Tesis entregada a la Universidad de Chile en cumplimiento parcial de los requisitos para optar al grado de Doctor en Ciencias, mención Biología Molecular, Celular y Neurociencias. / El citoesqueleto es un componente esencial en todas las células. En particular, el citoesqueleto de Actina cumple múltiples funciones, desde el desarrollo de un organismo, la migración celular, hasta la formación de distintas estructuras celulares, tales como pelos cuticulares o tricomas, que corresponden a una extensión de la membrana plasmática. En Drosophila melanogaster, las células epiteliales forman un único pelo o tricoma en la zona apico-distal de estas. Durante el desarrollo, esta estructura se forma por la acumulación polarizada de Actina y su subsecuente polimerización lineal, la que es finamente regulada. Sin embargo, aún no se tiene claro cuáles son los mecanismos moleculares que promueven la acumulación y polimerización de Actina para la formación de pelos en las células epiteliales de insectos como Drosophila melanogaster. En nuestro laboratorio se encontró una mutación en un gen no caracterizado en Drosophila melanogaster. Dicha mutación en homocigosis genera la letalidad del animal en el periodo embrionario. Para analizar el fenotipo celular asociado a la mutación de dicho gen, utilizamos mosaicos celulares. Se observó que en células epiteliales mutantes para pelado, la formación de pelos es inhibida. Junto con esto, en células del sistema inmune de Drosophila, la pérdida de función de Pelado genera una alteración en la forma celular, las que aparentemente no se adhieren bien a la superficie de contacto. Sin embargo, al inducir la ganancia de función en estas mismas células se observa la formación de filopodios. Estos datos en conjunto sugieren que Pelado promueve la polimerización lineal de Actina durante la formación del pelo. El fenotipo en la formación de pelos o tricomas generado por la pérdida de función de Pelado es revertido con la ganancia de función de Diaphanous, que corresponde a una formina, que nuclea y polimeriza la Actina de manera lineal. Este fenotipo también es revertido por la pérdida de función de Scar/WAVE, proteína que induce la polimerización ramificada de Actina. En el caso de los hemocitos, la pérdida de función de Diaphanous revierte la formación de filopodios inducida por Pelado. Esto indica que la función de Pelado podría estar mediada por la regulación de la formina Diaphanous. Se generó una mutante que carece del extremo C-terminal de Pelado con la intención de determinar si era suficiente para cumplir la función de la proteína completa. Al analizar el fenotipo de ganancia de función de esta mutante sobre los hemocitos, se observó que de todas maneras se induce la formación de filopodios. Sin embargo, esta mutante no es capaz de revertir el fenotipo de pérdida de función de Pelado en la formación del pelo. Indicando que el extremo N-terminal de Pelado cumple la función de inducir la polimerización lineal de Actina, pero no así en la formación del pelo. Finalmente, el análisis de la distribución celular de ambas versiones de Pelado, muestra que la versión silvestre se localiza más periféricamente que la que carece del extremo Cterminal, sugiriendo que esta región es necesaria para su localización subcelular durante el proceso de formación del pelo. / Cytoskeleton is an essential component in every cell. In particular, Actin cytoskeleton fulfill several functions, from development of an organism, cell migration, to different cell structures formation, such cellular as hairs or trichomes. In Drosophila melanogaster, a single hair grows at the distal side of the apical cortex of every epithelial cell. During development, this structure is formed by the polarized accumulation of Actin and its subsequent linear polymerization, which is tightly regulated. However, it is still not clear what are the molecular mechanisms that promote the accumulation and polymerization of Actin for the hair formation in insects as Drosophila melanogaster. In our lab, we found a mutation in an undescribed gene of Drosophila, which in homozygosity causes embryonic lethality. To analyze the cellular phenotype associated with this mutation, we use cell mosaics. We observed that in mutant epithelial cells, hair formation is inhibited. Moreover, loss of function of Pelado in immune cells generates cell shape defect and its gain of function promotes filopodia formation. All this data together, indicates that Pelado promotes linear actin polymerization during hair formation. The hair formation phenotype generated by Pelado loss of function, is reversed by Diaphanous gain of function, which is a type of formin, that nucleates and polymerize Actin in a linearly. This phenotype is also reversed by the Scar/WAVE loss of function, a protein that induces the branched actin polymerization. In hemocyte cells case, the Diaphanous loss of function reversed the filopodia formation induced by Pelado gain of function. This indicates that Pelado function in Actin polymerization could be mediated by Diaphanous. In order to start unveiling the role of the different domains of Pelado, we generated a new mutant, that lacks the C-terminal portion of Pelado. This mutant was generated to determine whether this region is enough to fulfill the entire protein function. This new mutant also induces the filopodia formation in hemocytes. However, this mutant is not able to revert the hair formation phenotype induced by Pelado loss of function, indicating that the amino portion of Pelado is sufficient to induce linear Actin polymerization, but not to induce hair formation. Finally, analyses of cellular distribution of Pelado forms shows that wild type version has a more peripheral location than the mutant, suggesting that the C-terminal region is required for its localization. / Mayo 2020

