Introdução: A doença vascular do coração transplantado, consiste em um processo inflamatório proliferativo que compromete o sucesso a longo prazo do transplante cardíaco e não há prevenção ou tratamentos efetivos. Uma nanoemulsão lipídica (LDE) pode carregar agentes quimioterápicos na circulação e concentrá-los nos enxertos cardíacos dos coelhos. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do paclitaxel combinado a LDE;do metotrexate combinado ao LDE e a associação de ambos quimioterápicos ao LDE nos corações transplantados. Método: 28 coelhos alimentados com dieta com teor de 0,5% de colesterol e submetidos a transplante cardíaco herotópico foram tratados com ciclosporina (dose 10 mg/kg/ dia por via oral) e alocados em 4 grupos de 7 animais.Um grupo recebeu a associação de Metotrexate e LDE endovenosa (4 mg/kg/semana); segundo grupo recebeu por via endovenosa a combinação de Paclitaxel e LDE; o terceiro grupo recebeu a associação de LDE com metotrexate e paclitaxel; grupo controle que recebeu somente solução salina intravenosa. Os animais foram sacrificados 6 semanas após o procedimento. Foram realizadas análises da morfologia,histologia,imunohistoquímica e análise da expressão gênica do enxerto e dos corações nativos. Resultado: Em comparação com o grupo controle,coelhos transplantados e tratados com paclitaxel associado ao LDE apresentaram redução em 50% de estenose em artérias coronárias. Já nos grupos que usaram metotrexate associado a LDE ou paclitaxel combinado com metotrexate e associado a LDE, houve redução em 18% da estenose coronariana em relação ao grupo controle,mas a diferença não apresentou significância estatística.Nos três grupos tratados, houve redução do infiltrado macrofágico. No grupo que recebeu metotrexate associado a LDE,a expressão gênica de fatores pró-inflamatórios( TNF-alfa; MCP1; IL 18; VCAM-1 e MMP-12) foi reduzida drasticamente; enquanto a expressão de agentes anti-inflamatórios(IL 10 por exemplo) aumentou. Nos outros dois grupos (LDE+paclitaxel e LDE+paclitaxel e metotrexate) não houve influência consistente na expressão de genes pró e anti-inflamatórios. Conclusão: A associação paclitaxel e LDE promoveu melhora importante na vasculopatia dos enxertos.A associação metotrexate e LDE e a metotrexate mais palcitaxel e LDE reduziram a estenose de coronárias porém sem significância estatística. O infiltrado macrofagocítico foi reduzido nos três grupos tratados. Tais resultados podem servir de ponte para novos ensaios clínicos / Background: Coronary allograft vasculopathy is an inflammatory-proliferative process that compromises the long-term success of heart transplantation and currently has no effective prevention and treatment. A lipid nanoemulsion (LDE) can carry chemotherapeutic agentsin the circulation and concentrates them in the heart graft in rabbits. The aim of this study was to investigate the effects of paclitaxel (PACLI) binded tire parentesis to LDE, methotrexate (MTX) binded to LDE and the association of both particles in transplanted heart. Methods: Twenty eight rabbits fed 0,5% cholesterol diet and submitted to heterotopic heart transplantation were treated with cyclosporine A (10mg/kg/daily orally) and allocated to four groups of 7 animals. One group was treated with intravenous LDE-MTX (4mg/kg B.W., weekly); a second with LDE-paclitaxel, the third one with association of LDE-PACLI with LDE-MTX and the control group received only weekly intravenous saline solution. Animals were sacrificed 6 weeks later for morphometric, histological, immunohistochemical and gene expression analysis of the graft and native hearts. Results: Compared to controls, grafts of LDE-PACLI treated rabbits showed 50%reduction of coronary stenosis and in the LDE-MTX and LDE-MTX/PACLIstenosiswas around 18% less than control but this difference was not statistically significant. In the 3 treatment groups macrophage infiltration was decreased. In LDE-MTX group, gene expression of pro-inflammatory factors TNF-?, MCP-1, IL-18 and VCAM-1, and MMP-12 was strongly diminished whereas expression of anti-inflammatory IL-10 increased. In the other two treatment, groups (LDE-PACLI and LDE-PACLI/MTX) there was not a consistent influence in pro and anti-inflammatory gene expression. Conclusions: LDE-PACLI promoted strong improvement of the cardiac allograft vasculopathy. LDE- MTX and LDE -MTX/PACLI decreased coronary stenosis but without statistic significance. Macrophage infiltration was decrease in the three treatment groups. This new preparation maybe candidate for future clinical trials

