Este estudo in vitro avaliou a influência do tempo de aplicação do bicarbonato de sódio a 10% na qualidade da união de um sistema adesivo universal unido ao esmalte bovino clareado por meio de testes de resistência de união (microtração imediata e após 6 meses) e grau de conversão na interface adesiva (espectroscopia micro-Raman). Cento e dez blocos de esmalte bovino (4x4 mm) foram planificados e distribuídos aleatoriamente em 5 grupos: C: controle, sem clareamento; B: clareamento com peróxido de hidrogênio 35% (HP); BS3: clareamento com HP seguido de tratamento com a solução de bicarbonato de sódio 10% (BS) por 3 min; BS5: clareamento com HP seguido de tratamento com BS por 5 min; BS10: clareamento com HP seguido de tratamento com BS por 10 min. O HP foi aplicado duas vezes (20 minutos cada, com exceção do grupo C) e em seguida as restaurações adesivas foram realizadas. Após 24 horas, 20 espécimes de cada grupo foram seccionados em palitos (1x1 mm) e submetidos ao teste de resistência de união (imediato e após 6 meses) em máquina de ensaios universal com velocidade de 0,5 mm/min (n=10). Os dados foram analisados por ANOVA a dois critérios (p <0,05). As médias das análises imediata e após 6 meses foram: C: 26,77 / 25,32; B: 26,42 / 26,42; BS3: 23,95 / 22,98; BS5: 23,65 / 26,64; BS10: 23,42 / 29,30. Nenhum dos fatores testados apresentou significância: tratamento (p=0,349) e tempo (p=0,234), não havendo interação entre estes (p=0,198). Falhas adesivas foram predominantes nos dois períodos de avaliação. Para a análise do grau de conversão, após 24 horas da restauração, 2 espécimes de cada grupo foram seccionados em fatias de 1mm, sendo apenas 3 fatias selecionadas. Os seguintes parâmetros foram utilizados: excitação dos espécimes com laser de argônio operando a 538 nm, espectro obtido a uma resolução ~4cm-1, sob uma região de espectro entre 1580-1660cm-1, verificando a altura dos picos 1608cm-1 e 1637cm-1. Os dados foram analisados por ANOVA a um critério (p <0,05) e as médias do grau de conversão foram: C: 71,10%; B: 72,11%; BS3: 73,98%; BS5: 69,25%; BS10: 70,56%. O fator de estudo tratamento não apresentou significância estatística (p=0,808). A adesão no esmalte clareado parece não ter sido afetada negativamente quando restaurações adesivas foram feitas imediatamente após o clareamento, independente da aplicação ou não da substância antioxidante. Mais estudos que avaliem a adesão em esmalte clareado, principalmente no que diz respeito ao grau de conversão e aos diferentes tipos de sistemas adesivos universais se fazem necessários para fins comparativos e para que possamos indicar seguramente as restaurações imediatas (quando necessárias) na prática clínica. / The present in vitro study evaluated the influence of the application time of 10% sodium bicarbonate in the adhesion quality of a universal adhesive system bonded to bleached enamel through microtensile bond strength testing (immediate and after 6 months) and the degree conversion (micro-Raman spectroscopy). One hundred and ten bovine enamel blocks (4x4mm) were flattened and randomly allocated into 5 groups: C: control, without bleaching; B: bleached with 35% hydrogen peroxide (HP); BS3: bleached and treated with 10% sodium bicarbonate solution (BS) for 3 min; BS5: bleached and treated with BS for 5 min; BS10: bleached and treated with BS for 10 min. HP was applied twice (20 minutes each, except in group C) and the adhesive restorations were performed. After 24 hours, 20 specimens from each group were sectioned into sticks (1x1 mm) and submitted to microtensile bond strength testing (immediately and after 6 months) in a universal testing machine with a crosshead speed of 0.5 mm/min (n = 10). Data was analyzed by two-way ANOVA (p <0.05). The means of the immediate and 6 months analysis were: C 26.77 / 25.32; B: 26.42 / 26.42; BS3: 23.95 / 22.98; BS5: 23.65 / 26.64; BS10: 23.42 / 29.30. None of the tested factors showed significance: treatment (p = 0.349) and time (p = 0.234), with no interaction between them (p = 0.198). Adhesive failures were predominant in both evaluation periods. For the degree of conversion analysis, 2 specimens of each group were sectioned into 1 mm slices after 24 hours of the restorative procedure, and 3 slices were selected. The following parameters were