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A Structure-Enhancement Relationship and Mechanistic Study of Chemical Enhancers on Human Epidermal Membrane based on Maximum Enhancement Effect (Emax)Ibrahim, Sarah A. 12 April 2010 (has links)
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Assessing Corn Quality And Transformation During Nixtamalization: A Physico-Chemical ApproachLucius, Ruth A. 12 February 2009 (has links)
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Effect of Riboflavin and Lumichrome Degradation on the Oxidative Stability of Salad DressingLee, Yoon-Hee 05 November 2009 (has links)
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Reaction Synthesis of Titanium Aluminide / Titanium Diboride in-Situ CompositesJeffers, Elizabeth Ann 29 November 2006 (has links)
Reaction synthesis is a processing technique where the thermal activation energy needed to form a compound is provided by the exothermic heat of formation of the thermodynamically stable product. This type of synthesis has been used to form a variety of ceramics, intermetallics, and in-situ composites. In this work, the effects of changing the stoichiometry of the titanium aluminide matrix, and the effects of extrinsic reaction variables on the behavior of the reaction were studied and compared to theoretical predictions. It was shown that changing the stoichiometry of the titanium aluminide did have an effect on the measured heat of reaction; however this did not match the prediction. Changing the extrinsic variables of titanium and aluminum particle sizes also showed a significant effect on the behavior of the reaction. / Master of Science
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Estabilidade térmica da hemoglobina extracelular gigante de Glossoscolex paulistus (HbGp): estudos dos efeitos do pH do meio e do estado de oxidação do ferro por microcalorimetria diferencial de varredura (DSC), espectroscopia de absorção óptica e dicroísmo circular (CD) / Thermal stability of the giant extracellular hemoglobin of Glossoscolex paulistus (HbGp): studies of the effects of the mediam pH iron oxidation state by differential of scanning microcalorimetry (DSC), optical absorption and circular dichroism (CD) spectroscopiesCarvalho, José Wilson Pires 11 August 2010 (has links)
A estabilidade térmica em função do pH para três formas da hemoglobina extracelular gigante do anelídeo Glossoscolex paulistus (HbGp), monitorada atraves de DSC, CD e absorção óptica, e estudada no presente trabalho. Estes estudos possibilitaram a determinação de parâmetros importantes do processo de desnaturação e dissociação da proteína oligomerica em pH ácido, neutro e alcalino. A HbGp se mostrou mais estável no pH ácido do que em pH neutro e alcalino. No meio alcalino a HbGp sofre dissociação oligomérica gerando subunidades tais como o dodecâmero, o trímero e o monômero. Além disso, as técnicas de DSC, dicroísmo circular (CD) e absorção óptica permitiram o monitoramento da desnaturação da estrutura protéica global, da estrutura secundária e do centro ativo da HbGp, em função da temperatura. Por DSC foi determinado que o mecanismo do processo de desnaturação térmica da HbGp é irreversível. As variações de entalpia calorimétrica, ΔHcal, e de van Hoff, ΔHvH, nas formas oxi-, meta- e cianometa-HbGp são bem distintas, em todos os pHs estudados, indicando que o processo de desnaturação é bastante complexo, sugerindo que o pico de transição deve ser composto por varias transições. A ordem de estabilidade apresentada pela HbGp em termos dos valores de temperatura de transição (Tm) foi a seguinte: cianometa- > oxi- > meta- no intervalo de pH 5,0 a 8,0. Os valores de ΔHcal no pH 7,0 para a oxi-HbGp, meta-HbGp e cianometa-HbGp foram de 25 ± 4, 20 ± 2 e 56 ± 4 MJ/mol, respectivamente. Os valores de energia de ativação (Ea) obtidos no pH 7,0 para a oxi- e cianometa-HbGp foram de 673 ± 99 e 780 ± 105 KJ/mol, e no pH 8,0 de 897 ± 106 e 850 ± 201 KJ/mol, respectivamente. Esses valores de energia de ativação são condizentes com os reportados na literatura para outras hemoglobinas. Nos estudos realizados por CD a oxi-HbGp forma hemicromo no pH 6,0 e 7,0, em temperaturas superiores a 40 °C, e se dissocia em meio alcalino. A oxi-HbGp apresenta