Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-15Bitstream added on 2014-06-13T20:04:52Z : No. of bitstreams: 1 santos_vac_dr_araca.pdf: 328430 bytes, checksum: fa7714cc673cc07b5444ab3b493c9529 (MD5) / Avaliar a expressão de SCF e FGF-2 por odontoblastos (OD) estimulados por LPS, via p42/44, p38 e PI3K no processo. OD line MDPC-23 murino células foram estimuladas com 0,1, 1, 10 e 100 μg / ml LPS por horas 1, 6 e 24. A expressão de SCF e FGF-2 no OD foi avaliada por RT-PCR. Produção de SCF no sobrenadante da cultura foi analisado por ELISA. Examinar se a expressão de SCF e FGF 2eram e produção de citocinas dependentes / ou presença de leucotrienos, as células foram pré-tratados com dexametasona (DEXA) e MK886 (MK) por 30 minutos e então estimulados com LPS (0, 1 μg / mL) para 1 hora. Para avaliar as vias de transdução de sinal, as células foram pré-tratados por 30 minutos com um inibidor específico para p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) e PI3K (wortmannin, Wort), logo depois foram estimulados com LPS (0.1μg / mL) por 1 hora. Células estimuladas por LPS após 1 hora expressar SCF em uma concentração de 0,1 μg / mL com concentrações decrescentes de 1, 10 e 100, seguidos por períodos de 6 e 24 hous. A expressão do FGF 2 em odontoblastos estimulados por LPS eram capazes de induzir concentrações 0,1 e 10 μg/mL 1 hora após. A DEXA e MK foram capazes de inibir a expressão de mRNA para SCF e FGF-2. PD, SB e Wort bloqueou a indução da expressão do SCF e FGF-2. DEXA e MK inibiu a expressão de SCF e FGF-2 através da ativação de p42 / 44, p38 e PI3K. : Os dados sugerem que SCF e FGF-2 liberados pela OD podem atuar como moduladores da resposta imune e reparação os tecidos após a inflamação, levando à produção de mediadores químicos que participam na formação de novos tecidos de celulares / Evaluate the expression of SCF and FGF-2 by odontoblasts (OD) stimulated by LPS, via p42/44 , p38 and PI3K in the process. OD line MDPC-23 murine cells were stimulated with 0.1, 1, 10 and 100 μg / mL LPS for 1, 6 and 24 hours. The expression of SCF and FGF-2 in OD was evaluated by RT-PCR. Production of SCF in the culture supernatant was analyzed by ELISA. To examine whether the expression of SCF and FGF 2eram dependent cytokine production and / or presence of leukotriene, cells were pretreated with dexamethasone (DEXA) and MK886 (MK) for 30 minutes and then stimulated with LPS (0 , 1 μg / mL) for 1 hour. To evaluate signal transduction pathways, cells were pretreated for 30 minutes with a specific inhibitor for p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) and PI3K (wortmannin, Wort), soon after were stimulated with LPS (0.1μg/mL) for 1 hour. Cells stimulated by LPS after 1 hour express SCF in a concentration of 0.1 μg / mL with decreasing concentrations of 1, 10 and 100, followed by periods of 6 and 24 hous. The expression of FGF 2 in odontoblasts stimulated by LPS were capable of inducing concentrations 0.1 and 10ug/mL 1 hour after. The DEXA and MK were able to inhibit the expression of mRNA for SCF and FGF-2 . PD, SB and Wort blocked the induction of expression of the SCF and FGF-2. DEXA and MK inhibited the expression of SCF and FGF-2 via activation of p42 / 44, p38 and PI3K. The data suggest that SCF and FGF-2 released by the OD can act as modulators of immune response and tissue repair after inflammation, leading to production of chemical mediators

Orientador: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Cristina Antoniali Silva / Banca: Carlos Ferreira dos Santos / Banca: Vanessa Soares Lara / Resumo: Avaliar a expressão de SCF e FGF-2 por odontoblastos (OD) estimulados por LPS, via p42/44, p38 e PI3K no processo. OD line MDPC-23 murino células foram estimuladas com 0,1, 1, 10 e 100 μg / ml LPS por horas 1, 6 e 24. A expressão de SCF e FGF-2 no OD foi avaliada por RT-PCR. Produção de SCF no sobrenadante da cultura foi analisado por ELISA. Examinar se a expressão de SCF e FGF 2eram e produção de citocinas dependentes / ou presença de leucotrienos, as células foram pré-tratados com dexametasona (DEXA) e MK886 (MK) por 30 minutos e então estimulados com LPS (0, 1 μg / mL) para 1 hora. Para avaliar as vias de transdução de sinal, as células foram pré-tratados por 30 minutos com um inibidor específico para p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) e PI3K (wortmannin, Wort), logo depois foram estimulados com LPS (0.1μg / mL) por 1 hora. Células estimuladas por LPS após 1 hora expressar SCF em uma concentração de 0,1 μg / mL com concentrações decrescentes de 1, 10 e 100, seguidos por períodos de 6 e 24 hous. A expressão do FGF 2 em odontoblastos