Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 444782.pdf: 1327290 bytes, checksum: 51c0bcf62b76809d6ed98fd7aca7d6b9 (MD5) Previous issue date: 2011-03-15 / The Wilms Tumors (WT) is the most frequent renal tumors of children, and although curable, fatal outcomes may occur. A number a genetic alterations have been suggested as associated factors but still, the exact pathogenesis of WT remains to be fully characterized. Tissue factor (TF) is a glycoprotein which happens to be a key receptor for factor VII/VIIa and is the primary initiator of blood coagulation. Also important, TF has been associated with processes that lead to angiogenesis. It is widely expressed among cells and tissues and recent evidences pointed out an important role for TF in cancer progression and metastasis. Recent evidences suggested that TF may have a role in WT since its immunodetection was associated with poor prognosis. In the present investigation the differential expression of TF was assessed in WT using real-time PCR of RNA retrieved from paraffin sections using microdissection. Different histological components of WT - (blastema, epithelial and stromal) were analysed and the results revealed that TF in blastema and epithelial components was upregulated (14.38 and 16.02-fold respectively, P<0.001). Stroma and control non neoplasic tissues expressed similar levels of expression (P>0.05). TF expression in metastatic lesions from WT was also singificantly upregulated compared to non metastatic lesions. Microvessel density was positively correlated with TF expression (r=0.721). As described for other tumors, TF seems to play a role in malignancy or WT. Further investigations are warranted to better understand the pathways by which TF exerts its effects on tumor progression. Noteworthy, pharmacological strategies that aim at controlling angiogenesis through regulation of TF may be very promising / Esta pesqusisa teve como objetivo demonstrar a express?o diferencial do fator tecidual (FT) em tumor de Wilms (TW), atrav?s de um estudo do tipo transversal. O TW ? a neoplasia renal maligna mais comum na inf?ncia. Os estudos sobre angiog?nese em neoplasias malignas pedi?tricas apresentam poss?veis vias de terapias antiangiog?nicas, com menor agressividade e melhor especificidade tumoral. E, entre os fatores angiog?nicos poss?veis, foi estudo o Fator Tecidual (FT), prote?na transmebrana com sua principal fun??o no processo de hemostasia, mas que demonstra ter importante papel nos processos patol?gicos de tumorig?nese, angiog?nese e microambiente tumoral favor?vel ? dissemina??o neopl?sica. Sua express?o vem sendo associada ?s met?stases e piora no progn?stico. Contuto, s? a partir da pesquisa de Maciel et al (1) que a associa??o do FT com TW foi observada, onde se encontrou, utilizando imunoistoqu?mica, a correla??o positiva entre a express?o do FT, recidiva tumoral e ?bito. Ent?o, a partir desses dados iniciais, a presente pesquisa analisou uma amostra com 27 esp?cimes fixadas em parafina de TW e 26 controles (?rea sem TW), para demonstrar a express?o diferencial do FT em TW, atrav?s da t?cnica de quantifica??o de ?cidos nucl?icos (RNAm) por Rea??o Cadeia de DNA Polimerase em Tempo Real (RT-PCR), avaliar a express?o do FT em diferentes componentes tumorais, com a densidade microvascular (DMV) do TW e a ocorr?ncia de met?stases. Foi observado aumento da express?o diferencial do FT no TW, sua maior varia??o do FT foi encontrada nos componentes blastematoso e epitelial, enquanto no componente estromal apresentou varia??o m?nima em rela??o ao tecido n?o tumoral, em les?es metast?ticas o FT se mostrou significativamente mais elevado, sugerindo um papel importante para essa prote?na no processo de dissemina??o dessas c?lulas malignas, o aumento da DMV apresentou associa??o positiva com a express?o do FT. Os resultados apresentados corroboram os achados de Maciel et al (1) de forma mais concisa e quantitativa, enfatizando a import?ncia do FT na biologia do TW

