Orientador: Iêda Maria Begnini. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

Orientador: Ricardo Andrade Rebelo. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

Orientador: Mirtes Costa / Banca: Theresa Christina Monteiro de Lima / Banca: Ricardo Luiz Nunes de Souza / Banca: Silvia Mitiko Nishida / Banca: Luiz claudio Di Stasi / Resumo: A depressão e a ansiedade representam algumas das mais comuns e proliferativas desordens mentais no mundo. Tradicionalmente se postula que ansiedade e depressão são desordens separadas e distintas. Entretanto, muitos estudos clínicos têm demonstrado uma grande sobreposição entre esses dois estados. Atualmente, a maioria dos transtornos de ansiedade é tratada com drogas que interferem, de modo mais ou menos seletivo, com a neurotransmissão gabaérgica, serotonérgica e/ou noradrenérgica. A depressão, por sua vez, tem seu tratamento fundamentado no aumento da disponibilidade de serotonina e/ou noradrenalina. As drogas disponíveis na clínica não são capazes de controlar estas desordens em boa parte dos pacientes e possuem efeitos colaterais importantes. Dessa forma, os múltiplos efeitos adversos das drogas disponíveis, e a sua eficácia limitada em uma considerável proporção de pacientes, justificam os esforços no sentido de se encontrar novas substâncias com potencial atividade no tratamento destas desordens. As espécies vegetais Cymbopogon citratus e Citrus aurantium apresentam este potencial, pois são utilizadas na medicina popular como calmante e sedativa. Resultados prévios demonstraram a presença de atividade ansiolítica no óleo essencial (OE) obtido de ambas as espécies. No presente trabalho o OE de C. citratus apresentou atividade ansiolítica resultante da interação com o complexo receptor GABA-benzodiazepínico na dose de 10 mg/kg após tratamento agudo (v.o.). Além disso, o tratamento concomitante com doses não efetivas de diazepam e OE demonstrou efeito sinérgico entre as duas preparações. Por sua vez, o OE de C. aurantium apresentou atividade ansiolítica na dose de 5 mg/kg (v.o.) mediada pelos receptores serotonérgicos do tipo 5-HT1A... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Depression and anxiety represent two of the most common and proliferating mental disorders in the world. Traditionally, anxiety and depression disorders have been considered separate and distinct. However, many clinical studies have shown a significant comorbidity between these two states. Currently, most anxiety disorders are treated with drugs that interfere, more or less selectively, with GABAergic, serotonergic and/or noradrenergic neurotransmission. The treatment of depression, on the other hand, has been based on the increased availability of serotonin and/or norepinephrine. The drugs available in a clinic are not able to control these disorders in many patients and also have significant side effects. Thus, based on the multiple adverse effects of available drugs and their limited efficacy in a considerable proportion of patients, significant efforts are justified for finding new substances that could potentially treat these disorders, particularly, the plant species Cymbopogon citratus and Citrus aurantium because they are used in folk medicine as tranquilizers and sedatives. Previous results demonstrated the presence of anxiolytic-like activity in the essential oil (EO) obtained from both species. In this work, the C. citratus EO showed anxiolytic-like activity resulting from interaction with the GABA-benzodiazepine receptor complex at a dose of 10 mg/kg after acute oral treatment. Moreover, concomitant treatment with ineffective doses of diazepam and EO showed a synergistic effect between the two preparations. In turn, the C. aurantium EO showed anxiolytic-like activity at a dose of 5 mg/kg (p.o.) mediated by serotonin receptors of 5-HT1A type, and, after 14 days of treatment, the EO showed anxiolytic-like effects at a dose of 1 mg/kg/day. Neurochemical changes were not detected in the cortex, striatum... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Estágio realizado na empresa CETRIB e orientado pelo Eng.º Luís Magalhães / Tese de mestrado integrado. Engenharia Mecânica. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2010

