OLIVEIRA, Aline de Albuquerque. Efeitos do levetiracetam no modelo de convulsões induzidas por pilocarpina em camundongos. 2005. 153 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-05T13:01:34Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_aaoliveira.pdf: 594682 bytes, checksum: be7f5a2d72ddb0a2d0eaea989b41490a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-07T11:36:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_aaoliveira.pdf: 594682 bytes, checksum: be7f5a2d72ddb0a2d0eaea989b41490a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-07T11:36:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_aaoliveira.pdf: 594682 bytes, checksum: be7f5a2d72ddb0a2d0eaea989b41490a (MD5) Previous issue date: 2005 / Levetiracetam (LEV) is a new antiepileptic drug effective as adjunctive therapy for partial seizures and in experimental models of seizures, including pilocarpine-induced seizures in rodents. Objectifying to clarify if anticonvulsant activity of LEV occurs near cholinergic muscarinic alterations, adult male mice received LEV injections before muscarinic agonists’ administration. Pretreatment with LEV (30, 50, 100 or 200 mg/Kg, i.p.) increased the latency of seizures, latency of status epilepticus and latency of death on the seizure model induced by pilocarpine, 400 mg/Kg, s.c. (P400). LEV (200 mg/Kg, i.p., LEV200) pretreatment abolished seizures in 53% (20/38) of the animals; reduced status epilepticus appearance in 58% (22/38); increased death’s latency in 116% compared to P400 group; protected 61% (23/38) of the animals from death and also reduced the intensity of tremors induced by oxotremorine (0,5 mg/kg, i.p). [3H]-N-methylscopolamine binding assays in mice hippocampus showed that LEV200 pretreatment reverts the downregulation on muscarinic acetylcholine receptors (mAChR), induced by P400 administration, bringing back these density values to control ones (0,9% NaCl, i.p.). However, subtype-specific binding assays revealed that P400 and LEV200 alone treatments results in M1 and M2 subtypes decrease, respectively. The agonist-like behavior of LEV200 on the inhibitory M2 mAChR subtype, observed in this work, could contribute to explain the reduction on oxotremorine-induced tremors and the delay on pilocarpine-induced seizures, by an increase in the attenuation of neuronal activity mediated by the M1 receptors. [3H]-spiroperidol binding assays also showed a downregulation of dopaminergic D2 receptors, induced by LEV200 alone treatment. Although this effect was reverted on P400 presence, maybe it posses some influence on LEV200 protective effect, since the stimulation of these receptors can reduce the intensity of pilocarpine induced-seizures. Objectifying to investigate if LEV’ mechanism of action also involves anti-oxidant proprieties, neurochemical analysis were carried out in hippocampus and striatum and showed that P400 produced an increased lipid peroxidation in hippocampus, main epileptogenic focus on cholinergic agents induced-seizures, demonstrating and confirming the involvement of free radical oxygen injury in the P400 induced brain injury. However, LEV200 pretreatment abolished this increase, bringing lipid peroxidation levels back to normal values, suggesting an anti-oxidative property of LEV. Our finds also showed a decrease of nitrite levels and stabilization of catalase activity in hippocampus and striatum, beyond an increase on reduced glutathione levels on hippocampus, induced by LEV200 treatment before P400 administration. In this way, the anti-oxidative action of LEV was showed in several stages involved on oxidative injury, suggesting a novel mechanism of its protector effects. / O levetiracetam (LEV) é uma nova droga antiepiléptica, com eficácia na terapia adicional das convulsões parciais e em vários modelos experimentais de convulsão, inclusive nas convulsões induzidas por pilocarpina em roedores. Objetivando investigar se o mecanismo de ação anticonvulsivante do LEV está relacionado a alterações no sistema colinérgico muscarínico, camundongos machos adultos receberam injeções de LEV uma hora antes da administração de agonistas muscarínicos. O pré-tratamento com LEV (30, 50, 100 ou 200 mg/Kg, i.p.) aumentou significativamente as latências de convulsão, de estatus epilepticus e de morte no modelo de convulsões induzidas por pilocarpina, 400 mg/Kg, s.c. (P400). O pré-tratamento com LEV (200 mg/Kg, i.p., LEV200) levou à ausência de convulsões em 53% (20/38) dos animais; reduziu a ocorrência de estatus epilepticus em 58% (22/38); aumentou a latência de morte em 116% comparada ao grupo P400; protegeu 61% (23/38) dos animais da morte e, ainda, reduziu a intensidade dos tremores induzidos por oxotremorina (0,5 mg/kg, i.p). Ensaios de binding com [3H]-N-metilescopolamina em hipocampo mostraram que o pré-tratamento com LEV200 reverte a downregulation dos receptores muscarínicos de acetilcolina, induzida por P400, normalizando a densidade desses receptores. Todavia, ensaios para subtipos específicos de receptores muscarínicos revelaram que a administração de P400 ou LEV200, isoladamente, resulta em downregulation dos subtipos M1 e M2, respectivamente. A ação agonista-símile do LEV nos receptores pré-sinápticos inibitórios M2, observada no presente estudo, poderia contribuir para explicar a redução nos tremores induzidos por oxotremorina e o retardo na instalação das convulsões induzidas por P400, através da atenuação da atividade neuronal mediada pelos receptores M1. Ensaios de binding com [3H]-espiroperidol demonstraram uma downregulation dos receptores dopaminérgicos D2, induzida pela administração isolada de LEV200. Embora esse efeito tenha sido revertido na presença de P400, talvez possua alguma influência na ação protetora oferecida por LEV200, considerando que a estimulação desses receptores reduz a intensidade das convulsões induzidas pela pilocarpina. Objetivando investigar se o efeito protetor demonstrado pelo LEV envolve propriedades antioxidantes, análises neuroquímicas foram realizadas em hipocampo e corpo estriado. A administração de P400 aumentou a ocorrência de peroxidação lipídica no hipocampo, considerado principal foco de instalação das convulsões provocadas por agentes colinérgicos, demonstrando e confirmando o envolvimento de espécies deletérias na injúria cerebral produzida por esse modelo de convulsões. O pré-tratamento com LEV200 reverteu esse efeito, fornecendo indícios de uma atividade antioxidante dessa droga. Nossos estudos também mostraram uma diminuição da produção de nitrito e estabilização da atividade da catalase no hipocampo e corpo estriado e o aumento dos níveis de glutationa reduzida no hipocampo, decorrentes do tratamento com LEV antes de P400. A ação antioxidante do LEV foi evidenciada em várias etapas envolvidas no processo de dano oxidativo, sugerindo um novo mecanismo através do qual essa droga poderia exercer seus efeitos protetores.