Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O boto-cinza (Sotalia guianensis Van Beneden, 1864) é uma espécie de delfinídeo que ocorre em águas costeiras das Américas do Sul e Central, especialmente em ambientes estuarinos, baías e áreas protegidas. Estudos de ecologia alimentar podem prover informações sobre o comportamento das espécies e de suas presas. Nesse contexto, o conhecimento da dieta é o primeiro passo para entendermos como se dá as relações predador-presa do ambiente. Neste estudo são abordados aspectos do hábito alimentar do boto-cinza na Baía de Guanabara, com o objetivo caracterizar sua dieta, e realizar comparações intra e interespecíficas, utilizando para isso a análise do conteúdo estomacal de exemplares encalhados entre 1990 e 2009. Outras espécies de delfinídeos foram utilizadas para a comparação com o boto-cinza, estes apresentam hábitos costeiros e oceânicos, são elas: o golfinho-pintado-do-Atlântico (Stenella frontalis Cuvier, 1829), o golfinho-de-dentes-rugosos (Steno bredanensis Lesson, 1828), o golfinho-comum (Delphinus delphis Linnaeus, 1758) e o golfinho-nariz-de-garrafa (Tursiops truncatus Montagu, 1821), o golfinho-de-Fraser (Lagenodelphis hosei Fraser, 1956) e o golfinho-riscado (Stenella coeruleoalba Meyen, 1833). A metodologia empregada se baseia na triagem do conteúdo estomacal, e identificação dos itens alimentares recuperados (otólitos, vértebras de teleósteos e bicos de cefalópodes). O comprimento e biomassas das presas foram estimados com o uso de equações de regressão encontradas na literatura para essas espécies. Para verificar variações intraespecíficas na dieta do boto-cinza, as amostras foram separadas nas categorias: machos adultos, fêmeas adultas e juvenis, e também segundo a estação do ano em que os estômagos foram recuperados, classificados em estações quente/chuvosa (out-abr) e fria/seca (mai-set). Para a caracterização da dieta do boto-cinza e posteriores comparações intra e interespecíficas, foram utilizados os parâmetros: abundância, riqueza, ocorrência, comprimento e biomassa estimada das presas. Os teleósteos foram o grupo de presas mais freqüente e abundante na dieta do boto-cinza, seguido dos cefalópodes e por último dos crustáceos. Foi visto uma alta similaridade da dieta entre fêmeas, machos e juvenis com relação às espécies consumidas e ao perfil das presas, sendo o porte das presas diferente entre adultos e juvenis. Com relação a variações sazonais, foi visto que as espécies consumidas variaram em quantidade, porém, o tamanho e o perfil das presas se mantive o mesmo entre as épocas quente/chuvosa e fria/seca. A abundância, biomassa e riqueza de espécies foram maiores nas estações quentes/chuvosas que nas estações frias/secas, o que pode ser um reflexo da maior disponibilidade de presas nessa época. As demais espécies de delfinídeos consumiram maior variedade de presas que o boto-cinza, o que pode estar relacionado a uma maior movimentação dessas espécies ao longo da costa. Este estudo indica que o boto-cinza apresenta variações intra-específicas no seu hábito alimentar entre adultos e juvenis, e variações sazonais na composição de sua dieta. Seus hábitos alimentares diferiram das demais espécies de delfinídeos, e indicam que o boto-cinza encontra na Baía de Guanabara recursos alimentares suficientes para seu requerimento energético, não precisando sair da região da baía para sua alimentação ou realizando apenas pequenos deslocamentos. / In this work, aspects of feeding habits of the Guiana dolphin, Sotalia guianensis (Van Beneden, 1864), were studied in Guanabara Bay (N = 26), with the aim of characterizing its diet and comparing the results with those from other species of the Delphinidae family (N = 31). The stomach contents analyzed were collected from specimens stranded on the beaches of Rio de Janeiro between 1990 and 2009. The methodology is based on washing stomach contents through 1 mm mesh sieves, as well as on the identification of the food items remained, such as teleost otoliths and cephalopod beaks. The length of the food items was used to estimate the length and weight of preys using regression equations found in the literature for these species. Teleosts constituted the most abundant prey in the stomachs of Guiana dolphin (N = 325), being followed by cephalopods (N = 76) and finally by crustaceans (N = 16). Were identified 17 species of teleosts belonging to 10 families, as well as two species of cephalopods from the Loliginidae family and one species of crustacean from the Penaeidae family. The most important species in Guiana dolphin diet, according to the index of relative importance were the whitemouth croaker (Micropogonias furnieri), the weakfish (Cynoscion jamaicensis) and atlantic midshipman (Porichthys porosissimus). Among cephalopods, the squid Loligo plei was the most representative prey in the diet. Regarding the size of prey, most consumed teleosts had the length varying between 11 and 20 cm (15.4 5.5 cm), characterizing the consumption of juvenile fishes. The cephalopods mantle length ranged from 6 to 15 cm (11.8 4.2 cm). A great similarity was observed in the diet composition of females, males, and juveniles of Guiana dolphin, however, the mean length and biomass of fish differed between those consumed by adults and those preyed by juveniles (Kruskal-Wallis, p<0,05, posteriori comparison of medians). Species richness was higher in warm seasons, as well as the diversity and evenness index, which may be related to a greater availability of prey during these seasons. Proportions of the preys consumed varied, however, the composition of the diet, as well as the habits and size of prey, remained similar between seasons. While all species consumed by Guiana dolphin presented coastal habits, the other delphinids species consumed preys of larger distributions, which could be related to a greater movement of these species along the coast. This study showed that there are variations in food habits of Guiana dolphin in Guanabara Bay and indicates that this species feeds on the available resources in the region.

Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O boto-cinza (Sotalia guianensis Van Beneden, 1864) é uma espécie de delfinídeo que ocorre em águas costeiras das Américas do Sul e Central, especialmente em ambientes estuarinos, baías e áreas protegidas. Estudos de ecologia alimentar podem prover informações sobre o comportamento das espécies e de suas presas. Nesse contexto, o conhecimento da dieta é o primeiro passo para entendermos como se dá as relações predador-presa do ambiente. Neste estudo são abordados aspectos do hábito alimentar do boto-cinza na Baía de Guanabara, com o objetivo caracterizar sua dieta, e realizar comparações intra e interespecíficas, utilizando para isso a análise do conteúdo estomacal de exemplares encalhados entre 1990 e 2009. Outras espécies de delfinídeos foram utilizadas para a comparação com o boto-cinza, estes apresentam hábitos costeiros e oceânicos, são elas: o golfinho-pintado-do-Atlântico (Stenella frontalis Cuvier, 1829), o golfinho-de-dentes-rugosos (Steno bredanensis Lesson, 1828), o golfinho-comum (Delphinus delphis Linnaeus, 1758) e o golfinho-nariz-de-garrafa (Tursiops truncatus Montagu, 1821), o golfinho-de-Fraser (Lagenodelphis hosei Fraser, 1956) e o golfinho-riscado (Stenella coeruleoalba Meyen, 1833). A metodologia empregada se baseia na triagem do conteúdo estomacal, e identificação dos itens alimentares recuperados (otólitos, vértebras de teleósteos e bicos de cefalópodes). O comprimento e biomassas das presas foram estimados com o uso de equações de regressão encontradas na literatura para essas espécies. Para verificar variações intraespecíficas na dieta do boto-cinza, as amostras foram separadas nas categorias: machos adultos, fêmeas adultas e juvenis, e também segundo a estação do ano em que os estômagos foram recuperados, classificados em estações quente/chuvosa (out-abr) e fria/seca (mai-set). Para a caracterização da dieta do boto-cinza e posteriores comparações intra e interespecíficas, foram utilizados os parâmetros: abundância, riqueza, ocorrência, comprimento e biomassa estimada das presas. Os teleósteos foram o grupo de presas mais freqüente e abundante na dieta do boto-cinza, seguido dos cefalópodes e por último dos crustáceos. Foi visto uma alta similaridade da dieta entre fêmeas, machos e juvenis com relação às espécies consumidas e ao perfil das presas, sendo o porte das presas diferente entre adultos e juvenis. Com relação a variações sazonais, foi visto que as espécies consumidas variaram em quantidade, porém, o tamanho e o perfil das presas se mantive o mesmo entre as épocas quente/chuvosa e fria/seca. A abundância, biomassa e riqueza de espécies foram maiores nas estações quentes/chuvosas que nas estações frias/secas, o que pode ser um reflexo da maior disponibilidade de presas nessa época. As demais espécies de delfinídeos consumiram maior variedade de presas que o boto-cinza, o que pode estar relacionado a uma maior movimentação dessas espécies ao longo da costa. Este estudo indica que o boto-cinza apresenta variações intra-específicas no seu hábito alimentar entre adultos e juvenis, e variações sazonais na composição de sua dieta. Seus hábitos alimentares diferiram das demais espécies de delfinídeos, e indicam que o boto-cinza encontra na Baía de Guanabara recursos alimentares suficientes para seu requerimento energético, não precisando sair da região da baía para sua alimentação ou realizando apenas pequenos deslocamentos. / In this work, aspects of feeding habits of the Guiana dolphin, Sotalia guianensis (Van Beneden, 1864), were studied in Guanabara Bay (N = 26), with the aim of characterizing its diet and comparing the results with those from other species of the Delphinidae family (N = 31). The stomach contents analyzed were collected from specimens stranded on the beaches of Rio de Janeiro between 1990 and 2009. The methodology is based on washing stomach contents through 1 mm mesh sieves, as well as on the identification of the food items remained, such as teleost otoliths and cephalopod beaks. The length of the food items was used to estimate the length and weight of preys using regression equations found in the literature for these species. Teleosts constituted the most abundant prey in the stomachs of Guiana dolphin (N = 325), being followed by cephalopods (N = 76) and finally by crustaceans (N = 16). Were identified 17 species of teleosts belonging to 10 families, as well as two species of cephalopods from the Loliginidae family and one species of crustacean from the Penaeidae family. The most important species in Guiana dolphin diet, according to the index of relative importance were the whitemouth croaker (Micropogonias furnieri), the weakfish (Cynoscion jamaicensis) and atlantic midshipman (Porichthys porosissimus). Among cephalopods, the squid Loligo plei was the most representative prey in the diet. Regarding the size of prey, most consumed teleosts had the length varying between 11 and 20 cm (15.4 5.5 cm), characterizing the consumption of juvenile fishes. The cephalopods mantle length ranged from 6 to 15 cm (11.8 4.2 cm). A great similarity was observed in the diet composition of females, males, and juveniles of Guiana dolphin, however, the mean length and biomass of fish differed between those consumed by adults and those preyed by juveniles (Kruskal-Wallis, p<0,05, posteriori comparison of medians). Species richness was higher in warm seasons, as well as the diversity and evenness index, which may be related to a greater availability of prey during these seasons. Proportions of the preys consumed varied, however, the composition of the diet, as well as the habits and size of prey, remained similar between seasons. While all species consumed by Guiana dolphin presented coastal habits, the other delphinids species consumed preys of larger distributions, which could be related to a greater movement of these species along the coast. This study showed that there are variations in food habits of Guiana dolphin in Guanabara Bay and indicates that this species feeds on the available resources in the region.