estimulados por LPS eram capazes de induzir concentrações 0,1 e 10 μg/mL 1 hora após. A DEXA e MK foram capazes de inibir a expressão de mRNA para SCF e FGF-2. PD, SB e Wort bloqueou a indução da expressão do SCF e FGF-2. DEXA e MK inibiu a expressão de SCF e FGF-2 através da ativação de p42 / 44, p38 e PI3K. : Os dados sugerem que SCF e FGF-2 liberados pela OD podem atuar como moduladores da resposta imune e reparação os tecidos após a inflamação, levando à produção de mediadores químicos que participam na formação de novos tecidos de celulares / Abstract: Evaluate the expression of SCF and FGF-2 by odontoblasts (OD) stimulated by LPS, via p42/44 , p38 and PI3K in the process. OD line MDPC-23 murine cells were stimulated with 0.1, 1, 10 and 100 μg / mL LPS for 1, 6 and 24 hours. The expression of SCF and FGF-2 in OD was evaluated by RT-PCR. Production of SCF in the culture supernatant was analyzed by ELISA. To examine whether the expression of SCF and FGF 2eram dependent cytokine production and / or presence of leukotriene, cells were pretreated with dexamethasone (DEXA) and MK886 (MK) for 30 minutes and then stimulated with LPS (0 , 1 μg / mL) for 1 hour. To evaluate signal transduction pathways, cells were pretreated for 30 minutes with a specific inhibitor for p42/44 (PD98059, PD), p38 (SB203580, SB) and PI3K (wortmannin, Wort), soon after were stimulated with LPS (0.1μg/mL) for 1 hour. Cells stimulated by LPS after 1 hour express SCF in a concentration of 0.1 μg / mL with decreasing concentrations of 1, 10 and 100, followed by periods of 6 and 24 hous. The expression of FGF 2 in odontoblasts stimulated by LPS were capable of inducing concentrations 0.1 and 10ug/mL 1 hour after. The DEXA and MK were able to inhibit the expression of mRNA for SCF and FGF-2 . PD, SB and Wort blocked the induction of expression of the SCF and FGF-2. DEXA and MK inhibited the expression of SCF and FGF-2 via activation of p42 / 44, p38 and PI3K. The data suggest that SCF and FGF-2 released by the OD can act as modulators of immune response and tissue repair after inflammation, leading to production of chemical mediators / Doutor

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:10Z : No. of bitstreams: 1 000844099.pdf: 1423355 bytes, checksum: 8649e82cdb205c9cea62cc32e42d5564 (MD5) / Os processos de reparo da polpa dentária frente a procedimentos conservadores passam, em geral, pelo confronto entre possíveis microrganismos presentes na área da exposição e as células responsáveis pela diferenciação e produção de tecido mineralizado. Entretanto, a literatura ainda necessita de informações sobre o efeito direto de produtos bacterianos sobre este processo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (E. coli) sobre células progenitoras da polpa dental, utilizando-se condições basais e com mineralização préinduzida por meio osteogênico. Para isso, células progenitoras caracterizadas foram submetidas a diferentes concentrações de LPS bacteriano (com ou sem indutor da mineralização [lM]), para observação da atividade de fosfatase alcalina (ALP). A concentração mínima de 200 ng/ml, para se verificar alteração de atividade enzimática de ALP, foi usada para se observar os efeitos funcionais de mineralização (pelo alizarin vermelho - ARS), expressão das citocinas IL-1β e TNF-α, além da expressão dos genes DSPP e DMP-1. Os dados quantitativos foram analisados por ANOVA e teste de Tukey. As células em meio osteogênico com as diferentes concentrações de LPS apresentaram baixa atividade da ALP no curto prazo, comparadas às tratadas com meio α-MEM. Estas apresentaram alta atividade, comparadas ao controle. 200 ng/ml do LPS afetaram o processo de mineralização ao longo do tempo, reduzindo a ação de mineralização dos grupos que o associaram ao indutor de mineralização. Houve expressão de IL-1β e TNF-α para todos os grupos em todos os tempos, além disso, para a IL-1β, o grupo que associou os 200ng/ml de LPS com o meio indutor após 7 dias apresentou maior expressão. Houve expressão do gene DMP-1 e não expressão de DSPP e ocorreu uma maior expressão gênica nos grupos tratados com meio indutor da mineralização no gene DMP-1 . Esses achados / Dental pulp repair processes due to conservative procedures are, in general, affected by the conflicts between possible microorganisms at the area of exposure and cells responsible for differentiation and production of mineralized tissue. However, the literature still lacks information on how bacterial products affect these processes directly. The purpose of this study was to evaluate the bacterial lipopolysaccharide (E. coli LPS) effects on dental pulp progenitor cells, regarding