Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T19:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliano_PriscilaBianchi_M.pdf: 2749600 bytes, checksum: a6323ddb35a6ed804b6e080a03a83c4a (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A participação da barreira trofoblástica na patogènese da vilosite placentária tem sido abordada somente em raros estudos realizados em cultura de tecidos, os quais demonstram que a expressão de ICAM-1 (intercellular adhesion molecule I) por células do trofoblasto viloso poderia permitir o influxo de células maternas para dentro da vilosidade. Para investigar a expressão de ICAM-1 pelo trofoblasto viloso, sua relação com ruptura da barreira trofoblástica e influxo de células imunes para dentro da vilosidade, foram analisadas 18 placentas com placentites (5 causada por T. gondii, 3 por T. cruzi, 2 por P. brasiliensis e 8 de etiologia desconhecida - VED) e 8 sem inflamação. Todas foram analisadas através da técnica de imunoistoquímka, em secções de parafina, utilizando-se anticorpos monoclonais anti-CD45RO, anti-CD20, MAC 387, HAM 56, anti-CD15, anti-hNK e anti-ICAM-1. Nas vilosites, o infiltrado intraviloso era composto principalmente por macrófagos HAM 56+ e linfócitos T UCHL-1+, enquanto que no espaço interviloso as células eram predominantemente monócitos MAC 387+. Na intervilosite por P. brasiliensis, não havia célula inflamatória dentro da vilosidade, enquanto que o infiltrado do espaço interviloso era composto principalmente por monócitos MAC 387+ e neutrófilos CDI5+. Todos os casos com placentite, exceto um, mostraram aumento da expressão de ICAM-1 nas vilosidades inflamadas, a qual estava localizada, quase que exclusivamente, próxima às áreas de ruptura trofoblástica. Nestas, foram observados leucócitos aderidos, apenas nos casos com vilosite. Quando a reação inflamatória ocorria somente no espaço interviloso (infecção por P. brasiliensis) apesar da ruptura trofoblástica e aumento da expressão de ICAM-I, não se observou influxo de leucócitos em direção ao estroma viloso. Nenhuma das placentas sem inflamação mostrou expressão de ICAM-1. Concluindo, o aumento da expressão de ICAM-1 pelo trofoblasto viloso ocorre durante placentites com acúmulo de leucócitos tanto no estroma viloso como no espaço interviloso e, provavelmente, desempenha um importante papel na ruptura da barreira trofoblástica. O influxo de células imunes para o vilo placentário, aparentemente, é mediado por ICAM-1, mas a localização do antígeno no interior da vilosidade é certamente um fator crucial para que isso ocorra. / Abstract: Although an in vitro study has hypothesized that expression of ICAM-1 by villous trophoblasts could be important for the influx of maternal immune cells in villitis, it remains to be shown whether the same phenomenon occurs in human villitis. To investigate the expression of ICAM-1 by villous trophoblasts, its relationship with rupture of the trophoblastic barrier and influx of immune cells into the villi, we analyzed 18 paraffin-embedded placentas with placentitis (5 by T. gondii, 3 by I cruzi, 2 by P. brasiliensis and 8 of unknown aetiology - VTJE) and 8 control placentas by immunohistochemistry using the monoclonal antibodies anti-CD45RO, anti-CD20, MAC 387, HAM 56, anti-CD15, anti-HNK and ami-ICAM-1. In all villitis cases, the inflammatory infiltrate within the villous stroma was composed mainly of HAM 56+ macrophages and UCHL-1 T lymphocytes, but in the intervillous space, the cells were mainly MAC 387+ monocytes. Otherwise, intervillosites caused by P. brasiliensis showed mainly MAC 387+ monocytes, CD15+ granulocytes and none inflammatory cell within the villi. All cases but one of placentitis showed trophoblast overexpression of ICAM-1 in the inflamed villi, located almost exclusively next to the areas of trophoblastic rupture. The villitis cases (caused by T. cruzi, T. gondii and VUE) presented leukocyte adherence in the areas of trophoblastic rupture. When the inflammatory reaction was situated in the intervillous space (placentitis by P. brasiliensis), in spite of the trophoblastic rupture and ICAM-1 overexpression there was no leukocyte influx into villi. None of the control placentas showed ICAM-1 expression. We concluded that overexpression of ICAM-1 by villous trophoblasts occurs during placentitis characterized by accumulation of leukocytes in the villous or intervillous space and probably plays an important role in the rupture of the trophoblastic barrier. The influx of immune cells into the villi appears to be mediated by ICAM-1 but the location of the antigen within villous stroma is certainly a crucial factor for its occurrence. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Thesis (M.S.)--Michigan State University. School of Criminal Justice, 2006 / Title from PDF t.p. (viewed on Nov. 20, 2008) Includes bibliographical references (p. 112-116). Also issued in print.