Orientadores: Luiz Roberto Lopes, Celso Dario Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T03:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_JoseRoberto_D.pdf: 4105947 bytes, checksum: af11b64c91070282e755c061d50774e9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução - Com os estudos de Gould et al. (1960), Cabanas (1977) e Morton et al. (1992), estabeleceu-se o conceito da pesquisa do linfonodo sentinela. Esse se baseia na teoria de que ao identificar a presença ou ausência de metástase no primeiro linfonodo que recebe a drenagem linfática a partir do tumor (sentinela), poderia representar o estado de acometimento dos outros linfonodos. Isto evitaria a realização desnecessária de linfadenectomias. Com o passar dos anos, foi consagrada para ser aplicada em casos de melanoma e câncer de mama. Nesta última década, tenta-se estender os princípios da utilização da pesquisa de linfonodo sentinela para os cânceres do aparelho digestivo. Entretanto, no caso do estômago, existem algumas dificuldades, como: presença de sistema de drenagem linfática multidirecional, ocorrência de metástases saltatórias e identificação de mais de um linfonodo sentinela por indivíduo. Objetivo - Criar e padronizar um modelo animal para o treinamento de pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago. Método - Trinta e dois coelhos, saudáveis, foram submetidos à anestesia exclusivamente intramuscular. Por meio de laparotomia, foi injetado na subserosa da parede anterior do corpo gástrico, 0,1 ml de fitato marcado com tecnécio-99m (0,2 mCi), em seguida pelo mesmo orifício, de 0,2 ml de Azul Patente V® 2,5%. A cavidade abdominal foi avaliada, "in vivo", para pesquisa de suspeitas de linfonodos azuis (corados em azul) e com detector manual de radiação gamma aos 5, 10 e 20 minutos para detecção de suspeitas de linfonodos radioativos (radioatividade identificada superior a 10X o valor apresentado pelo fundo). Após 20 minutos, realizou-se ressecção e exérese total do estômago, baço e suspeitas de linfonodos, para posterior avaliação da radioatividade "ex vivo". A seguir, encaminharam-se as suspeitas de linfonodos para estudo histológico para identificação de tecido linfóide. Resultados - Foram identificados linfonodos em 30 coelhos (93,75%) com média de 2,2 por animal. Das 90 suspeitas de linfonodos detectadas, em 70 casos (77,77%) obteve-se confirmação histológica para tecido linfóide. Dessas, a maioria foi identificada e localizada na região entre o esôfago e o fundo gástrico durante a avaliação "in vivo" aos 5 minutos. Dois coelhos faleceram durante os experimentos (Taxa de mortalidade = 6,25%). Conclusão - O modelo experimental em coelhos para pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago por métodos combinados foi factível, de fácil execução e baixa mortalidade, podendo ser usado para treinamento / Abstract: Introduction - The concept of sentinel lymph node was established by the studies of Gould et al. (1960), Cabanas (1977) and Morton et al. (1992). It is based on the theory that, whenever the presence or absence of metastasis is identified in the first lymph node that receives the lymphatic drainage from the tumor (sentinel) the status of involvement of other lymph nodes might be infered. This could avoid the performance of unnecessary lymphadenectomies. Over the years, its use was consecrated by its application in melanoma and breast cancer. In the last decade, attempts have been made to extend the principles of sentinel lymph node investigation to cancers of the digestive tract. In the case of stomach cancer, additional difficulties were found, such as multiple and aberrant lymphatic routes, the occurrence of skip metastasis and the possible identification of more than one sentinel lymph node in the same patient. Aim - To develop and evaluate an animal model for training sentinel lymph node navigation in the stomach. Methods - Thirtytwo healthy rabbits, were prepped and given intramuscular anesthesia. Through a formal laparotomy, they received a subserosal injection of 0.1 ml of phytate labeled with technetium-99m (0.2 mCi) in the anterior wall of the gastric corpus, followed by 0.2 ml of Blue Patent ® V 2.5%, through the same puncture site. Suspicious lymph nodes were searched in-vivo at 5, 10 and 20 minutes, both visually (Blue Patent stained lymph nodes) and with a manual gamma radiation detector (to detect suspected radioactive lymph nodes, displaying radioactivity levels over 10X the value displayed by the background). En-block resection of the stomach, spleen, visible limph nodes and local fat tissue was then performed and the specimen was assessed "ex vivo" for radioactivity. Suspected lymph nodes were sent for histological study to evaluate the presence of lymphoid tissue. Results - Radiolabeled or stained lymph nodes were identified in 30 rabbits (93.75%) with an average of 2.2 specimens per animal; of the 90 suspicious lymph nodes detected, histology confirmed lymphoid tissue in 70 cases (77.77%). Most lymph nodes were identified at the 5-minute in-vivo evaluation and their most common location was found to be in the region between the esophagus and the gastric fundus. Two rabbits died during the procedure resulting in a 6.25% mortality. Conclusion - The rabbit model proved adequate for