the expression of differentiation genes and function of mineralization, using basal conditions and pre-induced mineralization by osteogenic media. Characterized progenitor cells was initially submitted to different LPS concentrations (with or without osteogenic medium [lM]), to observe alkaline phosphatase activity (ALP). The minimal concentration (200 ng/ml) to observe phosphatase enzymatic activity was used to assess the functional mineralization effects (by alizarin red staining - ARS), cytokine production (IL-1β e TNF-α), besides the gene expression for odontoblast differentiation markers (DSPP and DMP-1). Quantitative data will be statistically analyzed by ANOVA and Tukey's test. Cells in osteogenic medium with different concentrations of LPS showed low ALP activity shortterm compared to those treated with α-MEM. These showed high activity, compared to control. 200 ng/ml of LPS did affect the mineralization process over time, reducing the action of mineralization of the groups that have associated LPS with the IM. There was expression of IL-1β and TNF-α for all groups at all times, additionally, IL-1β for the group that has associated 200 ng/ml of LPS with osteogenic media after 7 days showed higher expression. There was expression of DMP-1 and DSPP genes and the expression in groups treated with IM was greater in DMP-1. These findings suggest that the inflammatory potential of LPS on the pulp progenitor cells contribute to an early mineralization ...

Orientador: Bruno Das Neves Cavalcanti / Banca: Cláudio Antonio Talge Carvalho / Banca: Aletéia Massula de Melo Fernandes / Resumo: Os processos de reparo da polpa dentária frente a procedimentos conservadores passam, em geral, pelo confronto entre possíveis microrganismos presentes na área da exposição e as células responsáveis pela diferenciação e produção de tecido mineralizado. Entretanto, a literatura ainda necessita de informações sobre o efeito direto de produtos bacterianos sobre este processo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (E. coli) sobre células progenitoras da polpa dental, utilizando-se condições basais e com mineralização préinduzida por meio osteogênico. Para isso, células progenitoras caracterizadas foram submetidas a diferentes concentrações de LPS bacteriano (com ou sem indutor da mineralização [lM]), para observação da atividade de fosfatase alcalina (ALP). A concentração mínima de 200 ng/ml, para se verificar alteração de atividade enzimática de ALP, foi usada para se observar os efeitos funcionais de mineralização (pelo alizarin vermelho - ARS), expressão das citocinas IL-1β e TNF-α, além da expressão dos genes DSPP e DMP-1. Os dados quantitativos foram analisados por ANOVA e teste de Tukey. As células em meio osteogênico com as diferentes concentrações de LPS apresentaram baixa atividade da ALP no curto prazo, comparadas às tratadas com meio α-MEM. Estas apresentaram alta atividade, comparadas ao controle. 200 ng/ml do LPS afetaram o processo de mineralização ao longo do tempo, reduzindo a ação de mineralização dos grupos que o associaram ao indutor de mineralização. Houve expressão de IL-1β e TNF-α para todos os grupos em todos os tempos, além disso, para a IL-1β, o grupo que associou os 200ng/ml de LPS com o meio indutor após 7 dias apresentou maior expressão. Houve expressão do gene DMP-1 e não expressão de DSPP e ocorreu uma maior expressão gênica nos grupos tratados com meio indutor da mineralização no gene DMP-1 . Esses achados / Abstract: Dental pulp repair processes due to conservative procedures are, in general, affected by the conflicts between possible microorganisms at the area of exposure and cells responsible for differentiation and production of mineralized tissue. However, the literature still lacks information on how bacterial products affect these processes directly. The purpose of this study was to evaluate the bacterial lipopolysaccharide (E. coli LPS) effects on dental pulp progenitor cells, regarding the expression of differentiation genes and function of mineralization, using basal conditions and pre-induced mineralization by osteogenic media. Characterized progenitor cells was initially submitted to different LPS concentrations (with or without osteogenic medium [lM]), to observe alkaline phosphatase activity (ALP). The minimal concentration (200 ng/ml) to observe phosphatase enzymatic activity was used to assess the functional mineralization effects (by alizarin red staining - ARS), cytokine production (IL-1β e TNF-α), besides the gene expression for odontoblast differentiation markers (DSPP and DMP-1). Quantitative data will be statistically analyzed by ANOVA and Tukey's test. Cells in osteogenic medium with different concentrations of LPS showed low ALP activity shortterm compared to those treated with α-MEM. These showed high activity, compared to control. 