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000423660-Texto+Completo-0.pdf: 1269441 bytes, checksum: 013bf89e5344de67da62eb0bd425fc07 (MD5) Previous issue date: 2010 / Ethological studies address the repertoire of behavioral patterns of animals, ie, the innate characteristics of each species. According to this approach, unconditioned, we used the zebrafish (Danio rerio) as a model organism in this behavior research. The zebrafish has great homology with mammals (70-80%), presents a wide behavioral repertoire, and also is sensitive to different pharmacological compounds. Because of its many offspring (200-300 eggs) generated every 2-3 times a week and its rapid development, it has become an appropriate model system to screen drugs quickly and at low cost. Although there are studies in the scientific literature that evaluate behavioral profiles as fear/anxiety in zebrafish, there is a small amount of studies on pharmacology, validated and documented as occurs with rodents. Thus, in this study, we used acute treatment with antianxiety drugs to assess such behavioral profiles in zebrafish in order to validate it as a model organism in research of different anxiolytic drugs. Two experiments were conducted, 50 and 10 minutes of drug exposure, called Group Behavior Task. In both we used an aquarium in which three fish were placed and four behavioral parameters analyzed: height in the aquarium, locomotion, color and shoal cohesion. After the exposure of fish to different concentrations of anxiolytic doses, with 50 minutes of treatment, the benzodiazepines and moderate doses of ethanol showed a decrease in the shoal cohesion of the fish in a dose-dependent manner. Fish treated with buspirone, 5-HT1A receptor agonist, preferentially remained in the upper portion of the tank. Propranolol, β-adrenergic antagonist, has no effect on behavioral parameters analyzed. In the second experiment, we evaluated the effect of the effective dose (anxiolytic) of each drug in the first experiment for 10 minutes in the 1, 2, 3, 4, 5 and 10 minutes. The effects of continuous treatment (with drug in the test aquarium), and no drug in the tank were evaluated. In this case, benzodiazepines reproduced the effects observed in the first experiment on the shoal cohesion with 10 minutes of treatment. Buspirone replied the effect on height in the aquarium. Ethanol showed better results in the height parameter in the test tank with continuous treatment. A third experiment, called Test of Preference for Light-Dark Compartment was performed with anxiolytic doses of benzodiazepines, ethanol and buspirone. Treated fish showed a strong preference for a light environment, different from untreated fish, which has a preference for the dark side. There was no significant change in latency to the first enter or the total number of crossings in de compartments. The models developed in this work, the Group Behavior Task (50 and 10 minutes) and Test Preference for Light-Dark Compartment with zebrafish have predictive validity and can be used for initial screening of new anxiolytic drug or to identify the potential effects of not studied drugs in behavior. The Test of Preference for Light-Dark Compartment is particularly useful for screening anxiolytic drugs, whereas the Group Behavior Task, which analyzes other behavioral parameters such as height in the tank and shoal cohesion, may be useful to discriminate between different classes drugs. / Estudos etológicos abordam o repertório de padrões de comportamento de animais, ou seja, as características inatas peculiares de cada espécie. De acordo com esta abordagem, não-condicionada, utilizou-se o zebrafish (Danio rerio) como organismo modelo neste trabalho comportamental. O zebrafish possui grande homologia com mamíferos (70-80%), apresenta um vasto repertório comportamental, e ainda, é sensível a diferentes compostos farmacológicos. Devido ao seu grande número de descendentes (200-300 ovos) gerados a cada 2-3 vezes por semana e ao seu rápido desenvolvimento, tornou-se um organismo adequado para screening de drogas de forma rápida e de baixo custo. Embora já existam na literatura científica estudos avaliando perfis comportamentais como medo/ansiedade em zebrafish, são poucos os estudos associados à farmacologia, validados e documentados, como ocorre com roedores. Desta forma, nesse trabalho, empregamos tratamento agudo com drogas ansiolíticas conhecidas para avaliar tais perfis comportamentais em zebrafish a fim de validá-lo como um organismo modelo na pesquisa de diferentes drogas ansiolíticas. Foram realizados dois experimentos, um com duração de 50 e outro de 10 minutos nomeados Group Behavior Task. Em ambos utilizou-se um aquário no qual eram colocados três peixes e analisados quatro parâmetros comportamentais: altura de permanência no aquário, locomoção, cor e coesão social. Após a exposição dos peixes a quatro concentrações diferentes de drogas, com 50 minutos de tratamento, os benzodiazepínicos e, doses moderadas de etanol apresentaram diminuição na coesão social dos peixes de forma dose dependente. Peixes tratados com buspirona, agonista do receptor pré-sináptico 5-HT1A, preferencialmente permaneceram na porção superior do aquário. Propranolol, antagonista β-adrenégico, não apresentou nenhum efeito nos parâmetros comportamentais analisados. No segundo experimento, avaliamos o efeito da dose efetiva (ansiolítica) de cada fármaco do primeiro experimento durante 10 minutos, nos minutos 1, 2, 3, 4, 5 e 10. Foi avaliado simultaneamente tratamento contínuo (com droga no aquário teste) e sem droga no aquário teste. Neste, os benzodiazepínicos reproduziram os efeitos observados no primeiro experimento quanto à coesão social com 10 minutos de tratamento. Buspirona replicou o efeito na altura em que os peixes permaneceram no aquário. Com exceção ao etanol, que apresentou melhores resultados no parâmetro altura no aquário com tratamento contínuo. Um terceiro experimento, denominado Teste de Preferência por Claro-Escuro, foi realizado com as doses ansiolíticas dos benzodiazepínicos, etanol e buspirona. Os peixes tratados apresentaram alteração no tempo de permanência no ambiente claro, diferente de peixes não tratados, que tem preferência pelo lado escuro. Não houve alteração significativa na latência para o primeiro cruzamento nem no número total de cruzamentos. Os modelos desenvolvidos nesse trabalho, Group Behavior Task (10 e 50 minutos) e Teste de Preferência por Claro-Escuro em zebrafish apresentam validade preditiva e podem ser utilizados para screening inicial de novos candidatos a drogas ansiolíticas ou para identificar a potencial ação de fármacos ainda não estudados em comportamento. O Teste de Preferência por Claro-Escuro é particularmente útil para o screening de drogas de caráter ansiolítico, enquanto que, o Group Behavior Task, que analisa os demais parâmetros comportamentais como altura no aquário e coesão social, pode ser útil para se discriminar diferentes classes de drogas.