used: excitation of specimens with argon laser operating at 538 nm, spectrum obtained at a resolution of ~4cm-1, under a spectrum region between 1580-1660cm-1, evaluating the height of the peaks at 1608cm-1 and 1637cm-1. Data was analyzed by one-way ANOVA (p <0.05). The means of degree of conversion were: C: 71.10%; B: 72.11%; BS3: 73.98%; BS5: 69.25%; BS10: 70.56%. The study factor \"treatment\" was not statistically significant (p = 0.808). The results of bonding to bleached enamel was not negatively affected when adhesive restorations were made immediately after bleaching, regardless of the application of the antioxidant substance. Further studies to evaluate the adhesion on bleached enamel, mainly with regard to the degree of conversion and different types of universal adhesive systems are needed for comparative purposes. Only after this, the immediate restoration (if necessary) in clinical practice can be safely and indicated.

Existem muitas metodologias utilizadas para tentar analisar a permeação de peróxido de hidrogênio através das estruturas dentárias, porém não conseguem determinar o momento exato em que o peróxido começa a alcançar concentrações detectáveis dentro da câmara pulpar. OBJETIVO: Investigar a viabilidade de um modelo experimental de análise eletroquímica para detecção e mensuração da concentração de peróxido de hidrogênio proveniente de produtos utilizados em tratamento clareador e avaliar a cinética da difusão destes peróxidos através dos tecidos duros dentários. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram utilizados 45 dentes incisivos bovinos permanentes mandibulares, cujo preparo envolveu a remoção da face lingual coronária, mantendo-se o esmalte e a dentina vestibulares intactos. Todos os dentes foram fixados em resina acrílica com auxílio de matriz elastomérica quadrangular e organizados segundo os testes: 1: análise eletroquímica e 2: análise espectrofotométrica. Para os testes foram utilizados clareadores à base de peróxido de hidrogênio (HP) e de peróxido de carbamida (CP) e seus respectivos placebos (PHP e PCP). Foram realizados três cronoamperogramas e três voltamogramas para cada uma das amostras. Utilizou-se a mesma cela no experimento eletroquímico e no teste espectrofotométrico, permitindo assim a comparação das metodologias. RESULTADOS: A análise eletroquímica mostrou na 1ª permeação de HP média de 1688,50 segundos quando comparada a 857,70s e a 457,70s da 2ª e da 3ª permeações, respectivamente. Desta forma observa-se que a 1ª permeação representa aproximadamente o dobro e o quadruplo dos valores sequenciais da 2ª e da 3ª permeações. Não foi detectado início de permeação para CP, PHP e PCP. Para o grupo HP há uma relação crescente nas concentrações de moléculas de peróxido de hidrogênio detectadas nas três permeações respectivamente. Entretanto, o crescimento entre a 1ª e 2ª permeação é discreto, quando comparado à 3ª permeação, onde foi detectada maior concentração de moléculas do peróxido de hidrogênio. No grupo CP observam-se médias de 2,96E-02 A na 1ª permeação, 3,11E-05 A na 2ª permeação e 1,37E-04 A na 3ª permeação, havendo diferença entre a 1ª e 3ª permeação (p = 0,00472). Todavia, não ocorreram diferenças entre os demais grupos (p > 0,05). Quando comparado o método eletroquímico e o método espectrofotométrico, o peróxido de hidrogênio (HP) não demonstrou diferença significativa entre as análises (p =0,0826); todavia o peróxido de carbamida mostrou diferenças entre as duas análises (p=0,0093). CONCLUSÕES: A metodologia eletroquímica é tão eficaz quanto à metodologia consolidada na literatura para a detecção da presença de peróxido de hidrogênio na câmara pulpar, nos testes com peróxido de hidrogênio 35%. O tempo necessário para que o peróxido de hidrogênio chegasse à câmara pulpar diminuiu a cada aplicação e a penetração do peróxido de hidrogênio aumentou a permeabilidade dos tecidos duros dentais. / There are many methods used to analyze the permeation of hydrogen peroxide through the tooth structure, but they cannot determine the exact moment when the peroxide begins to reach detectable concentrations within the pulp chamber. OBJECTIVE: To investigate the feasibility of an experimental model of electrochemical analysis for detection and measurement of the concentration of