Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:08:40Z : No. of bitstreams: 1 dias_nb_me_rcla.pdf: 2468653 bytes, checksum: f8a7aea8e6bf4a1721726d766144e387 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O desenvolvimento dos venenos e aparelhos de ferroar entre os Insecta representa um atributo evolutivo que contribuiu para a adaptação dos insetos em muitos ambientes terrestres diferentes. Os venenos desses insetos são misturas complexas de compostos biologicamente ativos, tais como compostos de baixa massa molecular, peptídeos e proteínas. Estudos recentes têm demonstrado a capacidade de se detectar e identificar diferentes compostos de natureza peptídica, em concentrações bastante reduzidas nos venenos animais, utilizando-se diferentes abordagens de espectrometria de massas. Isso tem permitido a construção de bibliotecas peptídicas de grande interesse aplicado à biotecnologia. O veneno da vespa social Polybia paulista tem sido intensamente investigado, porém somente os peptídeos mais abundantes deste veneno são conhecidos: os mastoparanos Polybia -MPI e -MPII, o peptídeo quimiotáctico Polybia-CP e a Paulistina. Este fato deve-se principalmente à utilização de abordagens clássicas até então, com coletas “off-line” em relação às análises de sequenciamento, fazendo com que somente os peptídeos mais abundantes pudessem ser investigados. Com os avanços na área da espectrometria de massas, incluindo o desenvolvimento da tecnologia de analisadores do tipo “ion-trap” utilizado no presente trabalho, tornou-se possível a investigação de amostras pouco abundantes, com alta velocidade de aquisição de dados e elevada resolução. O presente estudo visou a obtenção de um perfil peptídico detalhado do veneno de P. paulista por uma abordagem analítica moderna e mais sensível, além de padronizar o sequenciamento destes peptídeos por espectrometria de massas sequencial de maneira “on-line”. Os peptídeos foram detectados e sequenciados utilizando-se um sistema LC-ESI-IT-TOF/MS e MSn... / The evolution of venoms and their injection apparatuses among the Insecta represents an evolutionary attribute which contributed for thr adaptation of the insects to many different terrestrial environments. The venoms of insects are complex mixtures of biologically active compounds, such as low molecular mass compounds, peptides and proteins. Recent studies have demonstrated the ability to detect and identify different compounds in very low concentrations in animal venoms, using different approaches of mass spectrometry. This has allowed the construction of peptide libraries of great applied interest in biotechnology. The venom of the social wasp Polybia paulista has been intensively investigated, but only the most abundant peptides of this venom are known: the mastoparans Polybia-MPI and -MPII, the chemotactic peptide Polybia-CP and the Paulistine. This fact is mainly due to the use of classical approaches, using offline collections in relation to peptide sequencing, so only the more abundant peptides could be investigated. With the advances in mass spectrometry, including the development of analyzers type ion-trap as the one used in present work, it became possible to investigate low abundance samples, with high speed of data acquisition at high resolution. The objective of this study was to profile and sequence the peptide compounds present in the venom of the social wasp P. paulista using a modern and very sensitive analytical technique, and standardize the sequencing of peptides by high resolution LC-MS and MSn strategy. Peptides were detected and sequenced using a LCESI- IT-TOF/MS and MSn system of high resolution and sensitivity. The analysis of the venom was performed by high performance liquid chromatography on a reverse phase (HPLC), and the analytes (peptides) were characterized ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-22Bitstream added on 2014-06-13T19:18:46Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_vc_me_rcla.pdf: 2151688 bytes, checksum: 544a8f0c3a68d21030ad183c4096e7bb (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As vespas, devido à característica difilética do grupo, são um excelente modelo para se tentar compreender a evolução do comportamento social nos Hymenoptera. A biologia e a organização social das vespas eussociais primitivas, em especial o gênero Mischocyttarus, são pouco conhecidas, apesar da grande diversidade de espécies desse gênero nos trópicos. Com o objetivo de identificar os mecanismos envolvidos na regulação social de Mischocyttarus (M.) montei, foram coletadas 9 colônias para a análise da morfofisiologia dos indivíduos, sendo que destas, 6 foram previamente observadas em