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En el presente trabajo se registraron y describieron ocho morfotipos larvales de cestodes pertenecientes al grupo Scolex, parasitando a Cynoscion guatucupa, Porichthys porosissimus y Artemesia longinaris en el estuario de Bahía Blanca. Tanto en C. guatucupa como en P. porosissimus se hallaron tres morfotipos larvales en cada uno de ellos, los cuales fueron asignados a los géneros: Anthobothrium, Crossobothrium y Acanthobothrium. Artemesia longinaris presentó dos morfotipos larvales, de los cuales uno pudo esclarecerse su identidad genérica, Orygmatobothrium y el restante pudo determinarse su estatus ordinal, Rhinebothriidea. Se postuló que este último morfotipo podría representar un nuevo género. Se determinó que los morfotipos larvales hallados pertenecen a diferentes órdenes de cestodes parásitos de elasmobranquios: Tetraphyllidea, Onchoproteocephalidea, Phyllobothriidea y Rhinebothriidea. Los morfotipos larvales se identificaron mediante la conjunción de técnicas morfológicas y estudios moleculares para lograr mayor precisión y evitar subestimar especies crípticas, no evidenciables mediante las técnicas morfológicas y morfométricas tradicionales. Se hallaron diferencias en el tipo y el patrón de distribución de los microtricos entre los diferentes morfotipos larvales y se evaluó la existencia de variaciones dentro de cada morfotipo. El conocimiento de las identidades genéricas de los morfotipos larvales y de las respectivas interrelaciones con los hospedadores, permitieron reconstituir las tramas tróficas para poder analizar los ciclos de vida. Se reconstruyeron parcialmente los ciclos de vida hipotéticos de Anthobothrium, Crossobothrium, Acanthobothrium y Orygmatobothrium en el mar Argentino. Además, se predijo cómo podría ser el ciclo de vida del miembro del orden Rhinebothriidea. Se determinó que los tres hospedadores estudiados, C. guatucupa, A. longinaris y P. porosissimus actúan como hospedadores intermediarios/paraténicos en las vías de transmisión de los metacestodes hallados en el estuario de Bahía Blanca. Se determinó que C. guatucupa y P. porosissimus albergan los mismos géneros larvales de cestodes, lo cual indica una superposición en el nicho trófico y una baja especificidad de los géneros larvales por el hospedador intermediario. Se pudo demostrar que las larvas del grupo Scolex producen cambios degenerativos en la mucosa digestiva de los peces que parasitan, produciendo atrofia compresiva y destrucción del epitelio en el sitio de fijación. El efecto de las lesiones ocasionadas por las larvas sobre el factor de condición del hospedador se encontró directamente influenciado por la intensidad de la infección. Las características de la infección, junto con los detalles que se describieron de la interfaz parásito-hospedador, demostraron una relación coevolutiva bien establecida entre ambos. / In this work eight morphotypes of cestodes larvae morphotypes belonging to the Scolex group, parasitizing Cynoscion guatucupa, Porichthys porosissimus and Artemesia longinaris in the estuary of Bahia Blanca, were recorded and described using morphological and molecular tools. Three larval morphotypes, which were assigned to the genera Anthobothrium, Crossobothrium and Acanthobothrium, were found in both C. guatucupa and P. porosissimus. Artemesia longinaris presented two larval morphotypes, one of which was clarified in its generic identity and belongs to the genus Orygmatobothrium, and the remaining ones could be determined in its ordinal status, Rhinebothriidea. This morphotype was postulated as representative of a novel new genus. It was determined that the larval morphotypes belong to different orders of cestodes parasites of elasmobranchs: Tetraphyllidea, Onchoproteocephalidea, Phyllobothriidea and Rhinebothriidea. Larval morphotypes were identified by a combination of morphological and molecular techniques with greater precision and avoid underestimating cryptic species. Differences in type and pattern of distribution between the different larval microtriches were found and also variations of these features within each larval morphotype were revealed. Knowledge of generic identities of larval morphotypes and their respective relationships with the hosts, allowed rebuild food webs for the life cycles analysis. Hypothetical life cycles of members of Anthobothrium, Crossobothrium, Acanthobothrium, Orygmatoobothrium and the representative of Rhinebothriidea from the Argentine Sea, were partially proposed. It was determined that the three hosts studied, C. guatucupa, P. porosissimus and A. longinaris play the role of intermediate/paratenic hosts in the transmission pathway of metacestodes from Bahia Blanca estuary. It was determined that C. guatucupa and P. porosissimus harbor the same larval cestodes genera, indicating an overlap in the trophic niche and low specificity of larval genera by the intermediate host. Degenerative change, compressive atrophy and destruction of the gastrointestinal epithelium produced by the larvae, were shown. The effect of these lesions on the condition factor of the hosts was directly influenced by the intensity of the infection. The characteristics of the infection, along with features in the parasite-host interface, reveal a well-established co-evolutionary relationship.