training in sentinel node navigation in the stomach by combined methods (dye and radiocolloid) being easy to execute and associated with low mortality / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) is a major etiologic agent of meningo-encephalitis in cattle and establishes lifelong latent infection in trigeminal ganglia and also in other areas of the brain. Colonization of deep areas of the brain with latent viral DNA may have important implications on the pathogenesis of BHV-5 neurological infection upon reactivation. In this study, we investigated the distribution of BHV-5 DNA in the brain of experimentally infected rabbits a laboratory model for BHV-5 infection - prior and subsequently to virus reactivation, using a nested PCR for the glycoprotein B gene. Eighteen rabbits inoculated intranasally with a Brazilian BHV-5 isolate were divided in two groups: group A rabbits (n=8) were euthanized 60 days post-inoculation (pi) for tissue collection; group B (n=7) were submitted to dexamethasone administration at day 60pi for reactivation of latent infection and euthanized for tissue collection 60 days later. To compare, we used two groups of BHV-1-infected rabbits (C, n=3 and D, n=3), each group being submitted to one of the above treatments, respectively. In group A rabbits, viral DNA was consistently detected in trigeminal ganglia (8/8), frequently in cerebellum (6/8), anterior cortex, pons medulla (3/8) and only occasionally in thalamus (2/8), ventro-lateral, dorsal and posterior cortices, midbrain (1/8). In rabbits previously submitted to virus reactivation, viral DNA showed a broader distribution, being detected more frequently besides the TG (7/7) - in ventro-lateral (6/7) and posterior cortices (5/7), pons-medulla and thalamus (4/7) and midbrain (3/7). In contrast, rabbits inoculated with BHV-1 harbored latent viral DNA in a few tissues in addition to TG and did not show significant changes in distribution of viral DNA post-reactivation. These results demonstrate that latency by BHV-5 DNA and not BHV-1 DNA may be established in several areas of the brain of experimentally infected rabbits. Further, dexamethasone-induced virus reactivation is followed by a wider distribution of latent viral DNA, probably due to virus dissemination from the original sites. Thus, it is reasonable to speculate that reactivation of latent infection from deep areas of the brain may contribute to the recrudescence of neurological disease frequently observed upon reactivation of latent BHV-5 infection. / O herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) é um importante agente etiológico de meningoencefalite em bovinos e estabelece infecção latente em seus hospedeiros, principalmente nos gânglios dos nervos sensoriais. No entanto, a colonização de áreas profundas do cérebro com DNA viral pode ter implicações importantes na patogenia da infecção pelo BHV-5 após a reativação da infecção latente. Neste estudo, foi investigada a distribuição do DNA do BHV-5 no cérebro de coelhos infectados experimentalmente, antes e após a reativação da infecção latente, utilizando um nested-PCR para uma seqüência do gene da glicoproteína B. Dezoito coelhos infectados pela via intranasal com um isolado brasileiro de BHV-5 foram divididos em dois grupos: coelhos do grupo A (n=8) foram submetidos a eutanásia 60 dias pós inoculação (pi) para a coleta de tecidos; animais do grupo B (n=7) foram submetidos a administração de dexametasona no dia 60 pi. Para comparação foram utilizados dois grupos de coelhos inoculados com o BHV-1 (C, n=3 e D, n=3), cada grupo sendo submetido a um dos tratamentos acima, respectivamente. Nos animais do grupo A, o DNA viral foi consistentemente detectado no gânglio trigêmeo (8/8), freqüentemente no cerebelo (6/8), com menor freqüência na ponte e córtex anterior (3/8) e ocasionalmente no tálamo (2/8) e córtices ventro-lateral, dorso-lateral e posterior, pedúnculo cerebral e tálamo (1/8). Nos animais previamente submetidos à reativação, a distribuição do DNA viral foi mais ampla, sendo detectado mais consistentemente, além do TG (7/7), nos córtices ventro-lateral (6/7), e posterior (5/7), ponte e tálamo (4/7) e menos freqüentemente no pedúnculo cerebral (3/7). Em contrapartida, os animais inoculados com o BHV-1 apresentaram o DNA viral latente em poucos tecidos além do TG, e não apresentaram alterações importantes na distribuição do DNA viral após a reativação. Esses resultados demonstraram que o DNA latente do BHV-5 - e não o do BHV-1 - pode estar presente em várias áreas do cérebro de coelhos infectados experimentalmente. A reativação induzida por dexametasona resulta na reativação viral e provavelmente na colonização de áreas adicionais no cérebro. Com base nesses resultados pode-se especular que a reativação do DNA viral latente nestas regiões pode contribuir para a recrudescência de doença neurológica observada após a reativação da infecção latente pelo BHV-5.

