Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2015. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-08-29T16:36:16Z No. of bitstreams: 1 2016_FilipeTavaresCarneiro.pdf: 765407 bytes, checksum: 5fc99eafa298ff677c0b62f4a86654a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-09-01T21:37:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_FilipeTavaresCarneiro.pdf: 765407 bytes, checksum: 5fc99eafa298ff677c0b62f4a86654a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T21:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_FilipeTavaresCarneiro.pdf: 765407 bytes, checksum: 5fc99eafa298ff677c0b62f4a86654a8 (MD5) / Hemoplasmas são bactérias que prendem-se frouxamente à membrana plasmática de eritrócitos, podendo parasitar mamíferos domésticos e selvagens. Felídeos são conhecidamente parasitados por Mycoplasma haemofelis, Candidatus Mycoplasma haemominutum e Candidatus Mycoplasma turicensis, enquanto canídeos são infectados por pelo menos duas espécies de hemoplasmas: Mycoplasma haemocanis e Candidatus Mycoplasma haematoparvum. As hemoplasmoses são de grande relevância na clínica veterinária, tanto por sua distribuição cosmopolita e severidade de sinais clínicos, a depender da espécie do parasita e imunocompetência do hospedeiro, quanto pelo seu potencial zoonótico e de infecção de animais selvagens ameaçados de extinção. O presente trabalho se propôs a investigar quais espécies de hemoplasmas parasitam as diferentes espécies de carnívoros de cativeiro, a fim de esclarecer a epidemiologia da doença nestas espécies. Além disso, a pesquisa visou caracterizar as alterações hematológicas causadas pela infecção por diferentes espécies de micoplasmas hemotrópicos, a fim de estabelecer sua importância clínica para as espécies selvagens e a capacidade dessas espécies de se tornarem reservatório dos agentes estudados. Foram investigadas as amostras de 33 felídeos e 18 canídeos selvagens e observou-se que a ocorrência da infecção por hemoplasmas nessas espécies é de 45,5% e 83,3%, respectivamente. Fatores como faixa etária, gênero ou presença de anemia não apresentaram correlação com a positividade para a infecção. Sendo assim, conclui-se que a infecção por hemoplasmas em carnívoros selvagens tem alta prevalência, a patogenicidade dos agentes é baixa, ou o estágio crônico é mais frequente, resultando na redução de seu diagnóstico. / Hemoplasmas are bacteria able to adhere themselves loosely to the plasma membrane of erythrocytes and may parasitize several species of mammals. There are three known species of hemoplasmas that parasitize domestic and wild cats: Mycoplasma haemofelis, Candidatus Mycoplasma haemominutum and Candidatus Mycoplasma turicensis. Dogs are infected by at least two species of hemoplasmas: Candidatus Mycoplasma haematoparvum and Mycoplasma haemocanis. The hemoplasmoses are very important in the veterinary clinic, either because of its worldwide distribution and severity of clinical signs, depending on parasite species and host immune competence, or due to its zoonotic potential and capability of infecting endangered species. This study set out to investigate which hemoplasmas species parasitize different species of captive wild carnivores in order to clarify the epidemiology of the disease in these species. Furthermore, the research intended to characterize the hematological changes caused by different species of hemotrophic mycoplasmas infection in order to establish their clinical importance to wild species and the capacity of these species to become a reservoir of studied agents. Samples of 33 wild felids and 18 wild canids were investigated and it was observed that the occurrence of hemoplasma infection in these species is 45.5% and 83.3%, respectively. Factors such as age, gender or anemia are not more frequent in animals positive for the infection. Therefore, it is concluded that infection by hemoplasmas in wild carnivores has high prevalence, and either agent pathogenicity is low, or chronic stage is more frequent, resulting in the reduction of diagnosis.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2015. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-01-26T10:51:46Z No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-01-27T20:57:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-27T20:57:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_LarissaCamposAquino.pdf: 2726967 bytes, checksum: 51abca4084a9b1d6981087858e63bda6 (MD5) / Hemoplasmas são micoplasmas hemotrópicos que não possuem parede celular e crescem na superfície de eritrócitos podendo causar anemia infecciosa em diferentes espécies de mamíferos. Gatos são infectados por três espécies principais: Mycoplasma haemofelis (Mhf), ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ (CMhm) e ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ (CMt) e em cães as espécies Mycoplasma haemocanis (Mhc) e ‘Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ (CMhp) são as mais prevalentes. O presente estudo teve como objetivos determinar a ocorrência e a filogenia das espécies de hemoplasmas em gatos da capital do Brasil e cidades satélites e de cães da Nigéria, África, e verificar se há correlação com alterações hematológicas. Amostras de sangue foram coletadas de 451 gatos de diferentes origens de Brasília, DF e de 246 cães de Jos, Plateau State, Nigeria e submetidas a avaliação eritrocitária e extração de DNA para PCRs e sequenciamento. No estudo em gatos, hemoplasmas foram encontrados em 13.8% dos animais. CMhm foi a espécie mais prevalente (13.8% dos gatos), seguida pelo Mhf (11.1%) e CMt (4.4%). Mais de 80% dos gatos infectados por hemoplasmas estavam infectados por duas ou mais espécies: 7.1% estavam co-infectados com Mhf/CMhm, 0,4% com CMhm/CMt e 3,9% com Mhf/CMhm/CMt. O gênero masculino estava significativamente associado com infecção por hemoplasmas. Nenhuma associação entre o resultado da qPCR para hemoplasmas e parâmetros hematológicos foi encontrada, porém o número relativo de cópias de CMhm apresentou correlação com o número de eritrócitos e hematócrito. As sequencias do gene 16S rRNA (>1Kb) das espécies de hemoplasmas provenientes de gatos com co-infecções foram obtidos usando oligonucleotídeos espécie específicos, o que permitiu a obtenção de sequencias do gene 16S rRNA apesar do alto nível de co-infecções, que impossibilita o uso de oligonucleotídeos universais para o gene 16S rRNA. Dentro de cada espécie as sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram identidade de >99.8%, >98.5% e >98.8%,respectivamente. As sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram >99.2%, >98.4% e >97.8% de identidade, respectivamente, com sequencias do GenBank. A análise filogenética demonstrou todas as sequencias do Mhf em um único grupo, enquanto as sequencias de CMhm e CMt se agruparam em 3 subgrupos distintos. Estes achados filogenéticos sugerem a existência de diferentes cepas de CMhm e CMt. No estudo em cães, a qPCR espécie específica detectou infecção por Mhc em 18 dos 245 cães (7,3%) e CMhp em apenas um cão (0,4%). A qPCR de gênero de hemoplasmas foi positiva em 44 dos 245 (17,9%) dos cães. Vinte e cinco cães tiveram resultados discordantes nas qPCRs, nos quais foram positivos na qPCR de gênero de hemoplasmas, mas negativos na qPCR espécie específica. A avaliação desses cães discordantes por meio do sequenciamento do gene 16S rRNA gerou resultados limitados, mas em 5 cães confirmou-se a infecção por espécies diferentes de hemoplasmas: 2 Anaplasma phagocytophilum, 1 Anaplasma ovis, 1 Serratia marcescens e 1 Aerococcus spp. O sequenciamento do gene 16S rRNA dos Mhc mostrou >99,8% de identidade entre elas e >99,6% de identidade com sequencias disponíveis no GenBank e permaneceram no mesmo grupo de outras sequencias de Mhc e Mycoplasma haemofelis, indicando baixa variabilidade genética do gene 16S rRNA entre Mhc de diferentes origens. / Haemoplasmas are wall less haemotropic mycoplasmas that attach and grown in the surface of erythrocytes and cause anaemia in different mammals species. Cats are infected with three main species: Mycoplasma haemofelis (Mhf), ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ (CMhm) and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ (CMt), while in dogs the species Mycoplasma haemocanis (Mhc) and ‘Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ (CMhp) are the most prevalent. The aims of the present study were to determine the occurrence and the phylogeny of haemoplasma species from cats