Orientador: Domingos Alves Meira / Banca: Rogério de Jesus Pedro / Banca: David Salomão Lewi / Banca: Alexandrina Sartori / Banca: Maria Inês de Moura Campos Pardini / Resumo: Iniciativas como a "WHO/UNAIDS '3 by 5' permitiram que se atingisse, no ano de 2007, a marca de 3 milhões de pessoas com acesso à terapia antiretroviral (TARV) em países de baixa e média renda. O aumento da cobertura nestes países demanda custos importantes com anti-retrovirais, porém também levanta outro problema, que é o monitoramento da terapia em localidades de poucos recursos. Há consenso no fato de que devem ser pesquisados marcadores de eficácia da TARV mais acessíveis. Considerando o comportamento da β-2 microglobulina sérica e das citocinas séricas TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10 com relação à atividade inflamatória induzida pela replicação do HIV-1, o objetivo deste estudo foi o de verificar o comportamento destas substâncias como indicadores da presença, ou não, de falha terapêutica à HAART. Entre agosto de 2004 e novembro de 2005, 89 indivíduos infectados pelo HIV-1, atendidos pela Área de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP, e 20 indivíduos normais, doadores de sangue do Hemocentro de Botucatu [43 mulheres e 66 homens; idade média = 39,7 anos (22 - 66 anos)] foram divididos em 4 grupos: G1- 15 indivíduos infectados pelo HIV-1, virgens de tratamento ou sem HAART há pelo menos seis meses e com contagens de linfócitos T CD4 + menores que 350 células/mm3; G2- 31 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e sem falha terapêutica virológica (FT); G3- formado por 43 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e com FT, e GC- formado por 20 indivíduos normais, não infectados pelo HIV-1, que serviram de controles para as citocinas séricas. Foram revisados os dados demográficos, clínicos e de HAART e realizados os exames β-2 microglobulina sérica, citocinas séricas (TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10), genotipagem do HIV-1, carga viral plasmática (CV) e linfócitos T CD4 + e T CD8 +. Para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Initiatives such as WHO/UNAIDS '3 by 5' made it possible to achieve the figure of 3 million people with access to antiretroviral therapy (ART) in middle- and low-income countries in 2007. The increase in these countries' coverage leads to important expenditure on antiretroviral drugs; however, it also raises another problem, which is therapy monitoring in low-income locations. There is agreement on the fact that more accessible ART efficacy markers must be studied. By considering the behavior of serum β-2 microglobulin and serum cytokines TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10 in relation to inflammatory activity induced by HIV-1 replication, the objective of this study was to assess the behavior of such substances as indicators of the presence, or not, of antiretroviral therapeutic failure (TF). From August 2004 to November 2005, 89 HIV-1-infected individuals assisted by the Tropical Diseases Sector of the Botucatu School of Medicine - UNESP and 20 normal blood donors at the Blood Transfusion Center of Botucatu [43 female and 66 male; mean age = 39.7 years (22 - 66 years)] were divided into 4 groups: G1- 15 HIV-1-infected individuals, previously untreated or without HAART for at least six months and CD4 + < 350 cells/mm3; G2- 31 HIV-1-infected individuals undergoing HAART without virological therapeutic failure (TF), G3- 43 HIV-1-infected individuals undergoing HAART with TF, and CG- 20 normal individuals who served as controls for serum cytokines. Demographic, clinical and HAART data were reviewed, and serum β-2 microglobulin, serum cytokines (TNFα, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10), HIV-1 genotyping, plasma viral load (VL) and T CD4 + and T CD8 + lymphocytes tests were performed. The Mann-Whitney test for independent samples was used for between-group comparison in the case of numeric variables, and Fisher's exact test was applied for category variables. Statistical difference... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luiz Carlos Marques / Banca: Fabiano Antonio Cadioli / Banca: Lúcia Helena Rodrigues / Resumo: Sabendo-se que os valores laboratoriais de referência devem ser estabelecidos para cada espécie e em seus grupos, este estudo objetivou estabelecer valores hematológicos e bioquímicos séricos de referência para jumentos da raça Pêga; determinar diferenças entre as faixas etárias, sexos, fêmeas prenhes e não prenhes, além de acompanhar mudanças durante o primeiro ano de vida. Foram realizados hemogramas, análises bioquímicas séricas e fracionamento de proteínas por eletroforese em gel de acrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) de amostras de animais com zero a um, um a três e com mais de três anos de idade, machos e fêmeas. No primeiro ano de vida, apenas a porcentagem de monócitos (Mon), níveis de albumina (Alb), triglicérides (Trig), magnésio (Mg) e cloretos (Cl) não diferiram significativamente. Os animais até um ano tiveram as maiores médias para a contagem