Neisseria lactamica, uma bactéria comensal não patogênica, predominantemente humana e usualmente encontrada no trato respiratório superior de crianças, está intimamente relacionada a Neisseria meningitidis patogênica. A colonização com N. lactamica pode ser responsável pelo envolvimento da imunidade natural contra a infecção pelos meningococos em crianças pequenas, quando as taxas de portadores de meningococos são baixas. Estas características levam a sugerir que os componentes de N. lactamica possam ser um elemento-chave para a produção de uma nova vacina para N. meningitidis. Devido ao pouco conhecimento sobre a dinâmica dos portadores e sobre a diversidade da população de N. lactamica em crianças, tem sido difícil escolher um isolado representativo para preparar um adequado produto imunogênico. Em nosso estudo, foi proposto um protocolo para estudar a imunogenicidade de whole cells de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c (isoladas de portadores), através da imunização intranasal em coelhos, considerando a via de entrada natural do patógeno. Isolados da orofaringe de N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca ou N. meningitidis c, foram inoculados em coelhos adultos pela via intranasal, numa concentração de densidade ótica 1.0 a 650nm, num volume de 1000 ?L. Os coelhos foram imunizados por quatro vezes em intervalos de sete dias. Também foram usadas cepas como N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa isoladas do líquido cérebro-espinhal ou sangue de pacientes. Os coelhos desenvolveram níveis de anticorpos IgG específicos no soro, como foi determinado por ELISA usando whole cells de cepas homólogas e heterólogas. O soro dos coelhos imunizados com N. lactamica, N. meningitidis, N.sicca ou N. meningitidis c, apresentaram anticorpos IgG que reagiram com antígenos numa faixa de 5 a 130 kDa por meio de immunoblot. Os anticorpos presentes nos soros dos coelhos imunizados com N. lactamica não induziram altos títulos de anticorpos com atividade bactericida contra as cepas de N. meningitidis, no entanto, esta atividade pode ser observada com anticorpos produzidos pelos coelhos imunizados intranasalmente com N. meningitidis. Anticorpos IgG de alta avidez foram produzidos, embora não tenha sido determinada uma significativa correlação entre atividade bactericida e a indução de anticorpos IgG de alta avidez, principalmente nos coelhos imunizados com N. lactamica. A imunização RESUMO intranasal usando whole cells de N. lactamica foi adequada para sensibilizar eficientemente o sistema imune de mucosa no modelo coelho. / Neisseria lactamica, a commensal bacterium non-pathogenic to human beings and usually found in the upper respiratory tract of children, is closely related to pathogenic Neisseria meningitides. Colonization with N. lactamica can be responsible for evolving natural immunity to meningococcal infection in childhood, when rates of meningococcus carriers are low. These features lead to suggest that N. lactamica components can be key-elements in the production of a new vaccine for N. meningitides. As little is known about dynamic carriers and N. lactamica population diversity in children, it has been difficult choosing a representative for preparing an adequate immunogenic product. A protocol was proposed to study immunogenicity of whole cells of N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca or N. meningitides c (carrier-isolated) by i.n. immunization in rabbits considering the natural pathogen entry route. Oropharinx-isolated N. lactamica, N. meningitidis, N. sicca, or N. meningitides c were i.n. inoculated into adult rabbits, in a concentration of optical density 1.0 at 650nm in a volume of 1000 ?L. The rabbits were immunized four times at seven-day intervals. N. subflava, N. elongata, N. sicca, N. perflava, N. mucosa strains isolated from CSF and blood from patients were also used. The rabbits developed levels of specific lgG antibodies in serum, as determined by ELISA using whole cells of homologous and heterologous strains. Serum from rabbits immunized with N. lactamica, N. meningitidis, and N. sicca or N. meningitides c, presented lgG antibodies reactive to 5 to 130 kDa antigens on immunoblot. Antibodies in serum from rabbits immunized with N. lactamica failed to induce high concentration of antibodies with bactericidal activity against N. meningitidis; however, this activity could be observed with antibodies produced by rabbits i.n. immunized with N. meningitidis. High avidity lgG antibodies were produced, although a significant correlation between bactericidal activity and induction of lgG antibodies of high avidity could not be determined, mainly in rabbits immunized with N. lactamica. Intranasal immunization of N.lactamica whole cells was suitable to efficiently sensitize mucosal immune system in rabbit model.