicos de neurolépticos para o tratamento da dependência química. Não obstante, o tratamento repetido com neurolépticos típicos é capaz de promover um aumento compensatório de receptores dopaminérgicos, que poderia intensificar os efeitos reforçadores das drogas de abuso. De importância, todavia, essa supersensibilidade dopaminérgica parece não ocorrer com neurolépticos de 2ª e 3ª geração, como, por exemplo, a ziprasidona e o aripiprazol. Esta tese teve como proposição a investigação da possível efetividade de estratégias que aliem a extinção ao tratamento com ziprasidona ou aripiprazol em um modelo animal de dependência química: a sensibilização comportamental. Como drogas de abuso foram utilizadas a cocaína e o etanol. Resumidamente, camundongos Swiss fêmeas foram tratados repetidamente com as respectivas drogas de abuso, com injeções pareadas ao ambiente de observação e, após o término do tratamento, a droga de abuso foi substituída pelo neuroléptico, administrado de forma pareada ou não ao ambiente. Após o término do tratamento com o neuroléptico, os animais receberam uma injeção desafio da droga de abuso para a quantificação da expressão da sensibilização da atividade locomotora. Nossos resultados mostraram que o tratamento repetido com ziprasidona atenuou a expressão da sensibilização comportamental à cocaína e ao etanol apenas quando a administração do neuroléptico foi realizada de forma pareada ao ambiente. Já o tratamento repetido com aripiprazol atenuou a expressão da sensibilização comportamental à cocaína também apenas quando realizado de forma pareada ao ambiente, mas atenuou a sensibilização ao etanol independentemente da exposição ao ambiente previamente associado ao efeito dessa droga de abuso. Os dados demonstram o potencial terapêutico da estratégia proposta na presente tese e revelam um importante papel do condicionamento ambiental para que essa estratégia atinja completa eficácia. / It has been shown that conditioning between the pharmacological effects of drugs of abuse and the environmental context in which these effects are experienced is a critical process for the development of addiction and especially for relapse. Thus, extinction of this conditioning appears to be critical in the search for an effective treatment of addiction. In parallel, our research group has demonstrated that the pharmacological effects of neuroleptics (i.e., dopamine antagonists) can also be conditioned to an environment. These facts raise the possibility of using new strategies allying extinction processes with the pharmacological effects of neuroleptics for the treatment of addiction. Notwithstanding, repeated treatment with typical neuroleptics may produce a compensatory up-regulation of dopamine receptors that could intensify the reinforcing effects of drugs of abuse. Importantly, this dopaminergic supersensitivity does not seem to develop after treatment with neuroleptics of 2nd and 3rd generations, such as ziprasidone and aripiprazole. This thesis aimed to investigate the possible efficacy of strategies allying extinction with treatment with ziprasidone or aripiprazole on an animal model of addiction: behavioral sensitization. Cocaine and ethanol were the drugs of abuse chosen for this study. Briefly, Swiss female mice were repeatedly treated with the drug of abuse, with injections paired to the test environment and, after this treatment was finished, the drug of abuse was replaced by one of the neuroleptics, which was administered in the test environment or in the home cage. When the neuroleptic treatment finished, the animals received a challenge injection of the drug of abuse to verify the expression of locomotor sensitization. Our results showed that repeated treatment with ziprasidone attenuated the expression of cocaine- and ethanol-induced behavioral sensitization only when neuroleptic administration occurred within the context previously paired with cocaine or ethanol treatment. On the other hand, aripiprazole treatment attenuated cocaine-induced behavioral sensitization only when it was paired with the environment previously associated with cocaine, but attenuated ethanol-induced behavioral sensitization irrespectively of the context in which the neuroleptic treatment occurred. These data demonstrate the therapeutic potential of the strategy proposed in this thesis and attribute an important role for the environmental conditioning to achieve complete efficacy in this strategy. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:11Z : No. of bitstreams: 1 Publico-12803.pdf: 1327527 bytes, checksum: 4fb071f9df6c6a7299fea37a3cbfb20a (MD5) / As orexinas são dois neuropeptídeos, orexina-A e orexina-B, derivados do mesmo gene precursor (pré-pro-orexina), produzidos em alguns milhares de neurônios localizados na área perifornicial do Hipotálamo lateral. Apesar de ter uma produção restrita ao hipotálamo, os neurônios orexinérgicos projetam-se amplamente para todo o cérebro regulando uma série de funções endócrinas e homeostáticas. Evidências recentes, no entanto, mostram o envolvimento do sistema da orexina no circuito de recompensa. Neste estudo avaliamos o envolvimento do sistema da orexina na sensibilização comportamental induzida por etanol. No experimento 1 foi utilizado o modelo de sensibilização comportamental e os animais do grupo salina, agudo (uma administração de EtOH) e crônico (7 administrações de EtOH) foram tratados durante 14 dias para verificar o desenvolvimento de sensibilização comportamental; após o término do tratamento os animais foram perfundidos e a imunorreatividade de duplas marcações para orexina e c-Fos foi avaliada pela técnica de imunohistoquímica. No experimento 2 foi utilizado o modelo de sensibilização comportamental para verificar se o antagonista de receptor do tipo 1 da orexina, SB 334867, bloqueia esse fenômeno. No primeiro experimento não houve diferença estatística entre os grupos salina, agudo e crônico quanto à ORX+c-Fos-IR; porém os animais tratados cronicamente com EtOH apresentaram uma tendência de aumento da dupla marcação de neurônios orexinérgicos indicando que o desenvolvimento da sensibilização comportamental produz ativação desses neurônios; além disso, os animais tratados cronicamente com etanol desenvolveram a sensibilização comportamental. No segundo experimento, o SB 334867 bloqueou a expressão deste fenômeno, indicando que o sistema orexinérgico parece influenciar de maneira importante o processo de sensibilização comportamental, já que a administração sistêmica do SB334867 bloqueou a expressão da sensibilização comportamental aos efeitos estimulantes do etanol em camundongos machos. / Orexins are two neuropeptides, orexin-A and orexin-B, derived from the same precursor gene (pre-pro-orexin) produced by a few thousand neurons located in the perifornical area of the lateral hypothalamus. Despite having a restricted production, orexinergic neurons project widely to brain structures that regulate a number of endocrine and homeostatic functions. Recent evidence suggests the involvement of the orexin system in the reward circuit. We evaluated the role of this system in ethanol-induced behavioral sensitization. In Experiment 1 was used the behavioral sensitization model (development), in which animals were chronically treated for 14 days with saline, acute ethanol after saline treatment or with ethanol (seven administration) to induce behavioral sensitization; at the end of the treatment animals were perfused and immunohistochemistry technique was used to determine double staining for orexin and c-Fos (ORX+c-Fos-IR). In Experiment 2 behavioral sensitization was induced and SB 334867, an orexin-1 receptor antagonist, was used to examine whether it could block the expression of this phenomenon. The results of Experiment 1 showed no statistical difference among the groups (saline, acute and chronic) as to ORX+c-Fos-IR, although animals chronically treated with EtOH exhibited an trend to more double staining of orexin neurons indicating that this treatment regimen activates this neuropeptide system. In the second experiment, SB 334867 blocked the expression of this phenomenon. The orexin system seems to influence the process of behavioral sensitization, since systemic administration of SB 334867 blocked the expression of this phenomenon induced by a stimulant dose of ethanol in male mice. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Vários estudos clínicos demonstram que existem fatores adicionais ao efeito reforçador primário das drogas que determinam por que alguns indivíduos permanecem usuários ocasionais, enquanto outros progridem para a farmacodependência. Evidências clínicas apontam o estresse como uma variável importante na iniciação, manutenção e recaída ao uso da cocaína ou morfina. Em roedores, a cocaína induz a sensibilização comportamental que se caracteriza pelo aumento progressivo da atividade motora no decorrer do seu uso prolongado. Esse fenômeno é um dos eventos que emergem no decurso temporal das adaptações que levam à farmacodependência. Recentemente foi sugerido que a sensibilização é a gênese do uso compulsivo de drogas. Muitos estudos revelam que o estresse induz a sensibilização comportamental cruzada com os psicostimulantes. O objetivo desse trabalho foi avaliar a sensibilização cruzada entre o estresse e a cocaína, bem como os mecanismos neurais subjacentes. Para tanto foram avaliados as concentrações plasmáticas da corticosterona, a atividade locomotora basal e a induzida por cocaína, e a atividade da PKA nos animais expostos aos estresses agudo ou crônico, previsível ou imprevisível. A exposição ao estresse crônico previsível (EP) aumentou a atividade locomotora basal e a induzida por cocaína. A exposição ao EP aumentou as concentrações basais da corticosterona mas não alterou a atividade da PKA no núcleo acumbens e no corpo estriado. Assim, podemos concluir que a exposição a EP induziu sensibilização comportamental cruzada à cocaína, sendo que esse efeito não se correlacionou com as alterações na atividade da PKA. / A potential etiologic factor in substance abuse is stress, and it is possible that chronic exposure to stressful life’s events is related to the development of drug dependence and relapse. Behavioral sensitization is defined as an augmentation of a response to a drug during repeated drug exposure. Behavioral sensitization has been