Estágio realizado na Actua Software / Tese de mestrado integrado. Engenharia Informátca e Computação. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2008

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-28Bitstream added on 2014-06-13T20:50:23Z : No. of bitstreams: 1 luzia_dmm_me_sjrp.pdf: 505775 bytes, checksum: 81c90e542310e5bb315511eae347d9b5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho teve como principais objetivos avaliar o comportamento do óleo de soja adicionado de extratos de sementes de limão, em diferentes concentrações, por meio da estabilidade oxidativa e medir a atividade antioxidante através do método do radical livre 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH) e compostos fenólicos totais. A concentração de 2.400 mg/kg para o extrato de sementes de limão, variedade galego, foi a que conferiu melhor estabilidade oxidativa ao óleo de soja. As atividades antioxidantes máximas e os valores da concentração suficiente para obter 50% do efeito máximo, estimado em 100% (EC50), determinados pelo método DPPH para o extrato e ácido gálico foram 70,58%, 69,94 mg/mL e 75,07%, 64,73 mg/mL, respectivamente. A concentração de compostos fenólicos totais, determinada pelo método de Folin-Ciocalteu, foi de 76 mg EAG/g. Foi possível concluir, que o extrato de sementes de limão galego possui ação antioxidante natural, podendo ser aplicado em alimentos. 3DODYUDV FKDYH antioxidante natural; compostos fenólicos totais; estabilidade. / Not available.

Orientador: Lin Chau Ming / Resumo: A comercialização de plantas condimentares, medicinais e aromáticas tem se expandido muito nos últimos anos, principalmente, no mercado externo. Constata-se uma grande carência de informações sobre essas plantas, desde a área botânica até a área agronômica. Entre essas plantas, destaca-se a erva cidreira (Lippia alba (Mill.) N. E. Br.), uma planta medicinal brasileira, reconhecida por sua atividade calmante e antiespasmódica. Foi conduzido um experimento na Fazenda Experimental de São Manuel (UNESP - Botucatu), com delineamento experimental em blocos ao acaso, com parcelas subdivididas no tempo. As parcelas constituíram-se de 4 níveis de sombreamento (0, 30, 50 e 70%) e as subparcelas de 4 épocas de colheita (out/97, jan/98, abr/98, jul/98), com 4 blocos. Foram avaliadas as características de produção de folhas e de óleo essencial, a composição do óleo essencial e as características anatômicas quantitativas da região do limbo e da nervura principal da folha. Para a análise estatística, foram utilizados os métodos multivariados de Análise de Componentes Principais e de Análise de Agrupamento ou a Análise de Variância com teste de comparação de médias. Para todos os conjuntos de variáveis analisadas neste experimento, houve interação dos níveis de sombreamento com as épocas de colheita, porém, algumas tendências foram observadas. Os dados de produção de folhas e de óleo essencial indicaram melhor adaptação da planta a condições de alta intensidade luminosa. A determinação das condições de cultivo mais adequadas para a extração de óleo essencial em L. alba depende do interesse no rendimento ou na qualidade do óleo. Dos 9 compostos mais abundantes no óleo, o neral, o geranial, o óxido de cariofileno, o linalol e o tcariofileno apresentaram alta correlação com os níveis de sombreamento e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The market of spice, medicinal and aromatic plants has been increased in last years, especially in exterior market. There is a big lack on information about these plants, since botany until agronomic areas. Among these plants, it is emphasized Lippia alba (Mill.) N. E. Br., a brazilian medicinal plant, recognized by its calmativy and antispasmodic activity. The essay was carried out in São Manuel Experimental Farm (UNESP- Botucatu), with randomized blocks design using split plot in time. The plots were composed by 4 shade levels (0, 30, 50 and 70%) and split plot were composed by 4 harvest times (Oct/97, Jan/98, Apr/98, Jul/98), with 4 replications. The evaluated characteristics were leaves and essential oil yield, essential oil composition, and quantitative anatomy features of midrib and leaf blade. Multivariated methods of principal components and clustering analysis or analysis of variance were used. There was