temperatura crítica (Tc) nas regiões das hélices-α e do grupo heme praticamente idêntica nos vários pHs estudados. A cianometa-HbGp possui maior quantidade de estrutura secundária do que a oxi-HbGp, e maiores valores de temperatura crítica (Tc), sendo bem mais estável que a oxi-HbGp, assim como o observado por DSC. Por absorção óptica o comportamento térmico da HbGp é similar ao do CD, sendo observado ainda, além da formação de hemicromo, a presença de espécies pentacoordenadas no pH neutro e alcalino. / The thermal stability as a function of the pH, for three forms of the extracellular giant hemoglobin of the annelid Glossoscolex paulistus (HbGp) was monitored by DSC, CD and optical absorption in the present work. These studies allowed the determination of important parameters characterizing the denaturation and dissociation at acid, neutral and alkaline pH values. HbGp was shown to be more stable in acid pH as compared to neutral and alkaline pH values. In alkaline medium, HbGp presents oligomeric dissociation generating smaller subunits such as the dodecamer, the trimer and the monomer. Besides that, the techniques of the DSC, circular dichroism (CD) and optical absorption spectroscopy allowed to monitor, respectively, the denaturation of the global protein structure, of the secondary structure and of the active center of the hemoglobin, as a function of the temperature. By DSC it was determined that the mechanism of the thermal denaturation of the HbGp is irreversible. The variations of calorimetric and van Hoff enthalpies, in the oxy- and cyanomet-HbGp forms, are quite different, for all studied pH values, indicating that the process of denaturation is complex, characterized by a transition peak composed by several contributions. The order of stability presented by the HbGp in terms of the transition temperature values (Tm) was the following: cyanomet-> oxy- for pH from 5.0 to 8.0. The values of ΔHcal at pH 7.0 for the oxy-HbGp, met-HbGp and cianomet-HbGp were 25 ± 4, 20 ± 2 and 56 ± 4 MJ/mol, respectively. The activation energy values (Ea) obtained at pH 7.0 for the oxy- and cyanomet-HbGp were 673 ± 99 and 780 ± 105 KJ/mol, and at pH 8.0 they were 897 ± 106 and 850 ± 201 KJ/mol, respectively. Those energy values are consistent with data reported in the literature for other hemoglobins. In the studies carried out by CD for oxy-HbGp formation of hemichrome was observed at pH 6.0 and 7.0, at temperatures above 40 °C. In alkaline medium the oligomeric dissociation is observed. Oxy-HbGp presents critical temperatures (Tc), which are practically identical in the spectral regions of the polypeptide and of the heme groups for all studied pH values. The cyanomet-HbGp own larger quantity of secondary structure than oxy-HbGp, and higher values of critical temperatures (Tc), being more stable than oxy-HbGp, in agreemente with DSC data. Optical absorption spectroscopy shows thermal behavior of HbGp similar to that observed by CD. Besides the formation of the hemichrome species upon heating, the presence of penta-coordinate species at neutral and alkaline pH values was observed.
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Obtenção de micropartículas contendo dispersões sólidas de praziquantel por secagem por nebulização e estudo de sua estabilidade / Obtaining of microparticles containing solid dispersions of praziquantel by spray dryer and study its stabilityPignata, Marcela Olaia Machado 23 June 2016 (has links)
O objetivo deste trabalho foi obter dispersões sólidas microparticuladas contendo praziquantel a fim de aumentar sua solubilidade em água e consequentemente melhorar sua biodisponibilidade in vivo e estudar sua estabilidade acelerada. Foram preparadas 4 misturas físicas em proporções diferentes de PZQ e carreador e 8 dispersões sólidas microparticuladas foram obtidas por spray dryer. Para controle também foi seco em spray dryer o PZQ puro nas mesmas temperaturas do estudo das dispersões. Foi realizada a caracterização dessas amostras por DSC, Raios-x, Infravermelho e MEV. O aumento de solubilidade das misturas físicas não foi significante em relação ao PZQ puro, no entanto as DSM obtidas na temperatura de 70ºC foi significante, com p<=0,05, e chegaram a ser até 3 vezes maiores. O estudo de