Foram avaliadas as características hematológicas, mais especificamente a resposta dos elementos de proteção do sangue, de juvenis de pacu, espécie endêmica e neotropical, mantidos em condições adversas e alimentados com dietas contendo colostro bovino liofilizado. Esta primeira secreção láctea, rica fonte de proteínas, moléculas biologicamente ativas e elementos antioxidantes, pode atuar positivamente no sistema de proteção dos animais. No experimento de estresse crônico, juvenis de pacu foram alocados em elevada densidade (50 kg peixe/m3) por 30 dias. No experimento de estresse agudo, os juvenis permaneceram por 15 dias em gaiolas de alimentação, sendo submetidos à baixa concentração de oxigênio (0,75 mg/L). Durante o período experimental, quatro dietas contendo 0, 10, 20 e 30% de colostro bovino liofilizado (CBL) (com 32% de proteína bruta), foram fornecidas duas vezes diariamente (considerando-se quadruplicatas para cada dieta). Antes do início e ao final de cada experimento, analisou-se para cada lote os parâmetros biométricos de biomassa e comprimento para obtenção de análises de desempenho. Oito juvenis para a situação experimental de adensamento, e dez juvenis para a de hipóxia, de cada tratamento, foram anestesiados com benzocaína e amostras de sangue foram coletadas do vaso caudal para análises hematológicas. Foram realizadas análises de eritrograma, leucograma (contagem total e diferencial de leucócitos), hematócrito e calculados os índices hematimétricos. As imunoglobulinas séricas dos juvenis de pacu foram quantificadas através do método de Turvação por Sulfato de Zinco (ZST), que foi padronizado para peixes no presente trabalho. Os juvenis de pacu foram distribuídos em um delineamento experimental inteiramente casualizado no experimento de estresse crônico, e para o de estresse agudo, em blocos, ambos com quatro tratamentos. Os dados foram submetidos à análise de variância, através do procedimento \"General Linear Model\" (PROC GLM) do programa estatístico SAS (1989). Para a avaliação de diferenças entre médias foram efetuados contrastes entre pares de médias utilizando-se o método de Tukey, onde foi considerada a probabilidade de 5% (P<0,05). Não foi observada influência do colostro bovino no desempenho e nas variáveis hematológicas analisadas em ambas situações experimentais, estresse crônico e agudo. Entretanto, para o experimento de estresse agudo, a inclusão de CBL na dieta dos pacus influenciou o número de células granulocíticas especiais, sendo que o grupo que recebeu 0% de CBL apresentou menor número de células que o grupo que recebeu 10% de CBL, assim como o número de monócitos, sendo que o grupo que recebeu 20% de CBL apresentou menor número de células que o grupo que recebeu 30% de CBL na dieta (P<0,05). Embora o colostro bovino não tenha influenciado as variáveis hematológicas analisadas, não houve efeito negativo à esta fonte de proteína heteróloga fornecida aos peixes, uma vez que o desempenho dos animais que receberam o composto na dieta foi semelhante aos animais que receberam dieta sem esta secreção láctea. Considerando os presentes resultados, o colostro bovino liofilizado, uma fonte rica de moléculas bioativas, não contribuiu para a proteção de juvenis de pacu sujeitos à alta densidade de estocagem e baixa oxigenação. / Hematological characteristics were evaluated, specifically the response of blood protection elements of juvenile pacu, endemic and neotropical species, kept under adverse conditions and fed diets containing lyophilized bovine colostrum. This first milk secretion, a rich protein source, biologically active molecules and antioxidant elements, can act positively in the animal protection system. In the chronic stress experiment, juvenile pacu were allocated at high density (50 kg fish/m3) for 30 days. In the acute stress experiment, the juveniles remained for 15 days in feed cages and were submitted to low oxygen concentration (0.75 mg/L). During the experimental period, four diets containing 0, 10, 20 and 30% of lyophilized bovine colostrum (CBL) (with 32% crude protein) were given twice daily (considering quadruplicates for each diet). Before the beginning and the end of each experiment, the biometric parameters of biomass and length were analyzed in each batch for performance analyses. Eight juveniles for the experimental situation of densification and ten juveniles for hypoxia of each treatment were anesthetized with benzocaine and blood samples were collected from the caudal vein for the hematological analysis. Erythrogram, leukogram (total and differential counts of leukocytes), hematocrit and hematimetric indexes were performed. The serum immunoglobulins of the pacu juveniles were quantified by the Zinc Sulfate Turbid (ZST) method, which was standardized for fish in this study. Juveniles pacu were distributed in a completely randomized experimental design for cronic stress experiment, and for acute stress in randomized blocks, both with four treatments. Data were submitted to the \"General Linear Model\"procedure (PROC GLM) of the statistical program SAS (1989). For a mean-to-average assessment, contrasts were performed between pairs of means using the Tukey method, where a probability of 5% (P <0.05) was considered No influence of bovine colostrum was observed on performance and hematological variables analyzed in both experimental situations, chronic and acute stress. However, for the experimental situation of acute stress, the addition of CBL to the diet of pacu influenced the number of special granulocytic cells, and the group that received 0% CBL presented lower number of cells than the group that received 10% CBL, as well as the number of monocytes. The group that received 20% of CBL presented lower number of monocytes than the group that received 30% of CBL in the diet (P <0.05). Although bovine colostrum did not influence the hematological variables analyzed, there was no negative effect on this source of heterologous protein supplied to the fish, since the performance of the animals that received the compound in the diet was similar to the animals that received diet without this milk secretion. Considering theresults, lyophilized bovine colostrum, a rich source of bioactive molecules, does not contribute to the protection of juvenile pacu subjected to high stocking density and low oxygenation.