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-05-17T16:27:22Z No. of bitstreams: 1 2012_LuciannaLopesCouto.pdf: 2940861 bytes, checksum: cf75e034974cb5ac73615d0ddd81861f (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-23T11:25:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_LuciannaLopesCouto.pdf: 2940861 bytes, checksum: cf75e034974cb5ac73615d0ddd81861f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-23T11:25:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_LuciannaLopesCouto.pdf: 2940861 bytes, checksum: cf75e034974cb5ac73615d0ddd81861f (MD5) / A epilepsia é um distúrbio neurológico complexo, manifestado por aproximadamente 50 milhões de pessoas no mundo, e 90% destas estão em países em desenvolvimento. Para o tratamento dos diferentes tipos de epilepsia, existem no mercado diversos fármacos, porém muitos destes geralmente são caros, apresentam limitações e produzem efeitos colaterais, e assim reduzem a qualidade de vida do paciente. Portanto, o desenvolvimento de novos fármacos é importante, e, neste contexto, os compostos neuroativos isolados da peçonha de artrópodes e, em especial, de vespas, são um recurso em potencial, pois atuam com afinidade e especificidade nas funções sinápticas excitatórias e inibitórias de mamíferos. O objetivo desta pesquisa foi identificar um peptídeo anticonvulsivante na peçonha de Polybia paulista. Vespas foram coletadas no Distrito Federal após obtenção de licença de coleta e manutenção. Glândulas e reservatórios de peçonha foram homogeneizados em água deionizada e acetonitrila 1:1 e centrifugados, e o sobrenadante foi ultrafiltrado com um filtro de até 3000 Da, para a obtenção dos compostos de baixa massa molecular (CBMM-Pp). Para a separação dos CBMM-Pp, foi realizada a cromatografia líquida de alta eficiência em uma coluna de fase reversa semipreparativa (RP-HPLC). A fração com atividade anticonvulsivante foi recromatografada em coluna analítica, e o neuropeptídeo, Ppnp7, foi submetido à espectrometria de massa MALDI TOF/TOF para obtenção da massa molecular, da sequência de aminoácidos e do grau de pureza. Ratos Wistar (Rattus norvegicus) foram submetidos a um procedimento para implantação de uma cânula no ventrículo lateral, para injeção via i.c.v. Para a avaliação da atividade anticonvulsivante, foi utilizado o modelo de indução química aguda de crises epilépticas por meio do convulsivante pentilenotetrazol (subcutânea, 105 mg/kg). Foram registradas a ocorrência de e a latência para o início da crise epiléptica máxima. A avaliação de possíveis alterações na atividade geral espontânea dos ratos foi realizada por meio do bioensaio do campo aberto, enquanto a avaliação de um possível comprometimento motor foi feita por meio do bioensaio do rotarod. O Ppnp7 isolado da fração neuroativa foi sequenciado, e a estrutura primária apresenta nove resíduos de aminoácidos. Curvas de proteção contra a crise epiléptica máxima foram obtidas a partir da utilização de três doses dos CBMM-Pp (350, 210 e 70 µg/animal) e do Ppnp7 (4,5, 3 e 1,5 µg/animal) (p<0,05). Houve também um aumento significativo da latência para o início desta crise (p<0,05). O Ppnp7 não provocou alterações na atividade geral espontânea nem comprometimento motor. Portanto, esta pesquisa demonstrou como compostos isolados da peçonha de vespas sociais, pouco explorados até o momento, podem ser importantes recursos na busca por novos fármacos e na compreensão de distúrbios neurológicos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Epilepsy is a complex neurological disorder, manifested by approximately 50 million people worldwide (90% are in “developing” countries). For the treatment of this disorder, there are several drugs available, but most of them are expensive, have limitations and produce side effects, reducing the quality of life of patients. Therefore, the development of new drugs is important, and, in this context, the neuroactive compounds isolated from the venom of arthropods, and in particular wasps, are a potential resource because they act with affinity and specificity in excitatory and inhibitory synaptic functions in mammals. The purpose of this study was to identify an anticonvulsant peptide in the venom of Polybia paulista. Wasps were collected in Distrito Federal, Brazil, after obtaining a license for collection and maintenance. Venom glands and reservoirs were homogenized and centrifuged, and the supernatant was ultrafiltered (<3000 Da), to obtain the low molecular weight compounds (LMWC-Pp). For separation of LMWC-Pp, the high performance liquid chromatography was performed on a reversed-phase semipreparative column (RP- HPLC). The anticonvulsant fraction was rechromatographed on an analytical column, and the neuropeptide, Ppnp7, was subjected to MALDI TOF/TOF mass spectrometry to obtain the molecular mass, the amino acids sequence and the purity degree. Wistar rats (Rattus norvegicus) underwent a procedure for implantation of a cannula in the lateral ventricle, for i.c.v. injection. To evaluate the anticonvulsant activity, the model of acute seizures induced by pentylenetetrazole was used (subcutaneous, 105 mg/kg). Occurrence and latency of the maximum seizure were recorded in the bioassays. To evaluate possible changes in spontaneous general activity of rats, the open field bioassay was performed, and to evaluate the possible motor impairment, the rotarod bioassay was used. The Ppnp7 isolated from the neuroactive fraction was sequenced, and the primary structure contains nine amino acid residues. Curves of protection against the maximum seizure were obtained with three different doses of the LMWC-Pp (350, 210 e 70 µg/animal) and of the Ppnp7 (4.5, 3 e 1.5 µg/animal) (p<0.05). There was also a significant increase in the latency to seizure onset (p<0.05). The Ppnp7 did not cause changes in spontaneous general activity and did not cause also motor impairment. Therefore, this study demonstrated how compounds isolated from wasps’ venom, little explored until now, may be important resources in the search for new drugs and in understanding of neurological disorders.