200 ng/ml of LPS did affect the mineralization process over time, reducing the action of mineralization of the groups that have associated LPS with the IM. There was expression of IL-1β and TNF-α for all groups at all times, additionally, IL-1β for the group that has associated 200 ng/ml of LPS with osteogenic media after 7 days showed higher expression. There was expression of DMP-1 and DSPP genes and the expression in groups treated with IM was greater in DMP-1. These findings suggest that the inflammatory potential of LPS on the pulp progenitor cells contribute to an early mineralization ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-25Bitstream added on 2014-06-13T19:15:18Z : No. of bitstreams: 1 turrioni_aps_me_arafo.pdf: 6913344 bytes, checksum: d860b5c16f62f7513a0953411968f01f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Pesquisas recentes demonstraram que a irradiação transdentinária da polpa pode resultar em aumento na síntese de matriz de dentina e redução na resposta inflamatória local. Entretanto, os mecanismos que regem estes processos permanecem desconhecidos. Assim, o objetivo desta pesquisa foi investigar o efeito transdentinário do LED, em três comprimentos de onda (CO: 455nm, 630nm e 850nm) e duas doses de energia (DE: 4J/cm2 e 25 J/cm2), sobre células odontoblastóides MDPC-23 cultivadas em discos de dentina (molares humanos) com 0,2 mm de espessura. Foram realizadas análises do metabolismo celular (SDH), proteína total (PT) e fosfatase alcalina (ALP), através dos ensaios de MTT, Read Northcote e Ponto Final, respectivamente. O ensaio de RT-PCR foi aplicado para avaliação da expressão dos genes que codificam para colágeno tipo I (Col-1), fibronectina (FN) e fosfatase alcalina (ALP). Além disso, foi realizada a análise da morfologia celular em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Para a produção de PT, os resultados não apontaram diferença estatisticamente significante entre os grupos irradiados e controle (Mann-Whitney, p>0,05). Entretanto, para o metabolismo celular, o grupo irradiado com LED no CO de 630 nm, na DE de 25 J/cm2, obteve melhores resultados (aumento de 21,8 %), com diferença significante quando comparado ao grupo controle (Mann-Whitney, p<0,05). Para a produção de fosfatase alcalina, houve aumento significante pra todos os parâmetros utilizados (Mann-Whitney, p<0,05), com exceção da luz azul na dose de 4 J/cm2 (Mann-Whitney, p>0,05). Na análise por RT-PCR, houve maior expressão de Col-1 para o LED infravermelho na dose de 4 J/cm2. Um maior número de células MDPC-23 com morfologia normal aderidas aos discos de dentina, semelhante ao grupo controle, foi... / Several studies have demonstrated that the transdentinal irradiation of dental pulp may increase the dentin matrix synthesis as well as decrease the local inflammatory reaction. However, the mechanisms that regulate these processes remain unknown. Therefore, the objective of this in vitro study was to investigate the transdentinal effect of LED irradiation at three different wavelengths (λ= 455, 630 and 850 nm) and two doses (4J/cm2 and 25 J/cm2) on odontoblast-like cells seeded on 0.2-mm-thick dentin disks obtained from sound human molars. Cell metabolism (MTT), alkaline phosphatase expression (ALP), total protein synthesis, and cell morphology (MEV) were evaluated. The expression of genes that encode for collagen type-1 (Col-1), fibronectin (FN) and alkaline phosphatase (ALP) was analyzed by RT-PCR. For total protein synthesis, the results showed no statistical difference among irradiated and control groups (Mann-Whitney test, p>0.05). However, for cellular metabolism, the group irradiated with 630 nm LED (dose of 25 J/cm2) showed better results (21,8% increase), with significant difference when compared to control group (Mann-Whitney test, p<0.05). For alkaline phosphatase activity, a significantly increase was observed for all parameters (Mann-Whitney test, p<0.05), except for the blue light at a dose of 4 J/cm2 (Mann-Whitney test, p>0.05). RT-PCR showed a higher expression of Col- 1 for the infrared LED at a dose of 4 J/cm2. A larger number of MDPC-23 cells with normal morphology adhered to the dentin discs was observed after irradiation with 25 J/cm2 when compared to 4 J/cm2, for all wavelengths evaluated. It may be concluded that LED irradiation was effective for transdentinal cell biostimulation and the cellular response was dose and wavelength-dependent.