in Brasilia and surrounding cities and from dogs in Nigeria, Africa; and assess weather any correlation existed between haemoplasma infection and haematological abnormalities. Blood samples were collected from 451 cats in different origins of Brasília, DF and from 246 dogs from Jos, Plateau State, Nigeria; submitted to erythrocyte evaluation and DNA extraction for PCR analysis and sequencing. In the cats study, haemoplasmas were found in 13.8% of 432 cats. CMhm was the most prevalent species (in 13.8% of cats), followed by Mhf (11.1%) and CMt (4.4%). Over 80% of haemoplasma-infected cats harboured two or more feline haemoplasma species: 7.1% of cats were co-infected with Mhf/CMhm, 0.4% with CMhm/CMt and 3.9% with Mhf/CMhm/CMt. Male gender was significantly associated with haemoplasma infections. No association was found between qPCR haemoplasma status and haematological variables, however CMhm relative copy numbers were correlated with red blood cell (RBC) numbers and packed cell volume (PCV). Haemoplasma 16S rRNA gene sequences (>1Kb) were derived from co-infected cats using novel haemoplasma species-specific oligonucleotides. This allowed 16S rRNA gene sequences to be obtained despite the high level of co-infection, which precluded the use of universal 16S rRNA gene oligonucleotides. Within each species, the Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.8%, >98.5% and >98.8% identity, respectively. The Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.2%, >98.4% and >97.8% identity, respectively, with GenBank sequences. Phylogenetic analysis showed all Mhf sequences to reside in a single clade, whereas the CMhm and CMt sequences each grouped into three distinct subclades. These phylogeny findings suggest the existence of different CMhm and CMt strains. In the dogs study, species-specific qPCR assays found Mhc infection in 18 of 245 dogs (7.3%), and CMhp infection in only one dog (0.4%). The generic haemoplasma qPCR assays were positive in 44 of 245 (17.9%) dogs. Twenty-five dogs had discordant qPCR results in that they were generic haemoplasma qPCR positive but species-specific qPCR negative. Further evaluation of these dogs by 16S rDNA sequencing gave limited results but 5 were confirmed to be infected with non-haemoplasma species: The 16S rRNA gene sequences from Mhc species showed >99.8% identity with each other and >99.6% identity with GenBank sequences, and resided in a single clade with other global Mhc and Mycoplasma haemofelis sequences, indicating low 16S rRNA genetic variability amongst this canine haemoplasma species.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-02-14T18:58:03Z No. of bitstreams: 1 2016 - Aline Tonussi da Silva.pdf: 2072458 bytes, checksum: 143dab8a0068b4bd1a643fe48f82873c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T18:58:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Aline Tonussi da Silva.pdf: 2072458 bytes, checksum: 143dab8a0068b4bd1a643fe48f82873c (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES / The hemotropic hemoparasites mycoplasmas are gram-negative bacteria, which must attach to the wall of erythrocytes, causing deformation in the membrane of the infected erythrocytes. The goal of this study was to detect molecularly hemoplasmas infection in sheltered dogs in Metropolitan region of Rio de Janeiro, linking it to hematological, biochemical and clinical data changes. Of 222 dogs sampled, 20,27% (45/222) were positive by the Polymerase Chain Reaction Real Time (qPCR) for Mycoplasma spp.. The frequency of hemoplasma species infection by PCR using species-specific oligonucleotides, was 13,06% (29/222), 0% (0/222) and 2,25% (5/222) respectively for M. haemocanis (Mhc), ?Candidatus M. turicensis? (Cmt) and ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum / haemominutum? (Cmhp / m). There for e M. haemocanis presented the highest incidence in the dogs population studied. Coinfections were identified between Cmhp/m and Mhc 1,35% (3/222). Regarding hematological alterations associated with infection by Mycoplasma spp., hyperproteinemia on plasma was detected (p = 0,0010). It was not observed an association between hemoplasmas infection and the occurrence of anemia and leukocyte changes. Changes in serum