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000431744-Texto+Completo-0.pdf: 1284546 bytes, checksum: 0fe201a13f3e5141e00f462c9966d484 (MD5) Previous issue date: 2011 / Introduction: The symptomatic generalized epilepsy is usually characterized by the presence of tonic and atonics crisis, many times leading the patient to sudden fall. When it happens, we call these seizures drop attacks. The treatment of these seizures is usually disappointing. Objective: This study intended to evaluate the efficacy of a medicinal scheme well determined, composed by the association of three antiepileptic drugs, aiming to control a type of epileptic seizures, the sudden fall seizures or drop attacks. Methods: We evaluated a consecutive group of 32 patients with drop attacks, which attended to Epilepsy Outpatient Clinic of the Neurology Service, Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS), in Porto Alegre. All of them passed through a drug adjustment period, where the drugs in use were reduced and taken off, as we slowly introduced the association of valproate, lamotrigine and a benzodiazepine (clobazam, clonazepam or nitrazepam). The visits were every three months, during the period of one year. Results: Twenty-eight patients (22 male) aged 5-44 years (mean 16. 5), were followed for 12 months. For the whole group, the median (minimum-maximum) number of drop attacks during the 2 months of baseline was 50 (3-900). After one year with the planned medication regimen, median number of epileptic falls was 2, representing a reduction of 96% (P < 0. 001). Specifically, in the fourth trimester, 15 patients (47%) were free of drop attacks, 7 (21%) had a 75% and 5 others had a 50-75% reduction in the frequency of falls. Only one patient had a reduction of less than 25%.Conclusions: We observed that the association of valproate, lamotrigine and a benzodiazepine can be effective in the control of seizures in fall in patients with generalized and multifocal epilepsy. / Introdução: A epilepsia generalizada sintomática é normalmente caracterizada pela presença de crises tônicas e atônicas, muitas vezes levando o paciente a quedas súbitas. Quando isto acontece, chamamos estas crises de drop attacks. Seu tratamento é usualmente desapontador. Objetivo: Avaliar a eficácia de uma associação de três fármacos antiepilépticos no controle de drop attacks.Métodos: Foram avaliados 32 pacientes consecutivos com drop attacks epilépticos que freqüentavam o ambulatório de Epilepsias de Difícil Controle do Serviço de Neurologia do Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS). Todos passaram por um período de ajuste medicamentoso no qual as medicações em uso foram substituídas pela associação de ácido valproico, lamotrigina e um benzodiazepínico (clobazam, clonazepam ou nitrazepam). As visitas de avaliação foram a cada três meses, no período de um ano. Resultados: Vinte e oito pacientes (22 homens) com idade entre 5-44 anos (média 16,5) foram seguidos por 12 meses. A mediana de drop attacks durante os 2 meses basais foi 50 (3-900). Após um ano com o tratamento proposto, a mediana foi 2, uma redução de 96% (P < 0,001). No 4º trimestre, 15 pacientes (47%) estavam livres de drop attacks, 7 (21%) tinham uma redução de 75% e 5 (15%), entre 50-75% de redução de drop attacks. Somente 1 paciente teve uma redução menor que 25% em suas crises. Discussão: Viu-se que a associação de ácido valproico, lamotrigina e um benzodiazepínico (clobazam, clonazepam ou nitrazepam) pode ser efetiva no controle de crises em queda em pacientes com epilepsia generalizada e multifocal.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:03:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000390125-Texto+Completo-0.pdf: 626147 bytes, checksum: e54cd8041fd3057fb6852bf1c6c1689e (MD5) Previous issue date: 2006 / Long term therapy with antiepileptic drugs (AED) is related to decreased mineral bone density and increased risk of osteoporotic fractures. Objective: To investigate bone mass in patients with 40 years old or more, who have been using AED for at least 5 years. Patients and Methods: Sixty outpatients, 33 males and 27 females, adults, who have been using AED for at least 5 years were compared to a control group composed of 65 health adults, l6 males and 49 females who have never used AED. Bone density was measured by using dual-energy x-ray absorptiometry, such as sunlight exposure, calcium intake and physical activity with all those patients. Results: BMD (g/cm2), of the femoral neck and lumbar spine (L1-L4) of the AED users and the control group were evaluated separately for male and female. In the femoral neck, the difference between AED male users and control group was respectively 0,902 (±0,139) and 0,934 (±0,098) p= NS; for females was 0,855 (±0,126) and 0,894 (±0,099) p=NS, In lumbar spine, the difference between AED male users and control group was 1,079 (±0,191) and 1,255 (±0,199) p<0,05; for females was l,024 (±0,151) and 1,110 (±0,113) p<0,05. Conclusion: The study concluded that BMD in an adult group of patients, users of AED for five years or more, compared to the control group was significantly lower in lumbar spine but in femoral neck no significant difference was shown. / A terapia prolongada com drogas anticonvulsivantes (DAC) está relacionada com a diminuição da densidade mineral óssea e o aumento do risco de fraturas por osteoporose. Objetivo: Investigar a massa óssea de pacientes de quarenta anos ou mais que estejam fazendo uso de DAC há pelo menos cinco anos. Pacientes e Métodos: Sessenta pacientes ambulatoriais, 33 homens e 27 mulheres, adultos, usuários de DAC há pelo menos cinco anos foram comparados a um grupo de controle de 65 indivíduos adultos, 16 homens e 49 mulheres, que nunca haviam usado DAC. Foram realizados exames de densitometria óssea, assim como foi avaliado o tempo de exposição solar, a quantidade de cálcio ingerida e a atividade física de todos os indivíduos. Resultados: Avaliou-se a densidade mineral óssea (g/cm²) do colo do fêmur e da coluna lombar (L1 a L4) dos usuários de DAC e do grupo de controle, separadamente, para homens e mulheres. No colo do fêmur a densidade mineral óssea (DMO) dos homens usuários de DAC e dos controles foi, respectivamente 0,902 (±0,139) e 0,934 (±0,098) p=NS; e das mulheres, 0,855 (±0,126) e 0,894 (±0,099) p= NS. Na coluna lombar a DM0 dos homens usuários de DAC e dos controles foi, respectivamente, 1,079 (±0,191) e 1,255 (± 0,199) p<0,05; e das mulheres, 1,024 (± 0,151) e 1,110 (± 0,113) p<0,05. Conclusão: O estudo concluiu que a DMO de uma amostra de pacientes adultos usuários de DAC por cinco anos ou mais, comparada com a DMO de um grupo de controle foi significativamente menor na coluna lombar, porém no fêmur não foi observada diferença significativa.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000403713-Texto+Completo-0.pdf: 10272711 bytes, checksum: b67b11e2d0a86525614cc7a22bbc56b4 (MD5) Previous issue date: 2008 / Rationale: Bromide was the first therapeutic option in the treatment of refractory pediatric epilepsies. Despite this fact the pharmacological activity of bromides has not been profusely investigated and remains without a complete elucidation. The mechanism of action proposed suggests GABAergic activation. Bromides share ionic kinetics with chlorides. However, its activity on nonsynaptic mechanisms has not been studied yet. Purpose: This study aims to verify the effect of NaBr on epileptiform activity (EA) induced by suppression of nonsynaptic connections through perfusion with 0- Ca++ and high K+ artificial cerebrospinal fluid (ACSF). Methods and Results: The study involved experimental measures and simulation. Experiments were taken on hippocampal slices from Wistar rats (4 to 6 weeks old). The studied groups were NaBr (n=23), SITS (n=3), and control (n=3). After EA induction with 0- Ca++ and high K+ (8 mM) ACSF, Br- was applied by perfusion. We replaced choride for bromide in the following concentrations: NaCl 5, 7, 9 and 11 mM for NaBr 5, 7, 9 and 11 mM. SITS was also perfused (time: 20min). Br- reversely suppressed EA in the dentate gyrus (DG). Before full EA suppression, we observed the following changes in the extracellular field potentials (FP): (i) decrease of DC amplitude; (ii) transitory increase of population spikes amplitudes, followed by reduction until full suppression; (iii) decrease of event duration and inter-event interval. Simultaneously, we recorded the intrinsic optical signal (IOS). In accordance to FP recordings we observed decrease of event duration and inter-event interval. SITS response was similar to the NaBr one. IOS suggests partition in the region compreheding the events, pointing a reduction in spatial recruitment with NaBr. Simulations were based on mathematical modeling of subcellular and electrochemical mechanisms of neurons (sodium-potassium pump, ion channels, gap junctions, co-transporters, electrodiffusion, field effect and volume variation), comprehending a net of granular and glial cells connected to extracellular net. Reproduction of space-time behavior during blockade was possible with the assumption of competitive effect between Br- and Cl-, either in channels or contransports. Conclusion: NaBr at 9 mM is the minimum required concentration for full blockade of EA, with minimum extinction time. Computational simulations suggest two explanations for the inhibitory effect of NaBr on EA: (i) Br- competing with Cl-, decreasing permeability of the latter, which reduces efflux and influx during interical and ictal periods, respectively; (ii) Br- Nernst potential, that has inhibitory effects, favoring reduction in excitability. Possible involvement of voltage-dependent Cl- channels (FP and IOS recordings similar for NaBr and SITS). / Justificativa: Apesar do brometo ter sido a primeira terapêutica para o tratamento das epilepsias refratárias em crianças, seu mecanismo de ação ainda não foi completamente esclarecido. O mecanismo de ação proposto, sugere ação GABAérgica. Entretanto, apesar de compartilhar a cinética iônica com os cloretos sua atividade na membrana neuronal independente da atividade sináptica não foi estudada. Objetivos: Este estudo tem como objetivo verificar o efeito do NaBr sobre as atividades epileptiformes (AE), induzidas por supressão das conexões não-sinápticas por perfusão com líquido cefalorraquidiano artificial (ACSF) 0- Ca++ e alto K+. Métodos e Resultados: O estudo envolveu medidas experimentais e simulação. Os experimentos com grupo NaBr (n=23), grupo SITS (n=3), grupo controle (n=3) foram realizados em fatias de hipocampo de ratos Wistar (4 a 6 semanas). Após indução das atividades epileptiformes por perfusão com ACSF 0- Ca++ e alto K+ (8 mM), o Br- foi aplicado por substituição nas seguintes concentrações: 5, 7, 9 e 11 mM de NaCl por 5, 7, 9 e 11 mM de NaBr. O SITS também foi aplicado por perfusão (tempo: 20min). A aplicação do Br- resultou na supressão reversível das AE do giro denteado (GD). Antes da completa supressão das AE, foram observadas as seguintes alterações no potencial elétrico extracelular (PE): (i) redução da amplitude da componente DC; (ii) aumento transitório das amplitudes dos population spikes, seguido de redução até completa supressão; (iii) reduções da duração e intervalo entre eventos. Simultâneo ao potencial elétrico extracelular foi registrado o