Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 403713.pdf: 10272711 bytes, checksum: b67b11e2d0a86525614cc7a22bbc56b4 (MD5) Previous issue date: 2008-03-03 / Justificativa: Apesar do brometo ter sido a primeira terap?utica para o tratamento das epilepsias refrat?rias em crian?as, seu mecanismo de a??o ainda n?o foi completamente esclarecido. O mecanismo de a??o proposto, sugere a??o GABA?rgica. Entretanto, apesar de compartilhar a cin?tica i?nica com os cloretos sua atividade na membrana neuronal independente da atividade sin?ptica n?o foi estudada. Objetivos: Este estudo tem como objetivo verificar o efeito do NaBr sobre as atividades epileptiformes (AE), induzidas por supress?o das conex?es n?o-sin?pticas por perfus?o com l?quido cefalorraquidiano artificial (ACSF) 0- Ca++ e alto K+. M?todos e Resultados: O estudo envolveu medidas experimentais e simula??o. Os experimentos com grupo NaBr (n=23), grupo SITS (n=3), grupo controle (n=3) foram realizados em fatias de hipocampo de ratos Wistar (4 a 6 semanas). Ap?s indu??o das atividades epileptiformes por perfus?o com ACSF 0- Ca++ e alto K+ (8 mM), o Br- foi aplicado por substitui??o nas seguintes concentra??es: 5, 7, 9 e 11 mM de NaCl por 5, 7, 9 e 11 mM de NaBr. O SITS tamb?m foi aplicado por perfus?o (tempo: 20min). A aplica??o do Br- resultou na supress?o revers?vel das AE do giro denteado (GD). Antes da completa supress?o das AE, foram observadas as seguintes altera??es no potencial el?trico extracelular (PE): (i) redu??o da amplitude da componente DC; (ii) aumento transit?rio das amplitudes dos population spikes, seguido de redu??o at? completa supress?o; (iii) redu??es da dura??o e intervalo entre eventos. Simult?neo ao potencial el?trico extracelular foi registrado o sinal ?ptico intr?nseco (IOS). Em termos temporais, da mesma forma que o PE, observaram-se redu??es da dura??o e do intervalo entre eventos. Espacialmente, o IOS sugere uma parti??o da regi?o que compreende os eventos, sugerindo uma redu??o do recrutamento espacial. As simula??es basearam-se na modelagem matem?tica de mecanismos subcelulares e eletroqu?micos de neur?nios (bombas de s?diopot?ssio, canais i?nicos, gap-junctions, co-transportes, eletrodifus?o, efeito de campo el?trico e varia??o de volume), compreendendo uma rede de c?lulas granulares e gliais interligada a uma rede extracelular. A reprodu??o do comportamento espa?o-temporal durante o bloqueio foi poss?vel supondo-se o efeito competitivo entre o Br- e o Cl-, tanto em canais como em cotransportes. Conclus?es: 9 mM de NaBr ? a concentra??o m?nima necess?ria para o completo bloqueio das atividades, com tempo m?nimo de extin??o; Simula??es computacionais sugerem duas explica??es para o efeito inibit?rio do NaBr sobre as AE s: (i) atua??o competitiva do Br- com o Cl-, decrementando a permeabilidade deste ?on que, por sua vez, reduz seus efluxo e influxo durante os per?odos interictal e ictal, respectivamente; (ii) o potencial de Nernst do Br- que tem efeito inibit?rio, favorecendo a redu??o da excitabilidade. Poss?vel envolvimento dos canais de Cl- voltagem-dependentes (semelhan?a dos registros do PE e sinal ?ptico intr?nseco entre NaBr e SITS).

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423333.pdf: 1058400 bytes, checksum: 190a7d318f751aa812d5db628604c8e0 (MD5) Previous issue date: 2010-03-26 / Objetivos: Avaliar a influ?ncia de dois paradigmas distintos de desnutri??o (intra-uterina x extra-uterina) no peso corporal e cerebral, no limiar para crises convulsivas e na morfometria do hipocampo de ratos em desenvolvimento. Metodologia: O modelo de desnutri??o intra-uterina constou em reduzir pela metade a ra??o oferecida ? f?mea durante todo o per?odo gestacional; a desnutri??o extra-uterina constou da limita??o progressiva da lacta??o atrav?s do afastamento da f?mea nutriz de seus filhotes, de P2 a P15. A indu??o de crise convulsiva foi realizada atrav?s da exposi??o ao flurotil, em P15. No mesmo dia, os animais foram submetidos ? perfus?o transcard?aca e seus c?rebros foram processados histologicamente. A an?lise morfom?trica baseou-se na estimativa do n?mero total de neur?nios das regi?es CA1, CA2, CA3, CA4 e giro denteado do hipocampo, atrav?s do c?lculo do volume e da densidade celular. Resultados: A desnutri??o extra-uterina reduziu de forma significativa o peso corporal dos animais, tanto em P7 como em P15; e cerebral, somente no grupo sem crise, em rela??o aos controles nutridos. O limiar para crise convulsiva tamb?m foi significativamente reduzido nos animais desnutridos extra-uterinos em rela??o aos nutridos e desnutridos intra-uterinos. A desnutri??o intra-uterina per se reduziu significativamente o n?mero de c?lulas das regi?es CA2 e CA3 do hipocampo, em rela??o aos animais nutridos. N?o encontramos diferen?a significativa entre os dois tipos de desnutri??o em rela??o ao n?mero de c?lulas nas cinco regi?es hipocampais. No giro denteado encontramos um aumento significativo (p=0,03) de c?lulas no grupo nutrido submetido ? crise convulsiva, em rela??o ao nutrido sem crise. Conclus?es: O paradigma de desnutri??o extra-uterina foi mais eficaz que o intra-uterino na redu??o no peso corporal e cerebral dos animais em estudo, assim como na redu??o do limiar para crises convulsivas. A morfometria do hipocampo n?o evidenciou diferen?a significativa quando comparados os paradigmas de desnutri??o entre si. Entretanto, a desnutri??o intra-uterina trouxe redu??o celular em CA2 e CA3 em compara??o aos controles nutridos. Os animais nutridos submetidos ? crise convulsiva apresentaram maior celularidade no giro denteado.