biochemistry showed a significant difference in serum protein (p = 0,0291), globulin (p = 0,0253), creatinine (p = 0,0279) and alkaline phosphatase (p = 0,0242). Additionally the azotemia was statistically (p = 0,0023) associated with the infection. The results obtained in the evaluation of Mhc positive dogs demonstrated no significant difference in plasma total protein (p = 0,0012) and hyperproteinaemia was associated with infection (p = 0,0238). There were significant differences in alkaline phosphatase parameter (p = 0,0173) and urea (p = 0,0401), with azotemia is associated shall infection (p = 0,0061). The results observed in the evaluation of positive dogs for (Cmhp / m) show that ALT (alanine aminotransferase) was associated with infection (p = 0,0301). As for factors associated with infection by Mycoplasma spp., only gender (p = 0,0062) and age (p = 0,0041) were associated with infec??o.N?o are statistically associated with the historical agent of fights, access to street, castration, history fleas, ticks history, presence of fleas and ticks. The frequency of the main findings of anamanse and clinical examination of the dogs positive for Mycoplasma spp . were lymphadenopathy (37,8% ) , skin lesions compatible with scabies ( 28,9%) , TPC > 2 ( 31,1% ) , oral affections ( 15,5%) of hist?rico ehrlichiosis ( 13,3%) . Consequently, knowledge of the disease and the factors related to their occurrence are necessary for the adoption of preventive measures aimed at animal health. / Os hemoparasitos micoplasmas hemotr?ficos s?o bact?rias gram-negativas, que se fixam obrigatoriamente na superf?cie dos eritr?citos, levando a deforma??o desta. O objetivo do presente estudo foi detectar molecularmente a infec??o por hemoplasmas em c?es de abrigos da Regi?o Metropolitana do Rio de Janeiro, associando-a aos dados hematol?gicos, bioqu?micos e altera??es cl?nicas. Dos 222 c?es amostrados, 20,27% (45/222) foram positivos pela Rea??o em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR) para Mycoplasma spp.. A frequ?ncia de infec??o das esp?cies de hemoplasma pela PCR, utilizando oligonucleot?deos esp?cie-espec?ficos, foi 13,06% (29/222), 0% (0/222) e 2,25% (5/222), respectivamente para M. haemocanis (Mhc), ?Candidatus M. turicensis (CMt) e ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum/ haemominutum? (CMhp/m). M. haemocanis constitui, portanto, a esp?cie de maior ocorr?ncia na popula??o de c?es estudada. Foram identificadas coinfec??es entre CMhp/m e Mhc em 1,35% (3/222) dos c?es. No tocante ?s altera??es hematol?gicas associadas ? infec??o por Mycoplasma spp., constatou-se hiperproteinemia plasm?tica refratom?trica (p=0,0010). N?o foi observada associa??o entre a infec??o por hemoplasmas e a ocorr?ncia de anemia ou altera??es leucocit?rias. Nas altera??es da bioqu?mica sangu?nea, evidenciou-se diferen?a significativa na prote?na s?rica (p=0,0291), globulina (p=0,0253), creatinina (p=0,0279), fosfatase alcalina (p=0,0242). Adicionalmente, a azotemia foi estatisticamente (p=0,0023) associada ? infec??o. Os resultados observados na avalia??o de c?es positivos para Mhc demonstram haver diferen?a significativa na prote?na plasm?tica total (p=0,0012) e hiperproteinemia foi associada ? infec??o (p=0,0238). Houve diferen?a significativa no par?metro fosfatase alcalina (p=0,0173) e ur?ia (p=0,0401), com a azotemia sendo associada ? infec??o (p=0,0061). Os resultados observados na avalia??o de c?es positivos para CMhp/hm demonstram que a ALT (alanina aminotransferase) foi associada ? infec??o (p=0,0301). Quanto aos fatores associados ? infec??o por Mycoplasma spp., apenas g?nero (p=0,0062) e idade (p=0,0041) foram associadas ? infec??o. N?o apresentaram associa??o estat?stica com o agente hist?rico de brigas, acesso a rua, castra??o, hist?rico de pulgas, hist?rico de carrapatos, presen?a de pulgas e presen?a de carrapatos. A frequ?ncia dos principais achados de anamanse e exame cl?nico dos c?es positivos para Mycoplasma spp. foram a linfadenopatia (37,8%), les?es de pele compat?veis com sarna (28,9%), TPC >2 (31,1%), afec??es bucais (15,5%) e hist?rico de erlichiose (13,3%). Consequentemente, o conhecimento da doen?a bem como dos fatores relacionados ? sua ocorr?ncia s?o necess?rios para a ado??o de medidas preventivas visando ? sa?de animal.