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 447898.pdf: 1408088 bytes, checksum: c93d094ed0aac173eb02d8b5c6481c61 (MD5) Previous issue date: 2013-03-15 / Renal cell carcinomas (RCCs) are among most the most lethal malignant neoplasms. Despite the evolution in the development of new drugs and imaging studies, mortality rates have increased around the world. Currently, to establish risks of mortality in RCC patients are classified according to scales and nomograms that can&#8215;t accurately predict clinical outcomes. The association between cancer and thromboembolic events is well known for a long time. A few years ago, researchers identified tissue factor as one of the proteins responsible for these phenomena and several studies have been conducted trying to correlate the expression of tissue factor with cancer. In 2009, a study conducted by our group described the important association between the immunohistochemical expression of tissue factor and mortality in patients with Wilms' tumours. The aim of the present study was to correlate the immunohistochemical expression tissue factor with prognostic factors and mortality in 58 patients surgically treated at Hospital S?o Lucas in the years 2004 to 2007, who had been followed for at least five years. / O c?ncer renal ? uma das neoplasias malignas mais letais. As taxas de mortalidade t?m crescido mundialmente a despeito da evolu??o do diagn?stico precoce e do surgimento de novos f?rmacos ativos na terapia da doen?a sist?mica. Atualmente, para se estabelecer riscos de morbimortalidade em c?ncer renal, os pacientes s?o classificados de acordo com escalas e nomogramas que ainda n?o conseguem predizer com acur?cia a evolu??o cl?nica dos mesmos. De longa data, j? sabemos da associa??o entre fen?menos tromboemb?licos e neoplasia. H? alguns anos, pesquisadores identificaram o fator tecidual como uma das prote?nas respons?veis por estes fen?menos e desde ent?o v?rios estudos t?m sido conduzidos tentando identificar em diferentes tipos tumorais a associa??o entre fator tecidual, tromboembolismo e neoplasia. Em 2009, nosso grupo analisou a correla??o da express?o imunoistoquimica do fator tecidual com sobrevida em pacientes com tumores de Wilms. Neste estudo, houve importante associa??o entre express?o elevada do fator tecidual e pior progn?stico. O objetivo do presente trabalho foi correlacionar a express?o imunoistoquimica deste mesmo fator tecidual com fatores progn?sticos e mortalidade em 58 pacientes portadores de tumores de c?lulas claras de rim submetidos a cirurgia no Hospital S?o Lucas da PUCRS nos anos de 2004 ? 2007 e que tiveram acompanhamento por pelo menos 5 anos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458592.pdf: 13592524 bytes, checksum: 0f4861417438fcd80d410bc2aaf21c00 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Purpose: Increased expression of tissue factor (TF) was correlated with worse prognosis and survival in various malignant neoplasms. In urologic tumors, it was studied in prostate, bladder and kidney cancers. The present study evaluates the immunohistochemical expression of TF in human penile cancer, correlating it with prognostic factors and survival. Materials and Methods: A total of 34 patients were treated by partial or total penectomy for penile carcinoma at our institution from January 1998 to December 2012. The immunohistochemical expression of TF was determined by a quantitative methodology in formalin-fixed paraffin-embedded tissue samples and correlated with age, clinical stage, pathologic stage, lymph node metastases, tumor grade and survival. Results: Immunohistochemical expression of TF was observed in 26/34 (76.4%) specimens. The mean area of TF expression in the samples was 27.82 &#956;m2 [95% CI 20.0 35.6, SD 22.4]. Mean age was significantly lower among patients with increased TF expression in comparison to those with lower TF expression [57.6 (SD 9,9) vs. 67.3 years (SD 16,4); p = 0.047). Mean postoperative follow-up was 28.3 months (from 1 to 139.6 months). There were eight deaths (23.5%), four in each group, all related to the penile cancer. In multivariate analyses, there was no statistically significant correlation between TF expression and the study variables. Conclusions: TF was expressed in most samples of penile cancers. There was no statistically significant correlation between TF expression, prognostic factors and survival. / Embasamento: O aumento da express?o do fator tecidual (FT) foi correlacionado com pior progn?stico e sobrevida em v?rias neoplasias malignas. Em tumores