O desenvolvimento ontogenético em peixes é considerado como uma das etapas mais importantes no fornecimento de informações para biologia do desenvolvimento, aquicultura e estudos taxonômicos. A Proteína Óssea Morfogenética 2 (BMP-2) é considerada uma molécula essencial como regulador no desenvolvimento embrionário e na formação óssea, sendo ainda pouco estudada em peixes. Neste trabalho, foram comparadas todas as fases do desenvolvimento de três espécies de peixes importantes da bacia do rio Pardo, curimbatá (Prochilodus hartii), piabanha (Brycon sp) e piau (Leporinus steindachneri). A superfície ovocitária, estádios e duração do desenvolvimento embrionário/larval foram classificados com a utilização de microscópio estereoscópio, havendo variações entre as espécies no desenvolvimento. A transformação dos alevinos também apresentaram variações, com 16 dias pós-eclosão em P. hartii, 5 dias em Brycon sp e 14 dias em L. steindachneri. Na imunohistoquímica, BMP-2 foi identificada na blastocele nas fases de blástula e gástrula; na formação da vesícula óptica, notocorda e somitos, na fase embrionária das espécies estudadas. Na fase larval e de juvenil, BMP-2 foi identificada na formação de brânquias, olhos, coração, estômago, intestino, fígado, nadadeiras, músculos e na ossificação em todas as espécies estudadas. Indivíduos adultos foram sacrificados, e depois de realizada a biometria, dissecados para mensuração dos órgãos internos e documentação fotográfica. Observou-se que o estômago de P. hartii tem forma de \"U\" com presença de uma estrutura semelhante a uma moela, enquanto em Brycon sp tem forma de \"J\" com presença de cecos pilóricos aderidos no piloro e em L. steindachneri, o mesmo possui forma de \"Y\" sem presença de cecos pilóricos. Esqueletos foram preparados através da técnica de maceração com insetos dermestídeos, sendo observadas diferenças, sendo interessante descrever que em P. hartii foram encontrados 4 ossos infraorbitais, 6 em Brycon sp e 4 em L. steindachneri. Conclui-se que os exemplares de P. hartii possuem hábito alimentar iliófago, enquanto Brycon sp e L. steindachneri são considerdados onívoros, baseado nos achados anatômicos e a expressão de BMP-2 está ligada com a morfogênese e organogênese na embriologia das espécies estudadas. / The ontogenetic development in fish is considered as one of the most important steps in providing information to developmental biology, aquaculture and taxonomic studies. The Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP-2) is considered as a molecule essential for regulaton of embryonic development and bone formation, and has been poorly studied in fish. In this work, we have compared all the development phases of three important species of fish from the Pardo River basin, Curimbata (Prochilodus hartii) Piabanha (Brycon sp) and Piau (Leporinus steindachneri). The surface oocyte, stage and duration of embryonic/larval development were classified by using a stereoscopic microscope, and showed variations between the studied species. The transformation of the juveniles also showed variations, with 16 days post-hatching in P. hartii, 5 days in Brycon sp and 14 days in L. steindachneri. In immunohistochemistry, BMP-2 was identified in the blastocoel of the blastocyst and gastrula stages; forming the optic vesicle, notochord and somites on embryo of the ivestigated species. In larval and juvenil stages, BMP-2 has been identified in the formation of gills, eyes, heart, stomach, intestine, liver, fins, muscle and ossification in the species studies. Adults were sacrificed, dissected for biometrics measurements of the internal organs and photo documentation. The stomach of P. hartii showed a \"U\" shape with the presence of a structure similar to a gizzard, whereas in Brycon sp it was shaped like a \"J\" with the presence of pyloric caeca and in L. steindachneri it presented a \"Y\" form without the presence of pyloric caeca. Skeletons were prepared by retting technique with Dermestides beetles, interesting differences were observed between numbers of bones, where 4 infraorbital bones were found in P. hartii, 6 in Brycon sp and 4 in L. steindachneri. It is concluded that the specimens of P. hartii show ilyophagous eating habits while Brycon sp and L. steindachneri were considered omnivorous based on anatomical findings and that expression of BMP-2 is linked with morphogenesis and organogenesis of the studied species.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000423971-Texto+Completo-0.pdf: 420258 bytes, checksum: 53b4c1e4ced71be9f6cf930e265f01fb (MD5) Previous issue date: 2010 / The zebrafish is a small teleost that has been considered an ideal model for studying many human diseases. Studies have shown that many genes are similar to mammals’, including humans. Evidence has indicated the important role played by ATP and adenosine in the central nervous system (CNS). The neurotransmitter ATP is stored in a vesicular manner and released into the synaptic cleft, where it can act on specific receptors located in the cell membrane. The inactivation of the signal mediated by extracellular ATP is performed by a family of enzymes called ectonucleotidases, including NTPDases (nucleoside triphosphate difosfohydrolases) and ecto-5'-nucleotidase. These enzymes are responsible for the extracellular catabolism of the neurotransmitter ATP to adenosine. Studies from our laboratory showed the presence of ectonucleotidases, such as NTPDases and ecto-5'- nucleotidase in the CNS of zebrafish. The objective of this study was to investigate the in vivo effects of subchronic exposure (96 hours) to arsenic on NTPDases and ecto-5'-nucleotidase activities in zebrafish brain and to evaluate the behavioral changes induced by arsenic in this species. For the behavioral parameters, there was a decrease in locomotor activity of animals exposed to 5 mg/L arsenic (30. 5%) when compared with the control group whereas there were no changes in the distance traveled during 5 minutes of analysis. During 5 minutes of behavioral assessment, no significant changes were observed in mean speed and in absolute turn for all arsenic concentrations tested. The time spent in the upper tank was not changed between the groups tested with different arsenic concentrations. The time spent in the middle of the tank significantly decreased at 0. 05 mg/L (55%), 5 mg/L (62%) and 15 mg/L (62%) when compared to control group. Moreover, the time spent in the lower region is significantly higher (28%) only in the group treated with 5 mg/L arsênio when compared to control. There was a significant decrease in ATP hydrolysis in the presence of 0. 05 mg/L (37. 6%), 5 mg/L (34. 8%), and 15 mg/L (30. 6%) arsenic when compared to control. The inhibitory effect was also observed in ADP hydrolysis at 0. 05 mg/L (25%), 5 mg/L (38%) and 15 mg/L (41%) when compared to control. Regarding to 5'-nucleotidase activity, a reduction in AMP was promoted by arsenic 0. 05 mg/L (37. 7%), 5 mg/L (26. 7%), and 15 mg/L (35%). The results demonstrated that changes on ectonucleotidases after arsenic treatments can be one of the factors involved in behavioral and neurotoxic effects induced by this contaminant in the central nervous system. / O peixe zebra é um pequeno teleósteo que vem sendo considerado um modelo ideal para estudos de numerosas doenças humanas. Estudos demonstraram que muitos genes deste peixe são similares ao de mamíferos, inclusive humanos. Evidências têm indicado o importante papel desempenhado pelo ATP e a adenosina no sistema nervoso central (SNC). O neurotransmissor ATP é armazenado de forma vesicular e liberado na fenda sináptica, onde pode agir em receptores específicos localizados na membrana celular. A inativação do sinal mediado pelo ATP extracelular é realizada por uma família de enzimas denominadas ectonucleotidases, incluindo as NTPDases (nucleosídeo trifosfato difosfoidrolases) e a ecto-5´-nucleotidase. Estas enzimas são responsáveis pelo catabolismo extracelular do neurotransmissor ATP até adenosina. Estudos do nosso laboratório demonstraram a presença de ectonucleotidases como as NTPDases e a ecto-5´-nucleotidase no SNC de zebrafish. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito in vivo da exposição subcrônica (96 horas) ao arsênio sobre a atividade das NTPDases e ecto-5’- nucleotidase em cérebro de peixe zebra, além de avaliar as alterações comportamentais induzidas pelo arsênio nesta espécie. Quanto aos parâmetros comportamentais, houve uma diminuição na atividade locomotora de animais submetidos a 5 mg/L de arsênio (30,5%) quando comparado com o grupo controle, sendo que não houve alteração na distância percorrida durante 5 minutos de análise. Durante 5 minutos de avaliação comportamental, não foram observadas alterações na velocidade média e no ângulo do nado dos peixes em todas as concentrações testadas de arsênio (0,05 mg/L, 5 mg/L e 15 mg/L). O tempo gasto no terço superior do tanque não foi alterado entre os grupos testados com diferentes concentrações de arsênio.O tempo gasto na zona média do tanque diminuiu significativamente nas concentrações de 0,05 mg/L (55%), 5 mg/L (62%) e 15 mg/L (62%) quando comparado ao grupo controle. Além disso, o tempo gasto na zona inferior foi significativamente maior (28%) apenas no grupo tratado com 5 mg/L arsênio quando comparado ao controle. Houve uma diminuição significativa na hidrólise de ATP na presença de 0,05 mg/L (37,6%), 5 mg/L (34,8%) e 15 mg/L (30,6%) de arsênio quando comparado ao controle. O efeito inibitório também foi observado sobre a hidrólise do ADP nas concentrações de 0,05 mg/L (25%), 5 mg/L (38%) e 15 mg/L (41%) quando comparado ao controle. Com relação a atividade da 5’-nucleotidase, uma redução na hidrólise do AMP foi promovida pelo arsênio nas concentrações de 50 mg/L (37,7%), 5 mg/L (26,7%) e 15 mg/L (35 %). Os resultados demonstraram que as alterações sobre ectonucleotidases após tratamentos com arsênio podem ser um dos fatores envolvidos nos efeitos neurotóxicos e comportamentais induzidos por este contaminante no sistema nervoso central.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:42:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000416908-Texto+Completo-0.pdf: 885300 bytes, checksum: 5452bf642a3ce3b68b89d90eab1512b5 (MD5) Previous issue date: 2009 / Zebrafish is a small teleost currently used as a model organism in several different areas of research. Its molecular neurobiology and genome similarities to humans allow its use in different types of studies including toxicological, genetic and pathological analysis. Studies have shown iron deficiency can cause anemia and its overload can be related to pathologies such as hereditary haemocromatosis in the liver and neurodegenerative diseases in the brain like Alzheimer and Parkinson. The cholinergic system has been widely used as a parameter to evaluate the action of toxic agents and behavior pattern alternation. Once removed, the acetylcholineterase can cause the accumulation of acetylcholine in the nerves synapses and muscle junctions, resulting in an excitatory transmission increase. The AChE gene was cloned and sequenced in the zebrafish. The increasing use of zebrafish in several studies involving exposure to toxic agents and drugs, supports its use as an attractive experimental model to evaluate the effects of iron in different tissues. Accordingly, the purpose of this study was to evaluate the effects of the exposure to different concentrations of iron on the activity of acetylcholinesterase in brain and liver of adult zebrafish, as well as, to investigate its possible correlation with the content of iron accumulated in each tissue analyzed. In in vitro tests, the iron was able to promote a significant increase in the activity of acetylcholinesterase in brain (52%) and liver (53%) when the tissues were exposed to high concentration of iron tested (2. 6 mM). An increase of enzyme activity was observed in tests in vivo in the presence of 15mg / L of iron, both in brain (62%) and in liver (70%). The analysis of semi-quantitative PCR showed no modulation in the levels of transcripts of the gene encoding acetylcholinesterase in both tissues of zebrafish. Furthermore, it was demonstrated that the iron in the liver was significantly increased when the fish were exposed to 15mg/ L (226%) and 150mg/L (200%) but not in brain. These results indicate that iron can promote significant changes in the activity of acetylcholinesterase, but that increased activity does not appear to be directly related to the increase of iron in tissues of zebrafish. / O zebrafish é um pequeno teleósteo usado atualmente como organismo modelo em diversas áreas das ciências. As bases moleculares da neurobiologia e o genoma similar ao dos humanos proporcionam o seu uso em diversos tipos de estudos, que incluem toxicológicos, genéticos e patológicos. Estudos demonstraram que o déficit de ferro pode gerar diversos tipos de anemias enquanto seu acúmulo pode estar relacionado com diversas patologias, como a Hemocromatose Hereditária, no fígado e Doenças Neurodegenerativas, como Alzheimer e Parkinson, no cérebro. O sistema colinérgico tem sido amplamente utilizado como parâmetro para avaliar a ação de agentes tóxicos e alteração de padrões comportamentais. A enzima Acetilcolinesterase (AChE), uma vez inibida, pode gerar um acúmulo de acetilcolina nas sinapses nervosas e junções musculares, resultando em um aumento da transmissão excitatória. O gene da AChE foi clonado e seqüenciado no zebrafish. O uso crescente do zebrafish em diversos estudos envolvendo exposição a agentes tóxicos e fármacos, dá suporte a seu uso como um modelo experimental atrativo para avaliar os efeitos do ferro em diferentes tecidos. Neste sentido, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da exposição a diferentes concentrações de ferro sobre a atividade da acetilcolinesterase em cérebro e fígado de zebrafish adultos, assim como investigar a possível correlação destes efeitos com o conteúdo de ferro acumulado em cada um dos tecidos analisados. Nos ensaios in vitro, o ferro foi capaz de promover um aumento significativo na atividade da acetilcolinesterase em cérebro (52%) e fígado (53%) quando os tecidos foram expostos a mais alta concentração de ferro testada (2. 6 mM). Um aumento desta atividade enzimática foi observado nos ensaios in vivo, na presença de 15mg/L de ferro, tanto em cérebro (62%) quanto em fígado (70%). A análise de PCR semiquantitativo mostrou não haver modulação nos níveis de transcritos do gene que codifica a AchE em ambos os tecidos de zebrafish. Além disto, foi demonstrado que o ferro estava significativamente aumentado no fígado quando os peixes foram expostos a 15mg/L (226%) e 150mg/L (200%), mas não no cérebro. Estes resultados indicam que o ferro pode promover alterações significativas na atividade da AchE, mas que o aumento da atividade não parece estar diretamente relacionado com o aumento de ferro nestes tecidos de zebrafish.