Paediatric intestinal failure following bowel resection causes significant morbidity and mortality. There is a pressing need for improved treatment modalities. Following loss of bowel, the remaining intestine undergoes a period of adaptation, characterised by an increase in height of the intestinal villi. Better understanding the factors that govern the formation and growth of villi may lead to therapeutic interventions that amplify the intrinsic adaptation response. This thesis aims to explore the processes by which intestinal villi form during embryological development, the contribution of intestinal stem cells to this, and candidate signalling pathways that may yield insights into new therapeutic interventions for patients with intestinal failure. Abstract: Aim I will examine the morphogenesis and morphology of intestinal villi by investigating three themes: 1) Villus morphogenesis: When and where do villi form along the gut tube? Can this process be quantified, both in vivo and in vitro? Is this initiated by a dominolike signaling-cascade along the bowel, or location-specific intrinsic triggers? 2) Stem cells: What is the spatiotemporal appearance of the Lgr5-expressing intestinal stem cells during development? How does this relate to the process of villus morphogenesis? 3) Signalling pathways: Can a genetic mutation mouse model help elucidate pathways by which post bowel resection adaptation might occur? Can this be used to help identify potential intestinotrophic agents? Abstract: Materials and Methods Three mice models were used as the foundation for this work. Embryonic tissue was analysed from wild-type CD1 and Lgr5-eGFP-IRES-CreERT2 mice, and adult intestinal tissue examined from tamoxifen-activated Villin-Cre-ERT2 Pten-/- Brafv600E mice. Culture of wild-type embryonic mouse intestine with and without segments removed and / or reversed was performed to investigate the question of what triggers the proximal-to-distal wave of villus morphogenesis. Immunohistochemical interrogation using anti-GFP antibodies was used in the Lgr5- GFP mice to identify the location of Lgr5-expressing cells during the development of villi. Bright-field microscopy, time-lapse in-incubator microscopy, and histological sections assessed villus morphology. The Villin-Cre-ERT2 Pten-/- Brafv600E mouse mutant was explored regarding the intestinal epithelial morphometric changes that occur following tamoxifen-induction. Abstract: Results The proximal-to-distal wave of villus morphogenesis was observed both in vivo and in vitro. Villus morphogenesis commences at embryonic day 14.5 in vivo and after three days in culture from e11.5 in vitro. The villus structures formed in vitro are significantly attenuated compared to in vivo development. An attempt was made to overcome this by providing intestinal explants with a blood supply to aid growth. Evidence is presented that suggest the proximal-to-distal wave of villus morphogenesis is driven by location specific factors intrinsic to each part of the bowel, rather than a domino-like signalling cascade travelling along the intestine. Lgr5-expressing intestinal stem cells were present in early development. Prior to villus morphogenesis they were uniformly distributed along the luminal surface of the intestinal epithelia. During the intense proliferation associated with villus morphogenesis they progressively congregated to the inter-villus spaces. Once villi are fully formed they were absent from the villi but identified in the inter-villus spaces. The Pten/Braf mouse mutant demonstrates villus morphological changes similar to those found following post-bowel resection adaptation. This suggests that there may be a role for Pten/Braf in the epithelial proliferation following extensive bowel resection. Signalling factors in these pathways may be candidate intestinotrophic agents for the treatment of short bowel syndrome. Abstract: Conclusions Before any processes that manipulate intestinal epithelia can be safely translated into therapies to aid adaptation in patients with intestinal failure, it is important to have a full and detailed understanding of the basic science principles that underpin the behaviour of the epithelial cells, both during development and in adulthood. I have explored and quantified the process of villus morphogenesis in the embryonic mouse, investigated the timing of appearance of Lgr5 intestinal stem cells, and interrogated a genetic mouse model with morphometric changes similar to those seen following small bowel resection. I propose two candidate intestinotrophic agents that may hold regenerative potential to augment post small bowel resection adaptation. The next stage of investigation would be to use a mouse model of small bowel resection with manipulation of cell signalling factors to assess impact on post resection adaptation. The ultimate goal would be to investigate epithelial activity in human neonatal intestine and explore methods of modulating this to improve the outcomes from post bowel resection intestinal failure.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2002. / Härtill 4 uppsatser och 1 appendix.

