Introdução: o sarcoma de Ewing é um dos tipo mais agressivos de câncer pediátrico. Esse tipo de câncer é um tumor primitivo neuroectodérmico, grupo que inclui ainda outros tumores pediátricos como o meduloblastoma e o neuroblastoma. Apesar de avanços significativos desde o surgimento da quimioterapia, ainda há necessidade de aumento dos índices de cura, redução da toxicidade da quimioterapia e redução da resistência ao tratamento em pacientes com essa doença. Inibidores da acetilação de histonas (HDACIs ou HDIs) e bifosfonatos têm um futuro promissor no tratamento de câncer, especialmente quando utilizados conjuntamente ou em associação com outros agentes citotóxicos, como antineoplásicos clássicos. No entanto, os efeitos destes tratamentos combinados ainda não haviam sido devidamente estudados em Sarcoma de Ewing. Objetivos: este estudo se propôs a avaliar, in vitro, os efeitos do inibidor da acetilação de histonas, butirato sódico (NaB), do bifosfonato, zoledronato (ZA), da associação destes dois agentes e de combinações dos mesmos com antineoplásicos clássicos sobre a proliferação, viabilidade e sobrevivência celular em sarcoma de Ewing. Métodos: as linhagens celulares de sarcoma de Ewing, SK-ES-1 e RD-ES, foram tratadas com NaB, ZA, doxorrubicina, etoposídeo ou vincristina e com diferentes combinações destes agentes. O crescimento tumoral in vitro, incluindo parâmetros de proliferação e viabilidade celular, foi analisado pelos métodos de contagem celular por exclusão com azul de tripan e MTT. Os efeitos tardios (sobrevivência) também foram estudados através da determinação da formação de colônias (ensaio colonogênico). Resultados: a combinação de NaB e ZA teve um efeito citotóxico sinérgico 72h após o tratamento, persistindo durante 10-14 dias após o tratamento, em ambas as linhagens celulares testadas. Todas as combinações entre NaB ou ZA e os antineoplásicos clássicos testados apresentaram efeitos citotóxicos sinérgicos 72h após os tratamentos em ambas linhagens celulares, com a exceção das seguintes associações: NaB + VCR e ZA + Doxo, que apresentaram apenas efeito aditivo nas células RD-ES, quando comparados com cada um dos agentes em monoterapia. Estes efeitos “agudos” observados em ambas as linhagens celulares de sarcoma de Ewing foram confirmados pelo ensaio clonogênico. Conclusão: os dados obtidos sugerem que o uso combinado de bifosfonatos e HDIs e a associação destes agentes com quimioterápicos clássicos representam promissoras alternativas no tratamento de sarcoma de Ewing e proporcionam a base para novos estudos. / Background: Ewing sarcoma, often referred to as Ewing’s sarcoma family tumors, is a peripheral primitive neuroectodermal tumor. Ewing sarcoma is the second most common solid bone and soft tissue malignancy of children and young adults. Despite significant advances in cancer chemotherapy, there is still need for increased rates of cure, reduction of toxicity of chemotherapy and reduced resistance to treatment in patients with this disease. Histone deacetylase inhibitors (HDACIs or HDIs) and bisphosphonates have a promising future in the treatment of cancer as targeted anticancer drugs, especially when used together or in combination with other cytotoxic agents. However, the effects of these combined treatments have not yet been properly evaluated in Ewing sarcoma. Objective: In the present study, we evaluated the in vitro cytotoxic effects (on cellular proliferation, viability, and survival) elicited by the co-treatment of sodium butyrate (NaB) and zoledronic acid (ZA) alone or in combination with three anti-cancer drugs strongly recommended to treat Ewing sarcoma (doxorubicin, etoposide and vincristine) in two human cell lines. Methods: two Ewing sarcoma cell lines, SK-ES-1 and RD-ES, were treated with NaB, ZA, doxorubicin, etoposide, vincristine and with different combinations of these drugs. The proliferation and cell viability were analyzed by counting cell in a hemocytometer, by exclusion of trypan blue and by MTT assay. The survival and proliferation of cells were also studied by clonogenic assay. Results: our results demonstrate that the combination of NaB and ZA has a synergistic cytotoxic effect at 72h after treatment, persisting for 10-14 days post-treatment, in both cell lines tested. All combinations between NaB or ZA and classical antineoplastic drugs demonstrated a synergistic cytotoxic effect at 72h post-treatment in SK-ES-1 and RD-ES cells, with the exception of NaB plus VCR, and ZA plus Doxo, which showed only an additive effect in RD-ES cells when compared to each agent alone. These acute effects observed in both Ewing sarcoma cells were confirmed by the clonogenic assay. Conclusion: These data suggest that HDIs and bisphosphonate co-treatment in combination with classical chemotherapeutic drugs is a promising therapeutic venue the treatment of Ewing sarcoma, and provide a basis for further study in this field.