shown to occur to the locomotor and reinforcing effects of cocaine, amphetamine and other drugs of abuse. It has been suggested that sensitization is the genesis of compulsive drug use. Converging evidence suggests that exposure to stress induces behavioral sensitization to psychostimulant drugs. The present study investigates behavioral and molecular aspects of the cross-sensitization between stress and cocaine. We evaluated the basal and cocaine-induced locomotor activity, corticosterone plasma levels and protein kinase cAMP-dependent (PKA) activity in animals exposed to acute or chronic predictable and unpredictable stress. Increased basal and cocaine-induced locomotor activity was observed in animals exposed to chronic predictable stress. Chronic predictable stress increased basal corticosterone levels but did not change protein kinase A activity in both accumbens and striatum. In conclusion, predictable stress produced sensitization to locomotor effects of cocaine but this effect did not correlate with changes in PKA activity.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2640.pdf: 532825 bytes, checksum: 85901050327f52892439c98345181eee (MD5) Previous issue date: 2009-09-24 / Financiadora de Estudos e Projetos / Nicotine and psychostimulants are often abused in combination. Drug abuse often begins during adolescence. Exposure to drugs of abuse during adolescence can have long-term consequences. We have previously demonstrated that adolescent rats pretreated with amphetamine displayed behavioral sensitization to nicotine, which persisted until adulthood. Moreover, the pretreatment with nicotine during adolescence sensitized adolescent and adult animals to amphetamine-induced locomotor activation. In the present study we investigated whether the behavioral cross-sensitization between nicotine and amphetamine is related to changes in dopamine or serotonin neurotransmission. To this end adolescent rats (post-natal day 28) were treated with nicotine (0.4 mg/Kg), amphetamine (5.0 mg/Kg) or saline during seven days. Three or thirty days after the last injection animals received an acute injection of nicotine (0.4 mg/Kg), amphetamine (5.0 mg/Kg for adolescents or 1.0 mg/Kg for adults) or saline. Thirty minutes after challenge rats were sacrificed, decapitated and brains removed. Nucleus accumbens (NAcc) and prefrontal cortex (PFC) were dissected and prepared for HPLC (high performance liquid chromatography) analysis. Dopamine, DOPAC, HVA, serotonin and 5-HIAA were measured in these brain regions. Our results showed that: 1) repeated administration of nicotine attenuated the acute effect of amphetamine on NAcc dopamine levels of adolescent rats; 2) repeated administration of nicotine increased the acute effect of amphetamine on PFC dopamine levels of adolescent rats; 3) repeated administration of nicotine, during adolescence, increased the acute effect of amphetamine on PFC dopamine of adult rats. The behavioral cross-sensitization shown previously is not related to alterations in NAcc and PFC concentrations of neurotransmitters and its metabolites. However, neuroadaptations induced by repeated nicotine during adolescence endures until adulthood. / Uma característica comum das substâncias que causam dependência é o aumento gradual e progressivo da atividade locomotora observado após a administração repetida, esse fenômeno é denominado sensibilização comportamental. A sensibilização comportamental resulta de adaptações neuroquímicas e moleculares do sistema dopaminérgico mesocorticolímbico. Foi demonstrado anteriormente a sensibilização cruzada entre nicotina e anfetamina em animais adolescentes e que esse fenômeno permanece até a idade adulta. Nesse trabalho investigamos se a administração repetida com nicotina ou anfetamina, durante a adolescência, pode alterar o efeito agudo dessas substâncias e se essas neuroadaptações persistem até a idade adulta. Para tanto, administramos, por sete dias, nicotina (0,4 mg/Kg), anfetamina (5,0 mg/Kg) ou salina a ratos adolescentes. Três ou trinta dias após a última injeção os animais receberam injeção aguda de nicotina (0,4 mg/Kg), anfetamina (5,0 mg/Kg para adolescentes e 1,0 mg/Kg para adultos) ou salina. Trinta minutos após as injeções os ratos foram sacrificados, decapitados e seus encéfalos removidos. O núcleo acumbens (NAc) e o córtex pré-frontal (CPF) foram retirados e preparados para determinação de dopamina, serotonina e seus metabólitos por cromatografia líquida de alta resolução (HPLC). Os resultados encontrados mostram que: 1) o pré-tratamento com nicotina atenuou o efeito agudo da anfetamina sobre a concentração tecidual de dopamina no Nac de ratos adolescentes; 2) o prétratamento com nicotina aumentou o efeito agudo da anfetamina sobre a concentração tecidual de dopamina no CPF de ratos adolescentes; 3) o prétratamento com nicotina na adolescência aumentou o efeito agudo da anfetamina sobre a concentração tecidual de dopamina no CPF de ratos adultos. Estes resultados não se relacionam à sensibilização cruzada observada anteriormente, mas o tratamento repetido com nicotina promoveu alterações em animais adolescentes que podem ser observadas também na vida adulta.