interaction between shade levels and harvest times, although, some trends were observed. The leaves and essential oil yield data suggested a better plant adaptation on full sunlight conditions. The determination of the better cultivation conditions for L. alba essential oil production depends on the interesting on essential oil yield or quality. Among the more abundant essential oil constituents, neral, geranial, caryophyllene oxide, linalool and tcaryophyllene showed high correlation with shade levels and harvest times. On anatomy features, L. alba exposed great leaf plasticity among the shade levels and harvest times arrangements. Leaf blade and midrib cross-section area, leaf blade upper and lower epidermis, palisade parenchyma, palisade parenchyma cells length and bundle sheath extension percentage, and midrib colourless parenchyma percentage were the characteristics with greater correlation among the treatments. Number of stomata and secretory trichomes on the lower side of the leaf decreased with the shading. / Doutor

Orientador: Alcides Lopes Leão / Banca: Felipe Korbus Sutili / Banca: Derva dos Santos Rosa / Resumo: Os polihidroxialcanoatos (PHAs) são uma família de biopolímeros biodegradáveis, que podem substituir os plásticos petroquímicos em muitas aplicações, principalmente embalagens e utensílios domésticos. Contudo, estes bioplásticos são atualmente mais caros do que os de origem petroquímica. É possível encontrar vários estudos na literatura que investigam o uso de resíduos e substratos mais baratos, com o intuito de permitir a produção em grande escala do PHA. Os óleos vegetais são largamente utilizados na preparação de alimentos, na maioria das vezes no processo de fritura, o que acarreta grandes quantidades de resíduo, muitas vezes descartados incorretamente, trazendo prejuízo ao meio ambiente e à população. Sob esta consideração, os resíduos de óleo de fritura são abundantes e podem ser utilizados na produção de PHA sem qualquer tratamento adicional. Portanto, este trabalho analisou a produção de polihidroxialcanoatos (PHA) a partir de duas linhagens de bactérias, Pseudomonas oleovorans e Bacillus megaterium, utilizando-se óleos residuais de frituras como fonte de carbono (óleo residual de fritura de batata, frango e pastel) e foram utilizados nas concentrações de 10 g.l-1 e 20 g.l-1, separadamente. Os ensaios de produção do biopolímero foram realizados em frascos agitados, em meio de cultura limitante em nitrogênio. A massa seca celular (MSC) foi determinada por gravimetria e a porcentagem de acúmulo e a composição do PHA foram determinados por cromatografia gasosa. A melhor ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Polyhydroxyalkanoates (PHAs) are a family of biodegradable biopolymers that can replace petrochemical plastics in many applications, especially packaging and household appliances. However, these bioplastics are currently more expensive than those of petrochemical origin. It is possible to find several studies in the literature that investigate the use of residues and cheaper substrates, in order to allow large scale production of the PHA. Vegetable oils are widely used in food preparation, most often in the frying process, which leads to large amounts of waste, often incorrectly discarded, causing damage to the environment and the population. Under this consideration, waste frying oils are abundant and can be used in the production of PHA without any further treatment. Therefore, this work studied the production of polyhydroxyalkanoates (PHA) from two strains of bacteria, Pseudomonas oleovorans and Bacillus megaterium, using waste frying oils as a source of carbon (waste oils from potato, chicken and pastel) and were used at concentrations of 10 g.l-1 and 20 g.l-1, separately. The biopolymer production assays were performed in shaken flasks, in nitrogen-limiting culture medium. The dry cell mass (DCM) was determined by gravimetry and the percentage of accumulation and the PHA composition were determined by gas chromatography. The best reaction condition was observed in the residual frying oil from potato, in which the bacterium Bacillus megaterium reached a PHA accumulation of 13.03 % and 3,93 g.l-1 of dry cell mass. From the results obtained it can be concluded that this alternative is promising, besides not competing with the production based on sources of sugar, that is ... / Mestre