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leticia Parrilha.pdf: 1228823 bytes, checksum: 8118e9aa1d510f179a4087486f0ca68a (MD5) Previous issue date: 2013-03-28 / The objective of this study was to evaluate the effectiveness of topical 1% cyclosporine eye drops diluted in two vehicles, olive and the linseed seed oil and the oils separately in treating experimentally induced keratoconjunctivitis sicca (KCS) in rabbits. Twenty-five male New Zealand white rabbits were aleatory allocated in 3 groups: Group C (Control), Group CO (1% cyclosporine in olive oil), Group CL (1% cyclosporine in linseed oil), Group O (olive oil), Group L (linseed oil), being evaluated by Schirmer s Tear Test (STT), Fluorescein Test (FT), Tear Film Break-Up Time Test (TFBUT) and Rose Bengal Test (RBT), ocular cytology, and at the end of the experiment the rabbits were euthanized for histopathological analysis of cornea and conjunctive. The results demonstrated that there was significant increase in the values of STT in all the treated groups after the induction of KCS, presenting better acting the group CL. Regarding FT, there was a more rapid resolution of corneal ulcers in the groups O and L. For RBT, the group O was that it presented worse acting. The groups L and CL presented less edema and cornea congestion. There was significant increase in the number of caliciform cells in all of the treated groups, mainly in the group CL. The cyclosporine was efficient in the CCS treatment, diluted in linseed oil as in olive oil, however the linseed oil presented better effectiveness, associated or no, when compared to the oil olive. / O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do uso tópico do colírio de ciclosporina 1% diluída em dois veículos, óleo de oliva e de semente de linhaça e dos óleos isoladamente, no tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) induzida experimentalmente em coelhos. Foram utilizados vinte e cinco coelhos machos adultos brancos da raça Nova Zelândia alocados aleatoriamente em 5 grupos: Grupo C (controle), Grupo CO (ciclosporina 1% em óleo de oliva), Grupo CL (ciclosporina 1% em óleo de linhaça), Grupo O (óleo de oliva), Grupo L (óleo de linhaça), sendo avaliados pelo Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), Teste de Fluoresceína (TF), Teste de Tempo de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL), Teste de Rosa Bengala (TRB), citologia ocular e ao final do experimento foram eutanasiados para análise histopatológica da córnea e conjuntiva. Os resultados demonstraram que houve aumento significativo nos valores de TLS em todos os grupos de tratamento após a indução da CCS, apresentando melhor desempenho o grupo CL. Com relação ao TF, houve resolução mais precoce das úlceras de córnea nos grupos O e L. Para o TRB, o grupo O foi que apresentou pior desempenho. Os grupos L e CL apresentaram menos edema e congestão de córnea. Houve aumento significativo no numero de células caliciformes em todos os grupos de tratamento, principalmente no grupo CL. A ciclosporina foi eficiente no tratamento da CCS tanto diluída em óleo de linhaça quanto em óleo de oliva, porém com o óleo de linhaça mostrou melhor eficácia, associada ou não, quando comparada ao óleo oliva.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DANIELLE ALVES SILVA.pdf: 987458 bytes, checksum: 32662d7c7f3cc988d4d70c1f1d44b609 (MD5) Previous issue date: 2014-03-20 / The keratoconjunctivitis sicca ( CCS ) , or dry eye, is a common chronic inflammatory eye disease in dogs and humans , which occurs due to deficiency of production of the aqueous portion of the tear film ( quantitative deficiency ) and / or excessive tear evaporation (disability qualitative ) , mainly affecting the cornea and conjunctiva may result in blindness . Treatment consists mainly in the use of tear substitutes as the use of immunosuppressive drugs (cyclosporine , tacrolimus and pimecrolimus ) (Stevenson et al , 2012) . Some studies in medicine and veterinary showed good results in controlling the CCS with the use of essential fatty acids (AGE ) , ω -3 and ω -6 , due to its ability to produce anti -inflammatory mediators ( BARABINO et al. 2003 , . NEVES et al , 2013 ) How fish oil and flaxseed oil are sources of AGE , but with differences in composition and concentration , and to the present time there is a comparative study of the efficacy of these compounds in the treatment of CCS . The objective of this study is to compare these two important sources of ω - 3 and ω - 6 , orally , in the treatment of experimentally induced in rabbits CCS .In order to compare the efficacy in the treatment of keratoconjunctivitis sicca ( CCS ) induced experimentally in rabbits , between two sources of omega 3 and 6 orally , fish oil ( FO) and linseed oil ( OL ) . We used 28 female rabbits of New Zealand breed , divided into 4 groups of 7 animals each : Group C (control ) , Group OP ( fish oil) , OL Group ( flaxseed oil ) and Group OPL ( Oil fish oil and flaxseed ) . The animals were evaluated by Schirmer Tear Test ( TLS ) , Rose Bengal Test ( TRB ) , Fluorescein test ( TF ) , Time Tear Film Break ( TRFL ) , ocular cytology and histopathology . The results showed a significant increase in the values of TLS and TRFL in all treatment groups , but this increase was earlier in the OP group . TRB in the performance of the groups was similar. With respect to the parameter TF , negative marking was delayed in group OPL . There was a significant decrease in the number of goblet cells in the OPL group in relation to other grupos.Os results showed that OL and OP orally improve the clinical signs of CCS , however this improvement was more rapid with the OP . The combined use of oils brought no additional benefit . These results can help in the future with new oral formulations useful in the adjuvant treatment of CCS . / A