condições naturais no Campus da Unesp de Rio Claro, SP. Foi verificado que a dinâmica hierárquica desta espécie é regulada através de três estratégias principais: a) interações agonísticas moderadas entre os indivíduos de maneira a permitir que fundadoras se associem, estabelecendo uma hierarquia de dominância mas ao mesmo tempo garantindo a viabilidade da colônia no início do ciclo; b) alimentação e gasto energético diferencial dos adultos, onde os mais dominantes ingerem maiores quantidades de alimento, em especial fontes de proteína, ao mesmo tempo em que realizam tarefas de baixo custo energético e comportamentos relacionados à dominância; e c) utilização da oofagia diferencial como forma indireta de competição e monopolização da postura de ovos. Através desses mecanismos, a hierarquia é regulada de forma dinâmica, de maneira a permitir que 2 qualquer indivíduo possa ocupar diferentes papéis dentro da colônia, uma vez que, como verificado, os adultos emergem com capacidades reprodutivas similares e não apresentam diferenças morfológicas significativas entre as castas. A determinação de suas funções na colônia dependerá, portanto, das estratégias acima descritas. / The wasps, due to their monophyletic characteristics, are an excellent model to explain the evolutionary scenario of the social behavior in the Hymenoptera. The biology and social organization of primitively eusocial wasps, especially of Mischocyttarus genera, are relatively poor studied, despite of its marked diversity in Neotropical regions. With the aim of identify the traits involved in social regulation of M. (Monogynoecus) montei nine colonies were collected and used in morphological and physiological analysis, from these six were monitored in natural conditions at UNESP, in Rio Claro, SP. The results showed that the hierarchical dynamics of this specie is regulated based on three main strategies: a) moderated agonistics interactions among nestmates, which leads to foundress associations foundations and assure the establishment of a dominance hierarchy and the success of the colony in initial phases of development; b) different feeding and energetic cost tasking of adults, whereas the dominant females feed on higher quantities of food, especially protein, and perform tasks with low energetic cost, mainly those related to dominance; and c) differential oophagy as an indirect strategy of competition, avoiding the subordinate oviposition. Through these mechanisms the hierarchy is regulated in a dynamical way, in which any female can assume different tasks in the colony, once the adults emerge with similar reproductive potential and a marked morphological caste differentiation is absent. The role of each nestmate, therefore, will depend on the strategies previously described.

Orientador: Edilberto Giannotti / Banca: Fabio Prezoto / Banca: Sulene Noriko Shima / Resumo: Do ponto de vista conservacionista, a importância de uma área é tipicamente determinada pela sua diversidade, representada pela riqueza das espécies presentes e a abundância das mesmas. Os insetos sociais representam um grupo rico em espécies e compõem uma enorme fração relativa à abundância e biomassa no ecossistema terrestre. O Brasil possui uma grande diversidade de vespas sociais e este grupo vem sendo cada vez mais estudado devido a sua importância como visitantes florais, polinizadores e predadores. Este trabalho teve como objetivo a realização de um inventário das vespas sociais encontradas na região de Ipeúna, SP. Para isso foram amostrados, durante treze meses, dois ambientes diferentes: uma área de borda da mata ciliar do Rio Passa-Cinco e uma plantação de cana-deaçúcar, por meio de coleta ativa, coleta ativa com uso de líquido atrativo e armadilha atrativa de garrafa PET com uso de suco de goiaba como atrativo. Obteve-se um total de 1072 vespas sociais, distribuídas em 31 espécies (oito gêneros), sendo que todas as espécies ocorreram na mata ciliar (954 indivíduos) e 16 na plantação de cana-de-açúcar (218 indivíduos), com nenhuma espécie exclusiva do canavial. Os índices de diversidade de Shannon-Wiener se mostraram estatisticamente iguais para os dois ambientes enquanto a equitabilidade foi maior para o ambiente de monocultura. A coleta ativa se mostrou mais eficiente em termos de riqueza, no entanto, todos os métodos apresentaram espécies exclusivas, evidenciando, dessa forma a importância do emprego de vários métodos de coleta na realização de inventários de vespas sociais. Foram observadas 11 espécies constantes ao longo do período amostrado na mata ciliar e seis no plantio de cana-de-açúcar, sendo que Polybia ignobilis, Agelaia pallipes, A. vicina, P. gr. occidentalis sp... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: From the conservationist point of view, the importance of an area is typically determined by its diversity, represented by the richness of species present and its abundance. Social insects represent a group rich in species and make up a huge fraction on the abundance and biomass of the terrestrial ecosystem. Brazil has an enormous diversity of social wasps and this group has been increasingly studied due to its importance as flower visitors, pollinators and predators. This study aimed to carry out an inventory of the social wasps found in the region of Ipeúna. For this, for thirteen months, two different environments were sampled: an area in the edge of the Passa-Cinco River riparian forest and a sugar cane plantation, by an active sampling, active sampling using attractant liquid and an attractive bottle trap (PET bottle) with the use of guava juice as attractant. We obtained a total of 1072 social wasps, distributed in 31 species (eight genera), of which 31 species occur in the riparian forest (954 individuals) and 16 in the sugar cane plantation (218 individuals), with no species exclusive of sugarcane plantation. The Shannon-Wiener diversity index was statistically equal for the two sites sampled, while the equitability was higher in the monoculture site. The active sampling was more efficient in terms of richness, however, all methods showed exclusive species, thus showing the importance of using various sampling methods when conducting social wasps inventories. We observed 11 species listed over the period sampled in the riparian forest areas and six in the sugar cane plantation, while Polybia ignobilis, Agelaia pallipes, A. vicina, P. gr. occidentalis sp 1 and Mischocyttarus drewseni were constant in both sites. It was not possible to establish a correlation between the environment variables, temperature and... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-22Bitstream added on 2014-06-13T18:40:13Z : No. of bitstreams: 1 locher_ga_me_rcla.pdf: 530094 bytes, checksum: c029abf23df22ae197d14a9786d9c9b7 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Do ponto de vista conservacionista, a importância de uma área é tipicamente determinada pela sua diversidade, representada pela riqueza das espécies presentes e a abundância das mesmas. Os insetos sociais representam um grupo rico em espécies e compõem uma enorme fração relativa à abundância e biomassa no ecossistema terrestre. O Brasil possui uma grande diversidade de vespas sociais e este grupo vem sendo cada vez mais estudado devido a sua importância como visitantes florais, polinizadores e predadores. Este trabalho teve como objetivo a realização de um inventário das vespas sociais encontradas na região de Ipeúna, SP. Para isso foram amostrados, durante treze meses, dois ambientes diferentes: uma área de borda da mata ciliar do Rio Passa-Cinco e uma plantação de cana-deaçúcar, por meio de coleta ativa, coleta ativa com uso de líquido atrativo e armadilha atrativa de garrafa PET com uso de suco de goiaba como atrativo. Obteve-se um total de 1072 vespas sociais, distribuídas em 31 espécies (oito gêneros), sendo que todas as espécies ocorreram na mata ciliar (954 indivíduos) e 16 na plantação de cana-de-açúcar (218 indivíduos), com nenhuma espécie exclusiva do canavial. Os índices de diversidade de Shannon-Wiener se mostraram estatisticamente iguais para os dois ambientes enquanto a equitabilidade foi maior para o ambiente de monocultura. A coleta ativa se mostrou mais eficiente em termos de riqueza, no entanto, todos os métodos apresentaram espécies exclusivas, evidenciando, dessa forma a importância do emprego de vários métodos de coleta na realização de inventários de vespas sociais. Foram observadas 11 espécies constantes ao longo do período amostrado na mata ciliar e seis no plantio de cana-de-açúcar, sendo que Polybia ignobilis, Agelaia pallipes, A. vicina, P. gr. occidentalis sp... / From the conservationist point of view, the importance of an area is typically determined by its diversity, represented by the richness of species present and its abundance. Social insects represent a group rich in species and make up a huge fraction on the abundance and biomass of the terrestrial ecosystem. Brazil has an enormous diversity of social wasps and this group has been increasingly studied due to its importance as flower visitors, pollinators and predators. This study aimed to carry out an inventory of the social wasps found in the region of Ipeúna. For this, for thirteen months, two different environments were sampled: an area in the edge of the Passa-Cinco River riparian forest and a sugar cane plantation, by