A separação cromatográfica de misturas de compostos hidrofóbicos, com cadeias carbônicas longas, apresenta dificuldades como, por exemplo, o entupimento da coluna de separação. Assim, técnicas alternativas de separação e quantificação destes compostos têm sido investigadas. O aumento da cadeia carbônica diminui drasticamente a solubilidade dos ácidos graxos em meios solventes, porém esta limitação é contornada preparando a amostra de óleo na forma de microemulsão (ME), permitindo o emprego de técnicas eletroanalíticas em razão da elevada condutividade característica desses sistemas. Este trabalho teve por objetivo o desenvolvimento de metodologia analítica para a quantificação de ácidos graxos livres presentes em óleo de soja diretamente na amostra, sem a necessidade de extração prévia, empregando cromatografia eletrocinética capilar em microemulsões (MEEKC) e eletroforese capilar em solventes orgânicos, ambas com detecção oscilométrica. Foi investigado o comportamento eletroquímico de MEs constituídas de dodecil sulfato de sódio, SDS, pentanol e água, cujo diagrama de fases apresenta uma ampla região de miscibilidade, bem como de microemulsões contendo óleo de soja. Nessa região, para uma faixa de composições correspondendo a diferentes tipos de microemulsões, foram estudadas propriedades como o comportamento das fases e a influência da natureza do cosurfactante e quantificados parâmetros físico-químicos ainda desconhecidos nesses meios, por exemplo, sua condutividade, raio, carga elétrica e coeficiente de difusão das gotículas. Na caracterização das MEs foram empregadas as técnicas de espalhamento de luz dinâmico (DLS), espalhamento de raios-x a baixo ângulo (SAXS), voltametria potenciodinâmica, espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) e condutometria. A identificação dos ácidos oléico e palmítico foi realizada em corridas individuais, usando como eletrólito de corrida uma mistura de NaOH, DMF e butanol, com um tempo de análise em torno de 50 minutos, aproximadamente. Já para a ME utilizando como eletrólito de corrida octano, 1-butanol e SDS em tetraborato de sódio aquoso, não houve a separação dos ácidos mencionados. O eletrólito de corrida que melhor atendeu aos requisitos necessários para a determinação da concentração do ácido oléico livre em óleo de soja foi uma mistura contendo 4 x 10-2 mol L-1 de KOH em metanol:propanol na proporção de 1:6, e 10 % em etilenoglicol, com um tempo de análise relativamente pequeno, comparativamente ao sistema hidroorgânico. / The chromatographic separation of hydrophobic compounds from mixtures presents some difficulties such as the occlusion of the column. Therefore, alternative techniques to separate and quantify these compounds have been investigated. Although the solubility of fatty acids in most solvents falls significantly with increasing carbon chain length this difficulty can be surmounted by preparing the oil sample as a microemulsion (ME) which allows carrying on electroanalytical measurements due to the higher conductivity these systems present as compared to oils and fats. The aim of this study is to develop analytical methodology in order to quantify free fatty acids in soybean oil, without previous extraction, by microemulsion electrokinetic capillary chromatography (MEEKC) and capillary electrophoresis, both with oscillometric detection. The electrochemical behavior of microemulsions (MEs) prepared with n-pentanol, SDS and water, the phase diagram of which presents a large miscibility region, as well as MEs containing soybean oil, have been investigated. In this region, for composition ranges corresponding to different types of MEs, the behaviour of the phases and the role of the cosurfactant nature have been investigated. Moreover, some physical-chemical parameters, up to now unknown in the studied media, such as conductivity, radii of the particles and their diffusion coefficient were quantified. Techniques such as dynamic light scattering (DLS) and small angle x-ray scattering (SAXS), linear voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy and conductometry were employed in the characterization of the MEs. A carrier electrolyte prepared with a mixture of NaOH, DMF and butanol evidenced the presence of either oleic and palmitic acids in individual runs with a time analysis around 50 minutes. For a soybean oil ME using octane, 1-butanol and SDS in aqueous sodium tetraborate as carrier electrolyte there was no separation of the mentioned fatty acids. Finally, the carrier electrolyte prepared with 4 x 10-2 mol L-1 KOH in metanol:propanol 1:6 and, w/w, and 10 % ethileneglycol allowed the determination of the free oleic acid content in a soybean oil sample with a quite short time of analysis as compared to the previous system.