urol?gicos, foi estudado na pr?stata, bexiga e rim. No presente estudo avaliamos a express?o imunoistoqu?mica do FT em esp?cimes de c?ncer de p?nis, correlacionando com fatores progn?sticos e sobrevida. Materiais e M?todos: Um total de 34 pacientes tratados com penectomia parcial ou total por c?ncer de p?nis no Hospital S?o Lucas da PUCRS no per?odo entre janeiro de 1998 a dezembro de 2012 foram inclu?dos no estudo. A express?o do FT foi determinada com metodologia quantitativa em amostras de tecido em parafina e correlacionada com idade, estadiamento cl?nico, estadiamento patol?gico, envolvimento linfonodal, grau de diferencia??o histol?gico e sobrevida. Resultados: A express?o do FT foi observada em 26 esp?cimes (76,4%). A m?dia da express?o na amostra foi de 27,8 &#956;m2 [IC 95% 20,0 35,6, DP 22,4]. Houve diferen?a significativa em rela??o a idade entre os grupos com express?o alta e baixa [57,6 anos (DP 9,9) contra 67,3 anos (DP 16,4), p = 0,047]. O seguimento m?dio foi de 28,3 meses (intervalo de 1 a 139,6 meses). Durante o acompanhamento houve 8 ?bitos (76,5%), 4 em cada grupo, todos relacionados a neoplasia. Na an?lise multivariada, n?o houve correla??o entre a express?o do FT e as vari?veis em estudo. Conclus?es: O FT foi expresso na maioria das amostras de c?ncer de p?nis. N?o houve correla??o entre n?vel de express?o do FT, fatores progn?sticos e sobrevida.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000401330-Texto+Completo-0.pdf: 5353673 bytes, checksum: 3c1d547acc29764200b6affc9d492d2d (MD5) Previous issue date: 2007 / Wilms tumor is the most common solid renal malignancy in childhood. Even among patients with favorable histology and staging, some recur and eventually die from the disease. Novel prognostic factors could be especially useful in the management of these children. Tissue factor (TF), a protein linked to the extrinsic coagulation pathway, is highly expressed in various tumors, and has been associated to the development of metastases and to a poor prognosis. Our study describes, for the first time, the expression of TF in paraffin-fixed specimens of Willms tumors from 41 patients treated at Hospital São Lucas da PUCRS and Hospital da Criança Conceição, Porto Alegre. The immunohistochemical expression of TF was compared to microvascular density (MVD) and to other established prognostic criteria, such as age, staging, histology, tumor recurrence, overall and cancer-specific mortality. Increased TF expression was correlated to a higher risk of tumor recurrence and death. However, there was no significant correlation between TF expression and other established prognostic factors. Likewise, TF expression was not correlated to an increased MVD. In multivariate analysis TF expression remain as a independent prognostic factor to a higher risk of death. / O Tumor de Wilms (TW) é o tumor sólido renal mais comum na criança. Apesar do bom prognóstico na maioria dos casos, muitos pacientes com doença de histologia favorável apresentam recidiva e evoluem para óbito. Tem-se buscado na biologia molecular a identificação de fatores de prognóstico mais efetivos para estas crianças. O fator tecidual (FT), uma proteína de membrana celular ligada ao desencadeamento da cascata da coagulação parece ser fundamental para a progressão de neoplasias malignas através da ativação do processo de angiogênese. A expressão do FT foi associada ao desenvolvimento de metástases e a um pior prognóstico em vários tipos tumorais. Descrevemos pela primeira vez a expressão do FT em espécimes fixados em parafina de tumores de Wilms obtidos de 41 pacientes operados no Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul e no Hospital da Criança Conceição de Porto Alegre e comparamos a intensidade da sua expressão com a densidade microvascular (DMV), critérios de prognóstico estabelecidos (idade, estagiamento e histologia), recidivas tumorais e sobrevida geral. Encontramos correlação positiva entre a expressão do FT e a recidiva dos tumores e entre a expressão do FT e o óbito. Não encontramos correlação significativa entre a expressão de FT e os outros fatores de prognóstico estabelecidos, bem como com a DMV. Na análise multivariada o FT permanece como um fator independente de prognóstico para uma maior mortalidade.