total de leucócitos (Leu), neutrófilos bastonetes (NB), fosfatase alcalina (FA), glicose (Glic), colesterol (Col), fósforo (P), imunoglobulina A (IgA) e ceruloplasmina (Cer) e as menores para a aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT), creatinina (Crea), bilirrubina indireta (BI), cálcio (Ca), Cl, proteína de peso molecular (PPM) 138 kDa e albumina obtida por eletroforese (Albe). Além disso, possuem médias de volume globular (VG), concentração de hemoglobina (Hb) e 1-glicoproteína ácida (A1GA) superiores e porcentagem de eosinófilos (Eos), níveis de ureia (Ur) e Trig inferiores àquelas do grupo com mais de três anos. Os animais mais velhos tiveram a menor média para Mon e os maiores valores para bilirrubina total (BT) e transferrina (Trans). O grupo com um a três anos apresentou potássio (K) sérico mais elevado que os animais acima de três anos. O cálcio inorgânico (Cai) teve sua maior média nos animais... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The reference laboratory values must be determined for each specie and specific group. Therefore, the aim of this experiment were to determine the hematological and serum biochemical reference values for Pêga breed; to determine differences among age, sex, pregnant and non-pregnant females; and describe the changes during the first year of age. The complete blood count, serum biochemical analysis and the protein fractionation by means of sodium dodecyl sulphate - poliacrilamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) of blood samples collected from animals until one year, from one to three years, and over three year of age, males and females, were analysed. During the first year, just monocytes percentage (Mon), levels of albumin (Alb), triglycerides (Trig), magnesium (Mg) and chloride (Cl) did not differ significantly. The animals until one year of age had the highest means for leukocytes (Leu), band cells (BC), alkaline phosphatase (AP), glucose (Gluc), cholesterol (Chol), phosphorus (P), IgA and ceruloplasmin (Cer) and the lowest for aspartate aminotransferase (AST), gamma glutamyl transferase (GGT), creatinine (Crea), unconjugated bilirubin (UB), calcium (Ca), Cl, 138 kDa molecular weight protein (MWP) and albumin of electrophoresis (Albe). Moreover, they had means of packed cell volume (PCV), hemoglobin concentration (Hb) and 1-acid glycoprotein (A1AG) higher and means of eosinophils percentage (Eos), levels of urea (Ur) and Trig lower than animals over three years old. The oldest animals had the smallest mean for Mon and the biggest values for total bilirubin (TB) and transferrin (Trans). The group between ages of one and three years old showed serum potassium (K) higher than animals over three years old. The inorganic calcium (Cai) was higher for animals until one year old, followed by the oldest animals... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: O Linfoma de Hodgkin (LH) é uma neoplasia linfóide histologicamente caracterizada pela presença de escassas células neoplásicas peculiares, denominadas células de Hodgkin/Reed-Sternberg (H-RS), em meio a infiltrado inflamatório não-neoplásico. Seu curso clínico está diretamente relacionado ao estadiamento, subtipo histológico e presença de alguns fatores prognósticos adversos já estabelecidos. Sintomas constitucionais como febre, perda de peso e sudoreses noturna, associados a um aparente desbalanço da resposta imune celular, são características comuns ao diagnóstico e denotam anormalidade da resposta imunológica desses pacientes, provavelmente causada pela produção de diferentes citocinas, tanto pelas células H-RS como pelo infiltrado inflamatório de permeio. Na maior parte dos casos de LH, há produção aumentada de citocinas de padrão Th2. No presente estudo, foram determinadas, por ELISA, as concentrações séricas de IL-6, IL-10 e IL-13 de 28 pacientes com LH clássico, antes e depois do tratamento anti-neoplásico, e de 26 voluntários saudáveis que compuseram grupo-controle. Dosagens de IL-6 e IL-10 pré-tratamento foram significativamente maiores nos pacientes em relação ao grupo-controle. Todos os pacientes apresentaram redução do nível sérico de IL-6 e IL-10 após o tratamento antineoplásico. Ao diagnóstico, níveis elevados de IL-6 foram associados à presença de linfonodomegalia abdominal, hepatomegalia, sintomas B e anemia. O estudo da regressão linear múltipla mostrou que sintomas B e linfocitopenia são bons preditores de níveis séricos pré-tratamento de IL-6. Níveis elevados de IL-10 foram relacionados à hipoalbuminemia e hepatomegalia. Nenhum paciente apresentou dosagem Resumo 52 sérica detectável de IL-13. Os resultados demonstram que níveis séricos elevados de IL-6 e IL-10 ao diagnóstico estão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hodgkin's lymphoma (HL) is a malignant lymphoid neoplasia characterized by abnormal immune response. Part of this disturbance is attributable to the activity of cytokines produced by the malignant Hodgkin/Reed-Sternbergh cells and reactive inflammatory cells. IL-6, IL-10 and IL-13 seem to play an important role in the pathogenesis of HL. Although