OLIVEIRA, J. M. de. Resistência de genótipos de meloeiro à mosca-minadora, Liriomyza sativae Blanchard (Diptera: Agromyzidae). 2017. 55f. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitotecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Weslayne Nunes de Sales (weslaynesales@ufc.br) on 2017-07-10T11:43:24Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_jmoliveira.pdf: 1344293 bytes, checksum: ceadcddc0d3ea182195552d01e8bb550 (MD5) / Approved for entry into archive by Weslayne Nunes de Sales (weslaynesales@ufc.br) on 2017-07-11T11:55:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_jmoliveira.pdf: 1344293 bytes, checksum: ceadcddc0d3ea182195552d01e8bb550 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T11:55:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_jmoliveira.pdf: 1344293 bytes, checksum: ceadcddc0d3ea182195552d01e8bb550 (MD5) Previous issue date: 2017 / The leafhopper (Liriomyza sativae) today is considered one of the main plagues of melon in Brazil, which has been stimulating the abusive use of insecticides to overcome the problems caused by the pest. In this sense, the use of resistant cultivars is a promising alternative. Thus, the present study aimed to evaluate the resistance of melon genotypes in relation to the fruit fly. For that, 21 genotypes of melon were evaluated, from the Genetic Improvement Program of Meloeiro of Embrapa, and the commercial hybrid "Goldex" testifies. The non-preference for oviposition and feeding were evaluated in tests with and without a choice; The effect of genotype antibiosis through larval and pupal viability; As well as the number of trichomes and volatile compounds present in the leaves. For evaluation, the following genotypes AC 35, AC 43, 341, 343, 333 and the Goldex hybrid were selected for the morphological characterization of leaves (adaxial and abaxial) and release of volatile compounds. Quantification of trichomes was carried out in Scanning Electron Microscope (SEM), where the number of trichomes was quantified and correlated with oviposition and plague feeding. The volatile analyzes in the melon leaves were carried out using the solid phase microextraction technique coupled to gas chromatography with mass spectrometry (SPME-GC-MS). As for the non-preference for oviposition (number of oviposition punctures) and feeding (number of feeding punctures), there was no difference between the genotypes and the Goldex control, in a test with a chance of choice. However, in the confinement test, genotypes 343 and AC 43 were the least oviposited by L. sativae, with mean values of 0.9 and 1.3 respectively; While genotype 343 was the least preferred for feeding, with 0.7 feeding punches / 4cm in diameter. As for larval and pupal viability, nine genotypes were more promising: 339, 346, 343, 341, 334, 331, 333, 313 and 330, and a possible antibiosis effect was found in these treatments. In relation to the density of trichomes, there was no difference between the treatments and no correlation was found between the density (adaxial and abaxial) and the number of oviposition and feeding punctures. For the volatile analysis of the leaves, a total of ten volatile compounds distributed among the treatments were obtained. From this study it is suggested to have antibiosis resistance in the nine genotypes mentioned above and the presence of some degree of antixenosis in genotypes 343 and AC43, but the trichomes and volatile compounds identified in the melon genotypes do not present any action Antioxenotic for oviposition and feeding of L. sativae. / A mosca-minadora (Liriomyza sativae) hoje é considerada uma das principais pragas do meloeiro no Brasil, o que vêm estimulando o uso abusivo de inseticidas para contornar os problemas ocasionados pela praga. Neste sentido, o uso de cultivares resistente é uma alternativa promissora. Assim, a presente pesquisa objetivou avaliar a resistência de genótipos de meloeiro em relação a mosca-minadora. Para tanto, avaliou-se 21 genótipos de meloeiro, provenientes do Programa de Melhoramento Genético de Meloeiro da Embrapa, e o híbrido comercial “Goldex” testemunha. Avaliaram-se a não-preferência por oviposição e alimentação, em testes com e sem chance de escolha; o efeito de antibiose dos genótipos através da viabilidade larval e pupal; assim como número de tricomas e compostos voláteis presentes nas folhas. Para avaliação, foram selecionados os seguintes genótipos AC 35, AC 43, 341, 343, 333 e o hibrido Goldex, para caracterização morfológica das folhas (adaxial