ceratoconjuntivite seca (CCS), ou olho seco, é uma doença ocular inflamatória crônica frequente em cães e humanos, que ocorre devido a deficiência de produção da porção aquosa do filme lacrimal (deficiência quantitativa) e/ou pela evaporação excessiva da lágrima (deficiência qualitativa), afetando principalmente a córnea e a conjuntiva podendo evoluir para cegueira. O tratamento consiste principalmente no uso como substitutos da lágrima e o uso de imunossupressores (ciclosporina, tacrolimus e pimecrolimus) (STEVENSON et al, 2012). Alguns estudos na Medicina e na Veterinária mostraram bons resultados no controle da CCS com a utilização de ácidos graxos essenciais (AGE), ω-3 e ω-6, devido à sua capacidade de produzir mediadores anti-inflamatórios (BARABINO et al., 2003; NEVES et al., 2013) Como o óleo de peixe e o óleo de linhaça são fontes de AGE, porém com diferenças na sua composição e concentração, e até o presente momento não há um estudo comparativo da eficácia destes compostos no tratamento da CCS. O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia no tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) induzida experimentalmente em coelhos, entre duas fontes de ômega 3 e 6 por via oral, o óleo de peixe (OP) e o óleo de linhaça (OL). Foram utilizados 28 coelhos, fêmeas, da raça Nova Zelândia, divididos em 4 grupos com 7 animais cada: Grupo C (controle), Grupo OP (óleo de peixe), Grupo OL (óleo de linhaça) e Grupo OPL (óleo de peixe e óleo de linhaça). Os animais foram avaliados pelo Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), Teste de Rosa Bengala (TRB), Teste de Fluoresceína (TF), Tempo de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL), citologia ocular e análise histopatológica. Os resultados demonstraram que houve aumento significativo nos valores de TLS e TRFL em todos os grupos de tratamento, porém esse aumento foi mais precoce no grupo OP. No TRB o desempenho dos grupos foi similar. Com relação ao parâmetro TF, a marcação negativa foi mais tardia no grupo OPL. Houve uma diminuição significativa no número de células caliciformes no grupo OPL em relação aos demais grupos.Os resultados demonstraram que o OP e OL por via oral melhoram os sinais clínicos da CCS, porém essa melhora foi mais rápida com o OP. O uso combinado dos óleos não trouxe benefício adicional. Esses resultados podem contribuir no futuro com novas formulações orais úteis no tratamento adjuvante da CCS.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leticia Parrilha.pdf: 1228823 bytes, checksum: 8118e9aa1d510f179a4087486f0ca68a (MD5) Previous issue date: 2013-03-28 / The objective of this study was to evaluate the effectiveness of topical 1% cyclosporine eye drops diluted in two vehicles, olive and the linseed seed oil and the oils separately in treating experimentally induced keratoconjunctivitis sicca (KCS) in rabbits. Twenty-five male New Zealand white rabbits were aleatory allocated in 3 groups: Group C (Control), Group CO (1% cyclosporine in olive oil), Group CL (1% cyclosporine in linseed oil), Group O (olive oil), Group L (linseed oil), being evaluated by Schirmer s Tear Test (STT), Fluorescein Test (FT), Tear Film Break-Up Time Test (TFBUT) and Rose Bengal Test (RBT), ocular cytology, and at the end of the experiment the rabbits were euthanized for histopathological analysis of cornea and conjunctive. The results demonstrated that there was significant increase in the values of STT in all the treated groups after the induction of KCS, presenting better acting the group CL. Regarding FT, there was a more rapid resolution of corneal ulcers in the groups O and L. For RBT, the group O was that it presented worse acting. The groups L and CL presented less edema and cornea congestion. There was significant increase in the number of caliciform cells in all of the treated groups, mainly in the group CL. The cyclosporine was efficient in the CCS treatment, diluted in linseed oil as in olive oil, however the linseed oil presented better effectiveness, associated or no, when compared to the oil olive. / O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do uso tópico do colírio de ciclosporina 1% diluída em dois veículos, óleo de oliva e de semente de linhaça e dos óleos isoladamente, no tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) induzida experimentalmente em coelhos. Foram utilizados vinte e cinco coelhos machos adultos brancos da raça Nova Zelândia alocados aleatoriamente em 5 grupos: Grupo C (controle), Grupo CO (ciclosporina 1% em óleo de oliva), Grupo CL (ciclosporina 1% em óleo de linhaça), Grupo O (óleo de oliva), Grupo L (óleo de linhaça), sendo avaliados pelo Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), Teste de Fluoresceína (TF), Teste de Tempo de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL), Teste de Rosa Bengala (TRB), citologia ocular e ao final do experimento foram eutanasiados para análise histopatológica da córnea e conjuntiva. Os resultados demonstraram que houve aumento significativo nos valores de TLS em todos os grupos de tratamento após a indução da CCS, apresentando melhor desempenho o grupo CL. Com relação ao TF, houve resolução mais precoce das úlceras de córnea nos grupos O e L. Para o TRB, o grupo O foi que apresentou pior desempenho. Os grupos L e CL apresentaram menos edema e congestão de córnea. Houve aumento significativo no numero de células caliciformes em todos os grupos de tratamento, principalmente no grupo CL. A ciclosporina foi eficiente no tratamento da CCS tanto diluída em óleo de linhaça quanto em óleo de oliva, porém com o óleo de linhaça mostrou melhor eficácia, associada ou não, quando comparada ao óleo oliva.