As limitações ao uso de antibióticos promotores de crescimento vêm aumentando a procura por aditivos substitutos para manter a performance animal, a saúde intestinal e a resposta imune de frangos de corte. Este experimento foi conduzido para comparar o efeito e a dose resposta do produto Ava Cid P (composto por substância húmica, butirato de sódio 30% protegido e uma pequena porção de acidificantes) suplementado na dieta, sobre a performance, resposta imune e saúde intestinal de frangos de corte. O experimento seguiu um design inteiramente casualizado, envolvendo um arranjo fatorial 2 x 5 (2 sexos e 5 tratamentos) com 7 repetições de 15 aves por tratamento. Os tratamentos seguiram a suplementação em diferentes fases de 1 a 49 dias: 1) Controle: dieta basal sem nenhuma suplementação; 2) AVA1-21: aves receberam 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d; 3) AVA1-35: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1-21 d e 0,45 kg/t de 22-35 d; 4) AVA1-42: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d e 0,45 kg/t de 22- 42 d; 5) AVA1-49: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d, 0,45 kg/t de 22-35 d e 0,23 kg/t de 36-49 d. A suplementação com Ava Cid P não influenciou a performance de machos e fêmeas, nem mesmo a densidade de células caliciformes (P > 0,05). No entanto, o Ava Cid P foi capaz de modificar a morfometria intestinal, aumentando a altura de vilosidades aos 9 e 35 d (P < 0,05). A área superficial aparente dos vilos e altura de vilos, nas aves que receberam Ava Cid P durante todas as fases experimentais, foi superior à das aves suplementadas somente na fase inicial. No íleo, a área superficial aparente dos vilos também foi superior nas aves suplementadas aos 9 d. Além disso, a expressão do gene para mucina 2 (MUC2) e para o fator de necrose tumoral (TNF-α) diminuiu nas aves recebendo Ava Cid P aos 21 d (P < 0,05), mas não foram observadas diferenças estatísticas para interleucina-1 beta e interleucina-10. Os resultados sugerem que Ava Cid P pode alterar a expressão de mRNA de algumas citocinas e MUC2 e a morfometria intestinal de frangos de corte, aumentando a superfície aparente e a altura dos vilos, o que demonstra a potencialidade do produto como alternativa aos antibióticos promotores de crescimento. / The limitations of the antibiotic growth promoter’s (AGP) usage have been increasing the search for new products to improve poultry performance, gut healthy and immune response. This experiment was conducted to compare the effect and dose response of Ava Cid P (consisted of a humic substance, coated sodium butyrate 30% and a small acidifier portion) diet supplementation on performance, immune response and gut health of broilers. Five dietary regimens were used: 1) birds didn’t receive Ava Cid P in any phase (Control), 2) birds received 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d (AVA1-21), 3) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d and 0.45 kg/t from 22 to 35 d (AVA1-35), 4) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d and 0.45 kg/t from 22 to 42 d (AVA1-42), 5) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d, 0.45 kg/t from 22 to 35 d and 0.23 kg/t from 36 to 49 d (AVA1-49). They were applied in a completely randomized design, involving a 2 × 5 factorial arrangement with 2 sex and 5 levels of inclusion, and 7 replications with 15 birds each. The supplementation with Ava Cid P showed no influence on males and females growth performance and goblet cell density (P > 0.05). However, it modified the gut morphometry, increasing jejunum villi height at 9 and 35 days (P < 0.05). The apparent villus surface area and villi height on birds fed with Ava Cid P during all phases also increased in relation to those who received only in the early phase. The expression of mucin 2 (MUC2) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) decreased on birds that received Ava Cid P at 21 days (P < 0.05), but no differences were seen for interleukin-1beta (IL-1β) and interleukin-10 (IL-10). The results suggest that Ava Cid P can alter the mRNA expression of some inter-leukins, MUC2 and intestinal morphometry in broilers, increasing apparent villus surface area and villi height, which demonstrates the product potential as an alternative growth promoter.