e abaxial) e liberação de compostos voláteis. Realizou-se a quantificação de tricomas em Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV), onde o número de tricomas foi quantificado e correlacionado com a oviposição e alimentação da praga. As análises de voláteis nas folhas de meloeiro foram realizadas utilizando-se da técnica da microextração em fase sólida acoplada a cromatografia gasosa com espectrometria de massa (SPME-GC-MS). Quanto à não-preferência para oviposição (número de puncturas de oviposição) e alimentação (número de puncturas de alimentação), não houve diferença entre os genótipos e a testemunha Goldex, em teste com chance de escolha. Porém, no teste em confinamento, os genótipos 343 e AC 43 foram os menos ovipositados por L. sativae, com valores médios de 0,9 e 1,3 respectivamente; enquanto, o genótipo 343 foi o menos preferido para alimentação, com 0,7 puncturas de alimentação/4cm de diâmetro. Quanto a viabilidade larval e pupal, nove genótipos mostraram-se mais promissores: 339, 346, 343, 341, 334, 331, 333, 313 e 330, sendo encontrado um possível efeito de antibiose nesses tratamentos. Em relação à densidade de tricomas, não houve diferença entre os tratamentos e não foi encontrado correlação entre a densidade (adaxial e abaxial) e o número de puncturas de oviposição e alimentação. Para a análise de voláteis das folhas, obteve-se um total de dez compostos voláteis distribuídos entre os tratamentos. A partir deste estudo sugerese haver resistência, do tipo antibiose nos nove genótipos, citados acima, e a presença de algum grau de antixenose nos genótipos 343 e AC43, porém os tricomas e os compostos voláteis identificados nos genótipos de meloeiro, não apresentam ação antixenótica para oviposição e alimentação de L. sativae.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-05Bitstream added on 2014-06-13T19:28:31Z : No. of bitstreams: 1 moraisfilho_jc_me_sjrp.pdf: 1021463 bytes, checksum: 598badad9689497c075bc1a02b27e9a6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Até dez espécies de aranhas do gênero Peucetia (Oxyopidae), incluindo duas espécies sul-americanas, P. flava e P. rubrolineata, vivem associadas a várias espécies de plantas com tricomas glandulares nas regiões Neotropical, Paleártica, Neártica e Afrotropical; estas associações provavelmente evoluíram porque insetos aderidos aos tricomas glandulares podem ser utilizados como fonte de alimento pelas aranhas. Na região noroeste do estado de São Paulo, indivíduos de P. flava ocorrem estritamente sobre a planta com tricomas glandulares Rhynchanthera dichotoma (Melastomataceae). Neste sistema nós desenvolvemos experimentos para testar quais os custos e benefícios de P. flava para R. dichotoma e se há condicionalidade nestas associações. Além disso, testamos o papel dos tricomas glandulares como mediadores destas associações aranhas-plantas. Nós observamos que estas aranhas atuam como guarda-costas das plantas e que este efeito é temporalmente condicional; forças base-topo minimizam os efeitos das aranhas durante o período chuvoso. Além disso, estas aranhas indiretamente aumentaram a aptidão da planta pela redução do número de botões inviáveis. Os tricomas glandulares podem ter uma função análoga ao de uma teia pela retenção de presas. As aranhas preferem plantas com tricomas glandulares intactos e permanecem mais tempo sobre estas do que em plantas com tricomas glandulares removidos. Análises isotópicas de 15N mostraram que estas aranhas podem se alimentar tanto de insetos vivos como de carcaças de insetos aderidos aos tricomas glandulares, exibindo hábitos carniceiros. Estes resultados demonstram que esta associação é um mutualismo facultativo. / Up to ten species of the genus Peucetia (Oxyopidae), including two South American species, P. flava and P. rubrolineata, live strictly associated with many species of glandular plants in Neotropical, Palearctic, Afrotropical and Neartic regions; this associations probably evolved because insects adhered to these sticky structures may be used as prey by the spiders. In southeastern Brazil specimens of P. flava were reported to occur strictly on Rhynchanthera dichotoma (Melastomataceae), a glandular shrubby plant that typically inhabits swamps. In this system we used experiments to test the cost and benefit of these spiders to plants and also the role of glandular trichomes as mediators of this association. We found that these spiders act as plant body-guards and this function is temporally conditional; bottom-up forces mitigate the impact of spiders during the rainy season. Moreover, these spiders indirectly increase fitness of the host plant by reducing the number of unviable flower buds, without influence on the seed set. Glandular trichomes probably have an analogous function of a web by capture or prey retention. Spiders prefer plants with intact glandular trichomes, remaining much longer on these ones than on those with these structures removed. Isotopic analyses of 15N demonstrated that these spiders fed on live and dead prey adhered to glandular trichomes, exhibiting a scavenging behavior. These results demonstrate that this association is a facultative mutualism.