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DANIELLE ALVES SILVA.pdf: 987458 bytes, checksum: 32662d7c7f3cc988d4d70c1f1d44b609 (MD5) Previous issue date: 2014-03-20 / The keratoconjunctivitis sicca ( CCS ) , or dry eye, is a common chronic inflammatory eye disease in dogs and humans , which occurs due to deficiency of production of the aqueous portion of the tear film ( quantitative deficiency ) and / or excessive tear evaporation (disability qualitative ) , mainly affecting the cornea and conjunctiva may result in blindness . Treatment consists mainly in the use of tear substitutes as the use of immunosuppressive drugs (cyclosporine , tacrolimus and pimecrolimus ) (Stevenson et al , 2012) . Some studies in medicine and veterinary showed good results in controlling the CCS with the use of essential fatty acids (AGE ) , ω -3 and ω -6 , due to its ability to produce anti -inflammatory mediators ( BARABINO et al. 2003 , . NEVES et al , 2013 ) How fish oil and flaxseed oil are sources of AGE , but with differences in composition and concentration , and to the present time there is a comparative study of the efficacy of these compounds in the treatment of CCS . The objective of this study is to compare these two important sources of ω - 3 and ω - 6 , orally , in the treatment of experimentally induced in rabbits CCS .In order to compare the efficacy in the treatment of keratoconjunctivitis sicca ( CCS ) induced experimentally in rabbits , between two sources of omega 3 and 6 orally , fish oil ( FO) and linseed oil ( OL ) . We used 28 female rabbits of New Zealand breed , divided into 4 groups of 7 animals each : Group C (control ) , Group OP ( fish oil) , OL Group ( flaxseed oil ) and Group OPL ( Oil fish oil and flaxseed ) . The animals were evaluated by Schirmer Tear Test ( TLS ) , Rose Bengal Test ( TRB ) , Fluorescein test ( TF ) , Time Tear Film Break ( TRFL ) , ocular cytology and histopathology . The results showed a significant increase in the values of TLS and TRFL in all treatment groups , but this increase was earlier in the OP group . TRB in the performance of the groups was similar. With respect to the parameter TF , negative marking was delayed in group OPL . There was a significant decrease in the number of goblet cells in the OPL group in relation to other grupos.Os results showed that OL and OP orally improve the clinical signs of CCS , however this improvement was more rapid with the OP . The combined use of oils brought no additional benefit . These results can help in the future with new oral formulations useful in the adjuvant treatment of CCS . / A ceratoconjuntivite seca (CCS), ou olho seco, é uma doença ocular inflamatória crônica frequente em cães e humanos, que ocorre devido a deficiência de produção da porção aquosa do filme lacrimal (deficiência quantitativa) e/ou pela evaporação excessiva da lágrima (deficiência qualitativa), afetando principalmente a córnea e a conjuntiva podendo evoluir para cegueira. O tratamento consiste principalmente no uso como substitutos da lágrima e o uso de imunossupressores (ciclosporina, tacrolimus e pimecrolimus) (STEVENSON et al, 2012). Alguns estudos na Medicina e na Veterinária mostraram bons resultados no controle da CCS com a utilização de ácidos graxos essenciais (AGE), ω-3 e ω-6, devido à sua capacidade de produzir mediadores anti-inflamatórios (BARABINO et al., 2003; NEVES et al., 2013) Como o óleo de peixe e o óleo de linhaça são fontes de AGE, porém com diferenças na sua composição e concentração, e até o presente momento não há um estudo comparativo da eficácia destes compostos no tratamento da CCS. O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia no tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) induzida experimentalmente em coelhos, entre duas fontes de ômega 3 e 6 por via oral, o óleo de peixe (OP) e o óleo de linhaça (OL). Foram utilizados 28 coelhos, fêmeas, da raça Nova Zelândia, divididos em 4 grupos com 7 animais cada: Grupo C (controle), Grupo OP (óleo de peixe), Grupo OL (óleo de linhaça) e Grupo OPL (óleo de peixe e óleo de linhaça). Os animais foram avaliados pelo Teste Lacrimal de Schirmer (TLS), Teste de Rosa Bengala (TRB), Teste de Fluoresceína (TF), Tempo de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL), citologia ocular e análise histopatológica. Os resultados demonstraram que houve aumento significativo nos valores de TLS e TRFL em todos os grupos de tratamento, porém esse aumento foi mais precoce no grupo OP. No TRB o desempenho dos grupos foi similar. Com relação ao parâmetro TF, a marcação negativa foi mais tardia no grupo OPL. Houve uma diminuição significativa no número de células caliciformes no grupo OPL em relação aos demais grupos.Os resultados demonstraram que o OP e OL por via oral melhoram os sinais clínicos da CCS, porém essa melhora foi mais rápida com o OP. O uso combinado dos óleos não trouxe benefício adicional. Esses resultados podem contribuir no futuro com novas formulações orais úteis no tratamento adjuvante da CCS.