hydrogen peroxide from products used in bleaching and evaluate the kinetics of diffusion of these peroxides through dental hard tissues. MATERIALS AND METHODS: We used 45 bovine permanent mandibular incisors, whose preparation involved removing the lingual coronary hard tissues keeping intact the vestibular enamel and dentin. All teeth were fixed in acrylic resin with the aid of elastomeric matrix square and organized according to the tests: 1: electrochemical analysis and 2: spectrophotometric analysis. For tests were used based bleaching hydrogen peroxide (HP) and carbamide peroxide (CP) and their respective placebos (PHP and PCP). Three cronoamperograms and three voltammograms were performed for each sample. We used the same cell to the spectrophotometric test, thus allowing comparison of methodologies. RESULTS: The analysis showed the 1st electrochemical permeation HP average of 1688.50 seconds when compared to 857.70s and 457.70s of the 2nd and 3rd permeations respectively. Thus we observe that the 1st permeation is approximately double and quadruple sequential values of the 2nd and the 3rd permeations. Not detected early permeation for CP, PHP and PCP. For Group HP there is a ratio of molecules increasing concentrations of hydrogen peroxide detected in three permeations respectively. However, the growth between the 1st and 2nd permeation is understated when compared to 3rd permeation, where there has been a greater concentration of molecules of hydrogen peroxide. In the CP group were observed averages of 2.96 E-02A in the 1st permeation, 3.11 E-05 A in the 2nd permeation and 1.37 E-04 A in 3rd permeation, no difference between 1st and 3rd permeation (p = 0.00472) . However, there were no differences between the other groups (p> 0.05). When compared the electrochemical and spectrophotometric methods, hydrogen peroxide (HP) showed no significant difference between the analysis (p = 0.0826), yet the carbamide peroxide showed differences between the two analyzes (p = 0.0093). CONCLUSIONS: The electrochemical method is as effective as the consolidated methodology in the literature to detect the presence of hydrogen peroxide in the pulp chamber, in the tests with hydrogen peroxide 35%. The time required for the hydrogen peroxide to reach the pulp chamber decreased to each application and the penetration of hydrogen peroxide increased the permeability of dental hard tissues.

Spermatogenesis is a complex process of male germ cell development from diploid spermatogonia to haploid fertile spermatozoa. Apoptosis plays a vital role in limiting cell numbers and eliminating defective germ cells. This requires novel gene products, and precise and well-coordinated programmes of gene expression. It is therefore possible that a disruption of transcription factor function would significantly impact germ cell development. The present work was undertaken to use Staput separation followed by culture of purified germ cells of rodent testis since mammalian spermatogenesis cannot yet be recreated in vitro. Specificity of separation was assessed using immunocytochemistry to identify spermatogonia, spermatocytes and spermatids. The genotoxins H2O2, doxorubicin, N-ethyl-N-nitrosourea, N-methyl-N-nitrosourea, 6-mercaptopurine, 5-bromodeoxyuridine, methyl methanesulphonate and ethyl methanesulphonate were investigated. Cells were cultured and treated with different concentrations for each agent. DNA damage and apoptosis were measured by Comet and TUNEL assay respectively. Up-regulation of expression of the transcription factors Tbpl1, FHL5 and Gtf2a1l that are important post-meiotically, were examined using RT- PCR and qPCR. Protein production was evaluated using Western blotting. Tbpl1, FHL5 and Gtf2a1l were cloned in-frame into the inducible expression vector pET/100-TOPO. The recombinant clones were induced and successful expression of the proteins in E. coli was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting. The recombinant clones obtained were used to demonstrate genotoxin induced impairment of gene expression. Thus, Staput-isolated rodent testicular germ cells seem to be a suitable model to study genotoxicity in vitro yielding result comparable to those reported in vivo. Furthermore, the work shows that genotoxins can impair gene expression.

Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Cacio de Moura-Neto / Banca: Ivaldo gomes de Moraes / Banca: Marcia Carneiro Valera / Banca: Fabio Luiz Camargo Villela Berbert / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade de peróxido que passa da câmara pulpar para a superfície dentária externa durante o clareamento interno no esmalte, cemento e dentina. Foram utilizados 50 incisivos bovinos extraídos que receberam aberturas coronárias, as raízes foram cortadas a 5 mm da junção amelo-cementária e foi realizado um tampão de 2mm de ionômero de vidro selando a entrada do canal. A extremidade apical dos espécimes foi isolada externamente com resina composta fotoativada. Os dentes foram então impermeabilizados completamente, deixando exposto somente as áreas a serem estudadas. As câmaras coronárias foram preenchidas com peróxido de hidrogênio a 35%. Os dentes foram divididos em três grupos experimentais e dois grupos controles, com 10 espécimes cada. GE - esmalte exposto a ser avaliado; GC - cemento exposto a ser avaliado; GD - dentina exposta a ser avaliada; e dois grupos Controle: GC1 - sem a presença de clareador internamente e sem impermeabilização e GC2 - câmara pulpar preenchida com clareador e impermeabilização total. Cada amostra foi colocado no interior de reservatórios individuais com 1000μl de solução tampão de acetato 2M (pH 4,5). Após 7 dias a 37±1ºC a solução foi transferida para um tubo de ensaio onde foram adicionados 100μl do corante violeta leucocristal e 50 μl de peroxidase, resultando em uma solução de coloração azul. A mensuração da absorbância foi feita em um espectrofotômetro e convertida em μg/ml de peróxido. Para avaliar se houve diferença entre os grupos experimentais e controle, realizou-se os testes de Kruskall-Walis e Dunn-Bunferroni e os resultados mostraram os íon passaram mais pela dentina exposta, seguida da dentina recoberta pelo esmalte e dentina recoberta pelo cemento, sem diferenças estatísticas. Todos os grupos experimentais foram diferentes dos controles... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was evaluated the pulp chamber penetration of peroxide bleaching agent to the root surface during the internal bleach technique in the enamel, dentin and cement. Bovine teeth were sectioned 5mm apical of the cemento-enamel junction and was performed a 2mm cervical seal with glass ionomer cement. The external apical part of samples was filled with composite resin. The teeth were divided into three experimental groups and two control groups: GE - exposition of enamel; GC - exposition of cement; GD - exposition of dentin and control groups: GC1 - no presence of internal agent bleaching e no waterproof and GC2 - pulp chamber filled with bleaching agent and total waterproof. Each sample was placed inside of individual flasks with 1000μl of acetate buffer solution 2M (pH 4.5). After 7 days, the buffer solution was transferred to a glass tube where leuco crystal violet and horseradish peroxidase were added, producing a blue solution. The optical density of the blue solution was determined by spectrophotometer and converted into microgram equivalents of hydrogen peroxide. Data were submitted to Kruskal-Wallis, and Dunn-Bunferroni tests. The results showed that the ions penetration was higher in dentin followed by enamel and cement. All experimental groups presented statistical differences to the control groups. / Doutor

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Marcelo Ferrarezi de Andrade / Banca: José Carlos Pereira / Resumo: O objetivo da presente pesquisa foi avaliar in vitro os efeitos citotóxicos de diferentes concentrações de um agente clareador de ativação dual à base de peróxido de hidrogênio, sobre células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para isso, 50 discos de dentina com 0,5mm de espessura, obtidos de dentes terceiros molares humanos íntegros, foram tratados com EDTA 0,5 M, pH 7,4 por 1 minuto, sendo a condutância hidráulica (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) determinada para cada um deles. Estes discos foram distribuídos em 5 grupos de acordo com os valores