Os tricomas são estruturas de origem epidérmicas que podem ser classificados em dois tipos: glandulares e não glandulares (tectores) e estão relacionados, principalmente, com estratégias de defesas de plantas. Pouco se conhece sobre a via de desenvolvimento dos tricomas glandulares, já que a maior parte dos estudos é em Arabidopsis thaliana, modelo no qual os tricomas glandulares são ausentes. O gênero Solanum possui uma grande diversidade de tricomas, em especial glandulares (tipos I, IV, VI e VII). O estudo de tais estruturas vem ganhando cada vez mais destaque, já que são fontes de diversos metabólitos secundários de importância econômica e ecológica. Espécies selvagens são consideradas recursos genéticos para o tomateiro (S. lycopersicum), tais como S. galapagense, a qual possui variações genéticas naturais que lhe confere maior resistência ao ataque de herbívoros. Entre essas variações está a presença de tricomas glandulares do tipo IV, uma fonte do aleloquimico acilaçúcar. A ausência de tricomas glandulares do tipo IV é considerada uma das causas da suscetibilidade do tomateiro cultivado a insetos. No presente trabalho, foi demonstrado que o tomateiro cultivado na verdade forma tricomas do tipo IV, mas estas estruturas estão presentes somente até o primeiro par de folhas, além dos cotilédones. Desse modo, a presença de tricomas tipo IV em espécies selvagens seria considerada uma neotenia, ou seja, a manutenção de estruturas juvenis na fase adulta. Além de se determinar que mutantes de tomateiro afetando a juvenilidade (e.g. Mouse ears e fasciated) apresentam tricomas tipo IV na fase adulta, a formação dessas estruturas correlacionou se com a expressão de miR156, sendo também presentes em grandes quantidades em uma linhagem transgênica superexpressando esse micro RNA relacionado à juvenilidade. Quanto à base genética da presença de tricomas tipo IV nas espécies selvagens, no presente trabalho foi criada uma linhagem quase isogênica ao modelo genética Micro-Tom (MT) contendo a variação genética natural por nós denominada Galapagos enhanced trichomes (Get). Tal variação é derivada de S. galapagense e condiciona a presença de tricomas tipo IV em folhas adultas, quando introgredida em tomateiro cultivado (cv. Micro-Tom). O mapeamento preliminar de Get no cromossomo 2 de tomateiro também foi realizado através do mapa de \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) entre MT e a linhagem MT-Get. A eventual clonagem de GET irá contribuir não somente para se desvendar a base genética da formação de tricomas glandulares, como também contribuir para se criar variedades resistentes a insetos, reduzindo o uso de agrotóxicos. / Trichomes are epidermal structures that can be classified into two types: glandular or non-glandular, and they are mainly related to plant defense strategies. Little is known about the glandular trichome development pathway, since most of the studies are in Arabidopsis thaliana, a model in which this kind of trichome is absent. The Solanum genus has a wide variety of trichomes, especially glandular ones (Types I, IV, VI and VII). The study of these structures are gaining more prominence, since they are sources of several secondary metabolites of economic and ecological importance. Wild species are considered genetic resources for tomato (S. lycopersicum), such as S. galapagense which has natural genetic variations that gives resistance to herbivores attack. Among these variations is the presence of type IV glandular trichomes, a source of the acyl sugar allelochemical. The absence of type IV glandular trichomes is considered to be one of the causes of tomato susceptibility to insects. In this study, it was determined that tomato actually has type IV trichomes, but these structures are present only in the cotyledons and the first pair of leaves. Thus, the presence of type IV trichomes in wild species would be considered a neotenic feature, i.e. the maintenance of juvenile structures in adulthood. In addition, it was determined that tomato mutants affecting youthfulness (e.g. Mouse ears and fasciated) have type IV trichomes in adulthood. Moreover, the presence of these structures was correlated with the expression of miR156, besides the increased formation of type IV trichomes in a transgenic line overexpressing this micro RNA related to youthfulness. On the genetic basis of type IV trichomes presence in wild species, in this work it was created a near isogenic line (NIL) containing the natural genetic variation here named Galapagos enhanced trichomes (Get). This variation is derived from S. galapagense and harbors type IV trichomes in adult leaves, when introgressed in cultivated tomato (cv. Micro-Tom). The preliminary genetic map of Get in the tomato chromosome 2 was conducted through the analysis of \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) between MT and MT-Get. The eventual cloning of GET will contribute not only to unravel the genetic basis of glandular trichomes formation, but will also contribute to create varieties resistant to insects, reducing the pesticides use.

Duas espécies de Barbatimão, da família Leguminosae, foram utilizadas como modelo neste trabalho para elucidar as vias ontogenéticas de produção de taninos: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) e Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Apesar de inseridas em grupos distantes de Leguminosae, as duas espécies são grandes produtoras de taninos, geralmente concentrados na casca, o que confere a elas uma grande procura para uso na medicina popular. Partes vegetativas de Indivíduos jovens e adultos foram processadas para observações em microscopia de luz e eletrônica (varredura e transmissão). Dois tipos de estruturas secretoras são responsáveis pela produção e acúmulo de taninos: idioblastos, encontrados já em indivíduos jovens de ambas espécies; e tricomas secretores, encontrados em gemas vegetativas de indivíduos adultos de S. adstringens. O processo de produção de taninos nas duas espécies é semelhante, com alguma diferença nas etapas de acúmulo. Plastídios e RER parecem ser as organelas associadas à produção de taninos nessas espécies. Destaca-se ainda o relato inédito da ocorrência de coléteres de origem protodérmica em D. mollis. Considerando a problemática referente à classificação de estruturas secretoras, pretende-se utilizar os resultados obtidos para reflexão sobre o tema / In this study, two