Submitted by Roberta Martins Crivelaro null (robertamc.vetunesp@hotmail.com) on 2018-04-04T13:28:30Z No. of bitstreams: 1 Crivelaro_RM_Tese_Doutorado.pdf: 54255477 bytes, checksum: 59fad4a92042108771349ee8c36dca9c (MD5) / Rejected by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: No arquivo pdf submetido ao repositório não consta a ficha catalográfica e o certificado de aprovação (documentos obrigatórios). Peço que insira os mesmos no arquivo pdf e depois faça uma nova submissão. Agradecemos a compreensão on 2018-04-04T14:03:35Z (GMT) / Submitted by Roberta Martins Crivelaro null (robertamc.vetunesp@hotmail.com) on 2018-04-04T15:29:19Z No. of bitstreams: 1 Crivelaro_RM_Tese.pdf: 54429572 bytes, checksum: 4d5ef09be8bb95df6635d4fb516cef61 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-04-04T18:00:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 crivelaro_rm_dr_jabo.pdf: 54429572 bytes, checksum: 4d5ef09be8bb95df6635d4fb516cef61 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-04T18:00:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 crivelaro_rm_dr_jabo.pdf: 54429572 bytes, checksum: 4d5ef09be8bb95df6635d4fb516cef61 (MD5) Previous issue date: 2018-02-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As doenças cardiovasculares constituem grande problema de saúde pública. A necessidade do entendimento do processo de remodelação cardíaca tem acarretado em aumento do número de pesquisas envolvendo terapias biológicas. Neste contexto, peixes teleósteos emergem como opção de modelo experimental, pois possuem homologia morfofuncional e imunológica com mamíferos. Tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus) já vêm sendo empregadas no estudo de diversas doenças que afetam seres humanos. Com a presente pesquisa, objetivou-se desenvolver técnica de acesso videocirúrgico e induzir lesão cardíaca mecânica, em tilápias-do-Nilo; avaliar a eficácia da metadona no controle da dor associada à lesão; e caracterizar os mecanismos de remodelação do miocárdio ventricular, empregando-se avaliações por eletrocardiograma e por microscopias. As avaliações foram conduzidas antes, 1 h depois, e transcorridos 7, 14, 30, 60 e 90 dias da lesão cardíaca. O acesso à cavidade celomática foi realizado utilizando-se um punch de biopsia de 3 mm, permitindo a introdução de endoscópio para posterior amputação do ápice do coração. O procedimento foi executado rapidamente e com baixo índice de mortalidade transoperatória (5,60%) e pós-operatória (3,38%). Aproximadamente 6% de tecido cardíaco, apresentando epicárdio e miocárdio, foi removido com a pinça de biopsia, sendo que a videocirurgia permitiu boa visibilização interna, padronização do tamanho da lesão e alta precisão. A avaliação da analgesia fornecida pela metadona foi realizada por meio de parâmetros fisiológicos e comportamentais. Os resultados demonstraram que, na dose empregada, a metadona não possuiu efeito analgésico em tilápias-do-Nilo, contudo, o tempo de recuperação da anestesia foi maior entre os animais que receberam metadona, sugerindo um possível efeito sedativo do fármaco. Os ventrículos da tilápia-do-Nilo, após lesão, não apresentaram evidências de regeneração e evoluíram para um processo de remodelamento caracterizado pelos espessamentos das paredes do ventrículo e do epicárdio, pela hipertrofia dos cardiomióticos, e por alterações em atividade elétrica. Mudanças no estado ordenado de agregação do colágeno intersticial, no tamanho e no formato dos núcleos dos cardiomiócitos, e na supraorganização da cromatina nuclear dos cardiomiócitos, bem como presença de células poliplóides, de células necróticas e de células apoptóticas foram observadas. Em conclusão, a tilápia-do-Nilo parece ser um bom organismo modelo para estudos em cardiologia experimental, uma vez que seu ventrículo, após amputação do ápice do coração, acumula muitas das alterações vistas em corações de pacientes humanos cardiopatas. Vantagens adicionais referentes ao emprego de tilápias-do-Nilo em pesquisas incluem o tamanho dos animais, o que possibilita a utilização de técnicas menos onerosas; e a facilidade de alojamento e de manutenção de um grande número de indivíduos num espaço reduzido, com baixa taxa de mortalidade. / Cardiovascular disease are a public health big problem. The need for understanding cardiac repair mechanism has increased the number of researches biologic therapy field. In this context, teleost fish show as a experimental model, as they have morpho-functional and immunologic homology whit mammals. Nile tilapia (Oreochromis niloticus) has been used to study several diseases that affect humans. The present study aimed to develop a video surgery access and mechanically induce cardiac injury in Nile tilapia; to evaluate the analgesic activity of methadone in effectively control the pain associated with the injury; and characterize myocardial repair mechanisms by microscopy and electrocardiogram analysis. Data were recorded before cardiac injury and then 1 hour, 7, 14, 30, 60 and 90 days after cardiac injury. The access to coelomatic cavity was made with a 3-mm biopsy punch, allowing the passage of an endoscope for amputation of the cardiac apex. The procedure was quickly performed with intraoperative (5.6%) and post-operatory (3.38%) low mortality rates. Approximately 6% cardiac tissue, including epicardium and myocardium were removed with the biopsy forceps, once video surgery allowed good visualization, standard lesion areas and great precision. To evaluate the analgesic effect of methadone, physiological and behavioral parameters were recorded. Results show that in the dose used, methadone did not show analgesic effect in Nile tilapia. However, recovery time was longer in fish that received methadone, suggesting a sedative effect of the drug in the specie. The ventricles of Nile tilapia, after lesion, did not showed any evidence of regeneration, progressing for a remodeling process, characterized by a thicker ventricle wall and epicardium, by cardiomiocytes hypertrophy, and changes in electrical activity. Changes in the interstitial collagen aggregation state, size and shape of cardiomiocytes nuclei, and in the supra-organization of nuclear chromatin of cardiomiocytes, as well as presence of ploydy, necrotic and apoptotic cells, were also oberved It was concluded that Nile tilapia seems to be a good experimental model organism for experimental cardiology studies, once its ventricle, after have its apex amputated, shows many of the alterations observed in hearts of humans cardiac patients. Additional advantages regarding the use of Nile tilapia in research include the size of the animals, that allows the use of cheaper techniques; and the practical way to keep a great number of animals in small spaces, with low mortality rates.