de permeabilidade. Os discos de dentina adaptados a um dispositivo metálico foram autoclavados, posicionados de maneira invertida (superfície pulpar dos discos voltados para cima) em recipientes plásticos de 24 compartimentos ("wells"). Então, 5 x 104 células MDPC-23/cm2 foram semeadas em cada compartimento. Após 72 horas de incubação na temperatura de 37º C, 5% de CO2 e 95% de ar, os dispositivos com os discos foram invertidos nos compartimentos, de tal maneira que os materiais experimentais pudessem ser aplicados (2 trocas de 15 minutos cada) sobre a superfície oclusal dos discos, caracterizando os 164 seguintes grupos experimentais: G1: H2O2 7,5%; G2: H2O2 20%; G3: H2O2 35%; e G4: gel base (sem o H2O2). No grupo controle (G5) os discos não foram tratados. Após esta etapa do experimento, o metabolismo das células MDPC-23 que permaneceram aderidas à superfície pulpar dos discos de dentina foi avaliado pela técnica de MTT. A morfologia das células e dentina tratada com os agentes experimentais foram avaliadas em microscopia eletrônica de varredura. A análise estatística de Kruskal-Wallis demonstrou que as três concentrações do agente clareador à base de H2O2 causaram intenso efeito citotóxico sobre as células MDPC-23. As concentrações de 7,5%, 20% e 35% de H2O2 aplicadas sobre os discos de dentina com 0,5mm... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The aim of this in vitro study was evaluate the transdentinal effects of an experimental bleaching agent with different concentration of hydrogen peroxide on the immortalized odontoblast-cell line MDPC-23. Fifty dentin disks, 0.5mm thick, cut from extracted non-carious permanent third human molar were conditioned for 1 minute with 0.5M EDTA, pH 7.4 and the hydraulic conductance (Lp; æL/mm2/min/cm H2O) was determined. The dentin discs were adapted to a metallic device which were sterilized and placed in wells of 24-well dishes (the pulpal surface of the discs remained in up position). Then, the cells were plated (5 x 104 cells/cm2) on the pulpal surface of the discs and incubated for 72 hours at 37oC, with 5% CO2 and 95% air. The metallic devices with the adapted dentin discs were inverted into the wells in such way that the experimental bleaching agents were applied on the oclusal surface of the discs for 30 minutes (2 changes of 15 minutes). The different concentration of H2O2 present in the bleaching agent gave rise to the following experimental groups: G1: 7.5% H2O2; G2: 20% H2O2; G3: 35% H2O2; and G4: 0% H2O2. In control group the dentin discs were not 167 submitted to treatment. The metabolism of MDPC-23 cells which remained attached to the pulpal surface of the discs was evaluated by the methyltetrazolium assay (MTT) and the cell and dentin morphology was assessed under scanning electron microscope (SEM). The statistical analysis of Kruskal-Wallis determined that the experimental bleaching agent caused an intense cytotoxic effects on the MDPC-23 cells. This experimental agent containing H2O2 at 7.5%; 20%; and 35% concentration decreased the cell metabolism by 62.65%; 62.28%; and 65.69%, respectively. The complementary statistical test of Mann-Withney demonstrated no difference between groups 1 and 2. The bleaching agent with... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

O processo de clarificação do caldo de cana-de-açúcar tem sido alvo de vários trabalhos de pesquisa, no intuito de melhorar a qualidade do açúcar obtido, tanto do ponto de vista de novas tecnologias em equipamentos e processos, quanto a respeito do estudo das propriedades físico-químicas da sacarose durante sua decomposição na clarificação. Os POA (Processos Oxidativos Avançados) têm sido aplicados, em especial, ozonização do caldo, tal qual este projeto propõe estudar uma alternativa ao processo convencional de sulfitação do caldo para a obtenção do açúcar cristal branco, através da utilização do peróxido de hidrogênio como agente de redução de cor ICUMSA do caldo e o impacto na degradação da sacarose em compostos não-cristalizáveis, reduzindo o rendimento industrial. Não há relatos na literatura sobre condições ideais de uso