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-10-04T18:07:36Z No. of bitstreams: 1 2017 - Camila Fl?via Magalh?es Botelho.pdf: 1531668 bytes, checksum: b445ba2353dc7515e478a8e151b24d75 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-04T18:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Camila Fl?via Magalh?es Botelho.pdf: 1531668 bytes, checksum: b445ba2353dc7515e478a8e151b24d75 (MD5) Previous issue date: 2017-02-14 / CAPES / Hemotrophic mycoplasmas hemoparasites are pleomorphic, epicellular, gram negative organisms that are located on the surface of erythrocytes of several species. In dogs, hemoplasma infection can cause hemolytic anemia in the acute phase, while in the chronic phase the signs are generally inapparent, and immunosuppression can trigger the acute disease. The present study aimed to detect molecularly the presence of hemotrophic mycoplasma agents in domestic dogs from the urban and rural areas of Aragua?na, Tocantins and, in addition, to correlate hematological alterations and factors associated with natural infection. In the analysis of the results, 2.9% (3/105) of the dogs sampled from the urban area and 24.49% (24/99) from the rural area were positive for Mycoplasma spp. by the Real Time Polymerase Chain Reaction (qPCR). The frequency of hemoplasmas species infection by PCR using species-specific oligonucleotides was 1.9% (2/105) and 13.26% (13/99) for Mycoplasma haemocanis in the urban and rural areas, respectively. No positive dogs were observed for ?Candidatus Mycoplasma turicensis? and ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum?/?Candidatus Mycoplasma haemominutum? in both areas studied. Regarding hematological alterations, there was no statistical association with the infection by Mycoplasma spp. Similarly, among the analyzed variables (age, gender, racial pattern, site cleanliness and housing), no statistical correlation was observed in either urban or rural areas. This is the first report of the molecular detection of Mycoplasma haemocanis in dogs from Tocantins and opens up prospects for future studies in this group of hemotrophic agents. / Os hemoparasitos micoplasmas hemotr?ficos s?o organismos pleom?rficos, epicelulares, Gram negativos, que se localizam na superf?cie dos eritr?citos de diversas esp?cies. Em c?es, a infec??o pelos hemoplasmas pode causar anemia hemol?tica na fase aguda, enquanto na doen?a cr?nica os sinais em geral s?o inaparentes, sendo que a imunossupress?o pode desencadear a doen?a aguda. O presente estudo objetivou detectar molecularmente a presen?a de infec??o pelos agentes micoplasmas hemotr?ficos em c?es dom?sticos procedentes de ?reas urbana e rural de Aragua?na, Tocantins e, adicionalmente correlacionar as altera??es hematol?gicas e fatores associados com a infec??o natural. Na an?lise dos resultados obtidos, 2,9% (3/105) dos c?es amostrados da ?rea urbana e 24,49% (24/99) da ?rea rural foram positivos pela Rea??o em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (qPCR) para Mycoplasma spp. A frequ?ncia de infec??o das esp?cies de hemoplasmas pela PCR, utilizando oligonucleot?deos esp?cie-espec?ficos, foi de 1,9 % (2/105) e 13,26% (13/99) para Mycoplasma haemocanis na ?rea urbana e rural, respectivamente. N?o foram observados c?es positivos para ?Candidatus Mycoplasma turicensis? e ?Candidatus Mycoplasma haematoparvum?/?Candidatus Mycoplasma haemominutum? em ambas as ?reas estudadas. No tocante ?s altera??es hematol?gicas, n?o houve associa??o estat?stica com a infec??o por Mycoplasma spp. De modo semelhante, dentre as vari?veis analisadas (idade, sexo, padr?o racial, limpeza do local e moradia) n?o foi verificada qualquer correla??o estat?stica com a infec??o pelo agente Mycoplasma spp., seja na ?rea urbana ou na rural. Esta constitui a primeira detec??o molecular de Mycoplasma haemocanis em c?es do Tocantins e abre perspectivas para futuros estudos neste grupo de agentes hemotr?ficos.