A doença de von Willebrand (DvW) é um defeito qualitativo/quantitativo do fator de von Willebrand (FvW), uma glicoproteína que desempenha um papel essencial na adesão e agregação plaquetária. Cães acometidos por esta diátese hemorrágica hereditária podem ser assintomáticos, ou apresentar sinais clínicos de um problema hemostático primário, especialmente hemorragias em superfícies mucosas. O diagnóstico da DvW baseia-se na quantificação do FvW plasmático, este sendo atualmente realizado por ELISA – antígeno FvW (Ag:FvW). O presente trabalho desenvolveu um ensaio para quantificação do Ag:FvW em amostras caninas e aplicou o teste em uma população de cães. Também determinou intervalos de referência para o ensaio e para tempos de coagulação. O ensaio apresentou R² médio de 0,9810, com coeficientes de variação intra-teste de 1,83 a 4,54% e entre-teste de 9,02 a 17,75%. Valores de referência para Ag:FvW, Tempo de Protrombina e Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada obtidos foram de 24,87 a 224,5%, 6,0 a 9,3 segundos e 15,2 a 24,5 segundos, respectivamente. Completando, foi feita uma revisão da literatura sobre a doença em cães. Em conclusão, a determinação do Ag:FvW é um teste essencial para pacientes com histórico de diátese hemorrágica sem coagulopatia e/ou trombocitopenia e pode ser conclusivo para o diagnóstico de DvW. Obter valores de referência para a população local e padronizar os reagentes e instrumentos utilizados são extremamente importantes para um diagnóstico acurado dos distúrbios de hemostasia. Finalmente, um caso clínico de um cão com DvW também foi descrito. / The von Willebrand disease (vWD) is a von Willebrand factor (vWF) quantitative/qualitative defect. This glycoprotein plays a crucial role on platelet adhesion and aggregation. Dogs affected by the hemorrhagic diathesis may be asymptomatics, or show clinical signs of a primary hemostatic disturbance, such as bleeding from mucosal surfaces. The diagnosis is based on vWF quantification by ELISA techniques – vWF antigen (vWF:Ag). The current study developed an assay for vWF:Ag quantification on canine samples, and the test was conducted on a dog population. Also, reference intervals were determined for this assay and for clotting times. The assay achieved a mean R² of 0.9810, with coefficient of variation for intra-assay of 1.83 to 4.54% and for inter-assay of 9.02 to 17.75%. The vWF:Ag assay, Prothrombin Time and activated Partial Thromboplastin Time reference intervals were 24.87 to 224.5%, 6.0 to 9.3 seconds and 15.2 to 24.5 seconds, respectively. In addition, a literature review about the disease in dogs was done. In conclusion, vWF:Ag determination is an essential assay for patients with hemorrhagic diathesis history without coagulopathy and/or thrombocytopenia, and might be conclusive for the disease diagnosis. Reference values for local population and standard protocols are extremely important for an accurate diagnosis of disorders of hemostasis. Finally, a case report of a dog with vWD was also described.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399864-Texto+Completo-0.pdf: 2357842 bytes, checksum: 33aacb0348512c8221c086f9eb4b8def (MD5) Previous issue date: 2008 / Presence of cervical metastases is the most important prognostic factor in squamous cell carcinoma of the oral cavity (OSCC). Recently, other clinical and molecular factors have been sought in order to improve prognostic capabilities in this disease. The aim the present study is to evaluate the impact of tissue factor (TF) expression and microvessel density (MVD) as predictors of cervical metastases in these neoplasms. Immunohistochemistry techniques were used to assess the expression of TF and to quantify MVD (through expression of CD34) in 53 patients with OSCC who were treated surgically by the author. These findings, as well as other clinical and pathological variables, were correlated with the presence or absence of cervical metastases. TF was expressed in all but three cases; it was highly expressed (more than 50% of tumor cells showing intense expression) in 13 patients (24. 5%), but TF expression was not correlated with the presence of cervical metastases. MVD ranged from four to 47. 8 vessels per high power field (200X) in selected hot spots, with an average of 18. 47 vessels. Increased MVD (more than 20 vessels) was present in 21 patients (39. 6%), but also did not correlate with the presence of positive cervical nodes. Clinical stage, neuronal infiltration and intravascular embolization were the most important predictors of cervical metastases. This study focuses, for the first time, the expression of TF as a prognostic factor in OSCC. Its expression was not a significant predictor of cervical metastases in OSCC. Likewise, MVD was not correlated with cervical metastases. Further studies are needed to determine new molecular markers capable of improving prognostic accuracy of conventional clinical and pathologic prognostic factors in OSCC. / A presença de metástase cervical é o fator prognóstico mais relevante no carcinoma epidermóide de boca. Fatores clínicos e histológicos estão associados com o desenvolvimento da metástase cervical, porém a pesquisa de fatores moleculares está sendo amplamente realizada nos últimos anos. O objetivo deste estudo é avaliar a associação da expressão do fator tecidual e da densidade microvascular como fatores de risco para a presença de metástase cervical nestas neoplasias. A expressão do fator tecidual e a densidade microvascular foram aferidas pela técnica de imunoistoquímica e suas associações com a presença de metástase cervical foram estudadas em 53 pacientes com diagnóstico de carcinoma epidermóide de boca tratados cirurgicamente pelo autor. Características clínicas e histológicas também foram pesquisadas e associadas com a presença de metástase cervical. Somente três casos não expressaram o fator tecidual. A alta expressão do fator tecidual, mais de 50% das células tumorais intensamente coradas, foi encontrada em 13 pacientes (24,5%). A densidade microvascular por paciente variou entre 4 e 47,8 vasos, com uma média de 18,47 vasos. A alta densidade microvascular (mais de 20 vasos por paciente) ocorreu em 21 pacientes (39,6%). O estadiamento clínico, a infiltração neuronal e as embolizações vasculares foram os fatores preditivos de metástase de maior relevância. Este estudo descreve pela primeira vez a expressão do fator tecidual como fator prognóstico de metástase e de óbito no carcinoma epidermóide de boca. Os resultados indicam que a expressão do fator tecidual e a densidade microvascular não estão associados com a presença de metástase cervical. Estudos adicionais são necessários para determinar novos marcadores moleculares capazes de melhorar a acurácia do prognóstico, comparados aos fatores clínicos e histológicos de prognóstico do carcinoma epidermóide de boca já estabelecidos.