sinal óptico intrínseco (IOS). Em termos temporais, da mesma forma que o PE, observaram-se reduções da duração e do intervalo entre eventos. Espacialmente, o IOS sugere uma partição da região que compreende os eventos, sugerindo uma redução do recrutamento espacial. As simulações basearam-se na modelagem matemática de mecanismos subcelulares e eletroquímicos de neurônios (bombas de sódiopotássio, canais iônicos, gap-junctions, co-transportes, eletrodifusão, efeito de campo elétrico e variação de volume), compreendendo uma rede de células granulares e gliais interligada a uma rede extracelular. A reprodução do comportamento espaço-temporal durante o bloqueio foi possível supondo-se o efeito competitivo entre o Br- e o Cl-, tanto em canais como em cotransportes. Conclusões: 9 mM de NaBr é a concentração mínima necessária para o completo bloqueio das atividades, com tempo mínimo de extinção; Simulações computacionais sugerem duas explicações para o efeito inibitório do NaBr sobre as AE’s: (i) atuação competitiva do Br- com o Cl-, decrementando a permeabilidade deste íon que, por sua vez, reduz seus efluxo e influxo durante os períodos interictal e ictal, respectivamente; (ii) o potencial de Nernst do Br- que tem efeito inibitório, favorecendo a redução da excitabilidade. Possível envolvimento dos canais de Cl- voltagem-dependentes (semelhança dos registros do PE e sinal óptico intrínseco entre NaBr e SITS).

Dissertação apresentada ao curso de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, como requisito à obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / A estimulação eletroconvulsiva (ECS) aplicada experimentalmente em animais é largamente utilizada como um modelo de estudo para a terapia eletroconvulsiva. O uso de um pré-tratamento com os anticonvulsivos aumenta o limiar de convulsão induzido por choque ECS em modelo animal, demonstrando que o efeito do ECS pode ser modulado. Porém, as modificações que este modelo de convulsão causa entre os vários sistemas de neurotransmissores não são conhecidas. Há uma ampla evidência do envolvimento do neurotransmissor glutamato em crises epilépticas. A adenosina, importante neuromodulador do sistema nervoso central, exerce principalmente efeitos inibitórios através dos receptores A1, resultando em efeitos sedativos, anticonvulsivos e neuroprotetores, através de mecanismos de inibição da excitabilidade glutamatérgica. Ou seja, a adenosina é um importante modulador da atividade glutamatérgica, inibindo a liberação pré-sináptica e ação póssináptica do glutamato. No presente trabalho foi avaliado o efeito do choque sub-eletroconvulsivo (sub-ECS) aplicado em diferentes tempos antes do ECS no comportamento convulsivo e na locomoção de camundongos. Também foi investigada a possível participação dos receptores adenosinérgicos e glutamatérgicos do tipo NMDA no efeito do sub-ECS a partir da administração dos antagonistas, cafeína e MK- 801, respectivamente. Os camundongos CF-1 machos albinos (60 dias, 30-40 g) receberam choques sub-convulsivos e/ou convulsivos em diferentes intervalos de tempo, de acordo com os grupos: controle (sham), sub-ECS, ECS, sub-ECS + ECS 30 min, 4h, 8h, 24h, 48h ou 72h. Os animais foram pré-tratados com injeções intraperitoniais de solução salina (NaCl 0,9g%), 30 mg de cafeína/kg ou 0,25 mg/kg de MK-801 de animal 30min antes da aplicação do sub-ECS. O comportamento convulsivo (extensão tônica de 180° das patas traseiras) e a atividade locomotora dos camundongos foram avaliados. A aplicação do sub-ECS com 4h a 48h de intervalo entre a aplicação do ECS reduziu em de 72,7% a 90,9% o número de animais com convulsões após o ECS, efeito esse bloqueado por cafeína quando os intervalos entre sub-ECS e ECS foram maiores que 8h. O MK-801, ao contrário, só não bloqueou o efeito protetor do sub-ECS no intervalo de 30min entre o ECS. A associação dos choques sub-ECS e ECS induziu hipolocomoção nos animais quando eles foram avaliados 2h após o ECS. A cafeína não foi capaz de alterar esse efeito comportamental, mas o MK-801 bloqueou a hipolocomoção da induzida pela aplicação dos choques nos intervalos de 30min, 24h e 48h. O presente estudo demonstra o efeito protetor do sub-ECS contra convulsões induzidas pelo ECS, com possível participação do sistema de neurotransmissão glutamatérgica e de modulação adenosinérgica.

O suco de uva possui um importante papel econômico no Brasil, principalmente no estado do Rio Grande do Sul, grande produtor de uvas e derivados. Atualmente, podem ser encontrados sucos de uva orgânicos, em que o uso de agrotóxicos e engenharia genética no cultivo da uva são proibidos, e sucos convencionais, elaborados com uvas que recebem uma série de agroquímicos. Uma diferença significativa observada entre os dois tipos de suco é o conteúdo de compostos fenólicos, que é maior no suco orgânico. Esses compostos podem apresentar importante atividade antioxidante, minimizando a incidência de diversas doenças relacionadas ao estresse oxidativo, como as neurodegenerativas, o câncer e a aterosclerose. A epilepsia é uma das doenças neurológicas mais comuns em todo o mundo e é caracterizada por crises convulsivas espontâneas e recorrentes. Essas crises podem aumentar o conteúdo de espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio, desequilibrando o metabolismo redox de pacientes epilépticos. Em vista disso, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante e anticonvulsivante de sucos de uva Bordô, orgânico e convencional, e seus efeitos no comportamento de ratos Wistar. Em adição, foi determinado o conteúdo de compostos fenólicos totais e compostos majoritários de cada suco. Para a realização do estudo, ratos Wistar machos (n=48) com 3 meses de idade pesando em torno de 250-300g foram divididos em 3 grupos e tratados, por gavagem, com solução salina, suco de uva orgânico ou convencional, durante 17 dias (tempo determinado de acordo com teste piloto). No 18° dia, as possíveis mudanças no comportamento (ansiedade, capacidade locomotora e exploratória) dos animais foram avaliadas pelo teste de Campo Aberto. A seguir, metade dos