species of Leguminosae, popularly known as Barbatimão, were used as a model to elucidate the ontogenetic process of tannin production: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) and Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Although inserted in non-related groups of Leguminosae, the two species are largely known as tannin producers, a metabolite often concentrated in the bark, which makes them highly sought after for use in folk medicine. Vegetative parts of young and adult plants were processed for observation using light and electron microscopy (scanning and transmission). Two types of secretory structures are responsible for tannin production and accumulation: idioblasts, found even in young plants of both species, and secretory trichomes, observed in vegetative buds of mature plants of S.adstringens. Tannin production is similar in both species, although some differences in the stages of accumulation occur. Plastids and RER organelles appear to be associated with the production of tannins in these species. This study also provides the first report of colleters in D. mollis, which originate from protodermal cells. Considering the controversies regarding the classification and nomenclature of secretory structures, our results can be used to help clarify some issues regarding secretory structures, especially colleters

Os tricomas são estruturas de origem epidérmicas que podem ser classificados em dois tipos: glandulares e não glandulares (tectores) e estão relacionados, principalmente, com estratégias de defesas de plantas. Pouco se conhece sobre a via de desenvolvimento dos tricomas glandulares, já que a maior parte dos estudos é em Arabidopsis thaliana, modelo no qual os tricomas glandulares são ausentes. O gênero Solanum possui uma grande diversidade de tricomas, em especial glandulares (tipos I, IV, VI e VII). O estudo de tais estruturas vem ganhando cada vez mais destaque, já que são fontes de diversos metabólitos secundários de importância econômica e ecológica. Espécies selvagens são consideradas recursos genéticos para o tomateiro (S. lycopersicum), tais como S. galapagense, a qual possui variações genéticas naturais que lhe confere maior resistência ao ataque de herbívoros. Entre essas variações está a presença de tricomas glandulares do tipo IV, uma fonte do aleloquimico acilaçúcar. A ausência de tricomas glandulares do tipo IV é considerada uma das causas da suscetibilidade do tomateiro cultivado a insetos. No presente trabalho, foi demonstrado que o tomateiro cultivado na verdade forma tricomas do tipo IV, mas estas estruturas estão presentes somente até o primeiro par de folhas, além dos cotilédones. Desse modo, a presença de tricomas tipo IV em espécies selvagens seria considerada uma neotenia, ou seja, a manutenção de estruturas juvenis na fase adulta. Além de se determinar que mutantes de tomateiro afetando a juvenilidade (e.g. Mouse ears e fasciated) apresentam tricomas tipo IV na fase adulta, a formação dessas estruturas correlacionou se com a expressão de miR156, sendo também presentes em grandes quantidades em uma linhagem transgênica superexpressando esse micro RNA relacionado à juvenilidade. Quanto à base genética da presença de tricomas tipo IV nas espécies selvagens, no presente trabalho foi criada uma linhagem quase isogênica ao modelo genética Micro-Tom (MT) contendo a variação genética natural por nós denominada Galapagos enhanced trichomes (Get). Tal variação é derivada de S. galapagense e condiciona a presença de tricomas tipo IV em folhas adultas, quando introgredida em tomateiro cultivado (cv. Micro-Tom). O mapeamento preliminar de Get no cromossomo 2 de tomateiro também foi realizado através do mapa de \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) entre MT e a linhagem MT-Get. A eventual clonagem de GET irá contribuir não somente para se desvendar a base genética da formação de tricomas glandulares, como também contribuir para se criar variedades resistentes a insetos, reduzindo o uso de agrotóxicos. / Trichomes are epidermal structures that can be classified into two types: glandular or non-glandular, and they are mainly related to plant defense strategies. Little is known about the glandular trichome development pathway, since most of the studies are in Arabidopsis thaliana, a model in which this kind of trichome is absent. The Solanum genus has a wide variety of trichomes, especially glandular ones (Types I, IV, VI and VII). The study of these structures are gaining more prominence, since they are sources of several secondary metabolites of economic and ecological importance. Wild species are considered genetic resources for tomato (S. lycopersicum), such as S. galapagense which has natural genetic variations that gives resistance to herbivores attack. Among these variations is the presence of type IV glandular trichomes, a source of the acyl sugar allelochemical. The absence of type IV glandular trichomes is considered to be one of the causes of tomato susceptibility to insects. In this study, it was determined that tomato actually has type IV trichomes, but these structures are present only in the cotyledons and the first pair of leaves. Thus, the presence of type IV trichomes in wild species would be considered a neotenic feature, i.e. the maintenance of juvenile structures in adulthood. In addition, it was determined that tomato mutants affecting youthfulness (e.g. Mouse ears and fasciated) have type IV trichomes in adulthood. Moreover, the presence of these structures was correlated with the expression of miR156, besides the increased formation of type IV trichomes in a transgenic line overexpressing this micro RNA related to youthfulness. On the genetic basis of type IV trichomes presence in wild species, in this work it was created a near isogenic line (NIL) containing the natural genetic variation here named Galapagos enhanced trichomes (Get). This variation is derived from S. galapagense and harbors type IV trichomes in adult leaves, when introgressed in cultivated tomato (cv. Micro-Tom). The preliminary genetic map of Get in the tomato chromosome 2 was conducted through the analysis of \"single nucleotide polymorphism\" (SNPs) between MT and MT-Get. The eventual cloning of GET will contribute not only to unravel the genetic basis of glandular trichomes formation, but will also contribute to create varieties resistant to insects, reducing the pesticides use.