Foram utilizados 1140 pintos de corte, machos, da linhagem comercial Cobb criados de 1 a 42 dias de idade e alojados em um galpão experimental. Foram testados seis tratamentos, com seis repetições de 40 aves, adotando-se um delineamento experimental inteiramente ao acaso. Os tratamentos foram: T1 Controle; T2 - Antibiótico (Bacitracina de Zinco); T3 - MOS; T4- Ácidos Orgânicos; T5 - MOS + Ácidos Orgânicos, T6- Extratos de Plantas. Os parâmetros de desempenho avaliados foram (consumo de ração, ganho de peso, conversão alimentar e mortalidade), e morfometria intestinal.Os dados foram submetidos à análise de variância e, para a comparação das médias foi utilizado contrastes ortogonais , com um nível de 5% de probabilidade. Houve efeito significativo (p<0,05) tanto para as varáveis de desempenho em todos os períodos analisados, como para as variáveis de morfometria intestinal. Os aditivos alternativos substituíram o antibiótico de forma eficiente em todas as fases de criação, tanto para índices zootécnicos quanto para morfometria intestinal, sendo uma eficiente alternativa de uso. / Were used in 1140 chicks, male, commercial line Cobb raised from 1 to 42 days old and housed in an experimental barn. We tested six treatments with six replicates of 40 birds, adopting a completely randomized experimental design. The treatments were: T1 - control, T2 - Antibiotic (Bacitracin Zinc), T3 - MOS-Organic Acids T4, T5 - MOS + Organic Acids, Plant Extract-T6. The performance parameters evaluated were (feed intake, weight gain, feed conversion and mortality), and morphometry intestinal.Os data were subjected to analysis of variance and, for comparison of means was used orthogonal contrasts, with a level of 5 % Probability. Significant effects (p <0.05) for both variables of performance in all study periods, as for the variables of intestinal morphology. The additives have replaced the alternative antibiotic efficiently at all stages of creation, both in biological indices as in intestinal morphology, with an efficient alternative use.

Objetivo: Caracterizar as indicações das gestantes que procuram o serviço de Medicina Fetal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo que realizaram procedimentos invasivos diagnósticos e avaliar os resultados dos cariótipos fetais e destas gestações no período de fevereiro de 2005 a dezembro de 2009. Método: Estudo observacional retrospectivo das gestantes que realizaram biópsia de vilo corial (BVC), amniocentese e cordocentese. Não foram incluídos outros procedimentos diagnósticos ou terapêuticos. O resultado da gestação foi obtido através de consulta de prontuário eletrônico e/ou físico e/ou contato telefônico. Resultados: Foram realizados 113 BVC, 340 amniocenteses e 260 cordocenteses. A principal indicação para a realização dos procedimentos invasivos foi a presença de malformações fetais (69,8%), seguido por translucência nucal aumentada (13,4%) e idade materna avançada (10,2%). A trissomia do cromossomo 18 foi a aneuploidia mais comum (8,1%), seguido pela trissomia do 21 (6,2%), 45,X0 (4,8%) e a trissomia do 13 (3,8%). Ocorreram 4,9% abortamentos, 25,7% natimortos e 13% neomortos. Oito gestantes optaram pela interrupção judicial. 99% das gestantes cujos fetos não apresentavam malformação e que apresentavam cariótipo fetal normal tiveram nativivos. CONCLUSÃO: A principal indicação para a realização dos procedimentos invasivos foi a presença de malformação fetal em 69,8% das gestantes e presença de anormalidades cromossômicas encontradas nos fetos foi de 26,23%. / Objective: The purpose of this study is to characterize the indications of pregnant women who seek the Fetal Medicine Service of Hospital das Clínicas of São Paulo University to perform invasive diagnostic procedures and evaluate the results of fetal karyotypes and their pregnancies from February 2005 to December 2009. Methods: Retrospective observational study of pregnant women who underwent CVS, amniocentesis or cordocentesis. Other diagnostic or