A doença de von Willebrand (DvW) é um defeito qualitativo/quantitativo do fator de von Willebrand (FvW), uma glicoproteína que desempenha um papel essencial na adesão e agregação plaquetária. Cães acometidos por esta diátese hemorrágica hereditária podem ser assintomáticos, ou apresentar sinais clínicos de um problema hemostático primário, especialmente hemorragias em superfícies mucosas. O diagnóstico da DvW baseia-se na quantificação do FvW plasmático, este sendo atualmente realizado por ELISA – antígeno FvW (Ag:FvW). O presente trabalho desenvolveu um ensaio para quantificação do Ag:FvW em amostras caninas e aplicou o teste em uma população de cães. Também determinou intervalos de referência para o ensaio e para tempos de coagulação. O ensaio apresentou R² médio de 0,9810, com coeficientes de variação intra-teste de 1,83 a 4,54% e entre-teste de 9,02 a 17,75%. Valores de referência para Ag:FvW, Tempo de Protrombina e Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada obtidos foram de 24,87 a 224,5%, 6,0 a 9,3 segundos e 15,2 a 24,5 segundos, respectivamente. Completando, foi feita uma revisão da literatura sobre a doença em cães. Em conclusão, a determinação do Ag:FvW é um teste essencial para pacientes com histórico de diátese hemorrágica sem coagulopatia e/ou trombocitopenia e pode ser conclusivo para o diagnóstico de DvW. Obter valores de referência para a população local e padronizar os reagentes e instrumentos utilizados são extremamente importantes para um diagnóstico acurado dos distúrbios de hemostasia. Finalmente, um caso clínico de um cão com DvW também foi descrito. / The von Willebrand disease (vWD) is a von Willebrand factor (vWF) quantitative/qualitative defect. This glycoprotein plays a crucial role on platelet adhesion and aggregation. Dogs affected by the hemorrhagic diathesis may be asymptomatics, or show clinical signs of a primary hemostatic disturbance, such as bleeding from mucosal surfaces. The diagnosis is based on vWF quantification by ELISA techniques – vWF antigen (vWF:Ag). The current study developed an assay for vWF:Ag quantification on canine samples, and the test was conducted on a dog population. Also, reference intervals were determined for this assay and for clotting times. The assay achieved a mean R² of 0.9810, with coefficient of variation for intra-assay of 1.83 to 4.54% and for inter-assay of 9.02 to 17.75%. The vWF:Ag assay, Prothrombin Time and activated Partial Thromboplastin Time reference intervals were 24.87 to 224.5%, 6.0 to 9.3 seconds and 15.2 to 24.5 seconds, respectively. In addition, a literature review about the disease in dogs was done. In conclusion, vWF:Ag determination is an essential assay for patients with hemorrhagic diathesis history without coagulopathy and/or thrombocytopenia, and might be conclusive for the disease diagnosis. Reference values for local population and standard protocols are extremely important for an accurate diagnosis of disorders of hemostasis. Finally, a case report of a dog with vWD was also described.