The plant Urera baccifera Gaudich, known as stinging nettle, had its leaves and roots used to urinary infections and arthritis. Studies about its anti-inflammatory activities already exist, but are few the studies about their chemical constituents. Due the shortage of dates, this study aim to realize an qualitative and quantitative photochemistry analysis, and antioxidant activity of the plant roots and leaves, beyond realize a morphoanatomic and hystochemical study its leaves and stems. In the qualitative analysis were obtained positive results to aminogroups, anthocyanins, anthocyanidins and flavonoids, steroids, phenols with free para positions, coumarins, saponins and organic acids in the leaves and the roots. In the qualitative analysis the plant showed significant values of phenolic compounds, flavonoids, alkaloids and condensed tannins, mainly in the chloroform fraction of leaves and roots. The crude extract of both part of the plant presented a moderated antioxidant activity. An expressive concentration of oxalic acid was quantified in the roots, indicating toxicity. The morphological analysis of steams and leaves showed stinging, simple tectores and glandular trichomes, cistolits in the epidermis and abundant presence of drusen-type crystals of calcium oxalate besides that elucidate the inner structure of the plant tissues. In the hystochemical tests were presented in the different vegetative organs, substances which form cell walls, reserve substances and secondary metabolites, like phenolic compounds, lipids, terpenoids and cetosteroids, tannins and serotonin. More studies will be realized with Urera baccifera roots, stems and leaves, to elucidate its chemical composition and toxic potential. / A planta Urera baccifera Gaudich, conhecida como Urtiga-Brava, tem suas folhas e raízes utilizadas para infecção urinária e artrite. Já existem estudos sobre sua atividade antiinflamatória, mas poucos são os estudos a respeito de sua composição química. Devido à escassez de dados, este estudo visa realizar uma análise fitoquímica qualitativa e quantitativa, e avaliar a atividade antioxidante das raízes e folhas da planta, além de realizar um estudo morfo-anatomico e histoquímico das folhas e caules. Na análise qualitativa foram obtidos resultados positivos para aminogrupos, antocianinas, antocianidinas e flavonóides, esteróides, fenóis com posição para livres, cumarinas, saponinas e ácidos orgânicos nas folhas e raízes. Na analise qualitativa a planta mostrou valores significantes de compostos fenólicos, flavonoides, flavonóis, alcaloides e taninos condensados principalmente na fração clorofórmio das folhas e raízes. O extrato bruto das duas partes da planta demonstraram uma moderada atividade antioxidante. Foi quantificado numa concentração expressiva, ácido oxálico nas raízes, indicando toxicidade. A análise da morfologia dos caules e folhas evidenciou tricomas urticantes, tectores simples e glandulares, cistólitos na epiderme e presença abundante de cristais do tipo drusas de oxalato de cálcio, além de elucidar a estrutura interna dos tecidos da planta. Nos testes histoquímicos foram evidenciados nos diferentes órgãos vegetativos, substâncias que formam as paredes celulares, substâncias de reserva e metabólitos secundários, como compostos fenólicos, lipídios, terpenóides e cetoesteróides, taninos e serotonina. Mais estudos serão realizados com raízes, caules e folhas de Urera baccifera, a fim de elucidar sua composição química e analisar seu potencial tóxico.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 244413 bytes, checksum: f5f18043e48f747c94912ce637ef46aa (MD5) Previous issue date: 2009-02-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Whitefly Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) is an important pest of Lycopersicon esculentum. The injuries caused by adults and nymphs are sucking of sap, injection of toxins and transmission of fitoviroses. The use of resistants varieties is a alternative to managmant of this pest. In order to have these varieties is important the selection of sources of resistance, study of mechanisms and causes this resistance. Thus, this work aimed to select sources of resistance to B. tabaci of the 103 tomato plants accessions of the Horticultural Germplasm Bank of Federal University of Viçosa (HGB-UFV). The experiment was conducted in greenhouse of the DBA-UFV. The characteristics evaluated were number of adults/plant, eggs/plant and nymphs/plant. Were calculates the number of eggs/adult, nymphs/egg and the index resistance of the accessions compared with commercial cultivar Santa Clara. Were evaluated the number of trichome/0.04 cm2 of the leaf, the identification and the quantification of the chemical compounds from in the hexanic extraction in each tomato accessions. Differences were observed in the densities adults/plant, eggs/plant, nymphs/plant, eggs/adult and e nymphs/egg. 20 peaks were identified in the gas chromatogram from hexanic extracts of the leaves of 103 tomato plants accessions (HGB-UFV). Observed significant positive correlation (p<0.05) between hydrocarbons undecane, tritecane, octadecane, hexacosane and nonacosane with adults and nymphs B. tabaci. Significative differences were observed in the trichomes density/0.04 cm2 and significant positive correlation betweem the trichomes density and the number of eggs/plant. The accections HGB-225, HGB-327, HGB-630, HGB- 813, HGB-985, HGB-2029, HGB-2030, HGB-2055, HGB-2057, HGB- 2060, HGB-2062 e