dissolução mostrou que ao final de 60 minutos de teste a dispersão sólida estudada obteve um desempenho 6x melhor que o PZQ puro. O MEV mostrou que as partículas ficaram esféricas, de superfície r?gosa, e a eficiência de encapsulação variou de 90 a 100%. Um estudo preliminar de estabilidade das amostras mostrou um aumento na solubilidade em relação ao tempo. Sendo assim algumas amostras foram escolhidas para recomeçar o estudo, fazendo um estudo de estabilidade acelerada mais aprofundado avaliando estabilidade quiral do fármaco, perfil de solubilidade, DSC, Raios-X e Infravermelho. Ao avaliar os dados dessa estabilidade acelerada percebemos que esse aumento de solubilidade com o tempo foi ocasionado por uma redução na cristalinidade do fármaco, também com o tempo. Observou-se nos dados de DSC o surgimento de um pico característico de transição vítrea para as DSMs 8, 10, 12 e PZQsd, e essa alteração na transição vítrea possivelmente levou a uma diminuição na mobilidade molecular do sistema dificultando o rearranjamento molecular do fármaco e assim sua recristalização. Foram realizados testes in vitro e in vivo de eficácia e os resultados mostraram que a dispersão sólida estudada teve excelente eficácia comparada ao PZQ puro. Podemos concluir, portanto, que a técnica escolhida nesse estudo atendeu aos objetivos propostos e foi eficaz no aumento de solubilidade e na eficácia para o tratamento da esquistossomose e que o estudo de estabilidade é de fato importante para dispersões sólidas / The aim of this study was to produce microparticulated solid dispersions of praziquantel in order to increase its solubility in water and thus improve its bioavailability in vivo. Were prepared 4 physical mixtures in different proportions of carrier and 8 solid dispersion microparticles was obtained by spray drying. To control was also dried by spray drying pure PZQ the same temperatures the study of dispersions. The characterization of these samples was performed by DSC, X-rays, infrared and SEM. The increased solubility of the physical mixtures was not significant compared to pure PZQ, but for the samples dried at 70°C was significant compared to pure PZQ and 3folder than PZQ. The dissolution study has shown that the end of the 60minutes test solid dispersion released about 90% dr?g, while releasing pure PZQ for the same time the study was about 15%. The SEM showed that the particles were spherical, and shown a \"sponge-like\" surface. The encapsulation efficiency varied from 90 to 100%. A preliminary study of the stability samples showed an increase in solubility over time. For this reason some samples were chosen for the recommence study, making a further study of accelerated stability evaluating chiral dr?g stability, solubility profile, DSC, X-rays, infrared. When considering data that accelerated stability realized that this increase in solubility with time was caused by a decrease in dr?g crystallinity, also in time. It was observed in the DSC data the appearance of a characteristic peak of glass transition for the samples 8, 10, 12 and PZQsd, and the change in glass transition possibly led to a decrease in the molecular mobility system avoiding molecular dr?g rearrangement and thus its recrystallization. in vitro in vivo efficacy tests were carried out and the results showed that the solid dispersion studied had excellent efficacy compared to pure PZQ. Than it can be concluded that the technique chosen in this study met the proposed objectives and was effective in increasing solubility and efficacy for the treatment of schistosomiasis
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Avalia??o da estabilidade t?rmica e oxidativa do biodiesel de algod?o e do efeito da adi??o de antioxidantes (α-tocoferol e BHT)Gondim, Amanda Duarte 20 March 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-03-20 / Petr?leo Brasileiro SA - PETROBRAS / This work aims to study the effects of adding antioxidants, such as, α- tocopherol and BHT on the thermal and oxidative stability of biodiesel from cottonseed (B100). The Biodiesel was obtained through the methylical and ethylical routes. The main physical and chemical properties of cotton seed oil and the B100 were determined and characterized by FTIR and GC. The study of the efficiency of antioxidants, mentioned above, in concentrations of 200, 500, 1000, 1500, 2000ppm, to thermal and oxidative stability, was achieved by Thermogravimetry (TG), Differential Thermal Analysis (DTA), Differential Scanning