an active sampling, active sampling using attractant liquid and an attractive bottle trap (PET bottle) with the use of guava juice as attractant. We obtained a total of 1072 social wasps, distributed in 31 species (eight genera), of which 31 species occur in the riparian forest (954 individuals) and 16 in the sugar cane plantation (218 individuals), with no species exclusive of sugarcane plantation. The Shannon-Wiener diversity index was statistically equal for the two sites sampled, while the equitability was higher in the monoculture site. The active sampling was more efficient in terms of richness, however, all methods showed exclusive species, thus showing the importance of using various sampling methods when conducting social wasps inventories. We observed 11 species listed over the period sampled in the riparian forest areas and six in the sugar cane plantation, while Polybia ignobilis, Agelaia pallipes, A. vicina, P. gr. occidentalis sp 1 and Mischocyttarus drewseni were constant in both sites. It was not possible to establish a correlation between the environment variables, temperature and... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Márcia Regina Brochetto Braga / Banca: Patricia Ucelli Simioni / Banca: Patricia Pasquali Parise Maltempi / Resumo: A vespa social Polybia paulista é muito agressiva e abundante nos Estados de São Paulo e Sul de Minas Gerais e, responsável por muitos acidentes de importância médica. Os principais alérgenos (Fosfolipase, Hialuronidase e Antígeno 5) de seu veneno já foram caracterizados por estudos proteômicos porém, os estudos em nível molecular estão em andamento pelo nosso grupo. O Antígeno 5 (Ag 5) (~23 kDa) tem sido relatado, em alguns venenos de vespas, como um dos mais abundantes e importantes alérgenos, com elevada prevalência de ligação a IgE (em Vespula vulgaris e em Polistes versicolor) enquanto que em outros, como uma molécula hipoalergênica (em Polybia scutellaris). No Brasil, ainda não existem extratos alergênicos ou componentes padronizados para o tratamento e diagnóstico de alergia ao veneno de Hymenoptera. Neste trabalho, o Ag 5 de P. paulista foi clonado, sequenciado, expresso utilizando a levedura Pichia pastoris X-33, purificado e analisado mediante a imunodetecção por IgE. Os maiores níveis de expressão da proteína recombinante rPoly p 5 foram obtidos em meio BMMY, a 28ºC após 120 horas de indução com metanol. O alérgeno recombinante (rPoly p 5), obtido no meio extracelular, foi purificado por cromatografia de afinidade em resina de Ni+2 e posteriormente por exclusão molecular em coluna de Sephadex-G 100 acoplada a um sistema AKTA-FPLC, com um rendimento de 158 μg/mL. Em paralelo, o Ag 5 nativo (nPoly p 5) foi extraído de glândulas de veneno de P. paulista e purificado a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The social wasp Polybia paulista is very aggressive and abundant in the states of São Paulo and South of Minas Gerais, responsible for many accidents of medical importance. The major allergens (Phospholipase, Hyaluronidase and Antigen 5) of its venom have already been characterized by proteomic studies. However, studies at the molecular level are in progress by our group. Antigen 5 (Ag 5) (~ 23 kDa) has been reported in some wasp venoms as one of the most abundant and important allergens with a high prevalence of IgE binding (in Vespula vulgaris and in Polistes versicolor), while in others as a hypoallergenic molecule (in Polybia scutellaris). In Brazil, there are no standardized allergenic extracts or components for treatment and diagnosis of allergy to Hymenoptera venoms. In this work, Ag 5 from P. paulista was cloned, sequenced, expressed using the Pichia pastoris X-33 yeast, purified and analyzed by immunodetection by IgE. The highest levels of expression of the rPoly p 5 recombinant protein were obtained in BMMY medium at 28 ° C after 120 hours of methanol induction. The recombinant allergen (rPoly p 5) obtained in the extracellular medium was purified by Ni+2 resin affinity chromatography and subsequently by column exclusion of Sephadex-G 100 coupled to an AKTA-FPLC system with an yield of 158 μg/mL. In parallel, the native Ag 5 (nPoly p 5) from P. paulista venom glands was purified by cation exchange chromatography. Western Blotting analysis was used to evaluate the Ig... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-13Bitstream added on 2014-06-13T20:40:55Z : No. of bitstreams: 1 santos_ld_dr_rcla.pdf: 2886206 bytes, checksum: c9a53b4683009217d7580a3bff769ea7 (MD5) / A prevalência de sensibilização de humanos aos venenos de himenópteros sociais foi estimada entre 9,3% e 28,5% na população mundial; muitas das alergias causadas por insetos desta ordem são provocadas por ferroadas de abelhas (família Apidae), vespas (família Vespidae) e formigas (família Formicidae). Há um interesse crescente no conhecimento da estrutura e função dos componentes do veneno desses insetos, principalmente no campo da imunologia clínica. Entre os Hymenoptera sociais, os venenos de abelhas e vespas endêmicas do hemisfério norte têm sido extensivamente estudados e, principalmente, seus componentes foram isolados e identificados. Por outro lado, os venenos de espécies de vespas das regiões neotropicais como aquelas típicas da biodiversidade brasileira têm sido pouco caracterizados. Apesar da ausência de dados epidemiológicos sobre esse assunto, a prática clínica diária mostra que as reações alérgicas ao veneno de Himenópteros são bastante freqüentes no Brasil. Cerca de 500 espécies diferentes de vespas sociais são conhecidas em todo Brasil; a maioria dessas espécies apresenta diferentes tipos de comportamentos biológicos em relação àquelas espécies endêmicas do hemisfério norte. Os extratos comercialmente disponíveis de extratos de venenos de vespas usados para diagnósticos e terapias de pacientes alérgicos a venenos de vespas são oriundos dos Estados Unidos e/ou da Europa. Apesar da história de reações sistêmicas após a ferroada destes insetos, a maioria dos pacientes brasileiros (sensíveis aos venenos de vespas) apresentam testes cutâneos negativos quando extratos de venenos importados são utilizados nesses testes. Com o objetivo de aperfeiçoar e alcançar uma melhor compreensão da bioquímica e imunologia dos venenos das principais espécies de vespas do Sudeste do Brasil... / The prevalence of human sensitivity to social Hymenoptera venom was estimated from 9.3 to 28.5% of word population; many allergies are caused by stingings of the insects representatives of Hymenoptera order such as bees (Apidae), ants (Formicidae) and wasps (Vespidae). There is a keen interest in the knowledge about the structure and function of the venom components of these insects, mainly in the field of clinical immunology. Among the social Hymenoptera the venoms of honeybees and wasps endemic from the North Hemisphere have been extensively studied and many of their components were isolated and identified. Meanwhile, the venoms of wasps species from the Neotropical regions of the planet like those typical of Brazilian biodiversity have been poorly characterized. Despite the absence of epidemiological data about this subject in the most of Brazilian regions, it well known by the doctors that this type of accident of very frequent in Southeast Brazil. About five hundreds different species of social wasps are reported all over Brazil; the large most of these species present different biology and aggressive behaviour in relation to those species endemic from the cold regions of the planet. The commercially available wasp venom extracts used for diagnosis and therapy of allergic patients to wasp venoms are produced by foreign pharmaceutical companies with the venom of wasp species obtained in United States and/or Europe. Despite of the history of systemic reactions when stung by local wasp species, the most of Brazilian patients (sensitive of wasps venoms) present negative skin tests when imported venom extracts are used in these tests. With the aim to improve the knowledge and to get a better understanding about the biochemistry and immunology of venoms of the most abundant wasp species from Southeast Brazil, the venom of the social wasp Polybia paulista ... (Complete abstract click eletronic access below)

Orientador: Edilberto Giannotti / Banca: Fabio Prezoto / Banca: Sulene Noriko Shima / Resumo: Neste trabalho foi estudada a atividade diária de busca por recursos de Protopolybia exigua em duas áreas no município de Bom Jesus da Lapa (13º15’S; 43º25’W), Bahia, Brasil, localizado na região do Médio São Francisco, com o objetivo de responder as seguintes questões: Qual a amplitude de horário da atividade forrageadora? Qual a relação entre os fatores físicos do tempo (temperatura, umidade relativa do ar, luminosidade e velocidade do vento) e a freqüência de saídas do ninho? Qual a influência das fases de desenvolvimento da colônia no número de saídas? Quais recursos as campeiras conduzem ao ninho? Qual a relação entre os fatores físicos do tempo e a coleta dos diferentes recursos? A coleta dos recursos é diferenciada de acordo com as fases do ciclo colonial e com o número de indivíduos (adultos e imaturos) presentes na colônia? Esta espécie, na região estudada, conduz presa macerada no papo? Durante o período de janeiro a junho de 2006 foram realizadas observações em 12 colônias de P. exigua, em