HGB-2068 were the more resistants to B. tabaci in all characteristics evaluated. The resistance mechanisms associated to these HGBs were antixenosis and antibiosis. The causes were chemical and morphological. / A mosca-branca Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) é uma importante praga de Lycopersicon esculentum. Os danos causados pelos adultos e ninfas consistem na sucção de seiva, injeção de toxinas e transmissão de fitoviroses. O uso de variedades resistentes é uma alternativa no manejo dessa praga. No processo de obtenção dessas variedades é fundamental a seleção de fontes de resistência, o estudo dos mecanismos e causas da resistência. Assim, o objetivo deste trabalho foi selecionar fontes de resistência a B. tabaci dentre 103 subamostras de tomateiro do Banco de Germoplasma de Hortaliças da Universidade Federal de Viçosa (BGH-UFV). O experimento foi conduzido em casa de vegetação do DBA- UFV. As características avaliadas foram os números de adultos/planta, ovos/planta e ninfas/planta. Calcularam-se os números de ovos/adulto, ninfas/ovo e o índice de resistência das subamostras em relação ao padrão de suscetibilidade (cultivar Santa Clara). Realizou-se contagem do número de tricomas/0,04 cm2 do limbo foliar, a identificação e a quantificação dos compostos químicos encontrados na extração hexânica em cada subamostra de tomateiro. Verificou-se diferença nas densidades de adultos/planta, ovos/planta, ninfas/planta, ovos/adulto e ninfas/ovo. Foram identificados 20 picos nos cromatogramas dos extratos hexânicos das folhas de 104 subamostras de tomateiro do BGH-UFV. Observou-se correlação positiva e significativa (p<0,05) dos hidrocarbonetos undecano, tritecano, octadecano, hexacosano e nonacosano com adultos e ninfas de B. tabaci. Verificaram-se diferenças significativas na densidade de tricomas/0,04 cm2 e correlação positiva e significativa entre a densidade de tricomas e o número de ovos/planta. As subamostras BGH-225, BGH-327, BGH-630, BGH-813, BGH-985, BGH-2029, BGH-2030, BGH-2055, BGH- 2057, BGH-2060, BGH-2062 e BGH-2068 são fontes de resistência ao biótipo B de B. tabaci considerando todas as características avaliadas. Os mecanismos de resistência associados a estes BGHs foram antixenose e antibiose e as causas da resistência foram químicas e morfológicas.

Submitted by PATRICE JACOB SAVI (savipatricejacob@yahoo.fr) on 2018-04-13T23:56:05Z No. of bitstreams: 1 Savi_pj_me_jabo.pdf: 5321539 bytes, checksum: 55c0543813b08023f4e1f48c3330cf33 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-04-16T10:40:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 savi_pj_me_jabo.pdf: 5321539 bytes, checksum: 55c0543813b08023f4e1f48c3330cf33 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-16T10:40:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 savi_pj_me_jabo.pdf: 5321539 bytes, checksum: 55c0543813b08023f4e1f48c3330cf33 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O ácaro-vermelho-do-tomateiro, Tetranychus evansi Baker e Pritchard (Acari: Tetranychidae), foi introduzido em diversos países da África e da Europa a partir da América do Sul. Nesses países, este ácaro encontrou condições favoráveis ao seu desenvolvimento e se tornou uma das principais pragas do tomateiro, podendo causar perdas de produtividade de até 90%. Devido ao seu elevado potencial biótico, o controle desse ácaro é dificultado pela baixa eficiência dos produtos empregados e pelas populações resistentes aos acaricidas. Dessa forma, o uso de plantas resistentes se torna essencial como uma alternativa ideal de controle, uma vez que permite a manutenção da praga em níveis inferiores aos de dano econômico, minimizando o impacto ambiental do uso de acaricidas e diminuindo os custos de produção. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi selecionar genótipos de tomateiro provenientes da África que confiram resistência ao ácaro T. evansi utilizando os genótipos sul americanos de tomateiros selvagens como testemunha. Foram avaliados cinco genótipos de tomateiros comerciais Solanum lycopersicum L. oriundos do Institut National des Recherches Agricoles du Bénin (INRAB), sendo var. AKIKON, var. TOUNVI, var. KEKEFO oriundos do Benin, var. TOML4 oriundo do Senegal, var. TLCV15 oriundo da República Democrática de Congo, e os genótipos selvagens sul americanos: Solanum pennellii Correll LA-716 e Solanum habrochaites Knapp e Spooner var glabratum (PI134417 e PI134418) oriundos do Instituto Agronômico de Campinas, SP-Brasil. Foram realizados experimentos de preferência para atratividade e para o oviposição com chance e sem chance de escolha em laboratório, assim como a relação com a densidade de tricomas foliares com a preferencia do ácaro foram realizados. Foi realizado também um experimento de resistência por antibiose mediante a duração dos estádios de desenvolvimento, oviposição, viabilidade de ovos, sobrevivência nesses genótipos mantidos em câmara climatizada. Os genótipos de tomateiro africanos (AKIKON, TOUNVI, KEKEFO, TOML4 e TLCV15) possuem maior densidade de tricomas não glandulares especialmente o tipo Va, o que proporcionou maior preferência para atratividade e oviposição do ácaro T. evansi ao comparar com os resultados dos genótipos sul americanos de tomateiros (LA-716 e PI134417). Nenhum dos genótipos africanos testados apresentou resistência por antibiose. De acordo com nível de resistência dos genótipos testados porém, os selvagens da América do Sul (PI134417 e PI134418) foram altamente resistentes ao ácaro, os