Calorimetry (DSC), Differential Scanning Calorimetry - Hi-Pressure (P-DSC) and Rancimat. The Biodiesel obtained are within the specifications laid down by Resolution of ANP No7/2008. The results of TG curves show that the addition of
both antioxidants, even in the lowest concentration, increases the thermal stability of Biodieseis. Through the DTA and DSC it was possible to study the physical and chemical transitions occurred in the process of volatilization and decomposition of
the material under study. The initial time (OT) and temperature (Tp) of oxidation were determined through the P-DSC curve and they showed that the α-tocopherol has a pro-oxidant behavior for some high concentrations. The BHT showed better results than the α-tocopherol, with regard to the resistance to oxidation / Este trabalho tem como objetivo estudar o efeito da adi??o de agentes antioxidantes, tais como o α-tocoferol e BHT sobre a estabilidade t?rmica e oxidativa do biodiesel de algod?o (B100), obtido pelas rotas met?licas e et?licas. Foram determinadas as principais propriedades f?sico-qu?micas do ?leo de algod?o e do B100, al?m das caracteriza??es atrav?s de Espectroscopia de
Absor??o na Regi?o de Infravermelho (FTIR) e Cromatografia Gasosa (CG). O estudo da efici?ncia dos antioxidantes adicionados, nas concentra??es de 200, 500, 1000, 1500 e 2000 ppm, para as estabilidades t?rmicas e oxidativa, foi
realizado atrav?s da Termogravimetria (TG), An?lise T?rmica Diferencial (DTA), Calorimetria Explorat?ria Diferencial (DSC), Calorimetria Explorat?ria Diferencial sob Press?o (P-DSC) e Rancimat. As amostras de biodiesel apresentaram-se dentro das especifica??es estabelecidas pela Resolu??o da ANP No 7/2008. A adi??o de ambos os antioxidantes, mesmo em baixa concentra??o (200 ppm), aumentou a estabilidade t?rmica dos B100. Atrav?s das curvas DTA e DSC, foram estudadas as transi??es f?sico-qu?micas ocorridas no biodiesel. O tempo inicial (OIT) e temperatura (Tp) de oxida??o, determinados atrav?s das curvas P-DSC, mostraram que o α-tocoferol tem comportamento pr?-oxidante para algumas concentra??es elevadas. O BHT apresentou melhor resultado do que o α-tocoferol, com rela??o ? resist?ncia ? oxida??o
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Estudo da influ?ncia do biodiesel de mamona como aditivo antioxidante para o biodiesel de girassol e sojaSilva, Hellyda Katharine Tomaz de Andrade 11 March 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-03-11 / Biodiesel is a fuel made up by mono-alkyl-esters of long chain fatty acids, derived from
vegetable oils or animal fat. This fuel can be used in compression ignition engines for
automotive propulsion or energy generation, as a partial or total substitute of fossil
diesel fuel. Biodiesel can be processed from different mechanisms. Transesterification is
the most common process for obtaining biodiesel, in which an ester compound reacts
with an alcohol to form a new ester and a new alcohol. These reactions are normally
catalyzed by the addition of an acid or a base. Initially sunflower, castor and soybean oil
physicochemical properties are determined according to standard test methods, to
evaluate if they had favorable conditions for use as raw material in the
transesterification reaction. Sunflower, castor and soybean biodiesel were obtained by
the methylic transesterification route in the presence of KOH and presented a yield
above 93% m/m. The sunflower/castor and soybean/castor blends were studied with the
aim of evaluating the thermal and oxidative stability of the biofuels. The biodiesel and
blends were characterized by acid value, iodine value, density, flash point, sulfur
content, and content of methanol and esters by gas chromatography (GC). Also studies
of thermal and oxidative stability by Thermogravimetry (TG), Differential Scanning
Calorimetry High Pressure (P-DSC) and dynamic method exothermic and Rancimat
were carried out. Biodiesel sunflower and soybean are presented according to the