some features of the disease have been associated with the production of these interleukins, there is insufficient data about changes in its serum levels at diagnosis and after the treatment, as well as its potencial use as biomarkers of HL course. Design and Methods. Serum levels pre and post treatment of IL-6, IL-10 and IL-13 in 28 patients with HL were determined by ELISA. Results were evaluated against clinical and laboratory parameters, as well as response to treatment and presence of infection by the Epstein-Barr virus (EBV), assessed by in situ hybridization with biotinylated probe directed to the viral transcript EBER-1. Serum samples from 26 healthy blood-donors volunteers were evaluated as a control group. Results. IL-6 and IL-10 serum levels before treatment of HL were significantly higher in patients compared to healthy individuals (p<0,001), and a significant reduction after treatment of the disease was observed (p<0,001). Serum levels of IL-13 were indetectable both in patients (before and after treatment) and controls. Serum levels of IL-6 before treatment were higher in patients with abdominal involvement by HL (p=0,03), hepatomegaly (p=0,04), B-symptoms (p=0,01), and anemia (p=0,02). On the other hand, IL-10 pre-treatment levels were higher in patients with hypoalbuminemia (p=0,04) and hepatomegaly (p=0,01). Multivariate analysis Abstract 54 revealed that lymphocytopenia and B-symptoms were good predictors of IL-6 levels in serum before treatment of patients... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Deilson Elgui de Oliveira / Coorientador: Lígia Niéro-Melo / Banca: José Salvador Rodrigues de Oliveira / Banca: Maria Claudia Nogueira Zerbini / Mestre

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A variabilidade na composição e nas atividades biológicas dos venenos de serpentes vem sendo documentada por diversos autores e pode ser observada em diversos níveis. As diferenças na composição dos venenos apresentam relevância na terapêutica dos envenenamentos ofídicos, tornando o estudo da variação dos venenos de extrema importância para a confecção de antivenenos mais específicos e de maior eficácia nos tratamentos de envenenamentos ofídicos em humanos. Os estudos das variações do veneno de serpentes em populações isoladas são raros, sendo no Brasil os casos mais conhecidos os da Bothrops insularis e Bothrops alcatraz. Diversos estudos sugerem que as oscilações do nível marinho, ocorridas há 11.000 anos, teriam isolado populações de serpentes nas ilhas recentemente formadas, resultando em duas diferentes rotas evolutivas que deram origem a estas espécies. Tendo em vista que a formação da Ilha de São Sebastião-SP ocorreu no mesmo período, isolando populações de animais ali existentes, nos propusemos a avaliar a variação nas atividades do veneno de 80 exemplares de serpentes Bothrops jararaca provenientes da ilha e da sua área de distribuição continental, comparando-as com o Veneno Referência Nacional, para as atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica indireta, hemorrágica e amidolítica, assim como de seus perfis eletroforéticos (SDS-PAGE) e seu reconhecimento pelo soro antibotrópico comercial através da técnica de Western Blot. A análise eletroforética (SDS-PAGE 12,5%) através de densitometria óptica evidenciou, em sua maioria bandas protéicas de baixo peso molecular e a presença de duas áreas majoritárias com grande variação no número, disposição e intensidade das bandas nas faixas de pesos moleculares de 45 kDa e 25 kDa. A variação da disposição das bandas apresentadas nos géis correlacionou-se com a variação nas atividades. Amostras que apresentaram baixa atividade fosfolipásica foram exatamente aquelas que apresentaram poucas e tênues bandas com aproximadamente 14 kDa. A análise das atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e esterásica apresentou um padrão de similaridade que nos permitiu estabelecer duas grandes subpopulações de venenos; uma ao norte da distribuição geográfica amostrada, apresentando altas atividades proteolítica sobre caseína, fosfolipásica e amidolítica e outra ao sul apresentando menores valores para tais variedades. Não foi possível estabelecer uma relação direta entre o padrão de distribuição geográfica com a variação nas atividades hemorrágicas dos venenos amostrados. A técnica de Western Blot permitiu concluir que o soro antibotrópico comercial não apresenta um bom reconhecimento para proteínas de baixo peso molecular. A análise das atividades dos venenos dos exemplares insulares apresentou similaridade com as atividades das amostras de veneno de serpentes coletadas próximas à ilha, sugerindo que o intercâmbio gênico não tenha sido de todo interrompido, provavelmente devido à sua proximidade para com o continente. / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Low temperature-processed, porous sol-gel glasses represent a new class of materials for the immobilisation of biomolecules. If used to entrap biological recognition elements, these transparent and chemically inert glasses offer a new approach in the development of optical biosensors.