genótipos de tomateiro africanos TLCV15 e TOML4 foram moderadamente resistentes, enquanto AKIKON foi suscetível e os genótipos TOUNVI e KEKEFO foram altamente suscetíveis ao ácaro vermelho. / The tomato red spider mite Tetranychus evansi Baker and Pritchard (Acari: Tetranychidae) was introduced in several countries of Africa and Europe from South America. In these countries, this mite found favorable conditions for its development and becomes one of the main pests of tomato, which can cause yield losses of up to 90%. Due to its high biotic potential, the control of this mite is dificultated by the low efficiency of the chemicals used and populations resistant to acaricides. Thus, the use of resistant plants becomes essentials as an ideal control alternative, since it allows the pest to be kept at levels below the economic threshold, minimizing the environmental impact of the use of acaricides and reducing production costs. Therefore, the aim of this study was to select African tomato genotypes that confers resistance to red spider mite using the South American tomato genotypes as a control. Five commercial tomato genotypes of Solanum lycopersicum L. from Institut National des Recherches Agricoles du Bénin (INRAB) were evaluated: var. AKIKON, var. TOUNVI, var. KEKEFO from Benin, var. TOML4 from Senegal, var. TLCV15 from the Democratic Republic of Congo, and two wild tomato genotypes from South America: Solanum pennellii Correll LA-716 and Solanum habrochaites Knapp & Spooner f. glabratum (PI134417 and PI134418) from the Instituto Agronômico de Campinas, SP, Brasil. No-preference bioassay for attractiveness and oviposition was conducted in free choice and no choice tests as well as the relationship of the density of leaf trichomes with the preference of the red spider mite were realized. It was also carried out the antibiosis resistance bioassay evaluating immature development time, oviposition rate, egg viability and survival of T. evansi in these genotypes maintened under controlled laboratory conditions. African tomato genotypes (AKIKON, TOUNVI,KEKEFO, TOML4 e TLCV15) have a higher density of non - glandular trichomes especially type Va, which provided higher attractiveness preference and oviposition of the T. evansi mite when compared to the results of the South American (LA-716 and PI134417) tomato genotypes. None of the African tomato genotypes tested showed antibiosis resistance. According to the resistance level of the genotypes tested, South American tomato genotypes PI134417 and PI134418 were highly resistants to the red spider mite, African tomato genotypes TLCV15 and TOML4 were less suitables hosts for T. evansi, while AKIKON was suitable host and TOUNVI and KEKEFO were most suitable hosts for red spider mite. / CNPQ- PEC-PG: 190160/2015-2

Duas espécies de Barbatimão, da família Leguminosae, foram utilizadas como modelo neste trabalho para elucidar as vias ontogenéticas de produção de taninos: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) e Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Apesar de inseridas em grupos distantes de Leguminosae, as duas espécies são grandes produtoras de taninos, geralmente concentrados na casca, o que confere a elas uma grande procura para uso na medicina popular. Partes vegetativas de Indivíduos jovens e adultos foram processadas para observações em microscopia de luz e eletrônica (varredura e transmissão). Dois tipos de estruturas secretoras são responsáveis pela produção e acúmulo de taninos: idioblastos, encontrados já em indivíduos jovens de ambas espécies; e tricomas secretores, encontrados em gemas vegetativas de indivíduos adultos de S. adstringens. O processo de produção de taninos nas duas espécies é semelhante, com alguma diferença nas etapas de acúmulo. Plastídios e RER parecem ser as organelas associadas à produção de taninos nessas espécies. Destaca-se ainda o relato inédito da ocorrência de coléteres de origem protodérmica em D. mollis. Considerando a problemática referente à classificação de estruturas secretoras, pretende-se utilizar os resultados obtidos para reflexão sobre o tema / In this study, two species of Leguminosae, popularly known as Barbatimão, were used as a model to elucidate the ontogenetic process of tannin production: Dimorphandra mollis Benth. (Caesalpinioideae) and Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Mimosoideae). Although inserted in non-related groups of Leguminosae, the two species are largely known as tannin producers, a metabolite often concentrated in the bark, which makes them highly sought after for use in folk medicine. Vegetative parts of young and adult plants were processed for observation using light and electron microscopy (scanning and transmission). Two types of secretory structures are responsible for tannin production and accumulation: idioblasts, found even in young plants of both species, and secretory trichomes, observed in vegetative buds of mature plants of S.adstringens. Tannin production is similar in both species, although some differences in the stages of accumulation occur. Plastids and RER organelles appear to be associated with the production of tannins in these species. This study also provides the first report of colleters in D. mollis, which originate from protodermal cells. Considering the controversies regarding the classification and nomenclature of secretory structures, our results can be used to help clarify some issues regarding secretory structures, especially colleters