therapeutic procedures were not included. The outcomes of pregnancies were obtained through consultation of medical records and/or telephone contact. Results: 113 CVS, 340 amniocentesis and 260 cordocentesis were performed. The main indication for performing invasive procedure was the presence of fetal anomaly (69.8%), followed by increased nuchal translucency (13.4%) and maternal age (10.2%). The trisomy of chromosome 18 was the most common aneuploidy (8.1%), followed by trisomy 21 (6.2%), 45,X0 (4.8%), and trisomy 13 (3.8%). There were 4.9 % of miscarriage, 25.7% of stillbirth and 13% of neonatal deaths. Eight women opted for legal termination of pregnancies. 99% of pregnant women whose fetus had no structural abnormalities and normal karyotype had a live child. CONCLUSION: The main indication for karyotyping was the presence of fetal malformation in 69.8% of pregnancies and chromosomal abnormalities was found in 26.23% of the fetuses.

A clonagem de animais é uma técnica em desenvolvimento e ainda requer refinamento, uma vez que as perdas embrionárias são significativas. Mesmo com animais chegando à termo, algumas deficiências verificadas ao nascimento provocam a morte destes antes do primeiro mês de vida. As alterações placentárias durante a embriogênese estão relacionadas, à formação deficiente da placenta, principalmente nas regiões de troca materno-fetal. Considerando a necessidade de estudos mais detalhados sobre a morfologia da placenta e a ausência de estudos quantitativos das estruturas placentárias em grandes mamíferos, investigamos comparativamente os vilos coriônicos da placenta de bovinos não clonados e clonados usando delineamento estereológico. Foram utilizadas placentas de quatro fêmeas de bovinos clonados e quatro de não clonados. A amostragem foi realizada de modo uniforme, sistemático e aleatório, sendo obtidas estimativas de densidade de volume, volume referência, tamanho e comprimento e número de unidades volume star. Todos os parâmetros estereológicos apresentaram valores superiores (embora não significativos) para não clonados, com exceção do número de unidades volume star. No entanto, a placenta de não clonados foi mais eficiente (p= 0.014). Apesar de não significativos, os resultados sugerem a existência de diferenças biológicas, ou seja, a placenta de bovinos não clonados apresenta vilos maiores (porém em menor número), mas distribuídos em um número maior de placentomas. Já em animais clonados, estes vilos são menores, mais numerosos e distribuídos em um número menor de placentomas. / Animal cloning is still in development it requires further improvements since embryonic losses are remarkable animals die before the first month after birth. The placental changes during embryogenesis cause a deficiency in the placenta, mostly in the maternal-fetal exchange areas. Due to the need for more detailed studies on the placenta?s morphology, especially the quantitative analysis of the placenta structures in large animals, chorionic villi were comparatively investigated in both cloned and non-cloned bovines by means of stereology designed methods. Placentas from four cloned and four non-cloned bovines were used. Specimens were collected in a random uniformand systematic procedure, and stereological designed methods were pursued to estimate volume density of villi; the volume reference of placenta (Cavilieri Principle), surface density, surface area, star volume and number of star volume units. All parameters presented larger values for non-cloned, with exception of number of star volume units, thought these results were statistically non-significant larger in non-cloned animals (p= 0.014). In conclusion, it is possible to say that there are biological differences, in the placenta of non-cloned bovines which presents larger chorionic villi, small villi number, but distributed in a larger number of placentomas. In cloned bovines, however, villi are smaller, numerous more, and they are distributed in fewer number of placentomes.