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Kathryn Cardim Araujo (kathryn.cardim@gmail.com) on 2009-09-22T18:19:22Z No. of bitstreams: 1 2009_CarolinadePaulaFerreira.pdf: 4839614 bytes, checksum: 8590291403d531a3a90cc2f3749df013 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-06-22T19:26:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_CarolinadePaulaFerreira.pdf: 4839614 bytes, checksum: 8590291403d531a3a90cc2f3749df013 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-22T19:26:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_CarolinadePaulaFerreira.pdf: 4839614 bytes, checksum: 8590291403d531a3a90cc2f3749df013 (MD5) Previous issue date: 2008-03 / O objetivo deste trabalho foi caracterizar química e morfologicamente diferentes genótipos de Mentha e fornecer subsídios que contribuam para melhorar o conhecimento do gênero Mentha. O experimento foi conduzido na Estação Biológica da Universidade de Brasília/UnB. Para a caracterização morfológica, o material constou de 14 genótipos de Mentha, oriundos da coleção da Embrapa /Cenargen, representados pelo código de acesso (CM), M. aquatica L. (CM01), M. arvensis L. (CM59), M. canadensis L. (CM05), M. citrata (Ehrh.) Briq. (CM44), M. longifolia (L.) Huds. (CM27), M. spicata x suaveolens (CM35), M. spicata L. (CM 29, 53, 58 e 64), M. suaveolens Ehrh. (CM04 e 61), M. sylvestris L (CM34). e M. x villosa Huds (CM65). Para a caracterização química foram analisados quatro genótipos, M. aquatica (CM01), M. citrata (CM47) e M. spicata (CM07 e CM54). O primeiro experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado, com 14 tratamentos (acesso) e três repetições cultivados em campo, o segundo experimento, em delineamento inteiramente casualizado, com 4 tratamentos (acessos) e quatro repetições, com parcelas de cinco vasos, mantidos em estufa. Os parâmetros quantitativos avaliados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste Tukey, utilizando-se o nível de 5%. No primeiro experimento, os quatro genótipos da M. spicata diferiram quanto ao hábito de crescimento, duas espécies mostraram-se semi-prostradas (CM29 e CM53), e outras duas eretas (CM58 e CM64). A suscetibilidade a ferrugem, causada por Puccinia menthae, também foi detectada em M. arvensis (CM59), M. citrata (CM44), M. spicata x suaveolens (CM35) e M. x villosa (CM65). Foram observados três tipos de lâminas foliares, oblonga, elíptica e ovada, predominado o tipo oblongo, o ápice foliar mais comum foi o agudo, correspondendo a oito acessos. A base do limbo foliar variou entre, côncavo-convexa, convexa e redonda. A M. canadensis (CM05) e a M. spicata x suaveolens (CM35), diferiram significativamente da Mentha aquatica (CM01) quanto à área foliar, o índice de afilamento das M. aquatica (CM01), M. spicata x suaveolens (CM35) e M. suaveolens (CM61) diferiram significativamente das M. longifolia (CM27) e M. citrata (CM44). No segundo experimento, os dois genótipos de M. spicata (CM07 e CM54) divergiram quanto à pilosidade e quanto à rugosidade. O acesso de M. spicata (CM07) apresentou maior rugosidade e o tamanho do pecíolo significativamente menor que os demais. A área foliar e o índice de afilamento não diferiram estatisticamente. Foram encontrados dois quimiotipos, quimiotipo I, rico em limoneno e 1,8-cineol, na M. aquatica (CM01); e o quimiotipo II, rico em linalol e acetato de linalila, observados em M. citrata (CM47) e M. spicata (CM07 e CM54). Os componentes majoritários encontrados na M. aquatica foram limoneno e 1,8- cineol, com 73 e 10%, respectivamente, já no segundo quimiotipo, M. citrata (CM47) e M. spicata (CM07 e CM54) apresentaram o linalol e o acetato de linalila como