Orientador: Marcelo Rocha Marques / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-19T22:02:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pessoa_JulianaIsabelitaCyrino_M.pdf: 1330572 bytes, checksum: 9bb6bbc1a1159fcdb5025fd37c60de5f (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Gelatinases são endopeptidases zinco-dependentes que formam uma das classes das metaloproteinases da matriz (MMPs). O objetivo deste estudo foi localizar, em dentina saudável de molares de ratos, onde há atividade de gelatinases por meio da técnica de zimografia in situ. Para tanto, 10 ratos Wistar com 8 semanas de idade foram sacrificados, suas hemimandíbulas foram removidas, fixadas em paraformaldeído, lavadas em PBS+glicerol e descalcificadas em EDTA+glicerol. E, seguida as peças foram lavadas em PBS+glicerol+sucrose e incluídas em Paraplast. Cortes longitudinais da região de molares foram incubados com Dq Gelatin (Invitrogen) diluído em tampão Tris/HCl/CaCl2. Com os controles, cortes foram incubados com Dq Gelatin (Invitrogen)+inibidor de MMPs ou apenas com tampão Tris/HCl/CaCl2. Após a incubação foi possível observar, por meio de microscopia de fluorescência confocal, atividade gelatinolítica em praticamente toda a dentina, inclusive nos prolongamentos dos odontoblastos. Próximo ao limite amelo-dentinário e também na pré-dentina, observou-se maior atividade gelatinolítica em relação a toda dentina analisada. Pode-se concluir que é possível detectar atividade de gelatinases em dentina de molares de ratos por meio da técnica de zimografia in situ e que tal atividade varia em diferentes regiões da dentina. Portanto, zimografia in situ pode ser útil na investigação do papel das gelatinases de dentina em eventos como :o processo de desmineralização-remineralização da dentina, a cárie dentária e a degradação da camada híbrida, formada em procedimentos restauradores adesivos / Abstract: Objective: The purpose of this study was to evaluate the gelatinases activity in decalcified rat molars crowns by in situ zymography. Methods: Five male Wistar rats were killed and their hemimandibles were fixed in paraformaldehyde, decalcified in EDTA+Glycerol solution and embedded in paraffin. Section from the region of molars teeth were incubated with DQ gelatin (Invitrogen) and observed under confocal microscopy. Results: By using in situ zymography was possible detected gelatinolytc activity in whole crown dentin. High activity of the gelatinases was observed in the odontoblastic process, dentin-enamel junction (DEJ) and predentin. Conclusions: It was possible to evidence gelatinases activity in fixed and decalcified dentin from rat molars, and it activity was not uniformly distributed over different compartments of the dentin. In situ zymography could be a tool in studies investigating the role of the gelatinases in the dentin development and degradation / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-18Bitstream added on 2014-06-13T19:22:59Z : No. of bitstreams: 1 lessa_fcr_dr_arafo.pdf: 4260399 bytes, checksum: 525a03c2dd993eddd2a9e6fcabbbc84b (MD5) / O objetivo da presente pesquisa foi avaliar o efeito citotóxico direto e transdentinário de diferentes concentrações de clorexidina (CHX), bem como sua atividade antibacteriana. Para isto, concentrações de 0,06%; 0,12%; 0,2%; 1% e 2% de CHX foram aplicadas sobre células odontoblastóides MDPC-23 em cultura (teste direto). Além disto, as concentrações de CHX também foram aplicadas sobre a superfície oclusal de discos de dentina de 0,5mm ou 0,2mm de espessura, os quais apresentavam células MDPC-23 cultivadas sobre sua superfície pulpar (teste indireto). O metabolismo e morfologia celular foram avaliados pelo teste de MTT e pela análise em MEV, respectivamente. O potencial antibacteriano da CHX foi avaliado sobre S.mutans com e sem interposição de discos de dentina. Os dados numéricos obtidos dos experimentos realizados foram submetidos à análise estatística. A redução do metabolismo celular provocado pela CHX mostrou-se dose e tempo dependentes. Foi demonstrado ainda que quanto menor a espessura do disco de dentina e maior a concentração da CHX, mais intensos são os efeitos tóxicos deste agente químico sobre as células pulpares em cultura, e mais efetiva é a atividade antibacteriana da CHX sobre S.mutans. Foi possível concluir que o intenso efeito tóxico direto observado para a CHX é notavelmente reduzido pela interposição de barreiras de dentina, cuja espessura interfere no metabolismo das células pulpares MDPC-23. Além disso, a CHX