ratos de cada grupo recebeu uma dose única da droga convulsivante pentilenotetrazol (PTZ) e foram observados durante 30 minutos para avaliação das características convulsivas (tempo de latência para início da convulsão, tempo de convulsão tônico-clônica, tempo de convulsão total, número de convulsões e número de animais que chegaram ao nível cinco da escala de Racine, o tipo mais severo de crise convulsiva). Avaliou-se, ainda, a taxa de mortalidade em cada grupo. A seguir, os animais foram eutanasiados por decapitação e as estruturas cerebrais (córtex cerebral, cerebelo e hipocampo), fígado e sangue foram coletados para avaliação do metabolismo redox (danos oxidativos a lipídios e proteínas, conteúdo de óxido nítrico, atividade das enzimas superóxido dismutase e catalase e conteúdo de proteínas sulfidril). Os resultados mostraram que o tratamento com os sucos não alterou o comportamento dos ratos e não foi capaz de minimizar as convulsões induzidas por PTZ. Observou-se, no entanto, que o tratamento com suco convencional evitou a morte dos animais induzida por PTZ, enquanto que com o suco orgânico a mortalidade foi reduzida para 33%. Por outro lado, ambos os sucos evitaram os danos oxidativos a lipídios e proteínas, bem como o aumento no conteúdo de óxido nítrico no sistema nervoso central (SNC), fígado e soro dos ratos. Observou-se, ainda, que o tratamento com os sucos evitou a depleção de proteínas sulfidril em todos os tecidos estudados. O suco orgânico foi capaz de evitar, também, a depleção da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase e catalase em todos os tecidos. Já o suco convencional evitou a diminuição da atividade das enzimas antioxidantes induzida por PTZ apenas no fígado e soro dos ratos tratados. Observou-se, ainda, que o suco orgânico apresentou maior concentração de compostos fenólicos totais, catequina, epicatequina, antocianinas, procianidina B1 e resveratrol do que o suco convencional, fator que pode ter influenciado nos resultados obtidos neste trabalho. Portanto, os resultados obtidos neste estudo abrem portas para o desenvolvimento de novas estratégias terapêutica para o tratamento da epilepsia afim de aumentar a qualidade e a expectativa de vida de indivíduos portadores da doença, além de contribuir para o aumento do valor agregado do suco de uva, favorecendo a vitivinicultura nacional. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-12T12:30:02Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Adriana Dalpicolli Rodrigues.pdf: 1688892 bytes, checksum: bcdf7d300490484f595f1f30d92f183a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-12T12:30:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Adriana Dalpicolli Rodrigues.pdf: 1688892 bytes, checksum: bcdf7d300490484f595f1f30d92f183a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Grape juice has an important economic role in Brazil, mainly in the state of Rio Grande do Sul, a great important producer of grapes and its derivatives. Currently, it can be found organic grape juice, in which the use of pesticides and genetic engineering in grape cultivation are forbidden, and conventional juices obtained from grapes that receive a series of agrochemicals. A remarkable difference observed between the two types of juices is the content of phenolic compounds, which is higher in organic juice. These compounds have significant antioxidant activity, reducing the incidence of several diseases related to oxidative stress, such as neurodegenerative disorders, cancer and atherosclerosis. Epilepsy is a most common neurological disease worldwide and is characterized by spontaneous and recurrent seizures. These crises may increase the concentration of oxigen reactive species, unbalancing the redox metabolism of epileptic patients. Accordingly, the aim of this study was to evaluate the antioxidant, anticonvulsant and behavior activities of organic and conventional purple grape juices treatments in Wistar rats. In addition, it was determined the content of total and major phenolic compounds of each juice. For the study, male Wistar rats (n = 48), 3 months old, were divided into three groups and treated, by gavage, with saline, organic or conventional grape juice for 17 days (time determined by pilot testing). On the 18th day, the animals were evalueted by the open field test and the possible behavior changes (anxiety, locomotor and exploratory activities) are appointed. After that, half the animals in each group received a single dose of the convulsant drug pentylenetetrazole (PTZ) and they were observed for 30 minutes for evaluation of seizure characteristics (the latency to seizure, the tonic-clonic seizure time, the total seizure time, the number of seizure and how many animals reached the fifth stage on Racine’s scale, the most severe type of seizure). It was also evaluated the mortality rate in each group. Then, the animals were euthanized by decapitation according the animal ethics protocols and the brain structures (hippocampus, cerebellum and cerebral cortex), liver and blood were collected to evaluate the redox metabolism (oxidative damage to lipids and proteins, the nitric oxide content, activity of the superoxide dismutase and catalase enzymes and proteins sulfhydryl content). The results showed that treatment with the juices did not change the behavior of rats and it was not able to minimize the PTZ-induced seizures. However, the treatment with conventional juice prevented the death of animals induced by PTZ, whereas with organic juice mortality was reduced to 33%. By the other hand, both juices prevented the oxidative damage to lipids and proteins, as well as increased the of nitric oxide content in the central nervous system (CNS), liver and serum of rats. It was also observed that treatment with the juices prevented depletion of sulfhydryl proteins in all studied tissues. Organic juice was also able to prevent the reduction of the activity of antioxidant superoxide dismutase and catalase enzymes in all tissues. However, the conventional juice do not prevented the decrease in antioxidant enzyme activity induced by PTZ in the CNS of treated rats. Also, organic juice had a higher organic concentration of total phenolic compounds, catechin, epicatechin, anthocyanins, procyanidin B1 and resveratrol than conventional juice, a factor that may have influenced the results obtained in this work. Therefore, the results obtained in this study open possibility to the delopment of new therapeutic strategies for the treatment of epilepsy in order to increase the quality and expectancy life of epileptic individuals, and contribute to increasing the value of grape juice, favoring the wine country.