compostos majoritários, juntos representando 70 a 80% do óleo, sendo que a porcentagem de linalol no acesso de M. spicata (CM07) foi significativamente superior aos demais acessos. O quimiotipo I M. aquatica (CM01) foi significativamente inferior ao quimiotipo II, M. citrata (CM47) e M. spicata (CM07 e CM54), em relação aos parâmetros agronômicos, massa seca das folhas, rendimento e massa do óleo essencial. Os melhores resultados para a massa fresca e seca da parte aérea, massa e rendimento do óleo foram encontrados nos acessos do quimiotipo II, M. citrata (CM47) e M. spicata (CM54). / The objective of this work was to characterize chemical and morphologically different genotypes of Mentha and to supply subsidies that contribute to improve the knowledge of the Mentha sort. The experiment was lead in the Estação Biológica da Universidade de Brasilia/UnB. For the morphologic characterization, the material consisted of 14 genotypes of Mentha, deriving of the collection of the Embrapa /Cenargen, represented for the access code (CM), M. aquatica L. (CM01), M. arvensis L. (CM59), M. canadensis L. (CM05), M. citrata (Ehrh.) Briq. (CM44), M. longifolia (L.) Huds. (CM27), M. spicata x suaveolens (CM35), M. spicata L. (Cm 29, 53, 58 and 64), M. suaveolens Ehrh. (CM04 and 61), M. sylvestris L (CM34). e M. x villosa Huds (CM65). For the chemical characterization four genotypes had been analyzed, M. aquatica (CM01), M. citrata (CM47) and M. spicata (CM07 and CM54). The first experiment was carried through in entirely randomized outline, with 14 treatments (access) and three repetitions cultivated in field, as the experiment, in entirely randomized outline, with 4 treatments (accesses) and four repetitions, with parcels of five vases, kept in greenhouse. The evaluated quantitative parameters had been submitted to the analysis of variance and the averages compared for the Tukey test, using themselves the 5% level. In the first experiment, the four genotypes of the M. spicata had differed how much to the growth habit, two species had revealed half-prostradas (CM29 and CM53), and others two erect ones (CM58 and CM64). The susceptibility the rust, caused for Puccinia menthae, also was detected in M. arvensis (CM59), M. citrata (CM44), M. spicata x suaveolens (CM35) and M. x villosa (CM65). Three types of leaves blades had been observed, oblong, elliptical and ovada, predominated the oblong type, the more common foliar apex was the sharp, corresponding the eight accesses. The base of the foliar limb varied enters, concavous-convex, convex and round. The M. canadensis (CM05) and the M. spicata x suaveolens (CM35), had differed significantly from the M. aquatica (CM01) how much to the area leaves, the taping index of the M. aquatica (CM01), M. spicata x suaveolens (CM35) and M. suaveolens (CM61) had differed significantly from the M. longifolia (CM27) and M. citrata (CM44). In as the experiment, the two genotypes of M. spicata (CM07 and CM54) different how much to the pilosity and how much to the rugosity. The access of M. spicata (CM07) presented greater rugosity and the size of peciole significantly lesser that excessively. The leaf area and the taping index had not differed statistical. Two quimiotipos, quimiotipo I, rich in limonene and 1,8-cineol had been found, the M. aquatica (CM01); e quimiotipo II, rich in linalol and linalil acetate, observed in M. citrata (CM47) and M. spicata (CM07 and CM54). The found majority components in the M. aquatica they had been limonene and 1,8-cineol, with 73 and 10%, respectively, no longer second quimiotipo, M. citrata (CM47) and M. spicata (CM07 and CM54) had presented linalol and the linalil acetate as majority, together composites representing 70 80% of the oil, being that the percentage of linalol in the access of M. spicata (CM07) was significantly superior to the too much accesses. Quimiotipo I M. aquatica (CM01) it was significantly inferior to quimiotipo II, M. citrata (CM47) and M. spicata (CM07 and CM54), in relation to the agronomic parameters, dry mass of leaves, income and mass of the essential oil. The best ones resulted for the cool mass and dry of the aerial part, mass and income of the oil had been found in the accesses of quimiotipo II, M. citrata (CM47) and M. spicata (CM54).