difunde através dos túbulos dentinários exercendo efeito antibacteriano contra S.mutans. / The aim of this in vitro study was to evaluate the direct and transdentinal cytotoxicity of different concentrations of chlorhexidine (CHX) and its antibacterial activity. The following concentrations of CHX: 0.06%; 0.12%; 0.2%; 1%; and 2% were applied directly on odontoblast-cell line MDPC-23 or on the occlusal surface of dentin discs (0.5mm or 0.2mm thick) which presented pulp cells seeded on their pulpal surface. Cell metabolic activity and morphology were evaluated by MTT assay and SEM, respectively. The influence of dentin thickness on the antibacterial activity of CHX against S. mutans was also assessed. The data were submitted to the statistical analysis of Mann-Whitney. Reduction in the cell metabolism from 42% to 78% was observed according to the concentration of CHX and its period of application on the cells. Therefore, the direct cytotoxicity of CHX is dose and time dependent. It was also observed that the most intense toxic effects occurred as thicker was the dentin disc and as higher was the concentration of CHX. Antibacterial activity against S. mutans was observed to the highest concentration of CHX. It was concluded that the intense cytotoxicity of all concentrations of CHX applied directly on the MDPC-23 cells is notably reduced by the presence of dentin discs interposed between this chemical agent and the cultured cells. In addition, the transdentinal diffusion of CHX causes antibacterial activity against S. mutans.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-28Bitstream added on 2014-06-13T19:22:59Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_cf_dr_arafo.pdf: 5096479 bytes, checksum: c93553f9fa019b1a3784c9a4402e4a1a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido amplamente utilizado no tratamento da hipersensibilidade dentinária. Pesquisas in vivo demonstraram que o LBI pode promover um aumento na síntese de matriz de dentina e menor grau de inflamação pulpar. Entretanto, o mecanismo que rege este processo permanece desconhecido. Assim, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o metabolismo de células odontoblastóides em cultura quando submetidas à irradiação direta ou transdentinária (indireta) com LBI e seus efeitos sobre o complexo dentino-pulpar. Células odontoblastóides MDPC-23 foram cultivadas em placas de acrílico de 24 compartimentos ou sobre a superfície pulpar de discos de dentina, com 0,4 mm de espessura e obtidos de terceiros molares, adaptados em câmaras pulpares artificiais. As células foram irradiadas diretamente por 3 vezes (a cada 24 horas) com 2, 4, 10, 15 ou 25 J/cm2 e submetidas a avaliação de metabolismo (MTT), síntese de proteína total e de fosfatase alcalina. Os dois melhores parâmetros de irradiação direta foram utilizados para o ensaio de irradiação transdentinária (indireta) das células. Como resultado da etapa direta de irradiação, foi demonstrado que tanto os valores do MTT quanto os níveis de proteína total e fosfatase alcalina apresentaram valores estatisticamente superiores nas doses de 15 e 25 J/cm2 (Mann-Whitney p<0.05). Assim, estas doses foram usadas no teste de irradiação indireta, obtendo-se aumento do metabolismo, síntese de proteína e fosfatase alcalina estatisticamente superior apenas para a dose de 25 J/cm2 (Mann-Whitney p<0.05). Desta maneira, foi possível concluir, dentro das condições experimentais, que os maiores valores de bio-estimulação das células MDPC-23 ocorreram quando estas foram irradiadas com 25 J/cm2. Para avaliação dos efeitos do LBI sobre o complexo dentinopulpar, foram confeccionadas cavidades... / Low level laser (LLL) has been widely used for treatment of dentin hypersensitivity. In vivo studies have shown increased synthesis of dentin matrix and less severe pulpal inflammation in teeth irradiated with LLL. However, the mechanisms that guide this process remain unknown. This study evaluated the metabolism of cultured odontoblastlike cells submitted to direct or transdentinal LLL irradiation as well as its effects on pulp tissue of first molars of rats. The odontoblast-like cells MDPC-23 were cultured (12,500 cells/cm2) on either 24-well acrylic plates or the pulpal surface of dentin discs adapted to artificial pulp chambers. In the first experiment, the cells received direct irradiation for 3 times (every 24 hours) with the following energy doses: 2 J/cm2, 4 J/cm2, 10 J/cm2, 15 J/cm2, and 25J/cm2. Then, the irradiated cells were evaluated concerning their