This thesis describes an experiment involving guinea pigs' blood and the changes that occurred in the serum with the injection of an antigen. The serum was analyzed in complement titration tests.

This work attempts to establish some phenomenon of a rise in titer of C'3 and C'4 due to antigenic stimulation. Normal level of complement is established and compared to other workers as well as against guinea pig levels. Young rats were bled to establish normal levels of complement. The animals were then injected with an antigenic substance and after a period of seven days were bled again to determine the level of complement. Various antigenic and non-antigenic substances were used as well as normal saline injections for control.

The principal purpose of this work was to determine the effect of immunized guinea pig serum upon the survival time of tumor infected mice, and to make a correlation between this effect and the complement titer.

Magister Scientiae (Medical Bioscience) - MSc(MBS) / The aim of this study is to be the first to ascertain the effects of silver nanoparticles on testosterone production. The Ag NPs used for this study have the following characteristics; purity ≥ 99.5%; 66.7 % of particles have a diameter between 20-40 nm in aqueous solution. Three month old male Balb/C mice were sacrificed and testicular cell cultures were prepared. The cells were subsequently treated with various concentrations of Ag NPs (with or without luteinizing hormone (LH)-treatment) and incubated for 4 hours. Testosterone secretion in the culture supernantant was then determined using a testosterone ELISA kit. Ag NPs (at 20 μg/ml) significantly (p < 0.001) decreased LH-stimulated testosterone production as compared to the control. This study showed that Ag NPs adversely affect testosterone synthesis in vitro and can therefore pose a risk for male reproduction.

Trauma of diverse origins is a common reason for presentation of pets for treatment. It is often difficult clinically to objectively measure the severity of any trauma to an animal. One approach is to measure the changes in the various serum parameters which are known to alter in response to trauma or inflammation. If the changes over time of relevant and easily measurable parameters can be established under two controlled but different conditions of surgical trauma, it may provide the foundation for evaluating their future use in establishing the severity of trauma in a patient. A prospective study was performed on animals presented to the Onderstepoort Veterinary Academic Hospital for either thoracolumbar disc disease or for elective ovariohysterectomy. The two surgical procedures chosen for the study involved significant surgical trauma, particularly to muscle, in the case of thoracolumbar decompression and relatively minor surgical trauma in the case of ovariohysterectomy. Serial evaluation of creatine kinase (CK) and C-reactive protein (CRP) were performed both pre- and post-operatively on two sets of patients derived from the two surgical categories. CK is an enzyme found predominantly in skeletal muscle and significantly elevated serum activity is largely associated with muscle damage. CRP is an acute phase protein which shows elevated serum concentration in response to a broad range of inflammatory stimuli. Analysis of the data showed a very wide range of results at each time point for both CK and CRP. There were no significant differences between the two surgical groups for either analyte preoperatively. Thereafter CK results were markedly and significantly different between the two groups. CRP results were very similar in the two groups with no statistical difference at any time point. The results of this study suggest that the evaluation of CK and CRP at any one time point in a traumatized animal is of limited value. However the evaluation of the trend of these two analytes, even over a relatively short time period, may allow for useful prognostication in clinical cases. / Dissertation (MMedVet)--University of Pretoria, 2008. / Companion Animal Clinical Studies / unrestricted