As limitações ao uso de antibióticos promotores de crescimento vêm aumentando a procura por aditivos substitutos para manter a performance animal, a saúde intestinal e a resposta imune de frangos de corte. Este experimento foi conduzido para comparar o efeito e a dose resposta do produto Ava Cid P (composto por substância húmica, butirato de sódio 30% protegido e uma pequena porção de acidificantes) suplementado na dieta, sobre a performance, resposta imune e saúde intestinal de frangos de corte. O experimento seguiu um design inteiramente casualizado, envolvendo um arranjo fatorial 2 x 5 (2 sexos e 5 tratamentos) com 7 repetições de 15 aves por tratamento. Os tratamentos seguiram a suplementação em diferentes fases de 1 a 49 dias: 1) Controle: dieta basal sem nenhuma suplementação; 2) AVA1-21: aves receberam 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d; 3) AVA1-35: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1-21 d e 0,45 kg/t de 22-35 d; 4) AVA1-42: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d e 0,45 kg/t de 22- 42 d; 5) AVA1-49: 0,91 kg/t de Ava Cid P de 1 a 21 d, 0,45 kg/t de 22-35 d e 0,23 kg/t de 36-49 d. A suplementação com Ava Cid P não influenciou a performance de machos e fêmeas, nem mesmo a densidade de células caliciformes (P > 0,05). No entanto, o Ava Cid P foi capaz de modificar a morfometria intestinal, aumentando a altura de vilosidades aos 9 e 35 d (P < 0,05). A área superficial aparente dos vilos e altura de vilos, nas aves que receberam Ava Cid P durante todas as fases experimentais, foi superior à das aves suplementadas somente na fase inicial. No íleo, a área superficial aparente dos vilos também foi superior nas aves suplementadas aos 9 d. Além disso, a expressão do gene para mucina 2 (MUC2) e para o fator de necrose tumoral (TNF-α) diminuiu nas aves recebendo Ava Cid P aos 21 d (P < 0,05), mas não foram observadas diferenças estatísticas para interleucina-1 beta e interleucina-10. Os resultados sugerem que Ava Cid P pode alterar a expressão de mRNA de algumas citocinas e MUC2 e a morfometria intestinal de frangos de corte, aumentando a superfície aparente e a altura dos vilos, o que demonstra a potencialidade do produto como alternativa aos antibióticos promotores de crescimento. / The limitations of the antibiotic growth promoter’s (AGP) usage have been increasing the search for new products to improve poultry performance, gut healthy and immune response. This experiment was conducted to compare the effect and dose response of Ava Cid P (consisted of a humic substance, coated sodium butyrate 30% and a small acidifier portion) diet supplementation on performance, immune response and gut health of broilers. Five dietary regimens were used: 1) birds didn’t receive Ava Cid P in any phase (Control), 2) birds received 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d (AVA1-21), 3) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d and 0.45 kg/t from 22 to 35 d (AVA1-35), 4) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d and 0.45 kg/t from 22 to 42 d (AVA1-42), 5) 0.91 kg/t of Ava Cid P from 1 to 21 d, 0.45 kg/t from 22 to 35 d and 0.23 kg/t from 36 to 49 d (AVA1-49). They were applied in a completely randomized design, involving a 2 × 5 factorial arrangement with 2 sex and 5 levels of inclusion, and 7 replications with 15 birds each. The supplementation with Ava Cid P showed no influence on males and females growth performance and goblet cell density (P > 0.05). However, it modified the gut morphometry, increasing jejunum villi height at 9 and 35 days (P < 0.05). The apparent villus surface area and villi height on birds fed with Ava Cid P during all phases also increased in relation to those who received only in the early phase. The expression of mucin 2 (MUC2) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) decreased on birds that received Ava Cid P at 21 days (P < 0.05), but no differences were seen for interleukin-1beta (IL-1β) and interleukin-10 (IL-10). The results suggest that Ava Cid P can alter the mRNA expression of some inter-leukins, MUC2 and intestinal morphometry in broilers, increasing apparent villus surface area and villi height, which demonstrates the product potential as an alternative growth promoter.

The thesis "The proteomic analysis in hematology: Identification of alfa2- macroglobulin as a specific carrier for the hormone hepcidin and proteomic analysis of the leukemic K562 cell differentiation induced by sodium butyrate" describes proteomic approaches, used for the identification and functional characterisation of proteins, which are binding and transporting the iron metabolism regulating hormone hepcidin. Proteomic techniques are also exploited for the identification of proteins, participating in erythroid differentiation of the model cell line K562. In the first section of the thesis, non-denaturing, native techniques, such as chromatography and native electrophoresis are used, in the second section, the control and butyrate - induced K562 cell proteomes are compared using the classical 2D - SDS polyacrylamide gel electrophoresis approach. The methods, described in the thesis are broadening the spectrum of available techniques in experimental hematology. The results, described in this thesis together with the accompanying published manuscripts broaden our knowledge in the function of proteins of iron metabolism and proteins, functioning in erythroid differentiation. Key words: proteomic analysis, hepcidin, alfa2-macroglobulin, iron metabolism, CML, K562, sodium butyrate