O suco de uva possui um importante papel econômico no Brasil, principalmente no estado do Rio Grande do Sul, grande produtor de uvas e derivados. Atualmente, podem ser encontrados sucos de uva orgânicos, em que o uso de agrotóxicos e engenharia genética no cultivo da uva são proibidos, e sucos convencionais, elaborados com uvas que recebem uma série de agroquímicos. Uma diferença significativa observada entre os dois tipos de suco é o conteúdo de compostos fenólicos, que é maior no suco orgânico. Esses compostos podem apresentar importante atividade antioxidante, minimizando a incidência de diversas doenças relacionadas ao estresse oxidativo, como as neurodegenerativas, o câncer e a aterosclerose. A epilepsia é uma das doenças neurológicas mais comuns em todo o mundo e é caracterizada por crises convulsivas espontâneas e recorrentes. Essas crises podem aumentar o conteúdo de espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio, desequilibrando o metabolismo redox de pacientes epilépticos. Em vista disso, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antioxidante e anticonvulsivante de sucos de uva Bordô, orgânico e convencional, e seus efeitos no comportamento de ratos Wistar. Em adição, foi determinado o conteúdo de compostos fenólicos totais e compostos majoritários de cada suco. Para a realização do estudo, ratos Wistar machos (n=48) com 3 meses de idade pesando em torno de 250-300g foram divididos em 3 grupos e tratados, por gavagem, com solução salina, suco de uva orgânico ou convencional, durante 17 dias (tempo determinado de acordo com teste piloto). No 18° dia, as possíveis mudanças no comportamento (ansiedade, capacidade locomotora e exploratória) dos animais foram avaliadas pelo teste de Campo Aberto. A seguir, metade dos ratos de cada grupo recebeu uma dose única da droga convulsivante pentilenotetrazol (PTZ) e foram observados durante 30 minutos para avaliação das características convulsivas (tempo de latência para início da convulsão, tempo de convulsão tônico-clônica, tempo de convulsão total, número de convulsões e número de animais que chegaram ao nível cinco da escala de Racine, o tipo mais severo de crise convulsiva). Avaliou-se, ainda, a taxa de mortalidade em cada grupo. A seguir, os animais foram eutanasiados por decapitação e as estruturas cerebrais (córtex cerebral, cerebelo e hipocampo), fígado e sangue foram coletados para avaliação do metabolismo redox (danos oxidativos a lipídios e proteínas, conteúdo de óxido nítrico, atividade das enzimas superóxido dismutase e catalase e conteúdo de proteínas sulfidril). Os resultados mostraram que o tratamento com os sucos não alterou o comportamento dos ratos e não foi capaz de minimizar as convulsões induzidas por PTZ. Observou-se, no entanto, que o tratamento com suco convencional evitou a morte dos animais induzida por PTZ, enquanto que com o suco orgânico a mortalidade foi reduzida para 33%. Por outro lado, ambos os sucos evitaram os danos oxidativos a lipídios e proteínas, bem como o aumento no conteúdo de óxido nítrico no sistema nervoso central (SNC), fígado e soro dos ratos. Observou-se, ainda, que o tratamento com os sucos evitou a depleção de proteínas sulfidril em todos os tecidos estudados. O suco orgânico foi capaz de evitar, também, a depleção da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase e catalase em todos os tecidos. Já o suco convencional evitou a diminuição da atividade das enzimas antioxidantes induzida por PTZ apenas no fígado e soro dos ratos tratados. Observou-se, ainda, que o suco orgânico apresentou maior concentração de compostos fenólicos totais, catequina, epicatequina, antocianinas, procianidina B1 e resveratrol do que o suco convencional, fator que pode ter influenciado nos resultados obtidos neste trabalho. Portanto, os resultados obtidos neste estudo abrem portas para o desenvolvimento de novas estratégias terapêutica para o tratamento da epilepsia afim de aumentar a qualidade e a expectativa de vida de indivíduos portadores da doença, além de contribuir para o aumento do valor agregado do suco de uva, favorecendo a vitivinicultura nacional. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Grape juice has an important economic role in Brazil, mainly in the state of Rio Grande do Sul, a great important producer of grapes and its derivatives. Currently, it can be found organic grape juice, in which the use of pesticides and genetic engineering in grape cultivation are forbidden, and conventional juices obtained from grapes that receive a series of agrochemicals. A remarkable difference observed between the two types of juices is the content of phenolic compounds, which is higher in organic juice. These compounds have significant antioxidant activity, reducing the incidence of several diseases related to oxidative stress, such as neurodegenerative disorders, cancer and atherosclerosis. Epilepsy is a most common neurological disease worldwide and is characterized by spontaneous and recurrent seizures. These crises may increase the concentration of oxigen reactive species, unbalancing the redox metabolism of epileptic patients. Accordingly, the aim of this study was to evaluate the antioxidant, anticonvulsant and behavior activities of organic and conventional purple grape juices treatments in Wistar rats. In addition, it was determined the content of total and major phenolic compounds of each juice. For the study, male Wistar rats (n = 48), 3 months old, were divided into three groups and treated, by gavage, with