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 433744.pdf: 2709153 bytes, checksum: ff7318acee1d49accb9162ce058c629e (MD5) Previous issue date: 2011-08-29 / O brometo de s?dio, f?rmaco antiepil?ptico de primeira gera??o, ainda ? utilizado para tratar epilepsia refrat?ria em crian?as. Seu mecanismo de a??o n?o est? totalmente elucidado. Neste trabalho propomos, i- investigar sua a??o nas atividades epileptiformes (AE‟S) de natureza n?o-sin?ptica na regi?o do giro dentado in vitro; ii- comparar sua a??o com solu??o contendo alta concentra??o de cloreto de s?dio; com bloqueadores de canais de cloreto dependente de voltagem (SITS, DIDS); iii-investigar o poss?vel envolvimento das gap junctions no momento da atua??o do f?rmaco. O estudo envolveu medidas experimentais tais como registros extracelulares de campo e medidas do sinal ?ptico intr?nseco. Obtivemos inibi??o das AE‟S induzidas pelo modelo do zero c?lcio e alto pot?ssio com 9 mM de NaBr (n=6). Com a perfus?o da solu??o de zero Ca++ + alta concentra??o de NaCl nos registros (n=7) de campo, obtivemos um bloqueio transit?rio. Comparou-se o efeito do NaBr com os bloqueadores de canais de cloreto dependente de voltagem o SITS 1mM (n=3) e DIDS 250 μM (n=8), obteve-se uma semelhan?a nos registros de potencial el?trico extracelular, mostrando poss?vel envolvimento dos canais de cloreto dependente de voltagem. O bloqueador de gap junctions (N-octanol) em concentra??es de 0,07mM foi utilizado juntamente com o brometo 5mM. Este reduziu ? alta freq??ncia elucidada no per?odo transiente durante a aplica??o da droga. O efeito do Br- n?o ? apenas no potencial de membrana, por meio de sua maior permeabilidade em rela??o ao Cl- induzindo hiperpolariza??o, mas apresenta tamb?m uma maior permeabilidade aos canais de cloreto dependente de voltagem. O aumento da frequ?ncia das descargas pode ser devido ao efeito competitivo do Br- sobre os canais de cloreto, reduzindo a permeabilidade ao Cl-. O NaBr tem pouca afinidade pelos cotransportadores NKCC1 e substitui parcialmente Cl- nos cotransportadores KCC2.A origem da alta freq??ncia nos registros com o brometo, provavelmente est? relacionada com as gaps junctions

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:36:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 397458.pdf: 1733563 bytes, checksum: 992752e280f9a8a81b06e232e3094649 (MD5) Previous issue date: 2007-12-07 / Objetivo: Neste estudo foram avaliados os efeitos da desnutri??o precoce e de crises convulsivas no aprendizado espacial e na mem?ria, em um modelo de desenvolvimento cerebral. M?todos: Filhotes machos de ratos Wistar foram alocados em seis grupos: Nutridos Controles (NC), Nutridos Crises Recorrentes (NCR), Nutridos Status Epilepticus (NSE), Desnutridos Controles (DC), Desnutridos Crises Recorrentes (DCR) e Desnutridos Status Epilepticus (DSE). Os animais dos grupos DC, DCR e DSE foram mantidos em um regime de priva??o alimentar do segundo (P2) ao d?cimo quinto (P15) dia de vida p?s-natal. De P2 a P4, os grupos NCR e DCR foram expostos a tr?s crises convulsivas recorrentes por dia, induzidas por flurothyl. Em P15, os grupos NSE e DSE foram expostos a um status epilepticus induzido por esta mesma subst?ncia. De P21 ? 26 todos os grupos foram testados no labirinto aqu?tico de Morris para aferi??o do aprendizado e mem?ria espaciais. Em P30, os animais foram sacrificados e os c?rebros foram pesados. Resultados: A an?lise indicou que a desnutri??o precoce n?o alterou a suscetibilidade ?s crises convulsivas em P15 mas reduziu os pesos corporais e cerebrais (p<0,001), enquanto as crises convulsivas diminu?ram o peso corporal (p<0,01), mas n?o o cerebral (p=0,972). Al?m disto, os animais desnutridos permaneceram menos tempo no quadrante alvo do labirinto aqu?tico de Morris do que os nutridos, durante o teste de prova, em P26 (p<0,001). Da mesma forma, os ratos submetidos ?s crises recorrentes, assim como os que sofreram status epilepticus, tamb?m permaneceram menos tempo no quadrante alvo, quando comparados aos animais livres de crises (p=0,001). Conclus?o: Nossos achados mostram que a desnutri??o e as crises convulsivas apresentam um efeito aditivo prejudicial no peso corporal, no peso cerebral e na reten??o da mem?ria espacial de ratos jovens.