Orientador: Luis Guilherme de Oliveira / Resumo: Mycoplasma suis e Mycoplasma parvum se ligam fortemente aos eritrócitos e causam hemoplasmose em suínos. Os animais infectados podem ser portadores assintomáticos ou apresentar sinais inespecíficos, acometendo todas as faixas etárias. No Brasil, os estudos sobre a ocorrência e a diversidade genética associada aos hemoplasmas suínos (HS) são escassos. Portanto, este trabalho teve como objetivo detectar, quantificar e caracterizar a diversidade genética da HS em animais terminados de granjas tecnificadas no estado de Goiás, Brasil. Amostras de sangue total de 450 de 30 granjas diferentes localizadas no estado de Goiás, foram coletadas em tubos contendo ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) e armazenadas a -80 °C. A extração de DNA seguiu o método “in house” descrito previamente. A PCR convencional (cPCR) direcionada ao gene endógeno gapdh foi realizada para evitar resultados falso-negativos nos testes seguintes. Os ensaios de PCR em tempo real quantitativa (qPCR) foram realizados a fim de detectar e quantificar DNA de Mycoplasma baseado no gene 16S rRNA para HS. Para avaliar a diversidade genética da HS, realizou-se a clonagem e sequenciamento dos genes 16S rRNA e 23S rRNA para hemoplasmas. Os resultados da qPCR mostraram uma ocorrência de HS de 68,89%, onde todas as fazendas tinham pelo menos dois animais positivos. A quantificação na qPCR variou de 8.43x10-1 a 4.69x106 µL, e 52.71% das amostras apresentaram 1x103 copies/µL. Além disso, o teste do coeficiente de Spearman reve... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mycoplasma suis and Mycoplasma parvum are strongly bound to erythrocytes and cause hemoplasmosis in pigs. Infected animals can be asymptomatic carriers or have nonspecific signs, affecting all age groups. In Brazil, studies on the occurrence and genetic diversity associated with porcine hemoplasmas (PH) are scarce. Therefore, this work aimed to detect, quantify and characterize the genetic diversity of PH in finished animals from technified farms in the state of Goiás, Brazil. Whole blood samples from 450 animals from 30 different farms located in the state of Goiás, were collected in tubes containing ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and stored at -80°C. DNA extraction followed the "in house" method previously described. Conventional PCR (cPCR) targeting the gapdh endogenous gene was performed to avoid false negative results in the following tests. Quantitative real-time PCR (qPCR) assays were performed in order to detect and quantify Mycoplasma DNA based on the 16S rRNA gene for PH. To assess the genetic diversity of PH, cloning and sequencing of the 16S rRNA and 23S rRNA genes for hemoplasmas was performed. The results of the qPCR showed a PH occurrence of 68.89%, where all farms had at least two positive animals. The quantification in the qPCR varied from 8.43x10-1 to 4.69x106 µL, and 52.71% of the samples presented 1x103 copies / µL. Furthermore, the Spearman coefficient test revealed that the occurrence of PH is inversely associated with the number of births per we... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by CRISTIANE MARIA FERNANDES DE MELO (crisalicemelo@gmail.com) on 2018-04-23T12:15:44Z No. of bitstreams: 1 MELO, C.M.F_TESE.pdf: 4639815 bytes, checksum: 188d6576ee59b2ae0d697aa8640ecc4c (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-04-25T12:32:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 melo_cmf_dr_jabo.pdf: 4639815 bytes, checksum: 188d6576ee59b2ae0d697aa8640ecc4c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-25T12:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 melo_cmf_dr_jabo.pdf: 4639815 bytes, checksum: 188d6576ee59b2ae0d697aa8640ecc4c (MD5) Previous issue date: 2018-03-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os parâmetros sanguíneos de animais domésticos e selvagens diferem em relação às localidades no mundo. Este trabalho teve como objetivo pesquisar a presença de hematozoários e determinar os parâmetros hemostáticos, hematológicos e bioquímicos sanguíneos de macacos bugios de cativeiro no Estado de São Paulo, sudeste do Brasil. Para realização do hemograma e das análises moleculares dos macacos bugios foi colhido sangue em tubos contendo K2EDTA de 68 primatas Alouatta, sendo (Alouatta guariba clamitans, Alouattta caraya e Alouatta spp. de cativeiro). Para as análises bioquímicas e eletroforese de proteínas, foi colhido sangue em tubos contendo