saline, organic or conventional grape juice for 17 days (time determined by pilot testing). On the 18th day, the animals were evalueted by the open field test and the possible behavior changes (anxiety, locomotor and exploratory activities) are appointed. After that, half the animals in each group received a single dose of the convulsant drug pentylenetetrazole (PTZ) and they were observed for 30 minutes for evaluation of seizure characteristics (the latency to seizure, the tonic-clonic seizure time, the total seizure time, the number of seizure and how many animals reached the fifth stage on Racine’s scale, the most severe type of seizure). It was also evaluated the mortality rate in each group. Then, the animals were euthanized by decapitation according the animal ethics protocols and the brain structures (hippocampus, cerebellum and cerebral cortex), liver and blood were collected to evaluate the redox metabolism (oxidative damage to lipids and proteins, the nitric oxide content, activity of the superoxide dismutase and catalase enzymes and proteins sulfhydryl content). The results showed that treatment with the juices did not change the behavior of rats and it was not able to minimize the PTZ-induced seizures. However, the treatment with conventional juice prevented the death of animals induced by PTZ, whereas with organic juice mortality was reduced to 33%. By the other hand, both juices prevented the oxidative damage to lipids and proteins, as well as increased the of nitric oxide content in the central nervous system (CNS), liver and serum of rats. It was also observed that treatment with the juices prevented depletion of sulfhydryl proteins in all studied tissues. Organic juice was also able to prevent the reduction of the activity of antioxidant superoxide dismutase and catalase enzymes in all tissues. However, the conventional juice do not prevented the decrease in antioxidant enzyme activity induced by PTZ in the CNS of treated rats. Also, organic juice had a higher organic concentration of total phenolic compounds, catechin, epicatechin, anthocyanins, procyanidin B1 and resveratrol than conventional juice, a factor that may have influenced the results obtained in this work. Therefore, the results obtained in this study open possibility to the delopment of new therapeutic strategies for the treatment of epilepsy in order to increase the quality and expectancy life of epileptic individuals, and contribute to increasing the value of grape juice, favoring the wine country.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431744.pdf: 1284546 bytes, checksum: 0fe201a13f3e5141e00f462c9966d484 (MD5) Previous issue date: 2011-03-11 / Introdu??o: A epilepsia generalizada sintom?tica ? normalmente caracterizada pela presen?a de crises t?nicas e at?nicas, muitas vezes levando o paciente a quedas s?bitas. Quando isto acontece, chamamos estas crises de drop attacks. Seu tratamento ? usualmente desapontador.Objetivo: Avaliar a efic?cia de uma associa??o de tr?s f?rmacos antiepil?pticos no controle de drop attacks.M?todos: Foram avaliados 32 pacientes consecutivos com drop attacks epil?pticos que freq?entavam o ambulat?rio de Epilepsias de Dif?cil Controle do Servi?o de Neurologia do Hospital S?o Lucas da Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul (PUCRS). Todos passaram por um per?odo de ajuste medicamentoso no qual as medica??es em uso foram substitu?das pela associa??o de ?cido valproico, lamotrigina e um benzodiazep?nico (clobazam, clonazepam ou nitrazepam). As visitas de avalia??o foram a cada tr?s meses, no per?odo de um ano.Resultados: Vinte e oito pacientes (22 homens) com idade entre 5-44 anos (m?dia 16,5) foram seguidos por 12 meses. A mediana de drop attacks durante os 2 meses basais foi 50 (3-900). Ap?s um ano com o tratamento proposto, a mediana foi 2, uma redu??o de 96% (P < 0,001). No 4? trimestre, 15 pacientes (47%) estavam livres de drop attacks, 7 (21%) tinham uma redu??o de 75% e 5 (15%), entre 50-75% de redu??o de drop attacks. Somente 1 paciente teve uma redu??o menor que 25% em suas crises. Discuss?o: Viu-se que a associa??o de ?cido valproico, lamotrigina e um benzodiazep?nico (clobazam, clonazepam ou nitrazepam) pode ser efetiva no controle de crises em queda em pacientes com epilepsia generalizada e multifocal.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:36:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 390125.pdf: 626147 bytes, checksum: e54cd8041fd3057fb6852bf1c6c1689e (MD5) Previous issue date: 2007-01-17 / A terapia prolongada com drogas anticonvulsivantes (DAC) est? relacionada com a diminui??o da densidade mineral ?ssea e o aumento do risco de fraturas por osteoporose. Objetivo: Investigar a massa ?ssea de pacientes de quarenta anos ou mais que estejam fazendo uso de DAC h? pelo menos cinco anos. Pacientes e M?todos: Sessenta pacientes ambulatoriais, 33 homens e 27 mulheres, adultos, usu?rios de DAC h? pelo menos cinco anos foram comparados a um grupo de controle de 65 indiv?duos adultos, 16 homens e 49 mulheres, que nunca haviam usado DAC. Foram realizados exames de densitometria ?ssea, assim como foi avaliado o tempo de exposi??o solar, a quantidade de c?lcio ingerida e a atividade f?sica de todos os indiv?duos. Resultados: Avaliou-se a densidade mineral ?ssea (g/cm?) do colo do f?mur e da coluna lombar (L1 a L4) dos usu?rios de DAC e do grupo de controle, separadamente, para homens e mulheres. No colo do f?mur a densidade mineral ?ssea (DMO) dos homens usu?rios de DAC e dos controles foi, respectivamente 0,902 (?0,139) e 0,934 (?0,098) p=NS; e das mulheres, 0,855 (?0,126) e 0,894 (?0,099) p= NS. Na coluna lombar a DM0 dos homens usu?rios de DAC e dos controles foi, respectivamente, 1,079 (?0,191) e 1,255 (? 0,199) p<0,05; e das mulheres, 1,024 (? 0,151) e 1,110 (? 0,113) p<0,05. Conclus?o: O estudo concluiu que a DMO de uma amostra de pacientes adultos usu?rios de DAC por cinco anos ou mais, comparada com a DMO de um grupo de controle foi significativamente menor na coluna lombar, por?m no f?mur n?o foi observada diferen?a significativa