Introdução: o sarcoma de Ewing é um dos tipo mais agressivos de câncer pediátrico. Esse tipo de câncer é um tumor primitivo neuroectodérmico, grupo que inclui ainda outros tumores pediátricos como o meduloblastoma e o neuroblastoma. Apesar de avanços significativos desde o surgimento da quimioterapia, ainda há necessidade de aumento dos índices de cura, redução da toxicidade da quimioterapia e redução da resistência ao tratamento em pacientes com essa doença. Inibidores da acetilação de histonas (HDACIs ou HDIs) e bifosfonatos têm um futuro promissor no tratamento de câncer, especialmente quando utilizados conjuntamente ou em associação com outros agentes citotóxicos, como antineoplásicos clássicos. No entanto, os efeitos destes tratamentos combinados ainda não haviam sido devidamente estudados em Sarcoma de Ewing. Objetivos: este estudo se propôs a avaliar, in vitro, os efeitos do inibidor da acetilação de histonas, butirato sódico (NaB), do bifosfonato, zoledronato (ZA), da associação destes dois agentes e de combinações dos mesmos com antineoplásicos clássicos sobre a proliferação, viabilidade e sobrevivência celular em sarcoma de Ewing. Métodos: as linhagens celulares de sarcoma de Ewing, SK-ES-1 e RD-ES, foram tratadas com NaB, ZA, doxorrubicina, etoposídeo ou vincristina e com diferentes combinações destes agentes. O crescimento tumoral in vitro, incluindo parâmetros de proliferação e viabilidade celular, foi analisado pelos métodos de contagem celular por exclusão com azul de tripan e MTT. Os efeitos tardios (sobrevivência) também foram estudados através da determinação da formação de colônias (ensaio colonogênico). Resultados: a combinação de NaB e ZA teve um efeito citotóxico sinérgico 72h após o tratamento, persistindo durante 10-14 dias após o tratamento, em ambas as linhagens celulares testadas. Todas as combinações entre NaB ou ZA e os antineoplásicos clássicos testados apresentaram efeitos citotóxicos sinérgicos 72h após os tratamentos em ambas linhagens celulares, com a exceção das seguintes associações: NaB + VCR e ZA + Doxo, que apresentaram apenas efeito aditivo nas células RD-ES, quando comparados com cada um dos agentes em monoterapia. Estes efeitos “agudos” observados em ambas as linhagens celulares de sarcoma de Ewing foram confirmados pelo ensaio clonogênico. Conclusão: os dados obtidos sugerem que o uso combinado de bifosfonatos e HDIs e a associação destes agentes com quimioterápicos clássicos representam promissoras alternativas no tratamento de sarcoma de Ewing e proporcionam a base para novos estudos. / Background: Ewing sarcoma, often referred to as Ewing’s sarcoma family tumors, is a peripheral primitive neuroectodermal tumor. Ewing sarcoma is the second most common solid bone and soft tissue malignancy of children and young adults. Despite significant advances in cancer chemotherapy, there is still need for increased rates of cure, reduction of toxicity of chemotherapy and reduced resistance to treatment in patients with this disease. Histone deacetylase inhibitors (HDACIs or HDIs) and bisphosphonates have a promising future in the treatment of cancer as targeted anticancer drugs, especially when used together or in combination with other cytotoxic agents. However, the effects of these combined treatments have not yet been properly evaluated in Ewing sarcoma. Objective: In the present study, we evaluated the in vitro cytotoxic effects (on cellular proliferation, viability, and survival) elicited by the co-treatment of sodium butyrate (NaB) and zoledronic acid (ZA) alone or in combination with three anti-cancer drugs strongly recommended to treat Ewing sarcoma (doxorubicin, etoposide and vincristine) in two human cell lines. Methods: two Ewing sarcoma cell lines, SK-ES-1 and RD-ES, were treated with NaB, ZA, doxorubicin, etoposide, vincristine and with different combinations of these drugs. The proliferation and cell viability were analyzed by counting cell in a hemocytometer, by exclusion of trypan blue and by MTT assay. The survival and proliferation of cells were also studied by clonogenic assay. Results: our results demonstrate that the combination of NaB and ZA has a synergistic cytotoxic effect at 72h after treatment, persisting for 10-14 days post-treatment, in both cell lines tested. All combinations between NaB or ZA and classical antineoplastic drugs demonstrated a synergistic cytotoxic effect at 72h post-treatment in SK-ES-1 and RD-ES cells, with the exception of NaB plus VCR, and ZA plus Doxo, which showed only an additive effect in RD-ES cells when compared to each agent alone. These acute effects observed in both Ewing sarcoma cells were confirmed by the clonogenic assay. Conclusion: These data suggest that HDIs and bisphosphonate co-treatment in combination with classical chemotherapeutic drugs is a promising therapeutic venue the treatment of Ewing sarcoma, and provide a basis for further study in this field.

Introdução: o sarcoma de Ewing é um dos tipo mais agressivos de câncer pediátrico. Esse tipo de câncer é um tumor primitivo neuroectodérmico, grupo que inclui ainda outros tumores pediátricos como o meduloblastoma e o neuroblastoma. Apesar de avanços significativos desde o surgimento da quimioterapia, ainda há necessidade de aumento dos índices de cura, redução da toxicidade da quimioterapia e redução da resistência ao tratamento em pacientes com essa doença. Inibidores da acetilação de histonas (HDACIs ou HDIs) e bifosfonatos têm um futuro promissor no tratamento de câncer, especialmente quando utilizados conjuntamente ou em associação com outros agentes citotóxicos, como antineoplásicos clássicos. No entanto, os efeitos destes tratamentos combinados ainda não haviam sido devidamente estudados em Sarcoma de Ewing. Objetivos: este estudo se propôs a avaliar, in vitro, os efeitos do inibidor da acetilação de histonas, butirato sódico (NaB), do bifosfonato, zoledronato (ZA), da associação destes dois agentes e de combinações dos mesmos com