do peróxido de hidrogênio, bem como quais alterações essa tecnologia pode ocasionar no caldo. Por isso, buscaram-se elucidar quais são as melhores condições de trabalho e quais fatores influenciam na sua ação, bem como quais são os seus efeitos sobre o caldo tratado. As melhores condições para o uso do peróxido de hidrogênio são: pH entre 3,0 e 7,0, temperatura entre 40 a 70ºC, peróxido de hidrogênio maior que 600 ppm e dextrana menor que 750 ppm. Pode-se verificar que a maturidade da cana-de-açúcar no corte pode influenciar na ação do peróxido de hidrogênio, uma vez que quanto maior o grau de maturação da cana-de-açúcar, maior quantidade de compostos fenólicos e maior a cor inicial do caldo. A cinética de degradação da cor ICUMSA não apresentou distribuição regular, oscilando em pequenos intervalos de tempo, devido provavelmente à pequena quantidade de peróxido de hidrogênio utilizada nos ensaios. Não houve diminuição visual da cor do caldo quando utilizado doses até 5.000 ppm de H2O2. Com relação à turbidez, não foi possível identificar a influência da peroxidação nos valores. Houve degradação de sacarose quando foi feito o tratamento combinando temperatura elevada (62ºC) com pH ácido (3,8). A rede neural artificial (RNA) mostrou um bom ajuste na maioria dos casos apresentados e indicou a variável temperatura como a que apresentou maior influência na diminuição da absorbância à 420 nm. A segunda variável com maior influência foi o Brix do caldo de cana-de-açúcar. A espectrometria de massa mostrou que a peroxidação, nas condições reacionais avaliadas, não foi capaz de reduzir significativamente a cor do caldo, sugerindo que haja uma promoção de sedimentação de algumas impurezas do caldo, o que faz com que haja uma diminuição visual da cor do mesmo, não ocorrendo aparentemente reação química no caldo, quando utilizamos doses de 50.000 ppm. Assim o peróxido de hidrogênio não funcionou como um agente clarificante, nas condições estudadas. / The process of sugarcane juice clarification has been the subject of several research papers in order to improve the quality of sugar obtained both from the point of view of new technologies in equipment and processes , as concerning the study of physico- chemical properties of sucrose during decomposition in clarification . The AOP \'s (Advanced Oxidation Process ) have been applied in particular ozonation of the juice as such this design proposed to study an alternative to conventional process sulphiting of the juice to obtain sugar white crystal through the use of hydrogen peroxide as reduction ICUMSA color of juice and the impact on the degradation of sucrose into non- crystallizable compounds by reducing industrial productivity agent. There are no reports in the literature on optimal conditions of use of hydrogen peroxide as well as the technology changes which may result in the juice. Therefore , we sought to elucidate what are the best working conditions and factors which influence in its action, and what are its effects on the treated juice. The best conditions for the use of hydrogen peroxide are: pH lower than 7.0 or higher than 3.0, temperature greater than 40 °C and below 70 °C, hydrogen peroxide greater than 600 ppm and lower than 750 ppm dextran. We observed that the maturity of the sugarcane cutting can influence the action of hydrogen peroxide, since the more mature sugarcane, a greater number of phenolic compounds are produced and the higher the initial color of the juice. The kinetics of ICUMSA color degradation showed no regular distribution, oscillating at short time intervals, probably due to the small amount of hydrogen peroxide used in the tests. There was no visual color decrease of the juice. Regarding turbidity, it was not possible to identify the influence of peroxidation values . There was sucrose degradation when the treatment was made by combining high temperature (62°C) at acid pH (3.8). The artificial neural network (ANN) showed a good fit in most cases presented and indicated the variable temperature with the highest influence on the absorbance decrease at 420 nm. The second variable with the greatest influence was the Brix of sugarcane juice. Mass spectrometry showed that peroxidation in the reaction conditions evaluated was not able to significantly reduce the sugarcane juice color, suggesting a promotion of sedimentation of some impurities in the juice, hindering a reduction of its visual color, and apparently, there was no chemical reaction in the juice, using rate of hydrogen peroxide of 50,000 ppm. Thus hydrogen peroxide did not work as a clarifying agent, in the studied conditions