A doença de von Willebrand (DvW) é um defeito qualitativo/quantitativo do fator de von Willebrand (FvW), uma glicoproteína que desempenha um papel essencial na adesão e agregação plaquetária. Cães acometidos por esta diátese hemorrágica hereditária podem ser assintomáticos, ou apresentar sinais clínicos de um problema hemostático primário, especialmente hemorragias em superfícies mucosas. O diagnóstico da DvW baseia-se na quantificação do FvW plasmático, este sendo atualmente realizado por ELISA – antígeno FvW (Ag:FvW). O presente trabalho desenvolveu um ensaio para quantificação do Ag:FvW em amostras caninas e aplicou o teste em uma população de cães. Também determinou intervalos de referência para o ensaio e para tempos de coagulação. O ensaio apresentou R² médio de 0,9810, com coeficientes de variação intra-teste de 1,83 a 4,54% e entre-teste de 9,02 a 17,75%. Valores de referência para Ag:FvW, Tempo de Protrombina e Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada obtidos foram de 24,87 a 224,5%, 6,0 a 9,3 segundos e 15,2 a 24,5 segundos, respectivamente. Completando, foi feita uma revisão da literatura sobre a doença em cães. Em conclusão, a determinação do Ag:FvW é um teste essencial para pacientes com histórico de diátese hemorrágica sem coagulopatia e/ou trombocitopenia e pode ser conclusivo para o diagnóstico de DvW. Obter valores de referência para a população local e padronizar os reagentes e instrumentos utilizados são extremamente importantes para um diagnóstico acurado dos distúrbios de hemostasia. Finalmente, um caso clínico de um cão com DvW também foi descrito. / The von Willebrand disease (vWD) is a von Willebrand factor (vWF) quantitative/qualitative defect. This glycoprotein plays a crucial role on platelet adhesion and aggregation. Dogs affected by the hemorrhagic diathesis may be asymptomatics, or show clinical signs of a primary hemostatic disturbance, such as bleeding from mucosal surfaces. The diagnosis is based on vWF quantification by ELISA techniques – vWF antigen (vWF:Ag). The current study developed an assay for vWF:Ag quantification on canine samples, and the test was conducted on a dog population. Also, reference intervals were determined for this assay and for clotting times. The assay achieved a mean R² of 0.9810, with coefficient of variation for intra-assay of 1.83 to 4.54% and for inter-assay of 9.02 to 17.75%. The vWF:Ag assay, Prothrombin Time and activated Partial Thromboplastin Time reference intervals were 24.87 to 224.5%, 6.0 to 9.3 seconds and 15.2 to 24.5 seconds, respectively. In addition, a literature review about the disease in dogs was done. In conclusion, vWF:Ag determination is an essential assay for patients with hemorrhagic diathesis history without coagulopathy and/or thrombocytopenia, and might be conclusive for the disease diagnosis. Reference values for local population and standard protocols are extremely important for an accurate diagnosis of disorders of hemostasis. Finally, a case report of a dog with vWD was also described.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-09-08T18:57:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - CLARISSA BARROS MADRUGA versão digital.pdf: 2723819 bytes, checksum: ae4a199db2f44ecf66614c6242c348b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T18:57:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - CLARISSA BARROS MADRUGA versão digital.pdf: 2723819 bytes, checksum: ae4a199db2f44ecf66614c6242c348b3 (MD5) Previous issue date: 2015-06-18 / A dengue é importante causa de doença febril em países tropicais e de acordo com sua nova classificação a presença de sangramentos em mucosas e alterações hepáticas alertam para possível evolução desfavorável. O envolvimento do fígado manifesta-se principalmente por elevação de aminotransferases ou hepatomegalia e as formas hemorrágicas da dengue associam-se ao prolongamento precoce do TTPA. Foram selecionados 554 indivíduos com diagnóstico laboratorial de dengue a partir de banco de dados formado no período de março de 2009 a maio de 2011, divididos em dois grupos: com e sem sangramento espontâneo de mucosa, e os parâmetros laboratoriais (aminotransferases, TTPA e plaquetas) foram comparados entre eles. Dos 554 indivíduos, 285 (51,4%) eram do sexo feminino e 269 (48,6%) do sexo masculino, com idade média de 27,4 anos, mediana de 22 anos (3 meses a 92 anos), 219 (39,5%) tinham idade ≤ 15 anos e 335 (60,5%) com idade > 15 anos, 166 (30%) pacientes apresentaram manifestação hemorrágica espontânea, contra 388 (70%) que não apresentaram sangramento. Dentre os pacientes que sangraram, 81 (48,8%) eram do sexo masculino e 85 (51,2%) do sexo feminino, predominando na faixa etária ≤ 15 anos com 84/219 (38,4%) versus a faixa etária > 15 anos com 82/335 (24,5%). Pela localização, os sangramentos espontâneos apresentaram a seguinte ordem de ocorrência: gengivorragia, 30,3% (64/166); hematêmese, 26,5% (56/166); epistaxe, 22,3% (47/166); melena, 8,1% (17/166); hematúria, 