antineoplásicos clássicos sobre a proliferação, viabilidade e sobrevivência celular em sarcoma de Ewing. Métodos: as linhagens celulares de sarcoma de Ewing, SK-ES-1 e RD-ES, foram tratadas com NaB, ZA, doxorrubicina, etoposídeo ou vincristina e com diferentes combinações destes agentes. O crescimento tumoral in vitro, incluindo parâmetros de proliferação e viabilidade celular, foi analisado pelos métodos de contagem celular por exclusão com azul de tripan e MTT. Os efeitos tardios (sobrevivência) também foram estudados através da determinação da formação de colônias (ensaio colonogênico). Resultados: a combinação de NaB e ZA teve um efeito citotóxico sinérgico 72h após o tratamento, persistindo durante 10-14 dias após o tratamento, em ambas as linhagens celulares testadas. Todas as combinações entre NaB ou ZA e os antineoplásicos clássicos testados apresentaram efeitos citotóxicos sinérgicos 72h após os tratamentos em ambas linhagens celulares, com a exceção das seguintes associações: NaB + VCR e ZA + Doxo, que apresentaram apenas efeito aditivo nas células RD-ES, quando comparados com cada um dos agentes em monoterapia. Estes efeitos “agudos” observados em ambas as linhagens celulares de sarcoma de Ewing foram confirmados pelo ensaio clonogênico. Conclusão: os dados obtidos sugerem que o uso combinado de bifosfonatos e HDIs e a associação destes agentes com quimioterápicos clássicos representam promissoras alternativas no tratamento de sarcoma de Ewing e proporcionam a base para novos estudos. / Background: Ewing sarcoma, often referred to as Ewing’s sarcoma family tumors, is a peripheral primitive neuroectodermal tumor. Ewing sarcoma is the second most common solid bone and soft tissue malignancy of children and young adults. Despite significant advances in cancer chemotherapy, there is still need for increased rates of cure, reduction of toxicity of chemotherapy and reduced resistance to treatment in patients with this disease. Histone deacetylase inhibitors (HDACIs or HDIs) and bisphosphonates have a promising future in the treatment of cancer as targeted anticancer drugs, especially when used together or in combination with other cytotoxic agents. However, the effects of these combined treatments have not yet been properly evaluated in Ewing sarcoma. Objective: In the present study, we evaluated the in vitro cytotoxic effects (on cellular proliferation, viability, and survival) elicited by the co-treatment of sodium butyrate (NaB) and zoledronic acid (ZA) alone or in combination with three anti-cancer drugs strongly recommended to treat Ewing sarcoma (doxorubicin, etoposide and vincristine) in two human cell lines. Methods: two Ewing sarcoma cell lines, SK-ES-1 and RD-ES, were treated with NaB, ZA, doxorubicin, etoposide, vincristine and with different combinations of these drugs. The proliferation and cell viability were analyzed by counting cell in a hemocytometer, by exclusion of trypan blue and by MTT assay. The survival and proliferation of cells were also studied by clonogenic assay. Results: our results demonstrate that the combination of NaB and ZA has a synergistic cytotoxic effect at 72h after treatment, persisting for 10-14 days post-treatment, in both cell lines tested. All combinations between NaB or ZA and classical antineoplastic drugs demonstrated a synergistic cytotoxic effect at 72h post-treatment in SK-ES-1 and RD-ES cells, with the exception of NaB plus VCR, and ZA plus Doxo, which showed only an additive effect in RD-ES cells when compared to each agent alone. These acute effects observed in both Ewing sarcoma cells were confirmed by the clonogenic assay. Conclusion: These data suggest that HDIs and bisphosphonate co-treatment in combination with classical chemotherapeutic drugs is a promising therapeutic venue the treatment of Ewing sarcoma, and provide a basis for further study in this field.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T12:12:43Z No. of bitstreams: 1 Maria Edna Gomes de Barros.pdf: 1315593 bytes, checksum: fa81695d81b1a4b6785e298c1eb69e52 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T12:12:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Edna Gomes de Barros.pdf: 1315593 bytes, checksum: fa81695d81b1a4b6785e298c1eb69e52 (MD5) Previous issue date: 2013-02-21 / The modernization of the global poultry industry along with consumer trends in search of safe foods that meet the requirements of importing countries of Brazilian chicken, makes the organic acids are an alternative to replace the use of antibiotics. This study aims to evaluate the morphological, immunological and husbandry of broilers supplemented with microencapsulated sodium butyrate. Therefore, we used 720 chicks a day in life, housed in 40 boxes experimental measuring 1.5 m², with 18 birds each, with a density of 12 chickens / m², distributed in a completely randomized in a 2x6 factorial, where factors were two experimental diets: control: Ration without supplementation of sodium butyrate; Treaty (BS): Feed supplementation with sodium butyrate, with four replicates per treatment and six collection periods 7, 14, 21 and 35 days each week, two birds per plot were weighed and killed by cervical dislocation, which were collected fragments of duodenum, jejunum, ileum, liver, spleen, thymus and bursa of Fabricius. The amostrasforam weighed and opened longitudinally, rinsed in phosphate buffer (0.1M, pH 7.4) and then fixed in 4% glutaraldehyde in 0.1 M phosphate buffer, pH 7.4, for 24 hours, were processed in Routine histological technique in paraffin and historesin and stained by hematoxylin-eosin, hematoxylin-Phloxine, Sudan Black and Alcian Blue. To evaluate the humoral immune response, blood samples were collected before vaccination DNC (Newcastle disease) and