specifications established by the Resolution ANP no 7/2008. Biodiesel from castor oil,
as expected, showed a high density and kinematic viscosity. For the blends studied, the
concentration of castor biodiesel to increased the density, kinematic viscosity and flash
point. The addition of castor biodiesel as antioxidant in sunflower and soybean
biodiesels is promising, for a significant improvement in resistance to autoxidation and
therefore on its oxidative stability. The blends showed that compliance with the
requirements of the ANP have been included in the range of 20-40%. This form may be
used as a partial substitute of fossil diesel / Biodiesel ? um combust?vel constitu?do por mono-alquil-?steres de ?cidos graxos de
cadeias longas, derivado de ?leos vegetais ou gordura animal. Este combust?vel pode
ser utilizado em motores de igni??o por compress?o para a propuls?o de ve?culos
autom?veis ou gera??o de energia, como um substituto parcial ou total de diesel f?ssil
combust?vel. O biodiesel pode ser processado a partir de diferentes mecanismos. A
transesterifica??o ? o processo mais comum para obten??o do biodiesel, em que um
?ster reage com um ?lcool para formar outro ?ster e um novo ?lcool. Essas rea??es s?o
normalmente catalisadas pela adi??o de um ?cido ou uma base. Inicialmente, foram
determinadas as propriedades f?sico-qu?micas dos ?leos de girassol, mamona e soja de
acordo com as especifica??es de metodologias de teste padronizadas, com o intuito de
avaliar se os mesmos possu?am condi??es favor?veis para serem utilizados como
mat?ria-prima na rea??o de transesterifica??o. O biodiesel desses ?leos foi obtido
atrav?s da rea??o de transesterifica??o pela rota met?lica, fazendo uso de KOH no
preparo do catalisador (met?xido de pot?ssio). O rendimento das rea??es de
transesterifica??o foi acima de 93% m/m. Os biocombust?veis e as blends foram
caracterizados pelos ?ndices de acidez e iodo, ponto de fulgor, pela massa espec?fica,
pelos teores de enxofre, metanol e ?steres. As estabilidades t?rmica e oxidativa foram
avaliadas atrav?s da Termogravimetria (TG), da Calorimetria Explorat?ria Diferencial
sob Press?o (P-DSC) pelos m?todos din?mico e isot?rmico, e do Rancimat. As amostras
de biodiesel de girassol e soja apresentaram conformidade com as especifica??es
estabelecidas pela Resolu??o ANP no 7/2008. O biodiesel de mamona, como esperado,
apresentou elevadas massa espec?fica e viscosidade cinem?tica. A adi??o do biodiesel
de mamona como antioxidante ao biodiesel de girassol e de soja ? promissora, pois
promoveu uma melhora significativa na resist?ncia ? auto-oxida??o e, por conseguinte,
na estabilidade oxidativa de ambos. Para as blends estudadas, o aumento da
concentra??o de biodiesel de mamona contribuiu para um aumento da massa espec?fica,
viscosidade cinem?tica e ponto de fulgor. As blends que apresentaram conformidade ?s
exig?ncias da ANP foram ?quelas compreendidas na faixa de 20-40% de biodiesel de
mamona adicionado, o que as tornam candidatas ? substituta do diesel f?ssil
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Cinética da cristalização não isotérmica de poli(3- hidroxibutirato) em compósitos com fibra de babaçuARRUDA, Salim Abdelnor 26 February 2016 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-28T15:26:06Z
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DISSERTAÇÃO BIB CENTRAL SALIM ARRUDA.pdf: 4318932 bytes, checksum: a6d753eb3af831ca1aa8c18f6f631669 (MD5)
Previous issue date: 2016-02-26 / PRH-L8 Petrobrás / O acúmulo de resíduos plásticos em aterros sanitários, rios e ilhas, além da contaminação da
fauna e da flora com esses dejetos, acarretou uma pesquisa intensa em materiais biodegradáveis
que possam substituir os tradicionais materiais sintéticos advindos do petróleo. Os polímeros
biodegradáveis são uma opção que vem sendo constantemente estudada e que pode, em um
futuro próximo, competir com os polímeros a base de petróleo. O Poli (3-hidroxibutirato)
(PHB) é um polímero produzido por bactérias que utilizam a sacarose da cana de açúcar ou do
milho como fonte de alimento. O PHB possui características interessantes como
biodegradabilidade, sustentabilidade, plasticidade e sua durabilidade. Porém, ele possui um
maior custo, além de ser duro e quebradiço e termicamente instável durante o processamento.