metabolism, synthesis of total protein (TP) and alkaline phosphatase (ALP). The two best direct irradiation parameters obtained in this first protocol were selected to be used in the second experiment, in which the MDPC-23 cells were irradiated through 0.4mm dentin discs obtained from human teeth (indirect irradiation). For the direct assay, the MTT values as well as the TP and ALP levels were significantly higher at the doses of 15 and 25 J/cm2 (Mann-Whitney; p<0.05). When both of these energy doses were used for the indirect irradiation assay, it was observed a statistically significant increase in cell metabolism and synthesis of TP and ALP only for 25 J/cm2 (Mann-Whitney; p <0.05). Under the experimental conditions, it may be concluded that the highest biostimulation values were obtained when the MDPC-23 cells were irradiated with 25 J/cm2. For evaluation of the effects of LLL on the pulp dentin complex, class I cavities were prepared in the first superior molars of rats. After this, the cavities were immediately irradiated... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-10Bitstream added on 2014-06-13T19:43:58Z : No. of bitstreams: 1 sacono_nt_dr_arafo.pdf: 695189 bytes, checksum: 66481f0fa19f637e17a35d32612d52da (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo do estudo foi avaliar a citotoxicidade trans-amelodentinária de um gel clareador com 35% de H2O2 aplicado sobre dentes com ou sem restauração de resina composta e submetidos ou não a procedimento de envelhecimento. Cavidades preparadas em discos de esmalte/dentina obtidos de dentes bovinos íntegros foram restauradas com sistema adesivo autocondicionante e resina composta. Os discos foram armazenados em solução aquosa por 24 horas ou 6 meses e o procedimento de termociclagem foi realizado somente nos grupos armazenados por 6 meses. Os discos foram posicionados em câmaras pulpares artificiais e distribuídos em grupos: Íntegros 24 horas; Íntegros 24 horas clareados; Íntegros 6 meses; Íntegros 6 meses clareados; Restaurados 24 horas; Restaurados 24 horas clareados; Restaurados 6 meses; e Restaurados 6 meses clareados. O gel clareador foi aplicado sobre os discos por 15 minutos (1 aplicação) ou por 45 minutos (3 aplicações consecutivas de 15 minutos cada), sendo que os extratos (meio de cultura em contato com a dentina + componentes dos gel clareador que se difundiram através dos discos) foram recolhidos e aplicados por 1 hora sobre células odontoblastóides MDPC-23 em cultura (12.500 células/cm2). Para o experimento no qual o gel clareador foi aplicado somente uma vez, observouse redução significativa do metabolismo celular apenas para o grupo de dentes restaurados quando comparado ao controle (íntegros 24 horas não clareados) e ao grupo restaurado não clareado, independente do tempo de armazenamento (Tukey, p<0,05). Quando o gel clareador foi aplicado por três vezes consecutivas, houve diminuição do metabolismo celular estatisticamente significante em todos os grupos clareados (Mann-Whitney, p<0,05), sendo observadas intensas alterações morfológicas das células MDPC-23. Entretanto, não houve diferença com relação a presença de restauração e o tempo... / The aim of this in vitro study was to evaluate the trans-enamel and transdentinal cytotoxic effects of a 35% hydrogen peroxide (H2O2) bleaching gel applied on non-restored or restored teeth, submitted or not to aging by water storage and thermocycling. Enamel/dentin discs were obtained from bovine central incisors and restored or not with self-etching adhesive system and composite resin. These discs were storage in water for 24 hours or 6 months (aging). Thus, the discs were adapted individually in artificial pulp chambers and distributed according to the following treatments: non-restored teeth stored for 24 hours submitted or not to bleaching procedures; non-restored teeth stored for 6 months submitted or not to bleaching procedures; restored teeth stored for 24 hours submitted or not to bleaching procedures; and restored teeth stored for 6 months submitted or not to bleaching procedures. The bleaching gel was left in contact with the enamel surface for 15 minutes (1 application) or for 45 minutes (3 applications of 15 minutes each). The extracts (culture medium in contact to the dentin surface of the discs + bleaching agents components that diffused across the discs) were collected and applied on previously cultured MDPC-23 cells (12.500 cells/cm2) for 1 hour. Cell metabolism was evaluated by the MTT assay and cell morphology by scanning electron microscopy. One application of bleaching gel in the enamel surface of the discs caused a significant decrease in cell metabolism only in the restored discs in comparison with control discs (unbleached and non-restored discs stored for 24 hours) and unbleached restored discs, regardlles of the storage time (Tukey, p<0.05). On the other hand, bleaching agent applied for three consecutive times on enamel caused a significant decreased in cell metabolism in all bleached discs (Mann- Whitney, p<0.05). However, there were no differences between... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Denise Madalena Palomari Spolidório / Banca: Cristina Kurachi / Resumo: Na biofotônica, lasers e LEDs (light-emitting diodes) têm sido empregados na bioestimulação de células e tecidos. LED é um diodo semicondutor que, quando energizado, produz luz de espectro estreito, em forma de eletroluminescência. Experimentos in vitro utilizando LEDs com diferentes comprimentos de onda demonstraram a ocorrência de significativo estímulo no crescimento celular, efeito antiinflamatório e antimicrobiano, além do metabolismo celular aumentado. Na odontologia, a aplicação clínica de lasers e LEDs em terapias objetivando a redução da hipersensibilidade dentinária tem se mostrado efetiva, através de aparente síntese e deposição de dentina reacional. Entretanto, não há trabalhos na literatura que demonstrem o efeito do LED sobre a cultura de odontoblastos, tampouco dados científicos caracterizando a relação entre LED e redução da hipersensibilidade dentinária. Assim, o objetivo desta pesquisa foi investigar a ação do LED em 630 nm sobre o metabolismo de células de linhagem odontoblástica MDPC-23. Para isto, as células foram descongeladas, cultivadas e plaqueadas. Então, o LED foi aplicado diretamente sobre estas células, em diferentes tempos (20, 40, 80 e 240") e condições de estresse (2 ou 10% de SFB), de acordo com cada grupo experimental, por três dias consecutivos, através de um dispositivo de irradiação denominado "LEDTable". Posteriormente, foram avaliados a viabilidade celular, através do teste MTT, e a morfologia celular, por microscopia eletrônica de varredura. Os dados obtidos nos testes de MTT foram submetidos ao teste de Mann-Whitney para a comparação das concentrações de soro fetal bovino em cada dose de energia individualmente. Foi utilizado também o teste de Kruskal-Wallis para comparar as diferentes doses de energia em cada concentração de soro fetal bovino. Os dados foram analisados estatisticamente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lasers and LEDs (light-emitting diodes) have been used for biostimulation of cells and tissues. LED is a semiconductor diode which produces limited spectrum visible light. In vitro experiments using LEDs at different wavelengths have shown an enhancement of cell growth, anti-inflammatory and antibacterial effects and increased cell metabolism. In dentistry, the use of lasers and LEDs in therapies to reduce dental hypersensitivity has been proved to be clinically effective, through the synthesis and deposition of reactionary dentin. However, there are no studies that demonstrate the effect of LED therapy on odontoblast-like cells and there is no scientific data linking LED irradiation to dental hypersensitivity reduction. For this reason, the aim of this study was to investigate the effect of LED 630 nm irradiation on MDPC-23 (odontoblast-like) cells metabolism. Cells were seeded on 24-wells plates and cultured. Then the LED light was directly applied to these cells under different experimental conditions (time and % of BFS), according to each experimental group, for three following days. A device named LEDTable provided red LED irradiation. Then, cell viability (MTT Assay) and cell morphology (SEM) were evaluated. The cell viability results were first submitted to Mann-Whitney tests in order to compare the fetal bovine serum concentrations and energy dose, and then Kruskal-Wallis test was performed to compare different energy doses in every serum concentration. Data were statistically analyzed (p=0,05). Results show a biostimulation of cells kept under normal culture conditions and submitted to low LED irradiation dose (1 J/cm2). However, under nutritional stress, cells required higher energy dose to be stimulated, such as 4 J/cm2. On the other hand, a 8 J/cm2 dose did not affect the metabolism of this immortalized cell line. The SEM analysis showed a higher number of cells attached... (Complete abstract click electronic acess below) / Mestre