at 21, 33 and 42, where we assessed the levels of antibodies in response to vaccination. The antibody levels were quantified by ELISA. In addition we assessed the levels of animal performance, such as feed, daily weight gain, feed intake and viability of diets. Data were subjected to analysis of variance (ANOVA) of SAS, and the averages compared by Tukey method at 5% significance. Were also made correlation analyzes. / A modernização mundial da indústria avícola junto às tendências de consumo em busca de alimentos seguros, que atendam as exigências dos países importadores da carne de frango brasileira, faz com que os ácidos orgânicos sejam uma alternativa em substituição ao uso de antibióticos.O presente trabalho tem o objetivo de avaliar os aspectos morfológicos, imunológicos e zootécnicos de frangos de corte suplementados com butirato de sódio microencapsulado. Para tanto, foram utilizados 720 pintinhos com um dia de vida, alojados em 40 boxes experimentais medindo 1,5 m², com 18 aves cada, com densidade de 12 frangos/m², distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado em fatorial 2x6, onde os fatores foram duas rações experimentais: Controle: Ração sem suplementação de butirato de sódio; Tratado (BS): Ração com suplementação de butirato de sódio,com quatro repetições por tratamento e seis períodos de coleta 7, 14, 21 e 35 dias, a cada semana, duas aves por parcela experimental foram pesadas e abatidas por deslocamento cervical, das quais foram coletados fragmentos deduodeno, jejuno, íleo, fígado, baço, bursa de Fabricius e timo. As amostrasforam pesadas e abertas longitudinalmente, lavadas em solução tampão fosfato (0,1 M e pH 7,4) e posteriormente fixadas em glutaraldeido a 4% em tampão fosfato 0,1M e pH 7,4, por 24 horas, foram processadas em técnica histológica de rotina em parafina e historesina e coradas por Hematoxilina- Eosina, Hematoxilina-Floxina, Sudan Black e Alcian Blue. Para a avaliação da resposta imune humoral, foram coletadas amostras de sangue antes da vacinação contra a DNC (Doença de Newcastle) e aos 21, 33 e 42, onde foram avaliados os níveis de anticorpos em resposta a vacinação. Os níveis de anticorpos foram quantificados pela técnica de ELISA. Além disso foram avaliados os índices de desempenho zootécnico, tais como: conversão alimentar, ganho de peso diário, consumo diário de ração e a viabilidade das dietas. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) do programa SAS, e as médias comparadas entre si pelo método de Tukey a 5% de significância. Foram feitas também análises de correlação.

Orientador: Valquíria Cação Cruz-Polycarpo / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do butirato de sódio microencapsulado (BSM) em substituição ao antibiótico sobre o desempenho, hematologia, peso de órgãos do TGI, escores de lesão intestinal e contagem de oocistos nas excretas de frangos de corte desafiados com Eimeria spp. Para isso foram utilizados 1.050 pintos machos Ross, distribuídos em DIC, com seis tratamentos: CN (controle negativo)- ração basal (RB) (aves não desafiadas); CND- RB (aves desafiadas); 0,10%- RB + 1.000 mg/kg de BSM (aves desafiadas); 0,15%- RB + 1.500 mg/kg de BSM (aves desafiadas); 0,20%- RB + 2.000 mg/kg de BSM (aves desafiadas); AVL- RB + avilamicina (aves desafiadas), com cinco repetições. Aos 16 dias de idade, as aves foram inoculadas oralmente e individualmente com oocistos de Eimerias e as aves de CN, inoculadas com solução salina, para que também sofressem o estresse da inoculação. Observou-se maiores GPM e CRM nas aves não desafiadas em comparação às desafiadas na fase de 1 a 21 d, e na fase final de criação e melhor CA e FEP, mostrando o poder da inoculação com o protozoário. Não houve diferença nas variáveis hematológicas e bioquímicas entre as diferentes dietas fornecidas, porém frangos submetidos às Eimerias apresentaram queda nos valores normais após desafio, e demonstraram recuperação ao final da criação. Na alometria de órgãos do TGI, o peso do fígado apresentou-se superior nas aves que receberam aditivo. Já, o peso do pâncreas, mostrou-se superior nas aves suplementadas com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study was to evaluate the effect of microencapsulated sodium butyrate (MSB) in substitution to antibiotics on performance, hematology, weight of organs of the GIT, intestinal injury scores and oocyst count in the excreta of broilers challenged with Eimeria spp. For this, 1,050 male Ross chicks were used, distributed in completely randomized design, with six treatments: NC - basal diet (BD) (non-challenged birds); NCC- BD (challenged birds); 0.10% - BD+1,000 mg/kg of MSB (challenged birds); 0.15% - BD+1,500 mg/kg of MSB (challenged birds); 0.20% - BD+2,000 mg/kg of MSB (challenged birds); AVL - BD + avilamycin (challenged birds), with five repetitions. At 16 days of age, the birds were inoculated orally and individually with Eimerias oocysts and the NC birds were inoculated with saline solution, so that they also suffered the stress of inoculation. Higher ABW and AFI were observed in the unchallenged birds compared to those challenged in the 1 to 21 day phase, and in the final breeding phase, better FCR and PEF, showing the power of inoculation with the protozoan. There was no difference in hematological and biochemical variables between the different diets provided, but chickens subjected to inoculation with Eimerias showed a drop in normal values after challenge, and showed recovery at the end of the rearing period. In the allometry of organs of the TGI, the liver weight was higher in the birds that received additive. The weight of the pancreas, on the ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o efeito da inclusão de butirato de sódio, monensina sódica ou