Portanto, torna-se necessário o estudo da cristalização do PHB atrelado a fibras de babaçu, com
o intuito de diminuir o custo do compósito, além de buscar melhorias nas propriedades térmicas,
como cristalinidade relativa, taxa de cristalização, temperatura do pico de cristalização, entre
outras variáveis. Neste trabalho foram estudados os parâmetros de cristalização a partir do
fundido para o sistema PHB/20% fibra de babaçu conduzidos a diferentes taxas de resfriamento
(2, 3, 4, 6, 8, 12, 16 e 24 °C/min) e fluxo de nitrogênio a 50 mL/min e, posteriormente, esses
parâmetros de cristalização, como a granulometria, tempo de processamento e diferentes partes
do babaçu, foram comparados para as diferentes taxas de resfriamento. Uma segunda análise
foi realizada para os parâmetros de cristalização a frio conduzidos a diferentes taxas de
aquecimento. A partir do tratamento de dados obtidos para os parâmetros de cristalização a
partir do fundido, realizou-se a modelagem cinética para os modelos de Pseudo-Avrami, Ozawa
e Mo. Entre as modelagens, o modelo de Pseudo-Avrami apresentou a melhor correlação com
os dados experimentais com erro relativo de aproximadamente 5%. O modelo de Ozawa
apresentou um erro em torno de 8% e Mo aproximadamente 10%. A análise da energia de
ativação foi realizada a partir do Método Isoconversional de Friedman, obtendo energias de
ativação negativas, indicativo que há reações complexas na cristalização a partir do fundido
para o sistema PHB/20% fibra de babaçu. / The accumulation of plastic waste in landfills, rivers and islands, as well as the contamination
of fauna and flora with these wastes, led to intensive research into biodegradable materials that
can replace traditional synthetic materials. Biodegradable polymers are an option that has been
constantly studied and that may, in the near future, compete with petroleum-based polymers.
Poly (3-hydroxybutyrate) (PHB) is a polymer produced by bacteria that use sucrose from sugar
cane or corn as a food source. PHB has interesting features such as biodegradability,
sustainability, plasticity and durability. However, it has a high cost, in addition to being hard
and brittle and thermally unstable during processing. Therefore, it was found convenient to
study the crystallization of PHB/20% babassu compounds, with the intention of reducing the
cost of the composite, in addition to seeking improvements in thermal properties such as relative
crystallinity, crystallization rate, peak crystallization temperature, etc. In this work, the
parameters of melt crystallization were studied for PHB/20% babassu compounds driven at
different cooling rates (2, 3, 4, 6, 8, 12, 16 and 24°C/min) under a nitrogen flow of 50 ml/min.
Subsequently, crystallization parameters determined in compounds prepared with different
filler particle size, processing times, and different parts of babassu, were compared for different
cooling rates. A second analysis was performed for the parameters of cold crystallization
conducted at different heating rates. A kinetic analysis of data obtained for melt crystallization,
using Pseudo-Avrami, Ozawa, and Mo models was performed. Among the models studied,
Pseudo-Avrami showed the best correlation with experimental data, with relative error about
5%. The Ozawa model presented a discrepancy around 8% and Mo approximately 10%. The
activation energy was estimated using the isoconversional Friedman method, obtaining
negative activation energies, which suggests that there are complex reactions involved in the
crystallization from the melt in the system PHB/20% babassu.
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Estabilidade térmica da hemoglobina extracelular gigante de Glossoscolex paulistus (HbGp): estudos dos efeitos do pH do meio e do estado de oxidação do ferro por microcalorimetria diferencial de varredura (DSC), espectroscopia de absorção óptica e dicroísmo circular (CD) / Thermal stability of the giant extracellular hemoglobin of Glossoscolex paulistus (HbGp): studies of the effects of the mediam pH iron oxidation state by differential of scanning microcalorimetry (DSC), optical absorption and circular dichroism (CD) spectroscopiesJosé Wilson Pires Carvalho 11 August 2010 (has links)