diferentes fases do ciclo colonial. Os resultados revelaram que a espécie possui uma amplitude de quase 13 horas de atividade forrageadora e o Índice de Retorno com Recursos para a espécie foi de 93,5%. A atividade tornou-se mais intensa das 13:01 às 16:00h, quando foram registradas as maiores temperaturas (ºC) e menores valores de umidade relativa do ar (%). As colônias que possuíam maior número de larvas apresentaram um maior número médio de viagens ao campo por hora e o aumento do número de fêmeas na colônia tende a induzir a atividade forrageadora. Há diferença no número de saídas das campeiras do ninho, considerando as três fases de desenvolvimento colonial. A atividade de coleta de diferentes recursos (néctar, polpa de madeira, água, presa e resina) por P. exigua está relacionada ... ( Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this study the daily activity of search for resources by Protopolybia exigua was studied in two areas of the city of Bom Jesus da Lapa (13º15'S; 43º25'W), Bahia, Brazil, located in the region of Médio São Francisco River, aiming to answer the following questions: what is the amplitude of the foraging activity time? What is the relation between the physical factors of weather (temperature, relative air humidity, luminosity and wind speed) and the frequency of nest leaving? What is the influence of the stages of colony development on the number of exits by the bees? What resources do workers take to the nest? What is the relation between the physical factors of weather and the gathering of different resources? Is the resource collecting distinct according to the phases of the colony cycle and the number of individuals (adults and immatures) present in the colony? Does this species, in the region studied, carry its prey macerated in the crop? During the period from January to June 2006 twelve colonies of P. exigua in different phases of the colony cycle were observed. The results revealed this species presented an activity amplitude of almost 13 hours of foraging activity and the Rate of Returns with Resources for the species was 93.5%. The activity became more intense from 1:01 p.m. to 4:00 p.m., when the highest temperatures (ºC) and the least values of relative air humidity (%) were observed. The colonies that had a larger number of larvae presented a larger average number of trips to the camp per hour, and the increase in the number of females in the colony tended to induce to foraging activity. There was difference in the number of exits by the nest workers, considering the three phases of colony development. The activity of collecting different resources (nectar, wood pulp, water, prey and resin) by P. exigua is related both to physical factors of weather and to colony intrinsic ... (Complete abstract click eletronic access below) / Mestre

Orientador: Mario Sergio Palma / Banca: Fabio Fernandes Morato Castro / Banca: Gilberto Barbosa Domont / Banca: Luisa Karla de Paula Arruda / Banca: João Martins Pizauro Junior / Resumo: A prevalência de sensibilização de humanos aos venenos de himenópteros sociais foi estimada entre 9,3% e 28,5% na população mundial; muitas das alergias causadas por insetos desta ordem são provocadas por ferroadas de abelhas (família Apidae), vespas (família Vespidae) e formigas (família Formicidae). Há um interesse crescente no conhecimento da estrutura e função dos componentes do veneno desses insetos, principalmente no campo da imunologia clínica. Entre os Hymenoptera sociais, os venenos de abelhas e vespas endêmicas do hemisfério norte têm sido extensivamente estudados e, principalmente, seus componentes foram isolados e identificados. Por outro lado, os venenos de espécies de vespas das regiões neotropicais como aquelas típicas da biodiversidade brasileira têm sido pouco caracterizados. Apesar da ausência de dados epidemiológicos sobre esse assunto, a prática clínica diária mostra que as reações alérgicas ao veneno de Himenópteros são bastante freqüentes no Brasil. Cerca de 500 espécies diferentes de vespas sociais são conhecidas em todo Brasil; a maioria dessas espécies apresenta diferentes tipos de comportamentos biológicos em relação àquelas espécies endêmicas do hemisfério norte. Os extratos comercialmente disponíveis de extratos de venenos de vespas usados para diagnósticos e terapias de pacientes alérgicos a venenos de vespas são oriundos dos Estados Unidos e/ou da Europa. Apesar da história de reações sistêmicas após a ferroada destes insetos, a maioria dos pacientes brasileiros (sensíveis aos venenos de vespas) apresentam testes cutâneos negativos quando extratos de venenos importados são utilizados nesses testes. Com o objetivo de aperfeiçoar e alcançar uma melhor compreensão da bioquímica e imunologia dos venenos das principais espécies de vespas do Sudeste do Brasil... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The prevalence of human sensitivity to social Hymenoptera venom was estimated from 9.3 to 28.5% of word population; many allergies are caused by stingings of the insects representatives of Hymenoptera order such as bees (Apidae), ants (Formicidae) and wasps (Vespidae). There is a keen interest in the knowledge about the structure and function of the venom components of these insects, mainly in the field of clinical immunology. Among the social Hymenoptera the venoms of honeybees and wasps endemic from the North Hemisphere have been extensively studied and many of their components were isolated and identified. Meanwhile, the venoms of wasps species from the Neotropical regions of the planet like those typical of Brazilian biodiversity have been poorly characterized. Despite the absence of epidemiological data about this subject in the most of Brazilian regions, it well known by the doctors that this type of accident of very frequent in Southeast Brazil. About five hundreds different species of social wasps are reported all over Brazil; the large most of these species present different biology and aggressive behaviour in relation to those species endemic from the cold regions of the planet. The commercially available wasp venom extracts used for diagnosis and therapy of allergic patients to wasp venoms are produced by foreign pharmaceutical companies with the venom of wasp species obtained in United States and/or Europe. Despite of the history of systemic reactions when stung by local wasp species, the most of Brazilian patients (sensitive of wasps venoms) present negative skin tests when imported venom extracts are used in these tests. With the aim to improve the knowledge and to get a better understanding about the biochemistry and immunology of venoms of the most abundant wasp species from Southeast Brazil, the venom of the social wasp Polybia paulista ... (Complete abstract click eletronic access below) / Doutor

Resumo: Stenonartonia é um gênero neotropical restrito a regiões com floresta da América do Sul ao leste dos Andes. Os seus membros podem ser reconhecidos pelo primeiro tergo metassomal sub-peciolado assim como carenado transversalmente; a válvula propodeal lamelar translúcida bem desenvolvida e contínua com a lamela apical do propódeo que também é desenvolvida e translúcida; a redução da abertura da fossa axilar, devida à expansão interna da crista escutelar e o do painel lateral da axila; a existência de pelo menos uma pequena fóssula axilar anterior vizinha à paratégula; a presença de duas pequenas fóveas próximas uma da outra e posicionadas à meia distânçia entre os ocelos posteriores e o occipício numa área mais ou menos plana de forma semielíptica com escultura e pilosidade diferenciada no vértice da fêmea; o metanoto com uma linha transversal de dentes e o propódeo simples, livre de carenas ou lamelas além da carena medial. Outros caracteres úteis incluem a redução ou desaparecimento das carenas occipital e epicnemial; a presença de carena pretegular; a ausência de notaulos, as tégulas fusiformes não expandidas e com o ápice posterior agudo, decotado e ligeiramente torcido para dentro no nível da paretégula; a margem simples dos tergos e esternos metassomais e a ausência de projeção ou superfície truncada sub-basal no segundo esterno metassomal. O gênero é revisado aqui totalizando 13 espécies, incluindo 8 espécies novas e 3 novas combinações para espécies já conhecidas: S. polybioides (Schulthess) n. comb., S. mimica (Kohl) n. comb., S. flavotestacea (Giordani Soika) n. comb., S. hasyva n. sp., S. cooperi n. sp., S. guaraya n. sp., S. rejectoides n. sp., S. occipitalis n. sp., S. tanykaju n. sp., S. hermetica n. sp. e S. grossa n. sp. São fornecidas neste trabalho uma chave de identificação, descrições completas, ilustrações das estruturas morfológicas e mapas de distribuição para todas as espécies. As hipóteses de relacionamento filogenético para as espécies de Stenonartonia foram reconstruídas com base em 82 aracteres morfológicos. Vinte terminais foram incluídos, treze deles pertencendo ao grupo estudado e sete pertencendo aos grupos externos. Dois esquemas de pesagem dos caracteres, igual e implícita, foram implementados nas análises, resultando cada um deles numa única árvore, diferindo uma topologia da outra somente pela posição relativa de duas espécies na base de um dos grupos de espécies reconhecidos. A análise corrobora a monofilia de Stenonartonia e permite reconhecer três grupos de espécies dentro do gênero.