Objetivo: Caracterizar as indicações das gestantes que procuram o serviço de Medicina Fetal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo que realizaram procedimentos invasivos diagnósticos e avaliar os resultados dos cariótipos fetais e destas gestações no período de fevereiro de 2005 a dezembro de 2009. Método: Estudo observacional retrospectivo das gestantes que realizaram biópsia de vilo corial (BVC), amniocentese e cordocentese. Não foram incluídos outros procedimentos diagnósticos ou terapêuticos. O resultado da gestação foi obtido através de consulta de prontuário eletrônico e/ou físico e/ou contato telefônico. Resultados: Foram realizados 113 BVC, 340 amniocenteses e 260 cordocenteses. A principal indicação para a realização dos procedimentos invasivos foi a presença de malformações fetais (69,8%), seguido por translucência nucal aumentada (13,4%) e idade materna avançada (10,2%). A trissomia do cromossomo 18 foi a aneuploidia mais comum (8,1%), seguido pela trissomia do 21 (6,2%), 45,X0 (4,8%) e a trissomia do 13 (3,8%). Ocorreram 4,9% abortamentos, 25,7% natimortos e 13% neomortos. Oito gestantes optaram pela interrupção judicial. 99% das gestantes cujos fetos não apresentavam malformação e que apresentavam cariótipo fetal normal tiveram nativivos. CONCLUSÃO: A principal indicação para a realização dos procedimentos invasivos foi a presença de malformação fetal em 69,8% das gestantes e presença de anormalidades cromossômicas encontradas nos fetos foi de 26,23%. / Objective: The purpose of this study is to characterize the indications of pregnant women who seek the Fetal Medicine Service of Hospital das Clínicas of São Paulo University to perform invasive diagnostic procedures and evaluate the results of fetal karyotypes and their pregnancies from February 2005 to December 2009. Methods: Retrospective observational study of pregnant women who underwent CVS, amniocentesis or cordocentesis. Other diagnostic or therapeutic procedures were not included. The outcomes of pregnancies were obtained through consultation of medical records and/or telephone contact. Results: 113 CVS, 340 amniocentesis and 260 cordocentesis were performed. The main indication for performing invasive procedure was the presence of fetal anomaly (69.8%), followed by increased nuchal translucency (13.4%) and maternal age (10.2%). The trisomy of chromosome 18 was the most common aneuploidy (8.1%), followed by trisomy 21 (6.2%), 45,X0 (4.8%), and trisomy 13 (3.8%). There were 4.9 % of miscarriage, 25.7% of stillbirth and 13% of neonatal deaths. Eight women opted for legal termination of pregnancies. 99% of pregnant women whose fetus had no structural abnormalities and normal karyotype had a live child. CONCLUSION: The main indication for karyotyping was the presence of fetal malformation in 69.8% of pregnancies and chromosomal abnormalities was found in 26.23% of the fetuses.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-10Bitstream added on 2014-06-13T20:18:12Z : No. of bitstreams: 1 augusto_rmn_me_botfmvz.pdf: 475859 bytes, checksum: c7eb29be32951647006a8bc33ef784a0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Foram realizados dois experimentos: no primeiro utilizaram-se 96 leitões desmamados com idade média de 21 dias, num delineamento em blocos com arranjo fatorial dos tratamentos 2 x 2 ( duas fontes de carboidratos e duas classes de peso ao desmame). No segundo foram utilizados 48 leitões, num delineamento em blocos com arranjo fatorial 2 x 2 x 2 x 3 (duas classes de pesos ao desmame x duas fontes de carboidratos x duas porções do intestino delgado x três épocas de abate). Portanto, no modelo estatístico foram usados os efeitos fixos de peso, fontes de carboidratos, porções do intestino delgado, épocas de abate e suas respectivas interações; e o efeito aleatório de blocos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da substituição da lactose pela maltodextrina nas rações de leitões desmamados, com diferentes pesos, sobre o consumo diário de ração, ganho diário de peso, conversão alimentar, incidência de diarreia, altura das vilosidades, profundidade das criptas e espessura de mucosa. No primeiro experimento, nos períodos de 0 a 17 e 0 a 29 dias após o desmame constatou-se efeito