Neste estudo avaliamos a ocorrência de fagocitose por parte de alguns tipos celulares presentes na hemolinfa do carrapato bovino B. microplus e a produção de espécies reativas de oxigênio durante a resposta imune. As técnicas empregadas para avaliação da produção de espécies reativas de oxigênio foram luminescência amplificada por luminol, oxidação de fenol vermelho, microscopia de fluorescência e fluorimetria com o corante dihidrorrodamina 123 (DHR). Observamos um aumento da luminescência amplificada por luminol quando hemócitos foram incubados na presença de bactérias Micrococcus luteus ou zimosam ou PMA. Esta luminescência foi inibida por superóxido dismutase (SOD) e por catalase (CAT), enzimas antioxidantes que removem superóxido e peróxido de hidrogênio, respectivamente. LPS não elicitou aumento da luminescência dos hemócitos em relação ao controle. Através da oxidação de fenol vermelho em reação inibida por CAT, verificamos aumento nos níveis de H2O2 produzido pelos hemócitos quando estimulados com PMA e Micrococcus luteus, enquanto não houve aumento quando o estímulo foi LPS, corroborando os resultados da luminescência. Usando microscopia de fluorescência para avaliar a produção de ERO pelos hemócitos, encontramos que cerca de 25% dos hemócitos fluorescem com maior intensidade quando estimulados com zimosam, sendo esta fluorescência inibida por CAT. Através de fluorimetria usando DHR observamos um aumento na intensidade de fluorescência dos hemócitos estimulados com PMA em reação inibida por cisteína, substância redutora que remove peróxido de hidrogênio e peroxinitrito. Nosso conjunto de resultados permitem concluir que os hemócitos do carrapato bovino produzem espécies reativas de oxigênio durante a resposta imune, semelhantemente ao que ocorre em vertebrados e em invertebrados como moluscos, crustáceos e insetos. Este é o primeiro trabalho mostrando produção de ERO pelos hemócitos de aracnídeos. / The phagocytic activity and the reactive oxygen species (ROS) production during immune response of some hemocytes of the cattle tick Boophilus microplus were evaluated in this study. The ROS production was evaluated by luminol amplified luminescence, phenol red oxidation, dyhydrorhodamine (DHR) fluorescence microscopy and fluorimetry. The luminol-amplified luminescence increased when hemocytes were incubated with bacteria (Micrococcus luteus) or zymosam or phorbol 12-miristate 13 acetate (PMA). The superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), antioxidant enzymes that removes superoxide and hydrogen peroxide, respectively, inhibited this luminescence. Lipopolysaccharide (LPS) did not elicit luminescence of hemocytes in relation to controls. The catalase-inhibittable phenol red oxidation assay also showed an increase in the level of hydrogen peroxide produced by hemocytes stimulated with PMA or Micrococcus luteus. LPS did not stimulate the hemocytes, similarly to the observed by luminescence assay's. We also evaluated ROS production by fluorescence microscopy and we found approximately 25% more fluorescent hemocytes when zymosam was used. This fluorescence was inhibited by catalase. In DHR fluorimetry assay we observed an increase in the intensity of fluorescence in PMA stimulated hemocytes. This fluorescence was inhibited by cystein, a reducing agent that removes hydrogen peroxide and peroxinitrite. We conclude that hemocytes of the tick, like other invertebrate such as mollusks, crustaceans and insects and vertebrate, produce reactive oxygen species during the immune response. This is the first report of reactive oxygen species production by arachnid hemocytes.