ativador de coágulo de 40 macacos bugios para o proteinograma e 29 para as demais análises bioquímicas. Por fim, para avaliação dos parâmetros hemostáticos foi colhido sangue de 30 macacos Alouatta em tubos contendo citrato de sódio a 3,2%. Os resultados obtidos no hemograma de 27 Alouatta caraya e 15 Aloautta guariba clamitans saudáveis foram estatisticamente diferentes na contagem global de hemácias. Nas análises bioquímico-séricas dos bugios hígidos das espécies estudadas, os resultados referentes às dosagens de creatinina, ureia e fosfatase alcalina não apresentaram diferenças estatísticas, porém em relação às dosagens de ALT, os valores foram significativamente diferentes. Quanto ao eletroforetograma das espécies de bugios hígidos, ocorreram diferenças estatísticas apenas na dosagem de proteína total. Nos parâmetros hemostáticos entre espécies de bugios saudáveis, os resultados referentes a contagem de plaquetas, concentração de fibrinogênio plasmático, tempo de tromboplastina parcial ativada e tempo de protrombina não foram significativamente diferentes. Nesta pesquisa, dos 68 macacos bugios avaliados através da PCR convencional, 18 (26,47%) foram positivos para Mycoplasma spp. para o gene 16S rRNA e 1 (5,55%) para o gene RNAse P. Mas, na cPCR para Bartonella spp. para o gene glta a população amostrada de bugios foi negativa. O estudo mostrou que a infecção dos macacos bugios aproximou-se de um genótipo filogeneticamente associado a “Candidatus Mycoplasma kahanei”. Nas condições do presente estudo, os resultados obtidos dos primatas Alouatta caraya e Alouatta guariba clamitans hígidos podem ser úteis como fonte de consulta para outros pesquisadores, quanto aos parâmetros hematológicos, bioquímicos sanguíneos e hemostáticos. Os resultados obtidos pela PCR convencional mostraram que espécies de hemoplasmas circulam entre primatas Alouatta de cativeiro no Estado de São Paulo, Brasil. / The blood parameters of domestic and wild animals differ in relation to the localities of the world. The objective of this study was to investigate the presence of hematozoars and to determine the hemostatic parameters, hematological parameters and blood biochemical of howler monkeys of captive in the State of São Paulo, Southeastern Brazil. For realization hematological and molecular analyzis of howler monkeys, blood was collected in K2EDTA from 68 captive primates Alouatta (Alouatta guariba clamitans, Alouattta caraya and Alouatta spp.). Blood was collected in tubes containing clot activator, of 40 healthy howler monkeys for the proteinogram and 29 for the blood biochemical analyzis. Finally, to evaluate the hemostatic parameters, blood was collected from 30 healthy howler monkeys in tubes containing 3.2% sodium citrate. In the biochemical-serum analyzes of the healthy howler monkeys of the species studied, the results regarding the creatinine, urea and alkaline phosphatase dosages showed no differences statistics, but in relation to the dosages of ALT the values were significantly different. As for the electrophoretogram of the healthy monkeys, the results were statistical differences only in the total protein. In the hemostatic parameters between species of healthy howler monkeys, the results about platelet count, plasma fibrinogen concentration, activated partial thromboplastin time and prothrombin time were not significantly different. In this study, of the 68 howler monkeys evaluated through conventional PCR, 18 (26.47%) were positive for Mycoplasma spp. for the 16S rRNA gene and 1 (5.55%) for the RNAse P gene. But in cPCR for Bartonella spp. for the glta gene the sampled population of howler monkeys was negative. The study showed that the howler monkeys infection approached a genotype phylogenetically associated with "Candidatus Mycoplasma kahanei". Under the conditions of the present study, the results obtained from the Alouatta caraya and Alouatta guariba clamitans healthy can be useful as a source of consultation for other researchers about parameters hematological, blood biochemical and haemostatic. The results obtained by conventional PCR showed that hemoplasm species circulate among Alouatta captive in the State of São Paulo, Brazil.

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