da classe de peso, no ganho diário de peso e no consumo diário de ração dos leitões, ou seja, os animais mais pesados ao desmame apresentaram maiores consumo diário de ração e ganho diário de peso em relação aos animais mais leves. No segundo experimento, verificou-se que a maltodextrina determinou aumentos na espessura média da mucosa intestinal dos leitões, independente do peso, e na profundidade média das criptas apenas nos animais leves. A maltodextrina pode ser usada como uma alternativa para substituir a lactose nas rações de leitões desmamados, pois não afeta negativamente o desempenho e a maioria dos parâmetros morfométricos do intestino. / Two trials were conducted: in the first trial, were used, 96 weaning pigs at the age of about 21 days, in a 2 × 2 factorial arrangement (two sources of carbohydrate: lactose and maltodextrin and two weaning weight classes: light, from 4,50 to 5,20 kg, and heavy, from 5,90 to 6,60 kg). In the second trial, 48 pigs, in a 2 x 2 x 2 x 3 factorial arrangement (two weaning weight classes x two sources of carbohydrate x two portions of the small intestine x three slaughter times). Therefore, in the statistical model the fixed effect of weight, sources of carbohydrate, portions of the small intestine, times of slaughter and its respective interactions; and the random effect of blocks. The objective of this study was to evaluate the effects of maltodextrin diets in weaning pigs of different weights on feed intake, feed:gain ratio, weight gain, diarrhea incidence, villus height, crypt depth and mucous membrane height. In the first trial, from 0-17 days and from 0-29 days after the weaning effects of weight classes, were detected on daily weight gain, and daily feed intake. The heaviest animals at weaning showed the best results. In the second trial, we verified that maltodextrin determined an increase in the average thickness of the intestinal mucosa, regardless of weight classes, and the increase in the average depth of the crypt, only in the highter animals. Maltodextrin can be used as an alternative to lactose in diets of weaning pigs, as it doesn’t affect negatively the performance neither the morfometric parameters of the intestine.

Foram utilizados 1140 pintos de corte, machos, da linhagem comercial Cobb criados de 1 a 42 dias de idade e alojados em um galpão experimental. Foram testados seis tratamentos, com seis repetições de 40 aves, adotando-se um delineamento experimental inteiramente ao acaso. Os tratamentos foram: T1 Controle; T2 - Antibiótico (Bacitracina de Zinco); T3 - MOS; T4- Ácidos Orgânicos; T5 - MOS + Ácidos Orgânicos, T6- Extratos de Plantas. Os parâmetros de desempenho avaliados foram (consumo de ração, ganho de peso, conversão alimentar e mortalidade), e morfometria intestinal.Os dados foram submetidos à análise de variância e, para a comparação das médias foi utilizado contrastes ortogonais , com um nível de 5% de probabilidade. Houve efeito significativo (p<0,05) tanto para as varáveis de desempenho em todos os períodos analisados, como para as variáveis de morfometria intestinal. Os aditivos alternativos substituíram o antibiótico de forma eficiente em todas as fases de criação, tanto para índices zootécnicos quanto para morfometria intestinal, sendo uma eficiente alternativa de uso. / Were used in 1140 chicks, male, commercial line Cobb raised from 1 to 42 days old and housed in an experimental barn. We tested six treatments with six replicates of 40 birds, adopting a completely randomized experimental design. The treatments were: T1 - control, T2 - Antibiotic (Bacitracin Zinc), T3 - MOS-Organic Acids T4, T5 - MOS + Organic Acids, Plant Extract-T6. The performance parameters evaluated were (feed intake, weight gain, feed conversion and mortality), and morphometry intestinal.Os data were subjected to analysis of variance and, for comparison of means was used orthogonal contrasts, with a level of 5 % Probability. Significant effects (p <0.05) for both variables of performance in all study periods, as for the variables of intestinal morphology. The additives have replaced the alternative antibiotic efficiently at all stages of creation, both in biological indices as in intestinal morphology, with an efficient alternative use.