6,6% (14/166), hemoptise; 3,3% (7/166) e hemotoquezia 2,8% (6/166). O prolongamento de TTPA foi encontrado em 23% (82/358) dos pacientes, enquanto 77% (276/358) tiveram TTPA normal. O prolongamento de TTPA foi mais frequente na faixa ≤ 15 anos com 51,2% versus a faixa etária >15 anos com 48,8% (p<0,05). Apenas 26% (138/524) apresentaram valores de AST maior que 175 e 74% (386/524) apresentaram AST até 175. Os valores de ALT apresentaram a seguinte distribuição: 16% (84/528) apresentam ALT maior que 200 e 84% (444/528) apresentam ALT até 200. Não houve associação entre elevação de aminotransferases e sangramentos (p > 0,05). Com a dicotomização das plaquetas em valores abaixo e acima de 50.000 mm3, o prolongamento de TTPA, apresentou resultado significativo para sangramentos espontâneos condicionado às plaquetas <50.000/mm³. Não foi encontrada associação entre alterações morfológicas do fígado e sangramentos espontâneos. Com a curva ROC foi estabelecido o ponto de corte de 41,3 segundos para a associação do TTPA com hemorragia espontânea de mucosa nos indivíduos estudados, com sensibilidade de 52,8%, especificidade de 69,2%, acurácia de 64,2%, Risco Relativo (RR) de 1,868 e Odds Ratio (OR) 2,511. Na análise multivariada apenas os fatores de risco prolongamento de TTPA e plaquetas apresentaram associação significativa quanto à ocorrência de sangramentos espontâneos (p < 0,05). O prolongamento de TTPA mostrou-se como possível preditor de sangramento, no entanto, faz-se necessário avaliação de outros elementos do coagulograma para que esse dado possa adquirir maior consistência. / Dengue is an important cause of febrile illness in tropical countries and according to the new classification the presence of mucosal bleeding and liver changes correlates with possible adverse developments. The involvement of the liver is manifested primarily by increased aminotransferases levels or hepatomegaly and hemorrhagic forms of dengue are associated with the early prolonged aPTT. Information from 554 patients with a laboratory diagnosis of dengue from the database formed from March 2009 to May 2011 were collected, divided into two groups: with and without spontaneous mucosa bleeding, and laboratorial parameters (aminotransferases, aPTT and platelet ) were compared. Of the 554 subjects, 285 (51.4%) were female and 269 (48.6%) were male, mean age 27.4 years, median 22 years (3 months to 92 years), 219 ( 39.5%) were aged ≤ 15 years and 335 (60.5%) aged> 15 years, 166 (30%) patients had spontaneous hemorrhagic manifestation, against 388 (70%) who did not have bleeding. Among the patients who bled, 81 (48.8%) were male and 85 (51.2%) were females, predominantly aged ≤ 15 years with 84/219 (38.4%) versus the age group > 15 years, with 82/335 (24.5%) (p <0.01). By location, spontaneous bleeding showed the following order of occurrence: gingival bleeding, 30.3% (64); hematemesis, 26.5% (56); epistaxis, 22.3% (47); melena, 8.1% (17); hematuria, 6.6% (14), hemoptysis; 3.3% (7) and hemotoquezia 2.8% (6). The extension of APTT was found in 23% (82/358) of patients, while 77% (276/358) had normal aPTT. The enlargement aPTT was more frequent in the range ≤15 years with 51.2% versus age> 15 years with 48.8% (p <0.05). Only 26% (138/524) had values of AST greater than 175 and 74% (386/524) had AST up to 175. ALT values were distributed as follows: 16% (84/528) have ALT greater than 200 and 84% (444/528) have ALT up to 200. There was no association between increased levels of aminotransferases and bleeding (p> 0.05). With the dichotomy of platelets in values below and above 50,000 mm3, the extension of aPTT, showed significant results (p <0.05) for spontaneous bleeding conditioning to platelets <50,000 / mm³. No association was found between morphological changes in the liver and spontaneous bleeding. With the ROC curve was established cutoff point of 41.3 seconds to the association of aPTT with spontaneous bleeding mucosa in studied subjects, with sensitivity 52.8%, specificity 69.2%, accuracy of 64.2% , relative risk (RR) of 1.868 and odds ratio (OR) 2.511. In multivariate analysis, only the risk factors enlargement aPTT and platelets were significantly associated for the occurrence of spontaneous bleeding (p <0.05). The extension of aPTT showed up as possible predictor of bleeding, however, it is necessary to evaluate other coagulation elements so that this data can acquire greater consistency.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-05T15:26:06Z No. of bitstreams: 1 Marcela Oliveira Sampaio.pdf: 2900436 bytes, checksum: 6ebdfecb2e0fff98f16db56143076a43 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-05T15:26:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcela Oliveira Sampaio.pdf: 2900436 bytes, checksum: 6ebdfecb2e0fff98f16db56143076a43 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Platelet Rich Plasma (PRP) is a platelet concentrate obtained at the end of the centrifugation process whole blood. The product has been studied in tissue repair because platelets contain inside growth factors that stimulate organic processes such as mitogenesis and angiogenesis. For the occurrence of release such growth factors into the tissue which is applied PRP, platelets need to be activated, and this occurs by the addition of substances called activation factors. From that moment, the PRP acquires a gelatinous consistency, which facilitates application and fixing the target tissue, happening to be called platelet gel. Taking into consideration that there is no single protocol for obtaining the platelet gel and different activating factors can be used in their production, aimed with this research conduct a comparative analysis of two activators factors: autogenous and thromboplastin thrombin with respect to ease of acquisition, cost, gel formation after activation and the risk of contamination of PRP through bacteriological analysis. To perform the experiment were 20 healthy dogs which were collected blood samples, a total of 18 ml for each animal for the production of platelet gel by the manual method using two centrifugation times, the first centrifugation at 1200 rpm and second 1600 rpm both for 10 minutes. Blood samples were equally divided into three groups, each group of 20 samples of group A (PRP without added activator control factor), group B (gel activated platelets with autologous thrombin) and group C (platelet gel activated with thromboplastin). Samples of PRP liquid (Group A) had varying in color from whitish to transparent rosea and the same is maintained in liquid form during the whole observation time. In group B staining remained cloudy as it was formed and the gel samples took 1 to 2 minutes to gelatinize, although 40% of the samples were still in liquid form, even with double the added proportion of activator factor. Samples in Group C was translucent and the color was formed a firm gel consistency maximum time of 30 seconds at 100% of the samples. There was no contamination of samples from all groups according to bacteriological analysis. It follows that although the autogenous and thromboplastin thrombin be easily acquired in Recife (Pernambuco), thromboplastin proved to be a better activating factor option for PRP gel have less cost and be more efficient gelling all samples. / O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) é um concentrado plaquetário obtido no final do processo de centrifugação do sangue total. O produto tem sido estudado na reparação tecidual pelo fato das plaquetas conterem no seu interior fatores de crescimento que estimulam processos orgânicos como a mitogênese e a angiogênese. Para que ocorra a liberação de tais fatores de crescimento no tecido onde o PRP é aplicado, as plaquetas precisam ser ativadas, e isso ocorre através da adição de substâncias denominadas fatores de ativação. A partir desse momento, o PRP adquire uma consistência gelatinosa, o que facilita sua aplicação e fixação no tecido alvo, passando a ser denominado gel de plaquetas. Levando em consideração que não existe um único protocolo de obtenção do gel de plaquetas e que diferentes fatores ativadores podem ser utilizados na sua produção, objetivou-se com essa pesquisa realizar uma análise comparativa de dois fatores ativadores: trombina autógena e tromboplastina, com relação a facilidade de aquisição, custo, formação do gel após a ativação e quanto ao risco de contaminação do PRP por meio de análise bacteriológica. Para realização do experimento foram selecionados 20 cães saudáveis dos quais foram coletados amostras de sangue, no total de 18 mL de cada animal para produção do gel de plaquetas pelo método manual usando dois tempos de centrifugação, sendo a primeira centrifugação de 1200 rpm e a segunda 1600 rpm, ambas durante 10 minutos. As amostras de sangue foram divididas igualmente em três grupos, sendo cada grupo com 20 amostras: grupo A (PRP sem ser adicionado fator ativador-controle), grupo B (gel de plaquetas ativado com trombina autógena) e grupo C (gel de plaquetas ativado com tromboplastina). As amostras de PRP líquido (Grupo A) possuíam a coloração variando do transparente esbranquiçado a rósea e as mesmas se mantiveram na forma liquida durante todo o tempo de observação. No grupo B a coloração se manteve turva à medida que o gel era formado e as amostras levaram de 1 a 2 minutos para gelificar, entretanto 40% das amostras continuavam na forma líquida, mesmo sendo adicionado o dobro da proporção do fator ativador. Nas amostras do Grupo C a coloração ficou translucida e foi formado um gel de consistência firme no tempo máximo de 30 segundos em 100% das amostras. Não houve contaminação das amostras de todos os grupos de acordo com análise bacteriológica. Conclui-se que, apesar da trombina autógena e tromboplastina serem de fácil aquisição na cidade do Recife (Pernambuco), a tromboplastina é uma melhor opção de fator ativador para o gel de PRP por apresentar menos custo e ser mais eficiente em gelificar todas as amostras.