Submitted by Adriana Martinez (amartinez@unoeste.br) on 2017-06-01T14:57:32Z No. of bitstreams: 1 Eveline.pdf: 680438 bytes, checksum: 5fb8af2b6ed1e1ccd9b3e015958fc2cb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-01T14:57:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eveline.pdf: 680438 bytes, checksum: 5fb8af2b6ed1e1ccd9b3e015958fc2cb (MD5) Previous issue date: 2016-11-21 / The platelet-rich plasma (PRP) is a promising resource in treatment of wounds, considered a non-toxic biomaterial, which when injected in the tissue, increases its regeneration capacity by stimulating growth factors and activating angiogenesis and thus to induce synthesis of collagen. Studies confirm the effectiveness of the autologous gel source of PRP, but the homologous and heterologous gel sources are alternatives when there are no conditions for obtaining the animal's own PRP, however, unknown whether the effect of using these sources in the organization of the collagen fibers during the process scar. Therefore, this study aimed to compare the effects on healing produced after performing dermal wound in rabbits treated with different sources of platelet-rich plasma (PRP) gel (autologous, homologous and heterologous). 36 biopsies of dermal wounds have been used, experimentally induced in 18 adult rabbits, clinically healthy, of New Zealand breed (n = 9 males, n = 9 females), treated and not treated with different sources of PRP. The wounds were sanitized and treated on 0,3,7,10,14 days, and, in 17º day, a biopsy of the wound has been made, for histologic evaluation and observation of the initial phase of remodeling. In order to determine the type of collagen, the biopsy slides passed through polarization technique with dye-red Picrosirius F3BA. Results confirmed that the source of homologous PRP gel proved to be as efficient as the source of autologous PRP gel if compared healing. Other important finding in this study was that heterologous PRP gel use provided a healing process as good as those provided by autologous and homologous gel groups. As tough PRP is rich in growth factors, even these being from other animals of the same species and also of different species, it is noteworthy that even when applied serially, the different types of PRPs have not caused negative effects, as rejection, for example. It has been concluded that the heterologous and homologous sources are safe alternatives and their use contributes positively to an adequate healing process. / O plasma rico em plaquetas (PRP) é um recurso promissor no tratamento de feridas, considerado um biomaterial atóxico, que quando injetado no tecido, aumenta a capacidade de regeneração tecidual por estimular fatores de crescimento e ativar a angiogênese, e assim induzir a síntese de colágeno. Estudos comprovam a eficácia do PRP de fonte autóloga gel, porém as fontes homóloga e heteróloga gel constituem alternativas quando não há condições de obtenção do PRP do próprio animal, porém desconhece-se o efeito do uso destas fontes na organização das fibras colágenas durante o processo cicatricial. Sendo assim, o trabalho teve como objetivo comparar os efeitos na cicatrização após a realização de ferida dérmica em coelhos tratados com diferentes fontes de plasma rico em plaquetas (PRP) gel (autólogo, homólogo e heterólogo). Foram utilizadas 36 biópsias de feridas dérmicas, experimentalmente induzidas em 18 coelhos adultos, clinicamente saudáveis, da raça Nova Zelândia (n= 9 machos, n= 9 fêmeas), tratados e não tratados (controle) com diferentes fontes de PRP. As feridas foram higienizadas e tratadas nos dia 0,3,7,10,14 e no 170 dia foi realizada a biópsia da ferida, para avaliação histológica e observação da fase inicial de remodelação. Para a determinação do tipo de colágeno, as lâminas de biópsia passaram pela técnica de polarização com o corante Picrosirius-red F3BA. Os resultados comprovaram que a fonte de PRP homólogo gel mostrou-se tão eficiente quanto a fonte de PRP autólogo gel em comparação a cicatrização. Outro importante achado no presente estudo foi que o uso PRP heterólogo gel proporcionou um processo de cicatrização tão bom quanto àqueles proporcionados pelos grupos autólogo e homólogo gel. Como o PRP é rico em fatores de crescimento, mesmo estes sendo de outros animais da mesma espécie e também de espécies diferentes, vale ressaltar que, mesmo quando aplicadas de forma seriada, as diferentes fontes de PRP não ocasionaram efeito negativo como, por exemplo, complicações clínicas. Conclui-se que as fontes heteróloga e homóloga são alternativas seguras e que seu uso contribui positivamente para um processo cicatricial adequado.

This thesis deals with the evaluation of the current situation of the agriculture company Jamenská a.s. and with the proposal how to use the empty building of a former cowshed. Specifically, the evaluation of the project, which involves the implementation of breeding rabbits in the unused object.