propionato de cálcio no concentrado inicial, sobre o desempenho, parâmetros sanguíneos e desenvolvimento ruminal de bezerros leiteiros. No primeiro experimento, 24 bezerras recém-nascidas da raça Holandesa foram alojadas em abrigos individuais até a 10a semana de vida, com livre acesso à água, sendo alimentadas com 4 litros de leite/dia e concentrado ad libitum, enquanto feno de capim-coast-cross foi fornecido após o desaleitamento. Os animais foram distribuídos em blocos de acordo com peso ao nascer e data de nascimento e alocados em um dos tratamentos, de acordo com o aditivo no concentrado: 1)Butirato de sódio (0,15%); 2)Monensina sódica (30 ppm); e 3)Propionato de cálcio (0,15%). Os animais foram pesados e avaliados quanto à altura na cernelha, largura do traseiro e perímetro torácico semanalmente. A partir da 4a semana foram realizadas colheitas semanais de amostras de sangue para determinação de glicose, ácidos graxos livres (AGL) e ?-hidroxibutirato (BHBA). Não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos para o consumo de concentrado ou de feno e para o peso e ganho de peso dos animais (P>0,05). As avaliações quanto à altura na cernelha e perímetro torácico também não apresentaram diferenças entre os tratamentos (P>0,05), entretanto as medidas de largura de traseiro foram menores para os animais do tratamento com adição de propionato de cálcio (P<0,05). As concentrações plasmáticas de glicose, AGL e BHBA não foram afetadas pelos tratamentos (P>0,05). Houve efeito significativo da idade (P<0,0001) para a concentração plasmática de glicose, sendo esta reduzida com a idade dos animais. No segundo experimento, 15 bezerros recémnascidos da raça Holandesa, recebendo o mesmo manejo nutricional, foram fistulados no rúmen e alojados em baias individuais até a 10ª semana de vida. A partir da 4ª semana, foram realizadas colheitas semanais de fluído ruminal para determinação de pH, ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e N-amoniacal; e de sangue para determinação de glicose. Ao completar dez semanas os animais foram abatidos para avaliação do desenvolvimento do trato digestório superior e de papilas ruminais. Não foram observadas diferenças significativas entre tratamentos para o consumo de concentrado e para o desempenho dos animais (P>0,05). Houve efeito significativo (P<0,05) de tratamento e horário de colheita para o pH ruminal. As concentrações de AGCC totais, bem como de cada ácido, não foram afetadas pelos tratamentos. As concentrações plasmáticas de glicose foram afetadas pelos tratamentos (P<0,05). O peso total do trato digestório superior, os pesos médios de cada compartimento e a capacidade máxima do retículo-rúmen não foram afetados pelos tratamentos, assim como os parâmetros de desenvolvimento do epitélio ruminal. Os aditivos incluídos no concentrado inicial se mostraram igualmente eficazes no que diz respeito aos seus efeitos no desempenho e desenvolvimento ruminal de bezerros em aleitamento. / Two trials were conducted in order to evaluate the effects of the addition of sodium butyrate, sodium monensin or calcium propionate in the starter feed on the performance, blood parameters and ruminal development of dairy calves. In the first experiment, 24 newborn Holstein calves were housed in individual hutches during ten weeks of life, with free access to water, being fed 4 liters of milk per day and starter ad libitum, with coast-cross hay offered only after weaning. The animals were blocked according to weight and date of birth and allocated in one of the treatments, according to the additive included in the starter feed: 1) sodium butyrate (0.15%); 2) sodium monensin (30 ppm); and 3) calcium propionate (0.15%). Animals were weighed and evaluated for whiter height, hearth girth and hip width weekly. From the fourth week of age blood samples were taken for glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate concentration determination. No significant differences were observed among treatments for starter or hay intake, and weight gain or live weight (P>0.05). Measurements of whiter height and hearth girth were also not affected by treatments (P> 0.05); however, measures of hip width of the animals were smaller for treatment with addition of calcium propionate (P<0.05). Plasma concentrations of glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate were not affected by treatment (P>0.05). There was significant effect of age (P<0.0001) for the plasma concentration of glucose, with reduction as animals aged. In the second experiment, 15 male newborns Holstein calves, receiving the same nutritional management, were ruminally fistulated and housed in individual pens during ten weeks of life. From the fourth week of age ruminal samples were taken weekly for the determination of pH, short-chain fatty acids (SCFA) and ammonia-N concentration. Blood samples were also taken weekly for glucose determination. By completing ten weeks of age, animals were slaughtered for forestomach growth and papillae development evaluation. No significant differences were observed among treatments for starter intake as well as for animal performance (P>0.05). The ruminal pH was significantly affected (P<0.05) by treatments and by sampling time. Concentrations of total SCFA and individual SCFA were not affected by treatments (P<0.05). Plasma concentrations of glucose were affected by treatments (P<0.05). The total forestomach weight, the average weight of each compartment and the maximum capacity of reticulum-rumen were not affected by treatments, as well as the parameters for ruminal epithelium development. The additives included in the starter feed were equally effective as regard to its effects on animal performance and rumen development of milk-fed dairy calves.

Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o efeito da inclusão de butirato de sódio, monensina sódica ou propionato de cálcio no concentrado inicial, sobre o desempenho, parâmetros sanguíneos e desenvolvimento ruminal de bezerros leiteiros. No primeiro experimento, 24 bezerras recém-nascidas da raça Holandesa foram alojadas em abrigos individuais até a 10a semana de vida, com livre acesso à água, sendo alimentadas com 4 litros de leite/dia e concentrado ad libitum, enquanto feno de capim-coast-cross foi fornecido após o desaleitamento. Os animais foram distribuídos em blocos de acordo com peso ao nascer e data de nascimento e alocados em um dos tratamentos, de acordo com o aditivo no concentrado: 1)Butirato de sódio (0,15%); 2)Monensina sódica (30 ppm); e 3)Propionato de cálcio (0,15%). Os animais foram pesados e avaliados quanto à altura na cernelha, largura do traseiro e perímetro torácico semanalmente. A partir da 4a semana foram realizadas colheitas semanais de amostras de sangue para determinação de glicose, ácidos graxos livres (AGL) e ?-hidroxibutirato (BHBA). Não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos para o consumo de concentrado ou de feno e para o peso e ganho de peso dos animais (P>0,05). As avaliações quanto à altura na cernelha e perímetro torácico também não apresentaram diferenças entre os tratamentos (P>0,05), entretanto as medidas de largura de traseiro foram menores para os animais do tratamento com adição de propionato de cálcio (P<0,05). As concentrações plasmáticas de glicose, AGL e BHBA não foram afetadas pelos tratamentos (P>0,05). Houve efeito significativo da idade (P<0,0001) para a concentração plasmática de glicose, sendo esta reduzida com a idade dos animais. No segundo experimento, 15 bezerros recémnascidos da raça Holandesa, recebendo o mesmo manejo nutricional, foram fistulados no rúmen e alojados em baias individuais até a 10ª semana de vida. A partir da 4ª semana, foram realizadas colheitas semanais de fluído ruminal para determinação de pH, ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e N-amoniacal; e de sangue para determinação de glicose. Ao completar dez semanas os animais foram abatidos para avaliação do desenvolvimento do trato digestório superior e de papilas ruminais. Não foram observadas diferenças significativas entre tratamentos para o consumo de concentrado e para o desempenho dos animais (P>0,05). Houve efeito significativo (P<0,05) de tratamento e horário de colheita para o pH ruminal. As concentrações de AGCC totais, bem como de cada ácido, não foram afetadas pelos tratamentos. As concentrações plasmáticas de glicose foram afetadas pelos tratamentos (P<0,05). O peso total do trato digestório superior, os pesos médios de cada compartimento e a capacidade máxima do retículo-rúmen não foram afetados pelos tratamentos, assim como os parâmetros de desenvolvimento do epitélio ruminal. Os aditivos incluídos no concentrado inicial se mostraram igualmente eficazes no que diz respeito aos seus efeitos no desempenho e desenvolvimento ruminal de bezerros em aleitamento. / Two trials were conducted in order to evaluate the effects of the addition of sodium butyrate, sodium monensin or calcium propionate in the starter feed on the performance, blood parameters and ruminal development of dairy calves. In the first experiment, 24 newborn Holstein calves were housed in individual hutches during ten weeks of life, with free access to water, being fed 4 liters of milk per day and starter ad libitum, with coast-cross hay offered only after weaning. The animals were blocked according to weight and date of birth and allocated in one of the treatments, according to the additive included in the starter feed: 1) sodium butyrate (0.15%); 2) sodium monensin (30 ppm); and 3) calcium propionate (0.15%). Animals were weighed and evaluated for whiter height, hearth girth and hip width weekly. From the fourth week of age blood samples were taken for glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate concentration determination. No significant differences were observed among treatments for starter or hay intake, and weight gain or live weight (P>0.05). Measurements of whiter height and hearth girth were also not affected by treatments (P> 0.05); however, measures of hip width of the animals were smaller for treatment with addition of calcium propionate (P<0.05). Plasma concentrations of glucose, free fatty acids and ?-hydroxybutyrate were not affected by treatment (P>0.05). There was significant effect of age (P<0.0001) for the plasma concentration of glucose, with reduction as animals aged. In the second experiment, 15 male newborns Holstein calves, receiving the same nutritional management, were ruminally fistulated and housed in individual pens during ten weeks of life. From the fourth week of age ruminal samples were taken weekly for the determination of pH, short-chain fatty acids (SCFA) and ammonia-N concentration. Blood samples were also taken weekly for glucose determination. By completing ten weeks of age, animals were slaughtered for forestomach growth and papillae development evaluation. No significant differences were observed among treatments for starter intake as well as for animal performance (P>0.05). The ruminal pH was significantly affected (P<0.05) by treatments and by sampling time. Concentrations of total SCFA and individual SCFA were not affected by treatments (P<0.05). Plasma concentrations of glucose were affected by treatments (P<0.05). The total forestomach weight, the average weight of each compartment and the maximum capacity of reticulum-rumen were not affected by treatments, as well as the parameters for ruminal epithelium development. The additives included in the starter feed were equally effective as regard to its effects on animal performance and rumen development of milk-fed dairy calves.