A estabilidade térmica em função do pH para três formas da hemoglobina extracelular gigante do anelídeo Glossoscolex paulistus (HbGp), monitorada atraves de DSC, CD e absorção óptica, e estudada no presente trabalho. Estes estudos possibilitaram a determinação de parâmetros importantes do processo de desnaturação e dissociação da proteína oligomerica em pH ácido, neutro e alcalino. A HbGp se mostrou mais estável no pH ácido do que em pH neutro e alcalino. No meio alcalino a HbGp sofre dissociação oligomérica gerando subunidades tais como o dodecâmero, o trímero e o monômero. Além disso, as técnicas de DSC, dicroísmo circular (CD) e absorção óptica permitiram o monitoramento da desnaturação da estrutura protéica global, da estrutura secundária e do centro ativo da HbGp, em função da temperatura. Por DSC foi determinado que o mecanismo do processo de desnaturação térmica da HbGp é irreversível. As variações de entalpia calorimétrica, ΔHcal, e de van Hoff, ΔHvH, nas formas oxi-, meta- e cianometa-HbGp são bem distintas, em todos os pHs estudados, indicando que o processo de desnaturação é bastante complexo, sugerindo que o pico de transição deve ser composto por varias transições. A ordem de estabilidade apresentada pela HbGp em termos dos valores de temperatura de transição (Tm) foi a seguinte: cianometa- > oxi- > meta- no intervalo de pH 5,0 a 8,0. Os valores de ΔHcal no pH 7,0 para a oxi-HbGp, meta-HbGp e cianometa-HbGp foram de 25 ± 4, 20 ± 2 e 56 ± 4 MJ/mol, respectivamente. Os valores de energia de ativação (Ea) obtidos no pH 7,0 para a oxi- e cianometa-HbGp foram de 673 ± 99 e 780 ± 105 KJ/mol, e no pH 8,0 de 897 ± 106 e 850 ± 201 KJ/mol, respectivamente. Esses valores de energia de ativação são condizentes com os reportados na literatura para outras hemoglobinas. Nos estudos realizados por CD a oxi-HbGp forma hemicromo no pH 6,0 e 7,0, em temperaturas superiores a 40 °C, e se dissocia em meio alcalino. A oxi-HbGp apresenta temperatura crítica (Tc) nas regiões das hélices-α e do grupo heme praticamente idêntica nos vários pHs estudados. A cianometa-HbGp possui maior quantidade de estrutura secundária do que a oxi-HbGp, e maiores valores de temperatura crítica (Tc), sendo bem mais estável que a oxi-HbGp, assim como o observado por DSC. Por absorção óptica o comportamento térmico da HbGp é similar ao do CD, sendo observado ainda, além da formação de hemicromo, a presença de espécies pentacoordenadas no pH neutro e alcalino. / The thermal stability as a function of the pH, for three forms of the extracellular giant hemoglobin of the annelid Glossoscolex paulistus (HbGp) was monitored by DSC, CD and optical absorption in the present work. These studies allowed the determination of important parameters characterizing the denaturation and dissociation at acid, neutral and alkaline pH values. HbGp was shown to be more stable in acid pH as compared to neutral and alkaline pH values. In alkaline medium, HbGp presents oligomeric dissociation generating smaller subunits such as the dodecamer, the trimer and the monomer. Besides that, the techniques of the DSC, circular dichroism (CD) and optical absorption spectroscopy allowed to monitor, respectively, the denaturation of the global protein structure, of the secondary structure and of the active center of the hemoglobin, as a function of the temperature. By DSC it was determined that the mechanism of the thermal denaturation of the HbGp is irreversible. The variations of calorimetric and van Hoff enthalpies, in the oxy- and cyanomet-HbGp forms, are quite different, for all studied pH values, indicating that the process of denaturation is complex, characterized by a transition peak composed by several contributions. The order of stability presented by the HbGp in terms of the transition temperature values (Tm) was the following: cyanomet-> oxy- for pH from 5.0 to 8.0. The values of ΔHcal at pH 7.0 for the oxy-HbGp, met-HbGp and cianomet-HbGp were 25 ± 4, 20 ± 2 and 56 ± 4 MJ/mol, respectively. The activation energy values (Ea) obtained at pH 7.0 for the oxy- and cyanomet-HbGp were 673 ± 99 and 780 ± 105 KJ/mol, and at pH 8.0 they were 897 ± 106 and 850 ± 201 KJ/mol, respectively. Those energy values are consistent with data reported in the literature for other hemoglobins. In the studies carried out by CD for oxy-HbGp formation of hemichrome was observed at pH 6.0 and 7.0, at temperatures above 40 °C. In alkaline medium the oligomeric dissociation is observed. Oxy-HbGp presents critical temperatures (Tc), which are practically identical in the spectral regions of the polypeptide and of the heme groups for all studied pH values. The cyanomet-HbGp own larger quantity of secondary structure than oxy-HbGp, and higher values of critical temperatures (Tc), being more stable than oxy-HbGp, in agreemente with DSC data. Optical absorption spectroscopy shows thermal behavior of HbGp similar to that observed by CD. Besides the formation of the hemichrome species upon heating, the presence of penta-coordinate species at neutral and alkaline pH values was observed.
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