Spectroscopic studies have been used to describe the mechanism of the decomposition of hydrogen peroxide by solutions of a dimeric Cu(II) complex of a dissymetric Schiff base, [CuSALAD]2.H2O, and imidazole or methyl substituted imidazoles, B, which form monomeric CuSALAD.B2 complexes, in aqueous ethanol solvent. Freezing point depression and vapor pressure lowering studies were carried out to confirm the dimeric nature of the [CuSALAD]2.H2O complex that had been previously reported. The stoichiometry of the [CuSALAD]2.H2O-imidazole equilibrium was extensively studied pointing to a 1:4 stoichiometry. The CuSALAD.B2 adducts exhibited certain catalytic properties that mimic those of catalase enzymes. The different imidazoles were buffered to acidic, neutral and basic pH media in order to investigate the pH effects of this reaction. Two charge transfer (CT) bands were observed near 420 and 450 nm upon addition of hydrogen peroxide to CuSALADB2 solutions, and were associated with two proposed intermediates (CuBOOH and CuBOOCu). A mechanism consistent with these results has been developed. First order dependence of the rate on CuSALAD.B2 was observed in the presence of excess CuSALAD.B2 over hydrogen peroxide, whereas second order dependence was observed with the latter in excess. The CuBOOCu intermediate was unstable in the presence of EDTA, and a first order dependence of rate of formation of intermediate on both CuSALAD.B2, and hydrogen peroxide was observed.

No description available.

Objectives: To measure the level of hydrogen peroxide penetration into the pulp chamber and to evaluate its whitening efficacy when the tooth is treated with an innovative double layer of potassium nitrate desensitizing agent and hydrogen peroxide whitening gel. Methods: Extracted human molar teeth (n=160) were collected. Roots were trimmed 3 mm apical to the cemento-enamel junction, the pulp was removed and a cavity prepared, leaving a standardized wall of 2 mm thickness, which retained 100 µL of acetate buffer solution. A standardized whitening area of 6 mm in diameter was established buccally by painting the rest of the tooth with gray nail varnish. The teeth were randomly assigned into four groups. Group 1: no treatment (glycerin gel, negative control); Group 2: double layer of 20 L 5% potassium nitrate (Relief ACP, Philips Oral Healthcare) and 100 L 25% hydrogen peroxide (Zoom Chairside Whitening Gel, Philips Oral Healthcare); Group 3: double layer of 40 L 5% potassium nitrate and 100 L 25% hydrogen peroxide; and Group 4: 100 L 25% hydrogen peroxide (positive control). All groups received three 45-minute sessions of in-office whitening with light activation at 3-day intervals. Hydrogen peroxide penetration was assessed spectrophotometrically using leucocrystal violet and horseradish peroxidase. Color measurements were assessed with VITA Easyshade at baseline, 1-day, and 1-month post-whitening. Tooth color change was measured per Commission Internationale de l'Eclairage methodology. One-way ANOVA with Tukey multiple comparisons adjustment was performed to compare group differences in overall tooth color change (Delta E*) and hydrogen peroxide penetration (type I error = 0.05). Results: Hydrogen peroxide penetration levels were not significantly different between Group 2 and Group 4; however, the levels were significantly higher than Group 1 and Group 3 (p< 0.0001). Groups 2, 3 and 4 showed no differences for overall tooth color change but differed significantly from the negative control group (Group 1) at 1-day and 1-month post-whitening. Conclusions: Hydrogen peroxide penetration was affected when pretreated by potassium nitrate desensitizer; however, the double layer technique did not adversely affect the whitening efficacy.