Orientador: Márcia Regina Brochetto Braga / Banca: Camila Andrea de Oliveira / Banca: Lucilene Delazari dos Santos / Resumo: Polybia paulista é uma vespa pertencente à ordem Hymenoptera muito comum no Sudeste do Brasil, especialmente no Estado de São Paulo. Os venenos destes insetos são constituídos por aminas, peptídeos, proteínas de alta massa molecular, sendo estas na sua maioria, enzimas. As fosfolipases são as enzimas de maior abundância entre os alérgenos de veneno dos Hymenoptera sociais, constituindo-se também no alérgeno de maior importância. A sequência completa de 985 pb do cDNA da fosfolipase A1 do veneno da vespa P. paulista foi determinada a partir da clonagem. A proteína deduzida por tradução apresentou 302 resíduos de aminoácidos, PI e MW teóricos de 9,1 e 33 kDa respectivamente. Por meio de ferramentas de bioinformática foi possível identificar o sítio ativo entre os resíduos 131 a 140 (10 aminoácidos) e inferir que se trata de uma proteína da super família das esterases lipases. O cDNA completo foi clonado em vetor de expressão pET-28a em cepas de Escherichia coli BL21-DE3. A PLA1-Rec com cauda de 6x Histidinas no N- terminal foi expressa na forma insolúvel em corpúsculos de inclusão por meio da indução com 1mM de IPTG à 20°C por 6 horas. A purificação foi realizada por cromatografia de afinidade em resina agarose-Ni+2 sob condições desnaturantes na presença de 8 M de uréia e a proteína eluida com tampão gradiente decrescente de pH. As análises de Western blotting revelaram a especificidade dos anticorpos policlonais produzidos em camundongos contra a fração eletroforética de PLA1 natural quando testados com o veneno bruto da própria vespa e com a PLA1- Rec de P. paulista. Além disto, estes anticorpos apresentaram imunoreatividade cruzada com o veneno bruto de outras vespas sociais testadas neste trabalho. Outras proteínas detectadas na membrana de nitrocelulose evidenciaram o reconhecimento dos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Polybia paulista is a wasp that belongs to the Hymenoptera order very common in southeastern Brazil, especially in São Paulo. The venoms of these insects are composed of amines, peptides, high weight molecular proteins, which are mainly enzymes. The phospholipase enzymes are the most abundant among the allergens of social Hymenoptera venom, and they are also the most important allergen. The complete sequence of 985 bp of phospholipase A1 cDNA from P. paulista venom was determined by cloning. The protein inferred by translation had 302 amino acid residues, PI and theoretical MW of 9.1 and 33 kDa respectively. By means of bioinformatics tools, it was possible to identify the active site between residues 131 to 140 (10 amino acids) and infer that it is a protein that belongs to esterases lipases super family. The complete cDNA was cloned into pET-28a expression vector in strains of BL21-DE3 Escherichia coli. The Rec-PLA1 with 6x histidine tail at the N-terminal was expressed in insoluble form in inclusion corpuscles by induction with 1mM IPTG at 20 ° C for 6 hours. The purification was performed by affinity chromatography on agarose-Ni+2 resin under denaturing conditions in the presence of 8 M urea and the protein eluted with decreasing pH gradient buffer. The Western blotting analyses revealed the specificity of polyclonal antibodies produced in mice against the electrophoretic fraction of natural PLA1 when tested with the crude venom of the wasp itself and with the PLA1- Rec of P. paulista. Besides these antibodies presented cross-immunoreactivity with the crude venom of other social wasps tested in this work. Other proteins detected in the nitrocellulose membrane showed the recognition of antibodies to other isoforms of phospholipase already described in the literature. Obtaining the recombinant form of... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre